本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥科學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種他莫昔芬組合物及其制劑。

背景技術(shù)：

癌癥，目前已成為全世界人類健康的最大殺手。各國(guó)科學(xué)家為攻克癌癥付出艱苦卓絕的努力，但仍然無(wú)法完全克制這一疾病，令其成為人類健康面臨的最大威脅和恐懼。

經(jīng)過(guò)不懈的研究和探索，多種多樣的抗癌藥物被開(kāi)發(fā)用于癌癥的藥物治療。全球各國(guó)已批準(zhǔn)上市的抗癌藥物大約有130～150種。用這些藥物配制成的各種抗癌藥物制劑大約有1300～1500種。除此之外，還有大量的新型的抗癌藥物不斷研發(fā)推出。而在這些藥物當(dāng)中，有許多藥物由于水溶性太差而難以實(shí)現(xiàn)進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。

使用增溶劑與藥物分子組成超分子藥物是一種促進(jìn)藥物分子在水中溶解進(jìn)而增強(qiáng)藥效的簡(jiǎn)單有效方法。但是這一方法中所使用的增溶劑必須滿足一下幾個(gè)條件：首先增溶劑本身無(wú)毒，其次是增溶劑的加入能夠提高或者不影響藥物分子本身的藥效，同時(shí)實(shí)現(xiàn)藥物分子在水溶液體系中較好的溶解性。

他莫昔芬是一種人工合成的非甾體類雌激素拮抗藥物，擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，用于治療晚期乳腺癌和卵巢癌。但在水中的溶解度極低，因此在臨床應(yīng)用中效率低下。

枸櫞酸他莫昔芬目前主要有片劑、膠囊、注射劑等劑型供臨床使用，這些劑型在胃腸道溶出度較差，生物利用度不高。cn1389199a公開(kāi)了一種枸櫞酸他莫昔芬緩釋片，cn1654037a公開(kāi)了一種枸櫞酸他莫昔芬分散片。然而這種制劑成本高、生物利用度低，不能很好地應(yīng)用于臨床。

綜上所述，能否利用現(xiàn)有技術(shù)，選擇合適的新型增溶劑，通過(guò)超分子主客體作用形成超分子藥物，簡(jiǎn)單有效的提高抗癌藥物分子他莫昔芬的溶解性，是實(shí)現(xiàn)抗癌藥物藥效提高的關(guān)鍵。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中他莫昔芬水溶性不足的問(wèn)題，提供一種含水溶性柱[6]芳烴的他莫昔芬組合物，水溶性柱[6]芳烴在水中具有良好的溶解度，毒性低，并且能夠通過(guò)主客體相互作用高效的提高他莫昔芬在水中的溶解度，同時(shí)提高該藥物的抗癌藥效。

一種他莫昔芬組合物，含有可增加他莫昔芬在水中溶解度的水溶性柱[6]芳烴，所述水溶性柱[6]芳烴為式(ⅰ)～(ⅲ)所示化合物中的至少一種，

優(yōu)選地，所述的他莫昔芬組合物由他莫昔芬與水溶性柱[6]芳烴以摩爾比為0.1～1:1組成。

進(jìn)一步優(yōu)選，他莫昔芬與水溶性柱[6]芳烴的摩爾比為0.3～0.6：1，他莫昔芬在水中的溶解性差，溶解度僅有5.90×10^–3mg/ml，在該比例范圍內(nèi)，所述的他莫昔芬組合物能在水中完全溶解。

作為優(yōu)選，所述水溶性柱[6]芳烴為式(ⅰ)所示的全羧酸銨鹽柱[6]芳烴(縮寫(xiě)為wp6)，全羧酸銨鹽柱[6]芳烴的堿性較弱，對(duì)細(xì)胞的滲透的影響較小，其在水中的溶解度為92.4±1.5mg/ml，他莫昔芬能夠和全羧酸銨鹽柱[6]芳烴形成主客體絡(luò)合物wp6-t，從而增強(qiáng)他莫昔芬在水中的溶解性和抗癌藥效。

本發(fā)明還提供了含上述他莫昔芬組合物的制劑，該制劑由他莫昔芬組合物和藥學(xué)上可接受的載體或其他藥用活性成分組成。

優(yōu)選地，所述制劑為固體制劑、半固體制劑或液體制劑。

其中，所述制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、口服液等口服用常見(jiàn)劑型；所述藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，由選自填充劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助溶劑、助懸劑、潤(rùn)濕劑、色素、香精、溶劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑或矯味劑中的一種或幾種組成。

所述制劑為輸液、水針、粉針等常見(jiàn)注射用常見(jiàn)劑型；所述藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，由選自滲透壓調(diào)節(jié)劑、ph調(diào)節(jié)劑、增溶劑、助溶劑、凍干保護(hù)劑、抗氧劑和穩(wěn)定劑中的一種或幾種組成。

本發(fā)明中所使用的水溶性柱[6]芳烴本身細(xì)胞毒性較低，而他莫昔芬組合物對(duì)于乳腺癌細(xì)胞mcf-7以及海拉細(xì)胞hela兩種癌細(xì)胞均表現(xiàn)出了相比于自由的他莫昔芬藥物更強(qiáng)的致死效率。說(shuō)明該他莫昔芬組合物不僅具有很好的水溶性，而且具有較他莫昔芬更高的殺死癌細(xì)胞的效率。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)水溶性柱[6]芳烴制備方法簡(jiǎn)便，綠色環(huán)保，細(xì)胞毒性低，同時(shí)通過(guò)主客體相互作用提高難溶抗癌藥物他莫昔芬在水中的溶解性；

(2)本發(fā)明他莫昔芬組合物，大大提高了他莫昔芬在水中的溶解度，制成口服制劑，有利于他莫昔芬的溶出和吸收，可大大提高他莫昔芬的生物利用度；

(3)本發(fā)明他莫昔芬組合物溶于水后形成的主客體絡(luò)合物具有很高的癌細(xì)胞的致死效率，可作為一類新型抗癌藥物。

附圖說(shuō)明

圖1為wp6提高他莫昔芬溶解性的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果圖；

圖2為wp6、wp6-t及他莫昔芬對(duì)于乳腺癌細(xì)胞mcf-7以及海拉細(xì)胞hela兩種癌細(xì)胞的毒性試驗(yàn)結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

全羧酸銨鹽柱[6]芳烴wp6的合成路線：

稱取全羥基柱[6]芳烴c0.730g于100ml圓底燒瓶中，依次加入2.59g的氯乙酸乙酯，6.62g的無(wú)水碳酸鉀，50ml的乙腈，氬氣保護(hù)，85～90℃下攪拌反應(yīng)48～50小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過(guò)濾，旋干溶劑，將所得固體溶于100～120ml的二氯甲烷中，用100～150ml的水洗滌三次，無(wú)水硫酸鈉干燥30～35min，過(guò)濾，用硅膠柱層析分離，洗脫劑用：石油醚：乙酸乙酯＝3：1，濃縮得白色固體，即為全酯基柱[6]芳烴b(0.74g，產(chǎn)率46％)。

稱取全酯基柱[6]芳烴b0.74g于100ml圓底燒瓶中，依次加入1.60g的naoh固體，40ml的乙醇，20～22ml的水，上述體系在90～95℃下反應(yīng)12～13小時(shí)，冷卻至室溫，加入鹽酸酸化，有大量固體析出，抽濾，濾餅用蒸餾水洗滌3～4次，真空干燥，得白色固體，即為全羧基柱[6]芳烴a(0.61g，產(chǎn)率93％)。

取全羧基柱[6]芳烴a0.56于50ml圓底燒瓶中，加入40～45ml氨水，室溫下攪拌反應(yīng)4～5小時(shí)。減壓旋干，得白色固體，即為全羧基銨鹽柱[6]芳烴wp6(0.62g,產(chǎn)率為99％)。

本實(shí)施例制備的產(chǎn)品表征數(shù)據(jù)如下：

全酯基柱[6]芳烴b：

¹hnmr(400mhz,cdcl3,298k,ppm):δ7.04(s,12h),4.56(s,24h,),3.87(s,12h),3.60(m,36h)；¹³cnmr(400mhz,cdcl3,298k,ppm):δ169.8,148.9,128.5,114.4,65.5,51.8,29.7,29.3。

全羧基柱[6]芳烴a：

¹hnmr(400mhz,dmso-d6,298k,ppm):δ12.96(s,12h),7.11(s,12h),4.71(s,12h),4.42(s,12h),3.74(s,12h)；¹³cnmr(400mhz,dmso-d6,298k,ppm):δ170.5,148.4,128.0,114.2,65.0,28.6。

全羧基銨鹽柱[6]芳烴wp6:

¹hnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):δ6.71(s,12h),4.20(s,24h),3.87(2,12h)；¹³cnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):176.8,150.1,128.4,115.9,67.9,30.1。

wp6對(duì)他莫昔芬溶解度影響實(shí)驗(yàn)：

以wp6在水中的溶解度為范圍，將wp6溶解于水中，設(shè)置其濃度梯度為1.63～81.68mg/ml。將過(guò)量的抗癌藥物他莫昔芬粉末加入配好的wp6水溶液，在25℃下充分?jǐn)嚢?4～25小時(shí)后，用22μm水相濾膜濾除過(guò)量的未溶解的他莫昔芬固體，他莫昔芬和wp6形成主客體絡(luò)合物wp6-t，得到含wp6-t的溶液。他莫昔芬含量測(cè)定方法如下，在d2o溶劑中，通過(guò)加入一定量的內(nèi)標(biāo)化合物均苯三甲酸鈉后，在¹h-nmr核磁氫譜上顯示相應(yīng)的質(zhì)子信號(hào)。通過(guò)相應(yīng)的質(zhì)子信號(hào)峰的積分面積比例與內(nèi)標(biāo)化合物的加入量可以計(jì)算得到樣品溶液中所溶解的他莫昔芬的含量。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析可知：

wp6能夠有效地通過(guò)主客體相互作用形成主客體絡(luò)合物wp6-t，從而提高難溶性抗癌藥物他莫昔芬在水中的溶解度，在測(cè)試范圍內(nèi)，最高可以將他莫昔芬在水中的溶解度提高至4.64mg/ml，與他莫昔芬自身的溶解度5.90×10^–3mg/ml相比，顯著提高。

檢測(cè)wp6，主客體絡(luò)合物wp6-t及他莫昔芬對(duì)于兩種癌細(xì)胞乳腺癌細(xì)胞mcf-7以及海拉細(xì)胞hela的致死效率。

在96孔板中，5％co2，36至37攝氏度環(huán)境下孵育乳腺癌細(xì)胞mcf-7和海拉細(xì)胞hela23至24小時(shí)備用。

分別配制wp6、主客體絡(luò)合物wp6-t、他莫昔芬的不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5μm、1μm、2μm、5μm、10μm、15μm、20μm備用。其中，主客體絡(luò)合物wp6-t的配制方法為：首先配制5mm的wp6水溶液，然后過(guò)量的他莫昔芬粉末加入該溶液，在25℃下充分?jǐn)嚢?4～25小時(shí)，濾除未溶解多余的他莫昔芬，將溶液稀釋至所需的濃度；由于他莫昔芬自身溶解度過(guò)低，其溶液的配制方法為：先將他莫昔芬粉末大量地溶于dmso，配制成他莫昔芬的濃溶液，然后稀釋至所需濃度，同時(shí)使細(xì)胞培養(yǎng)體系中dmso的含量不超過(guò)5％，保證細(xì)胞存活不受溶劑影響。

將上述溶液加入到乳腺癌細(xì)胞mcf-7和海拉細(xì)胞hela的培養(yǎng)基中，在36～37℃下繼續(xù)孵化4～5小時(shí)。用mtt法測(cè)定上述兩種細(xì)胞的存活率，以此來(lái)測(cè)定wp6、wp6-t、他莫昔芬的細(xì)胞毒性

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，其中圖(a)為wp6、wp6-t、他莫昔芬對(duì)乳腺癌細(xì)胞mcf-7的相對(duì)細(xì)胞活性；圖(b)為wp6、wp6-t、他莫昔芬對(duì)海拉細(xì)胞hela的相對(duì)細(xì)胞活性。

結(jié)果顯示，wp6在測(cè)試的濃度范圍內(nèi)都具有較低的細(xì)胞毒性，且他莫昔芬由于處理時(shí)間較短，在4～5小時(shí)的孵化時(shí)間內(nèi)也沒(méi)有顯示出明顯的細(xì)胞毒性，而wp6-t對(duì)于兩種測(cè)試癌細(xì)胞，都顯示出明顯的隨濃度增大而升高的較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，表明具有良好的抗癌效果，能增強(qiáng)他莫昔芬的抗癌藥效。

實(shí)施例2

全羧酸鈉鹽柱[6]芳烴的合成：

取實(shí)施例1制備的全羧基柱[6]芳烴a

取全羧基柱[6]芳烴a0.67～0.68g于50ml圓底燒瓶中，加入0.2～0.3gnaoh固體，30ml水，室溫下攪拌反應(yīng)12～13h。用1.0m～1.5m的鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph至6.5左右，減壓旋干體系中的水，得白色固體，即為全羧基鈉鹽柱[6]芳烴(0.79～0.80g,產(chǎn)率為97～100％)。

本實(shí)施例制備的產(chǎn)品全羧基鈉鹽柱[5]芳烴的表征數(shù)據(jù)如下：

¹hnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):6.58(s,12h),4.08(s,24h),3.75(s,12h)；¹³cnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):179.76,152.64,130.86,117.64,70.65,32.62。

實(shí)施例3

全羧酸鉀鹽柱[6]芳烴的合成：

取實(shí)施例1制備的全羧基柱[6]芳烴a

取全羧基柱[6]芳烴a0.67～0.68g于50ml圓底燒瓶中，加入0.2～0.3gnaoh固體，30ml水，室溫下攪拌反應(yīng)12～13h。用1.0m～1.5m的鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph至6.5左右，減壓旋干體系中的水，得白色固體，即為全羧基鈉鹽柱[6]芳烴(0.88～0.89g,產(chǎn)率為97～100％)。

本實(shí)施例制備的產(chǎn)品全羧基鈉鹽柱[5]芳烴的表征數(shù)據(jù)如下：

¹hnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):6.58(s,12h),4.08(s,24h),3.75(s,12h)；¹³cnmr(400mhz,d2o,298k,ppm):179.76,152.64,130.86,117.64,70.65,32.62。

實(shí)施例4

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.3:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液，得到含主客體絡(luò)合物wp6-t的水溶液。

實(shí)施例5

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.5:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液，得到含主客體絡(luò)合物wp6-t的水溶液。

實(shí)施例6

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.7:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液，得到含主客體絡(luò)合物wp6-t的水溶液。

實(shí)施例7

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為1:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液，得到含主客體絡(luò)合物wp6-t的水溶液。

實(shí)施例8

將全羧酸鈉鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.5:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液。

實(shí)施例9

將全羧酸鉀鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.5:1混合，得到他莫昔芬組合物，所得他莫昔芬組合物在水中可溶解為澄清透明溶液。

實(shí)施例10

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.5:1混合，得到他莫昔芬組合物，粉碎過(guò)100目篩后，灌裝膠囊。膠囊經(jīng)輻照滅菌即制成他莫昔芬組合物膠囊。

實(shí)施例11

將全羧酸銨鹽柱[6]芳烴與他莫昔芬以摩爾比為0.5:1混合，得到他莫昔芬組合物，粉碎過(guò)100目篩后，再將該藥物組合物粉末與微晶纖維素以質(zhì)量比為1：1混合充分，壓片，包衣，制成片劑，片劑經(jīng)輻照滅菌即制成他莫昔芬組合物片。