本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及一種治療免疫性流產(chǎn)的藥物組合物。

背景技術(shù)：

自然流產(chǎn)是妊娠早期常見(jiàn)的并發(fā)癥，發(fā)生率約占全部妊娠的15-20％，威脅母嬰健康和社會(huì)穩(wěn)定。近年來(lái)，自然流產(chǎn)率在全球呈現(xiàn)了逐年上升的變化趨勢(shì)，引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的深切關(guān)注。由于我國(guó)目前的二孩政策，育齡夫婦的數(shù)量尤為可觀，因此研發(fā)抗女性自然流產(chǎn)的藥物對(duì)于治療和預(yù)防免疫性自然流產(chǎn)來(lái)說(shuō)刻不容緩。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種治療免疫性流產(chǎn)的藥物組合物。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種治療免疫性流產(chǎn)的藥物組合物，所述藥物組合物由一定量的有效藥物成分以及藥學(xué)上常用的載體和輔料組成。其中有效藥物成分的結(jié)構(gòu)為：

其中

r1獨(dú)立地選自：h、烷基或鹵素；

優(yōu)選地，r1為f。

更優(yōu)選地，所述有效藥物成分的含量為18-28mg。

更優(yōu)選地，所述藥物組合物可以是任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型

本發(fā)明還提供化合物在制備治療免疫性流產(chǎn)的藥物中的用途，所述化合物具有下列結(jié)構(gòu)：

其中

r1獨(dú)立地選自：h、烷基或鹵素；

優(yōu)選地，r1為f。

從治療效果上來(lái)看，本發(fā)明所述的治療免疫性流產(chǎn)的藥物組合物具有抗免疫性自然流產(chǎn)的作用，使用藥物之后可以減少孕婦發(fā)生自然流產(chǎn)的可能性，是治療免疫性流產(chǎn)較為滿意的藥物。從作用機(jī)制上來(lái)看，本發(fā)明藥物對(duì)于自身免疫性流產(chǎn)的治療預(yù)防具有特異性強(qiáng)，靈敏度高的優(yōu)越性。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)的闡述，測(cè)定本發(fā)明藥物對(duì)模型小鼠胎盤(pán)組織中關(guān)鍵分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響，從免疫角度揭示本發(fā)明藥物的作用機(jī)制及最后的治療效果。

實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明藥物的表征

¹hnmr(cdcl3,300mhz)δ4.96(s,1h),4.80(s,1h),3.67(s,3h),2.69-2.61(m,1h),2.33-2.24(m,1h),2.11-2.07(m,2h),1.99-1.95(m,2h),1.58-1.34(m,4h)。

實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明藥物對(duì)于免疫性流產(chǎn)的治療效果

分組、造模與給藥

將60只雌性balb/c小鼠隨機(jī)為6組，每組10只，分別為空白對(duì)照組、模型組、阿司匹林組(陽(yáng)性對(duì)照，20mg/ml)和本發(fā)明藥物低、中、高劑量組(給藥劑量分別為10、20、40mg/ml)。除空白對(duì)照組外，其余各組小鼠參照文獻(xiàn)(tolomeot,ricodesouzaa,rotere,etal.tcellsdemonstrateath1-biasedresponsetonativebeta2-glycoproteiniinamurinemodelofanti-phospholipidantibodyinduction[j].autoimmunity,2009,42(4)：292-295.)中方法以人β2-糖蛋白ⅰ為免疫原建立抗磷脂抗體(apa)陽(yáng)性流產(chǎn)小鼠模型：將β2-糖蛋白ⅰ溶于無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(pbs)中，調(diào)整質(zhì)量濃度為400μg/ml。從實(shí)驗(yàn)第1天開(kāi)始ip人β2-糖蛋白ⅰ與弗氏完全佐劑(cfa)體積比為1：1的混合液50μl；實(shí)驗(yàn)第8天以弗氏不完全佐劑(ifa)代替cfa加強(qiáng)免疫1次，劑量同第1次免疫。于實(shí)驗(yàn)第18天，各組♀小鼠與♂小鼠以2：1的比例合籠，自合籠之日起，每天早上8：00和下午14：00分別觀察1次，若觀察到角化細(xì)胞中夾有大量精子和/或見(jiàn)到陰栓則計(jì)為妊娠第0.5天。從妊娠第1天起各給藥組小鼠均按0.1ml/10gig給藥，空白對(duì)照組和模型組小鼠ig等體積蒸餾水，每天1次，連續(xù)9d。在妊娠第9.5天時(shí)頸椎脫臼法處死小鼠，留取胎盤(pán)組織進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測(cè)定。

rt-pcr法測(cè)定小鼠胎盤(pán)組織toll樣受體4(tlr4)、髓樣分化蛋白2(md2)、髓樣分化因子88(myd88)、核因子(nf-κb)mrna表達(dá)水平

采用trizol液處理剪碎的胎盤(pán)組織并提取總rna,根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cdna，以cdna為模版進(jìn)行擴(kuò)增。反應(yīng)體系：real-timepcrmastermix混合液10μl，上、下游引物各0.4μl,cdna模板2μl，滅菌雙蒸水7.2μl，體系共20μl。在基因表達(dá)的半定量分析中，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(gapdh)為內(nèi)參，通過(guò)與gapdh表達(dá)量比較實(shí)現(xiàn)待測(cè)基因表達(dá)量的標(biāo)準(zhǔn)化。反應(yīng)條件：擴(kuò)增階段為95℃5min；95℃15s；60℃60s，共40個(gè)循環(huán)；溶解曲線階段為95℃15s；60℃1min；95℃15s。用rt-pcr系統(tǒng)自帶軟件進(jìn)行溶解曲線分析，以2^-δδct法(李莎莎，張義軍，李洪利，等.非小細(xì)胞癌中mtap蛋白及基因表達(dá)水平的檢測(cè)[j].中國(guó)腫瘤雜志，2011,14(2)：151-155.)計(jì)算目的基因mrna的相對(duì)表達(dá)量?；蛞镄蛄屑爱a(chǎn)物長(zhǎng)度見(jiàn)下表。

免疫組化法測(cè)定小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κb蛋白表達(dá)水平

常規(guī)制備小鼠胎盤(pán)組織石蠟切片。常規(guī)脫蠟、脫水，pbs沖洗3次，每次3min；3％雙氧水(h2o2)常溫孵育15min,pbs沖洗3次，每次3min；3％牛血清白蛋白(bsa)封閉30min后加入相應(yīng)一抗，濕盒4℃孵育過(guò)夜，pbs沖洗3次，每次5min；加入50μl生物素標(biāo)記的二抗，室溫孵育20min，pbs沖洗3次，每次5min；加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液，室溫孵育20min后pbs沖洗3次，每次5min；加入二氨基聯(lián)苯胺(dab)顯色液，室溫下顯色2～5min，鏡下控制；蘇木精復(fù)染，常規(guī)脫水、透明、封片。陽(yáng)性產(chǎn)物均定位于細(xì)胞漿，以細(xì)胞漿著色呈棕褐色為陽(yáng)性細(xì)胞。以計(jì)算機(jī)圖像分析軟件(ipp)分析tlr4、md2、myd88、nf-κb的積分光密度(iod)值，以此反映陽(yáng)性表達(dá)的強(qiáng)弱。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用spss10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以表示，組間比較采用單因素方差分析。p＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

各組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κbmrna表達(dá)水平測(cè)定結(jié)果

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κbmrna表達(dá)水平均明顯升高(p＜0.01)；與模型組比較，阿司匹林組和本發(fā)明藥物低劑量組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κbmrna表達(dá)水平均明顯降低(p＜0.01)，本發(fā)明藥物中劑量組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88mrna表達(dá)水平降低(p＜0.05或p＜0.01)，本發(fā)明藥物高劑量組上述指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；與阿司匹林組比較，本發(fā)明藥物低劑量組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κbmrna表達(dá)水平降低更為明顯，其中tlr4、md2mrna表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)，具體結(jié)果見(jiàn)下表。

注：與空白對(duì)照組比較，^**p<0.01；與模型組比較，^#p<0.05,^##p<0.01；與阿司匹林組比較，^δδp<0.01。

各組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κb蛋白表達(dá)水平測(cè)定結(jié)果

與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κb蛋白表達(dá)水平明顯升高(p＜0.01)；與模型組比較，各給藥組小鼠胎盤(pán)組織tlr4、md2、myd88、nf-κb蛋白表達(dá)水平不同程度地降低，除本發(fā)明藥物高劑量組小鼠胎盤(pán)組織md2、myd88蛋白表達(dá)水平降低不顯著外其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05或p＜0.01)；與阿司匹林組比較，本發(fā)明藥物低劑量組小鼠胎盤(pán)組織中md2、myd88表達(dá)水平明顯降低(p＜0.05)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)下表。

注：與空白對(duì)照組比較，^**p＜0.01；與模型組比較，^#p<0.05,^##p<0.01；與阿司匹林組比較，^δp<0.05。