本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，主要涉及一種抗菌肽與抗生素組合的抗菌藥物及其使用方法。

背景技術(shù)：

抗生素是用于預(yù)防和治療細(xì)菌感染的藥物?？股氐某霈F(xiàn)，拯救了無(wú)數(shù)生命，但是細(xì)菌對(duì)于抗生素產(chǎn)品的耐藥性問(wèn)題也逐年加重，新藥研發(fā)的速度遠(yuǎn)跟不上細(xì)菌耐藥的速度，抗生素耐藥性會(huì)導(dǎo)致更高的醫(yī)療費(fèi)用，更長(zhǎng)的住院時(shí)間和更多死亡?？股啬退幮允侵敢鸶腥镜钠胀?xì)菌所出現(xiàn)的對(duì)抗生素的耐藥性，它在細(xì)菌對(duì)使用該類藥物發(fā)生反應(yīng)并改變時(shí)出現(xiàn)，一般是由于耐藥基因?qū)е碌倪@種變化。

據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告，僅在歐盟地區(qū)，僅在2014年耐藥細(xì)菌估計(jì)就造成了25000例死亡，每年因此發(fā)生的衛(wèi)生保健支出和生產(chǎn)力損失超過(guò)了15億美元。因此急需改變開(kāi)處方和使用抗生素的方法。

在常見(jiàn)菌種如金黃色葡萄球菌對(duì)于抗生素的耐藥性日益嚴(yán)重的當(dāng)今，生物體產(chǎn)生的抗菌肽類物質(zhì)因其能夠在幾千年中仍保有殺菌抗菌作用而被選為抗菌藥物的后備軍?？咕囊卜Q為宿主防御肽，具有廣譜高效殺菌活性，對(duì)革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、真菌、病毒及癌細(xì)胞等均具有強(qiáng)有力的殺傷作用，其作用機(jī)制包括抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成、破壞細(xì)胞膜，激活自溶酶，抑制dna、rna和蛋白質(zhì)的合成等。研究表明很少有細(xì)菌對(duì)抗菌肽有耐藥性，現(xiàn)在已經(jīng)有一些抗菌肽在臨床上研究使用。

中國(guó)專利申請(qǐng)201410241068.9《抗菌肽抗菌活性預(yù)測(cè)方法及抗菌肽》中公開(kāi)了人工設(shè)計(jì)的dp系列抗菌肽，其序列為v-q-w-r-i-r-x1-x2-v-i-r-x3，其中x1＝i或v，x2＝a或c，x3＝a、r或k；或者：v-q-l-r-i-r-v-x4-v-i-r-x5，其中x4＝a或c，x5＝r或k。dp系列抗菌肽具有很好的廣譜抗菌活性，尤其是氨基酸序列為vqwrirvavirk(seqno.4)的dp7，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、真菌具有很好的抗菌活性，并且對(duì)真核細(xì)胞具有較低的毒性以及較低的溶血效應(yīng)。如何能進(jìn)一步提高dp系列抗菌肽的抗菌活性，尤其是使使細(xì)菌更難產(chǎn)生耐藥性，以及對(duì)耐藥細(xì)菌具有更好的抗菌作用，是本領(lǐng)域的難題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是為本領(lǐng)域的抗感染治療提供一種新的有效選擇。本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是提供了一種抗菌藥物。該抗菌藥物包括抗菌肽與抗生素作為主要活性成分。

其中，上述抗菌藥物中所述的抗菌肽具有如下所示的氨基酸序列：

v-q-w-r-i-r-x1-x2-v-i-r-x3，其中x1＝i或v，x2＝a或c，x3＝a、r或k；

或者：

v-q-l-r-i-r-v-x4-v-i-r-x5，其中x4＝a或c，x5＝r或k；

或者為上述序列多肽的碳末端進(jìn)行了酰胺化和/或氮末端進(jìn)行了乙?；难苌镏械闹辽僖环N。

進(jìn)一步的，上述抗菌藥物中所述的抗菌肽的氨基酸序列選自序列表中seqidno.1～seqidno.16中的至少一條。

其中，上述抗菌藥物中所述的抗生素為糖肽類抗生素、氨基苷類抗生素、大環(huán)內(nèi)脂類抗生素、β-內(nèi)酰胺類抗生素中的至少一種。

其中，上述抗菌藥物中所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素為青霉素類抗生素或頭孢菌素類抗生素中的至少一種。

進(jìn)一步的，所述的青霉素類抗生素為青霉素g、青霉素v、氟氯西林、苯唑青霉素、氨芐西林、羧芐西林、匹氨西林、磺芐西林、替卡西林、哌拉西林或阿莫西林中的至少一種。所述的頭孢菌素類抗生素為：頭孢羥氨芐、頭孢氨芐、頭孢唑啉、頭孢拉啶、頭孢丙烯，頭孢呋辛脂、頭孢克洛、頭孢孟多、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢克肟、頭孢地尼、頭孢皮羅、頭孢吡肟或頭孢唑南中的至少一種。

其中，上述抗菌藥物中所述的氨基苷類抗生素為鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、西索米星、妥布霉素、阿米卡星、奈替米星、核糖霉素、小諾霉素或阿斯霉素中的至少一種。

其中，上述抗菌藥物中所述的多肽類抗生素為萬(wàn)古霉素、去甲萬(wàn)古霉素、多粘菌素b或替考拉寧中的至少一種

其中，上述抗菌藥物中所述的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素為紅霉素、白霉素、無(wú)味紅霉素、依托紅霉素、乙酰螺旋霉素、麥迪霉素、交沙霉素或阿奇霉素中的至少一種。

進(jìn)一步的，上述抗菌藥物的其劑型為注射劑。

其中，上述抗菌藥物中所述的抗菌肽與抗生素處于獨(dú)立的包裝中。

進(jìn)一步的，上述抗菌藥物中所述的獨(dú)立包裝的抗菌肽的劑型為注射劑，抗生素的劑型為口服制劑或注射劑。

同時(shí)，本發(fā)明還提供了一種抗菌方法。該抗菌方法包括以下步驟：對(duì)于非生物物體或者帶菌生物體施用有效量的抗菌肽與抗生素，進(jìn)行抗菌處理。

其中，上述的抗菌方法中抗菌肽具有如下所示的氨基酸序列：

v-q-w-r-i-r-x1-x2-v-i-r-x3，其中x1＝i或v，x2＝a或c，x3＝a、r或k；

或者：

v-q-l-r-i-r-v-x4-v-i-r-x5，其中x4＝a或c，x5＝r或k；

或者；

為對(duì)上述氨基酸序列所示多肽的碳末端進(jìn)行了酰胺化和/或氮末端進(jìn)行了乙?；难苌镏械闹辽僖环N。

進(jìn)一步的，上述方法中所述抗菌肽的氨基酸序列選自序列表中seqidno.1～seqidno.16中的至少一條。

其中，上述的抗菌方法中所述的抗生素為多肽類抗生素、氨基苷類抗生素、大環(huán)內(nèi)脂類抗生素、β-內(nèi)酰胺類抗生素中的至少一種。進(jìn)一步的，各類抗生素的具體種類也如前所述。

其中，上述的抗菌方法中所述的抗菌肽和抗生素為同時(shí)或者分時(shí)施用。

其中，上述的抗菌方法中所述的抗菌肽和抗生素使用相同或不同的給藥途徑施用。

進(jìn)一步的，當(dāng)對(duì)生物體施用時(shí)，上述抗菌方法中所述抗菌肽和抗生素施用在生物體的體表和/或體內(nèi)。

當(dāng)施用在生物體的體表時(shí)，上述抗菌方法中可施用抗菌肽和抗生素在生物體的皮膚和/或毛發(fā)處，以用于皮膚和毛發(fā)的抗菌。

當(dāng)施用在生物體的體表時(shí)，上述抗菌方法中也能施用抗菌肽和抗生素在生物體表的傷口和/或感染處。

上述抗菌方法中，所述的生物為人或非人的脊椎動(dòng)物。

本發(fā)明開(kāi)展抗菌肽與抗生素類藥物的聯(lián)合使用研究，以期使其達(dá)到協(xié)同抗菌作用。但是由于不同的藥物往往具有不同的抗菌機(jī)制，聯(lián)合用藥與單獨(dú)用藥相比雖然可能使細(xì)菌更難產(chǎn)生耐藥性，但是哪些藥物之間有可能產(chǎn)生協(xié)同作用是難以預(yù)期的。在大量工作的基礎(chǔ)上，本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)dp系列的抗菌肽和抗生素類藥物之間能較好的配合使用，且能進(jìn)一步產(chǎn)生協(xié)同作用。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明抗菌肽抗生素組合藥能可有效提高抗菌效果，降低藥物尤其是抗生素的使用劑量，減少毒副作用；同時(shí)本發(fā)明抗菌肽抗生素組合藥物，將抗菌肽與抗生素聯(lián)合使用可有效降低菌株的耐藥性，對(duì)耐藥菌的抗菌效果也有明顯的提升，試驗(yàn)證明對(duì)已有的耐藥株也有良好的殺菌效果，為本領(lǐng)域提供了一種新的有效選擇。

附圖說(shuō)明

圖1、聯(lián)合用藥的藥物在96孔板排版布局示意圖。其中的blank是僅有培養(yǎng)基的對(duì)照，control是加菌液的培養(yǎng)基，未加藥物的對(duì)照。

圖2、金黃色葡萄球菌耐藥株s5375經(jīng)過(guò)不同藥物處理后細(xì)胞形態(tài)的透射電鏡圖。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合附圖和實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。

實(shí)施例1dp7與多種抗生素聯(lián)用對(duì)多種臨床分離耐藥菌的協(xié)同抗菌作用以及與cls001的協(xié)同抗菌效果比較：

將抗菌肽dp7(氨基酸序列vqwrirvavirk-nh2，碳末端進(jìn)行了酰胺化)分別與抗生素藥物萬(wàn)古霉素(van)、慶大霉素(gen)、阿奇霉素(azt)和阿莫西林(amo)用棋盤法進(jìn)行藥物聯(lián)用抑菌實(shí)驗(yàn)，并選取了重慶西南醫(yī)院和四川省疾控中心獲得的臨床分離耐藥金黃色葡萄球菌菌株(sau系列)、臨床分離耐藥大腸桿菌菌株(eco系列)、臨床分離耐藥綠膿桿菌菌株(paer系列)和臨床分離耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌菌株(aba系列)各三株用于聯(lián)合用藥效果測(cè)試。同時(shí)，本發(fā)明選取了目前處于臨床iii期評(píng)估階段的抗菌肽藥物omiganan(cls001，其氨基酸序列為ilrwpwwpwrrk(seqno.17)，并在碳末端進(jìn)行了酰胺化)，代替dp7重復(fù)以上的聯(lián)合用藥抗菌實(shí)驗(yàn)，以比較cls001和dp7的抗菌效果以及協(xié)同抗菌的效果。

1、抗菌肽與抗生素對(duì)于臨床分離耐藥菌的最小抑菌濃度測(cè)定

根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(clsi)系列文件(m7-a7)指導(dǎo)，使用微量肉湯稀釋法測(cè)定抗菌藥物的最低抑菌濃度(mic)。主要操作方法如下：將細(xì)菌涂于mha平板，于37℃培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)24小時(shí)，然后挑取的菌落用mh肉湯系列稀釋至1×10⁶cfu/ml，備用；藥物用mh肉湯進(jìn)行等二倍系列稀釋，藥物濃度范圍從512mg/l到0.50mg/l，然后分別加入到96板相應(yīng)的孔中，每孔加入100μl，每個(gè)藥物濃度有三個(gè)復(fù)孔；再向相應(yīng)板孔中96孔板中加入100μl的5×10⁶cfu/ml細(xì)菌；于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20小時(shí)后，用酶標(biāo)儀檢測(cè)od595波長(zhǎng)下的吸光度值，三復(fù)孔測(cè)得的值取平均值，并計(jì)算抑菌率，以抑菌率大于或等于80％的抗菌藥物濃度作為其對(duì)這種細(xì)菌的mic值。抑菌率計(jì)算公式如下:

結(jié)果見(jiàn)表1，最小抑菌濃度實(shí)驗(yàn)表明，大部分實(shí)驗(yàn)用的各臨床分離耐藥菌菌株對(duì)慶大霉素和阿莫西林都具有非常嚴(yán)重的耐藥性，而阿奇霉素和萬(wàn)古霉素對(duì)大部分菌株的抗菌效果也較差，抗菌肽dp7和cls001對(duì)所有菌株都有不錯(cuò)的抗菌效果，就整體抗菌效果來(lái)說(shuō)，dp7要稍微優(yōu)于cls001。

表1.臨床分離菌株的mic

(金黃色葡萄球菌菌株、大腸桿菌菌株、綠膿桿菌菌株和鮑曼不動(dòng)桿菌)

2、抗菌肽與抗生素聯(lián)用對(duì)臨床分離耐藥菌的協(xié)同抗菌作用

抗菌肽與抗生素聯(lián)合使用的部分抑菌濃度指數(shù)(ficis)是通過(guò)棋盤肉湯稀釋法測(cè)定mic后計(jì)算得來(lái)，可評(píng)價(jià)兩種藥物的體外協(xié)同抑菌效果。

抗菌肽與抗生素對(duì)于臨床分離耐藥菌的最小抑菌濃度(mic)測(cè)定的棋盤法的具體步驟如下：

(1)取需要聯(lián)用對(duì)抗菌藥物母液(10mg/ml)，然后稀釋至4×2倍mic濃度，并配置2倍梯度稀釋藥液。

(2)按照棋盤法布局混合各個(gè)濃度的藥液：聯(lián)合用藥孔每孔加每種藥物50μl，當(dāng)藥物孔加入藥物50μl，培養(yǎng)基50μl，每個(gè)藥物處理濃度設(shè)置二副孔。

(3)除blank孔，每孔加入100μl5×10⁶cfu/ml的待試菌液。每孔的液體體積為200μl，blank孔只含200μl培養(yǎng)基。

(4)將96孔板放置于37℃細(xì)菌孵箱培養(yǎng)中，培養(yǎng)20小時(shí)后取出用酶標(biāo)儀測(cè)量od595的值，計(jì)算各孔的抑菌率。

(5)聯(lián)合用藥的藥物在96孔板排版布局如圖1所示。

ficis的計(jì)算公式如下：

按照棋盤法布局混合各個(gè)濃度的藥液，取需要聯(lián)用對(duì)抗菌藥物母液(10mg/ml)，然后稀釋至4×2倍mic濃度，并配置2倍梯度稀釋藥液。聯(lián)合用藥孔每孔加每種藥物50μl，單藥物孔(對(duì)應(yīng)聯(lián)用藥0×mic)加入藥物50μl，培養(yǎng)基50μl，每個(gè)藥物處理濃度設(shè)置二副孔。除blank孔，每孔加入100μl5×10⁶cfu/ml的待試菌液。每孔中液體中體積200μl，blank孔只含200μl培養(yǎng)基。

將96孔板放置于37℃細(xì)菌孵箱培養(yǎng)，培養(yǎng)20小時(shí)后取出用酶標(biāo)儀測(cè)量od595的值，計(jì)算各孔的抑菌率，以抑菌率大于或等于90％的抗菌藥物濃度作為其對(duì)這種細(xì)菌的mic值。

結(jié)果見(jiàn)表2，在聯(lián)合抗菌實(shí)驗(yàn)中，dp7與cls001這兩種抗菌肽的聯(lián)用對(duì)所有菌株都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)協(xié)同作用(抑菌濃度指數(shù)fici≤0.5表明有協(xié)同作用)?？咕膁p7與萬(wàn)古霉素聯(lián)用時(shí)，所有菌株中有50％的菌株具協(xié)同作用，與慶大霉素、阿奇霉素和阿莫西林聯(lián)用時(shí)有協(xié)同作用的菌株比例分別為20％、60％和20％?？咕腸ls001與萬(wàn)古霉素、慶大霉素、阿奇霉素和阿莫西林聯(lián)用時(shí)有協(xié)同作用的菌株比例分別為30％、20％、10％和40％。從整體的協(xié)同效果上看，dp7與抗生素聯(lián)用時(shí)的具有協(xié)同效果的聯(lián)合抗菌結(jié)果比cls001與抗生素聯(lián)用時(shí)的結(jié)果更多。而抗菌肽與抗生素萬(wàn)古霉素和阿奇霉素聯(lián)用時(shí)具有更高的協(xié)同抗菌頻率。

表2.dp7或cls001與抗生素聯(lián)用的部分抑菌濃度指數(shù)ficis

注：部分抑菌濃度指數(shù)fici與協(xié)同作用關(guān)系：協(xié)同作用(fici≤0.5),部分協(xié)同作用(0.5<fici<1),無(wú)協(xié)同作用(1≤fici<4.0),拮抗作用(fici≥4.0)。

實(shí)施例2dp7與萬(wàn)古霉素和阿奇霉素聯(lián)合抗菌的擴(kuò)大實(shí)驗(yàn)

抗菌肽dp7與萬(wàn)古霉素和阿奇霉素聯(lián)用時(shí)，對(duì)于金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌株和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌株的協(xié)同抗菌具有更好的效果，因此我們擴(kuò)大dp7與萬(wàn)古霉素和阿奇霉素聯(lián)用抗菌實(shí)驗(yàn)的金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌的菌株數(shù)目以進(jìn)一步研究協(xié)同抗菌效果。

采用實(shí)時(shí)定量pcr(qpcr)的方法確定臨床分離耐藥菌菌種的準(zhǔn)確性。用dneasyblood&tissuekit(qiagen)提取細(xì)菌的總dna，dna濃度用thermoscientificnanodrop2000分光光度儀檢測(cè)，dna樣品的a260吸光度測(cè)定的濃度應(yīng)大于10ng/ml，a260/a280值應(yīng)大于1.8；用microbialdnaqpcrmulti-assaykits(qiagen)鑒定細(xì)菌萬(wàn)古霉素耐藥基因和阿奇霉素耐藥基因；用qpcr軟件計(jì)算每個(gè)孔的臨界循環(huán)數(shù)(cq值)，與陰性對(duì)照(ntc)的cq值相比，樣品cq值大于ntc-6的結(jié)果為陰性，小于ntc-6的結(jié)果為陽(yáng)性。處于陽(yáng)性和陰性之間的值為沒(méi)有顯著差異。根據(jù)cq值，確定臨床分離耐藥菌，然后進(jìn)行聯(lián)合用藥實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果見(jiàn)表3，對(duì)于金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌，抗菌肽dp7與萬(wàn)古霉素聯(lián)用(dp7–van)有協(xié)同作用的占總菌株數(shù)量的40％，有部分協(xié)同作用的占40％；dp7與阿奇霉素聯(lián)用(dp7–azt)有協(xié)同作用的占總菌株數(shù)量的50％。對(duì)綠膿桿菌臨床分離耐藥菌，抗菌肽dp7與萬(wàn)古霉素聯(lián)用有協(xié)同作用的占總菌株數(shù)量的50％，有部分協(xié)同作用的占20％；然而dp7與阿奇霉素聯(lián)用有協(xié)同作用的只占總菌株數(shù)量的10％，有部分協(xié)同作用的占30％。

表3.dp7、萬(wàn)古霉素和阿奇霉素對(duì)金黃色葡萄球菌臨床分離

耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌的mic以及聯(lián)合抗菌效果

實(shí)施例3dp7與阿奇霉素的協(xié)同作用與阿奇霉素耐藥基因之間的聯(lián)系

綜合dp7與阿奇霉素或萬(wàn)古霉素聯(lián)用時(shí)的協(xié)同抗菌效果以及各菌株對(duì)阿奇霉素或萬(wàn)古霉素的耐藥情況，我們采用實(shí)時(shí)定量pcr(qpcr)的方法，對(duì)金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌進(jìn)行了常見(jiàn)的萬(wàn)古霉素耐藥基因和阿奇霉素耐藥基因的鑒定分析，本實(shí)施例涉及到的耐藥基因是萬(wàn)古霉素耐藥基因(vanb、vanc)和阿奇霉素耐藥基因(erma,ermb,ermc,mefa,msra)。

結(jié)果見(jiàn)表4和表5、我們從qpcr基因鑒定結(jié)果得出，分離得到的金黃色葡萄球菌耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌均沒(méi)有萬(wàn)古霉素耐藥基因vanb和vanc(數(shù)據(jù)沒(méi)呈現(xiàn))。針對(duì)于阿奇霉素耐藥基因，13株金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌中有11株攜帶ermb基因，6株攜帶ermc基因(同時(shí)均攜帶ermb基因)；9株綠膿桿菌臨床分離耐藥菌中有4株攜帶erma基因,6株攜帶ermb基因，6株攜帶ermc基因；這幾種金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌均不攜帶mefa和msra基因。我們對(duì)這13株金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌和9株綠膿桿菌臨床分離耐藥菌的耐藥性及耐藥基因種類數(shù)量的統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，阿奇霉素耐藥基因種類越多的菌株，其最低抑菌濃度(mic)越大；然而，絕大多數(shù)存在協(xié)同作用的耐藥菌株都含有兩種及以上的耐藥基因，阿奇霉素耐藥基因種類越多的菌株，其dp7與azt聯(lián)用的部分抑菌濃度指數(shù)(fici)越小，協(xié)同作用越好；這些結(jié)果表明dp7與阿奇霉素對(duì)于金黃色葡萄球菌臨床分離耐藥菌和綠膿桿菌臨床分離耐藥菌的協(xié)同抗菌作用可能與菌株的耐藥基因種類和數(shù)量有關(guān)。

表4.各個(gè)耐藥基因菌株在阿奇霉素耐藥菌中所占的比例

表5.耐藥基因在阿奇霉素耐藥菌的分布及dp7與阿奇霉素聯(lián)用的fici

注：“+”代表cq<ntc-6，鑒定為陽(yáng)性；“-”代表cq≥ntc-6，鑒定為陰性。

實(shí)施例4金黃色葡萄球菌耐藥菌s5375被抗菌肽dp7與阿奇霉素處理后的形態(tài)學(xué)變化

本實(shí)例通過(guò)對(duì)藥物處理前后，通過(guò)透射電鏡來(lái)觀察細(xì)菌形態(tài)的變化，說(shuō)明藥物對(duì)細(xì)菌殺傷的方式。

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的金黃色葡萄球菌耐藥菌s5375，分組4組(control、dp7、dp7-azt、azt)，然后每組用各自藥物處理60分鐘；900g離心10分鐘，獲得的沉淀有1m磷酸鹽緩沖液洗滌2次；然后2.5％戊二醛/磷酸鹽緩沖夜固定細(xì)胞，4度過(guò)夜；在透射顯微鏡下拍照。

結(jié)果見(jiàn)圖2，與control對(duì)照組相比，我們發(fā)現(xiàn)azt處理后的細(xì)胞顯示核區(qū)顏色變深暗和有清晰的細(xì)胞壁，dp7組處理后的細(xì)胞的細(xì)胞壁發(fā)生斷裂，dp7-azt組處理后的細(xì)胞壁斷裂程度比dp7更加嚴(yán)重。這些結(jié)果說(shuō)明了dp7通過(guò)破壞細(xì)胞壁而殺菌，而azt可能是通過(guò)阻斷相關(guān)蛋白質(zhì)合成而殺菌。兩者通過(guò)不同的機(jī)理達(dá)成了協(xié)同的效果。