專利名稱:一種中藥材的粉碎方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥材的粉碎方法，尤其是一種加分散介質(zhì)對(duì)中藥材進(jìn)行超微粉碎的方法，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
一、超微粉碎研究進(jìn)展
1超微粉碎原理及意義
超微粉碎技術(shù)是使物料微細(xì)及超細(xì)化的機(jī)械加工方法，是提供超微粉體的重要手段之一。近20年來，該項(xiàng)技術(shù)獲得迅速發(fā)展，國(guó)外已廣泛應(yīng)用于冶金、陶瓷、紡織及航空航天等工業(yè)領(lǐng)域，國(guó)內(nèi)無機(jī)物的納米技術(shù)(如磁帶用磁粉)獲得了較快的發(fā)展。中藥行業(yè)引入微粉概念始于20世紀(jì)90年代末，雖然起步較晚，但由于粉碎是中藥生產(chǎn)及應(yīng)用中的基本加工技術(shù)，因此超微粉碎也愈來愈引起人們的關(guān)注，超微粉碎技術(shù)已顯露出特有的優(yōu)勢(shì)和廣闊的應(yīng)用前景。
在中藥材的粉碎過程中，藥材受到強(qiáng)烈的正向擠壓力和切向剪切力的作用，運(yùn)用高速、高能量進(jìn)行粉碎，細(xì)胞被擠壓、剪切，細(xì)胞壁被撕裂、斷開，細(xì)胞被破碎成碎片或被壓破，所得到的粉末粒徑一般達(dá)300目以上、中心粒徑達(dá)15～35μm，細(xì)胞破壁率達(dá)95％以上，“破壁”的藥粉其所含化學(xué)成分直接暴露出來，與傳統(tǒng)的中藥藥粉(化學(xué)成分存在于完整的細(xì)胞壁內(nèi))相比，產(chǎn)生了“質(zhì)”的變化，初步的藥理實(shí)驗(yàn)已證實(shí)細(xì)胞級(jí)超細(xì)微粉能明顯提高藥效，在中藥現(xiàn)代化方面有廣泛應(yīng)用。其原理目前初步認(rèn)為細(xì)胞破壁后的超微粉末可以全成分保留其中的各種成分，這些成分之間形成油/水型或水/油型固態(tài)乳化物，細(xì)胞級(jí)超細(xì)微粉易被小腸吸著、停留時(shí)間長(zhǎng)，利于吸收，同時(shí)直接暴露的化學(xué)成分及乳化態(tài)的全成分易于透膜吸收，大大提高了其生物利用度。
中藥超微粉碎給中藥劑型改革和中藥現(xiàn)代化帶來了一場(chǎng)革命，提高了細(xì)胞破壁率、比表面積、有效成分溶出度、生物利用度，能增強(qiáng)藥理作用、減少用藥量、節(jié)省藥材和保護(hù)藥材資源，同時(shí)還可改善氣味、口感，提高藥品質(zhì)量，相對(duì)目前常規(guī)粉碎、水煎煮或有機(jī)溶劑提取等方法具有無可比擬的優(yōu)勢(shì)。尤其對(duì)于樹脂類藥材、動(dòng)物藥及貴重藥材如血竭、水蛭、麝香、牛黃等，由于這些藥材中成分不明確，不宜提取，大多經(jīng)常規(guī)粉碎后入丸散應(yīng)用，而引入超微粉碎技術(shù)后，將對(duì)傳統(tǒng)的制劑工藝帶來深遠(yuǎn)的影響，使原有物料處于一種超微細(xì)粉末的“新的狀態(tài)”，充分發(fā)揮超微細(xì)粉獨(dú)特的理化性質(zhì)，中藥的有效成分不但不會(huì)丟失或減少，而且還會(huì)被人體更充分吸收利用，中醫(yī)藥的特色將得到更大的發(fā)揮。
2中藥超微粉碎存在的問題
盡管中藥超微粉碎研究已成熱潮，但有一些具有實(shí)際應(yīng)用意義的問題或難題，至今沒有得有效的解決，這些問題或難題包括(1)在藥材粉碎過程中，隨著顆粒粒徑的減小，所需進(jìn)一步粉碎的能量不斷增大，當(dāng)顆粒粒徑達(dá)到一定程度后，粉碎效率明顯降低；(2)既便在粉碎完成后，由于粒徑的減小仍然容易導(dǎo)致表面能增加，使顆粒處于不穩(wěn)定狀態(tài)；流動(dòng)性差，易聚集形成假大顆粒；可濕性增加，易吸潮；吸附性增加，易吸附空氣中的雜質(zhì)；(3)由于以上問題的存在，導(dǎo)致中藥微粉在制劑過程中出現(xiàn)粉體流動(dòng)性差、分劑量不準(zhǔn)確、易吸潮、片劑不易成型等技術(shù)問題，嚴(yán)重影響了中藥微粉的實(shí)際應(yīng)用，成為中藥超微粉碎技術(shù)或中藥超微粉與中藥制劑相銜接的瓶頸。
在其他工業(yè)領(lǐng)域，也存在以上類似的問題，如磁粉或墨粉的生產(chǎn)，解決方法就是加水粉碎，使生成的細(xì)粉迅速分散到水中，減弱其聚集作用，待粉碎完成后，再將水排除、烘干，即得到細(xì)致均勻的磁粉或墨粉。但這一方法并不能直接移植至中藥領(lǐng)域，因?yàn)榍罢叨际堑V物質(zhì)，性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定，既不溶于水中，受熱又不會(huì)破壞，也不存在制劑的過程；而中藥則不同，所含成分復(fù)雜、性質(zhì)各不相同，如果也加液粉碎，那么粉碎后的固液分離過程(無論是過濾還是加熱濃縮)必將對(duì)液體中的成分造成損失或破壞。因此，在中藥領(lǐng)域，加液(一般指水)超微粉碎的方法，一直被認(rèn)為是不可行的。

發(fā)明內(nèi)容 本發(fā)明的目的在于提供一種新的超微粉碎方法，尤其是應(yīng)用于中藥的超微粉碎方法
本發(fā)明目的是這樣實(shí)現(xiàn)的
一種加分散介質(zhì)制備中藥超微粉的方法，其特征在于將待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加適宜分散介質(zhì)一并置于超微粉碎設(shè)備中，進(jìn)行超微粉碎，即得。
該粉碎方法尤其適用于以下幾種中藥材
a、水蛭、蛤蚧、熊膽、麝香、牛黃、羚羊角、鹿茸、蟾酥、蛤士蟆油、海馬、全蝎、蜈蚣、虻蟲、螞蟻等動(dòng)物類藥材；
b、血竭、龍血竭、乳香、沒藥等樹脂類藥材；
c、冰片、冬蟲夏草、藏紅花、西紅花、蜂膠等貴重藥材。
上述制備方法，具體可以是以下方法中的任意一種
a.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.01～5倍量適宜的固體分散介質(zhì)，用振動(dòng)磨超微粉碎10～60分鐘，即得。
b.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.2～5倍量適宜的液體分散介質(zhì)，用振動(dòng)磨超微粉碎10～60分鐘，即得。
在上述方案中，所涉及到的分散介質(zhì)按其狀態(tài)，可分成固體分散介質(zhì)、液體分散介質(zhì)兩大類，具體為
固體分散介質(zhì)可以選自但不限于如下的一種或幾種的組合固體聚乙二醇、微粉硅膠、微晶纖維素、環(huán)糊精、硬脂酸鎂、滑石粉、淀粉、羧甲淀粉鈉、丙烯酸樹脂、羥丙甲、卡泊姆。
液體分散介質(zhì)可以選自但不限于如下的一種或幾種的組合大豆油、花生油、菜子油、玉米油、芝麻油、紅花油、油酸乙酯、椰子油酯類、向日葵油單甘油酯、蜂蠟、聚乙二醇(PEG)、甘油、丙二醇、山梨醇、磷脂、膽固醇、吐溫、司盤、帕洛沙姆。
在上述方案中，振動(dòng)磨的工作溫度可以為室溫或通冷卻水、液氮等低溫下操作；而上述所用分散介質(zhì)中固體分散介質(zhì)以微粉硅膠、固體聚乙二醇、環(huán)糊精中的一種或幾種的組合物分散效果最好，液體分散介質(zhì)以聚乙二醇、丙二醇、甘油、吐溫中的任意一種或幾種的組合物分散效果最好，對(duì)生物利用度的改善最明顯，因此發(fā)明人進(jìn)行了進(jìn)一步設(shè)計(jì)，制定了如下優(yōu)化的技術(shù)方案，但本專利所包含技術(shù)方案可選自但不僅限于如下技術(shù)方案中的任意一種
a.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.02～2倍量的微粉硅膠、固體聚乙二醇、環(huán)糊精中一種或幾種的組合物，用振動(dòng)磨超微粉碎20～60分鐘，即得。
b.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.2～2倍量的聚乙二醇、丙二醇、甘油、吐溫中任意一種或幾種的組合物，用振動(dòng)磨超微粉碎20～60分鐘，即得。
其中上述聚乙二醇組合物進(jìn)一步優(yōu)選的比例為聚乙二醇-丙二醇-甘油-吐溫的比例為6～9∶1～3∶0～3∶0～3。
最后，按照所得超微組合物的狀態(tài)不同，發(fā)明人設(shè)計(jì)劑型選擇如下
加固體分散介質(zhì)所得超微混合物可用于直接制備丸劑、散劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑等固體制劑。
加液體分散介質(zhì)所得超微混合物可用于直接制備軟膠囊劑、硬膠囊劑、口服凝膠劑、固體/半固體的透皮制劑和口服乳劑等固體或半固體制劑，尤其是直接用于灌裝中藥軟膠囊、硬膠囊。
有益效果
本發(fā)明的技術(shù)方案，從實(shí)用的角度考慮，結(jié)合制劑的需要，加適宜分散介質(zhì)超微粉碎制備半成品，直接制成所需制劑。因而所選分散介質(zhì)不是水，而是多種藥用輔料，這看似簡(jiǎn)單的改進(jìn)，卻是多年來本領(lǐng)域技術(shù)人員都未想到并付諸實(shí)施的，該方法一定程度上解決了超微粉碎應(yīng)用到中藥制劑中的適應(yīng)性問題，突破了常規(guī)超微粉碎效率不斷降低的技術(shù)困撓，打破了先制粉再制劑的思維模式，也摒棄了中藥不能加介質(zhì)超微粉碎的傳統(tǒng)觀念，這一方法越過了中藥超微粉碎與中藥制劑相銜接的瓶頸，是將粉碎與制劑完美結(jié)合的最佳工藝，必將極大推動(dòng)超微粉碎技術(shù)在中藥單味藥、復(fù)方尤其是復(fù)方中的應(yīng)用，是超微粉碎技術(shù)在中藥藥劑中應(yīng)用的新趨勢(shì)，達(dá)到節(jié)約藥材、簡(jiǎn)化制劑工藝的雙贏效果。具體來說，本專利方法除具有提高粉碎粒度，提高生物利用度，節(jié)省藥材等優(yōu)勢(shì)外，還具有以下優(yōu)勢(shì)
1.充分考慮藥材性質(zhì)植物類藥材、礦物類藥材，雖韌性強(qiáng)如靈芝孢子，但一般超微粉碎即可達(dá)到粉碎效果，而樹脂類藥材、動(dòng)物類藥材及難粉碎的貴重藥，常規(guī)工藝粉碎過程中極易“返粗”或受熱變軟、蛋白變性等問題，粉碎物中有明顯的片狀物，為鋼棒之間擠壓所致；且放置過程中極容易重新聚合。而根據(jù)藥材性質(zhì)，加適宜的基質(zhì)進(jìn)行超微粉碎，具有以下優(yōu)點(diǎn)a.完全避免了粉碎過程中復(fù)聚現(xiàn)象，藥物粉碎過程中迅速被分散，避免黏連、復(fù)聚；b.極大的提高了藥材的粒度，其中加固體分散介質(zhì)所得混合物90％粒子粒徑在20μm以內(nèi)，其中心粒徑在12μm以內(nèi)；加液體分散介質(zhì)，比濕法粉碎粒度更細(xì)，所得混合物90％粒子粒徑在10μm以內(nèi)，其中心粒徑在4μm以內(nèi)，較常規(guī)超微粉碎粒度大大提高；c.采用加分散介質(zhì)粉碎法，粉碎時(shí)間比原來縮短，粉碎效率比原來大大提高；d.更重要的是，采用此法操作，可避免超微粉碎物在放置過程中的聚合，解決該類成分存儲(chǔ)中穩(wěn)定性差的問題。
2.充分考慮制劑的需要 將粉碎與制劑結(jié)合起來，從制劑的角度出發(fā)，考慮制劑的穩(wěn)定性、生物利用度的提高等因素，選擇合適的分散介質(zhì)，例若制備成膠囊劑，常選擇加入5～10％的微粉硅膠進(jìn)行粉碎，所得混合物穩(wěn)定性好、流動(dòng)性強(qiáng)，可直接用于充填膠囊；若擬制備軟膠囊，可選擇加入植物油或PEG400，另加適宜的助懸劑、穩(wěn)定劑等藥劑學(xué)常用輔料，一并粉碎，所得流體或半流體直接用于充填軟膠囊。
3.沒有后續(xù)工藝，解決工藝生產(chǎn)中存在問題由于該工藝為粉碎后直接制成制劑，因此不存在液體、固體難于分離等問題；又因粉碎中加入了分散介質(zhì)，使超微粉體的流動(dòng)性大大改善，吸濕性降低，使制劑更容易成型、穩(wěn)定，避免了超微粉體固有的缺陷。
4.輔料本身的優(yōu)點(diǎn)對(duì)改善超微粉碎的作用
①微粉硅膠的應(yīng)用
又名白炭黑，其無臭、無味，不溶于水；與絕大多數(shù)藥物不發(fā)生反應(yīng)，有良好的流動(dòng)性和附著力；促崩解，作潤(rùn)滑劑，能增加溶出，固體分散，因其質(zhì)輕、體積大，流動(dòng)性好，用作分散介質(zhì)，能顯著改善超微粉的流動(dòng)性，避免分子間團(tuán)聚，保證制劑的重量差異，其在超微粉碎過程中應(yīng)用意義重大。
②聚乙二醇400的應(yīng)用
作為美國(guó)藥典推薦用軟膠囊輔料，引入到超微粉碎中，進(jìn)一步高度分散，能大大提高生物利用度，效果更突出，這一點(diǎn)在藥理試驗(yàn)中有報(bào)道；另有文獻(xiàn)報(bào)道，聚乙二醇類對(duì)動(dòng)物蛋白具有結(jié)構(gòu)修飾作用，修飾后的蛋白不容易被蛋白水解酶降解，而且不容易被腎小球?yàn)V過，所以血藥半衰期得以延長(zhǎng)。同時(shí)聚乙二醇對(duì)蛋白抗原表位的物理屏障作用，可以使蛋白的免疫原性或抗原性下降或消除。在藥物粉碎過程中直接加入聚乙二醇400，可使其及時(shí)、充分地與藥物成分相結(jié)合，其結(jié)合效果是傳統(tǒng)“先粉碎后混合”方法所不能比擬的。
③環(huán)糊精的應(yīng)用
分散介質(zhì)中加入適量羥丙環(huán)糊精或β-環(huán)糊精，可對(duì)待粉碎藥材如麝香、冰片或藥材中揮發(fā)油類成分有直接包和作用，且包封率及包和效率高，可有效保護(hù)揮發(fā)性或升華性強(qiáng)的成分，提高此類成分在制劑中的穩(wěn)定性。
5、方便制劑，提高制劑穩(wěn)定性
采用加入適宜分散介質(zhì)超微粉碎的方法，所得超微混合物根據(jù)臨床需要可直接制成制劑，且所得混合物高度均勻乳化，粒度小，穩(wěn)定性好，無分層現(xiàn)象，可用該方法解決留粉藥材制備軟膠囊易分層、沉淀等長(zhǎng)期困擾的難題，同樣也能提高如膠囊劑、散劑等其他制劑超微粉體的穩(wěn)定性，且制備工藝簡(jiǎn)便易行，是將粉碎與制劑完美結(jié)合的最佳工藝，必將在今后的超微制劑生產(chǎn)中被推廣。
6、單味藥材、中藥復(fù)方均可
本專利申請(qǐng)所提出方法，不僅適用于中藥材的加工，還可以用于含動(dòng)物藥、樹脂藥、貴重藥留粉的中藥復(fù)方的進(jìn)一步開發(fā)利用，如七厘散為傷科常用藥，其每年銷售額的30％以上用于購(gòu)買中藥材，若采用加分散介質(zhì)超微粉碎，在保證療效的基礎(chǔ)上，減量應(yīng)用，可節(jié)省約50％的藥材，其直接經(jīng)濟(jì)收益非?？捎^，所以該技術(shù)具有非常廣闊的市場(chǎng)前景。
為進(jìn)一步說明本發(fā)明所取得的有益效果，發(fā)明人從粉碎效果、超微混合物穩(wěn)定性和藥理試驗(yàn)三方面進(jìn)行說明
一、粉碎效果
選擇血竭(單味、樹脂藥材)和接骨七厘散(處方組成包括炙乳香、炙沒藥、當(dāng)歸、土鱉蟲、燙骨碎補(bǔ)、硼砂、血竭、煅自然銅及酒制大黃)為代表，分別進(jìn)行常規(guī)超微粉碎和加1倍量PEG-丙二醇(9∶1)超微粉碎，分別粉碎30分鐘，采用WJ9200激光粒度儀分別測(cè)定粒度，結(jié)果見表1。
由表1可看出，常規(guī)超微粉碎的血竭最大粒徑大于200μm(為復(fù)聚的碎片，約占6～8％，可過篩檢查)，中心粒徑在2)μm左右；加液體分散介質(zhì)后，最大粒徑小于20μm的粒子，中心粒徑在4μm左右；常規(guī)超微粉碎的接骨七厘最大粒徑約為200μm(為復(fù)聚的碎片，約占4～6％，可過篩檢查)，中心粒徑在24μm左右；加液體分散介質(zhì)后，最大粒徑在21μm左右，中心粒徑在4μm左右；因此，加分散介質(zhì)后，極大的提高了藥材的粒度，效果顯著。
二、制劑穩(wěn)定性
試驗(yàn)?zāi)康谋容^常規(guī)超微粉碎和加介質(zhì)超微粉碎所得半成品的穩(wěn)定性
試驗(yàn)藥物
①接骨七厘常規(guī)超微粉制備軟膠囊內(nèi)容物取凈接骨七厘藥材，預(yù)粉碎后，超微粉碎，所得微粉加1.5倍量PEG400-丙二醇(9∶1)作基質(zhì)，作軟膠囊內(nèi)容物，供穩(wěn)定性試驗(yàn)用；
②接骨七厘加分散介質(zhì)直接粉碎制備軟膠囊內(nèi)容物取凈接骨七厘藥材，預(yù)粉碎后，加1.5倍量PEG400-丙二醇(9∶1)作粉碎介質(zhì)，超微粉碎，所得混合物作軟膠囊內(nèi)容物，作穩(wěn)定性試驗(yàn)用。
試驗(yàn)方法
離心實(shí)驗(yàn)分別取5g樣品置離心管中，以3000rpm離心20min，觀察有無分層現(xiàn)象。
耐寒耐熱實(shí)驗(yàn)分別取適量樣品置低溫2-5℃，30d；及高溫50-53℃，24h，觀察樣品的色澤、稠度、均勻性有無變化。
室溫留樣觀察法分別取樣品適量，各裝三只具塞試管，采用室溫留樣觀察法測(cè)定樣品3個(gè)月后，外觀性狀是否穩(wěn)定。研究結(jié)果見表2。
由試驗(yàn)結(jié)果可知，以新思路超微粉碎所得混合物，穩(wěn)定性好，無分層現(xiàn)象，可初步確定以該方法解決留粉藥材制備軟膠囊易分層、沉淀等長(zhǎng)期困擾的難題。
三、藥理試驗(yàn)驗(yàn)證
為進(jìn)一步驗(yàn)證本發(fā)明在為了證明本發(fā)明藥物制劑在提高體外溶出度和生物利用度，節(jié)約藥材、提高藥效方面的貢獻(xiàn)，發(fā)明人根據(jù)其藥材性質(zhì)、單方、復(fù)方分類，選擇血竭(樹脂類藥材)、水蛭(動(dòng)物類藥材)、七厘散(復(fù)方，處方包含礦物、動(dòng)物、植物、樹脂類藥材)、西黃丸(麝香、牛黃、乳香、沒藥，動(dòng)物藥+樹脂類藥材)為代表，采用本發(fā)明的方法制備超微混合物，并依據(jù)其功能主治，進(jìn)行了動(dòng)物對(duì)比藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
(一)血竭超微粉碎前后藥理對(duì)照試驗(yàn)
一、基本資料
1、受試藥物血竭思藥牌，中國(guó)云南省思茅制藥廠；血竭普通粉思藥牌血竭粉碎收集80～100目粉末；血竭超微混合物選擇PEG400-丙二醇(9∶1)作基質(zhì)，經(jīng)超微粉碎混合得到，平均粒徑(3.96±0.22)μm，含藥量50％，超微粉組給藥相當(dāng)原生藥量的1/2進(jìn)行試驗(yàn)?？瞻讓?duì)照以生理鹽水作空白。
2、試驗(yàn)動(dòng)物NIH小鼠，20±2g，雌雄各半，由北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
二、試驗(yàn)內(nèi)容
1.小鼠血漿復(fù)鈣時(shí)間試驗(yàn)
NIH小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組12只，按表3所列藥品及劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)8天。于第8天給藥后1小時(shí)摘取眼球，取血1ml，放入加有檸檬酸鈉溶液的離心管內(nèi)，混勻后1000r/min離心10min。取上層血漿80μl于內(nèi)徑8mm的試管中，再加生理鹽水80μl，混勻，于37℃水浴中溫育2分鐘，再加入80μl氯化鈣溶液(0.25mol/l)，混勻，置于37℃水浴中，立即計(jì)時(shí)，記錄自加氯化鈣溶液至纖維蛋白凝固所經(jīng)歷的時(shí)間。結(jié)果見表3。
2.小鼠凝血時(shí)間試驗(yàn)
NIH小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，每組12只，按表4中所列的藥品及劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥6d。于第6天給藥后1h，用內(nèi)徑為0.1mm的毛細(xì)管在小鼠眼內(nèi)眥球后靜脈叢取血。從血液吸入毛細(xì)管的時(shí)刻開始計(jì)時(shí)，血液注滿后放在桌上，每30s小心折斷毛細(xì)管兩端約0.5mm，觀察到有血凝絲形成時(shí)停止計(jì)時(shí)。毛細(xì)管兩端時(shí)間讀數(shù)的平均值即為小鼠的凝血時(shí)間。結(jié)果見表4。
3.小鼠斷尾出血時(shí)間試驗(yàn)
NIH小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，每組12只，按表5中所列的藥品及劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥6d。于第6天給藥后1h，用利剪在距小鼠尾端8mm處斷尾，讓血液自然流出，每隔20s用濾紙輕觸斷尾處，至不再出血時(shí)為止，所歷時(shí)間為小鼠的斷尾出血時(shí)間。結(jié)果見表5。
試驗(yàn)結(jié)果表明，不同粒徑的血竭粉末和血竭超微粉均能顯著縮短出血時(shí)間、凝血時(shí)間、血漿復(fù)鈣時(shí)間，表明血竭有顯著的止血促凝的作用。
血竭超微粉組縮短小鼠血漿復(fù)鈣時(shí)間、縮短小鼠凝血時(shí)間和出血時(shí)間試驗(yàn)中與血竭普通粉比較有顯著性差異。表明通過減小血竭粒徑的方法增加血竭比表面積，能顯著增強(qiáng)血竭的止血促凝作用。
(二)水蛭超微粉碎前后藥理對(duì)照試驗(yàn)
一、基本資料
1、受試藥物水蛭購(gòu)自建聯(lián)藥店，經(jīng)鑒定合格；水蛭普通粉取干燥凈水蛭粉碎，收集100目粉末；水蛭超微混合物選擇PEG400-丙二醇(9∶1)作基質(zhì)，經(jīng)超微粉碎混合得到，平均粒徑(3.89±0.43)μm，含藥量50％，超微粉組給藥相當(dāng)原生藥量的1/2進(jìn)行試驗(yàn)?？瞻讓?duì)照以生理鹽水作空白。
2、試驗(yàn)動(dòng)物NIH小鼠，20±2g，雌雄各半，由北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
二、試驗(yàn)內(nèi)容
1.供試品對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響
NIH小鼠，隨機(jī)分為3組，每組12只。按表6中所列的藥品及劑量灌胃給藥，用生理鹽水作對(duì)照。每天3次，連續(xù)給藥3d，第4天給藥1h后，從小鼠眼內(nèi)毗球后靜脈叢取血，按毛細(xì)管法，測(cè)定各組小鼠的凝血時(shí)間，經(jīng)t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表6。
實(shí)驗(yàn)表明，水蛭普通粉與水蛭超微粉均有確切的抗凝活性，超微粉的抗凝活性明顯優(yōu)于普通散。
2.供試品對(duì)小鼠出血時(shí)間的影響
NIH小鼠，隨機(jī)分為3組，每組12只。按表7中所列的藥品及劑量灌胃給藥，用生理鹽水作對(duì)照。每天2次，連續(xù)灌胃3d，第4天給藥1h后，用剪尾法測(cè)定各組小鼠剪尾5mm的出血時(shí)間。結(jié)果見表7。
實(shí)驗(yàn)表明，水蛭普通粉與水蛭超微粉均有確切的抗凝活性，超微粉的抗凝活性明顯優(yōu)于普通散。
3供試品對(duì)小鼠體內(nèi)抗栓作用的影響
因小鼠尾出血時(shí)間，與鼠頸動(dòng)脈旁路血栓形成法具有很好的平行性，故可作為一種簡(jiǎn)便易行的抗血栓形成藥物的體內(nèi)初篩法用于實(shí)驗(yàn)。NIH小鼠，隨機(jī)分為3組，每組12只。以給定劑量灌胃3d，第4天給藥1h后，將小鼠固定，距尾尖3mm處剪斷，垂直放入(37±1)℃生理鹽水中，使尾端在液面下3cm，記錄出血時(shí)間，結(jié)果見表8。
實(shí)驗(yàn)表明，體內(nèi)抗栓作用，也以超微散為優(yōu)。
(三)七厘散超微粉碎前后藥理對(duì)照試驗(yàn)
一、基本資料
1、受試藥物七厘散普通粉，取干燥凈藥材，按照原標(biāo)準(zhǔn)工藝粉碎，收集100目粉末；七厘散超微混合物，選擇PEG400-丙二醇-甘油(6∶3∶1)作基質(zhì)，經(jīng)超微粉碎混合得到，平均粒徑(4.92±0.61)μm，含藥量50％，超微粉組給藥相當(dāng)原生藥量的1/2進(jìn)行試驗(yàn)；以NS作空白。
2、試驗(yàn)動(dòng)物NIH小鼠18～22g，雌雄兼用，Wistar大鼠，雌雄兼用，200～250g；均由北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
3、試驗(yàn)儀器電子天平，北京賽多利斯儀器有限公司；熱板儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)儀器研究所。
二、試驗(yàn)內(nèi)容
試驗(yàn)1小鼠的熱板法試驗(yàn)
調(diào)節(jié)恒溫水浴熱板溫度為55±0.5℃，預(yù)熱10min。取經(jīng)篩選合格的小鼠隨機(jī)分為3組，每組12只。分別為七厘散普通粉組、超微粉組和空白對(duì)照組，灌胃給藥。將上述小鼠放入熱板儀，測(cè)定不同時(shí)間段(30min、60min、90min、120min)的痛閾值。結(jié)果見表9。
試驗(yàn)結(jié)果表明，與空白對(duì)照組相比，七厘散組與超微粉制劑組均能顯著提高小鼠的痛閾值，超微粉碎組與七厘散普通粉組作用效果相當(dāng)，即本品超微粉相當(dāng)原處方1/2倍量與七厘散組效果相當(dāng)，起到減量應(yīng)用的功效。
試驗(yàn)2止血試驗(yàn)
取試驗(yàn)小鼠，隨機(jī)分組，分別為七厘散組、超微粉組和空白對(duì)照組，每組12只。灌胃給藥，連續(xù)給藥3d。末次用藥后2小時(shí)，距離尾尖2mm處斷尾，觀察出血時(shí)間。結(jié)果見表10。
試驗(yàn)結(jié)果表明，超微粉組在相當(dāng)于七厘散1/4劑量時(shí)即已顯效，在相當(dāng)于七厘散1/2劑量時(shí)，已有明顯的止血效果。
試驗(yàn)3活血化瘀試驗(yàn)
取試驗(yàn)小鼠，隨機(jī)分組，用0.2％戊巴比妥鈉ip30mg/kg麻醉，保持試驗(yàn)環(huán)境及所給藥物恒溫(30±0.5℃)，將麻醉小鼠放于觀察臺(tái)上，耳廓去毛，并墊耳托，使其平展以便于觀察，在耳廓與耳托間滴加液體石蠟，將觀察板置于多部位微循環(huán)觀察系統(tǒng)顯微鏡下進(jìn)行觀察，并用計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和顯示，記錄給藥前小鼠耳中動(dòng)脈第三分支微動(dòng)脈、微靜脈的血管直徑及血流速度，作為正常指標(biāo)，分別在耳廓涂以不同藥物；10min后用棉試子輕擦去所涂藥物，觀察上述各項(xiàng)指標(biāo)的變化情況。用藥后血管直徑及血液流速增加百分率計(jì)算公式為血管直徑增加％＝(用藥后血管直徑-用藥前血管直徑)/用藥前血液直徑×100％；血管流速增加％＝(用藥后血管流速-用藥前血管流速)/用藥前血液流速×100％。結(jié)果見表11。
試驗(yàn)結(jié)果表明，超微粉組與七厘散組對(duì)小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈均有明顯的擴(kuò)張作用，并使血管內(nèi)血流速度明顯增加，尤其以動(dòng)脈擴(kuò)張、動(dòng)脈血流速增加顯著，提示本品有較好的改善微循環(huán)的作用。即提示可以改善股骨頭壞死區(qū)域的血循環(huán)，從而起到治療的作用。試驗(yàn)中，超微粉1/2劑量組與七厘散組效果相當(dāng)，證明了超微粉的明顯的藥理效果。
試驗(yàn)4小鼠急性毒性試驗(yàn)
一日內(nèi)給小鼠灌胃普通粉、超微粉各85g/kg，相當(dāng)于臨床70kg人每公斤體重日用量的145倍以上，連續(xù)觀察七天，小鼠一般狀況良好，無一死亡，說明本品低毒、安全。
試驗(yàn)5大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)
取Wistar大鼠，連續(xù)給藥30天，對(duì)大鼠的活動(dòng)、行為、進(jìn)食、飲水、毛色、糞尿等一般狀況未見顯著影響，且無一死亡，大鼠的血液學(xué)、血液生化學(xué)和重要臟器病理組織指指標(biāo)均無顯著改變，給藥結(jié)束后經(jīng)過10天恢復(fù)觀察，未觀察到其它的后遺和繼發(fā)的毒性作用。提示超微制劑臨床應(yīng)用安全、低毒。
(四)西黃丸超微粉碎前后藥理對(duì)照試驗(yàn)
本發(fā)明藥物制劑具有清熱解毒，和營(yíng)消腫的功能，用于癰疽疔毒，瘰疬，流注，癌腫等疾病的治療。發(fā)明人還根據(jù)其功能主治，從食道癌、肝癌、胃癌三大腫瘤及相關(guān)藥效學(xué)著手對(duì)本品藥效學(xué)進(jìn)行了研究。
一、基本資料
受試藥物超微西黃制劑，給藥劑量按相當(dāng)生藥量折算，設(shè)計(jì)給藥劑量相當(dāng)普通西黃丸劑量的1/3(超微粉組1)、1/2(超微粉組2)、2/3(超微粉組3)。
西黃丸九寨溝天然藥業(yè)有限公司，批號(hào)030305。
受試動(dòng)物Wistar大鼠，雌雄兼用，150～210g；昆明種小鼠，雌雄各半，18～22g；均由山東醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
主要儀器3F-3型高速微量離心機(jī)，華興機(jī)輪公司生產(chǎn)；雙目倒置讀數(shù)顯微鏡，長(zhǎng)春第一光學(xué)儀器廠生產(chǎn)；TF光熱測(cè)痛儀，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所生產(chǎn)；電子天平，AEL-200型，日本SHIMADZU公司產(chǎn)品。
試驗(yàn)1抗腫瘤作用試驗(yàn)研究
試驗(yàn)方法取接種7d的肝癌(HepA)小鼠腹水，用滅菌生理鹽水按1∶4稀釋，每只鼠腹腔接種0.2ml(約25×106個(gè)細(xì)胞/ml)，接種后第2天隨機(jī)分組，每天灌胃給藥一次，共計(jì)9d。然后記錄各組小鼠存活時(shí)間，并計(jì)算生命延長(zhǎng)率。
生命延長(zhǎng)率(％)＝給藥組平均存活天數(shù)/對(duì)照組平均存活天數(shù)×100％。
取接種7-10d的小鼠肉瘤(S180)瘤塊，按1∶4加入滅菌生理鹽水勻漿成細(xì)胞懸液，分別于每只鼠右腋下接種0.2ml(約25～28×106癌細(xì)胞/ml)。接種后第2天隨機(jī)分組，每天給藥，共計(jì)9d，第10d處死小鼠、剝離瘤塊稱重，并計(jì)算瘤重抑制率。
抑瘤率＝1-給藥組平均瘤重/對(duì)照組平均瘤重×100％。
結(jié)果見表12。
表12結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3均能不同程度延長(zhǎng)腹水型肝癌小鼠的生存期，可抑制小鼠S180實(shí)體瘤的生長(zhǎng)，與對(duì)照組相比有顯著性差別。其抗腫瘤作用本品制劑2與西黃丸相當(dāng)。
綜上所述，本品制劑能抑制小鼠肉瘤(S180)和肝癌(HepA)的生長(zhǎng)。荷瘤小鼠灌胃給藥，抑瘤率均大于30％，生命延長(zhǎng)率均大于130％，療效較好。
試驗(yàn)2改善微循環(huán)試驗(yàn)研究
1.對(duì)大鼠血液流變性的作用
取Wistar大鼠，造模，對(duì)急性血瘀模型大鼠的治療作用結(jié)果見表13。
表13結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3能顯著降低模型大鼠的纖維蛋白原含量、血沉和血小板黏附率。給藥前后血液相對(duì)黏度的改變表明其主要通過降低血漿粘度來降低全血粘度，從而顯著改善大鼠血液循環(huán)。本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
2.對(duì)大鼠腸細(xì)膜微循環(huán)的作用
取健康大鼠60只，禁食不禁水12h后，用20％烏拉坦(0.4ml/100g)腹腔注射麻醉，背位固定，于一側(cè)壁切開長(zhǎng)約3～4cm的切口，拉出十二指腸插管結(jié)扎后復(fù)位準(zhǔn)備給藥，再拉出一段空腸袢，平鋪于特制的有機(jī)玻璃灌流水池內(nèi)，用大頭針將腸管固定，腸系膜平鋪于充以30℃的15ml洛氏營(yíng)養(yǎng)液灌流池，用雙目倒置顯微鏡放大80倍進(jìn)行觀察測(cè)量(顯微鏡頭內(nèi)裝有測(cè)微尺)。試驗(yàn)分為6組，每組10只。試驗(yàn)結(jié)果見表14。
表14結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3組均可顯著增加大鼠腸細(xì)膜毛細(xì)血管管徑和毛細(xì)血管流速，本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
綜上所述，本品制劑可降低高粘高凝大鼠血液粘度，減少血小板的數(shù)量，也可能降低其粘附率，通過此作用可達(dá)到活血化瘀的目的。另本品制劑還可使腸系膜血管擴(kuò)張，血細(xì)胞流速加快，毛細(xì)血管開放數(shù)增加，說明可改善腸系膜微循環(huán)。
試驗(yàn)3增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)研究
1.對(duì)S37肉瘤小鼠免疫器官重量的影響
取小鼠50只，每組10只，于接種S37瘤株后次日開始給藥，每日1次，連續(xù)給藥10天，并于停藥后次日將小鼠脫頸致死，取出脾臟、胸腺，用濾紙吸干水分，扭力天平稱重，并計(jì)算脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。結(jié)果見表15。
表15結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3組均可顯著提高S37肉瘤小鼠的脾指數(shù)和胸腺指數(shù)，促進(jìn)其免疫功能。本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
2.對(duì)荷S37肉瘤小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
取接種S37肉瘤后50只小鼠，隨機(jī)分為五組，給藥方法同上，連續(xù)給藥10天，于第10天早給藥后，每鼠腹腔注射5％雞紅細(xì)胞混懸液0.4ml，10小時(shí)后脫頸處死，稱重，消毒后腹腔注射2.5mlHank’s液(pH7.0～7.2)，輕揉腹部，在腹腔壁上剪一小口，吸取腹腔液2ml置于試管中，混勻后，吸少許滴于載玻片上，將玻片放在鋪有濕紗布的搪瓷盤中，放入培養(yǎng)箱37℃孵育30分鐘，用生理鹽水沖洗去附在玻片表面的細(xì)胞，吸干，甲醇固定5分鐘，用瑞氏染液染色10分鐘，然后用水沖洗去浮色，晾干，顯微鏡下觀察，計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)，結(jié)果見表16。
表16結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3組均可顯著地提高吞噬百分率和吞噬指數(shù)。本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
綜上所述，本品制劑可增強(qiáng)小鼠特異和非特異性的細(xì)胞及體液免疫功能。
試驗(yàn)4鎮(zhèn)痛、消炎等試驗(yàn)的研究
對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響試驗(yàn)研究小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只；每日給藥1次，連續(xù)3天；末次給藥后30min，小鼠左耳涂以二甲苯0.05ml/只致炎，右耳作對(duì)照；15min后脫頸臼處死，沿耳廓基線剪下雙耳，用6mm角膜環(huán)鉆在左右耳相同位置沖下耳片，在電子分析天平上稱重(精確到0.1mg)，左耳重量減去右耳重量之差值(單位mg)即為腫脹度，計(jì)算各組平均腫脹度并求出腫脹抑制率(％)，結(jié)果見表17。
表17結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3均能降低二甲苯致炎小鼠耳廓腫脹率，說明其具有一定的抗炎作用。本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
2.對(duì)光熱致痛法所致小鼠痛閾值的影響
選用在TF光熱測(cè)痛儀上預(yù)測(cè)痛閾值在3～10s范圍的雌性小鼠52只，體重22～26g，隨機(jī)分為5組，每組10～11只，在TF光熱測(cè)痛儀上測(cè)定給藥后30、60、120min各組小鼠的痛閾值，結(jié)果見表18。
表18結(jié)果表明，西黃丸與本品制劑1、2、3組小鼠給藥后不同時(shí)間測(cè)定的痛閾值均較給藥前或?qū)φ战M有一定的延長(zhǎng)趨勢(shì)，藥后痛閾值與對(duì)照組相比有顯著性差異。本品制劑2與西黃丸作用相當(dāng)。
試驗(yàn)5小鼠急性毒性試驗(yàn)
一日內(nèi)給小鼠灌胃本品制劑85g/kg，相當(dāng)于臨床70kg人每公斤體重日用量的145倍以上，連續(xù)觀察七天，小鼠一般狀況良好，無一死亡，說明本品低毒、安全。
試驗(yàn)6大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)
取Wistar大鼠，試驗(yàn)前穩(wěn)定7天，觀察一般狀況體重、進(jìn)食、糞便、活動(dòng)等情況均無異常，按體重隨機(jī)分為四組，空白組與超微粉高劑量組、中劑量組、低劑量組，每組30只，每籠5只，然后開始給藥，按1ml/100g鼠重每天定時(shí)灌胃給藥。每7天測(cè)一次體重并按體重變化調(diào)整給藥量，連續(xù)給藥45天，給藥期間注意觀察動(dòng)物活動(dòng)、毛色糞便、進(jìn)食、體重變化等情況。每周稱量一次體重，每周定食、定水，24小時(shí)后稱剩余量，加入量與剩余量之差即為日食量、日飲水量。給藥21天后，禁食不禁水12h，進(jìn)行血液學(xué)、血生化學(xué)檢驗(yàn)，每組各取20只動(dòng)物處死進(jìn)行病理解剖及病理組織學(xué)檢查。其余大鼠做10天恢復(fù)期觀察，復(fù)測(cè)上述指標(biāo)。
連續(xù)給藥21天，對(duì)大鼠的活動(dòng)、行為、進(jìn)食、飲水、毛色、糞尿等一般狀況未見顯著影響，且無一死亡，大鼠的血液學(xué)、血液生化學(xué)和重要臟器病理組織指指標(biāo)均無顯著改變，給藥結(jié)束后經(jīng)過10天恢復(fù)觀察，未觀察到其它的后遺和繼發(fā)的毒性作用。提示超微粉制劑的安全、低毒。
通過對(duì)以上血竭、水蛭及傳統(tǒng)中藥復(fù)方七厘散、西黃丸超微前后藥效學(xué)試驗(yàn)研究，由試驗(yàn)結(jié)果可以看出，除證明其治療作用外，還進(jìn)一步說明其只需1/2處方量，即可達(dá)到甚至超過原處方的效果，說明該藥用物質(zhì)已發(fā)生了質(zhì)的變化，是一種新的藥用物質(zhì)。

具體實(shí)施方式 下面列舉實(shí)施例，進(jìn)一步說明本發(fā)明，各實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，并不限制本發(fā)明。
實(shí)施例1超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過20目篩，加1.5倍量PEG400-丙二醇(9∶1)混合物作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例2超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過40目篩，加0.6倍量辛癸酸甘油酯作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例3超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過60目篩，加3倍量吐溫80-油酸乙酯-丙二醇(60∶20∶20)作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例4超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過80目篩，加2倍量大豆油-司盤80-蜂蠟(9∶0.7∶0.3)作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例5超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過100目篩，加0.1倍量微粉硅膠作分散劑，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎45分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例6超微粉碎制備龍血竭超微混合物
取干燥凈龍血竭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過40目篩，加1倍量微粉硅膠-聚乙二醇4000(4∶1)作分散劑，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例7超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過20目篩，加1.5倍量PEG400-丙二醇(9∶1)混合物作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例8超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過40目篩，加0.5倍量辛癸酸甘油酯作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例9超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過60目篩，加3倍量吐溫80-油酸乙酯-丙二醇(60∶20∶20)作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例10超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，用普通粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎后過80目篩，加2倍量大豆油-司盤80-蜂蠟(9∶0.7∶0.3)作基質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例11超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，加0.2倍量微粉硅膠作分散劑，用振動(dòng)磨機(jī)超微粉碎45分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例12超微粉碎制備水蛭超微混合物
取干燥凈水蛭，加1倍量聚乙二醇4000-微晶纖維素-羧甲淀粉鈉(8∶1.5∶0.5)作分散介質(zhì)，用振動(dòng)磨機(jī)低溫超微粉碎50分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，即得。
實(shí)施例13超微粉碎制備西黃超微粉丸劑
處方牛黃 15g 麝香 15g
制乳香 550g 制沒藥 550g
制法取上述藥材，干燥、潔凈，混合，常規(guī)粉碎過40目篩，加0.2倍量微粉硅膠作分散劑用振動(dòng)磨低溫下超微粉碎45分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，用水泛丸，置通風(fēng)干燥處陰干，即得超微丸劑。
實(shí)施例14超微粉碎制備西黃超微粉膠囊
處方牛黃 15g 麝香 15g
制乳香 550g 制沒藥 550g
制法取上述藥材，干燥、潔凈，混合，常規(guī)粉碎過80目篩，加0.2倍量微粉硅膠作分散劑用振動(dòng)磨低溫下超微粉碎20分鐘，制得中心粒徑小于20μm的超微混合物，裝膠囊，即得超微膠囊劑。
實(shí)施例15超微粉碎制備西黃超微粉軟膠囊
處方牛黃 15g 麝香 75g
制乳香 500g 制沒藥 500g
制法取上述藥材，干燥、潔凈，混合，常規(guī)粉碎過20目篩，加0.5倍量辛癸酸甘油酯作基質(zhì)，用振動(dòng)磨低溫下超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，裝軟膠囊，即得超微軟膠囊劑。
實(shí)施例16超微粉碎制備西黃超微粉軟膠囊
處方牛黃 15g 麝香 75g
制乳香 500g 制沒藥 500g
制法取上述藥材，干燥、潔凈，混合，常規(guī)粉碎過20目篩，加1.5倍量PEG400-丙二醇(9∶1)混合物作基質(zhì)，用振動(dòng)磨常溫下超微粉碎30分鐘，制得中心粒徑小于10μm的超微混合物，裝軟膠囊，即得超微軟膠囊劑。
附表
表1不同超微粉碎方法粉碎粒度檢查表
表2穩(wěn)定性研究結(jié)果表
表3血漿復(fù)鈣時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果(
n＝12)
表4凝血時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果(
n＝12)
表5出血時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果(
n＝12)
表6供試品對(duì)小鼠凝血時(shí)間的影響(
n＝12)
表7供試品對(duì)小鼠出血時(shí)間的影響(
n＝12)
表8供試品對(duì)小鼠體內(nèi)抗栓作用比較(
n＝12)
表9對(duì)小鼠痛閾值的影響

與空白對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.0，***P＜0.001；與七厘散組比較，#P＜0.05。
表10止血試驗(yàn)

與空白對(duì)照組比較*P＜0.05；與七厘散組比較，#P＜0.05。
表11對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)的影響

與空白對(duì)照組比較**P＜0.01，***P＜0.001。
表12對(duì)移植性小鼠腫瘤S180和HepA的抑制作用(x±s，n＝10)
注與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01
表13對(duì)急性血瘀模型大鼠血液黏度影響的研究(x±s)
注與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
表14對(duì)大鼠腸細(xì)膜微循環(huán)的作用(x±S，n＝10)
注各組給藥前后自身比較*P＜0.05，**P＜0.01。
表15對(duì)S37肉瘤小鼠免疫器官重量的影響(x±S，n＝10)
注*P＜0.05，**P＜0.01與NS比較
表16對(duì)荷S37肉瘤小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(x±S，n＝10)
注*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001與NS比較
表17對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(X±s)
注與對(duì)照組比較*P＜0.05
表18對(duì)光熱致痛法所致小鼠痛閾值的影響(X±s)
注與對(duì)照組比較*P＜0.05
權(quán)利要求
1.一種加分散介質(zhì)制備中藥超微粉的方法，其特征在于將待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加適宜分散介質(zhì)一并置于超微粉碎設(shè)備中，進(jìn)行超微粉碎，即得。
2.如權(quán)利要求
1所述的制備方法，其特征在于可以是以下方法中的任意一種
a.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.01～5倍量適宜的固體分散介質(zhì)，用振動(dòng)磨超微粉碎10～60分鐘，即得。
b.取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.2～5倍量適宜的液體分散介質(zhì)，用振動(dòng)磨超微粉碎10～60分鐘，即得。
3.如權(quán)利要求
2所述的制備方法，其特征在于方法a.中所用固體分散介質(zhì)可以選自但不限于如下的一種或幾種的組合固體聚乙二醇、微粉硅膠、微晶纖維素、環(huán)糊精、硬脂酸鎂、滑石粉、淀粉、羧甲淀粉鈉、丙烯酸樹脂、羥丙甲、卡泊姆。
4.如權(quán)利要求
3所述的制備方法，其特征在于該方法的步驟為取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.02～2倍量的微粉硅膠、固體聚乙二醇、環(huán)糊精中一種或幾種的組合物，用振動(dòng)磨超微粉碎20～60分鐘，即得。
5.如權(quán)利要求
2所述的制備方法，其特征在于方法b.中所用液體分散介質(zhì)可以選自但不限于如下的一種或幾種的組合大豆油、花生油、菜子油、玉米油、芝麻油、紅花油、油酸乙酯、椰子油酯類、向日葵油單甘油酯、蜂蠟、液體聚乙二醇、甘油、丙二醇、山梨醇、磷脂、膽固醇、吐溫、司盤、帕洛沙姆。
6.如權(quán)利要求
5所述的制備方法，其特征在于該方法的步驟為取待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加0.2～2倍量的聚乙二醇、丙二醇、甘油、吐溫中任意一種或幾種的組合物，用振動(dòng)磨超微粉碎20～60分鐘，即得。
7.如權(quán)利要求
6所述的制備方法，其特征在于聚乙二醇-丙二醇-甘油-吐溫的比例為6～9∶1～3∶0～3∶0～3。
8.如權(quán)利要求
2、3或4所述的制備方法在制備丸劑、散劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑等固體制劑中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求
2、5、6或7所述的制備方法在制備軟膠囊劑、硬膠囊劑、口服凝膠劑、固體/半固體的透皮制劑和口服乳劑等制劑中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求
2、5、6或7所述的制備方法在制備中藥軟膠囊、硬膠囊囊液中的應(yīng)用。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種新的中藥材粉碎方法，屬中藥領(lǐng)域。該方法是將待粉碎中藥材，常規(guī)粉碎過20～100目篩，加適宜分散介質(zhì)一并置于超微粉碎設(shè)備中，進(jìn)行超微粉碎，即可得到均勻分散的中藥超微粉。該方法解決了中藥超微粉存在的制劑困難，可使中藥超微粉直接用于制劑。
文檔編號(hào)A61K9/48GK1994332SQ200610200007
公開日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2006年1月5日
發(fā)明者高淑英 申請(qǐng)人:北京凱瑞創(chuàng)新醫(yī)藥科技有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan