專利名稱：3-酮HMG-CoA還原酶抑制劑的制作方法
已知血膽固醇過多癥是局部缺血性心血管疾病如動脈硬化的一種主要的危險因素。膽汁酸多價螯合劑已被用于治療該種疾病;看來它們具有中等效果，但用量很大，即每次需用幾克，也不很可口。
市售的MEVACORTM(lovastatin)是一組非常有效的抗血膽固醇過多癥藥劑中的一種，它們通過抑制β-羥-β-甲基戊二酸單酰輔酯A(HMG-CoA)還原酶，進而限制膽固醇的生物合成而起作用。除天然發(fā)酵產(chǎn)品mevastatin和lovastatin外，還有許多通過微生物技術(shù)、酶技術(shù)及合成技術(shù)生產(chǎn)的類似產(chǎn)品。
天然存在的化合物及其類似物具有下述結(jié)構(gòu)通式
式中，R1為氫、C1-5烷基或由苯基、二甲氨基或乙酰氨基之一取代的C1-5烷基;及
R＊為
式中，Q為
R3為氫或OH或Q為
M為
，R4為氫或羥基;X為CR5R6、O、S或NH;R5和R6為H、OH或OR7，其中R7表示磷酰基或?；?
R2為氫或甲基;a、b、c和d代表單鍵，a、b、c或d其中之一代表雙鍵，或a和c二者或b和d二者代表雙鍵，條件是當(dāng)a為雙鍵時，Q為
當(dāng)d為雙鍵時，M為
以及當(dāng)R5或R6為羥基或OR7，或X為O、S或NH時，a、b和c為單鍵。
美國專利4，517，373公開了上述通式所示的含羥基化合物，其中R＊為
美國專利4，537，859和美國專利4，448，979也公開了上述通式所示的含羥基化合物，其中R＊為
這些化合物由一些微生物作用于相應(yīng)的非羥基化的基質(zhì)制備。描述在美國專利4，537，859中的一種這樣的生物屬于諾卡(放線)菌屬。
英國專利2，075，013公開了上述通式所示的含羥基化合物，其中R＊為
式中R1為H或Me，而R2為氫或?；?。
美國專利申請系列254，525(1988年10月6日提交)公開了上述通式所示的6-取代的化合物，其中R＊為
式中R為CH2OH、CH2
、CO2R7或
R9;而R1、R4、R7、R8和R9廣泛地限定為有機部分。
美國專利4，604，472和4，733，003公開了上式化合物，其中R＊為
式中X代表氫原子或2-甲基丁?；?，Y代表氫原子或甲基，而R1和R2是相同的或不同的，分別代表氧原子或式＝N-OR3所示的一個基團，其中R3為氫或烷基。
本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)和(Ⅱ)所示的HMG-CoA還原酶抑制劑。
式中R1選自(1)C1-10烷基;
(2)取代的C1-10烷基，其中的一個或多個取代基選自(a)鹵素，(b)羥基，(c)C1-10烷氧基，(d)C1-5烷氧羰基，(e)C1-5酰氧基，(f)C3-8環(huán)烷基，(g)苯基，
(h)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(i)C1-10烷基S(O)n，其中n是0～2，(j)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(k)苯基S(O)n，(l)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(m)氧;
(3)C1-10烷氧基;
(4)C2-10烯基;
(5)C3-8環(huán)烷基;
(6)取代的C3-8環(huán)烷基，其中一個取代基選自(a)C1-10烷基，(b)取代的C1-10烷基，其中的取代基選自(ⅰ)鹵素，(ⅱ)羥基，(ⅲ)C1-10烷氧基，(ⅳ)C1-5烷氧羰基，(ⅴ)C1-5酰氧基，(ⅵ)苯基，(ⅶ)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(ⅷ)C1-10烷基S(O)n，(ⅸ)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(ⅹ)苯基S(O)n，(ⅹⅰ)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，及
(ⅹⅱ)氧，(c)C1-10烷基S(O)n，(d)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(e)苯基S(O)n，(f)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(g)鹵素，(h)羥基，(i)C1-10烷氧基，(j)C1-5烷氧羰基，(k)C1-5酰氧基，(l)苯基，及(m)取代的苯基，其中的取代基是X和Y;
(7)苯基;
(8)取代的苯基，其中取代基是X和Y;
(9)氨基，(10)C1-5烷基氨基;
(11)二(C1-5烷基)氨基;
(12)苯基氨基;
(13)取代的苯基氨基，其中取代基是X和Y;
(14)苯基C1-10烷基氨基;
(15)取代的苯基C1-10烷基氨基，其中的取代基是X和Y;
(16)下述基團之一(a)哌啶基，(b)吡咯烷基，
(c)哌嗪基，(d)嗎啉基，和(e)硫代嗎啉基;以及(17)R3S，其中R3選自(a)C1-10烷基，(b)苯基;和(c)取代的苯基，其中取代基是X和Y;
R2為H、CH2或CH2OH;
X和Y分別獨立地選自(a)OH，(b)鹵素，(c)三氟甲基，(d)C1-3烷氧基，(e)C1-3烷基羰氧基，(f)苯基羰基氧基，(g)C1-3烷氧羰基，(h)苯氧羰基，(i)氫，(j)C1-5烷基;
Z選自(1)氫;
(2)C1-5烷基;
(3)取代的C1-5烷基，其中取代基選自(a)苯基;
(b)二甲氨基，和(c)乙酰氨基;以及(4)2，3-羥丙基;
鹵素是Cl或F;
a是單鍵或雙鍵;
以及Z為氫的化合物(Ⅱ)的可藥用鹽。
除非特別指明，術(shù)語“烷基”，“烯基”，“?；保胺佳趸焙汀巴檠趸卑ㄆ渲辨満椭ф渻煞N情況。
本發(fā)明的一個實際例子是式(Ⅰ)或(Ⅱ)所示的一類化合物，其中R1選自(1)C1-10烷基;
(2)取代的C2-10烷基，其中的一個或多個取代基選自(a)鹵素，(b)羥基，(c)C1-10烷氧基，(d)C1-5烷氧羰基，(e)C1-5酰氧基，(f)C3-8環(huán)烷基，(g)苯基，(h)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，及(i)氧;
(3)C3-8環(huán)烷基;
(4)取代的C3-8環(huán)烷基，其中一個取代基選自
(a)C1-10烷基，(b)取代的C1-10烷基，其中的取代基選自(ⅰ)鹵素，(ⅱ)羥基，(ⅲ)C1-10烷氧基，(ⅳ)C1-5酰氧基，(ⅴ)C1-5烷氧羰基，(ⅵ)苯基，(ⅶ)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，及(ⅷ)氧，(c)鹵素，(d)羥基，(e)C1-10烷氧基，(f)C1-5烷氧羰基，(g)C1-5酰氧基，(h)苯基，(i)取代的苯基，其中的取代基是X和Y;
(5)苯基氨基;
(6)取代的苯基氨基，其中取代基是X和Y;
(7)苯基C1-10烷基氨基;及(8)取代的苯基C1-10烷基氨基，其中的取代基是X和Y;
X和Y獨立地選自(a)OH，(b)F，
(c)三氟甲基，(d)C1-3烷氧基，(e)氫，(f)C1-5烷基;
在一小類式(Ⅰ)或(Ⅱ)化合物中，R1是C1-10烷基。
下述的式(Ⅰ)或(Ⅱ)化合物可說明這一小類化合物，其中R1為2-丁基或2-甲基-2-丁基;及R2為H或CH3。
這一小類化合物的實例為下述化合物(1)6(R)-〔2-〔8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-2-(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(2)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(3)6(R)-〔2-〔8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-2(S)-甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(4)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2-(S)-甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(5)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(6)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)-甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(7)6(R)-〔2-〔8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-2(S)6(R)-二甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)〕乙基-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮;
(8)6(R)-〔2-〔8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-(S)-甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮。
式(Ⅰ)和(Ⅱ)中R2為甲基而a為雙鍵的化合物可以按下述微生物學(xué)方法中的一種從lovastatin或Simvastatin或其具有6-甲基取代基的類似物制備(a)將基質(zhì)加到自營諾卡氏菌的生長培養(yǎng)物中適當(dāng)?shù)嘏囵B(yǎng)一段時間，然后分離，需要時還可進行衍生化;
(b)收集生物轉(zhuǎn)化微生物的培養(yǎng)物，并使收集的細胞與基質(zhì)接觸;或
(c)從生物轉(zhuǎn)化微生物的細胞制備無細胞的、含酶的提取物，并使該提取物與基質(zhì)接觸。
諾卡氏菌屬生物轉(zhuǎn)化微生物的培養(yǎng)可在常規(guī)的。含有已知常用于這樣的微生物的營養(yǎng)素的培養(yǎng)基中用常規(guī)方法培養(yǎng)。如熟知的那樣，這樣的培養(yǎng)基中含有可同化的碳源和可同化的氮源，并且通常含有無機鹽?？赏奶荚吹膶嵗ㄆ咸烟?、蔗糖、淀粉、甘油、黍凝膠、糖蜜和大豆油?？赏牡吹膶嵗ù蠖构腆w(包括大豆餅粉和大豆粉)、小麥胚、肉類提取物，蛋白胨、玉米浸漬液、干酵母及銨鹽和硫酸銨。需要時，也可以包括無機鹽如氯化鈉、氯化鉀、碳酸鈣或磷酸鈣。需要時也可以適當(dāng)?shù)亟Y(jié)合形式使用其它能夠促進羥基化酶生成的添加劑。具體的培養(yǎng)技術(shù)對本發(fā)明的方法來說不是嚴格的，通常用于微生物培養(yǎng)的任何技術(shù)都可等同地用于本發(fā)明。當(dāng)然，通常情況下，所用的技術(shù)根據(jù)工業(yè)效益選擇。這樣，從工業(yè)上的觀點來說，液體培養(yǎng)物通常是優(yōu)選的，深層培養(yǎng)法是最方便的。
培養(yǎng)通常是在有氧條件下和20°-37℃溫度范圍(更優(yōu)選為26°-28℃)內(nèi)進行。
方法(a)是通過在培養(yǎng)過程中把基質(zhì)加到培養(yǎng)基中進行的。培養(yǎng)過程中加入起始化合物的精確時間隨培養(yǎng)設(shè)備、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)基溫度和其它因素而變化，但是優(yōu)選的是在微生物的羥基化能力開始增加時加入，該時間通常是微生物培養(yǎng)開始后的1-2天。加入基質(zhì)的量為培養(yǎng)基重量的0.01-5.0%較好，為0.05-0.5%更好，例如，0.05-0.1%。加入基質(zhì)后，通常是在上述溫度范圍內(nèi)繼續(xù)有氧培養(yǎng)。在加入基質(zhì)后，培養(yǎng)通常繼續(xù)1-2天。
在方法(b)中，微生物的培養(yǎng)首先在可達到最大羥基化能力的條件下進行;這一能力通常在培養(yǎng)開始后4-5天達到最大，雖然這一段時間隨培養(yǎng)基的性質(zhì)和溫度、微生物的種類及其它因素在變化。培養(yǎng)物在羥基化能力可以用下述方法監(jiān)測，即以適當(dāng)?shù)臅r間間隔，對培養(yǎng)物取樣，使它們在標(biāo)準(zhǔn)條件下與基質(zhì)接觸來測定樣品的羥基化能力，并測定所得產(chǎn)物的量，然后將這種能力對時間作圖。當(dāng)羥基化能力達到最大時，停止培養(yǎng)并收集微生物細胞，這可以通過將培養(yǎng)物進行離心分離、過濾或相似的已知分離方法來完成。然后最好用合適的洗滌液如生理鹽水或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌收集的培養(yǎng)微生物的完整細胞。
收集的諾守氏菌屬的微生物細胞與基質(zhì)的接觸一般是在含水介質(zhì)如pH值為5-9的磷酸鹽緩沖液中是進行的。反應(yīng)溫度最好為20°-45℃，為25°-30℃更好?；|(zhì)在反應(yīng)介質(zhì)中的濃度最好為0.01-5.0%(重量)。允許的反應(yīng)時間最好為1-5天雖然這一點可以根據(jù)基質(zhì)在反應(yīng)介質(zhì)中的濃度、反應(yīng)溫度、微生物的羥基化能力(當(dāng)然，微生物的羥基化能力依種類不同而不同，并且，如上所述，這取決于培養(yǎng)時間)以及其它因素而變化。
方法(c)中所用的無細胞的、含酶的提取物可用物理或化學(xué)手段破裂上述方法(b)中得到的微生物的完整細胞得到，例如，研磨或超聲處理以提供分散的細胞物質(zhì)或用表面活性劑或酶處理以產(chǎn)生細胞溶液。然后將得到的無細胞的提取物在上述方法中所述的相同條件下與基質(zhì)接觸。
用于本發(fā)明新方法的微生物屬于諾卡氏菌屬。特別重要的為已知的微生物菌株，自營諾卡氏菌，亞種Canberrica，培養(yǎng)物MA-6181的ATCC35203，和亞種amethystina，培養(yǎng)物MA1680的ATCC35204(設(shè)在Rahway，NewJersey的Merck&Co.，Inc.，的培養(yǎng)收集處存放)。培養(yǎng)物ATCC35203和ATCC35204的樣品可從設(shè)在12301ParklawnDrive，Rockville，MD20852的AmericanTypeCultureCollection的永久性培養(yǎng)物收藏處得到。
用上述任何一種方法完成轉(zhuǎn)化反應(yīng)后，可用常規(guī)的手段直接離析分離或純化所需化合物。例如，可以如下有效地進行分離和純化過濾反應(yīng)混合物，用與水不混溶的有機溶劑(如乙酸乙酯)提取所得濾液，從提取液中蒸除溶劑，將所得化合物粗品進行柱層析(例如硅膠或氧化鋁)并且適當(dāng)?shù)南疵搫┫疵?，特別是在HPLC設(shè)備上進行柱層析較好。
若式(Ⅰ)或(Ⅱ)的?；糠植皇?-甲基丁?；?，2-二甲基丁?；鶗r，可以按照美國專利4，444，784中的方法水解lovastatin中的?；糠植⒂眠m當(dāng)?shù)逆溚轷｛u重新酯化該羥基。鏈烷酰鹵可以通過標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化方法如用烷基鹵或其它合適的親電試劑在可得到的起始原料的酸性C-H部位進行取代形成。參見例如美國專利4，766，145和1988年6月10日提交的審定的申請205，406和205，407。
R2為CH2OH的起始原料(1)可以按照1988年10月6日提交的待審批的申請254，525中的方法制備。
式(Ⅰ)和(Ⅱ)化合物也可以按照路線1所示的合成方法制備。
路線1
T＝羥基保護基如三烷基硅烷基。
R12＝H，CH3或CH2OT.
將起始原料(1)用適于保護內(nèi)酯4-位上醇基的試劑處理。合適的試劑的實例有三烷基硅烷基氯、二烷基芳基硅烷基氯及二氫吡喃。
將二烯(2)在約-80℃和惰性溶劑中用約等摩爾數(shù)的鹵化試劑如苯基氧硒基氯或苯基氧硒基溴或苯基亞磺酰氯(最好是苯基氧硒基氯)處理約20分鐘;所述惰性溶劑的實例有二氯甲烷、乙醚等。經(jīng)常規(guī)處理后，將產(chǎn)物殘留物溶于醚性溶劑中，冷至約0℃，用一種試劑如30%過氧化氫或過氧酸如過氧苯甲酸氧化得到鹵代醇類似物(3)。
將中間體(3)在70°-100℃溫度(最好約90℃)下，在惰性溶劑如苯中用鹵化物還原劑如氫化三烷基錫或氫化三芳基錫，最好是氫化三正丁基錫，和游離基引發(fā)劑如偶氮二異丁腈(AIBN)處理0.5-5小時(最好2小時)，得到化合物(4)。
化合物(4)在甲苯中用氯鉻酸吡啶(PCC)/氧化鋁處理得到烯酮(5)。將化合物(5)與三甲基硅烷基三氟甲磺酸酯和胺接觸得到三甲基硅烷基醚二烯(6)。
將化合物(6)在乙腈中用乙酸鈀處理得到二烯酮(7)。在四氫呋喃中用氟化四丁胺和乙酸處理除去羥基保護基得到產(chǎn)物(Ⅰ)。
將烯酮(5)在乙酸中用氟化四丁胺處理可以轉(zhuǎn)化成式(Ⅰ)中a為單鍵的化合物。
或者，式(Ⅰ)化合物也可以按路線2的合成線路制備。
路線2
將二烯起始原料(1)在約0℃下用間氯過氧苯甲酸處理轉(zhuǎn)化成環(huán)氧化物(8)和(9)。然后將環(huán)氧化物混合物用三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)和三異丙氧基膦處理得到羥基二烯(10)和(11)的混合物。再用3，5-二甲基吡唑減弱的PCC氧化該混合物，得到5-酮化合物(12)和產(chǎn)物(Ⅰ)。
路線1中的烯酮(5)也可以從羥基被保護的環(huán)氧化物(9)或環(huán)氧化物(8)和(9)的混合物按如下方法生成，
然后按路線1方法用化合物(5)形成產(chǎn)物(Ⅰ)。
若上述化學(xué)轉(zhuǎn)化條件可能有害于8-酰氧基部分的取代基時，可用乙酰氧基作為保護基，它可以在分子中的其它位的反應(yīng)完成后通過水解而除去，得到8-羥基衍生物，然后再按照美國專利4，661，483中所述的通用方法將其?；?。
若按照上述合成途徑生成的產(chǎn)品不是所期望的該化合物形式，可用通常方法使該化合物再進一步進行一種或多種反應(yīng)，如水解、二硅烷基化、成鹽作用、酯化作用、?；饔?、氨解或內(nèi)酯化作用。
較好的金屬鹽是與堿金屬(如鈉或鉀)所成的鹽，與堿土金屬(如鈣或鎂)所成的鹽，或與其它金屬(如鋁、鐵、鋅、銅、鎳、或鈷)所成的鹽，其中堿金屬鹽、堿土金屬鹽、和鋁鹽較好，鈉、鈣和鋁所成的鹽最好。
形成氨基酸鹽的較好的氨基酸是堿性氨基酸，如精氨酸、賴氨酸α，β-二氨基丁酸或鳥氨酸。
形成胺鹽的較好的胺類包括二芐基胺、乙二胺、嗎啉、和三(羥甲基)氨基甲烷。用氨形成銨鹽也比較好。
酯類中較好的是烷基酯，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基或戊基酯，其中甲基酯較好。但其它的酯類如苯基C1-5烷基、二甲氨基C1-5烷基、或乙酰氨基C1-5烷基需要時也可以采用。
式(Ⅱ)羧酸的金屬鹽也可通過使氫氧化物或碳酸鹽與式(Ⅱ)的羧酸接觸而制得。所用的水性溶劑較好的是水，或者它也可以是水與一種有機溶劑(最好是醇類(如甲醇或乙醇)、酮類(如丙酮)、脂肪烴類(如乙酸乙酯))的混合物。用一種親水有機溶劑與水的混合物最好。這些反應(yīng)通常在室溫，但需要時也可在加熱或冷卻條件下進行。
式(Ⅱ)羧酸的胺鹽可以通過使胺在含水溶劑中與式(Ⅱ)的羧酸接觸而制得。合適的含水溶劑包括水和水與醇(如甲醇或乙醇)、醚(如乙醚或四氫呋喃)、腈(如乙腈)或酮(丙酮)的混合物;對于該反應(yīng)最好用含水丙酮。該反應(yīng)在室溫或更低的溫度進行較好，在5°至10℃更好。這一反應(yīng)直接完成，或者，將式(Ⅱ)羧酸的金屬鹽(它可以如上所述已經(jīng)制得)溶于含水溶劑中，然后加入所需要胺的無機酸鹽(如鹽酸鹽)，采用該胺本身與式(Ⅱ)羧酸進行反應(yīng)時的同樣條件，然后通過復(fù)分解作用得到所需產(chǎn)品。
式(Ⅱ)的羧酸的氨基酸鹽可以通過使氨基酸的水溶液與式(Ⅱ)的羧酸反應(yīng)而制得。適宜的含水溶劑包括水和水與醇(如甲醇或乙醇)或醚(如四氫呋喃)的混合物。
式(Ⅱ)羧酸的酯類(最好是烷基酯)可以通過使式(Ⅱ)的羧酸與適當(dāng)?shù)拇肌⒆詈迷谒嵝源呋瘎踩鐭o機酸(如鹽酸或硫酸)、路易斯酸(如三氟化硼)或酸性離子交換樹脂〕存在下反應(yīng)來制備。該反應(yīng)所用溶劑不很嚴格，但要求它不對反應(yīng)產(chǎn)生不利影響;適當(dāng)?shù)娜軇┌ù急旧怼⒈?、氯仿、醚類等?；蛘?，所需產(chǎn)品可以通過使式(Ⅱ)的羧酸與重氮烷反應(yīng)制得，其中的烷基部分可以帶有或不帶取代基。進行該反應(yīng)時通常是使酸與重氮烷的醚溶液接觸。制備酯的又一個方法是使式(Ⅱ)羧酸的金屬鹽與鹵化物(較好的是烷基鹵化物在適當(dāng)溶劑中反應(yīng);較好的溶劑包括二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲亞砜和丙酮。最后，酯類也可以由式(Ⅰ)的內(nèi)酯、通過與適當(dāng)?shù)拇见}在無水鏈烷醇中反應(yīng)來制備。所有這些生成酯的反應(yīng)最好在約室溫下進行，但是如果反應(yīng)體系需要，也可以在加熱或冷卻條件下進行反應(yīng)。
式(Ⅰ)羧酸的內(nèi)酯可以在本領(lǐng)域熟練人員已知的通常條件下通過使式(Ⅱ)羧酸內(nèi)酯化而制得。
所要求的化合物的內(nèi)在的HMG-CoA還原酶抑制活性按在J.Med.Chem.，28，p347-358(1985)公布的體外試驗記錄進行測量。
所要求化合物的內(nèi)在的HMG-CoA還原酶抑制活性的代表數(shù)據(jù)是下述化合物的相對效力當(dāng)與Simvastatin的IC50值4.2毫微克/毫升相比，化合物6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮顯示出2毫微克/毫升的IC50值?；衔?(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮顯示出20毫微克/毫升的IC50值。
本發(fā)明化合物可作為抗血膽固醇過多藥物用于治療人類動脈硬化、血脂過高、家族血膽固醇過多等類似疾病。它們可以膠囊、片劑注射劑或類似劑型口服或非腸胃給藥。通常希望通過口服途徑給藥?？梢愿鶕?jù)病人的年齡、嚴重程度、體重和其它條件改變劑量，但成年人的日劑量是約2毫克至2000毫克(10至100毫克較好)，可以分成2至4個分劑量給藥。需要時可使用較大劑量。
本發(fā)明化合物也可以與能在胃腸道中以不可再吸收形式與膽汁酸結(jié)合的可藥用的非毒性陽離子聚合物一起使用。這種聚合物的例子包括消膽胺、消膽寧和聚〔甲基-(3-三甲氨基丙基)亞氨基-三亞甲基二鹵化物〕。本發(fā)明化合物與這些聚合物的相對量在1∶100和1∶15，000之間。
包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的還有治療動脈硬化、家族血膽固醇過多或血脂過多癥的方法，該方法包括對需要這種治療的病人使用一種無毒的、治療有效量的式(Ⅰ)或(Ⅱ)化合物或它們的藥用組合物。
下述實例說明式(Ⅰ)和(Ⅱ)化合物的制備方法以及將它們摻入藥用組合物中去的方法，并且這些實例不應(yīng)被認為是對所附權(quán)利要求中提出的發(fā)明內(nèi)容的限制。
實施例16(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4-(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的制備用1988年10月6日提交的共同待定的專利申請SN254，525中所述的生物轉(zhuǎn)化7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸鈉鹽的一般方法，分離得到了少量的上述標(biāo)題化合物的產(chǎn)品。
在下述生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)中使用的是下述培養(yǎng)基培養(yǎng)基A克/每升蒸餾水酵母提取液4.0麥芽提取液10.0營養(yǎng)肉湯4.0葡萄糖4.0pH7.4培養(yǎng)基在121℃下消毒20分鐘。
培養(yǎng)基B克/每升蒸餾水葡萄糖10.0多凍(polypeptone)2.0肉類提取物1.0玉米浸漬液3.0pH7.0培養(yǎng)基在121℃下消毒20分鐘。
Ⅰ.培養(yǎng)條件和生物轉(zhuǎn)化用冷凍干燥過的一試管自營諾卡氏菌中的Canberrica亞種ATCC35204(MA-6180)對18×175的瓊脂斜面(培養(yǎng)基A)進行接種，然后在27℃培養(yǎng)7天。將斜面培養(yǎng)物用5毫升無菌的培養(yǎng)基B洗滌，再轉(zhuǎn)移到裝有50毫升無菌培養(yǎng)基B的250ML燒瓶中。使該第一階段接種物在220rpm的震蕩器上在27℃生成，24小時后，將2毫升轉(zhuǎn)移到另一個裝有無菌培養(yǎng)基B的燒瓶中。
在上述條件下生長后，用第二階段接種物引發(fā)生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)將20毫升接種培養(yǎng)物加入裝有400毫升無菌培養(yǎng)基B的2L燒瓶中培養(yǎng)物生長24小時后，將80毫克7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)。6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)、5(R)-二羥基庚酸鈉鹽加到每一個燒瓶中。繼續(xù)培養(yǎng)28小時或繼續(xù)培養(yǎng)至用HPLC檢驗不到7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸的存在。將整個液體培養(yǎng)基離心澄清，然后通過2號Whatman濾紙過濾。
Ⅱ.HPLC方法用HPLC法分析整個液體培養(yǎng)基的等分試樣中的7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸衍生物。將過濾后的液體培養(yǎng)基直接進樣(10-20微升)或用甲醇稀釋后進樣。在反相柱上用流速為1-3毫升/分的35-45%的乙腈水溶液進行梯度洗脫來分離化合物。分離游離酸時需加入冰醋酸或H3PO4(0.1毫升/每升流動相)。7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸的衍生物通過監(jiān)測238nm處的吸收及238nm/228nm的吸收比來檢測。所需產(chǎn)物6(R)-〔2-〔8(S)-(2-烷基酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮可通過監(jiān)測293nm處的吸收來檢測。
Ⅲ.6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕-乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮按照上述的一般方法，用2N硫酸調(diào)節(jié)由20千克7-〔1，26，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸鈉鹽的生物轉(zhuǎn)化所得的所有液體培養(yǎng)基(12，700升)的pH值至4.0，然后用乙酸乙酯(2×4500升)提取。接著用1N碳酸氫鈉(20%體積)提取乙酸乙酯溶液，并用乙酸乙酯洗滌含水提取物。然后于含水提取液中加入甲基異丁酮(MIBK，570升)，用7.2N硫酸調(diào)水相的pH值至3.1。酸化水相的MIBK提取液與水相分離，然后用第二份MIBK(570升)提取水相，合并MIBK提取液，經(jīng)硅藻土過濾，共沸干燥后，真空下濃縮至870升。將MIBK溶液加熱至95℃，然后用在MIBK(23升)中的三氟乙酸(0.9升)處理。約15分鐘后，將混合物冷卻至25℃，依次用1N碳酸氫鈉(0.5份體積)和水(2×0.5份體積)洗滌。真空下濃縮有機相，然后將殘留物溶于乙腈中，再用pH為7的0.02M磷酸鹽緩沖液稀釋至30%乙腈。將含有約700毫克的6(R)-〔2-〔〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-6-羥甲基-2(S)-甲基-1，2，6，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的部分(1/3)經(jīng)SP-207(300升，苯乙烯和二乙烯基苯的溴化共聚物，由三菱公司生產(chǎn))柱進行層析，用乙腈/緩沖液(30%，37%，47%，57%)和乙腈/水(67%)洗脫得到上述標(biāo)題產(chǎn)物和6-羥甲基化合物的混合物，所需產(chǎn)物可按下法進一步純化，即將混合物溶于乙酸異丙酯(IPAC)或甲基叔丁基醚(MTBE)中，然后將該溶液加到非極性溶劑(正庚烷，環(huán)己烷或石油醚)中結(jié)晶，除去大部分6-羥甲基化合物。
Ⅳ.6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的分離將第三步得到的結(jié)晶母液濃縮成油狀物，然后溶于甲苯∶甲醇∶乙腈(8∶1∶1，體積比)中使最終體積為100毫升。將該溶液裝到用己烷∶甲苯∶甲醇(3∶1∶1，體積比)平衡過的10升SephadexLH-20(PharmaciaInc.)柱中并用該溶劑以100毫升/分的流速洗脫。
在第11-14倍柱體積的洗脫液中含有所需化合物，濃縮富集產(chǎn)物的洗脫液得到固體物。用制備性反相HPLC層析法進一步純化產(chǎn)物(層析是在C18柱(21.4毫米內(nèi)徑×30厘米)上，以225%-75%乙腈/水為線性梯度洗脫劑進行的，梯度洗脫是在進樣后10分鐘開始的，洗脫時間為40分鐘，洗脫液流速為10毫升/分)。合并含所需產(chǎn)物(在29分鐘時洗出)的餾分，濃縮后得到約400毫克結(jié)晶狀所需產(chǎn)物。
13C NMR數(shù)據(jù)(CD2Cl2，δC＝53.8ppm)ppmppmppm9.436.567.010.636.876.024.137.7123.124.339.0124.524.439.6144.324.942.7154.932.943.3170.233.463.1177.6203.4質(zhì)譜分析表明m/z 432處為弱的分子離子峰，m/z 316和173(基峰)處為碎片離子峰，紫外吸收顯示出λmax＝290nm，ε＝21.900。
以相似的方式，把自營諾卡氏菌中的canberrica亞種ATCC35203(MA6181)用于7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(22-二甲基丁酰氧基-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸鈉鹽的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)中，得到了所需產(chǎn)物。
此外，用自營諾卡氏菌中的amethystina亞種ATCC35204(MA6180)和自營諾卡氏菌中的canberrica亞種ATCC35203(MA6181)使7-〔1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-2(S)，6(R)-二甲基-8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-1(S)-萘基〕-3(R)，5(R)-二羥基庚酸鈉鹽，開環(huán)lovastatin的鈉鹽，進行相似的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)，得到6(R)-〔2-〔8(S)-(2-甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮。
實施例26(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，5，6，7，8，8a(R)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的制備將溶解在3毫升乙酸乙酯中的30毫克實施例1的二烯酮產(chǎn)物(R1＝2-甲基-2-丁基，a＝雙鍵)在6毫克10% Pd/C上氫化(1個大氣壓H2，室溫)30小時。濾除催化劑并蒸發(fā)溶劑后，得到標(biāo)題化合物。IR(液膜)1718cm-1，1665cm-1。MS(EI)m/z 434(M+)。
實施例36(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的制備(a)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，6，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(2′)在0℃，將叔丁基二甲基甲硅烷基氯(8克，52毫摩爾)加到6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，6，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(20克，48毫摩爾)和咪唑(6.8克0.1摩爾)在DMF(150毫升)中的攪拌溶液中，將得到的混合物在0℃下攪拌5分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時。試樣的TLC分析表明反應(yīng)已完全。將反應(yīng)混合物倒入冷水中，用乙醚提取，乙醚提取液用稀鹽酸、水及5%碳酸氫鈉溶液洗滌。MgSO4干燥后，過濾有機提取液，并將濾液真空濃縮，得到無色的、粘稠油狀的所需產(chǎn)物;NMR(CDCl3)δ0.84(3H，t，J＝7Hz)，0.89(3H，d，J＝7Hz)，0.90(9H，s)，1.09(3H，d，J＝7Hz)，1.11(3H，s)，1.12(3H，s)，4.30(H，m)，4.60(H，m)，5.33(H，m)，5.51(H，m)，5.77(H，dofd，J＝10，6Hz)，5.98(H，d，J＝10Hz).
(b)6(R)-〔2-〔5(S)-氯-4a(S)-羥基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，4a，5，6，7，8，8a(S)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(3′)將苯基氧硒基氯(10克，52毫摩爾)在二氯甲烷(50毫升)中的溶液滴加到干冰/異丙醇浴(-78℃)中冷卻的化合物2′(25.2克，48毫摩爾)在二氯甲烷(350毫升)中的攪拌溶液中。將所得混合物在-78℃攪拌20分鐘，然后倒入冷水(300毫升)中，用乙醚(先用400毫升，再用150毫升)提取兩次。將合并的提取液用MgSO4干燥、過濾并濃縮，得到油狀殘留物，將其溶于四氫呋喃(300毫升)中。將該溶液在冰浴(0℃)冷卻下，于其中加入30%過氧化氫(15毫升)。將所得混合物在0℃攪拌5分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝兀倮^續(xù)攪拌1小時。將反應(yīng)混合物倒入冷水中，用氯仿(先用400毫升，再用2×100毫升)提取三次。合并的提取液用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到殘留物，再將殘留物在硅膠柱上進行閃式層析。用己烷∶乙酸乙酯(5∶1，體積比)洗脫除去雜質(zhì)。用己烷∶乙酸乙酯(4∶1，體積比)進一步洗脫得到標(biāo)題產(chǎn)物，為淺黃色樹膠狀物質(zhì)，放置后固化。
C31H53ClO6Si 計算值C，63.61;H，9.13.
實驗值C，63.80;H，9.04.
(c)6(R)-〔2-〔4a(S)-羥基-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，4a，5，6，7，8，8a(S)-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(4′)將氫化三丁基錫(7.06毫升，26.25毫摩爾)和偶氮二異丁腈(AIBN)(0.82克，5.0毫摩爾)加到磁力攪拌著的氯代醇3′(8.78克，15毫摩爾)在苯(100毫升)中的溶液中，將所得溶液回流2小時，然后冷卻并真空濃縮，得到粘稠的黃色油狀物，在-15℃(冰/丙酮浴)與石油醚(200毫升)一起攪拌，得到4′，為松散的無色固體(6.9克，mp97-9℃)。濾液用乙腈(4×50毫升)提取除去石油醚中所含的所有產(chǎn)物。合并乙腈提取液，濃縮后得到無色油狀物，在硅膠柱上進行閃式層析純化。用乙酸乙酯/己烷(1∶3，體積比)洗脫，得到無色固體(1.0克)，將該固體物在0℃的石油醚中攪拌除去一些錫殘留物?；旌衔镞^濾后得到產(chǎn)物4′，為無色固體物。
C31H54O6Si 計算值C，67.59;H，9.88.
實驗值C，67.20;H，9.99.
(d)6(R)-〔2-〔3-氧代-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，3，5，6，7，8，8a-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(5′)將7.2克(12毫摩爾)化合物(4′)與60毫升甲苯和442克氯鉻酸吡啶鹽/氧化鋁合并。將混合物在蒸汽浴上攪拌加熱20分鐘后，用TLC檢測表明反應(yīng)已完全。將混合物冷卻、過濾，固體物用溫?zé)岬募妆?4×50毫升)洗滌。蒸發(fā)溶劑后得到琥珀色樹膠狀物質(zhì)。Nmr(CDCl3)δ0.073(3H，s)，0.079(3H，s)，0.804(3H，t，J＝7Hz)，0.881(9H，s)，1.026(2H，d，J＝6Hz)，1.036(3H，d，J＝6Hz)，1.10(6H，br s)，2.55-2.66(3H，m)，4.276(H，m)，4.588(H，m)，5.42(H，m)，5.910(H，d，J＝1.5Hz)(e)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-3-(三甲基硅氧基)-1，2，6，7，8，8a(R)-六氫-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(6′)在氬氣下，將步驟3d中的琥珀色樹膠狀產(chǎn)物溶于二氯甲烷中，冷卻至0℃。將該溶液用三乙胺(7.2毫升，50毫摩爾)處理，接著慢慢加入三氟甲磺酸三甲基硅烷基酯(5.4毫升，28毫摩爾)，同時維持溫度在3℃以下。在0℃下攪拌15分鐘后(TLC表明5分鐘時反應(yīng)已完全)，將暗色溶液用二氯甲烷(100毫升)稀釋，用飽和NaHCO3(100毫升)洗滌，干燥并蒸發(fā)溶劑。
(f)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-(叔丁基二甲基硅氧基)-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(7′)將步驟(3e)的暗琥珀色殘留物溶于乙腈/四氫呋喃中。于該混合物中加入乙酸鈀(Ⅱ)(3.0克，13.0毫摩爾)，并將混合物在室溫下攪拌22小時，此時，TLC表明反應(yīng)已完全。將混合物通過3厘米的硅膠濾墊過濾，然后用乙酸乙酯(150毫升)洗滌，并蒸發(fā)溶劑。Nmr(CDCl3)δ0.076(3H，s)0.082(3H，s)，0.752(3H，t，J＝7Hz)，0.883(9H，s)1.033(3H，d，J＝7Hz)，1.059(3H，s)1.065(3H，s)1.804(3H，s)，4.295(H，m)4.606(H，m)，5.408(H，m)5.781(H，br s)，6.136(H，br s).
(g)6(R)-〔2-〔8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基-2(S)，6-二甲基-3-氧代-1，2，3，7，8，8a(R)-六氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮(Ⅰ)將步驟(3f)的暗棕色樹膠狀物溶于四氫呋喃中，于其中加入氟化四正丁銨(30毫升)和乙酸(5.6毫升)的混合物。將合并的混合物在50℃攪拌4小時，然后冷卻，用乙醚(400毫升)稀釋，用水(5×100毫升)洗滌，干燥并蒸發(fā)溶劑。殘留物固化得棕色物質(zhì)。在50毫米LP柱上進行層析，先用己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脫，收集10份(每份25毫升)后，用己烷-乙酸乙酯(1∶2)洗脫，收集11份，最后用己烷-乙酸乙酯(1∶4)洗脫。從25-53份中得到了標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.160-174℃，然后用乙酸乙酯(30毫升)-己烷(30毫升)重結(jié)晶該產(chǎn)物。在60℃和真空下干燥2小時后，得到了標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.179-180℃。
C25H36O6計算值C，69.42;H，8.39實驗值C，69.73;H，8.54實施例46(R)-〔2-〔3-氧代-8(S)-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2(S)，6(R)-二甲基-1，2，3，5，6，7，8，8a-八氫萘基-1(S)〕乙基〕-4(R)-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-吡喃-2-酮的制備將實施例3中的化合物(5′)(500毫克，0.9毫摩爾)在乙酸(42毫升)和水(15毫升)中的溶液在70℃下加熱3小時。冷卻后，將反應(yīng)混合物用水稀釋并用乙醚提取。乙醚提取物用水洗滌五次，然后用碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。干燥后過濾，濾液蒸發(fā)后得到殘留物，將殘留物在硅膠柱上進行閃式層析純化，用30%的丙酮在二氯甲烷中的溶液洗脫，得到固體狀標(biāo)題產(chǎn)物mp 117-8℃;nmr(CDCl3)δ0.80(3H，t，J＝7Hz)，1.02(3H，d，J＝7Hz)，1.04(3H，d，J＝7Hz)，1.10(6H，s)，2.64(H，m of d，J＝18Hz)，2.72(H，d of d，J＝18，4Hz)，4.3H(H，m)，4.65(H，m)，5.44(H，m)，5.92(H，bs).
C25H38O6計算值C，69.09;H，8.81實驗值C，68.85;H，8.65實施例5-9按照實施例3的方法，用相當(dāng)量的反應(yīng)物(A)代替步驟(a)中的Simvastatin，形成了產(chǎn)物(B)。
實施例5 R1＝2-丁基，R2＝CH3;
6 R1＝2-丁基，R2＝H;
7 R1＝2-甲基-2-丁基，R2＝H;
8 R1＝2-甲基-2-丁基，R2＝CH2OH;
9 R1＝2-丁基，R2＝CH3OH。
實施例10式(Ⅱ)化合物的銨鹽的制備在室溫下將實例1的內(nèi)酯(1.0毫摩爾)攪拌溶于0.1N NaOH(1.1毫摩爾)中。將所得溶液冷卻并通過滴加1N HCl酸化。所得混合物用乙醚提取，提取液用鹽水洗滌并干燥(MgSO4)。濾除MgSO4，濾液用氨氣飽和得到膠狀物，固化后得到銨鹽。
實施例11式(Ⅱ)化合物的堿金屬鹽和堿土金屬鹽的制備于實施例1得到的44毫克內(nèi)酯在2毫升乙醇中的溶液中加入1毫升(1當(dāng)量)NaOH水溶液。在室溫保持1小時后，將混合物真空處理至干，得到所需鈉鹽。
用類似方法，用1當(dāng)量氫氧化鉀制得鉀鹽，用1當(dāng)量CaO制得鈣鹽。
實施例12式(Ⅱ)化合物的乙二胺鹽的制備于0.50克實施例10銨鹽在10毫升甲醇中的溶液中加入0.75毫升乙二胺。真空下蒸去甲醇得到所需的乙二胺鹽。
實施例13式(Ⅱ)化合物的三(羥甲基)氨基甲烷鹽的制備于202毫克實施例10的銨鹽在5毫升甲醇中的溶液中加入60.5毫克三(羥甲基)氨基甲烷在5毫升甲醇中的溶液。真空除去溶劑，得到所需的三(羥甲基)氨基甲烷鹽。
實施例14式(Ⅱ)化合物的L-賴氨酸鹽的制備將0.001摩爾賴氨酸和0.0011摩爾實施例10的銨鹽在15毫升85%乙醇中的溶液真空濃縮至干，得到所需的賴氨酸鹽。
按類似方法制得L-精氨酸鹽、L-鳥氨酸鹽和N-甲基葡萄糖胺鹽。
實施例15式(Ⅱ)化合物的四甲銨鹽的制備將在2毫升二氯甲烷中的68毫克實施例10的銨鹽和在甲醇中的0.08毫升24%氫氧化四甲銨的混合物用乙醚稀釋，得到所需的四甲基銨鹽。
實施例16式(Ⅱ)化合物的甲基酯的制備于400毫克實施例1的內(nèi)酯在100毫升無水甲醇中的溶液中加入10毫升0.1M甲醇鈉的無水甲醇溶液。該溶液在室溫放置1小時，然后用水稀釋，用乙酸乙酯提取兩次。分出有機相，干燥(Na2SO4)，過濾并真空蒸發(fā)，得到所需的甲基酯。
用類似方法，使用相當(dāng)量的丙醇、丁醇、異丁醇、叔丁醇、戊醇、異戊醇、2-二甲氨基乙醇、芐醇、2-乙酰氨基乙醇等，得到相應(yīng)的酯。
實施例17游離二羥基酸的制備將實施例11的式(Ⅱ)化合物鈉鹽溶于2毫升乙醇-水(1∶1，體積比)中，并將其加到10毫升1N鹽酸中，用乙酸乙酯從中提取出二羥基酸。將有機提取物用水洗一次，干燥(Na2SO4)并真空蒸發(fā)(浴溫不超過30℃)。所得到的二羥基酸衍生物放置時慢慢轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的母體內(nèi)酯，但在pH值7.0以上時是穩(wěn)定的。
實施例18作為本發(fā)明組合物的一個具體實例，將20毫克實施例1的內(nèi)酯與足夠細的乳糖一起加工成總量為580至590毫克的制劑，裝入0號硬明膠膠囊中。
權(quán)利要求
1.一種制備化合物(Ⅰ)的方法， 式中R2選自(1)C2-10烷基；(2)取代的C2-10烷基，其中的一個或多個取代基選自(a)鹵素，(b)羥基，(c)C2-10烷氧基，(d)C2-5烷氧羰基，(e)C2-5酰氧基，(f) 環(huán)烷基，(g)苯基，(h)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(i)C2-10烷基S(O)n，其中n是0～2，(j)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(k)苯基S(O)n，(l)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(m)氧，(3)C2-10烷氧基，(4)C2-10烯基，(5)C3-8環(huán)烷基，(6)取代的C3-8環(huán)烷基，其中一個取代基選自(a)C2-10烷基，(b)取代的C2-10烷基，其中的取代基選自(i)鹵素，(ii)羥基，(iii)C2-10烷氧基，(iv)C2-5烷氧羰基，(v)C2-5酰氧基，(vi)苯基，(vii)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(viii)C2-10烷基S(O)n，(ix)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(x)苯基S(O)n，(xi)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，及(xii)氧，(c)C2-10烷基S(O)n，(d)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(e)苯基S(O)n，(f)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(g)鹵素，(h)羥基，(i)C2-10烷氧基，(j)C2-5烷氧羰基，(k)C2-5酰氧基，(i)苯基，及(m)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(7)苯基，(8)取代的苯基，其中取代基是X和Y，(9)氨基，(10)C2-5烷基氨基，(11)二(C2-5烷基)氨基；(12)苯基氨基，(13)取代的苯基氨基，其中取代基是X和Y；(14)苯基C2-10烷基氨基；(15)取代的苯基C2-10烷基氨基，其中的取代基是X和Y；(16)下述基團之一(a)哌啶基，(b)吡咯烷基，(c)哌嗪基，(d)嗎啉基，和(e)硫代嗎啉基；以及(17)R3S，其中R3選自(a)C1-10烷基，(b)苯基；和(c)取代的苯基，其中取代基是X和Y；R2為H、CH3或CH2OH；X和Y選自(a)OH，(b)鹵素，(c)三氟甲基，(d)C1-3烷氧基，(e)C1-3烷基羰氧基，(f)苯基羰基氧基，(g)C1-3烷氧羰基，(h)苯氧羰基，(i)氫，(j)C1-5烷基；鹵素為氯或氟；a為單鍵或雙鍵；該方法的特征在于用(a)氟化四正丁銨和乙酸或(b)氫氟酸在乙腈中的含水溶液處理化合物(7)得到化合物(Ⅰ)，
式中R′2為H、CH3或CH2OT；T為三甲基硅烷基、三乙基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基或三異丙基硅烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中進一步包括用乙酸鈀(Ⅱ)處理化合物(6)得到a為雙鍵的化合物(7)，
式中T和T1分別獨立地選自三甲基硅烷基、三乙基硅烷基、三異丙基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基或叔丁基苯硅烷基。
3.制備化合物(Ⅰ)的方法，
式中R2選自(1)C2-20烷基;(2)取代的C2-20烷基，其中的一個或多個取代基選自(a)鹵素，(b)羥基，(c)C2-20烷氧基，(d)C1-5烷氧羰基，(e)C1-5酰氧基，(f)C3-8環(huán)烷基，(g)苯基，(h)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(i)C2-20烷基S(O)n，其中n是0～2，(j)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(k)苯基S(O)n，(l)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(m)氧;(3)C2-10烷氧基;(4)C2-10烯基;(5)C3-8環(huán)烷基;(6)取代的C3-8環(huán)烷基，其中一個取代基選自(a)C1-20烷基，(b)取代的C1-10烷基，其中的取代基選自(ⅰ)鹵素，(ⅱ)羥基，(ⅲ)C2-10烷氧基，(ⅳ)C2-5烷氧羰基，(ⅴ)C2-5酰氧基，(ⅵ)苯基，(ⅶ)取代的苯基，其中的取代基是X和Y，(ⅷ)C1-10烷基S(O)n，(ⅸ)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(ⅹ)苯基S(O)n，(ⅹⅰ)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，及(ⅹⅱ)氧，(c)C1-10烷基S(O)n，(d)C3-8環(huán)烷基S(O)n，(e)苯基S(O)n，(f)取代的苯基S(O)n，其中的取代基是X和Y，(g)鹵素，(h)羥基，(i)C1-10烷氧基，(j)C1-5烷氧羰基，(k)C1-5酰氧基，(l)苯基，及(m)取代的苯基，其中的取代基是X和Y;(7)苯基;(8)取代的苯基，其中取代基是X和Y;(9)氨基，(10)C1-5烷基氨基;(11)二(C1-5烷基)氨基;(12)苯基氨基;(13)取代的苯基氨基，其中取代基是X和Y;(14)苯基C1-10烷基氨基;(15)取代的苯基C1-10烷基氨基，其中的取代基是X和Y;(16)下述基團之一(a)哌啶基，(b)吡咯烷基，(c)哌嗪基，(d)嗎啉基，和(e)硫代嗎啉基;以及(17)R3S，其中R3選自(a)C1-10烷基，(b)苯基;和(c)取代的苯基，其中取代基是X和Y;R2為H、CH3或CH2OH;X和Y選自(a)OH，(b)鹵素，(c)三氟甲基，(d)C1-3烷氧基，(e)C1-3烷基羰氧基，(f)苯基羰基氧基，(g)C1-3烷氧羰基，(h)苯氧羰基，(i)氫，(j)C1-5烷基;鹵素為Cl或F;該方法包括用氯鉻酸吡啶鎓鹽處理化合物(11)得到化合物(Ⅰ)，
全文摘要
式(I)和(II)化合物為β-羥-β-甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-COA)還原酶抑制劑。
文檔編號A61P9/10GK1047863SQ8910637
公開日1990年12月19日 申請日期1989年8月12日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月9日
發(fā)明者亨利·喬舒亞, 肯尼思·E·威爾遜, 邁克爾·S·許瓦茲, 李大智, 杰拉爾德·E·斯托克 申請人:麥克公司