本技術(shù)案主張2017年5月15日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/506,561號(hào)、2017年5月15日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/506,569號(hào)、2017年5月15日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/506,574號(hào)、2017年9月27日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/564,083號(hào)、2017年10月3日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/567,334號(hào)、2018年1月16日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/618,021號(hào)、2018年1月31日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/624,638號(hào)、及2018年4月20日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案序列號(hào)第62/660,758號(hào)的權(quán)益，主張這些申請(qǐng)案中每一者的優(yōu)先權(quán)且其中每一者以全文引用方式并入本文。本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)及重組醣蛋白生物化學(xué)領(lǐng)域，且具體來(lái)說(shuō)，是關(guān)于重組人類α-葡萄醣苷酶(recombinant?humanα-glucosidase；rhgaa)組合物，其具有較高總含量的帶甘露糖-6-磷酸酯的n-聚醣，從而有效地靶向細(xì)胞上的cimpr且隨后將rhgaa遞送至溶酶體，在溶酶體中，所述rhgaa可分解異常高水平的所累積肝醣。本發(fā)明的rhgaa相較于傳統(tǒng)rhgaa產(chǎn)品展現(xiàn)優(yōu)異的對(duì)肌細(xì)胞的靶向及向溶酶體之后續(xù)遞送且展現(xiàn)其他藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，使得其尤其有效地用于患有龐貝病的受試者的酶替代療法。本發(fā)明也提供用于治療龐貝病的方法，其包含向個(gè)體施用rhgaa及藥理學(xué)伴護(hù)蛋白的組合。例如，在一些實(shí)施例中，本發(fā)明提供用于治療龐貝病的方法，其包含向個(gè)體施用rhgaa及美格魯特(miglustat)的組合。本發(fā)明的rhgaa在治療及逆轉(zhuǎn)罹患龐貝病的受試者中的疾病進(jìn)程方面展現(xiàn)令人驚訝的功效。

背景技術(shù)：

1、龐貝病為一種由缺乏酸性α-葡萄醣苷酶(gaa)活性而產(chǎn)生的遺傳性溶酶體貯積癥?；加旋嬝惒〉娜巳鄙偎嵝驭?葡萄醣苷酶(gaa)或具有降低水平的酸性α-葡萄醣苷酶，所述酶將肝醣分解成作為肌肉的主要能量來(lái)源的葡萄糖。這種酶缺乏引起溶酶體中過(guò)量的肝醣累積，這些溶酶體為含有一般地分解肝醣及其他細(xì)胞碎屑或廢產(chǎn)物的酶的細(xì)胞內(nèi)胞器。在患有龐貝病的受試者的某些組織、尤其上肌肉中的肝醣累積削弱細(xì)胞正常起作用的能力。在龐貝病中，肝醣并未適當(dāng)?shù)卮x且逐漸地累積在溶酶體中，尤其在骨骼肌細(xì)胞及在疾病的嬰兒型發(fā)病形式中是累積在心肌細(xì)胞中。肝醣的累積破壞肌肉及神經(jīng)細(xì)胞以及其他受影響組織中的那些細(xì)胞。

2、傳統(tǒng)上，取決于發(fā)病的年齡，龐貝病在臨床上被視為早期嬰兒型形式或晚發(fā)型形式。發(fā)病的年齡趨向于與引起龐貝病的遺傳突變的嚴(yán)重性平行。最嚴(yán)重的遺傳突變引起gaa活性的完全損失且在嬰兒期期間表現(xiàn)為早期發(fā)病疾病。減少gaa活性但并未完全消除的遺傳突變與患有延遲型發(fā)病及進(jìn)程的龐貝病形式相關(guān)聯(lián)。嬰兒型發(fā)病龐貝病在出生后不就表現(xiàn)且特征在于肌肉虛弱、呼吸功能不全及心力衰竭。未治療時(shí)，通常在兩年內(nèi)是致命的。青少年及成年發(fā)病的龐貝病在生命稍后期表現(xiàn)且通常比嬰兒型發(fā)病的疾病更緩慢地進(jìn)程。雖然這形式的疾病通常不影響心臟，但其也可造成死亡，這是因?yàn)楣趋兰〖吧婕昂粑募∪獾娜趸?/p>

3、龐貝病的當(dāng)前非舒減治療涉及使用重組人類gaa(recombinant?human?gaa；rhgaa)的酶替代療法(enzyme?replacement?therapy；ert)，所述重組人類gaa是已知為或阿葡糖苷酶α。這種傳統(tǒng)酶替代療法設(shè)法通過(guò)施用rhgaa替換溶酶體中遺漏的gaa因此恢復(fù)細(xì)胞分解溶酶體肝醣的能力來(lái)治療龐貝病。及是通過(guò)genzyme作為生物學(xué)劑生產(chǎn)或出售且通過(guò)美國(guó)食品及藥物管理局批準(zhǔn)的傳統(tǒng)形式的rhgaa，且參考physician's?desk?reference(2014)(其據(jù)這以引用方式并入)來(lái)描述。阿葡糖苷酶α是鑒定為化學(xué)名稱[199-精胺酸,223-組胺酸]前驅(qū)升-α-葡萄醣苷酶(人類)；分子式為c4758h7262n1274o1369s35；cas編號(hào)420794-05-0。這些產(chǎn)品是施用至患有龐貝病的受試者，所述龐貝病也稱為ii型肝醣儲(chǔ)積病(glycogen?storage?disease?typeii；gsd-ii)或酸性麥芽糖酶缺乏病。

4、rhgaa分子的細(xì)胞吸收是通過(guò)特殊碳水化合物甘露糖-6-磷酸酯(m6p)促進(jìn)，所述碳水化合物結(jié)合至存在于諸如肌細(xì)胞的靶細(xì)胞上的陽(yáng)離子獨(dú)立性甘露糖-6-磷酸酯受體(cation-independent?mannose-6-phosphate?receptor；cimpr)。在結(jié)合之后，rhgaa分子通過(guò)靶細(xì)胞吸收且隨后轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)的溶酶體中。然而，大多數(shù)傳統(tǒng)rhgaa產(chǎn)品缺少高總含量的帶單m6p及雙m6p的n-聚醣(也就是說(shuō)，分別是帶有一個(gè)m6p殘基的n-聚醣或帶有兩個(gè)m6p殘基的n-聚醣)，從而限制其通過(guò)cimpr的細(xì)胞吸收及溶酶體遞送，因此使得傳統(tǒng)酶替代療法低效。例如，雖然20mg/kg或更高劑量的傳統(tǒng)rhgaa產(chǎn)品確實(shí)改善龐貝病的一些方面，但其尤其不能充分地(i)治療隱伏的細(xì)胞功能障礙，(ii)恢復(fù)肌肉結(jié)構(gòu)，或(iii)減少在諸如骨骼肌的許多靶組織中的累積肝醣以逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)程。另外，較高劑量可對(duì)受試者以及治療受試者的醫(yī)學(xué)專業(yè)人士施加另外的負(fù)擔(dān)，諸如使靜脈內(nèi)施用rhgaa所需的輸注時(shí)間加長(zhǎng)。仍然存在對(duì)進(jìn)一步改善用于治療龐貝病的酶替代療法的需要，諸如具有改善組織吸收、改善酶活性、改善穩(wěn)定性、或減少免疫原性的rhgaa。

5、gaa或rhgaa的醣基化可通過(guò)磷酸轉(zhuǎn)移酶及canfield等人的美國(guó)專利第6,534,300號(hào)所描述的揭露酶來(lái)活體外(in?vitro)酶促修飾以產(chǎn)生m6p基團(tuán)。酶促醣基化不能充分受控且產(chǎn)生具有不合需要的免疫學(xué)及藥理學(xué)性質(zhì)的rhgaa。經(jīng)酶促修飾的rhgaa可僅含有高甘露糖n-聚醣，其全部可潛在地經(jīng)磷酸轉(zhuǎn)移酶/揭露酶活體外酶促磷酸化且可含有每gaa平均5-6個(gè)m6p基團(tuán)。通過(guò)gaa的活體外酶促治療產(chǎn)生的醣基化型式是有問(wèn)題的，因?yàn)榱硗獾哪┒烁事短菤埢?、尤其非磷酸化末端甘露糖殘基?fù)面地影響修飾后rhgaa的藥物動(dòng)力學(xué)。當(dāng)這種經(jīng)酶促修飾產(chǎn)品活體內(nèi)施用時(shí)，這些甘露糖基團(tuán)增加gaa的非大量清除，增加經(jīng)酶促修飾gaa通過(guò)免疫細(xì)胞的吸收，且因?yàn)檫_(dá)到靶組織的gaa較少而減少rhgaa治療功效，這些靶組織諸如心臟或骨骼肌肌細(xì)胞。例如，末端非磷酸化甘露糖殘基為肝及脾中的甘露糖受體的已知配位體，其導(dǎo)致經(jīng)酶促修飾rhgaa的快速清除及rhgaa對(duì)靶組織的減少靶向。此外，具有帶末端非磷酸化甘露糖殘基的高甘露糖n-聚醣的經(jīng)酶促修飾gaa的醣基化型式類似于在酵母及霉菌中產(chǎn)生的醣蛋白上的醣基化型式，且增加觸發(fā)對(duì)經(jīng)酶促修飾rhgaa的免疫或過(guò)敏性反應(yīng)、諸如危急生命的嚴(yán)重過(guò)敏(過(guò)敏性)或高敏性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。

6、鑒于傳統(tǒng)rhgaa產(chǎn)品及磷酸化rhgaa的活體外方法的這些缺陷，發(fā)明人致力于尋找一種經(jīng)確認(rèn)方式來(lái)產(chǎn)生具有優(yōu)化n-聚醣分布的rhgaa以增強(qiáng)生物分布及溶酶體吸收且進(jìn)而最小化rhgaa在一旦被施用時(shí)的非大量清除。本發(fā)明為穩(wěn)定或衰退的龐貝癥患者提供一種有效療法，其在細(xì)胞水平逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)程。發(fā)明人也報(bào)告：本發(fā)明的rhgaa逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)程—包括比當(dāng)前照護(hù)標(biāo)準(zhǔn)更有效地清除溶酶體肝醣—且經(jīng)本發(fā)明的rhgaa治療的患者展現(xiàn)令人驚訝及顯著的健康改善，包括肌肉強(qiáng)度、運(yùn)動(dòng)功能、及/或肺功能的改善，及/或包括疾病進(jìn)程的逆轉(zhuǎn)，以上在來(lái)自臨床研究的各種功效結(jié)果(例如，實(shí)例10及11)中證明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明是涉及治療受試者的諸如龐貝病的疾病或病癥的方法，其包含施用重組人類酸性α-葡萄醣苷酶(rhgaa)分子的群體。

2、本文描述的rhgaa分子可在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(chinese?hamster?ovary；cho)細(xì)胞中表現(xiàn)且包含七個(gè)潛在的n-醣基化位點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(lc-ms/ms)測(cè)定本文所述的rhgaa分子群體的n-糖基化分布。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子平均包含3-4個(gè)甘露糖-6-磷酸酯(m6p)殘基。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子平均在第一潛在n-醣基化位點(diǎn)處包含每摩爾rhgaa約0.5摩爾雙磷酸化n-聚醣基團(tuán)(雙m6p)。在一些實(shí)施例中，rhgaa包含與seq?id?no:1或seq?id?no:5至少95％一致的胺基酸序列。在一些實(shí)施例中，rhgaa包含與seq?id?no:1或seq?id?no:5一致的胺基酸序列。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的至少30％的分子包含帶有一個(gè)或兩個(gè)m6p殘基的一或多個(gè)n-聚醣單元。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子包含每摩爾rhgaa平均約0.5摩爾至約7.0摩爾的帶有一個(gè)或兩個(gè)m6p殘基的n-聚醣單元。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子包含每摩爾rhgaa平均至少2.5摩爾的m6p殘基及每摩爾rhgaa至少4摩爾唾液酸殘基。在一些實(shí)施例中，在第一潛在n-醣基化位點(diǎn)處包含每分子平均3-4個(gè)m6p殘基及每摩爾rhgaa平均約0.5摩爾雙m6p的rhgaa分子進(jìn)一步包含在第二潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa平均約0.4至約0.6摩爾的單磷酸化n-聚醣(單m6p)、在第四潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa約0.4至約0.6摩爾的雙m6p、及在第四潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa約0.3至約0.4摩爾的單m6p。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子進(jìn)一步包含每摩爾rhgaa平均約4摩爾至約5.4摩爾的唾液酸殘基，包括在第三潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa約0.9至約1.2摩爾唾液酸、在第五潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa約0.8至約0.9摩爾唾液酸、及在第六潛在n-醣基化位點(diǎn)處每摩爾rhgaa約1.5至約4.2摩爾唾液酸。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以醫(yī)藥組合物調(diào)配。在一些實(shí)施例中，包含rhgaa分子的群體的醫(yī)藥組合物進(jìn)一步包含選自由檸檬酸鹽、磷酸鹽、及前述的組合組成的群的至少一種緩沖液，及選自由甘露醇、聚山梨醇酯80、及前述的組合組成的群的至少一種賦形劑。在一些實(shí)施例中，醫(yī)藥組合物的ph為約5.0至約7.0、約5.0至約6.0、或約6.0。在一些實(shí)施例中，醫(yī)藥組合物進(jìn)一步包含水、酸化劑、堿化劑、或前述的組合。在一些實(shí)施例中，醫(yī)藥組合物具有6.0的ph且包含約5-50mg/ml的rhgaa分子的群體、約10-100mm的檸檬酸鈉緩沖液、約10-50mg/ml甘露醇、約0.1-1mg/ml聚山梨醇酯80、及水，且視情況包含酸化劑及/或堿化劑。在一些實(shí)施例中，醫(yī)藥組合物具有6.0的ph且包含約15mg/ml的rhgaa分子的群體、約25mm的檸檬酸鈉緩沖液、約20mg/ml甘露醇、約0.5mg/ml聚山梨醇酯80、及水，且視情況包含酸化劑及/或堿化劑。

3、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以約1mg/kg至約100mg/kg的劑量施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以約20mg/kg的劑量施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是兩月一次、每月一次、兩周一次、每周一次、每周兩次、或每日一次地施用，例如，兩周一次地施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是靜脈內(nèi)施用。

4、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是與諸如美格魯特(也稱為at2221)的藥理學(xué)伴護(hù)蛋白或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽并行地或順序地施用。在一些實(shí)施例中，美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽是經(jīng)口施用，例如以約200mg至約600mg、及視情況約260mg的劑量施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以約5mg/kg至約20mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施用且美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽是以約233mg至約500mg的劑量經(jīng)口施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以約5mg/kg至約20mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施用且美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽是以約50mg至約200mg的劑量經(jīng)口施用。在一個(gè)實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以約20mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施用且美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽是以約260mg的劑量經(jīng)口施用。在一些實(shí)施例中，美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽是在施用rhgaa分子的群體之前(例如，在施用rhgaa分子的群體之前約一小時(shí))施用。在至少一個(gè)實(shí)施例中，受試者在施用美格魯特或其醫(yī)藥學(xué)上可接受的鹽之前至少兩個(gè)小時(shí)及之后至少兩個(gè)小時(shí)禁食。

5、本發(fā)明的實(shí)施例證明本文描述的rhgaa治療并逆轉(zhuǎn)患有龐貝病的受試者的疾病進(jìn)程的功效。

6、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠逆轉(zhuǎn)受試者的肌肉纖維中的細(xì)胞破壞的劑量施用。例如，在治療之后，受試者的肌肉或肌肉纖維展現(xiàn)正?；娜苊阁w大小及/或自噬堆積的解除。在一些實(shí)施例中，在治療之后，受試者中分析的肌肉纖維的少于65％具有自噬堆積。在一些實(shí)施例中，在治療之后，受試者中分析的肌肉纖維的至少36％具有正?；蚪咏５耐庥^。在一些實(shí)施方案中，在治療后經(jīng)歷疾病進(jìn)展逆轉(zhuǎn)的受試者是ert轉(zhuǎn)換患者，例如先前已經(jīng)用阿葡糖苷酶α治療至少兩年的ert轉(zhuǎn)換患者。

7、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠在受試者的肌肉中比相同劑量的阿葡糖苷酶α更快地減少肝醣含量的劑量施用。rhgaa可比相同劑量的阿葡糖苷酶α快至少約1.25、1.5、1.75、2.0、或3.0倍地減少肝醣含量。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以在一次、兩次、三次、四次、五次、或六次施用之后評(píng)定時(shí)進(jìn)一步能夠在受試者的肌肉中比以相同劑量施用的阿葡糖苷酶α更有效地減少肝醣含量的劑量施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體比以相同劑量施用的阿葡糖苷酶α至少約10％、20％、30％、50％、75％、或90％更有效地減少肝醣含量。在一些實(shí)施例中，在治療之后，受試者展現(xiàn)較低水平的肝醣累積生物標(biāo)志物尿己糖四醣(hex4)。在至少一個(gè)實(shí)施例中，受試者中的hex4水平在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線減少至少30％。例如，先前利用酶替代療法治療的有行動(dòng)力或無(wú)行動(dòng)力的受試者(ert切換患者)可在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線展現(xiàn)至少35％的hex4水平減少。在另一情況中，先前未接收酶替代療法的有行動(dòng)力的受試者(ert原始患者)可在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線展現(xiàn)至少45％的hex4水平減少。

8、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠改善受試者的運(yùn)動(dòng)功能的劑量施用。運(yùn)動(dòng)功能的改善可通過(guò)運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試測(cè)量，所述運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試諸如六分鐘步行測(cè)試(six-minute?walk?test；6mwt)、計(jì)時(shí)起立行走測(cè)試、四層樓梯攀爬測(cè)試、十米步行測(cè)試、gowers氏測(cè)試、步態(tài)-樓梯-gower-椅子(gait-stair-gower-chair；gsgc)測(cè)試、或前述的組合。在一些實(shí)施例中，在治療之后六個(gè)月的受試者(在相較于基線時(shí))顯示至少20米的6mwt距離增加、至少1秒的計(jì)時(shí)起立行走測(cè)試時(shí)間減少、至少0.6秒的四層樓梯攀爬測(cè)試時(shí)間減少、至少0.7秒的十米步行測(cè)試時(shí)間減少、至少1秒的gowers氏測(cè)試時(shí)間減少、及/或至少1的gcsc記分減少。例如，有行動(dòng)力的ert切換患者在治療之后六個(gè)月(相較于基線)可展現(xiàn)至少20米的6mwt增加、至少1.5秒的計(jì)時(shí)起立行走測(cè)試時(shí)間減少、至少0.6秒的四層樓梯攀爬測(cè)試時(shí)間減少、及/或至少1秒的gowers氏測(cè)試時(shí)間減少。在另一情況中，有行動(dòng)力的ert原始患者在治療之后六個(gè)月(相較于基線)可展現(xiàn)至少40米的6mwt距離增加、至少1秒的計(jì)時(shí)起立行走測(cè)試時(shí)間減少、至少0.6秒的四層樓梯攀爬測(cè)試時(shí)間減少、至少0.7秒的十米步行測(cè)試時(shí)間減少、及/或至少1的gsgc記分減少。在一些實(shí)施例中，ert切換患者在治療之后在至少一個(gè)運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試中相對(duì)于在利用阿葡糖苷酶α之前述ert之后的患者的運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試結(jié)果展現(xiàn)改善。

9、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠改善受試者的上身力量的劑量施用。在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是施用至有行動(dòng)力的受試者且進(jìn)一步能夠改善受試者的下身力量及/或全身力量。

10、在一些實(shí)施例中，上身力量的改善是使用徒手肌肉力量記分來(lái)測(cè)量。受試者的徒手肌肉力量記分可在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線改善至少1(對(duì)于有行動(dòng)力的ert切換患者來(lái)說(shuō))或至少5.5(對(duì)無(wú)行動(dòng)力的ert切換患者來(lái)說(shuō))。在一些實(shí)施例中，ert切換患者在治療之后在上身力量中相對(duì)于在利用阿葡糖苷酶α之前述ert之后的患者的上身力量展現(xiàn)改善。

11、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠改善上肢力量的劑量施用，上肢力量通過(guò)定量肌肉測(cè)試或肩膀內(nèi)收、肩膀外展、肘屈曲、及/或肘伸展的徒手肌肉測(cè)試來(lái)測(cè)量。例如，在治療之后六個(gè)月，相對(duì)于基線，無(wú)行動(dòng)力的ert切換患者可展現(xiàn)至少8磅力的肩膀內(nèi)收改善、至少1磅力的肩膀外展改善、至少2磅力的肘屈曲改善、及/或至少5磅力的肘伸展改善。

12、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠改善受試者的肺功能的劑量施用。運(yùn)動(dòng)功能的改善可通過(guò)肺功能測(cè)試測(cè)量，所述肺功能測(cè)試諸如直立(坐立)用力肺活測(cè)量試、最大呼氣壓(maximal?expiratory?pressure；mep)測(cè)試、最大吸氣壓(maximalinspiratory?pressure；mip)測(cè)試、或前述的組合。在一些實(shí)施例中，受試者在治療之后六個(gè)月(當(dāng)與基線比較時(shí))顯示至少4％的fvc改善、至少16厘米水柱的mep改善、及/或至少0.3厘米水柱的mip改善。例如，有行動(dòng)力的ert切換患者在治療之后六個(gè)月(相較于基線)可展現(xiàn)至少16厘米水柱的mep改善。在另一情況中，有行動(dòng)力的ert原始患者在治療之后六個(gè)月(相較于基線)可展現(xiàn)至少4％的fvc改善及/或至少11厘米水柱的mip改善。在一些實(shí)施例中，ert切換患者在治療之后在至少一個(gè)肺功能測(cè)試中相對(duì)于在利用阿葡糖苷酶α之前述ert之后的患者的肺功能測(cè)試結(jié)果展現(xiàn)改善。

13、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠減少受試者的疲勞的劑量施用，疲勞根據(jù)疲勞嚴(yán)重程度量表(fatigue?severity?scale；fss)記分所測(cè)量。例如，受試者可為無(wú)行動(dòng)力的ert切換患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少3.5的fss記分減少。在另一實(shí)例中，受試者可為有行動(dòng)力的ert切換患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少8的fss記分減少。在又一實(shí)例中，受試者可為有行動(dòng)力的ert原始患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少5的fss記分減少。在一些實(shí)施例中，ert切換患者在治療之后相對(duì)于在利用阿葡糖苷酶α之前述ert之后的患者的fss記分展現(xiàn)較低的fss記分。

14、在一些實(shí)施例中，rhgaa分子的群體是以能夠減少肌肉損傷的至少一種生物標(biāo)志物的水平的劑量施用，所述至少一種生物標(biāo)志物例如肌酸激酶(creatine?kinase；ck)、丙胺酸轉(zhuǎn)胺酶(alanine?aminotransferase；alt)、天冬胺酸轉(zhuǎn)胺酶(aspartateaminotransferase；ast)、或前述的組合。在一些實(shí)施例中，受試者的ck水平在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線減少至少15％，受試者的alt水平在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線減少至少5％，及/或受試者的ast水平在治療之后六個(gè)月相對(duì)于基線減少至少5％。例如，受試者可為有行動(dòng)力的ert切換患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少15％的ck水平減少、至少15％的alt水平減少、及/或至少10％的ast水平減少。在另一實(shí)例中，受試者可為無(wú)行動(dòng)力的ert切換患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少20％的ck水平減少、至少5％的alt水平減少、及/或至少5％的ast水平減少。在又一實(shí)例中，受試者可為有行動(dòng)力的ert原始患者且在治療之后六個(gè)月時(shí)相對(duì)于基線展現(xiàn)至少35％的ck水平減少、至少35％的alt水平減少、及/或至少30％的ast水平減少。