本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種醫(yī)用材料，具體為一種復(fù)合藥物載體及其制備方法。
背景技術(shù)：
：透明質(zhì)酸又名玻璃酸，是一種獨特的線性大分子酸性粘多糖，由葡萄糖醛酸和n-乙酰氨基葡萄糖的雙糖單位反復(fù)交替連接而成。與其他天然粘多糖不同，透明質(zhì)酸分子內(nèi)不含硫酸基團，也不與蛋白質(zhì)共價結(jié)合，能以自由鏈形式在體內(nèi)游離存在。透明質(zhì)酸廣泛分布于動物和人體結(jié)締組織細胞外基質(zhì)中，在眼玻璃體、臍帶、皮膚、軟骨和滑液中含量較高，血清中含量最低。依據(jù)組織來源不同，分子量變化介于105～107之間。透明質(zhì)酸因其高度的粘彈性、可塑性、滲透性、獨特的保濕性、優(yōu)良的生物相容性和可降解性，已被廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)和高級化妝品。比如在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，透明質(zhì)酸已被廣泛用于關(guān)節(jié)疾病、眼科手術(shù)、預(yù)防術(shù)后粘連、治療燙傷以及作為藥物載體和助劑等。透明質(zhì)酸及其衍生物作為藥物載體，主要利用其良好的生物相容性和可降解性、高粘彈性以及與細胞表面特異受體專一性結(jié)合的能力，以達到藥物增稠、藥物緩釋、促進藥物透皮能力及靶向性的目的。另外，透明質(zhì)酸的可修飾位點較多，改性方法多樣也是其作為藥物載體備受青睞的原因之一。目前，透明質(zhì)酸及其衍生物已被用作類固醇類藥物、多肽和蛋白類藥物及各種抗癌藥物的運動載體。這類新型藥物載體能夠明顯延長藥物在用藥部位的存留時間，減少給藥次數(shù)，提高生物利用度，降低不良反應(yīng)。但是透明質(zhì)酸穩(wěn)定性稍差，對強酸、強堿、熱、自由基及透明質(zhì)酸酶敏感，容易發(fā)生降解而限制了其應(yīng)用。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，獲得一種優(yōu)良機械強度、特殊流變學(xué)特性、良好穩(wěn)定性及靶向性的藥物載體，本發(fā)明公開了一種復(fù)合藥物載體及其制備方法。技術(shù)方案：一種復(fù)合藥物載體，所述藥物載體以透明質(zhì)酸為基體，基體內(nèi)部負載有復(fù)合材料；所述復(fù)合材料為絲膠蛋白、殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比4～9:1～5:3～7縮合的產(chǎn)物。優(yōu)選的，所述復(fù)合材料為絲膠蛋白、殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比7:3:5縮合的產(chǎn)物。一種復(fù)合藥物載體的制備方法，包含以下步驟：（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為2～16%的透明質(zhì)酸基體溶液；（2）絲膠蛋白粗提取：采用雙蒸水將蠶繭清洗干凈，然后置于2～5mmol/l碳酸氫鈉水溶液中浸泡1～4小時，室溫晾干；再將絲膠蛋白置于0.04～0.09mmol/l的碳酸鈉水溶液中，然后轉(zhuǎn)至高壓滅菌鍋內(nèi)，121℃滅菌50～80分鐘，其中絲膠蛋白與碳酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:2～4；（3）絲膠蛋白提純：將步驟（2）的產(chǎn)物離心后去上清，將上清液置于透析袋中，透析袋放置在雙蒸水中，室溫條件下透析26～40小時，每隔2小時換一次水，取透析后的絲膠蛋白置于4～8℃保存；（4）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于1.5～4mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為1.5～4.6%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中，室溫混合均勻后向其中加入步驟（3）提純的絲膠蛋白，500～800rpm攪拌反應(yīng)8～14小時；（5）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，20～30滴/小時，500rpm攪拌5～9小時。優(yōu)選的，步驟（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為13%的透明質(zhì)酸基體溶液。優(yōu)選的，步驟（2）絲膠蛋白粗提?。翰捎秒p蒸水將蠶繭清洗干凈，然后置于3.5mmol/l碳酸氫鈉水溶液中浸泡2.5小時，室溫晾干；再將絲膠蛋白置于0.07mmol/l的碳酸鈉水溶液中，然后轉(zhuǎn)至高壓滅菌鍋內(nèi)，121℃滅菌65分鐘，其中絲膠蛋白與碳酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:3。優(yōu)選的，步驟（3）絲膠蛋白提純：將步驟（2）的產(chǎn)物離心后去上清，將上清液置于透析袋中，透析袋放置在雙蒸水中，室溫條件下透析35小時，每隔2小時換一次水，取透析后的絲膠蛋白置于6℃保存。優(yōu)選的，步驟（4）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于3.2mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為3.8%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中，室溫混合均勻后向其中加入步驟（3）提純的絲膠蛋白，650rpm攪拌反應(yīng)12小時。優(yōu)選的，步驟（5）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，26滴/小時，500rpm攪拌7小時。有益效果：（1）本發(fā)明所述復(fù)合藥物載體具有一系列的優(yōu)良特性，如：適當(dāng)?shù)臋C械強度、特殊流變學(xué)特性、良好穩(wěn)定性及靶向性；（2）本發(fā)明所述復(fù)合藥物載體穩(wěn)定性好，對強酸、強堿、熱、自由基及透明質(zhì)酸酶不敏感。具體實施方式實施例1一種復(fù)合藥物載體，所述藥物載體以透明質(zhì)酸為基體，基體內(nèi)部負載有復(fù)合材料；所述復(fù)合材料為絲膠蛋白、殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比4:1:3縮合的產(chǎn)物。一種復(fù)合藥物載體的制備方法，包含以下步驟：（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為2%的透明質(zhì)酸基體溶液；（2）絲膠蛋白粗提?。翰捎秒p蒸水將蠶繭清洗干凈，然后置于2mmol/l碳酸氫鈉水溶液中浸泡1小時，室溫晾干；再將絲膠蛋白置于0.04mmol/l的碳酸鈉水溶液中，然后轉(zhuǎn)至高壓滅菌鍋內(nèi)，121℃滅菌50分鐘，其中絲膠蛋白與碳酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:2；（3）絲膠蛋白提純：將步驟（2）的產(chǎn)物離心后去上清，將上清液置于透析袋中，透析袋放置在雙蒸水中，室溫條件下透析26小時，每隔2小時換一次水，取透析后的絲膠蛋白置于4℃保存；（4）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于1.5mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為1.5%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中，室溫混合均勻后向其中加入步驟（3）提純的絲膠蛋白，500rpm攪拌反應(yīng)8小時；（5）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，20滴/小時，500rpm攪拌5小時。實施例2一種復(fù)合藥物載體，所述藥物載體以透明質(zhì)酸為基體，基體內(nèi)部負載有復(fù)合材料；所述復(fù)合材料為絲膠蛋白、殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比7:3:5縮合的產(chǎn)物。一種復(fù)合藥物載體的制備方法，包含以下步驟：（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為13%的透明質(zhì)酸基體溶液；（2）絲膠蛋白粗提?。翰捎秒p蒸水將蠶繭清洗干凈，然后置于3.5mmol/l碳酸氫鈉水溶液中浸泡2.5小時，室溫晾干；再將絲膠蛋白置于0.07mmol/l的碳酸鈉水溶液中，然后轉(zhuǎn)至高壓滅菌鍋內(nèi)，121℃滅菌65分鐘，其中絲膠蛋白與碳酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:3；（3）絲膠蛋白提純：將步驟（2）的產(chǎn)物離心后去上清，將上清液置于透析袋中，透析袋放置在雙蒸水中，室溫條件下透析35小時，每隔2小時換一次水，取透析后的絲膠蛋白置于6℃保存；（4）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于3.2mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為3.8%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中，室溫混合均勻后向其中加入步驟（3）提純的絲膠蛋白，650rpm攪拌反應(yīng)12小時；（5）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，26滴/小時，500rpm攪拌7小時。實施例3一種復(fù)合藥物載體，所述藥物載體以透明質(zhì)酸為基體，基體內(nèi)部負載有復(fù)合材料；所述復(fù)合材料為絲膠蛋白、殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比9:5:7縮合的產(chǎn)物。一種復(fù)合藥物載體的制備方法，包含以下步驟：（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為16%的透明質(zhì)酸基體溶液；（2）絲膠蛋白粗提取：采用雙蒸水將蠶繭清洗干凈，然后置于5mmol/l碳酸氫鈉水溶液中浸泡4小時，室溫晾干；再將絲膠蛋白置于0.09mmol/l的碳酸鈉水溶液中，然后轉(zhuǎn)至高壓滅菌鍋內(nèi)，121℃滅菌80分鐘，其中絲膠蛋白與碳酸鈉水溶液的質(zhì)量比為1:4；（3）絲膠蛋白提純：將步驟（2）的產(chǎn)物離心后去上清，將上清液置于透析袋中，透析袋放置在雙蒸水中，室溫條件下透析40小時，每隔2小時換一次水，取透析后的絲膠蛋白置于8℃保存；（4）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于4mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為4.6%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中，室溫混合均勻后向其中加入步驟（3）提純的絲膠蛋白，800rpm攪拌反應(yīng)14小時；（5）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，30滴/小時，500rpm攪拌9小時。對照例1與實施例2的區(qū)別在于，所述復(fù)合材料中不含絲膠蛋白，具體如下：一種復(fù)合藥物載體，所述藥物載體以透明質(zhì)酸為基體，基體內(nèi)部負載有復(fù)合材料；所述復(fù)合材料為殼聚糖和聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽按質(zhì)量比3:5縮合的產(chǎn)物。一種復(fù)合藥物載體的制備方法，包含以下步驟：（1）基體溶液配制：將透明質(zhì)酸溶于去離子水中，配制質(zhì)量分數(shù)為13%的透明質(zhì)酸基體溶液；（2）復(fù)合材料制備：將殼聚糖溶于3.2mmol/l的檸檬酸水溶液中，配制質(zhì)量分數(shù)為3.8%的殼聚糖溶液，將聚乙烯醇/苯乙烯基吡啶鹽加入殼聚糖溶液中；（3）成品：室溫條件下，將步驟（4）制備的復(fù)合材料滴加至基體溶液中，26滴/小時，500rpm攪拌7小時。對實施例1～3和對照例1制備獲得的復(fù)合藥物載體進行性能檢測，結(jié)果如下表所示：實施例1實施例2實施例3對照例1載藥量/%36.542.638.95.6zeta電位/mv11.315.813.22.37天藥物釋放量/%32605310適宜ph5.6～8.43.2～8.94.8～8.67.2～7.9當(dāng)前第1頁12