硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋的藥物新用途，具體涉及硫酸阿扎那韋通過抑制高遷移率族蛋白B1(high?mobility?group?protein，HMGB1)的表達從而抑制內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的發(fā)生發(fā)展，以致于預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥。在上述應(yīng)用中，其注射使用劑量范圍是50mg～2000mg；優(yōu)選50～1000mg；口服使用劑量范圍是100mg～6000mg；優(yōu)選200～3000mg。
【專利說明】硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的藥 物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及硫酸阿扎那韋抑制膿毒癥的發(fā)生發(fā)展從而預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥 和膿毒癥；具體涉及硫酸阿扎那韋通過抑制高遷移率族蛋白B1 (high mobility group protein, HMGB1)的表達，從而預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥。

【背景技術(shù)】
[0002] 膿毒癥（sepsis),即膿毒血癥。是一種由感染引起的臨床綜合征。化膿性病原菌 侵入血流并在其中大量的繁殖，并隨血流向全身擴散，在組織器官引起的新的多發(fā)性化膿 性病灶。膿毒癥常伴有下列征象：體溫高于或低于正常，白細胞增多或減少、心動過速、呼吸 急促或每分鐘通氣量異常升高，如臨床上出現(xiàn)其中兩項或兩項以上癥狀，即可診斷膿毒血 癥；當伴發(fā)器官功能衰竭，即稱為重癥膿毒血癥（severe sepsis)。美國每年有50萬名膿 毒血癥患者，存活率僅55 %?65%。
[0003] 膿毒癥是嚴重創(chuàng)傷、燒傷、休克、大手術(shù)后常見的并發(fā)癥，也是外科危重患者重 要的死亡原因之一。目前研究認為HMGB-1在膿毒癥中也起著關(guān)鍵作用[Wang H，Bloom 0，Zhang M，Vishnubhakat JM，Ombre 1 lino M，Che J. HMG-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice. Science 1999,285(5425) :248-251 ；Andersson U,Tracey KJ.HMGB1 in sepsis. Scand J Infect Dis 2003, 35 (9) :577-584. ]〇
[0004] 臨床上硫酸阿扎那韋膠囊用于與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物聯(lián)合使用治療HIV-1感 染，，但硫酸阿扎那韋在預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的藥理作用未見報道。本發(fā)明人通 過大量的研究發(fā)現(xiàn)硫酸阿扎那韋可以通過抑制脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1的表 達從而在預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥有明顯的作用?；诖?，本發(fā)明人發(fā)明了硫酸阿 扎那韋通過抑制巨噬細胞HMGB1的的表達從而抑制膿毒癥的發(fā)生發(fā)展，從而預(yù)防或治療內(nèi) 毒素血癥和膿毒癥。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的藥物中的 應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋在抑制內(nèi)毒素血癥和膿毒癥中HMGB1的藥物中的應(yīng) 用。
[0007] 本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥的藥物中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療膿毒癥的藥物中的應(yīng)用。
[0009] 發(fā)明提供的硫酸阿扎那韋在用于膿毒癥時，其注射使用劑量范圍是50mg? 2000mg ;優(yōu)選50?1000 mg ;其口服使用劑量范圍是100mg?6000mg ;優(yōu)選200?3000mg。
[0010] 本發(fā)明還提供的硫酸阿扎那韋可以和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成的藥物，該 藥物可以以藥學(xué)常規(guī)方法制備成注射液、凍干粉針、片劑、膠囊劑，優(yōu)選以凍干粉針和膠囊 形式存在。

【具體實施方式】
[0011] 實施例1硫酸阿扎那韋凍干粉針制備
[0012] 取硫酸阿扎那韋50. 0g，加注射用水2000ml使其溶解，加甘露醇8g，攪拌溶解，超 濾，得到無熱源的澄清液，灌入l〇ml西林瓶中，2ml/只，按凍干粉針工藝凍干，制成每支含 硫酸阿扎那韋50. Omg的凍干粉針。
[0013] 實施例2硫酸阿扎那韋膠囊制備
[0014] 稱取200. 0g硫酸阿扎那韋、和100. 0g羧甲基淀粉鈉充分混合均勻后過100目篩， 加入適量的3% PVPK30水溶液適量制軟材，20目篩制粒，60°C干燥3小時，18目篩整粒，力口 入2. 0g硬脂酸鎂，混合均勻后裝膠囊，調(diào)節(jié)膠囊重約200mg，即得。
[0015] 具體實施例
[0016] 試驗例1硫酸阿扎那韋對脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1表達的影響
[0017] 1.1實驗材料
[0018] DMEM培養(yǎng)基為Gibco公司產(chǎn)品，新生牛血清為杭州四季青公司產(chǎn)品
[0019] 脂多糖（LPS)購自Sigma公司
[0020] 人腹腔巨噬細胞株購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心，用含10%胎牛血清（Hyclone 公司）的低糖DMEM培養(yǎng)基（GIBC0公司），常規(guī)培養(yǎng)于5%的C02, 37°C人工培養(yǎng)箱中，細胞 呈貼壁生長。HMGB1 -抗購買于sigma公司。
[0021] 硫酸阿扎那韋（純度99. 5%，購買于上海翰香生物科技有限公司）
[0022] 1. 2試驗方法
[0023] 當細胞生長融合至70% -80%，用無血清培養(yǎng)基饑餓24h，換新鮮培養(yǎng)液，將傳代 的人腹腔巨噬細胞分為：（1)陰性對照組；（2) LPS處理組（2 μ g/L作用時間24 h) ; (3) LPS 處理組（2 μ g/L作用時間24 h) +硫酸阿扎那韋0. 3 μ Μ ; (4) LPS處理組（2 μ g/L作用時間 24h) +甲磺酸沙奎拉韋1 μ Μ ; (5) LPS處理組（2 μ g/L作用時間24 h) +硫酸阿扎那韋3 μ Μ ; (6) LPS處理組（2 μ g/L作用時間24 h) +硫酸阿扎那韋10 μ Μ。培養(yǎng)的細胞進行裂解，BCA 蛋白測定試劑盒（Pierce公司）測定蛋白濃度后，取50 μ g樣品蛋白進行10%的十二烷基 磺酸鈉-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE)凝膠變性電泳、然后轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯（PVDF)膜，加入 HMGB1 -抗，β -actin作內(nèi)參，Western blot檢測細胞HMGB1蛋白的表達。以LPS未刺激 組作為對照，計為相應(yīng)蛋白的100 %，分析各濃度藥物與單純LPS刺激組對HMGB1蛋白的表 達差異。組間進行T檢驗。
[0024] 表1硫酸阿扎那韋對脂多糖刺激的人腹腔巨噬細胞HMGB1表達影響（η = 5)
[0025]

【權(quán)利要求】
1. 本發(fā)明提供了硫酸阿扎那韋在制備預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥和膿毒癥的藥物中的應(yīng) 用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，硫酸阿扎那韋是通過抑制HMGB1表達達到預(yù)防或治療 內(nèi)毒素血癥和膿毒癥。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，硫酸阿扎那韋可預(yù)防或治療內(nèi)毒素血癥。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，硫酸阿扎那韋預(yù)防或治療膿毒癥。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3和4所述的應(yīng)用，硫酸阿扎那韋用于內(nèi)毒素血癥和膿毒癥時，其注 射使用劑量范圍是50mg?2000mg ;優(yōu)選50?lOOOmg ;其口服使用劑量范圍是lOOmg? 6000mg ;優(yōu)選 200 ?3000mg。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，硫酸阿扎那韋和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成的藥 物，該藥物可以以藥學(xué)常規(guī)方法制備成注射液、凍干粉針、片劑、膠囊劑、薄膜包衣片，優(yōu)選 以凍干粉針和膠囊形式存在。
【文檔編號】A61P29/00GK104138374SQ201410379453
【公開日】2014年11月12日 申請日期:2014年7月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月26日
【發(fā)明者】蔣王林, 許勇, 呂長俊, 亢澤春 申請人:濱州醫(yī)學(xué)院