專利名稱：：自身免疫性肝炎的免疫療法和預(yù)防的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及肝炎和其他自身免疫性疾病的免疫療法和預(yù)防。具體地說，本發(fā)明涉及一種組合物、制備所述組合物的方法以及使用方法。
背景技術(shù)：
：肝炎可以來源于病毒。病毒來源的肝炎與在人類和其他宿主物種的肝臟和其他細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的五種病毒有關(guān)，它們通常表示為甲型到戊型(英文為A到E型)。最近還發(fā)現(xiàn)了其他新的肝炎病毒。在下文中將對這些病毒進(jìn)行簡要的描述以為本發(fā)明提供背景知識。甲型肝炎病毒(HAV)是一種微小的、球形的并具有特別抗性的RNA病毒。它優(yōu)先通過糞口途徑傳播，并只在肝臟中復(fù)制。感染通常是自限性的，然而個(gè)體案例也可能具有較長的甚至復(fù)發(fā)的過程。然而未觀察到真正的慢性感染。HAV在世界范圍內(nèi)分布。在衛(wèi)生條件較差的國家，該病毒存在于環(huán)境中并且?guī)缀?00%的人口在兒童時(shí)期獲得過感染。隨著年齡的增長，感染在臨床上變得越來越明顯，在青春期以及青春期以后，超過80%的患者出現(xiàn)黃疸，在一些情況下甚至出現(xiàn)突發(fā)性和致命性肝炎。預(yù)防措施依賴于嚴(yán)格的個(gè)人衛(wèi)生和飲食衛(wèi)生以及接種滅活的甲型肝炎疫苗。這些疫苗具有高度的免疫原性，可誘導(dǎo)針對甲型肝炎的長時(shí)間的保護(hù)。目前還沒有特異性的抗病毒療法。乙型肝炎病毒(HBV)是較大的肝DNA病毒科(hepadnaviridaefamily)中的DNA病毒，在世界范圍內(nèi)感染大約3億5千萬個(gè)個(gè)體，是慢性肝臟疾病和肝細(xì)胞癌的首要致病因素。每年大約有500，000例死亡是由HBV導(dǎo)致的。從1981年以來，血漿來源的乙型肝炎疫苗被廣泛使用。1987年FDA批準(zhǔn)了由MerckSharp&Dohme制造的第一種基因工程乙型肝炎疫苗RecombivaxHB0雖然接種程序已經(jīng)減少了許多國家的HBV發(fā)病率，但它仍然是較大的公共健康問題，尤其是在亞洲和非洲。丙型肝炎病毒(HCV)是黃病毒科中的有包膜RNA病毒，它似乎具有較窄的宿主范圍。只有人類和黑猩猩是已知的易于感染的物種，這兩種物種出現(xiàn)相似的疾病。HCV是另一種全球公共健康問題，感染大約1億7千萬人。WHO估計(jì)每年有三百萬到四百萬人新感染HCV。大約85%的急性感染發(fā)展為HCV的長期存活，大約25%的這些慢性感染個(gè)體發(fā)展為致命性的肝臟疾病。目前沒有預(yù)防性疫苗來預(yù)防該疾病，也沒有特異性的抗病毒藥物來控制HCV復(fù)制。丁型肝炎病毒(HDV)是一種亞病毒衛(wèi)星(subviralsatellite)，乙型肝炎病毒(HBV)是它的天然輔助病毒。在進(jìn)入肝細(xì)胞后，它利用宿主的細(xì)胞結(jié)構(gòu)通過雙滾環(huán)機(jī)制來復(fù)制。HDV最常通過與污染的血液和體液接觸而傳染，這與HBV感染相似。全球大約5%的4HBV攜帶者也同時(shí)感染了HDV，導(dǎo)致全球總共1千至1千5百萬HDV攜帶者。HDV感染可以與HBV感染同時(shí)發(fā)生(同時(shí)感染)或者發(fā)生于已經(jīng)感染了HBV的患者中(重疊感染)。在旱獺模型中試驗(yàn)的接種手段誘導(dǎo)了特異性的B細(xì)胞和T細(xì)胞應(yīng)答，但仍無法防止HDV感染。治療HDV也是個(gè)問題，并且沒有有效的療法來消除該病毒。戊型肝炎病毒(HEV)是一種小RNA病毒，是戊型肝炎(一種急性病毒肝炎)的病原。HEV是肝炎病毒科Ofepeviridae)中的肝炎病毒屬Ofepevirus)中的唯一成員。HEV是熱帶和亞熱帶國家中暴發(fā)和散發(fā)的病毒肝炎病例中的主要原因，但在工業(yè)化國家中不常見?？偹劳雎试谀贻p成人和孕婦中分別為0.5-3%和15-20%。該病毒具有糞口傳播循環(huán)，通過環(huán)境污染、主要通過飲用水的污染來傳染。近來通過研究從動物物種中分離HEV樣病毒也表明，該病毒可通過動物傳播，例如通過豬傳播。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了適于繁殖該病毒的細(xì)胞培養(yǎng)體系，已經(jīng)記載了對于預(yù)防性HEV疫苗的初步的、有前景的試驗(yàn)。庚型肝炎病毒(HGV)被發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)90年代晚期。在通常人群中的患病率較高，大約2%。HGV是單鏈RNA病毒，屬于黃病毒科(flavivirusfamily)。HGV不同于HCV。新發(fā)現(xiàn)的黃病毒物質(zhì)(flavivirisagent)GBV-A和GBV-B也不同于HGV，而GBV-C表現(xiàn)為一種HGV的分離株。已經(jīng)提出將GBV-C/HGV菌株分為至少三種基因型(西非、歐洲/北美、亞洲)。HGV基因組的結(jié)構(gòu)類似于HCV。HGV在外周血細(xì)胞中復(fù)制，直到目前還未觀察到在肝細(xì)胞中的復(fù)制。許多涉及HGV的研究分析表明，該病毒是親淋巴性的。已經(jīng)確定HGV或GBV-C影響HIV感染患者的進(jìn)程和預(yù)后。直到現(xiàn)在，由于GBV-C經(jīng)常在同時(shí)感染、血液疾病和膽病中出現(xiàn)，所以沒有理由表明它是沒有病理學(xué)意義的無害病毒。最近發(fā)現(xiàn)了多種新的肝炎病毒，例如輸血轉(zhuǎn)染的環(huán)狀DNA病毒(TTV)和SEN(SEN-V)，一種源于血液的單鏈無包膜DNA病毒。針對這些病毒，尚無預(yù)防性或治療性疫田ο除了甲型、乙型和戊型肝炎之外，沒有開發(fā)出針對其他病毒的有效的預(yù)防性疫苗，對此類疫苗的需求還未滿足。另外，沒有開發(fā)出針對任何上述肝炎病毒的治療性疫苗，表明對此類疫苗的強(qiáng)烈需求。除了病毒性肝炎之外，還有其他形式的肝炎也具有類似的臨床癥狀，例如乙醇誘導(dǎo)的肝炎或者醫(yī)源性肝炎，即由肝毒性藥物或物質(zhì)誘導(dǎo)。雖然肝炎經(jīng)常由無關(guān)的病毒或其他因素引發(fā)，但它們僅僅是該疾病的誘因。肝炎的主要起因是異常的免疫反應(yīng)攻擊到肝臟并導(dǎo)致發(fā)炎。蛋白質(zhì)、多肽和肽被通稱為抗原，它們通常由注射或其他途徑給藥以避免消化降解。用于治療或預(yù)防的口服抗原是制藥和疫苗工業(yè)多少年來沒有解決的難題?？诜呙珙I(lǐng)域的這種不令人滿意的狀態(tài)由我們在綜述文章中廣泛地記載(Silinetal.,Oralvaccination:whereweare？ExpertOpinionDrugDelivery2007；4:1_18)。本申請人的先前的臨床研究已經(jīng)表明，當(dāng)口服給予肝炎患者時(shí)，熱滅活的肝炎抗原是安全有效的(Batdelgeretal.，OpenlabeltrialoftherapeutichepatitisBvaccineV-5Immunitor(V5)deliveredbyoralroute.LettDrugDesignDiscovery2007;4:540-44;Batdelgeretal.，OpenlabeltrialoftherapeuticimmunizationwithoralV—5Immunitor(V5)vaccineinpatientswithchronichepatitisC.Vaccine2008；262733-2737)。從20世紀(jì)60年代以來，水解的血液制品就已經(jīng)在臨床上使用。此類制品的實(shí)例有Hydroprot、Aminokrovin、Infusarnin、Fibrinosol等,它們是通過在人類或云力物血液中加入酸和葡萄糖制成。它們僅有的給藥途徑是靜脈途徑或直腸灌注，這是由于這些制品在口服給藥時(shí)不起作用，原因是它們在進(jìn)入胃后由于消化過程導(dǎo)致失去生物活性。另外，這些水解產(chǎn)物由酸水解過程產(chǎn)生，主要由氨基酸組成。因此，這些制品不具有任何由氨基酸長序列(如肽和多肽)帶來的抗原性或免疫原性。通常認(rèn)為，用于疫苗組合物的肝炎抗原在低或高pH時(shí)是不穩(wěn)定的或者是沒有生物活性的，將抗原暴露于這些條件是不可取的。然而一些肝炎病毒適于生長在胃腸道中，例如甲型和戊型肝炎，在低PH時(shí)仍保持相當(dāng)?shù)母腥拘?Scholzetal.,AcidstabilityofhepatitisAvirus.JGenVirol,1989Sep；70(Pt9):2481_5)，這主要是因?yàn)樗鼈兪菬o包膜病毒，無包膜病毒在不利環(huán)境中通常比有包膜病毒更加“強(qiáng)壯”。然而其他病毒對低PH和熱處理都更加敏感，在較溫和的條件下失去抗原性(例如參見Rombautetal.,ThermalinactivationoforalpoliovaccinecontributionofRNAandproteininactivation.JVirol19940ct；68(10):6454_7)。因此，當(dāng)前在疫苗領(lǐng)域的主流意見認(rèn)為，水解導(dǎo)致失去抗原性，即失去生物活性，這使得由水解的抗原制成的疫苗完全不起作用，特別是當(dāng)抗原也暴露于高溫環(huán)境中時(shí)(例如參見Nathetal.,StabilityoftherecombinanthepatitisBcoreantigen.JClinMicrobiol1992Jun；30(6)1617-9；NuanualsuwanandCliver.Inactivationofpicornavirusesandcaliciviruses；Part2Inactivation.ThaiJVeterinaryMedicine30S印tember2003；Vol.33No.3，以及其中的參考文獻(xiàn))。當(dāng)前對丙型肝炎的治療標(biāo)準(zhǔn)是給予干擾素α-2a(Roferon-A)和干擾素a-2b(Intron-A)，或者單獨(dú)或者與病毒唑(ribavirin,Copegus,Rebetol)一起給予長效干擾素(PEG-Intron，Pegasys)。治療應(yīng)答依賴于病毒亞型，基因型2和3中有76至80%、而基因型1或4中只有大約40%獲得了持續(xù)的病毒學(xué)應(yīng)答。對于乙型肝炎的最常用的治療方案是給予干擾素α和其長效形式的Pegasys。Glaxo-Wellcome的制品拉米夫定(Iamivudine)(Epivir)在1998年推出。第二種肝炎藥物阿德福韋二匹伏酯(adefovirdipivoxil)(Hepsera,GileadSciences)在2002年9月由FDA批準(zhǔn)。Bristol-MyersSquibb生產(chǎn)的恩替卡韋(Entecavir)(Baraclude)在2005年3月被批準(zhǔn)。最近被批準(zhǔn)的telbivudine(Tyzeka)是另一種核苷類似物，由Idenix開發(fā)。這些藥物通過減少復(fù)制性病毒的量而用作病毒抑制劑，然而通常治療一旦中斷病毒立即復(fù)發(fā)。另外，這些藥物中大多數(shù)具有明顯的副作用或毒性作用。許多患者由于副作用而放棄或拒絕治療。病毒抵抗力是長期抗抗毒化學(xué)療法的另一個(gè)缺點(diǎn)。Larnivudine單一治療導(dǎo)致的抗性(第1年，10-27%；第2年，37-48%；第4年，60-65%)要高于阿德福韋(adefovir)(M1年，0%；第2年，3%；第5年，29%)或者telbivudine(第1年，3-4%；第2年，9-22%)。恩替卡韋(Entecavir)抗性在幼年個(gè)體中罕見(第4年，<1，但在拉米夫定抗性患者中隨時(shí)間增加到43%。因此很明顯，需要更好的治療方式以提高肝炎患者的臨床效果。一種可解決目前在治療肝炎中的缺陷的方法在本發(fā)明中公開，如下文所述。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明不同于通常的觀念，即需要復(fù)雜的組合物來克服在開發(fā)有效的肝炎免疫療法和預(yù)防方法中缺少進(jìn)展的問題。本發(fā)明的特征是一項(xiàng)驚人的發(fā)現(xiàn)，即水解的肝炎病毒抗原在其臨床效能方面并不比常規(guī)的熱滅活病毒抗原差。因此，該組合物可作為用于治療或預(yù)防病毒性肝炎感染或自身免疫性肝炎的疫苗。另一項(xiàng)可增強(qiáng)本發(fā)現(xiàn)的吸引力的特征是要求保護(hù)的組合物在口服劑型中是有效的。為了在生物學(xué)上應(yīng)用，本發(fā)明的一種抗原被埋入或包被在制藥學(xué)上可接受的基質(zhì)中。另外，當(dāng)該組合物通過口服給藥時(shí)，無需免疫佐劑即可產(chǎn)生所需效果。一方面，本發(fā)明包括一種固體口服組合物，包括治療上有效量的部分水解抗原，其中所述的部分水解抗原來自于感染了一種肝炎病毒的供體的體液。該固體口服組合物可方便地制成片劑或丸劑。該體液可包括肝炎病毒或者肝炎病毒抗原。該組合物進(jìn)一步包括埋入例如金屬鹽等基質(zhì)中的異型抗原(alloantigen)或異種抗原(xenoantigen)。在本發(fā)明的另一個(gè)更加寬泛的方面，該組合物包括埋入金屬基質(zhì)中的酸水解的抗原、異型抗原或其組合。水解抗原可用作預(yù)防肝炎感染的免疫治療劑或者預(yù)防性制劑，所述感染例如丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、庚型肝炎病毒(HGV)、丁型肝炎病毒(HDV)、甲型肝炎病毒(HAV)以及其他已知的和有待發(fā)現(xiàn)的肝炎病毒。本發(fā)明也適用于屬于肝炎病毒科(包括蟲媒病毒(flaviviruse))的病毒。具體地說，本發(fā)明涉及一種組合物，以及制備和使用所述組合物的方法。本發(fā)明的第二方面是一種組合物，包括異型抗原和肝炎病毒抗原兩者。這是屬于本發(fā)明的驚人方面的另一個(gè)特征。該特征的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案是一種固體組合物，包括埋入可口服的金屬鹽基質(zhì)中的部分酸水解的異型抗原，其中該異型抗原或異種抗原是埋入二價(jià)金屬鹽基質(zhì)中的人異型抗原，并且優(yōu)選經(jīng)過熱處理。這種組合物的優(yōu)選給藥方式是口服。因此，本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選特征是該組合物優(yōu)選為例如片劑或丸劑等固體口服形式。本發(fā)明的另一方面是制備該組合物的方法，它通常包括部分水解肝炎病毒、肝炎病毒的片段或者異型抗原，將水解產(chǎn)物埋入固體基質(zhì)，并將該基質(zhì)制成適于口服的組合物。在本發(fā)明的另一方面中，水解抗原經(jīng)過熱處理，以使該組合物變得安全并且殺滅任何存留的、未水解的、外來的、可成為感染源的病毒。雖然該步驟很重要，但并不是必需的，因?yàn)樗夂桶襁^程在較高溫度下(至少56°C，優(yōu)選高于80°C)進(jìn)行較長時(shí)間，例如長于2小時(shí)。在本發(fā)明的另一方面中，該組合物在給藥時(shí)沒有免疫佐劑。不僅考慮到該組合物來自身體器官或者體液，如全血或者血漿或者血清，本發(fā)明也考慮到了重組病毒和病毒抗原，例如本領(lǐng)域公知的以及醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中的那些重組病毒和病毒抗原。這些重組病毒或其部分包括構(gòu)成此類抗原的天然存在的氨基酸或核酸序列、與天然存在的序列基本相似的天然存在的序列的衍生物、或者模擬它們的線性或三級結(jié)構(gòu)形式的序列、以及在一種組成中具有多于一種肝炎病毒(如HEV和HCV)的嵌合序列。疫苗的各種形式的這些和其他的變換均被考慮而不受限制，它們在本領(lǐng)域中公知，例如由Silin等記載(Silinetal.,Oralvaccination:whereweare？ExpertOpinionDrugDelivery2007;4:1_18)，該文獻(xiàn)的全部內(nèi)容是本公開的一部分。本發(fā)明的另一方面是一種治療患者的方法，包括向患者給予治療有效量的部分水解的肝炎病毒感染的細(xì)胞、肝炎病毒或其片段的步驟。除了治療感染肝炎病毒的患者，本發(fā)明還涉及一種預(yù)防性給予所述疫苗以減少最終肝炎感染的可能性或者嚴(yán)重程度的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種在脊椎動物受試者中誘發(fā)細(xì)胞免疫應(yīng)答的方法，包括向脊椎動物受試者給予治療有效量的本發(fā)明的埋入金屬基質(zhì)中的所選大分子。具體實(shí)施例方式碰與先前的嘗試相反，本發(fā)明解決的不是肝炎的誘因而是真正原因，即針對感染肝臟的自身免疫反應(yīng)。因此，本發(fā)明在總體上解決了自身免疫疾病的治療和預(yù)防。因此，本發(fā)明解決了前人很少研究的問題。因此，本發(fā)明不同于本領(lǐng)域長時(shí)間信奉的明顯的教條，只有克服了該教條才會有進(jìn)一步發(fā)展的空間。更具體地說，本申請人在本文中公開了當(dāng)HBV或HCV抗原被部分水解然后口服給藥，它們驚人地比未經(jīng)水解的熱滅活抗原更加安全有效。^JL如本文所定義，肝炎是一種肝臟損傷，其特征在于在該器官的組織中存在會損害肝臟的炎性細(xì)胞。從該觀點(diǎn)考慮，肝炎是一種自身免疫疾病，它由身體針對自身組織的活性過度的免疫應(yīng)答引發(fā)。換句話說，免疫系統(tǒng)攻擊其自身的細(xì)胞。由HAV感染帶來的肝臟損傷極有可能不直接來源于病毒復(fù)制，而是細(xì)胞介導(dǎo)的病毒特異性免疫與感染的肝細(xì)胞相互作用的結(jié)果。本文中使用的術(shù)語“肝炎病毒抗原”是指任何來源于肝炎病毒的抗原性材料，可以是天然的也可以是重組的，它可用于在有此需要者中(例如人中)產(chǎn)生有益的臨床效果。本文使用的術(shù)語“部分水解的抗原”是指通過水解成比最初的天然形式更小的片段而獲得的抗原。水解通過酸或堿進(jìn)行，更具體地說是指酸介導(dǎo)的水解。其他形式的水解，例如酶水解被稱為“消化”。兩個(gè)術(shù)語“異型抗原，，和“異種抗原，，也可被稱為“非自身抗原”，平等地分別用于表示前面術(shù)語中的每一個(gè)。異型抗原是在相同物種的不同個(gè)體的相同的基因座中編碼的以等位基因形式呈現(xiàn)的抗原。異型抗原可以是可作為異型抗原的任何蛋白質(zhì)、肽、氨基酸或者核酸。例如，當(dāng)從一個(gè)個(gè)體向同種的另一個(gè)個(gè)體移植外源組織或細(xì)胞時(shí)，異型抗原在異源免疫期間存在于宿主免疫系統(tǒng)中，這種情況為移植免疫學(xué)家所熟知。當(dāng)從一個(gè)物種的個(gè)體向另一個(gè)物種的個(gè)體移植異種抗原時(shí)，在異種移植期間會發(fā)生類似的情況。疫苗專家使用的術(shù)語“佐劑”是指任何這樣一種化合物，當(dāng)與一種抗原一起注射時(shí)，會非特異性地提高對該抗原的免疫應(yīng)答。雖然優(yōu)選的給藥方式是沒有佐劑，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可將該組合物與本領(lǐng)域中已知的免疫佐劑一起給藥。特別有利的是那些能夠有利地誘導(dǎo)免疫耐受并且同時(shí)產(chǎn)生有益的臨床效果并且能夠清除感染的佐劑。“患者”是指容易被肝炎病毒感染的宿主，例如人。患者可以被肝炎病毒感染也可以未被感染?；颊叩膶?shí)例有人、黑猩貍、鴨子、豬、狗、貓、旱獺和其他容易被肝炎病毒感染的物種。通過定義，術(shù)語“抗原”是指含有一個(gè)或多個(gè)表位的分子，當(dāng)該抗原根據(jù)本發(fā)明呈現(xiàn)時(shí)，能夠刺激宿主的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答或者體液抗體應(yīng)答。誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力可被理解為“免疫原性”。術(shù)語“治療有效量”是指該組合物中所含有的量，它可導(dǎo)致受試者產(chǎn)生足夠的應(yīng)答，以便預(yù)防、減輕、消除或診斷癥狀。確切的量將依賴于被治療的受試者；被治療的受試者的年齡和總體狀況；所治療疾病的嚴(yán)重程度；在免疫應(yīng)答的情況下，受試者的免疫系統(tǒng)合成抗體的能力；所需的保護(hù)水平和所選的特定抗原和其給藥方式等因素。適合的有效量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地確定。因此，“治療有效量”將是一個(gè)相對較寬的范圍，可通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)例如臨床試驗(yàn)來確定。除非另有說明，涉及術(shù)語時(shí)的例如“一”或“一種”并不限制于一。例如，“一種疫苗”并不排斥多種疫苗。有時(shí)用例如“一種或多種”之類的短語來強(qiáng)調(diào)可能存在多種。詳細(xì)說明在實(shí)驗(yàn)過程中驚人地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)肝炎病毒(如存在于肝炎病毒攜帶者血液中的病毒)被部分水解時(shí)，它們獲得了這樣一種生物活性，即當(dāng)給予肝炎患者時(shí)可誘導(dǎo)更加有利的臨床效果，或者作為預(yù)防感染的手段。部分水解可通過將酸處理作為優(yōu)選的水解方式而容易地實(shí)現(xiàn)。pH范圍優(yōu)選低于6，更優(yōu)選在0.5和5之間，更優(yōu)選在1和4之間，更優(yōu)選在1.0和3.0之間，更優(yōu)選在1.0和2.0之間。雖然給出了最佳范圍，但并不阻止本領(lǐng)域技術(shù)人員來確定最佳范圍，這仍在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明的重要的實(shí)施方案是部分水解這樣來實(shí)現(xiàn)水解過程在完成之前結(jié)束，即在抗原被消化成基本不含肽的氨基酸之前結(jié)束。這樣，病毒抗原仍然具有所需的抗原性質(zhì)。在優(yōu)選的部分水解反應(yīng)條件下，該組合物并不縮減為由游離氨基酸或其片段組成的組合物。優(yōu)選地，有足量的有免疫性質(zhì)的較大殘基，它們可以是蛋白質(zhì)、多肽和肽?；谝@得的臨床效果不同，濃度可根據(jù)需要調(diào)整，而無需過多的實(shí)驗(yàn)。部分水解的抗原例如蛋白質(zhì)占未水解的天然抗原的重量比為至少10%，優(yōu)選至少20%，優(yōu)選至少30%，優(yōu)選至少40%，優(yōu)選至少50%，優(yōu)選至少60%，優(yōu)選至少70%，優(yōu)選至少80%，可為至少90%。100%水解的意思是這樣一種情況，即在水解反應(yīng)之后所有的蛋白質(zhì)均被水解成游離氨基酸，沒有任何較大的殘基，例如殘留的肽。其他水解程度較低的狀態(tài)為“部分水解”。用于部分水解的酸可為無機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等。有機(jī)酸的實(shí)例有例如乙酸、檸檬酸、丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、水楊酸、對甲苯磺酸等等。另一種水解方法是使用有機(jī)或無機(jī)堿溶液進(jìn)行堿處理。這種情況下的PH范圍優(yōu)選高于8.5、更優(yōu)選在9.5和15.0之間，更優(yōu)選在10和14之間，更優(yōu)選在11和13.5之間。另外，部分酸水解的產(chǎn)物中可添加堿，以提高裂解物的PH值，所添加的堿例如氫氧化鈉、氫氧化鎂、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀等。應(yīng)理解，本文使用的術(shù)語“水解”不表示暴露于水、低滲溶液、空氣、熱、冷凍或者任何氣體，這可導(dǎo)致例如存在于血液中的細(xì)胞裂解。抗原的來源并不一定是來自血液或血液衍生物，如血漿或血清?？梢匀菀椎匦薷?本發(fā)明以便使用痰或者其他體液，例如尿、胃腸分泌液、組織液或腫瘤液、滑液、唾液、痰、囊內(nèi)液、羊水、腦脊液、腹水、肺灌洗液、精液、淋巴液、淚液、汗和前列腺液。這些液體中可含有粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或同樣有利的其他細(xì)胞。不限制于液體，固體組織如肝臟、胰臟、骨骼肌、心臟、腎臟、肺、腦、骨髓、腫瘤組織、皮膚、髓鞘、膠原、糞便以及其他組織如相應(yīng)分散的接種病毒的卵都是優(yōu)選實(shí)施方案的一部分。全血、或血清或血漿、或存在有病原感染的細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基、或者重組獲得的含有抗原的肝炎病毒優(yōu)選使用酸或堿處理。本領(lǐng)域技術(shù)人員可使用其他水解劑，如酶或洗滌劑。被部分水解的樣品可將來自同一個(gè)體的匯集在一起，或者將不同批次的匯集在一起。在這些情況下，酸與血液中存在的蛋白質(zhì)或異型抗原反應(yīng)，所述血液還含有肝炎病毒。在這些條件下，這些蛋白質(zhì)被部分水解減小為較小的片段，這被定義為部分水解的蛋白質(zhì)。這些片段可為多肽、肽和一些氨基酸。這些組分之間的比例可通過實(shí)驗(yàn)確定，無需過多的實(shí)驗(yàn)。部分水解的時(shí)間可從5分鐘到幾個(gè)小時(shí)，更優(yōu)選從10分鐘到5小時(shí)，更優(yōu)選從20分鐘到3小時(shí)。該時(shí)間可為較短的幾個(gè)小時(shí)時(shí)間，可在常規(guī)的水解條件下由簡單的實(shí)驗(yàn)確定，這對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說非常熟悉。因此，部分水解的時(shí)間可為30分鐘、1小時(shí)、1.5小時(shí)、2小時(shí)、2.5小時(shí)或3小時(shí)，或者中間時(shí)間。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)該組合物為液體溶液并且在部分水解過程中，部分水解的產(chǎn)物可使用形成了鹽的金屬或者堿金屬氫氧化物溶液來沉淀。該步驟有效地結(jié)束了水解過程，因?yàn)榭乖话换蚵袢牍腆w物質(zhì)的基質(zhì)中，不再與水解劑反應(yīng)。沉淀可與水解同時(shí)進(jìn)行，或者在水解步驟之后啟動，這取決于最終制品的目標(biāo)用途。例如，由抗原和異型抗原、優(yōu)選約90%至約20%蛋白質(zhì)、更優(yōu)選約80%至約40%蛋白質(zhì)溶液構(gòu)成的水溶液，用酸處理，直到PH為約1至約6、優(yōu)選約1至約4、更優(yōu)選約1至約2。將該溶液以低速攪拌，優(yōu)選約10至約500rpm、更優(yōu)選約30至約300，更優(yōu)選約60至約200rpm，持續(xù)約60分鐘至約120分鐘，優(yōu)選約45至約80分鐘，更優(yōu)選約30至約60分鐘。然后將金屬鹽添加到攪拌中的溶液形成漿液，漿液凝固形成固體物質(zhì)。將該物質(zhì)沖洗約1分鐘至約60分鐘，優(yōu)選約5分鐘至約45分鐘，更優(yōu)選約10至約30分鐘，然后在烘箱中通過加熱來干燥，所述加熱在約56至約200°C進(jìn)行，優(yōu)選約70至約150°C，更優(yōu)選約80至約140°C，更優(yōu)選約100至約120°C，持續(xù)約1小時(shí)至約72小時(shí)，優(yōu)選約3至約48小時(shí)，更優(yōu)選約5至約12小時(shí)。然后將干燥的固體物質(zhì)還原為粉末。同樣有利的是開始進(jìn)行沉淀并在該步驟之后加入水解劑(hydrolyzant)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，金屬鹽在部分水解之前即存在，在所述金屬鹽的存在下，蛋白質(zhì)被部分水解，同時(shí)地并發(fā)地被沉淀。包埋活性成分(如抗原與異型抗原一起，或者只有抗原沒有異型抗原，或者只有異型抗原沒有抗原)的方法的代表性步驟可包括使異型抗原與金屬鹽溶液接觸以形成漿液；使獲得的混合物與酸接觸以使其部分水解，以使該混合物硬化并變成固相或者固態(tài)形式，該方法也作為一組固體物質(zhì)而已知。然后將該固體形式減小為粉末顆粒，其中包埋有活性成分。它們的順序可事先容易地確定，無需過多實(shí)驗(yàn)即可實(shí)施，只要含有活性成分的最終制品在臨床研究中被證實(shí)是臨床上有效的即可。部分水解的肝炎抗原和異型抗原可埋入鹽中，包括但不限于鋰、鈹、鈉、硅酮、鎂、鋁、鋁、鉀、鈣、鈦、鋇、鉻、錳、鈷、鎳、銅、鋅、砷、鋯、鉬、銀、鎘、銻、鋇、鋨、鉬、金、汞、鉈、鉛或鈾。適當(dāng)?shù)目扇苄喳}包括氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣或氯化鎂。代表性金屬例如鎂的鹽的實(shí)例有硼化鎂鋁、乙酸鎂鈣、磷酸二鎂、氫氧化鎂鋁(Magaldrate)、鋁化鎂、天冬氨酸鎂、苯甲酸鎂、溴化鎂、碳酸鎂、氯化鎂、六水合氯化鎂、檸檬酸鎂、二硼化鎂、二谷氨酸鎂、二鈾酸鎂、氟化鎂、葡糖酸鎂、六水合鎂、氫化鎂、氫氧化鎂、碘化鎂、乳酸鎂、乙酰丙酸鎂、硝酸鎂、氮化鎂、乳清酸鎂、氧化鎂、氯氧化鎂、氧硫化鎂、高氯酸鎂、過氧化鎂、磷酸鎂、氧脯氨酸鎂(pidolate)、硅化鎂、硬脂酸鎂、硫酸鎂、硫化鎂、亞硫酸鎂、三硅酸鎂、磷酸一鎂、檸檬酸三鎂等。本領(lǐng)域技術(shù)人員還可采用與其他酸反應(yīng)形成的鹽，包括但不限于甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、α酮戊二酸鹽、α甘油磷酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、丙酸鹽、乙醇酸鹽、乳酸鹽、丙酮酸鹽、草酸鹽、氯氧化物、馬來酸鹽、水楊酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、氫溴化物、氫碘化物等。通常，金屬的鹽可以是硼化物、乙酸鹽、磷酸鹽、鋁化物、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、溴化物、碳酸鹽、氯化物、六水合氯化物、檸檬酸鹽、二硼化物、二谷氨酸鹽、二鈾酸鹽、氟化物、葡糖酸鹽、六水合物、氫化物、氫氧化物、氧化物、碘化物、乳酸鹽、乙酰丙酸鹽、硝酸鹽、氮化物、乳清酸鹽、氯氧化物、氧硫化物、高氯酸鹽、過氧化物、氧脯氨酸鹽(Pidolate)、硅化物、硬脂酸鹽、硫酸鹽、硫化物、亞硫酸鹽、三硅酸鹽等。在本發(fā)明的另一方面，可同時(shí)使用兩種或多種金屬。例如，氯化鈣和氯化鎂可以各種可接受的比例混合，并埋入部分水解的抗原。不限制于兩種金屬來源，很明顯多種來源包含有多種金屬或其合金的少量混合成分。例如，氧化鎂可含有少量的鈣和其他金屬。該混合物中的鈣例如碳酸鈣不會干擾該組固體物質(zhì)，因?yàn)楦弑壤姆磻?yīng)性氧化鎂發(fā)揮主要作用。反應(yīng)性鎂可方便地與其他混合成分結(jié)合，以形成固體物質(zhì)，如鋁酸鈣，或者在例如石膏或水泥樣組合物中發(fā)現(xiàn)的其他成分，并且這是特別有利的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，天然存在的礦物質(zhì)，如粘土、高嶺土、白堊、二氧化硅、石膏、長石、鈉長石、鈣長石、正長石、碳灰石、巖鹽、方解石、白云石、碳酸鈉、菱鐵礦、黑云母、皂土、白云母、綠泥石、輝沸石、黃鐵礦、赤鐵礦等可被粉碎并制成漿液，并將抗原混入其中并部分水解。在部分水解在其他步驟中進(jìn)行，例如在抗原的包埋步驟之后或者與該步驟同時(shí)進(jìn)行的情況下，這可被歸類為促進(jìn)劑反應(yīng)，這對于本發(fā)明的組合物是有幫助的。有用的化學(xué)物質(zhì)的實(shí)例可以有例如堿性化學(xué)物質(zhì)(它將抗原固定在基質(zhì)內(nèi))、上述的酸和酸的鹽、以及作為該反應(yīng)的有機(jī)促進(jìn)劑的蛋白質(zhì)、肽和氨基酸。作為本發(fā)明的一部分的堿性化學(xué)物質(zhì)包括例如堿和堿土氫氧化物、碳酸鹽、甲酸鹽、鋁酸鹽和硅酸鹽。這些堿性促進(jìn)劑的劑量無需過多實(shí)驗(yàn)即可確定，并且是本發(fā)明的組合物的一部分。最有效的可以是例如將硅酸鈉和鋁酸鈉作為方便的試劑。優(yōu)選的水解劑為酸和酸的可溶性鹽，通常陽離子和陰離子都有助于總體效果。一些陰離子可產(chǎn)生顯著的優(yōu)點(diǎn)，例如鹵素離子、氯離子、硝酸根、亞硝酸根、甲酸根、硫代硫酸根和硫氰酸根。還注意到二價(jià)和三價(jià)陽離子如鈣、鎂、鋇和鋁似乎比一價(jià)離子如鈉、鉀和銨更加有吸引力。其他酸性試劑包括硫酸亞鐵和硫酸鈣或銨、氯化鈣等。這些方法在回收和生成固體物質(zhì)中是等效的。該固體物質(zhì)可被進(jìn)一步處理，如熱處理、制成粉末以及制成顆粒、丸劑或片劑。這些步驟可以是任何邏輯上可接受的順序。減小的或者部分水解的形式本來就是抗原體的一部分。11根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，部分水解的抗原保持其物理結(jié)構(gòu)和形狀(例如其分子和超分子形狀)接近于原始的三維形狀或者結(jié)構(gòu)體。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，減小形式的抗原相對于原始結(jié)構(gòu)有變化，但可顯示相同的抗原性。本發(fā)明組合物和現(xiàn)有技術(shù)組合物(具有主要吸附在例如氫氧化鋁等免疫佐劑的表面的抗原)的區(qū)別在于本發(fā)明抗原被安全地包埋在基質(zhì)中，這使得它保持完整的物理結(jié)構(gòu)，即使在通常不利的條件下，即長時(shí)的高溫。已知暴露于高溫，例如在56°C或更高的溫度，如80°C加熱一個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間，可使HBV、HCV、HIV、HAV和其他病毒滅活。這樣的熱處理或變性可有效地破壞感染性并同時(shí)去掉抗原性，因?yàn)椴《镜目乖?如蛋白質(zhì)、糖、脂質(zhì)、糖蛋白、氨基酸和核酸)通過加熱它們的原始天然結(jié)構(gòu)而被不可逆地滅活。這些畸形抗原被本領(lǐng)域技術(shù)人員看作是無用的，因?yàn)樵谝呙缰苿┲惺褂盟鼈兪菬o益的實(shí)踐。被這些畸形抗原訓(xùn)練的免疫系統(tǒng)將不能夠識別例如存在于患者肝臟病毒上的天然抗原，從而錯(cuò)誤地指導(dǎo)免疫應(yīng)答。這已經(jīng)是并且仍然是疫苗學(xué)的基石。因此，暴露于稱為“高溫”的超過80°C的溫度并持續(xù)較長的時(shí)間可用于破壞感染性病毒，但不可用于制備疫苗。然而令人驚奇地，本組合物在暴露于高溫時(shí)不失去其抗原性，顯示出良好的臨床效果。因此，本組合物可安全地使用，由于本組合物中存在的潛在的感染性病毒已經(jīng)通過暴露于高溫1小時(shí)或更長時(shí)間而被有效地殺滅。熱處理的優(yōu)點(diǎn)雖然從消除感染性病毒的觀點(diǎn)看是顯而易見的，但從保持抗原性的觀點(diǎn)看根本不是顯而易見的，這種現(xiàn)象與本領(lǐng)域中的主流意見剛好相反。該優(yōu)點(diǎn)還消除了所謂的“冷鏈”要求，這是常規(guī)疫苗的特征，需要冷藏。本發(fā)明組合物可在數(shù)年中保持穩(wěn)定，可經(jīng)歷環(huán)境溫度如室溫或熱帶溫度的保存，對其生物學(xué)活性沒有任何有害作用。具體地說，該組合物在室溫時(shí)穩(wěn)定至少一年，更優(yōu)選在室溫穩(wěn)定至少1.5年，更優(yōu)選在室溫穩(wěn)定2年以上。這些抗原的粉末或小顆粒微粒和/或納米微粒的組合為來源有效提供了進(jìn)一步變換的方式，例如與片劑賦形劑相結(jié)合。賦形劑通常被看作是惰性物質(zhì)，它被添加到活性成分中以形成大塊，例如片劑。它們可以是任何下述成分，或者性質(zhì)相似的化合物粘合劑如微晶纖維素、樹膠或凝膠；賦形劑如淀粉或乳糖，崩解劑如褐藻酸或玉米淀粉；潤滑劑如硬脂酸鎂；助流劑如膠體二氧化硅；增甜劑如蔗糖或糖精；或者調(diào)味劑如薄荷或其他一些香料。與賦形劑的混合是通過濕法或干法制粒過程完成的，這對劑型專家來說是熟知的，生成的混合物被壓縮成片劑。賦形劑的各種性質(zhì)，如水分含量、顆粒大小和分布、多形性、無定形、結(jié)晶慣態(tài)、水合狀態(tài)以及影響壓緊的潤滑劑和粘合劑水平均在實(shí)施者的常規(guī)知識之內(nèi)。壓片速度和壓片的機(jī)械學(xué)方面，如選擇沖壓機(jī)/模具、壓片機(jī)器可由技術(shù)人員無需過多實(shí)驗(yàn)進(jìn)行選擇。另外，劑型中可包括其他各種修飾物理形狀的材料，例如糖包衣、蟲膠或其他腸內(nèi)吸收劑。片劑可被腸溶包衣材料覆蓋，所述材料主要在腸液中溶解，但在胃的胃液中是基本不溶的。實(shí)例包括聚乙烯醇酞酸酯(PVAP)、醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)、醋酸纖維素酞酸酯(CAP)、異丁烯酸共聚物、羥丙甲纖維素琥珀酸酯、醋酸纖維素琥珀酸酯、醋酸纖維素六氫酞酸酯、羥丙甲纖維素六氫酞酸酯、羥丙甲纖維素酞酸酯(HPMCP)、丙酸纖維素酞酸酯、醋酸纖維素馬來酸酯、醋酸纖維素偏苯三酸酯、醋酸纖維素丁酸酯、醋酸纖維素丙酸酯、甲基丙烯酸/異丁烯酸聚合物、甲基丙烯酸_甲基丙烯酸甲酯共聚物、異丁烯酸乙酯_異丁烯酸甲酯_氯三甲銨異丁烯酸乙酯共聚物等，以及包含一種或多種上述腸溶聚合物的組合。其他實(shí)例包括天然樹脂，如蟲膠、SANDARAC、copalcollophorium以及包含一種或多種上述聚合物的組合。腸溶聚合物的其他實(shí)例包括帶有羧基的合成樹脂，甲基丙烯酸丙烯酸乙酯共聚物。優(yōu)選地，腸溶包衣材料從可購得的材料中選擇，但是也可在實(shí)施者的技能范圍內(nèi)選擇新材料。優(yōu)選的劑型是口服固體劑型，如片劑或丸劑。而且，本文所述的藥物組合物可制成適當(dāng)?shù)膭┬?，包括但不限于液態(tài)口服分散劑、液態(tài)口服懸液、氣溶膠、可控釋放制劑、速溶制劑、泡騰制劑、自乳化分散劑、固溶體、脂質(zhì)體分散劑、凍干制劑、膠囊、粉末、延遲釋放制劑、立即釋放制劑、可變釋放制劑、延長釋放制劑、脈沖釋放制劑、多微粒制劑以及混合立即釋放和可控釋放的制劑。用于這些方法的設(shè)備是可購得的。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地從下列設(shè)備中選擇合適的設(shè)備旋轉(zhuǎn)鼓(RotaryDrums)、截面冷卻器(SectionalCoolers)、(干燥和冷卻)快速干燥器((DryingandCooling)FlashDryers)、流化床車間(FluidizedBedPlants)、渦輪盤式干燥機(jī)(Turbo-TrayDryers)、固化器(Solidizer)、盤式干燥機(jī)(DiscDryers)、Spirocorn,帶式干燥機(jī)(BeltDryers)、托盤干燥機(jī)(TrayDryers)Simplicior禾口Favorit、氣混機(jī)(AirMix)、噴混機(jī)(SprayMix)、碾磨機(jī)(Mills)和分粒機(jī)(Classifiers)并從多個(gè)廠商如DuskeEngineering、Inc.Fenwal、Baxter等處訂購。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，片劑中活性成分的量，S卩，通過固體劑型(如片劑或丸劑)給予受試者的部分水解的病毒抗原與異型抗原的量，是本領(lǐng)域中已知的獲得有需要的人或動物的藥物的治療有效濃度。例如，一種或多種活性成分的量可以為約0.001微克至約lg。在另一個(gè)實(shí)施方案中，活性成分的量可為約0.01微克至約lOOmg。在另一個(gè)實(shí)施方案中，活性成分的量可優(yōu)選為約0.1微克至約10，000微克，約0.5微克至約1，000微克或者約1微克至約500微克。在另一個(gè)實(shí)施方案中，固體劑型的給藥量為約10微克至約500微克。在另一個(gè)實(shí)施方案中，固體劑型中的活性成分制劑的給藥量為約1-100微克。在另一個(gè)實(shí)施方案中，基于組合物總重量的活性成分的量為約0.00001%至約30%，優(yōu)選該量為約0.001%至20%，優(yōu)選該量為約0.01%至10%，優(yōu)選該量為約0.1%至5%。含量可根據(jù)目標(biāo)用途而改變。治療用途與預(yù)防用途的組合物相比，含量可提高大約一個(gè)數(shù)量級。例如，如果在治療性組合物中HBV表面抗原(HBsAg)的等效量為60微克，那么在預(yù)防性組合物中，該劑量可減少至5或10微克。然而，這并不是絕對的要求。與有效劑量相關(guān)的這些和其他一些表示并非意在限制，它們僅以舉例的方式提供?；钚猿煞值拇_切的“治療有效”量由標(biāo)準(zhǔn)的臨床試驗(yàn)確定，其中臨床效果通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的手段監(jiān)測。在一些實(shí)施方案中，制劑在給藥后的約3小時(shí)至約24小時(shí)的時(shí)間內(nèi)提供治療有效量的組合物，如果需要，可以例如每天一次、每天兩次(b.i.d.)或每天三次(t.i.d.)給藥。優(yōu)選每天一或兩片的簡單劑量方案。給藥可以是單片給藥，更優(yōu)選是至少一星期長達(dá)一個(gè)月至一年的重復(fù)給藥，或者根據(jù)需要進(jìn)行。治療可在1-3個(gè)月后停止，在停止一個(gè)月后再重復(fù)，但對于一些患者，反復(fù)治療3或6個(gè)月之久是不必要的。有一些則愿意停止一年然后再重復(fù)。在一些個(gè)體中，不必重復(fù)治療，因?yàn)榛颊咭呀?jīng)治愈，無需更多的劑量。在本發(fā)明的另一方面，給予該組合物時(shí)無需免疫佐劑。雖然這是優(yōu)選的給藥方式，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以將該組合物與本領(lǐng)域中已知的免疫佐劑一起給藥。優(yōu)選的佐劑為能夠幫助產(chǎn)生免疫耐受狀態(tài)的佐劑。這類佐劑的代表性實(shí)例有Toll樣受體(TLR)佐劑，如酵母多糖(zymosan)和維生素Α。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠發(fā)現(xiàn)等效的佐劑。其他免疫佐劑的實(shí)例包括但不限于細(xì)菌佐劑；細(xì)胞因子佐劑；來源于植物的佐劑等。合成佐劑的實(shí)例有蘇氨?；邗６?Threonylmuramyldip印tide)；金剛烷基酰胺二肽(adamantyIamidedip印tide，AdDP)；癸酸；聚陽離子神經(jīng)鞘脂(polycationicsphingolipid)、N-棕櫚酰基D-紅-鞘氨醇氨甲?；?精胺(神經(jīng)酰胺氨甲酰基-精胺，CCS)；1，25_二氫維生素D3;以及阿夫立定(Avridine)-合成的脂樣胺。細(xì)菌佐劑的實(shí)例有大腸桿菌(E.coli)不耐熱毒素(LT)及其衍生物L(fēng)TK63、LTR72和R192G；霍亂毒素(CT)；CT的B亞基(CTB)；布魯氏菌2，4_二氧四氫喋啶合酶(Brucellalumazinesynthase)、志賀氏菌透明質(zhì)酸酶復(fù)合物(Shigellainvasioncomplex)；炭痕桿菌水月中毒素(Bacillusanthracisedematoxin)；嗜鹽弧菌鞭毛素(Vibriovulnificusflagellin)FlaB；腦膜炎雙球菌(Neisseriameningitides)的外膜蛋白；Protollin(腦膜炎雙球菌外膜蛋白與弗氏志賀菌(ShigellafleXneri)2a脂多糖非共價(jià)復(fù)合)。TLR配體是I型跨膜蛋白，可識別與腸道粘膜接觸的微生物，該配體的實(shí)例有TLR-2/6激動劑MALP-2；雙鏈聚肌苷酸-聚胞苷酸(poly(IC)；含CpG的寡聚脫氧核苷酸(CpGODN))；以及TLR-4激動劑，如氨基烷基氨基葡糖苷磷酸鹽(AGP)。細(xì)胞因子佐劑的實(shí)例有I型干擾素(IFN)；IL-12；Flt3配體(Flt3L)；IL-Iα；粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)；細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原-4(CTLA-4)；巨噬細(xì)胞炎性蛋白la(MIP-Ia)；吲哚胺2，3_加雙氧酶；CD40L和可作為替在佐劑報(bào)道的其他細(xì)胞因子。植物來源的佐劑的實(shí)例有菜豆植物血細(xì)胞凝集素(Phaseolusvulgarisphytohaemagglutinin,PHA)；槲寄生凝集素(mistletoelectins,MLI,MLII,MLIII)；番茄凝集素(tomatolectin,LEA)；小麥凝集素(wheatagglutinin,WGA)；荊豆凝集素1(Ulexeuropaeuslectin1，UEA-I)；洗滌劑樣物質(zhì)皂草苷(saponin)QS-21，來自于南美肥皂樹(SouthAmericansoaptree)的樹皮；另一種皂樹(Quillajasaponaria)來源物QuilA；皂草苷(quillajasaponin)衍生物GPI-OlOO；瞿麥屬種(Gypsophilasp.)皂草苷(Saponin)；藥(Chenopodiumquinoa)；(Polygalatenuifolia)；胃,的apiogalacturonanicpectin(Lemnaminor)、LemnanLM;7jC爺(Solanumtorvum)(STE)；RicinB;白樣(Betulaalba)；Thujaesummitates>Mf)l(Baptisiaetinctoriae)f[|、胃公^胃(Echinaceaepurpureae)牛艮禾口白錐菊(Echinaceaepallidae)牛艮；銀杏(Ginkgobiloba)；以及苦瓜(Momordicacharantia)。表位佐劑的實(shí)例有例如破傷風(fēng)毒素(TTE)的氨基酸殘基830-843，結(jié)核菌熱休克蛋白65(TBE)的1-20，風(fēng)疹蛋白E2-4(ME)的54-65以及沙眼熱休克蛋白60(CE)的35-48；P.vivax的MSPl(DYDVVYLKPLAGMYK)；以及DR-限制性輔助T細(xì)胞表位，稱為PADRE。其他本領(lǐng)域已知的佐劑有明礬、鋁、礦物油、可代謝的有機(jī)油、MF59、ISC0M、佐劑65(含花生油、二縮甘露醇一油酸(marmidemonooleate)和單硬脂酸鋁)、普盧蘭尼克聚醇(pluronicpolyol)L-121、乳化劑如弗氏不完全佐劑和角鯊烯(鯊魚油)。應(yīng)理解，當(dāng)使用基于金屬的免疫佐劑如鋁鹽或明磯時(shí)，它們不是用于包埋抗原的金屬基質(zhì)的一部分。—旦在腸中消化，基質(zhì)釋放出該抗原的初始部分或片段，將其呈現(xiàn)于宿主的免疫系統(tǒng)。宿主通過細(xì)胞途徑處理抗原，如通過1類或2類MHC的抗原呈現(xiàn)，這通過作為抗原呈現(xiàn)細(xì)胞(APC)的特化的粘膜和/或樹突細(xì)胞來實(shí)現(xiàn)。雖然本發(fā)明中，所要求保護(hù)的組合物的作用機(jī)制不是本發(fā)明的必需部分，但它為本領(lǐng)域技術(shù)人員提供了一種感興趣的物質(zhì)，這并非對本發(fā)明的深度和要旨沒有任何影響，本發(fā)明的深度和要旨由上述實(shí)例中的臨床證據(jù)14支持。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，部分水解的肝炎病毒與異型抗原一起存在于該組合物中，可用于預(yù)防和治療用途，以預(yù)防或治療肝炎和肝炎病毒感染。在疫苗現(xiàn)有技術(shù)中，花費(fèi)了很大力氣從非病毒抗原中純化抗原。這是由于，注射這些非病毒抗原會導(dǎo)致不期望的免疫反應(yīng)，這些反應(yīng)有時(shí)會危及生命。因此，使異型抗原與病毒抗原一起存在于該組合物中違背了本領(lǐng)域的主流觀點(diǎn)。異型抗原可以是例如白蛋白、MHC分子、細(xì)胞因子、淋巴素(Iymphokine)、趨化因子、免疫球蛋白以及可以單個(gè)優(yōu)選組合存在于宿主中的其他分子。部分水解的肝炎病毒與異型抗原的比例可由已知的方法無需過多的實(shí)驗(yàn)來確定。優(yōu)選地，理想的比例為天然存在的比例，例如在全血中的比例，即，肝炎病毒的量與其他宿主細(xì)胞如血液中存在的總蛋白的量的比例。這同樣適用于以下情形病毒或其抗原在繁殖細(xì)胞中重組表達(dá)，所述細(xì)胞如酵母細(xì)胞或哺乳動物細(xì)胞如CHO細(xì)胞。這些重組體是公知的，例如第三代HBV疫苗含有兩種病毒表面抗原的pre-Sl、pre_S2和S抗原成分，在使用重組乙型肝炎表面抗原DNA傳染后可在連續(xù)的哺乳動物細(xì)胞系小鼠cl27克隆細(xì)胞系中產(chǎn)生。在組合物成分在非人物種的細(xì)胞中培養(yǎng)但打算用于人的情況下，則將異型抗原稱為異種抗原，本發(fā)明的目的可被稱為異型抗原。在另一種情況下，有需要時(shí)，可以容易地培養(yǎng)不是部分病毒，而是整個(gè)病毒，例如在人肺癌A549細(xì)胞培養(yǎng)物中培養(yǎng)的HEV病毒。雖然陳述了優(yōu)選的比例，也可有意地增加異型抗原或抗原的量。在任何情況下，異型抗原的量不應(yīng)太少，以致可看作標(biāo)準(zhǔn)疫苗(如由血漿制備的乙型肝炎疫苗)的污染物。雖然在由匯集的血漿制備的乙型肝炎疫苗中污染的血漿蛋白即異型抗原的量根據(jù)批次或廠商的不同而不同，但它通常少于1%。在甲型肝炎疫苗的情況下，WHO推薦污染的白蛋白的量少于50納克/劑(參見例如WHO網(wǎng)站地址:http://www.who.intlbiologicals/publications/trs/areas/vaccines/hepatitis/WHOTRS858A2.pdf)。因此，這些要求使得本發(fā)明的組合物和現(xiàn)有技術(shù)中的常規(guī)疫苗有明顯的區(qū)別，因?yàn)樵诒景l(fā)明中總異型抗原與抗原的比例總是高于1100，當(dāng)用白蛋白來計(jì)量異型抗原物質(zhì)的量時(shí)總是高于50納克水平。這樣的組合物，特別是口服形式的組合物，將用于有需要的宿主，如有需要的人宿主或其他物種。本發(fā)明可包含肝炎病毒以及與之有關(guān)的病毒。例如，與丙型肝炎有關(guān)的蟲媒病毒(黃病毒科，F(xiàn)laviviridae)包括但不限于阿布塞塔羅夫病毒(Absettarov)；阿爾弗黃病毒(Alfuy)；Apoi病毒；Aroa__；Bagaza__；Banzi__；Bououi__；Bussuquara__；Cacipacore__；Island病毒；Dakarbat病毒；登革熱病毒1，2，3禾口4;EdgeHill病毒；Entebbebat病毒；GadgetsGulIy病毒；Hanzalova病毒；Hypr病毒；IIheus病毒；以色列土耳其腦膜炎病_(Israelturkeymeningoencephalitis)；ElHH(Japaneseencephalitis)；Jutiapa病毒；Kadam病毒；Karshi病毒；Kedougou病毒；Kokoera病毒；Koutango病毒；Kumlinge病毒；Kunjin病毒；基亞薩努森林病(KyasanurForestdisease)；Langat病毒；羊跳躍病(Loupingill)；Meaban病毒；Modoc病毒；蒙大拿蝙蝠腦白質(zhì)炎(Montanamyotisleukoencephalitis)；^yiflSItM#Hiit(Murrayvalleyencephalitis)；Naranjal^毒；Negishi病毒；Ntaya病毒；咢β木斯克出血熱(Omskhemorrhagicfever)；Phnom-Penhbat;Powassan病毒；RioBravo病毒；Recio病毒；RoyalFarm病毒；俄羅其jf春夏型腦炎(Russianspring-summerencephalitis)；Saboya病毒；圣各易士腦炎(St.Louisencephalitis)；SalVieja病毒；SanPerlita病毒；SaumarezReef病毒；Sepik病毒；15Sokuluk病毒；Spondweni病毒；Stratford病毒；Temusu病毒；Tyulenly病毒；UgandaS,Usutu,Wesselsbron；西尼羅河病毒；Yaounde病毒；黃熱病毒(Yellowfever)；以及Zika病毒。其他被發(fā)現(xiàn)在血液中循環(huán)的人病毒同樣適合單獨(dú)地用于本發(fā)明的組合物中或者與屬于以下科的所關(guān)注的病毒結(jié)合用于本發(fā)明的組合物中，所述科為肝脫氧核糖核酸病毒科Ofepadnaviridae)(乙型肝炎病毒)；微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)(例如甲型肝炎病毒；以及相關(guān)脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus)、腸道病毒(enterovirus)、人柯薩奇病毒(humanCoxsackievirus)、鼻病毒(rhinovirus)、?？刹《?echovirus))；黃病毒科(Flaviridae)(例如登革熱病毒(denguevirus)、腦炎病毒、黃熱病病毒)。其他病毒的實(shí)例可包括但不限于逆轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae)(例如人免疫缺陷病毒)；杯狀病毒科(Caliciviridae)(例如導(dǎo)致腸胃炎的毒株)；披膜病毒科(Togaviridae)(例如馬腦炎病毒、風(fēng)疹病毒(rubellavirus))；冠狀病毒科(Coronoviridae)(例如冠狀病毒(coronavirus))；彈狀病毒科(Rhabdoviradae)(例如水泡性口膜炎病毒(vesicularstomatitisvirus)、狂犬病毒(rabiesvirus))；纖絲病毒科(Filoviridae)(例如埃博拉病毒(ebolavirus))；Parantyxoviridae；苜Ij粘病毒禾斗(Paramyxoviridae)(例如苜Ij流胃病_(parainfluenzavirus)、月思■炎病_(mumpsvirus)(measlesvirus)、呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus))；IE豐占病毒禾斗(Orthornyxoviridae)(例如流感病毒))；布尼亞病毒科(Bungaviridae)(例如漢坦病毒(Hantaanvirus)、布尼病毒(bungavirus)、靜脈病毒(phlebovirus)禾口內(nèi)羅病毒(Nairovirus))；沙粒病毒科(Arenaviridae)(出血熱病毒(hemorrhagicfevervirus))；呼腸孤病毒禾斗(Reoviridae)(例如呼腸孤病毒(reovirus)、環(huán)狀病毒(orbiviurs)和輪狀病毒(rotavirus))；雙RNA病毒科(Birnaviridae)；細(xì)小病毒科(Parvoviridae)(細(xì)小病毒(parvovirus))；乳多空病毒科(Papovaviridae)(乳頭狀瘤病毒(papillomavirus)、多瘤病毒(polyomavirus))；腺病毒科(Adenoviridae)(大多數(shù)腺病毒))；皰疹病毒科(Herpesviridae)(I型和II型單純皰疫病毒(herpessimplexvirus，HSV)、7_K痘-帶狀皰疫病毒(varicellazostervirus)>(cytomegalovirus,CMV)(herpesvirus)；___禾4*(Poxyiridae)(類天花病毒(variolavirus)、痘苗病毒(vacciniavirus)、痘病毒(poxvirus))；虹彩病毒科(Iridoviridae)(非洲豬病毒(Africanswinevirus))；以及未分類的病毒(例如海綿狀腦病的病原)。本發(fā)明的制劑不僅僅可以用于抗病毒。存在于宿主中任何病原體的抗原均可用于誘發(fā)足夠的免疫反應(yīng)。例如，考慮治療真菌感染時(shí)，則可從皮膚真菌(Dermatophytres)獲得真菌抗原，包括絮狀表皮癬菌(Epidermophytonfloccusum)、頭癬小孢子菌(Microsporumaudouini)、大小孢子菌(Microsporumcanis)、扭曲小孢子菌(Microsporumdistortum)、馬類小抱子菌(Microsporumequinum)、石膏樣小抱子菌(Microsporumgypsum)、矮小抱子菌(Microsporumnanum)、同心性發(fā)癬菌(Trichophytonconcentricum)、馬發(fā)痛菌(Trichophytonequinum)、雞發(fā)痛菌(Trichophytongallinae)>石膏樣發(fā)癬菌(Trichophytongypseum)、麥格氏發(fā)癬菌(Trichophytonmegnini)、須發(fā)癬菌(Trichophytonmentagrophytes)、昆克努發(fā);菌(Trichophytonquinckeanum)、紅色發(fā)癬菌(Trichophytonrubrum)、許蘭發(fā)癬菌(Trichophytonschoenleini)、斷發(fā)發(fā)癬菌(Trichophytontonsurans)、撫狀發(fā)癬菌(Trichophytonverrucosum)、撫狀發(fā)癬菌白色變種(T.verrucosumvar.album)、撫狀發(fā)癬菌discoides變種(var.discoides)、撫狀發(fā)癬菌ochraceum變禾中(var.ochraceum)、堇色發(fā)癬菌(Trichophytonviolaceum)禾口/或蜜塊狀發(fā)癬菌(Trichophytonfaviforme)。不限于這些真菌，其他目的真菌病原體包括煙色曲霉(Aspergillusfumigatus)、黃曲霉(Aspergillusflavus)、黑曲霉(Aspergillusniger)、構(gòu)巢曲霉(Aspergillusnidulans)、土曲霉(Aspergillusterreus)、聚多曲霉(Aspergillussydowi)、Aspergillusflavatus、灰綠曲霉(Aspergillusglaucus)、頭狀H罾Mlii(Blastoschizomycescapitatus)>[=|lif(Candidaalbicans)>|if烯醇酶(Candidaenolase)、熱帶念珠菌(Candidatropicalis)、光滑念珠菌(Candidaglabrata)、克魯斯念珠菌(Candidakrusei)、近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis)、星(Candidastellatoidea)(Candidakusei)>Candidaparakwsei>^Ι^^Μ(Candidalusitaniae)>^？！lif(Candidapseudotropicalis)>pf禾丨J蒙德念珠菌(Candidaguilliermondi)、卡氏枝抱霉(Cladosporiumcarrionii)、粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)、皮炎芽生菌(Blastomnycesdermatidis)、新型隱球菌(Cryptococcusneoformans)、棒地霉(Geotrichumclavatum)、夾膜組織胞菜菌(Histoplasmacapsulatum)、卡氏月市囊蟲(Pneumocystiscarinii)、月市炎克雷伯氏桿菌(Klebsiellapneumoniae)、巴西苜1J球抱子菌(Paracoccidioidesbrasiliensis)、卵狀糠秕孢子菌(Pityrosporumovale)、詭譎腐霉(Pythiumninsidiosum)、釀酒酵母(Sacharomnycescerevisae)、布拉酵母(Saccharomycesboulardii)、粟酒裂殖酵母(Saccharomycespombe)、尖端賽多抱子菌(Scedosporiumapiosperum)、申克抱子絲菌(Sporothrixschenckii)、白色毛孢子菌(Trichosporonbeigelii)、鼠丐形體(Toxoplasmagondii)、馬爾尼菲青霉(Penicilliummarnaeffei)、馬拉色氏霉菌屬禾中(Malasseziaspp.)、產(chǎn)色芽生菌屬禾中(Fonsecaeaspp.)、萬吉拉菌屬禾中(ffangiellaspp.)>孢子絲菌屬種(Sporothrixspp.)、擔(dān)子菌團(tuán)屬種(Basidiobolusspp.)、耳霉屬種(Conidiobolusspp.)(Rhizopusspp)、€βΜ禾中(Mucorspp)、j^mM禾中(Absidiaspp)、·包βΜ禾中(Mortierellaspp)(Cunninghamellaspp)、瓶霉屬種(Saksenaeaspp·)、鏈格孢屬種(Alternariaspp)、彎孢霉屬種(Curvulariaspp)、長螺孢菌屬種(Helminthosporiumspp)、鐮孢菌屬種(Fusariumspp)、曲霉屬種(Aspergillusspp)、##M禾中(Penicilliumspp)、||冑胃M禾中(Monoliniaspp)菌屬禾中(Rhizoctoniaspp)、擬青霉屬禾中(Paecilomycesspp)、皮司霉屬禾中(Pitliomycesspp)禾口分支孢子菌屬禾中(Cladosporiumspp)。所述組合物同樣可用于治療存在于宿主血液或體液中的微生物感染，所述微生物包括例如金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)、松鼠葡萄球菌(Staphylococcussciuri)、中華根瘤菌屬(Sinorhizobium)種(例如草木犀屬(meliloti))、李斯特菌屬(Listeria)種(例如產(chǎn)單核細(xì)胞(monocytogenes))、梭菌屬(Clostridium)種(例如acetabutylicum、艱難梭菌(difficile))、弧菌屬(Vibrio)種(例如霍亂弧菌(cholerae))、棒狀桿菌屬(Corynebacterium)種(例如白喉棒桿菌(diptheriae))、布魯氏菌屬(Brucella)種(例如豬流產(chǎn)布氏桿菌(suis))、假單胞菌屬(Pseudomonas)種(例如綠膿假17單胞菌(aeruginosa)、香假單孢桿菌(syringae)、惡臭假單胞菌(putida))、希瓦氏菌屬(Shewanella)種(例如腐敗希瓦氏菌(putrefasciens))、中慢生根瘤菌屬(Mesorhizobium)種(例如百脈根中慢生根瘤菌(Ioti))、柄桿菌屬(Caulobacter)種(例如新月柄桿菌(crescentus))、乳球菌屬(Lactococcus)種(例如乳酸乳球菌(Iactis))、分支桿菌屬(Mycobacterium)種(例如恥垢分枝桿菌(smegmatis))、伯克霍爾德菌屬(Burkholderia)種(例如鼻疽伯克霍爾德菌(mallei)、性鼻疽伯克霍爾德菌(pseudomallei))、地桿菌屬(Geobacter)種(例如硫還原地桿菌(sulfurreducens))、密螺旋體屬(Tr印onema)種(例如齒垢密螺旋體(denticola))、桿菌屬(Bacillus)種(例如嗜熱脂肪芽胞桿菌(stearothermophilus)、炭疽桿菌(anthracis)、枯草桿菌(subtilis)、耐鹽嗜堿芽孢桿菌(halodurnas))、埃希氏桿菌屬(Escherichia)種(例如大腸埃希桿菌(coli))、腸球菌屬(Enterococcus)種(例如糞腸球菌(faecalis))、沙門氏菌屬(Salmonella)種(例如都伯林沙門氏菌(dublin)、腸炎沙門氏菌(enteriditis)、副傷寒沙門氏菌(paratyphi)、傷寒沙門氏菌(typhi))、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)種(例如肺炎克雷伯氏菌(pneumoniae))、博德特氏菌(Bordetella)種(例如副百日咳博德特氏菌(parapertussis))、放線桿菌屬(Actinobacillus)種(例如伴放線菌放線桿菌(actinomycetemcomitans))、鏈霉菌屬(Streptomyces)種(例如天藍(lán)色鏈霉菌(coelicolor))、鏈球菌屬(Streptococcus)種(例如釀膿鏈球菌(pyogenes)、肺炎鏈球菌(pneumoniae))、耶爾森氏菌屬(Yersinia)種(例如鼠疫耶爾森氏菌(pestis))、土壤桿菌屬(Agrobacterium)種(例如根瘤土壤桿菌(tumefaciens))和不動桿菌屬(Acinetobacter)禾中。本發(fā)明還包括治療自身免疫性疾病，無論其是由微生物感染或病毒感染導(dǎo)致的還是具有未知的病因。這些疾病例如包括急性壞死性出血性白質(zhì)腦炎(Acutenecrotizinghemorrhagicleukoencephalitis)、阿狄森氏病(Addison‘sdisease)、無丙球蛋白血癥(Agammaglobulinemia)、變應(yīng)性哮喘(Allergicasthma)、變應(yīng)性鼻炎(Allergicrhinitis)、斑禿(Alopeciaareata)、淀粉樣變(Amyloidosis)、強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosingspondylitis)、抗-GBM/抗-TBM腎炎(Anti-GBM/Anti-TBMnephritis)、抗磷脂綜合征(Antiphospholipidsyndrome,APS)、自身免疫性再生障礙性貧血(Autoimmuneaplasticanemia)、自身免疫性家族性自主神經(jīng)異常(Autoimmunedysautonomia)、自身免疫性月干炎(Autoimmunehepatitis)、自身免疫性高月旨血癥(Autoimmunehyperlipidemia)>§^^iiSti(Autoimmuneimmunodeficiency)、(Autoimmuneinnereardisease,AIED)、自身免疫性心肌炎(Autoimmunemyocarditis)、自身免疫個(gè)生IfiI/]、M個(gè)生sMM(Autoimmunethrombocytopenicpurpura,ATP)、自胃個(gè)生甲狀腺病(Autoimmunethyroiddisease)、車由突及神經(jīng)元神經(jīng)病變(Axonal&neuronalneuropathies)>E(Balodisease)>JJlΟ#K(Behcet'sdisease)、大M性類天皰瘡(Bullouspemphigoid)、心肌病(Cardiomyopathy)、巨大淋巴結(jié)增生癥(Castlemandisease)、口炎性腹灣(非熱帶的)(Celiacsprue(nontropical))、查力口斯病(Chagasdisease)、慢性疲乏綜合征(Chronicfatiguesyndrome)、慢性炎癥性脫髓鞘性多神經(jīng)病(Chronicinflammatorydemyelinatingpolyneuropathy,CIDP)>變應(yīng)性肉芽腫性血管炎(Churg-Strausssyndrome)、疤痕性類天皰瘡/良性黏膜類18天皰疫(Cicatricialpemphigoid/benignmucosalpemphigoid)、耳蟲咼前庭綜合征(Coganssyndrome)、冷凝集素疾病(Coldagglutinindisease)、先天性心臟傳導(dǎo)阻滯(Congenitalheartblock)、柯薩奇病毒個(gè)生肌炎(Coxsackiemyocarditis)、CREST病、克隆氏病(Crohn'sdisease)、脫髓鞘神經(jīng)病(Demyelinatingneuropathies)、皮肌炎(Dermatomyositis)、德維克病(Devicdisease)、盤狀狼瘡(Discoidlupus)、德雷斯勒氏綜合(Dressier'ssyndrome)、子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis)、嗜酸細(xì)胞性筋膜炎(Eosinophilicfasciitis)、結(jié)節(jié)性紅斑(Erythemanodosum)、特發(fā)性混合型冷沉淀球蛋白血癥(Essentialmixedcryoglobulinemia)、伊文思綜合征(Evanssyndrome)>實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性腦脊髓炎(Experimentalallergicenc印halomyelitis)、纖維肌痛(Fibromyalgia)、纖維化肺泡炎(Fibrosingalveolitis)、巨細(xì)胞動脈炎(顳動脈炎)(Giantcellarteritis(temporalarteritis))、古德中白斯徹氏綜合征(Goodpasture'ssyndrome)、格雷夫斯氏病(Graves‘disease)、格-巴二氏綜合征(Guillain-Barresyndrome)、橋本氏病(Hashimoto'sdrsease)、溶血性貧血(Hemolyticanemia)、亨-舍二ftm^(Henoch-Schonleinpurpura)>PiMM^(Herpesgestationis)癥(Hypogammaglobulinemia)、特發(fā)性月市纖維變性(Idiopathicpulmonaryfibrosis)>(Idiopathicthrombocytopenicpurpura,ITP)>(IgAnephropathy)、特發(fā)j"生血/J、板減少性紫癒(Immunoregulatorylipoproteins)、包涵體肌炎(Inclusionbodymyositis)>胰島素依賴性糖尿病(1型)(Insulin-dependentdiabetes(type1))、間質(zhì)性膀胱炎(Interstitialcystitis)、幼年型關(guān)節(jié)炎(Juvenilearthritis)、青少年糖尿病(Juvenilediabetes)、川崎綜合征(Kawasakisyndrome)、蘭伯特-伊頓綜合征(Lambert-Eatonsyndrome)、白細(xì)胞破裂性脈管炎(Leukocytoclasticvasculitis)、扁平苔癬(Lichenplanus)、硬化性苔癬(Lichensclerosus)、木樣結(jié)膜炎(Ligneousconjunctivitis)、線性IgA病(LinearIgAdisease，LAD)、狼瘡(SLE)(Lupus(SLE))、萊姆病(Lymedisease)、梅尼爾氏病(Meniere'sdisease)、顯微鏡下多血管炎(Microscopicpolyangiitis)、混合性結(jié)締組織病(Mixedconnectivetissuedisease，MCTD)、莫倫氏饋蕩(Mooren‘sulcer)、穆哈一哈伯曼二氏病(Mucha-Habermanndisease)、多發(fā)性硬化(Multiplesclerosis)、肌無力性肌炎(MyastheniaMyositis)、發(fā)作性睡病(Narcokpsy)、嗜中性白血球減少癥(Neutropenia)、眼瘢痕性類天皰瘡(Ocularcicatricialpemphigoid)、復(fù)發(fā)性風(fēng)濕病(Palindromicrheumatism)、鏈球菌相關(guān)的小兒自身免疫性神經(jīng)精神障礙(PANDAS(PediatricAutoimmuneNeuropsychiatricDisordersAssociatedwithStreptococcus))、畐Ij月中瘤性小腦變性(Paraneoplasticcerebellardegeneration)、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿(Paroxysmalnocturnalhemoglobinuria,PNH)、扁平部睫狀體炎(周邊葡萄膜炎)(Parsplanitis(peripheraluveitis))、神經(jīng)痛性肌萎縮(Parsonnage-Turnersyndrome)、天皰瘡(Pemphigus)、夕卜周神經(jīng)病(Peripheralneuropathy)、靜脈周圍個(gè)生腦脊髓炎(Perivenousencephalomyelitis)、惡個(gè)生貧血(Perniciousanemia)、POEMS綜合征、結(jié)節(jié)性多動脈炎(Polyarteritisnodosa)、風(fēng)濕性多肌痛(Polymyalgiarheumatica)、多肌炎(Polymyositis)、心肌梗塞后綜合征(Postmyocardialinfarctionsyndrome)、切開術(shù)后綜合征(Postpericardiotomysyndrome)、原發(fā)性膽汁性肝硬變(Primarybiliarycirrhosis)、黃體酮皮炎19(Progesteronedermatitis)、銀屑病(Psoriasis)、(Psoriaticarthritis)、單純紅細(xì)胞#L胃t生H(Pureredcellaplasia)(Pyodermagangrenosum)>W諾現(xiàn)象(Raynaudsphenomenon)、交感反射性營養(yǎng)不良(Reflexsympatheticdystrophy)、萊特爾氏綜合征(Reiter'ssyndrome)、復(fù)發(fā)性多軟骨炎(Relapsingpolychondritis)、多動腿綜合征(Restlesslegssyndrome)、風(fēng)濕熱(Rheumaticfever)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoidarthritis)、結(jié)節(jié)病(Sarcoidosis)、施密特綜合征(Schmidtsyndrome)、鞏膜炎(Scleritis)、硬皮病(Scleroderma)、斯耶格倫氏綜合征(Sjogren'ssyndrome)、精子及睪丸自身免疫(Sperm&testicularautoimmunity)、僵人綜合征(Stiffpersonsyndrome)、亞急性細(xì)菌心內(nèi)膜炎(Subacutebacterialendocarditis,SBE)、交感性眼炎(Sympatheticophthalmia)、高安氏動脈炎(Takayasu‘sarteritis)、聶頁動脈炎/巨細(xì)胞動脈炎、血小板減少性紫癜(Thrombocytopenicpurpura,TTP)、托洛薩-亨特綜合征(Tolosa-Huntsyndrome)、橫貫性脊髓炎及壞死性脊髓病(Transversemyelitis&necrotizingmyelopathy)、I、II及III型自身免疫性多腺綜合征(TypeI，II，&IIIautoimmunepolyglandularsyndromes)、饋蕩性結(jié)腸炎(Ulcerativecolitis)、未分化結(jié)締組織病(Undifferentiatedconnectivetissuedisease，UCTD)、葡萄膜炎(Uveitis)、血管炎(Vasculitis)、水泡性皮炎(Vesiculobullousdermatosis)、白癜風(fēng)(Vitiligo)、韋格納氏肉芽月中病(Wegener'sgranulomatosis)等。并非進(jìn)一步限制，本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案考慮到了支原體感染，例如肺炎支原體(Mycoplasmapneumoniae)、尿素分角軍尿素原體(Ureaplasmaurealyticum)、生殖器支原體(Mycoplasmagenitalium)、軍團(tuán)桿菌病(Legionellosis)、嗜肺性軍團(tuán)病菌(LegionelIapneumophi1ia)、鼠疫耳口爾森菌(Yersiniapestis)、鉤端螺旋體病(Leptospirosis)、鉤端螺旋體屬(Leptospira)、鼠咬熱(哈佛希耳熱)(Rat-BiteFever(HaverhillFever))、念珠狀鏈桿菌(Str印tobacillusmoniliformis)、蜱傳播的疾病(Tick-BorneDiseases)。螺旋體屬博氏疏螺旋體(Borreliaburgdorferi)、游走性紅斑(Erythemamigrans)、萎縮性肢皮炎(AcrodermatitisAtrophicans)、螺旋體淋巴細(xì)胞瘤(BorrelialLymphocytoma)、回歸熱(RelapsingFever)、埃里希體病(Ehrlichiosis)、土拉菌病(Tularemia)。衣原體感染，肺炎衣原體(Chlamydiapneumoniae)、鳥病(Ornithosis)、鸚鵡熱(Psittacosis)、鸚鵡熱(ParrotFever)、鸚鵡熱衣原體(Chlamydiapsittaci)、巴爾通體感染(BartonellaInfection)、Q熱(QFever)。立克次氏體感染，如落磯山斑疹熱(RockyMountainSpottedFever)、斑疹傷寒(Typhus)、流行性虱傳播的叢林斑疫傷寒(EpidemicLouse-BorneScrubtyphus)。蒼白密iii累方i!體(Treponemapallidum)>弧菌感染等。細(xì)胞內(nèi)病原體如結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)、麻風(fēng)分枝桿菌(Mycobacteriumleprae)的感染等。本發(fā)明可以為具有病毒和微生物抗原的組合疫苗。這些增補(bǔ)的抗原可以選自白喉類毒素(D)(diphtheriatoxoid(D))、破傷風(fēng)類毒素(T)(tetanustoxoid(T))、無細(xì)胞百日R^JjlJIi.(acellularpertussisantigens,Pa)^^i^i^MMM-^t^M(inactivatedpoliovirus,IPV)、嗜血桿菌流感抗原(haemophilusinfluenzaantigen,Hib)、甲型肝炎抗原、單純皰疹病毒(HSV)、衣原體、GSB、HPV、肺炎鏈球菌(str印tococcuspneumoniae)和奈瑟菌屬(neisseria)抗原。賦予針對其他疾病的保護(hù)作用的抗原也可以被組合到本發(fā)明的疫苗20制劑中。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案為一種治療自身免疫性疾病的方法，所述方法與病毒感染相關(guān)或不相關(guān)。這些疾病包括由肝炎病毒導(dǎo)致的肝炎；自身免疫性肝炎；與細(xì)小病毒B19感染相關(guān)的貧血；自身免疫性溶血性貧血；同種異體移植骨髓或器官移植受體；糖尿??；胎兒同種免疫性血小板減少癥(fetalalloimmunethrombocytopenia)；兒童難治性癲癇(pediatricintractableepilepsy)；低丙球蛋白血癥；X連鎖的無丙種球蛋白血癥(X-linkedagammaglobulinemia)；常見變異型免疫缺陷病(commonvariableimmunodeficiency)；威斯科特-奧爾德里奇綜合征(Wiskott-Aldrichsyndrome)；原發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathicthrombocytopeniapurpura)；川崎綜合征；皮肌炎；阿爾茨海默病(Alzheimerdisease)、多發(fā)性硬化；多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)；重癥肌無力(myastheniagravis)；多肌炎(polymyositis)；格-巴二氏綜合征；炎性脫髓銷性多神經(jīng)病(inflammatorydemyelinatingpolyneuropathy)；紅斑狼&(lupuserythematosus)；蘭伯特-伊頓綜合征(Lambert—Eatonmyasthenia)；落葉型天皰疫(pemphigusfoliaceus)等。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地識別并且采用本發(fā)明來治療其他自身免疫性疾病，如急性播散性腦脊髓炎(Acutedisseminatedencephalomyelitis)；阿狄森氏綜合征；斑禿；強(qiáng)直性脊柱炎；抗磷脂抗體綜合征(Antiphospholipidantibodysyndrome)；自身免疫性溶血性貧血；自身免疫性肝炎；抗平滑肌肌動蛋白(Anti-SmoothMuscleActin)；自身免疫性內(nèi)耳病；II型大皰性類天皰瘡抗大皰性類天皰瘡抗原1禾口2(半橋?？乖?(BullouspemphigoidIIAnti-BullousPemphigoidAntigen1and2(Hemidesmosomeantigens))；腹部疾病(Coeliacdisease)；查力口斯病(Chagasdisease)；月市慢性阻塞性疾病(Chronicobstructivepulmonarydisease)；克羅恩病(CrohnsDisease)；皮肌炎；糖尿病(Diabetesmellitus)；子宮內(nèi)膜異位癥；古德帕斯徹氏綜合征；抗基底膜膠原蛋白；心臟缺血(Heartischemia)和中風(fēng)(stroke)；格雷夫斯氏病；格-巴二氏綜合征；抗神經(jīng)節(jié)苷脂(Anti-ganglioside)；橋本氏?。换撔院瓜傺?Hidradenitissuppurativa)；川畸病(Kawasakidisease)；腎病(nephropathy)；原發(fā)性血小板減少性紫癜；間質(zhì)性膀胱炎；紅斑狼瘡；混合性結(jié)締組織病；硬斑病(Morphea)；多發(fā)性硬化；抗髓磷脂堿蛋白(Anti-MyelinBasicProtein)；重癥肌無力；發(fā)作性睡病(Narcolepsy)；神經(jīng)性肌強(qiáng)直(Neuromyotonia)；尋常型天皰瘡(PemphigusVulgaris)；抗維管束原(Anti-Desmogein)；牙周炎(Periodontitis)；惡性貧血；(Polymyositis)；(Primarybiliarycirrhosis)；抗-p62、抗-splOO、抗線粒體；銀屑病；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；類風(fēng)濕因子(Rheumatoidfactor)；精神分裂癥(Schizophrenia)；硬皮??；(Anti-topoisornerase)；斯耶格倫氏綜合征；僵人綜合征；顳動脈炎；潰瘍性結(jié)腸炎；原發(fā)性炎性腸病(Idiopathicinflammatoryboweldisease)；血管炎；(Vitiligo)；韋格納氏肉芽腫病等。本發(fā)明的組合物可與另一種抗肝炎病毒藥物聯(lián)合給藥。所給的劑量應(yīng)取決于藥物的吸收、失活和排出率，以及其他本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的因素?？共《舅幬锏膶?shí)例在本發(fā)明的
背景技術(shù)：
部分以及在例如美國專利7，456，155(通過引用的方式納入本文)的專利文獻(xiàn)中有述。同樣注意到了結(jié)合使用本發(fā)明與任何其他生物活性物質(zhì)的可能性，所述生物活性物質(zhì)如具有藥物活性的物質(zhì)，包括但不限于抗炎藥、鎮(zhèn)痛藥、安定劑、抗焦慮藥、解痙劑、抗抑郁藥、抗緊張劑、抗焦慮藥、麻醉拮抗劑、抗帕金森病藥、膽堿能激動劑、化學(xué)治療藥、免疫抑制劑、抗病毒藥、抗微生物藥如抗生素、食欲抑制劑、抗膽堿能藥、antimetrics、抗組胺藥、抗偏頭痛藥、冠狀動脈、小腦或外周血管擴(kuò)張藥、激素、避孕藥、抗血栓劑、利尿藥、抗高血壓劑、心血管藥、阿片樣物質(zhì)等。并不僅限于藥物，其他物質(zhì)同樣與本發(fā)明的組合物結(jié)合使用，如亞細(xì)胞組分如核或線粒體、細(xì)胞、質(zhì)體、細(xì)菌、病毒、外膜囊泡制劑，以及分子包括但不限于脂質(zhì)、有機(jī)物、蛋白和肽(合成的和天然的)、肽模擬物、天然激素(如hCG、FSH、LH、肽類激素和類固醇)、D氨基酸和L氨基酸多聚體、寡糖、多糖、核苷酸、寡核苷酸和核酸包括DNA和RNA、蛋白核酸雜合體、小分子及其生理活性類似物。此外，所述調(diào)節(jié)劑可來源自天然來源，或者通過重組和合成方法制備，并且所述調(diào)節(jié)劑包括類似物、激動劑和同系物。根據(jù)下文額外提供的具體實(shí)施方式，本發(fā)明的其他特征和優(yōu)勢是顯而易見的，所述實(shí)施方式包括不同的實(shí)施例。下文提供的實(shí)施例舉例說明了可用于實(shí)施本發(fā)明的不同組分和方法。所述實(shí)施例并非限制要求保護(hù)的發(fā)明。根據(jù)本公開內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以識別并且采用其他組分和方法來實(shí)施本發(fā)明，但是根據(jù)本發(fā)明的公開內(nèi)容這些組分和方法將是顯而易見的。實(shí)施例實(shí)施例1.在動物體內(nèi)的急性毒性根據(jù)用于急性毒性的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)，強(qiáng)制給實(shí)驗(yàn)室小鼠喂食過量的本發(fā)明的組合物2周，以鑒別50%致死劑量(LD50)。但是，在等于約27g/kg制劑的最大試驗(yàn)日劑量下，未觀察到小鼠群中有小鼠死亡。如果將該劑量外推到平均體型的人，則其相當(dāng)于每天1.9kg產(chǎn)品——等于每天2，000片的劑量。此外，通過尸檢未觀察到器官中存在可辨別的形態(tài)變化。因此，未能確定LD50。實(shí)施例2.動物體內(nèi)的慢性毒性即使在最高的測試w/w劑量下，在使用實(shí)施例1的組合物進(jìn)行慢性毒性研究的過程中也未觀察到在雌性和雄性大鼠中存在與處理相關(guān)的死亡。在該2.5%組的一些動物中，觀察到伴隨有軟便的水消耗增加。這似乎導(dǎo)致在正常體重增加方面產(chǎn)生輕微而非統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的降低，但僅僅是在給予高劑量的雄性中。總之，在任何給藥處理組中，均不存在可覺察的飲食習(xí)慣、行為、癥狀、形態(tài)和器官重量變化。實(shí)施例3.人體內(nèi)的安全性研究將本發(fā)明的口服劑型組合物以每天1-2片的日劑量給予正常人志愿者，持續(xù)2個(gè)月，所述組合物含有來源自慢性肝炎攜帶者的經(jīng)部分水解的HBV和HCV抗原。在給藥前和給藥后，記錄血液生物化學(xué)和其他關(guān)于肝臟和腎臟功能的標(biāo)準(zhǔn)測量值以及免疫系統(tǒng)參數(shù)。對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析并且在表1中示出。從結(jié)果中可以看出，本發(fā)明的組合物是安全的，對任何參數(shù)均沒有任何不良影響。在一些個(gè)體中，發(fā)現(xiàn)CD4T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，表明對細(xì)胞免疫性有積極作用。值得注意的是，觀察到在有飲酒嫌疑的那些個(gè)體中，肝功能得到了改善。在這類個(gè)體中特別是在代償失調(diào)的肝臟硬化患者中，本發(fā)明的組合物可有效改善酒精導(dǎo)致的肝炎的指標(biāo)。表1.通過各種實(shí)驗(yàn)室參數(shù)測量的安全性研究的結(jié)果2權(quán)利要求一種口服組合物，包括治療有效量的部分水解抗原，其中所述的部分水解抗原來自于感染了一種病毒的供體的體液。2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述病毒為肝炎病毒。3.權(quán)利要求1的組合物，其中所述抗原為肝炎病毒抗原。4.權(quán)利要求1的組合物，其中所述抗原為一種異型抗原。5.權(quán)利要求1的組合物，其中所述抗原為異種抗原。6.權(quán)利要求1的組合物，其中所述體液主要由全血組成。7.權(quán)利要求1的組合物，其中所述體液主要由血漿組成。8.權(quán)利要求1的組合物，其中所述血液主要由血清組成。9.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物中不含有免疫佐劑。10.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物為固體組合物。11.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物為片劑或丸劑。12.權(quán)利要求1的組合物，其中所述抗原被埋入在基質(zhì)中。13.權(quán)利要求12的組合物，其中所述基質(zhì)為選自下列的金屬或其鹽堿金屬、堿土金屬、過渡金屬、類金屬、堿性金屬、稀土元素。14.一種預(yù)防人肝炎病毒感染的方法，包括給予有效量的權(quán)利要求1所述的組合物。15.一種治療肝炎病毒感染的人的方法，包括給予有效量的權(quán)利要求1所述的組合物。16.一種制備用于治療或預(yù)防肝炎的如權(quán)利要求1所述的口服組合物的方法，包括部分水解肝炎病毒或其片段，使用金屬鹽沉淀，并且制成固體口服組合物。17.權(quán)利要求16所述的制備口服組合物的方法，包括將肝炎病毒或其片段埋入金屬鹽的步驟。18.權(quán)利要求17的方法，其中所述金屬主要選自堿金屬、堿土金屬、過渡金屬、類金屬、堿性金屬或者稀土元素。19.權(quán)利要求17的方法，其中所述金屬鹽包括硼化物、乙酸鹽、磷酸鹽、鋁化物、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、溴化物、碳酸鹽、氯化物、六水合氯化物、檸檬酸鹽、二硼化物、二谷氨酸鹽、二鈾酸鹽、氟化物、葡糖酸鹽、六水合物、氫化物、氫氧化物、氧化物、碘化物、乳酸鹽、乙酰丙酸鹽、硝酸鹽、氮化物、乳清酸鹽、氯氧化物、氧硫化物、高氯酸鹽、過氧化物、氧脯氨酸鹽、硅化物、硬脂酸鹽、硫酸鹽、硫化物、亞硫酸鹽或者三硅酸鹽。20.權(quán)利要求17的方法，其中該方法的一個(gè)附加的步驟包括加熱步驟。21.一種治療肝炎的方法，包括向有此需要的受試者給予有效量的口服組合物，所述口服組合物包括部分水解的肝炎病毒感染的細(xì)胞或者其片段。22.權(quán)利要求21的方法，所述方法用于保護(hù)有此需要的未感染的受試者免受肝炎病毒感染。23.一種治療或預(yù)防微生物感染的疫苗，所述疫苗包括片劑或丸劑形式的部分水解的微生物抗原以及異型抗原。24.權(quán)利要求23的疫苗，所述微生物感染主要選自由下列微生物導(dǎo)致的病毒感染肝DNA病毒科Ofepadnaviridae)、小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)、黃病毒科(Flaviridae)、逆轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae)、杯狀病毒科(Caliciviridae)、披膜病毒科(Togaviridae)、冠狀病毒科(Coronoviridae)、彈狀病毒科(Rhabdoviradae)、纖絲病毒科(Filoviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)、正粘病毒科(Orthomyxoviridae)、布尼亞病毒科(Bungaviridae)、沙粒病毒科(Arenaviridae)、細(xì)小病毒科(Parvoviridae)、乳禾4·(Papovaviridae)(Adenoviridae)(Herpesviridae)>痘病毒科(Poxyiridae)、虹彩病毒科(Iridoviridae)等。25.一種組合物，包括部分酸水解的肝炎抗原、一種異型抗原，其中所述部分酸水解的肝炎抗原和異型抗原被埋入金屬鹽基質(zhì)中。26.權(quán)利要求25的組合物，其中所述組合物是經(jīng)熱處理的。27.權(quán)利要求26的組合物，其中所述組合物是經(jīng)至少2小時(shí)熱處理的。28.權(quán)利要求26的組合物，其中所述組合物經(jīng)過高于56攝氏度的熱處理。29.權(quán)利要求26的組合物，其中所述組合物經(jīng)過高于80攝氏度的熱處理。30.權(quán)利要求26的組合物，其中所述組合物經(jīng)過pH低于3的條件下的酸水解。31.權(quán)利要求30的組合物，其中所述組合物經(jīng)過pH低于2的條件下的酸水解。32.一種固體組合物，包括在可口服的金屬鹽基質(zhì)中包埋的酸水解的異型抗原。33.權(quán)利要求32的組合物，其中所述異型抗原是人異型抗原。34.權(quán)利要求32的組合物，其中所述異型抗原經(jīng)過熱處理。35.權(quán)利要求32的組合物，其中所述金屬鹽來自二價(jià)金屬。全文摘要本發(fā)明涉及免疫學(xué)和微生物學(xué)領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及用于治療和預(yù)防肝炎和自身免疫疾病的一種組合物，所述組合物包括治療有效量的部分水解抗原，其中所述部分水解抗原來自于感染了一種病毒的供體的體液。本發(fā)明還公開了制備和使用該組合物的方法。文檔編號A61K47/18GK101954076SQ20101016674公開日2011年1月26日申請日期2010年4月27日優(yōu)先權(quán)日2009年4月27日發(fā)明者A·S·保林貝爾申請人:免疫制劑美國公司