技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺(“來那替尼”)的馬來酸鹽，其結(jié)晶形式，制備所述鹽的方法，有關(guān)的化合物，包含所述馬來酸鹽的藥物組合物，和它們的使用方法。(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的馬來酸鹽可用于治療癌。

背景技術(shù)：

衍生自3-羥基喹啉的化合物已表現(xiàn)出抗腫瘤活性，這使得它們可用作治療各種癌的化療劑，所述癌包括但不限于，胰腺癌，黑素瘤，淋巴管癌，腮腺瘤，巴雷特食管癌，食道癌，頭頸癌，卵巢癌，乳腺癌，上皮樣瘤，主要器官諸如腎、膀胱、喉、胃和肺的癌癥，結(jié)腸息肉和結(jié)直腸癌以及前列腺癌。衍生自3-氰基喹啉的化合物的實(shí)例在美國(guó)專利6,002,008；6,432,979和6,288,082中被公開并顯示出具有抗腫瘤活性。某些3-氰基喹啉化合物的一個(gè)限制是：它們?cè)谟坞x堿形式下不溶于水。

特定化合物作為其鹽、水合物和/或任何多晶型物的結(jié)晶形式通常是制備藥物的容易性，制劑的穩(wěn)定性、水溶性、儲(chǔ)存穩(wěn)定性、制劑的容易性和體內(nèi)藥理學(xué)的一個(gè)重要的決定因素。在某些方面諸如制備的容易性、穩(wěn)定性、水溶性和/或優(yōu)異藥代動(dòng)力學(xué)方面被認(rèn)為是關(guān)鍵時(shí)，一種結(jié)晶形式可能優(yōu)于另一種結(jié)晶形式。(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺鹽的結(jié)晶形式比游離堿具有更高的水溶性，但是穩(wěn)定，完成了對(duì)穩(wěn)定的、結(jié)晶的、水溶性形式的并選擇性抑制激酶活性并從而抑制細(xì)胞增殖和腫瘤發(fā)生的被取代的3-氰基喹啉化合物的未滿足的需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的結(jié)晶形式，其已被分離并被表征為：無水形式，一水合物形式，以及無水形式和一水合物形式的混合物(被稱為部分水合形式)。本發(fā)明還涉及使用該馬來酸鹽及其結(jié)晶形式的方法，以及包含它們的藥物制劑。

本發(fā)明提供了無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)的分離的結(jié)晶形式，其通過差示掃描量熱法(DSC)表征，表現(xiàn)出在約196-204℃范圍內(nèi)的開始溫度，在該溫度下發(fā)生熔化和分解。

本發(fā)明還提供了無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)的分離的結(jié)晶形式，其中該馬來酸鹽通過在其X-射線衍射圖案中以下的2θ角(±0.20°)處的X-射線衍射(XRD)峰來表征：6.16，7.38，8.75，10.20，12.24，12.61，14.65，15.75，17.33，18.64，19.99，20.66，21.32，22.30，23.18，24.10，24.69，25.49，26.09，26.54，27.52，28.62和29.43。在單獨(dú)的實(shí)施方案中，無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的分離的結(jié)晶形式表現(xiàn)出其中全部的X-射線衍射峰大約處于上面所公開的2θ角處的X-射線衍射圖案。

本發(fā)明提供了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物(II形)的分離的結(jié)晶形式，其在約50℃表現(xiàn)出失水并且特征在于基于作為一水合物的該化合物的重量的約2.5到2.7重量％的含水率。

本發(fā)明還提供了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物(II形)的分離的結(jié)晶形式，其中該馬來酸鹽的特征在于在其X-射線衍射圖案中以下的2θ角(±0.20°)處的XRD峰：6.53，8.43，10.16，12.19，12.47，13.01，15.17，16.76，17.95，19.86，21.11，21.88，23.22，23.78，25.69，26.17，27.06，27.58，28.26，28.73和29.77。在單獨(dú)的實(shí)施方案中，(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物的分離的結(jié)晶形式表現(xiàn)出其中全部的X-射線衍射峰大約處于上面所公開的2θ角處的X-射線衍射圖案。

本發(fā)明還提供了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物(II形)的分離的結(jié)晶形式，其通過DSC表征時(shí)表現(xiàn)出在196-204℃的范圍內(nèi)的開始溫度，在該溫度下、特別是在約203.8℃的轉(zhuǎn)變溫度下發(fā)生熔化和分解。

本發(fā)明提供了部分水合的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(III形)的分離的結(jié)晶形式，其特征在于基于該化合物的重量的約0.8到約2.4重量％、包括約1.5％到約2.3重量％的含水率。

本發(fā)明提供了通過將(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺(游離堿)與馬來酸混合并將該混合物溶解在高溫的水-醇溶液中來制備馬來酸鹽的方法。將生成的溶液冷卻，該冷卻的溶液包含(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。

本發(fā)明還提供了制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與有機(jī)溶劑和一定量的水混合并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物。

本發(fā)明還提供了制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與有機(jī)溶劑混合；將包含一定量的水的溶液加入到有機(jī)溶劑中；并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物。

本發(fā)明還提供了制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與有機(jī)溶劑和一定量的水混合并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物。

本發(fā)明還提供了制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與包含一定量的水的有機(jī)溶劑混合并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物。

本發(fā)明還提供了制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與包含一定量的水的有機(jī)溶劑混合數(shù)天的時(shí)段并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物。

本發(fā)明還提供了制備無水形式(I形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的方法，包括以下步驟：在大于30℃的溫度下真空干燥作為一水合物的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(II形)歷時(shí)約12到約48小時(shí)。

本發(fā)明還提供了包含(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽以及一種或多種由以下結(jié)構(gòu)表示的有關(guān)的化合物的藥物制劑：

本發(fā)明還提供了用于抑制HER-2激酶活性的藥物組合物，其包含治療有效量的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽和藥學(xué)可接受的載體。該藥物組合物還可包含一種或多種上面討論的有關(guān)的化合物。該馬來酸鹽可為無水形式，一水合物形式，以及這些形式的組合。

本發(fā)明還提供了通過對(duì)受治療者給予治療有效量的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽用來預(yù)防、治療或抑制癌的方法。受治療者可為哺乳動(dòng)物，更具體是人。該馬來酸鹽可在其無水形式，一水合物形式或部分水合形式下被給予。在該方法期間還可給予上面討論的一種或多種有關(guān)的化合物。

附圖說明

圖1.兩種結(jié)晶形式，即無水I形和一水合物II形的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的XRD掃描。

圖2.I形和II形的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的動(dòng)態(tài)蒸氣吸附(DSV)等溫線。

圖3.I形和II形的差示掃描量熱(DSC)曲線。

圖4.I形和II形的熱重分析(TGA)曲線。

圖5.在I形暴露于75％的相對(duì)濕度和周圍環(huán)境溫度下歷時(shí)22天之后，I形、II形和III形(部分水合形式)的XRD掃描。

圖6.兩批I形的XRD掃描。

圖7.在暴露于50-60％的相對(duì)濕度和20-25℃的周圍環(huán)境溫度下歷時(shí)24小時(shí)之前和之后，II形的XRD掃描。

圖8在暴露于50-60％的相對(duì)濕度和20-25℃的周圍環(huán)境溫度下歷時(shí)24小時(shí)之前和之后，I形的XRD掃描。

具體實(shí)施方式

(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺是Her-2(又名ErbB-2或neu)激酶的不可逆的抑制劑，所述激酶是表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)家族的一個(gè)成員。EGFR家族成員已牽涉腫瘤發(fā)生并與人類腫瘤類型的差預(yù)后有關(guān)。游離堿形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的結(jié)構(gòu)如下所示：

游離堿形式的化合物(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺描述于美國(guó)專利6,288,082中。將該化合物基于生藥分類系統(tǒng)(Biopharmaceutical Classification System)被分為BCS IV類化合物(低水溶性和弱滲透性)。游離堿在水中具有低的溶解度，在約pH 7下的水溶解度為約1μg/mL。水溶解度隨著pH的降低而增加，因?yàn)樗龌衔锇l(fā)生離子化。該化合物在胃腸pH下可溶于水，并且溶出是非限速的。需要具有改善的物化性質(zhì)的形式的該化合物。

本發(fā)明提供了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的可溶于水的酸加成鹽形式。游離堿化合物能夠與多種藥學(xué)合適的酸形成鹽。藥學(xué)合適的酸包括但不限于例如，乙酸，富馬酸(fumuric acid)，馬來酸，甲磺酸，琥珀酸，硫酸，酒石酸和對(duì)甲苯磺酸。評(píng)價(jià)了每種酸加成鹽形式的物化性質(zhì)，以篩選最佳的藥學(xué)鹽形式，如表1所示。

表1.(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的鹽形式的物化性質(zhì)

*--未列舉小的吸熱峰和一些寬吸熱峰。

在這九種鹽中，馬來酸鹽表現(xiàn)出有利的物化性質(zhì)。該馬來酸鹽是結(jié)晶并且吸濕性低。甲磺酸鹽具有吸濕性并且結(jié)晶度低。甲苯磺酸鹽更不具有吸引力，主要是因?yàn)榧妆交撬猁}的更高分子量和安全性考慮。盡管乙酸“鹽”似乎是結(jié)晶，但是NMR顯示從乙酸制備的產(chǎn)物實(shí)際上不是鹽。從乙酸制備的產(chǎn)物不溶于水并且獲得的堿性pH的事實(shí)證實(shí)了其主要保持了游離堿形式。

(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽是結(jié)晶，與游離堿相比具有更高的水溶解度，如表2所示。

表2.游離堿與馬來酸鹽的溶解度比較

^*LOD＝檢測(cè)極限

^**又名Polysorbate^TM 80，從聚氧乙基山梨醇(polyoxylated sorbitol)和油酸制備的非離子性溶劑。

已從在大鼠中進(jìn)行的多個(gè)臨床前研究中提取的數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的系統(tǒng)暴露(SE)數(shù)據(jù)的比較。這些數(shù)據(jù)的分析指示了，在大鼠中，當(dāng)在5到45mg/kg的劑量范圍下給藥時(shí)，給予作為馬來酸鹽的化合物，與給予游離堿相比，前者提供了AUC(濃度下面積)的兩倍增加。作為游離堿的化合物的系統(tǒng)利用度相對(duì)較低(20％)，并且在糞便中存在的大量的藥物可歸因于差的吸收。馬來酸鹽的提高的溶解度表明增強(qiáng)了化合物在大鼠中的吸收。表3表示在大鼠中觀察到的血漿化合物平均AUC和C_max數(shù)據(jù)。

表3.在大鼠中的平均(SE)化合物藥代動(dòng)力學(xué)

a：AUC_0-∞

ND＝未給藥

使用0.5到4.5mg/mL的懸浮液以10mL/kg給予的馬來酸鹽

使用1到10mg/mL的懸浮液以10mL/kg給予的游離堿

馬來酸鹽一致性地并且可重現(xiàn)性地表現(xiàn)出有利的物化性質(zhì)，如表4所示。

表4.馬來酸鹽初步試驗(yàn)批料的物化性質(zhì)

*粒度從得自光學(xué)顯微鏡的捕獲圖像進(jìn)行估計(jì)

**ND：未測(cè)定

***游離堿

游離堿形式的化合物(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺除了表現(xiàn)出差的水溶解度之外，還與胃中的emectic受體相互作用，導(dǎo)致哺乳動(dòng)物腹瀉。然而，(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的馬來酸鹽，意想不到地減輕這種問題并且使得與哺乳動(dòng)物中emectic受體的相互作用最小化。

馬來酸鹽通過將(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺(游離堿)與馬來酸混合并將該混合物溶解在高溫的水-醇溶液中來制備。將生成的溶液冷卻，該冷卻的溶液包含(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，如路線1所示，通過將馬來酸與游離堿在水和正丙醇的溶液中合并來制備(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。

路線1

游離堿與馬來酸的反應(yīng)在約40℃到約60℃、優(yōu)選約40℃到約50℃的高溫下發(fā)生。水:正丙醇的比率可改變，例如為約1:10到約1:5，并且水:正丙醇的最佳比率為約1:9。水-醇溶液可包含約5體積％到約20體積％的水和約80體積％到約95體積％的醇。醇可為正丙醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，水-醇溶液包含約10體積％的水和約90體積％的正丙醇。溶劑溶液的體積可為約8到約25體積，包括約10約12體積。相對(duì)于每當(dāng)量的游離堿使用約1.0-1.2當(dāng)量的馬來酸，優(yōu)選相對(duì)于每當(dāng)量的游離堿使用約1.03當(dāng)量的馬來酸。

生成的馬來酸鹽的溶液在冷卻之前可通過過濾使其澄清。冷卻步驟可持續(xù)進(jìn)行直到溶液達(dá)到約45℃或更低的溫度、包括達(dá)到約39℃或更低的溫度、更優(yōu)選達(dá)到約30℃或更低的溫度為止。在一個(gè)實(shí)施方案中，在冷卻到約室溫、優(yōu)選冷卻到約23℃到約25℃之后，將溶液過濾。一般地，當(dāng)溫度達(dá)到37℃或更低時(shí)，馬來酸鹽開始從溶液結(jié)晶出來。可使溶液在室溫下靜置至少12小時(shí)，優(yōu)選約12到約15小時(shí)，然后過濾和洗滌，以回收結(jié)晶馬來酸鹽產(chǎn)物。得到的濾餅可用相同的或不同的水-醇溶液洗滌以獲得產(chǎn)物?？蓪⒃摦a(chǎn)物干燥以獲得結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。此時(shí)，被回收和分離的馬來酸鹽產(chǎn)物一般是一水合物形式的馬來酸鹽的形式。

該產(chǎn)物可在加熱下進(jìn)行真空干燥，以約70％到約95％的收率、優(yōu)選約80％到約95％的收率制備無水形式的馬來酸鹽(I形)。該產(chǎn)物通常具有超過約98％的純度，一般為約99％純。一般地，干燥過程進(jìn)行約12到約48小時(shí)，以獲得從一水合物形式的馬來酸鹽(II形)向無水形式的馬來酸鹽的完全轉(zhuǎn)化。更短的干燥時(shí)間通常獲得兩種結(jié)晶形式的混合物。該干燥過程通常在大于室溫的溫度下進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，馬來酸鹽的干燥在大于約30℃、優(yōu)選約40℃到約60℃、并且在另一個(gè)實(shí)施方案在約50℃的溫度下進(jìn)行。

馬來酸鹽可溶于許多的極性溶劑中，這些極性溶劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，但是，如果要求小的溶劑體積，經(jīng)常使用二甲亞砜(DMSO)?？蓪MSO溶液加熱到約45℃到約60℃以進(jìn)一步提高溶解度。當(dāng)無水馬來酸鹽在溶液中時(shí)，可加入水，一般迅速地加入水，導(dǎo)致結(jié)晶，當(dāng)過濾時(shí)提供了結(jié)晶一水合物形式。無水鹽可溶于溶劑例如DMSO中，并可向該溶液中加入水和有機(jī)溶劑的水性溶液，所述有機(jī)溶劑例如諸如四氫呋喃(THF)、異丙醇(IPA)、正丙醇、丙酮、乙醇、甲醇和乙腈。在一個(gè)實(shí)施方案中，使用的有機(jī)溶劑是IPA，在另一個(gè)實(shí)施方案中，使用的有機(jī)溶劑是正丙醇，并且在第三個(gè)實(shí)施方案中，使用這兩種有機(jī)溶劑的混合物。水性溶液的含水率可以低至5％，但可為約7.5％或更高，并且在一個(gè)實(shí)施方案中，含水率為約10％到約15％。然后使生成的溶液靜置長(zhǎng)達(dá)約24小時(shí)，并且在一個(gè)實(shí)施方案中使其靜置約12小時(shí)到約24小時(shí)，以允許結(jié)晶的發(fā)生?；旌衔锏倪^濾得到結(jié)晶一水合物形式的馬來酸鹽。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“有機(jī)溶劑和水”是指有機(jī)溶劑和水的溶液，所述有機(jī)溶劑諸如例如四氫呋喃(THF)、DMSO、甲醇、乙醇、異丙醇或乙腈，其中有機(jī)溶劑占溶液體積的大于50％。

本發(fā)明的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的馬來酸鹽以三種不同的結(jié)晶形式被分離：無水形式(I形)，一水合物形式(II形)和部分水合形式(III形)，所述的部分水合形式包括I形和II形的混合物。

根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，通過將(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺與馬來酸的反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行干燥而獲得作為結(jié)晶固體的無水形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)。干燥包括空氣干燥，加熱和減壓干燥。在可供選擇的實(shí)施方案中，通過對(duì)一水合物形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(II形)進(jìn)行干燥而獲得作為結(jié)晶固體的無水形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)

無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)的分離的結(jié)晶形式，其通過差示掃描量熱法(DSC)表征時(shí)表現(xiàn)出在約196-204℃的范圍內(nèi)的開始溫度，在該溫度下發(fā)生熔化和分解。

無水馬來酸鹽(I形)的特征在于在其X-射線衍射圖案中以下的2θ角(±0.20°)處的X-射線衍射(XRD)峰：6.16，7.38，8.75，10.20，12.24，12.61，14.65，15.75，17.33，18.64，19.99，20.66，21.32，22.30，23.18，24.10，24.69，25.49，26.09，26.54，27.52，28.62和29.43。在單獨(dú)的實(shí)施方案中，無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)的分離的結(jié)晶形式表現(xiàn)出其中全部的X-射線衍射峰大約位于上面所公開的2θ角處的X-射線衍射圖案。

根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，通過將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與有機(jī)溶劑和一定量的水混合并過濾從該混合物沉淀的結(jié)晶一水合物來制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。

在單獨(dú)的實(shí)施方案中，通過將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與有機(jī)溶劑混合；將包含一定量的水的溶液加入到該有機(jī)溶劑中；并過濾從混合物沉淀的結(jié)晶一水合物來制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過將無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)與包含一定量的水的有機(jī)溶劑混合數(shù)天的時(shí)段并過濾從該混合物沉淀的結(jié)晶一水合物來制備結(jié)晶一水合物形式(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽。數(shù)天時(shí)段適當(dāng)?shù)貫榧s1-20天。

(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物(II形)的分離的結(jié)晶形式，通過DSC測(cè)量時(shí)在約50℃表現(xiàn)出失水，并且特征在于通過熱解重量分析(TGA)測(cè)量時(shí)基于作為一水合物的該化合物的重量的約2.5到2.7重量％的含水率。一水合物形式的馬來酸鹽的含水率還通過費(fèi)歇爾滴定法來測(cè)量。

作為一水合物(II形)的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的特征在于在其X-射線衍射圖案中以下的2θ角(±0.20°)處的X-射線衍射(XRD)峰：6.53，8.43，10.16，12.19，12.47，13.01，15.17，16.76，17.95，19.86，21.11，21.88，23.22，23.78，25.69，26.17，27.06，27.58，28.26，28.73和29.77。在單獨(dú)的實(shí)施方案中，(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽一水合物的分離的結(jié)晶形式表現(xiàn)出其中全部的X-射線衍射峰大約位于上面所公開的2θ角處的X-射線衍射圖案。

本文使用的術(shù)語(yǔ)分離的是指存在的結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的超過50％是I形和II形之一。在一個(gè)實(shí)施方案中，存在的結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的至少70％是I形和II形之一。在第二個(gè)實(shí)施方案中，存在的馬來酸鹽的至少80％是I形和II形之一。在第三個(gè)實(shí)施方案中，存在的馬來酸鹽的至少90％是I形和II形之一。

(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的兩種結(jié)晶形式表現(xiàn)出不同的XRD圖案和峰。每種馬來酸鹽形式的XRD圖案是該鹽形式所獨(dú)有的。I形和II形的XRD圖案采用分析化學(xué)和X-射線晶體衍射領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的技術(shù)和設(shè)備進(jìn)行測(cè)定。XRD圖案使用粉末樣品生成并且由一組衍射峰組成，其可用2θ角、d-間距和/或相對(duì)峰強(qiáng)度來表示。XRD圖案如圖1、5、6、7和8中所示。圖1、7和8中提供的X射線數(shù)據(jù)的收集參數(shù)如下所示：電壓40kV；電流40.0mA；5.00-30.00度掃描范圍；Bruker D8Advance設(shè)備；掃描步長(zhǎng)0.01°；總掃描時(shí)間30分鐘；使用Vantec-1檢測(cè)器和Ni濾波器。圖5和圖6中的X射線數(shù)據(jù)如下所示被收集：電壓30kV；電流15mA；3-40度掃描范圍；2.00°/min；Rigaku Miniflex臺(tái)式X射線衍射儀。

2θ衍射角和相應(yīng)的d-間距值說明了在XRD圖案中發(fā)現(xiàn)的峰的位置。使用布拉格方程，使用觀察到的2θ角和銅Kα1波長(zhǎng)來計(jì)算d-間距值。這些數(shù)字可由于使用不同的衍射計(jì)以及由于樣品制備方法的不同而發(fā)生改變。然而，預(yù)期相對(duì)峰強(qiáng)度可有更多的改變。因此，應(yīng)該基于所觀察到的2θ角和d-間距來鑒定不同的形式，并且強(qiáng)度不那么重要。本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解，根據(jù)本文所述而獲得的I形和II形的XRD圖案可包含另外的峰。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員可承認(rèn)，能夠觀察到給定形式的所有的峰可能高度依賴于該形式的濃度水平。圖1闡述了兩種結(jié)晶形式即I形和II形的馬來酸鹽的XRD掃描。結(jié)晶無水馬來酸鹽形式I形顯示于下方，而結(jié)晶一水合物形式II形的馬來酸鹽顯示于上方。

通過動(dòng)態(tài)蒸氣吸咐(DVS)詳細(xì)研究了兩種結(jié)晶形式的馬來酸鹽的相對(duì)穩(wěn)定性和吸濕性。無水形式的馬來酸鹽容易吸水并轉(zhuǎn)化為結(jié)晶一水合物形式的馬來酸鹽。當(dāng)干燥或相對(duì)濕度降低時(shí)，結(jié)晶一水合物形式的馬來酸鹽轉(zhuǎn)化為無水形式的馬來酸鹽，如圖2所示。圖2是動(dòng)態(tài)蒸氣等溫吸附曲線，其表明I形(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽在高于40％相對(duì)濕度(RH)、尤其在60％RH或更高時(shí)獲得水分。圖2還表明II形在20％RH和更低、尤其在10％RH和更低的條件下失水。在以下條件下進(jìn)行DVS：RH被設(shè)為0％、30％、52.5％、75％和90％，樣品在每個(gè)RH下暴露3個(gè)小時(shí)并歷時(shí)兩個(gè)完整的循環(huán)。

兩種結(jié)晶形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽表現(xiàn)出不同的DSC曲線。I形和II形的馬來酸鹽的DSC曲線概括在圖3中。I形馬來酸鹽表現(xiàn)出一個(gè)吸熱峰，指示202.49℃的轉(zhuǎn)變溫度。II形馬來酸鹽表現(xiàn)出兩個(gè)吸熱峰，對(duì)應(yīng)于失水的具有55℃的開始溫度的寬的吸熱峰和指示202.81℃的轉(zhuǎn)變溫度的第二個(gè)吸熱峰。在溶化和分解發(fā)生的約196-204℃范圍內(nèi)觀察到轉(zhuǎn)變溫度。使用具有以下參數(shù)的型號(hào)為Q1000的TA設(shè)備收集DSC數(shù)據(jù)、轉(zhuǎn)變溫度和熱流：50mL/min吹掃氣體(N₂)；掃描范圍40到240℃，掃描速率10℃/min。純的結(jié)晶固體具有特征性的轉(zhuǎn)變溫度，在該溫度下所述物質(zhì)改變其狀態(tài)，在本發(fā)明的情況下，固體轉(zhuǎn)變?yōu)橐后w。對(duì)于純物質(zhì)的小樣品而言，在固體和液體之間的轉(zhuǎn)變是如此地迅速，轉(zhuǎn)變溫度可被測(cè)量達(dá)到0.1℃。因?yàn)楹茈y將固體加熱到高于它們的轉(zhuǎn)變溫度，并且因?yàn)榧兊墓腆w傾向于在極小的溫度范圍內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)變，因此經(jīng)常使用轉(zhuǎn)變溫度來幫助進(jìn)行化合物的鑒定。固體的轉(zhuǎn)變溫度的測(cè)量還提供了與物質(zhì)純度有關(guān)的信息。純的結(jié)晶固體在極窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)變，而混合物在較寬的溫度范圍內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)變?；旌衔镞€趨向于在低于純固體的轉(zhuǎn)變溫度的溫度下發(fā)生轉(zhuǎn)變。

一水合物形式和無水形式的馬來酸鹽的TGA數(shù)據(jù)概括在圖4中。II形馬來酸鹽的特征在于通過TGA測(cè)量時(shí)基于作為一水合物的該化合物的重量的約2.5到2.7重量％的含水率。使用型號(hào)為Q的TA設(shè)備收集TGA數(shù)據(jù)。使用在30-220℃之間的10℃/min的加熱速率，并且TGA室處于40mL/min的氮?dú)饬鞯臈l件下。

觀察到馬來酸鹽的第三種結(jié)晶形式并根據(jù)XRD的觀察將其稱為部分水合物(III形)。該部分水合物是I形和II形馬來酸鹽的混合物。部分水合的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(III形)的特征在于基于該化合物的重量的約0.8到約2.4重量％，包括約1.5％到約2.3重量％的含水率。

圖5包括在將無水形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽暴露于75％相對(duì)濕度和20-25℃的周圍環(huán)境溫度下歷時(shí)22天之后，該馬來酸鹽的無水I形、一水合物II形和部分水合物III形各自的XRD掃描圖。

圖6是兩批I形的結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的XRD掃描圖。無水形式的馬來酸鹽在20-25℃的周圍環(huán)境溫度下在24小時(shí)內(nèi)吸水并部分地轉(zhuǎn)化為馬來酸鹽的一水合物形式。馬來酸鹽的一水合物形式在20-25℃的周圍環(huán)境溫度下在24小時(shí)內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。圖7是在暴露于50-60％的相對(duì)濕度和20-25的周圍環(huán)境溫度下歷時(shí)24小時(shí)之前和之后，II形的結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的XRD掃描圖。將馬來酸鹽的一水合物形式暴露于更高的溫度下(>50℃)或在減壓下加熱，促進(jìn)失水和完全轉(zhuǎn)變回到無水形式的馬來酸鹽。

I形無水形式可容易地轉(zhuǎn)化為II形一水合物形式。在20-25℃的溫度和50-60％的相對(duì)濕度(RH)下I形可隨著時(shí)間吸水并部分地轉(zhuǎn)化為一水合物，如圖8所示。圖8是I形的結(jié)晶(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽在暴露于50-60％的相對(duì)濕度和20-25℃的室溫下歷時(shí)24小時(shí)之前(下方掃描)和之后(上方掃描)的XRD掃描。水合物峰出現(xiàn)在上方的掃描圖中，指示該晶體在該條件下吸水。

在密閉容器和開放容器中在40℃和75％RH下評(píng)價(jià)了兩種形式的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的馬來酸鹽的穩(wěn)定性。I形和II形二者在這些條件下保持穩(wěn)定達(dá)6個(gè)月。在開放容器中，無水形式的馬來酸鹽迅速地吸收1摩爾的水以形成一水合物形式的馬來酸鹽。在密閉容器中的樣品保持干燥。HPLC純度分析指示在開放和密閉條件下降解產(chǎn)物在長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月內(nèi)沒有顯著增加。數(shù)據(jù)概括在表5中。

表5.無水馬來酸鹽(I形)的固態(tài)穩(wěn)定性

在不同溶劑中進(jìn)行了游離堿與馬來酸的反應(yīng)性結(jié)晶，以測(cè)定生成哪種或哪些種結(jié)晶形式的馬來酸鹽。表6示出了在不同的操作條件下，在正丙醇和水的混合物中的結(jié)晶方法的結(jié)果。在所有的實(shí)驗(yàn)中的濕濾餅包含一水合物形式的馬來酸鹽，其在干燥之后轉(zhuǎn)化為無水形式的馬來酸鹽。

表6.在水/正丙醇中的馬來酸鹽的反應(yīng)性結(jié)晶

表7表示游離堿和馬來酸在多種溶劑中的反應(yīng)性結(jié)晶的結(jié)果，其在全部實(shí)驗(yàn)中都獲得無水形式的馬來酸鹽。

表7.馬來酸鹽在多種溶劑中的反應(yīng)性結(jié)晶

相當(dāng)可觀地溶解(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽的一種溶劑是二甲亞砜(DMSO)。在DMSO和異丙醇或叔丁基甲基醚(tBME)的混合物中進(jìn)行冷卻結(jié)晶、反溶劑(anti-solvent)結(jié)晶和蒸發(fā)結(jié)晶。所述方法在許多情況下導(dǎo)致溶質(zhì)分解。反溶劑結(jié)晶和蒸發(fā)結(jié)晶不生成任何新的結(jié)晶形式，如表8和9中概括。

表8.馬來酸鹽形式的反溶劑結(jié)晶

表9.馬來酸鹽形式的蒸發(fā)結(jié)晶

根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，將無水I形轉(zhuǎn)變?yōu)橐凰衔颕I形的一種方法這樣進(jìn)行，即將所述鹽溶解在有機(jī)溶劑，例如，諸如，THF、異丙醇(IPA)、正丙醇、丙酮、乙醇、甲醇和乙腈以及水的溶液中，其中水以約5體積％到約20體積％體積存在，盡管水一般以約10體積％到約15體積％存在。可將該溶液加熱以提高馬來酸鹽的溶解度；在一個(gè)實(shí)施方案，將其加熱到約45℃或更高的溫度，在另一個(gè)實(shí)施方案中，將其加熱到約60℃。然后使溶液靜置數(shù)小時(shí)的時(shí)段以允許結(jié)晶，然后過濾晶體，得到一水合物II形(參見表6)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在過濾之前使溶液靜置約12小時(shí)到約24小時(shí)。

根據(jù)單獨(dú)的實(shí)施方案，I形這樣被轉(zhuǎn)化為II形，即，將I形在含有水的有機(jī)溶劑中再成漿料，并使該溶液在室溫下靜置數(shù)天，如表10中所概括的穩(wěn)定性研究所示。這一轉(zhuǎn)化即使在已吸收最多1％水的無水溶劑中也會(huì)發(fā)生，因?yàn)闊o水I形容易吸收水分，如圖8所證明的那樣。在一個(gè)實(shí)施方案中，使得再成的漿料(re-slurry)靜置約14天。

表10.再成的漿料在室溫下歷時(shí)14天的結(jié)晶形式的穩(wěn)定性

本發(fā)明還涉及與(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的游離堿或馬來酸鹽有關(guān)的化合物、或本發(fā)明的方法。這些有關(guān)的化合物中的一種或多種可在本發(fā)明的方法中在被冷卻的溶液中被發(fā)現(xiàn)。因?yàn)檫@些化合物可能不與馬來酸鹽分離，因此使用該馬來酸鹽制備的藥物制劑可能含有這些化合物中的一種或多種。

制備了馬來酸鹽的制劑并在40℃/75％RH穩(wěn)定室中儲(chǔ)存6個(gè)月并在56℃烘箱中儲(chǔ)存1個(gè)月。定期拉出樣品用于試驗(yàn)。將樣品以約0.5mg/mL的濃度溶于50/50體積/體積的乙腈/水中。直接使用LC/MS方法檢驗(yàn)該溶液以鑒定在六個(gè)月的任何降解產(chǎn)物和雜質(zhì)(下文稱作有關(guān)的化合物)。通過LC/MS檢測(cè)的有關(guān)的化合物的結(jié)構(gòu)如表11所示。值得注意地是，與(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽有關(guān)的降解產(chǎn)物的量由于采用本發(fā)明的生產(chǎn)方法而被減少了。

表11.降解產(chǎn)物和工藝雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)

這些有關(guān)的化合物的名稱是：

2-({4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}氨基)-2-氧代乙酸；

N¹-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-乙二酰胺；

6-氨基-4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-7-乙氧基-3-喹啉甲腈；

4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-7-乙氧基-6-(2-羥基-5-氧代吡咯烷基)-3-喹啉甲腈；

N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-3,4-二(二甲基氨基)丁酰胺；

N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-1-甲基-2,3-二氧代-4-哌啶甲酰胺；

N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}乙酰胺；

(E)-4-({4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}氨基)-N,N,N-三甲基-4-氧代-2-丁烯-1-銨

N¹-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-N²,N²-二甲基乙二酰胺；

4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基甲酰胺；和

4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-7-乙氧基-6-[(1-甲基-2-亞吡咯烷基)氨基]-3-喹啉甲腈。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式可用于通過對(duì)受治療者給予治療有效量的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽用來預(yù)防、治療或抑制炎癥或癌。受治療者可為哺乳動(dòng)物，更具體是人。馬來酸鹽可以其無水形式、一水合物形式或部分水合形式被給予。上面討論的一種或多種有關(guān)的化合物也可在該方法期間被給予。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式可用于制備用于抑制與癌治療有關(guān)的HER-2激酶活性的藥物組合物。所述制劑包括治療有效量的(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽和藥學(xué)可接受的載體。所述藥物組合物可以馬來酸鹽的無水形式、一水合物形式或部分水合形式被給予。上面討論的一種或多種有關(guān)的化合物也可在該方法期間被給予。

本發(fā)明的藥物組合物和制劑可用于治療以下的一種或多種：乳腺癌，卵巢癌，上皮樣瘤，結(jié)腸癌，前列腺癌，腎癌，膀胱癌，喉癌，食道癌，胃癌和肺癌。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，馬來酸鹽特別用于治療乳腺癌和/或卵巢癌。

包含本發(fā)明的馬來酸鹽形式的藥物組合物和制劑可經(jīng)口、病灶內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)注射給藥；輸注給藥；由脂質(zhì)體介導(dǎo)的遞送；局部，經(jīng)鼻，經(jīng)肛門，經(jīng)陰道，舌下，經(jīng)尿道，經(jīng)皮，鞘內(nèi)，經(jīng)眼或耳遞送給藥。本發(fā)明化合物的一種給藥方式是單位劑量形式。適當(dāng)?shù)膯挝粍┝啃问桨ㄆ瑒⒛z囊和在小袋或小瓶中的粉劑。本發(fā)明的結(jié)晶化合物可以經(jīng)口給藥。這種化合物可以每天給藥1-6次，更經(jīng)常是每天給藥1-4次。有效量是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的；有效量還根據(jù)化合物的形式、給藥方式和治療病況的嚴(yán)重程度而定。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以常規(guī)性地進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性活性試驗(yàn)以測(cè)定化合物在生物試驗(yàn)中的生物活性并由此判斷給予什么劑量。然而，通常，當(dāng)日劑量為約0.5mg/kg到約1000mg/kg體重，并且有效劑量的量通常是約1mg/kg體重到約300mg/kg體重時(shí)，使用本發(fā)明的化合物時(shí)可以獲得令人滿意的結(jié)果。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式可與常規(guī)的賦形劑進(jìn)行配制，諸如填充劑，崩解劑，粘合劑，潤(rùn)滑劑，增香劑，顏色添加劑和載體。所述載體可為稀釋劑，氣霧劑，局部用載體，水性溶液，非水性溶液或固體。所述載體可為聚合物或牙膏。本發(fā)明的載體涵蓋了任何標(biāo)準(zhǔn)的在藥學(xué)上被接受的載體，諸如磷酸鹽緩沖鹽水溶液，乙酸鹽緩沖鹽水溶液，水，乳液諸如油/水乳液或三酸甘油酯乳液，各種類型的潤(rùn)濕劑，片劑，包衣片劑和膠囊。

如果經(jīng)口或局部給藥，本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式可在不同的載體中被提供給受試者。一般地，這種載體包含賦形劑諸如淀粉、奶、糖、某些類型的粘土、明膠、硬脂酸、滑石、植物脂肪或油，樹膠或二醇類。具體的載體一般基于所需的遞送方法被選擇使用，例如，可使用磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)用于靜脈內(nèi)或系統(tǒng)遞送，以及可使用植物脂肪、霜?jiǎng)?、油膏劑、膏劑或凝膠劑用于局部遞送。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式可與適當(dāng)?shù)目捎糜谫樕锏闹委?、抑制或預(yù)防的稀釋劑、防腐劑、增溶劑、乳化劑、助劑和/或載體一起被遞送。這種組合物是液體或經(jīng)凍干或以其它方式干燥的制劑并包括各種緩沖劑內(nèi)容物的稀釋劑(例如，Tris-HCl，乙酸鹽，磷酸鹽)，pH和離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑，添加劑，諸如白蛋白或明膠以防止對(duì)表面的吸收，洗滌劑(例如，TWEEN^TM 20，TWEEN^TM 80，PLURONIC^TM F68，膽汁酸鹽)，增溶劑(例如，甘油，聚乙二醇)，抗氧化劑(例如，抗壞血酸，偏亞硫酸鈉)，防腐劑(例如，硫柳汞，苯甲醇，對(duì)羥基苯甲酸酯類)，增量劑或張力調(diào)節(jié)劑(例如，乳糖，甘露醇)，聚合物如聚乙二醇的共價(jià)結(jié)合，含有金屬離子的復(fù)合物，或在水凝膠或脂質(zhì)體的粒狀制劑內(nèi)或上引入所述化合物，微乳劑、膠束、單層或多層囊泡、紅細(xì)胞影泡或球芽。這種組合物將影響化合物或組合物的物理狀態(tài)、溶解度、穩(wěn)定性、體內(nèi)釋放速率和體內(nèi)清除速率。組合物的選擇將根據(jù)化合物的物理和化學(xué)性質(zhì)的不同而異。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式還可通過膠囊進(jìn)行局部遞送，所述膠囊允許化合物在一定的時(shí)段內(nèi)發(fā)生持續(xù)釋放。受控釋放或持續(xù)釋放組合物包括在親脂性儲(chǔ)庫(kù)(例如，脂肪酸，蠟，油)中的制劑。

本發(fā)明的馬來酸鹽的結(jié)晶形式還可與其它的有益于癌患者的活性化合物例如其它的化學(xué)試劑或抗生物物質(zhì)一起被劑量給藥，或與放射治療組合使用。這些活性化合物可與本發(fā)明的化合物同時(shí)或先后進(jìn)行劑量給藥。本發(fā)明的化合物還可被配制為在同一劑量單位內(nèi)包含其它的活性化合物，例如，二者可被包含在一個(gè)小丸、藥片或膠囊中?？膳c本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的一些可能類型的活性化合物是有絲分裂抑制劑諸如紫杉酚和長(zhǎng)春堿，烷化劑諸如順鉑和環(huán)磷酰胺，抗代謝物諸如5-氟尿嘧啶,氟尿嘧啶和羥基脲，DNA嵌入劑諸如阿霉素和博來霉素，拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑諸如依托泊苷和喜樹堿，抗血管生成劑諸如血管抑素以及抗雌激素藥諸如他莫昔芬。

將結(jié)合以下的具體實(shí)施例來更完全地描述本發(fā)明，這些具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的范圍不構(gòu)成限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在舉例說明的方法中，根據(jù)工藝參數(shù)和設(shè)備的不同，來進(jìn)行步驟的重新排列，合并，修改或刪除。

實(shí)施例1：制備(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽,II形

將粗品(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺游離堿(0.100kg,0.159摩爾)用USP凈化水在正丙醇中的10％溶液(0.082kg,0.10L)漂洗，然后加入水:正丙醇溶液(0.74kg,0.90L)。加入馬來酸(0.0191kg,0.164摩爾)并將混合物用10％水:正丙醇(0.082kg,0.10L)漂洗。將混合物迅速加熱到50-60℃并保持至少15分鐘，直到獲得溶液為止。使熱溶液經(jīng)過預(yù)熱到50-60℃的0.2Mm濾筒使其澄清，并在預(yù)熱到45-55℃的2L多頸燒瓶中收集濾液。將濾筒用預(yù)熱到45-55℃的10％水:正丙醇(0.082kg,0.10L)漂洗。將溶液在至少1小時(shí)內(nèi)冷卻到40℃并在該溫度下保持12小時(shí)，然后在至少4小時(shí)內(nèi)冷卻到室溫(25℃)并在該溫度下保持至少2小時(shí)。將混合物在12.5cm直徑的布氏漏斗上過濾5分鐘，然后用預(yù)過濾的10％的水:正丙醇溶液(2x0.12kg,2x0.15L)漂洗和洗滌。將濾餅壓實(shí)并保持抽吸直到滴液基本停止，歷時(shí)約1小時(shí)。

實(shí)施例2：制備(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽,I形

將得自實(shí)施例1的產(chǎn)物(II形)干燥(50℃,10mm Hg,24h)，得到94.4g(88％收率)的結(jié)晶，即無水(E)-N-{4-[3-氯-4-(2-吡啶基甲氧基)苯胺基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺馬來酸鹽(I形)(88％收率)，強(qiáng)度為80.8％(游離堿)，17.4％(馬來酸)，總雜質(zhì)1.06％,最大單一雜質(zhì)0.38％。