本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及一種治療高脂血癥的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：高脂血癥是血液中脂蛋白異常增加的一種癥狀，它與一些疾病如動(dòng)脈硬化和心肌梗塞密切相關(guān)，因此其治療被認(rèn)為十分重要。血液脂蛋白的主要成分是膽固醇和甘油三酯，在許多病例中，高血脂患者的血液膽固醇水平不僅增加，還伴隨著甘油三酯的增加。本發(fā)明從現(xiàn)有的多種治療高脂血癥的藥物出發(fā)，研制出有效安全的治療高脂血癥的創(chuàng)新藥。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種治療高脂血癥的藥物組合物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種治療高脂血癥的藥物組合物，所述藥物組合物由有效藥物成分以及藥學(xué)上可接受的其他輔助成分組成。優(yōu)選地，所述有效藥物成分具有下式結(jié)構(gòu)：其中r1、r2、r3、r4為相同或不同的基團(tuán)。優(yōu)選地，r1、r2、r3、r4均可以從鹵素、烷基、烷氧基、羥基、氫中任意選擇。優(yōu)選地，r1獨(dú)立地為羥基、r2獨(dú)立地為甲基、r3獨(dú)立地為甲氧基、r4獨(dú)立地為甲基。更優(yōu)選地，所述藥學(xué)上可接受的其他輔助成分可以選自一種或多種藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑、賦形劑。更優(yōu)選地，所述藥物組合物可以是任何一種藥學(xué)上的常規(guī)劑型，如膠囊劑或顆粒劑或粉末劑或丸劑。本發(fā)明還提供化合物在制備治療高脂血癥的藥物中的用途，所述化合物具有下列結(jié)構(gòu)：其中r1、r2、r3、r4為相同或不同的基團(tuán)。優(yōu)選地，r1、r2、r3、r4均可以從鹵素、烷基、烷氧基、羥基、氫中任意選擇。優(yōu)選地，r1獨(dú)立地為羥基、r2獨(dú)立地為甲基、r3獨(dú)立地為甲氧基、r4獨(dú)立地為甲基。使用本發(fā)明藥物后發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明藥物能夠有效減緩和降低高脂血癥患者肝臟脂肪變性的速度和程度，對(duì)高脂血癥患者有一定的治療和恢復(fù)作用，服用一段時(shí)間后可使高脂血癥患者血清脂質(zhì)向正?；椒较蜣D(zhuǎn)變，并且tg和hdl可以恢復(fù)至正常水平，進(jìn)而降低冠心病的風(fēng)險(xiǎn)。附圖說(shuō)明圖1是不同劑量本發(fā)明藥物治療高脂血癥大鼠肝臟切片效果(he，×20)。圖2是不同劑量本發(fā)明藥物對(duì)高脂血癥大鼠肝臟組織中accl、hsl蛋白表達(dá)的影響。a.正常組；b.模型組；c.洛伐他汀組；d.本發(fā)明藥物高劑量組；e.本發(fā)明藥物中劑量組；f本發(fā)明藥物低劑量組。具體實(shí)施方式為了使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明藥物的治療效果和機(jī)制，以下結(jié)合實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明藥物的表征1h-nmr(cdcl3)δ:7.90(1h,dd,j＝8.6,2.3hz),7.83-7.80(1h,m),7.48(1h,t,j＝8.2hz),7.13-7.06(2h,m),6.92(1h,d,j＝8.6hz),5.35(2h,s),3.94(3h,s),3.60(3h,s),2.02(3h,s)。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明藥物治療高脂血癥的效果體重180g～200g的健康成年雄性sd大鼠在空調(diào)動(dòng)物飼養(yǎng)室中同室群籠飼養(yǎng)，自由采食，自由飲水。室溫20℃±2℃濕度45％-60％?；A(chǔ)飼料配方：玉米35％、麥麩25％、豆粕25％、魚(yú)粉8％.酵母2％、骨粉2％、乳清粉1％、鹽0.5％、菜油0.5％、礦物添加劑0.1％、復(fù)合維生素0.03％、蛋氨酸0.13％、賴(lài)氨酸0.07％，魚(yú)肝油0.05％。高脂飼料配方：基礎(chǔ)飼料78.8％、豬油10％、蛋黃粉10％、膽固醇1％、膽鹽0.2％。實(shí)驗(yàn)大鼠組別設(shè)計(jì)所有大鼠全部飼喂基礎(chǔ)飼料，自由采食、飲水，喂養(yǎng)1周，以適應(yīng)環(huán)境和飼喂方式。1周后根據(jù)總膽固醇tc基礎(chǔ)值水平，將大鼠分別隨機(jī)分為6組，每組10只大鼠，具體分為：正常對(duì)照組、高脂模型組、洛伐他汀組、本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組。7d適應(yīng)期結(jié)束后進(jìn)入高脂模型建立期：正常對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料和蒸餾水，其余各組均飼喂高脂飼料和蒸餾水，共培養(yǎng)45d，使大鼠具有高脂血癥。給藥治療：45d后，本發(fā)明藥物低、中、高劑量組每日經(jīng)口一次性灌胃量分別為0.5、1.0、2.0mg/kg實(shí)施例1藥物，正常對(duì)照組和高脂模型組灌胃等量蒸餾水。洛伐他汀1.0mg/kg作為陽(yáng)性對(duì)照組大鼠的灌胃劑量。給藥45d。待測(cè)血清制備采血前禁食12h，乙醚麻醉，眼眶采血。收集血樣室溫放置1h后，在2000～2500r/min低速離心機(jī)上離心15min，用移液器吸出上層血清0.5ml分裝于離心管中，待測(cè)。大鼠血清中血脂指標(biāo)的測(cè)定：采用全自動(dòng)生化儀分析。待測(cè)肝臟及脂肪組織的制備肝臟、附睪及腸系膜脂肪組織的制備：試驗(yàn)結(jié)束時(shí)乙醚麻醉，大動(dòng)脈放血處死實(shí)驗(yàn)大鼠，解剖，摘取大鼠的肝臟組織、腸系膜脂肪組織、附睪脂肪組織迅速放入液氮中冷凍后，-80℃保存?zhèn)溆?。肝臟病理切片的制備：將大鼠脫頸椎處死，解剖，摘取新鮮肝組織稱(chēng)重后，從最大葉距邊緣5mm處取肝臟組織，并固定于10％的甲醛溶液中。指標(biāo)的測(cè)定脂代謝關(guān)鍵酶活性的測(cè)定：激素敏感性脂肪酶(hsl)、脂肪酸合成酶(fas)、乙酰輔酶a羧化酶(acc)活性測(cè)定采用美國(guó)rd公司的elisa檢測(cè)試劑盒肝臟病理變化：將固定好的肝臟組織脫水，石蠟包埋，切片，he(蘇木精-伊紅染色)染色，顯微鏡觀(guān)察。脂肪代謝關(guān)鍵酶蛋白表達(dá)量測(cè)定：采用hslantibody(1:500)，fasnantibody(1:600)，rabbitantiacclpolyclonalantibody(1:1000)，alphatubulinantibody(1:10000)，β-actinantibody(1:10000)。采用bca試劑盒測(cè)定蛋白濃度，采用sds-page電泳，雜交時(shí)，用pbs或是封閉液稀釋一抗：hslantibody(1:500)，fasnantibody(1:600)，rabbitantiacclpolyclonalantibody(1:1000),alphatubulinantibody(1:1000)，于37℃搖2-3h或是4℃搖過(guò)夜。用含1％tween-20的pbs洗膜三次，每次10min。加入用pbs或是封閉液稀釋的相應(yīng)的二抗：hrp-goatanti-rabbitigg(1:10000)，4℃過(guò)夜。再用含1％tween-20的pbs洗膜三次，每次10min。按ecl顯色試劑盒說(shuō)明書(shū)顯色、定影。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差’，表示，所有數(shù)據(jù)先進(jìn)行g(shù)rubbs檢驗(yàn)，以排除過(guò)失誤差；經(jīng)g檢驗(yàn)合格的數(shù)據(jù)，采用spss16.0，用鄧肯氏法進(jìn)行顯著性分析。不同劑量本發(fā)明藥物對(duì)高脂血癥大鼠血清脂質(zhì)的影響從下表中可以看出，不同組別大鼠血脂指標(biāo)tc、tg、ldl、hdl在適應(yīng)期沒(méi)有顯著性差異，飼喂高脂飼料45天后，與飼喂基礎(chǔ)飼料的正常對(duì)照組相比，其他飼喂高脂飼料的組大鼠的血脂指標(biāo)tc、tg、ldl均顯著高于正常對(duì)照組(p<0.05)，hdl指標(biāo)則顯著低于正常對(duì)照組(p<0.05)，說(shuō)明高脂模型建立成功。從45天的本發(fā)明藥物干預(yù)結(jié)果看(見(jiàn)下表)，本發(fā)明藥物高劑量組大鼠血清指標(biāo)tc、tg、ldl均顯著低于高脂模型組(p<0.01)，hdl顯著高于高脂模型組(p<0.01)，且tg與hdl與正常對(duì)照組無(wú)顯著性差異。洛伐他汀組(陽(yáng)性對(duì)照)的血清指標(biāo)tc、tg、ldl、hdl與高脂模型組有顯著性差異，與正常對(duì)照組無(wú)顯著性差異。本發(fā)明藥物高劑量組的降血脂效果雖不及洛伐他汀，但也證明了本發(fā)明藥物高劑量組具有較強(qiáng)的調(diào)節(jié)血脂代謝的作用。本發(fā)明藥物中、低劑量組大鼠血清指標(biāo)tc、ldl、hdl與高脂模型組無(wú)極顯著差異，但本發(fā)明藥物中、低劑量組均提高了hdl含量水平。試驗(yàn)結(jié)果表明，高劑量本發(fā)明藥物調(diào)節(jié)血脂代謝的效果優(yōu)于中、低劑量本發(fā)明藥物。不同劑量本發(fā)明藥物對(duì)高脂血癥大鼠肝臟的影響在正常情況下，除脂肪細(xì)胞外，其他細(xì)胞在光鏡下一般不見(jiàn)脂滴，若這些細(xì)胞漿中出現(xiàn)脂滴或脂滴增多，則稱(chēng)為脂肪變性，簡(jiǎn)稱(chēng)脂變。由圖1a可見(jiàn)，正常對(duì)照組肝臟組織切片顯示肝臟血竇明顯，肝細(xì)胞圍繞中央靜脈呈放射狀排列，肝細(xì)胞呈六邊形，胞質(zhì)內(nèi)容豐富，細(xì)胞周界清楚；圖1b顯示，肝細(xì)胞中出現(xiàn)大量脂肪滴空泡，散布在整個(gè)胞漿中，部分已融合成大空泡，占據(jù)整個(gè)胞漿位置，將細(xì)胞核擠壓至一邊，與脂肪細(xì)胞相似，且肝細(xì)胞周界模糊不清，細(xì)胞彌漫腫脹，肝細(xì)胞排列紊亂，胞漿淡染、疏松。說(shuō)明高脂模型大鼠肝臟脂肪細(xì)胞變性嚴(yán)重。從圖1d(本發(fā)明藥物高劑量組)來(lái)看，肝臟組織結(jié)構(gòu)基本正常，未見(jiàn)有脂肪變性及其它病理變化；而圖1e(本發(fā)明藥物中劑量組)、圖if(本發(fā)明藥物低劑量組)顯示，肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)數(shù)量不等的小脂肪滴空泡，但肝細(xì)胞索排列仍呈明顯放射狀，與圖1a相比，有輕微的脂肪變性，但與圖1b相比，程度較輕。從肝臟切片結(jié)果來(lái)看，高劑量本發(fā)明藥物能有效減緩和降低高脂血癥大鼠肝臟脂肪變性的速度和程度。不同劑量本發(fā)明藥物對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝關(guān)鍵酶活性的影響從下表可以看出，本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、洛伐他汀組以及高脂模型組大鼠肝臟組織中的hsl酶活性差異不顯著(p>0.05)，但他們顯著高于正常對(duì)照組、本發(fā)明藥物中劑量組以及本發(fā)明藥物低劑量組(p<0.05)，而正常對(duì)照組、本發(fā)明藥物中劑量組以及本發(fā)明藥物低劑量組的hsl酶活性差異不顯著(p>0.05)。本發(fā)明藥物高劑量組的hsl酶活性較高脂模型組提高了13.2％。從總體變化看，肝臟組織中的hsl活性提高并不明顯，這與肝臟組織hsl蛋白表達(dá)變化是一致的。從附睪組織中的hsl活性變化看，本發(fā)明藥物高劑量組以及洛伐他汀組的hsl活性極顯著高于高脂模型組(p<0.01)，與正常對(duì)照組無(wú)極顯著差異，而本發(fā)明藥物中劑量組和本發(fā)明藥物低劑量組與高脂模型組也無(wú)極顯著差異。說(shuō)明本發(fā)明藥物高劑量有助于提高高脂血癥大鼠附睪組織中的hsl酶活性。從腸系膜組織中的hsl活性變化看，本發(fā)明藥物高劑量組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組以及洛伐他汀組的hsl活性均極顯著高于高脂模型組和正常對(duì)照組(p<0.01)。說(shuō)明本發(fā)明藥物與洛伐他汀一樣能夠提高高脂血癥大鼠腸系膜組織中hsl的酶活性。下表顯示，在肝臟組織中本發(fā)明藥物高劑量組的乙酰輔酶a羧化酶(acc)活性極顯著低于高脂模型組、本發(fā)明藥物中劑量組、本發(fā)明藥物低劑量組以及正常對(duì)照組(p<0.01)，而其他組之間無(wú)極顯著差異。在附睪組織，本發(fā)明藥物高劑量組acc活性極顯著低于其他組別(p<0.01)，高脂模型組則顯著高于其他組別(p<0.01)。在腸系膜組織，本發(fā)明藥物高劑量組acc活性也極顯著低于其他組別(p<0.01)本發(fā)明藥物低劑量組也顯著低于高脂模型組(p<0.01)，但顯著高于正常對(duì)照組(p<0.01)。因此，高劑量本發(fā)明藥物有助于抑制高脂血癥大鼠脂肪組織乙酰輔酶a羧化酶活性(p<0.01)，這與acc1蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)是一致的。從下表還可看出，本發(fā)明藥物有助于抑制高脂血癥大鼠肝臟組織fas的活性(p<0.05)，且本發(fā)明藥物中劑量組和本發(fā)明藥物低劑量組抑制效果顯著高于其他組別(p<0.05)。但在附睪組織中，高劑量本發(fā)明藥物以及洛伐他汀均顯著抑制fas酶活性(p<0.01)，且高脂模型組的fas酶活顯著高于正常對(duì)照組(p<0.01)，本發(fā)明藥物中劑量組和本發(fā)明藥物低劑量組的fas與高脂模型組無(wú)顯著性差異。在腸系膜組織中，本發(fā)明藥物各組與洛伐他汀組的fas活性無(wú)顯著差異(p>0.05)，但顯著低于高脂模型組(p<0.05)?？傮w上看，高劑量本發(fā)明藥物能夠顯著的抑制高脂血癥大鼠脂肪組織中fas酶活性。脂質(zhì)代謝關(guān)鍵酶蛋白的表達(dá)分析不同劑量本發(fā)明藥物對(duì)高脂血癥大鼠肝臟組織中acc1，hsl蛋白表達(dá)的影響見(jiàn)圖2。采用imagej軟件，測(cè)定條帶光密度值，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用目的蛋白條帶光密度值與內(nèi)參條帶光密度值的比值表示，結(jié)果見(jiàn)下表。westernblot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，高劑量本發(fā)明藥物有上調(diào)hsl蛋白表達(dá)、下調(diào)acc1蛋白表達(dá)的作用。組別hslaccl正常1.4965±0.0860.6846±0.187模型0.7386±0.0941.5777±0.264洛伐他汀1.4052±0.3200.9544±0.250高劑量1.2721±0.3360.9556±0.308中劑量1.2754±0.0611.2550±0.245低劑量0.8224±0.2411.2540±0.171當(dāng)前第1頁(yè)12