本發(fā)明屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的，本發(fā)明涉及一種抑制腸源性內(nèi)毒素血癥的中藥組合物。

背景技術(shù)：

糖尿病是一種最常見的內(nèi)分泌代謝疾病，具有遺傳易感性，在環(huán)境因素的觸發(fā)下發(fā)病。Ⅱ型糖尿病，又名非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)。特點(diǎn)是人體自身能夠產(chǎn)生胰島素，但細(xì)胞無法對其作出反應(yīng)，使胰島素的效果大打折扣。因此患者體內(nèi)的胰島素是一種相對缺乏，可以通過某些口服藥物刺激體內(nèi)胰島素的分泌。但到后期仍有一些病人需要使用胰島素治療。多在35～40歲之后發(fā)病，占糖尿病患者90％以上。發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈逐年增高趨勢，糖尿病現(xiàn)已成為繼心血管病和腫瘤之后，第3位威脅人們健康和生命的非傳染性疾病。

據(jù)報(bào)道中國有9240萬Ⅱ型糖尿病患者，有1.48億人處于糖尿病前期，這是誘發(fā)顯性糖尿病和心血管疾病的一大因素，也是影響老年人身心健康的重要事件。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員致力于探索中醫(yī)藥對Ⅱ型糖尿病的療效。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種抑制腸源性內(nèi)毒素血癥的中藥組合物及其應(yīng)用。

本發(fā)明的第一方面提供了一種中藥組合物，所述中藥組合物含有原料藥材或所述原料藥材的提取物，其中所述原料藥材包括：熟地黃、黃連、澤瀉、葛根、天花粉、生山楂、決明子、荷葉；并且，所述的原料藥材的重量份如下：

優(yōu)選地，所述的原料藥材的重量份如下

在另一優(yōu)選例中，所述原料藥材由熟地黃30g、黃連30-90g、澤瀉30g、葛根30-120g、天花粉30-90g、生山楂30g、決明子30g、荷葉30g構(gòu)成。

在另一優(yōu)選例中，所述的提取物包括：水提取物或水性提取物(包括但不限于醇溶液提取物，所述醇為乙醇、甲醇或丙醇)。

在另一優(yōu)選例中，所述的水性提取物是指用水性溶劑提取的提取物。

在另一優(yōu)選例中，所述的水性溶劑指由水和與水相容的溶劑(如醇，包括乙醇)所構(gòu)成的混合溶劑，其中水含量為10-99.5wt％，較佳地為50-90wt％。

在另一優(yōu)選例中，所述原料藥材包括：

在另一優(yōu)選例中，所述的藥物還含有藥學(xué)上可接受的載體。

在另一優(yōu)選例中，所述藥學(xué)上可接受的載體的含量為5-99wt％，較佳地10-90wt％，按所述藥物的總重量計(jì)。

在另一優(yōu)選例中，所述的藥學(xué)上可接受的載體包括：水、填料、矯味劑、甘油、其他合適的添加劑或其組合。

在另一優(yōu)選例中，所述的藥物的劑型包括湯劑。

在另一優(yōu)選例中，所述的藥物為湯劑，規(guī)格為50或100g/份。

在另一優(yōu)選例中，所述的原料藥材為粉末狀。

在另一優(yōu)選例中，所述的原料藥材的粒徑為1-10mm。

本發(fā)明的第二方面提供了一種中藥組合物在制備藥物中的用途，所述中藥組合物含有原料藥材或所述原料藥材的提取物，其中所述原料藥材包括：熟地黃、黃連、澤瀉、葛根、天花粉、生山楂、決明子、荷葉；并且，所述的原料藥材的重量份如下：

所述藥物用于抑制腸源性內(nèi)毒素血癥。

在另一優(yōu)選例中，所述藥物還用于抑制JNK、和/或NFКB激酶。

另一優(yōu)選例中，所述藥物還用于治療或預(yù)防糖尿病，優(yōu)選為Ⅱ型糖尿病。

應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附圖說明

圖1顯示了大鼠胰腺JNK1、p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白的表達(dá)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明人經(jīng)過長期廣泛而深入的研究，經(jīng)過系列研究證實(shí)，腸源性內(nèi)毒素血癥(IETM)是連接胰島素抵抗與慢性炎癥之間的橋梁，是T2DM發(fā)生與發(fā)展的重要機(jī)制之一。本申請的實(shí)驗(yàn)已證明IETM可引起NASH和胰島素抵抗，從而把炎癥和代謝障礙連接在一起。本發(fā)明人應(yīng)用高糖高脂膳食喂養(yǎng)大鼠，發(fā)現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)第二個(gè)月直到實(shí)驗(yàn)第十二月一直伴有IETM，并先后或同時(shí)出現(xiàn)脂肪肝、脂肪性肝炎、T2DM、動脈粥樣硬化及心肌病、原發(fā)性老年癡呆等代謝綜合征系列疾病。成功復(fù)制出MS及其疾病的動物模型。

在此模型上，對大量的中藥組方進(jìn)行了研究，最終發(fā)現(xiàn)了根據(jù)本發(fā)明的中藥組合物，其治療效果包括：⑴通過降低IETM，使浸潤到肝、脂肪組織、胰島的CD68陽性細(xì)胞(標(biāo)志著巨噬細(xì)胞)明顯減少，使致炎細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)TNFα、CRP、MCP-1、FFA等明顯下降，致使動物胰島素抵抗和慢性炎癥得到明顯改善；⑵Western blot檢測表明，本發(fā)明中藥組合物作用下胰腺細(xì)胞內(nèi)JNK、NFКB激酶受到抑制使得信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路受阻而出現(xiàn)胰島素抵抗與炎癥反應(yīng)所導(dǎo)致的β細(xì)胞凋亡與功能障礙得以改善，進(jìn)而發(fā)揮對T2DM的治療作用。

本發(fā)明中藥組合物

藥物組方詳細(xì)信息：

黃連(Coptis chinensis Franch)：雙子葉植物綱，(根)苦，寒，無毒。歸心、脾、胃、肝、膽、大腸經(jīng)。清熱燥濕，瀉火解毒。用于濕熱痞滿，嘔吐吞酸，瀉痢，黃疸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，血熱吐衄，目赤，牙痛，消渴，癰腫疔瘡；外治濕疹，濕瘡，耳道流膿。

葛根(Pueraria lobata)：為豆科植物野葛的干燥根，習(xí)稱野葛。秋、冬二季采挖，趁鮮切成厚片或小塊；干燥。甘、辛，涼。有解肌退熱，透疹，生津止渴，升陽止瀉之功。常用于表證發(fā)熱，項(xiàng)背強(qiáng)痛，麻疹不透，熱病口渴，陰虛消渴，熱瀉熱痢，脾虛泄瀉。

天花粉(Trichosanthis Radix)葫蘆科植物栝蔞的根，甘、微苦，微寒。歸肺、胃經(jīng)。秋、冬二季采挖，洗凈，除去外皮，切段或縱剖成瓣，干燥。為清熱瀉火類藥物，其具體功效是清熱瀉火，生津止渴，排膿消腫。主治:治熱病口渴、消渴、黃疸、肺燥咳血、癰腫、痔痿。

澤瀉(Alisma plantago-aquatica Linn.)澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖，主產(chǎn)于福建、四川等地。澤瀉性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利水滲濕、泄熱、化濁降脂的功效。

熟地黃(Rehmannia glutinosa(Gaetn.)Libosch.ex Fisch.et Mey.)玄參科、地黃屬植物，中藥材熟地黃為生地黃的炮制加工品，其表面烏黑有光澤，質(zhì)軟而柔韌，味甘，性微溫，具有滋陰補(bǔ)血、益精填髓等功效。主治肝腎陰虛、腰膝酸軟、骨蒸潮熱、盜汗遺精、內(nèi)熱消渴、血虛萎黃、心悸怔忡、月經(jīng)不調(diào)、眩暈耳鳴、須發(fā)早白等癥。

生山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)核果類水果，核質(zhì)硬，果肉薄，味微酸澀。果可生吃或作果脯果糕，干制后可入藥，是中國特有的藥果兼用樹種，具有降血脂、血壓、強(qiáng)心、抗心律不齊等作用，同時(shí)也是健脾開胃、消食化滯、活血化痰的良藥，對胸膈脾滿、疝氣、血淤、閉經(jīng)等癥有很好的療效。

決明子，是豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，以其有明目之功而名之。秋季采收成熟果實(shí)，曬干，打下種子，除去雜質(zhì)。決明子味苦、甘、咸，性微寒，入肝、腎、大腸經(jīng)；潤腸通便，降脂明目，治療便秘及高血脂，高血壓。清肝明目，利水通便，有緩瀉作用，降血壓降血脂。

荷葉(Nelumbo nucifera Gaertn)，為睡蓮科植物蓮Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥葉。夏、秋二季采收，曬至七、八成干時(shí)，除去葉柄，折成半圓形或折扇形，干燥。荷葉味苦辛微澀、性涼，歸心、肝、脾經(jīng)。主治暑熱煩渴，頭痛眩暈，水腫，食少腹脹，瀉痢，白帶，脫肛，吐血，衄血，咯血，便血，崩漏，產(chǎn)后惡露不凈，損傷瘀血。

本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)包括：

(1)本發(fā)明的中藥組合物具有安全無毒、藥理作用明顯，具有較好的臨床應(yīng)用前景。

(2)本發(fā)明所采用的各中藥原料來源豐富、價(jià)廉、未見毒副作用，并可制作成口服劑使用。

(3)本發(fā)明所采用的中藥組合物對治療T2DM具有明顯療效且其作用的分子靶點(diǎn)—JNK、NFКB為連接胰島素抵抗和慢性炎癥反應(yīng)關(guān)鍵的信號蛋白。由于T2DM、心腦血管疾病之間在發(fā)病機(jī)制上存在著密切聯(lián)系，本發(fā)明為這些疾病的防治提供廣闊的市場前景。

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。

實(shí)施例1中藥組合物的制備

本發(fā)明中藥組合物制備方法如下：

以熟地黃30g、黃連60g、澤瀉30g、葛根80g、天花粉60g、生山楂30g、決明子30g、荷葉30g為原料，水煮醇沉，取其上清液濃縮成稠膏，制成顆粒為沖劑。該藥物具有減輕腸源性內(nèi)毒素血癥，同時(shí)又能抗肝損傷、改善肝功能的作用。

為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用藥理試驗(yàn)及結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。

實(shí)施例2中藥組合物對高糖高脂飲食所致大鼠模型的治療效果

實(shí)驗(yàn)方法

1.1動物分組及模型的建立

48只SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為3組：正常對照組、高糖高脂組以及治療組，分組16只。正常對照組以正常飲食(100％正常飼料)喂養(yǎng)；高糖高脂組和治療組采用高糖高脂膳食(68.75％正常飼料+20％豬油+10％蔗糖+1％膽固醇+0.25％膽酸)喂養(yǎng)，同時(shí)治療組喂服實(shí)施例1制備的中藥組合物沖劑(10ml)。上述各動物均在天黑前投食，自由飲水。

1.2對高糖高脂飲食所致大鼠體重、內(nèi)臟脂肪重量的影響

動態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)第3月末、第6月末上述各動物體重以及內(nèi)臟脂肪組織的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，經(jīng)高糖高脂膳食喂養(yǎng)后的高糖高脂組和治療組與正常對照組相比，體重和內(nèi)臟脂肪重量明顯增加(P<0.05)，但高糖高脂組大鼠的體重以及內(nèi)臟脂肪組織從3月至6月增長明顯，治療組顯著的降低了大鼠的體重以及內(nèi)臟脂肪組織重量的增長。表1(表2、3、4、5)中3月正常對照組(normal control group of3months,3C)、6月正常對照組(normal control group of 6months,6C)、3月高糖高脂組(high-sucrose and high-fat diet group of 3months,3G)、6月高糖高脂組(high-sucrose and high-fat diet group of 6months,6G)、3月治療組(3Y)、6月治療組(6Y)(表1)。

表1大鼠體重、臟器重量及其所占百分比變化(x±s.n＝8)

^a與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

BW：體重(body weight)；VF：內(nèi)臟脂肪(visceral fat)；LW：(liver weight).

采用本發(fā)明的中藥組合物治療可在3月、6月顯著降低高糖高脂組體重及內(nèi)臟脂肪的增長。

1.3對高糖高脂飲食所致大鼠血脂的影響

于實(shí)驗(yàn)第3月末、第6月末測定上述各動物血漿Tch、HDL、LDL、TG。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2，高糖高脂組大鼠3月后出現(xiàn)高酯血癥、高膽固醇血癥及異常脂蛋白血癥(LDL-c升高和HDL-c降低)治療組在3月、6月顯著降低高糖高脂膳食所致的血漿甘油三酯、膽固醇水平及血脂蛋白的異常。

研究發(fā)現(xiàn)高糖高脂組大鼠3月后出現(xiàn)高酯血癥、高膽固醇血癥及異常脂蛋白血癥(LDL-c升高和HDL-c降低)。本發(fā)明中藥組合物治療可在3月、6月顯著降低高糖高脂組血漿甘油三酯、膽固醇水平及血脂蛋白的異常(表2)。

表2血生化指標(biāo)的變化

^a與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

1.4對高糖高脂飲食所致大鼠FINS、FPG、HOMA-IR、HOMA-β的影響

于實(shí)驗(yàn)第3月末、第6月末測定上述各動物血漿FINS、FPG，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)：HOMA-IR＝(FINS×FPG)/22.5和β細(xì)胞功能指數(shù)(HOMA-β)：HOMA-β＝(20×FPI)/(FPG-3.5)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3，高糖高脂組以及治療組的大鼠3月、6月血漿FINS、FPG明顯升高(P<0.05)，發(fā)生明顯的胰島素抵抗(P<0.05)，而且反映胰島β細(xì)胞功能的HOMA-β出現(xiàn)分泌功能降低。但是治療組可顯著降低高糖高脂飲食所致大鼠FINS、FPG、HOMA-IR水平，并改善β細(xì)胞的分泌功能(表3)。

表3大鼠FBS、FINS、HOMA-IR、HOMA-β的變化

^a與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

1.5對高糖高脂飲食所致大鼠胰腺組織的病理學(xué)觀察

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高糖高脂組大鼠3至6月時(shí)胰島體積逐漸增大，胰島內(nèi)血管擴(kuò)張；蘇丹Ⅳ染色顯示3至6月時(shí)胰島內(nèi)有少量脂質(zhì)沉積。治療組胰島體積肥大及血管擴(kuò)張得到改善，胰島內(nèi)脂質(zhì)沉積也有所減輕。

1.6胰島細(xì)胞炎性浸潤及凋亡率的觀察

胰島β細(xì)胞凋亡率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表4)，高糖高脂組3至6月胰島β細(xì)胞凋亡率逐漸增加，而治療組可顯著降低6月高糖高脂組所致的胰島β細(xì)胞凋亡率。胰腺CD68是反應(yīng)胰腺炎癥的特征指標(biāo)。CD68免疫組化研究結(jié)果見表5，6月高糖高脂組所致的胰腺CD68陽性表達(dá)為2.60±0.74，而治療組的胰腺CD68陽性表達(dá)為0.70±0.13(P<0.05)(表5)。

表4大鼠胰島β細(xì)胞凋亡率的觀察

^a與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

表5大鼠胰島巨噬細(xì)胞浸潤的觀察

^a與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

上述結(jié)果說明，本發(fā)明中藥組合物治療高糖高脂飲食引起的T2DM有較好的療效，反映在本發(fā)明中藥組合物明顯減輕體重、內(nèi)臟脂肪的增長及血脂代謝的異常(如高甘油三酯血癥)，可顯著改善胰島素抵抗及抑制β細(xì)胞的衰竭?？梢姳景l(fā)明中藥組合物治療Ⅱ型糖尿病效果明顯。

1.7本發(fā)明中藥組合物治療T2DM的作用機(jī)制及分子靶點(diǎn)。

在高糖高脂飲食誘導(dǎo)大鼠發(fā)生T2DM模型中，本發(fā)明人動態(tài)分析了大鼠血漿LPS、炎癥因子及IR的變化，并檢測胰腺p-JNK1/JNK1、NFκB蛋白的表達(dá)。研究結(jié)果證實(shí)，本發(fā)明中藥組合物的上述治療作用是通過降低IETM(表7)，進(jìn)而減輕炎癥(表7)改善胰島素抵抗來實(shí)現(xiàn)的,而降低連接胰島素抵抗和慢性炎癥反應(yīng)關(guān)鍵的信號蛋白p-JNK1/JNK1、NFκB的表達(dá)為其作用的分子靶點(diǎn)(表6，圖1)。近年來，本發(fā)明人通過臨床實(shí)驗(yàn)觀測到T2DM患者血漿內(nèi)毒素水平明顯高于非T2DM患者(P<0.001)。這也再次證明T2DM發(fā)病與IETM相關(guān)。由于胰島素抵抗是T2DM發(fā)病的病理生理基礎(chǔ)，且又表現(xiàn)為慢性低度炎癥反應(yīng)。本發(fā)明人系列研究證實(shí)，IETM是連接胰島素抵抗與輕度慢性炎癥反應(yīng)之間的橋梁。故IETM是上述疾病發(fā)生與發(fā)展的重要機(jī)制之一，本發(fā)明中藥組合物降低IETM也成為治療上述疾病的機(jī)制，且療效十分顯著。

表6大鼠胰腺p-JNK1/JNK1、GRP78、NFκB蛋白的表達(dá)

與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

表7 LPS及MS相關(guān)的炎癥介質(zhì)變化

與對應(yīng)的正常組相比：P<0.05；^b與三月模型組相比：P<0.05；^c與六月模型組相比：P<0.05；

圖1顯示了大鼠胰腺JNK1、p-JNK1、GRP78和NFκ蛋白的表達(dá)。從圖中可以看出，3Y和6Y治療組中的p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白顯著減少，說明本發(fā)明的藥物組合物能夠顯著抑制p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白水平。

在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。