技術領域：
本發(fā)明涉及包含交聯(lián)透明質(zhì)酸和藥學上可接受載體的、抑制關節(jié)疾病疼痛的藥物組合物。
背景技術：
：在推進老齡化的現(xiàn)代社會，關節(jié)疼痛和起因于關節(jié)退行性變的骨關節(jié)炎(下文中稱為OA)是全世界最常見的關節(jié)疾病，成為老年人日常生活中引起不便的身體傷殘的主要原因之一。現(xiàn)在，作為OA的治療，例如有廣泛用于治療各種疼痛的非甾體抗炎藥等鎮(zhèn)痛藥的經(jīng)口給藥治療以及透明質(zhì)酸溶液的關節(jié)內(nèi)給藥治療。前者是一種通過具有明確鎮(zhèn)痛效果的合成藥物，以緩解關節(jié)疼痛為目的的對癥療法的治療方法。另一方面，后者是通過透明質(zhì)酸具有的潤滑作用、減震作用、軟骨代謝改善作用和關節(jié)疼痛抑制作用，以治療關節(jié)疾病為目的的治療方法，所述關節(jié)疾病是由關節(jié)液減少和關節(jié)軟骨退變引起的關節(jié)機能下降。下文中，在本說明書中，透明質(zhì)酸或由其衍生的基團簡稱為“HA”。目前，作為使用透明質(zhì)酸及其衍生物作為關節(jié)內(nèi)給藥制劑(下文中簡稱為IA-HA制劑)，市售制劑為含有透明質(zhì)酸鈉水溶液的制劑和含有交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物水溶液的制劑。例如，作為含有透明質(zhì)酸鈉水溶液的IA-HA制劑，列舉ARTZ(注冊商標)、SYNVISC(注冊商標)、HYALGAN(注冊商標)和ORTHOVISC(注冊商標)等。作為含有交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物水溶液的IA-HA制劑，列舉SYNVISC(注冊商標)和DUROLANE(注冊商標)。SYNVISC(注冊商標)是通過少量醛以共價鍵交聯(lián)得到的透明質(zhì)酸衍生物和通過二乙烯基砜進一步交聯(lián)該衍生物得到的透明質(zhì)酸衍生物組成的。DUROLANE(注冊商標)是環(huán)氧交聯(lián)的關節(jié)保護劑(參照專利文獻1)。為了達到理想的治療效果，這些IA-HA制劑基本上每1周-2周進行給藥(參考非專利文獻1、3)。由于透明質(zhì)酸具有粘彈性，這些IA-HA制劑經(jīng)關節(jié)內(nèi)給藥時，所用的注射針相比普通注射劑用針要粗。因此，與給予通常的注射劑相比，侵襲性和穿刺痛感更強，在日本，一個療程中給藥次數(shù)原則上限制在5次。此外，由于傳統(tǒng)的產(chǎn)品有每周連續(xù)給藥的必要性，對于居住在遠離醫(yī)院的患者或由于工作關系不方便每周來醫(yī)院就診的患者來說，是一個很大的負擔。因此，期待給藥次數(shù)少、顯示與傳統(tǒng)的IA-HA制劑相同或更好治療效果的制劑。作為使用(SYNVISC(注冊商標))的新處方，最近報道了使單次給藥量(2ml)增加三倍的、適于單次給藥的制劑(SYNVISC-ONE(商標))，根據(jù)該報道，這樣單次給藥后，顯示26周的治療效果(參考非專利文獻4)。然而，這樣的治療效果是單次給予傳統(tǒng)的三次給藥量(6ml)的結果。將傳統(tǒng)三倍劑量的制劑一次性注射入關節(jié)內(nèi)，具有給患者帶來很大負擔這樣的缺點。此外，有報道稱，與市售交聯(lián)透明質(zhì)酸交聯(lián)形式不同的光交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物經(jīng)關節(jié)內(nèi)給藥的關節(jié)疾病治療藥物，以單次給藥具有持續(xù)的效果，但沒有具體公開或教導關于對人類OA治療的超長期的持續(xù)性效果(參考專利文獻2)。此外，IA-HA制劑著眼于通過綜合性地改善關節(jié)機能以長期改善患者的生存質(zhì)量(QOL)，但幾乎不能期待達到如非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥那樣速效性的鎮(zhèn)痛效果(參考非專利文獻1、2、4和5)。如上所述，雖然存在大量的IA-HA制劑，但沒有報道這樣的關節(jié)內(nèi)給藥制劑：該制劑不增加每次給予量，通過單次給予，長期地、特別是從介入性的觀點看顯示半年以上的長期效果，所述效果與傳統(tǒng)的IA-HA制劑多次給予的效果相比相同或更好。因此，所需的制劑為能夠快速地顯示顯著的鎮(zhèn)痛作用，并且以較少的給藥次數(shù)和給藥量取得傳統(tǒng)的IA-HA制劑相同或更好治療效果的制劑?，F(xiàn)有技術文獻專利文獻專利文獻1：美國公開公報US2006/0148755專利文獻2：國際公開公報WO2008/069348非專利文獻非專利文獻1：TheJournalofRheumatology2004；31:4，pp.775-782非專利文獻2：OsteoArthritisandCartilage(2004)12,642-649非專利文獻3：CurrentMedicalResearchandOpinion11:205-213,1988非專利文獻4：ARD首先于2009年3月19日以10.1136/ard.2008.094623在線公開非專利文獻5：Arthritis&Rheumatism,Vol.43,No.9,pp.1905-1915(2000)技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種關節(jié)內(nèi)給藥制劑，所述制劑在給藥后顯示快速的鎮(zhèn)痛效果，并且不是多次給藥而僅通過單次給藥，給藥量與傳統(tǒng)的多次給予用IA-HA制劑的單次給藥量幾乎相同，對人類關節(jié)疾病具有超長期的持續(xù)效果。本發(fā)明的發(fā)明人認真研究解決上述問題，結果發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)的IA-HA制劑沒有顯示迅速的疼痛減輕效果，但通過使用以低碳數(shù)的氨基醇作為間隔物的交聯(lián)透明質(zhì)酸具有迅速的疼痛減輕效果作用。并且發(fā)現(xiàn)，該制劑使用與傳統(tǒng)的多次給藥用IA-HA制劑的單次給藥量幾乎相同的給藥量，僅通過單次給藥，在半年以上的長時間段內(nèi)，對人類關節(jié)疾病具有超長期的持續(xù)效果，從而完成本發(fā)明。即，本發(fā)明涉及包含交聯(lián)透明質(zhì)酸和藥學上可接受載體的、抑制關節(jié)疾病疼痛的藥物組合物。所述交聯(lián)透明質(zhì)酸通過使下列通式(1)表示的部分酰胺化的透明質(zhì)酸的肉桂酸部分的雙鍵環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)而獲得，[Ar-CH＝CH-COO-(CH2)n-NH-]m-HA(1)(式中，Ar表示可具有取代基的苯基，n表示2或3，HA表示透明質(zhì)酸的羧酸殘基，m表示相對于透明質(zhì)酸的總羧基被酰胺化的羧基的比例，m為總羧基的3-50％)。該藥物組合物中，交聯(lián)透明質(zhì)酸的含量優(yōu)選為制劑總量的0.5％(w/v％)％-3.0％(w/v％)。此外，期望該藥物組合物為單次給藥制劑。在這種情況下，優(yōu)選以13周以上的給藥間隔進行給藥。此外，該藥物組合物優(yōu)選是為了達到至少13周的持續(xù)效果、更優(yōu)選是為了達到至少26周的持續(xù)效果而使用的藥物組合物。本發(fā)明更加具體的內(nèi)容如下所述。(1)一種包含交聯(lián)透明質(zhì)酸和藥學上可接受載體的、抑制關節(jié)疾病疼痛的藥物組合物，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸通過使下列通式(1)表示的部分酰胺化的透明質(zhì)酸的肉桂酸部分的雙鍵環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)而獲得，[Ar-CH＝CH-COO-(CH2)n-NH-]m-HA(1)(式中，Ar表示可具有取代基的苯基，n表示2或3，HA表示透明質(zhì)酸的羧酸殘基，m表示相對于透明質(zhì)酸的總羧基被酰胺化的羧基的比例，m為總羧基的3-50％)。(2)上述(1)所述的藥物組合物，其中，環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)的肉桂酸部分的雙鍵的比例(交聯(lián)度)為5％-40％。(3)上述(1)或(2)所述的藥物組合物，其中，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸的含量為制劑總量的0.5％(w/v％)-3.0％(w/v％)。(4)上述(1)-(3)任一項所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物為注射劑。(5)上述(4)所述的藥物組合物，其中，所述注射劑的單次給藥量為2ml-3ml。(6)上述(1)-(5)之任一項所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物為單次給藥制劑。(7)上述(6)所述的藥物組合物，其中，所述單次給藥制劑以13周以上的給藥間隔進行給藥。(8)上述(1)-(7)之任一項所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物具有至少13周的持續(xù)效果。(9)上述(8)所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物具有至少26周的持續(xù)效果。(10)作為用于抑制關節(jié)疾病疼痛的藥物組合物而使用的交聯(lián)透明質(zhì)酸，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸通過使下列通式(1)表示的部分酰胺化的透明質(zhì)酸的肉桂酸部分的雙鍵環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)而獲得，[Ar-CH＝CH-COO-(CH2)n-NH-]m-HA(1)(式中，Ar表示可具有取代基的苯基，n表示2或3，HA表示透明質(zhì)酸的羧酸殘基，m表示相對于透明質(zhì)酸的總羧基被酰胺化的羧基的比例，m為總羧基的3-50％)。(11)上述(10)所述的透明質(zhì)酸，其中，環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)的肉桂酸的雙鍵的比例(交聯(lián)度)為5％-40％。(12)上述(10)或(11)所述的透明質(zhì)酸，其中，所述藥物組合物中，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸的含量為所述藥物組合物總量的0.5％(w/v％)-3.0％(w/v％)。(13)上述(10)-(12)所述的透明質(zhì)酸，其中，所述藥物組合物作為注射劑使用。(14)上述(13)所述的透明質(zhì)酸，其中，所述注射劑的單次給藥量為2ml-3ml。(15)上述(10)-(14)之任一項所述的透明質(zhì)酸，其中，所述藥物組合物為單次給藥制劑。(16)上述(15)所述的透明質(zhì)酸，其中，所述單次給藥制劑以13周以上的給藥間隔進行給藥。(17)上述(10)-(16)之任一項所述的透明質(zhì)酸，其中，所述藥物組合物具有至少13周的持續(xù)效果。(18)上述(17)所述的透明質(zhì)酸，其中，所述藥物組合物具有至少26周的持續(xù)效果。(19)一種對有必要抑制關節(jié)疾病疼痛的患者進行疼痛抑制的方法，所述方法包括向有必要抑制關節(jié)疾病疼痛的患者給予藥物組合物，所述藥物組合物包含藥學上可接受載體以及有效量的交聯(lián)透明質(zhì)酸，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸通過使下列通式(1)表示的部分酰胺化的透明質(zhì)酸的肉桂酸部分的雙鍵環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)而獲得，[Ar-CH＝CH-COO-(CH2)n-NH-]m-HA(1)(式中，Ar表示可具有取代基的苯基，n表示2或3，HA表示透明質(zhì)酸的羧酸殘基，m表示相對于透明質(zhì)酸的總羧基被酰胺化的羧基的比例，m為總羧基的3-50％)。(20)上述(19)所述的方法，其中，環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)的肉桂酸部分的雙鍵的比例(交聯(lián)度)為5％-40％。(21)上述(19)所述的方法，其中，所述藥物組合物中，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸的含量為所述藥物組合物總量的0.5％(w/v％)-3.0％(w/v％)。(22)上述(19)所述的方法，其中，所述藥物組合物為注射劑。(23)上述(22)所述的方法，其中，所述注射劑的單次給藥量為2ml-3ml。(24)上述(19)所述的方法，其中，所述藥物組合物為單次給藥制劑。(25)上述(24)所述的方法，其中，所述單次給藥制劑以13周以上的給藥間隔進行給藥。(26)上述(19)所述的方法，其中，所述藥物組合物具有至少13周的持續(xù)效果。(27)上述(19)所述的方法，其中，所述藥物組合物具有至少26周的持續(xù)效果。本發(fā)明提供了一種對關節(jié)疾病疼痛具有快速改善效果的透明質(zhì)酸制劑。此外，本發(fā)明提供了一種單次給藥制劑，所述制劑的給藥量與傳統(tǒng)制劑的給藥量幾乎相同。本發(fā)明的藥物組合物在給藥后顯示迅速的疼痛改善效果，這種速效性是傳統(tǒng)IA-HA制劑所沒有的，因此本發(fā)明的有效活性成分具有與傳統(tǒng)的IA-HA制劑具有不同機制的潛力。也就是說，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明使用的交聯(lián)透明質(zhì)酸具有這樣的潛力。此外，本發(fā)明的藥物組合物通過使用與傳統(tǒng)的多次給藥用IA-HA制劑的單次給藥量幾乎相同的給藥量，僅通過單次給藥就對人類關節(jié)疾病具有超長期的持續(xù)效果，不僅沒有增加患者的注射負擔，而且單次給藥還可以降低注射時微生物感染的風險，也解除了多次注射的刺痛感。而且，這種超長的效果也使患者就診和醫(yī)療費用的負擔降低。此外，可極大地延長給藥間隔，使IA-HA制劑進行連續(xù)治療成為可能。此外，本發(fā)明的藥物組合物副作用少，作為藥物組合物是特別優(yōu)選的。附圖說明圖1表示交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物組和PBS組在給藥后1周至13周期間疼痛抑制效果的圖。橫軸表示給藥后的周數(shù)，縱軸表示給藥后各周VAS值與給藥前基準值(baseline)的差值(mm)。第1周、第3周、第6周、第9周和第13周的圖中上下延伸的垂直線表示標準偏差。標記“●”表示交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物組的結果，“■”表示PBS組的結果。具體實施方式<1>有效成分本發(fā)明的有效成分為交聯(lián)透明質(zhì)酸，所述交聯(lián)透明質(zhì)酸通過使下列通式(1)表示的部分酰胺化的透明質(zhì)酸的肉桂酸部分的雙鍵環(huán)化形成環(huán)丁烷環(huán)而獲得，[Ar-CH＝CH-COO-(CH2)n-NH-]m-HA(1)(式中，Ar表示可具有取代基的苯基，n表示2或3，HA表示透明質(zhì)酸的羧酸殘基，m表示相對于透明質(zhì)酸的總羧基被酰胺化的羧基的比例，m為總羧基的3-50％)。下文中，將該化合物稱為“交聯(lián)HA衍生物”。對構成該交聯(lián)HA衍生物的HA沒有特別的限定，只要是以雙糖單元為構成單元(該雙糖單元通過β-1,3鍵將N-乙酰基-D-氨基葡糖和D-葡萄糖醛酸結合而成)，通過β-1,4鍵將該雙糖單元反復鍵合成的糖胺。此外，HA可以是不形成鹽的游離狀態(tài)，或可以形成藥學上可接受的鹽。HA藥學上可接受的鹽例如：鈉鹽和鉀鹽等堿金屬離子鹽；鎂鹽和鈣鹽等堿土金屬離子鹽；與銨鹽等無機堿形成的鹽；與二乙醇胺、環(huán)己胺、氨基酸等有機堿形成的鹽。作為HA鹽，更優(yōu)選堿金屬離子鹽，特別優(yōu)選鈉離子鹽。HA可以是從雞冠、臍帶、軟骨和皮膚等活體的局部抽提得到的、源自天然產(chǎn)物的物質(zhì)，也可以是化學合成的物質(zhì)以及利用酵母等微生物培養(yǎng)方法或基因工程學的方法得到的物質(zhì)，可以是這些物質(zhì)中的任意物質(zhì)，對此沒有限制。而且，本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物給予活體，因此，優(yōu)選高純度的HA，基本不含作為醫(yī)藥品在藥學上不允許混入的物質(zhì)。對HA的重均分子量沒有特別的限制，例如為10,000-5,000,000。例如，優(yōu)選200,000-3,000,000，特別優(yōu)選500,000-2,500,000。交聯(lián)HA衍生物的前提是存在這些HA中的羧基與肉桂酸氨烷基酯進行酰胺鍵合成的物質(zhì)(下文簡稱為“光反應性HA衍生物”)。而且，通過在肉桂酸氨烷基酯殘基的雙鍵部分形成環(huán)丁烷環(huán)，這些物質(zhì)相互之間通過分子間或/和分子內(nèi)進行交聯(lián)。在通式(1)中，n表示肉桂酸氨烷基酯的亞烷基部分的長度，n為2或3，也就是說，優(yōu)選碳原子數(shù)為2或3、特別優(yōu)選直鏈狀的結構，例如，亞乙基或亞丙基。本發(fā)明中肉桂酸酯的例子列舉肉桂酸2-氨基乙酯或肉桂酸3-氨基丙酯，但作為肉桂酸酯，優(yōu)選為肉桂酸3-氨基丙酯。在下文的說明中，肉桂酸3-氨基丙酯簡單地記載為肉桂酸氨基丙酯，以此為基礎進行說明。替代下文中說明的肉桂酸氨基丙酯，同樣地可以記載為肉桂酸氨基乙酯，這是容易理解的。光反應性HA衍生物可通過來自構成肉桂酸氨基丙酯的氨基丙醇的氨基與HA的羧基進行酰胺鍵合而制造。該肉桂酸氨基丙酯為肉桂酸的羧基和3-氨基丙醇的羥基經(jīng)酯鍵結合形成的酯類化合物。該肉桂酸氨基丙酯可以通過肉桂酸具有的亞乙烯基相互之間形成環(huán)丁烷環(huán)。肉桂酸含有亞乙烯基，具有經(jīng)光(紫外線)照射發(fā)生光二聚反應或光聚合反應的性質(zhì)。因此，經(jīng)光照射后，由兩個亞乙烯基形成環(huán)丁烷環(huán)。此外，構成肉桂酸3-氨基丙酯的肉桂酸可以是具有取代基的取代肉桂酸。上述通式(1)中的Ar表示可具有取代基的苯基。當通式(1)中的Ar為不具有取代基的苯基時，形成肉桂酸酯；當通式(1)中的Ar為具有取代基的苯基時，形成取代肉桂酸酯。作為這些取代基的例子，例如肉桂酸苯環(huán)上的任意一個或兩個氫原子是碳原子數(shù)為1-8的直鏈或支鏈的低級烷基(例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基等)；碳原子數(shù)為1-8的直鏈或支鏈的低級烷氧基(例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基等)；任選被上述烷基取代的氨基；羥基；鹵素等。光反應性HA衍生物中，HA的羧基不需要全部與肉桂酸氨基丙酯進行酰胺鍵合，一部分羧基進行酰胺鍵合也可以。上述通式(1)中的m表示相對于HA的總羧基，與肉桂酸氨烷基酯進行酰胺鍵合的羧基的比例(％)。下文中，將HA中存在的總羧基中形成酰胺鍵的比例(m)稱為“取代度”(DS)。通過相對于HA的每個雙糖構成單元，肉桂酸氨基丙酯殘基的導入比例(％)來計算DS，例如，相對于每個雙糖構成單元導入一個肉桂酸氨基丙酯殘基的光反應性HA衍生物或者相對于每個200糖構成單元導入一個肉桂酸氨基丙酯殘基的光反應性HA衍生物，它們的DS分別為100％和1％。對本發(fā)明中的光反應性HA衍生物的DS(即m)沒有特定的限制，優(yōu)選3％-50％，更優(yōu)選5％-30％，進一步優(yōu)選10％-25％。本發(fā)明中使用的交聯(lián)HA衍生物可以根據(jù)特開2002-249501號公報和WO2008/069348號小冊子等中記載的方法進行制造。例如，對肉桂酸氨基丙酯與HA通過酰胺鍵合的化學結合方法沒有特定的限制。例如，使用水溶性碳二亞胺(例如，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI·HCl)、1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳二亞胺-甲代-對甲苯磺酸鹽)等水溶性縮合劑的方法；使用N-羥基琥珀酰亞胺(HOSu)、N-羥基苯并三唑(HOBt)等縮合助劑和上述縮合劑的方法；使用4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽(DMT-MM)等縮合劑的方法；活性酯法；酸酐法等方法。此外，光反應性HA衍生物可以由肉桂酸和氨基丙醇(例如，3-氨基丙醇，下同)預先反應制備肉桂酸氨基丙酯(例如，肉桂酸3-氨基丙酯，下同)，然后制備得到的肉桂酸氨基丙酯的氨基與HA的羧基經(jīng)酰胺鍵合進行制備；或者，光反應性HA衍生物可以將氨基丙醇的氨基與HA的羧基進行酰胺鍵合，制備導入了氨基丙醇的HA，之后，肉桂酸的羧基與制備得到的導入了氨基丙醇的HA中的、來自氨基丙醇的羥基經(jīng)酯鍵合進行制備。交聯(lián)HA衍生物是如上所述的光反應性HA衍生物相互之間通過在該衍生物存在的肉桂酸丙酯殘基的雙鍵部分形成環(huán)丁烷環(huán)而進行結合的化合物。對在該肉桂酸丙酯殘基的雙鍵部分形成環(huán)丁烷環(huán)的方法沒有特別的限制，例如可以是，在該肉桂酸丙酯殘基相互之間發(fā)生光二聚或光聚合反應的條件下，對光反應性HA衍生物溶液進行光照射的方法。在這種光照射的情況下，只要是不切斷HA的糖苷鍵并且使肉桂酸丙酯殘基發(fā)生光反應的光，則對光線種類、波長等沒有特別的限制，例如可以是波長200-400nm的紫外線。照射光的強度可根據(jù)交聯(lián)HA衍生物的性狀要求進行適當?shù)倪x擇。優(yōu)選的光照射裝置可以為紫外線燈、高壓汞燈或金屬鹵化物燈等。如果必要的話，優(yōu)選用例如濾波器等從光源中去除不必要波長的光。交聯(lián)HA衍生物中，不需要光反應性HA衍生物中的肉桂酸丙酯殘基的全部雙鍵部分通過形成環(huán)丁烷環(huán)進行結合，僅一部分雙鍵部分形成環(huán)丁烷環(huán)進行結合即可。下文中，交聯(lián)HA衍生物中，光反應性HA衍生物存在的肉桂酸丙酯殘基中，對形成上述環(huán)丁烷環(huán)結構有貢獻的肉桂酸丙酯殘基的比例(％)稱為“交聯(lián)度”。例如，導入100個肉桂酸丙酯殘基的光反應性HA衍生物中，20個肉桂酸丙酯殘基(單體)的二聚化，生成10個二聚體，交聯(lián)度為20％。對本發(fā)明中使用的交聯(lián)HA衍生物的交聯(lián)度沒有特別的限制，優(yōu)選5％-40％，更優(yōu)選7％-35％，進一步優(yōu)選10％-30％。當環(huán)丁烷環(huán)的形成是在用上述光照射下發(fā)生交聯(lián)的情況下，進行該交聯(lián)時優(yōu)選的反應溶液濃度優(yōu)選0.5％-3.0％，更優(yōu)選0.7％-2％。交聯(lián)HA衍生物可以是不形成鹽的游離狀態(tài)，或可以形成藥學上可接受的鹽。交聯(lián)HA衍生物藥學上可接受的鹽的例子包括鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽和鈣鹽等。<2>本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物的含量上述交聯(lián)HA衍生物具有三維網(wǎng)狀結構。因此，交聯(lián)HA衍生物在水性介質(zhì)中溶解后的溶液呈現(xiàn)具有粘彈性的水凝膠的物理性質(zhì)，特別是與以相同濃度制備的透明質(zhì)酸鈉溶液相比，呈現(xiàn)更高的粘彈性。本發(fā)明的藥物組合物中，交聯(lián)HA衍生物的含量優(yōu)選0.5(w/v％)-3.0％(w/v％)，更優(yōu)選0.7(w/v％)-2.0％(w/v％)，進一步優(yōu)選1.0％(w/v％)?？蓪⒈景l(fā)明的藥物組合物配制成各種劑型，但通常優(yōu)選作為注射用液體制劑的注射劑。上述含量使得本發(fā)明的注射劑具有使用帶有注射針的注射器在關節(jié)內(nèi)注射給藥的適宜的流動性，并可通過18號-25號注射針，可用作關節(jié)內(nèi)給藥注射劑(注射用組合物)。<3>本發(fā)明的藥物組合物的給藥量本發(fā)明的藥物組合物用于人類關節(jié)內(nèi)、特別是膝關節(jié)內(nèi)給藥。例如，膝關節(jié)內(nèi)單次給藥時，優(yōu)選給予2ml-5ml，更優(yōu)選2ml-3ml。本發(fā)明的藥物組合物的給藥量可與傳統(tǒng)的多次給藥用IA-HA制劑的單次給藥量相同或幾乎相同。此外，在膝關節(jié)內(nèi)單次給藥時，給藥量(溶液體積)可進一步降低，對于每位成年患者(50kg-70kg)，作為光反應HA衍生物的重量，通常用量范圍為15mg-60mg，優(yōu)選為25mg-35mg，特別優(yōu)選為30mg。本發(fā)明的藥物組合物與傳統(tǒng)的IA-HA制劑相同，可以1周以上的給藥間隔進行給藥。本發(fā)明的藥物組合物的疼痛緩解作用起效快速并具有長期持續(xù)的效果，因而可以比傳統(tǒng)的IA-HA制劑的給藥間隔長。本發(fā)明的藥物組合物在13周以上，更具體地，在13周-26周的時間段具有持續(xù)的效果，因此，給藥間隔可設置為13周以上，進一步在13周-26周之間。為達到至少13周的持續(xù)效果，進一步為達到26周的持續(xù)效果，可使用本發(fā)明的藥物組合物?？紤]到當前的IA-HA制劑的一系列治療是每26周進行給藥，本發(fā)明的藥物組合物可稱為是可持續(xù)進行每26周給藥一次的持續(xù)性IA-HA制劑。<4>本發(fā)明的藥物組合物的適用對象等本發(fā)明的藥物組合物對人類關節(jié)疾病具有疼痛抑制作用或疼痛改善效果。本發(fā)明的藥物組合物在給藥后顯示快速的治療效果，給藥1周-3周后開始顯示幾乎最大的效果，該效果持續(xù)13周以上，進一步持續(xù)26周。這種“治療效果”只要對人類關節(jié)疾病癥狀具有改善效果就沒有特別的限制，包括身體機能改善效果、僵硬改善效果、疼痛抑制效果等，但優(yōu)選疼痛抑制效果。本發(fā)明的藥物組合物在單次給藥后，1周-3周后顯示這種改善效果，并且具有持續(xù)至少13周、進一步持續(xù)26周的超長持續(xù)的特征。此外，本發(fā)明的藥物組合物在不失去所期望的效果、同時又不發(fā)生副作用的情況下，如有必要，可含有配制通常的注射用制劑中使用的溶劑、pH調(diào)節(jié)劑、等滲劑和穩(wěn)定劑等添加劑。例如，作為交聯(lián)HA衍生物的溶劑，例如注射用水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖生理鹽水等；作為通常的注射劑的制劑配制中的pH調(diào)節(jié)劑、等滲劑使用的磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉等添加劑。此外，本發(fā)明的藥物組合物在單次給藥后快速獲得顯著的治療效果。正如下述的實施例，特別是疼痛抑制效果，本發(fā)明的藥物組合物在給藥3周后達到最好治療效果的約90％或以上。本發(fā)明的藥物組合物所具有的這種速效性和顯著性是傳統(tǒng)IA-HA制劑沒有發(fā)現(xiàn)的，認為本發(fā)明中的有效成分具有與傳統(tǒng)IA-HA制劑具有不同的作用機制，例如速效性鎮(zhèn)痛作用這樣作用的潛力。也就是說，本發(fā)明已首次發(fā)現(xiàn)交聯(lián)HA衍生物具有與傳統(tǒng)IA-HA制劑中透明質(zhì)酸成分的疼痛改善效果的機制相異的潛力。此外，在下述的實施例中，與PBS給藥患者相比，本發(fā)明的藥物組合物給藥組中，最初單次給藥后26周、需要再次治療的疼痛復發(fā)患者明顯較少，該結果顯示，給予本發(fā)明的藥物組合物后，顯著延遲疼痛復發(fā)。作為參考，市售的IA-HA制劑之一的ARTZ(注冊商標，生化學工業(yè)株式會社生產(chǎn))為每安瓿或每注射器中有2.5ml的關節(jié)內(nèi)注射液，基本處方為每周連續(xù)給藥5次，每次1安瓿或1注射器。因此，在單一療程中使用的ARTZ劑量為12.5ml。此外，Synvisc-One(商標，由ジェンザイム生產(chǎn))的處方為單次注射，單次給藥6ml。因此，本發(fā)明的藥物組合物基于單次給藥、低劑量且治療效果長期這三個主要優(yōu)點，例如，對于治療慢性關節(jié)疾病，使用每3個月到半年給藥一次的制劑等也成為可能。當然，考慮到患者改善效果的持續(xù)性和癥狀等，給藥間隔為6個月以上的給藥制劑也成為可能。理所當然的是，僅單次給藥即為一個療程也成為可能。下面將詳細介紹本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明的技術范圍不僅限于此。合成例：交聯(lián)HA衍生物的制備根據(jù)WO2008/069348號公報中所描述的方法，使用重均分子量為90萬-100萬的透明質(zhì)酸鈉和肉桂酸3-氨丙基鹽酸鹽為原料，制備取代度為10％-25％、交聯(lián)度為10％-30％、濃度為1.0(w/v)％的交聯(lián)透明質(zhì)酸衍生物溶液。下文中，將該溶液稱為“試驗物質(zhì)”。實施例1實驗步驟對膝關節(jié)骨關節(jié)炎患者進行多中心、雙盲、平行組間比較檢驗，驗證本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物單次給藥的有效性。另外，作為安慰劑(對照)，使用磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)。在給予試驗物質(zhì)1周-2周前，按以下的選擇標準和排除標準對患者進行篩選。符合此標準的患者被隨機分為本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物給藥組和PBS給藥組。交聯(lián)HA衍生物組為249例，PBS組為128例(總計377例)。將上述試驗物質(zhì)給予本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物給藥組的患者，以3ml/關節(jié)的劑量在一個患病膝的關節(jié)內(nèi)單次注射給藥。對PBS治療組的患者，以同樣的方式單次注射PBS。此外，進行給藥的醫(yī)生應在給藥前確認給藥患者的患病膝，有水腫時將關節(jié)積液吸出。注射后，在第1周、第3周、第6周、第9周及第13周的時間點，分別按照下述的評價方法評價改善效果。此外，在每個評價日，作為并用藥物，分發(fā)對乙酰氨基酚，每天允許服用高達4000mg。在試驗期間，除了對乙酰氨基酚，限于在給予試驗物質(zhì)前至少4周繼續(xù)服用一定量的情況下，允許病人服用非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥、非處方藥(OTC)、草藥療法和軟骨保護劑。此外，試驗期間，允許間歇性使用阿片類鎮(zhèn)痛藥。然而，在每個評價日前的24小時，禁止任何合并療法。選擇標準和排除標準(1)選擇標準滿足以下所有條件的患者且未被下文所述的排除標準所排除，則為本試驗的被評價患者?！?0歲和80歲之間的患有膝關節(jié)骨關節(jié)炎癥狀的患者?！ぴ谡玖⒒蛐凶邥r，有持續(xù)至少4周以上膝疼痛的患者?！射線所見判斷為KellgrenLarence分類1-3級的患者。·根據(jù)WesternOntarioandMcMasterUniversitiesOsteoarthritisIndex(WOMAC(注冊商標)疼痛評價，被評價膝在40mm以上且對側膝在20mm以下的患者。此外，WOMAC(注冊商標)使用100mm視覺模擬量表(VAS)。·在治療試驗期間，除了允許的合并療法，同意中止當前實施的治療法的患者。(2)排除標準·X射線所見判斷為KellgrenLarence分類4級的患者?！け辉u價膝患有除OA外的其他炎癥性疾病的患者、患有重度膝關節(jié)水腫的患者、或下肢力線(alignment)嚴重變化的患者?！そ邮苓^膝或髖關節(jié)人工關節(jié)手術的患者、12個月內(nèi)做過膝關節(jié)手術的患者、3個月內(nèi)做過關節(jié)鏡的患者、6周內(nèi)在關節(jié)內(nèi)給予過透明質(zhì)酸制劑的患者?！乐氐娜硇约膊』蛟u價對象膝患有感染性皮膚病的患者。評價方法使用NicholasBellamy博士開發(fā)的WOMAC(TheJournalofRheumatology1988；15:12,p.1833-1840)評分標準，對交聯(lián)HA衍生物的有效性進行評價。此外，WOMAC是一個注冊商標。在下文中，這個注冊商標的標識將被省略。本文使用的WOMAC評分標準是對患者進行包括由疼痛、僵硬和身體機能三部分組成的全部24個項目(全項目)對患者進行詢問并根據(jù)患者的回答進行評分的方法。在本試驗中，WOMAC疼痛評分作為主要評價，進一步地，WOMAC僵硬評分、WOMAC身體機能評分以及WOMAC全項目評分作為次要評價。此外，WOMAC評分是通過詢問如上所述的由疼痛、身體機能、僵硬共計24個問題的患者申報型的評分方法，該方法作為OA的評價方法而建立?；卮饐栴}的方法分為VAS(VisualAnalogScale)和李克特量表(Likertscale)兩種。VAS是患者在100mm的直線上標示自己對各個問題感受的程度并根據(jù)位置判斷程度的方法。該位置表示從量表的左端開始的長度。另一方面，李克特量表是患者根據(jù)5個等級的回答選項表示自己對各個問題感受程度的方法。本實驗中根據(jù)VAS對患者的疼痛、身體機能和僵硬程度進行評價。例如，在給藥前和給藥后的各評分時間點向患者詢問關于疼痛的同一問題，患者通過在量表上標示位置(程度)進行回答。基于給藥前患者標示的長度(給藥前基準值(Baseline))與給藥后各評分時間點患者所標示的長度之間的差值，使改善效果轉化為數(shù)值。WOMAC評分廣泛用于OA治療效果的評價指標，WOMAC評分還可以確認OA治療效果可靠性和可信性(TheJournalofRheumatology2000；27:11,p.2635-2641)。使用意圖治療人群(Intention-to-treatpopulation)(ITT人群)和符合方案人群(perprotocolpopulation)(PP人群)進行有效性分析。ITT人群共375例，其中，本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物組247例，PBS組128例。此外，兩例給藥后沒有就診的患者被排除在外。PP人群共344例，其中，本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物組229例，PBS組115例。此外，那些違反本次試驗條件的患者被排除在外。結果表1顯示了WOMAC疼痛評分中PP人群分析的結果，表2顯示了ITT人群分析的結果。表1表2已經(jīng)證實：相對于PBS組，本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物組在給藥后第3周在統(tǒng)計學上有顯著改善作用，并且在第3周后效果顯著。PP人群中，第3周、第6周和第13周時間點的p值在0.05以下，相對于PBS組，具有統(tǒng)計學上的顯著性差異。雖然在第9周時沒有顯著性差異，確認本發(fā)明的交聯(lián)HA衍生物具有改善趨勢。此外，圖1顯示使用ITT人群回歸分析結果的示意圖。分析給藥后13周的疼痛改善效果，相對于PBS給藥組，交聯(lián)HA衍生物給藥組在第1周-第13周以及第3周-第13周疼痛改善效果在統(tǒng)計學上具有顯著性差異。給藥后第1周-第13周，p值＝0.0483，給藥后第3周-第13周，p值＝0.0495，二者相對于PBS組均在統(tǒng)計學上具有顯著性差異。此外，在第13周的時間點，使用PP人群，分析了通過回歸模型的各WOMAC評分的改善。結果示于表3。證實了在給藥后第13周的時間點，相對于PBS組，交聯(lián)HA衍生物組在統(tǒng)計學上具有顯著性的疼痛改善作用。作為次要的有效性評分項目，WOMAC全項目評分和WOMAC身體機能評分也表明交聯(lián)HA衍生物組在統(tǒng)計學上有顯著性的改善作用，相對于PBS組，在統(tǒng)計學上具有顯著性差異。WOMAC僵硬評分，雖沒有統(tǒng)計學上的顯著性差異，但表明交聯(lián)HA衍生物組具有顯著的趨勢。此外，估算差是使用回歸模型計算的差異，翻譯為Estimateddifference。表3此外，為了驗證其臨床有用性，分析嚴格OMERACT-OARSI響應(StrictOMERACT-OARSIResponse)，表明交聯(lián)HA衍生物在統(tǒng)計學上具有顯著性的改善作用(參照表4)。嚴格OMERACT-OARSI響應定義為在WOMAC疼痛評分或WOMAC身體機能評分下，認為與給藥前基準值相比提高50％以上且改善超過20mm的患者為顯著改善組。該改善組被總稱為嚴格OMERACT-OARSI響應者。表4比值比(oddsratio)p值嚴格OMERACT-OARSI1.740.012此外，關于改善效果的快速顯現(xiàn)，對比、驗證了交聯(lián)HA衍生物組和PBS組之間關于WOMAC疼痛評分、WOMAC全項目評分、WOMAC身體機能評分以及WOMAC僵硬評分在第3周時相對于基準值的平均改善值。WOMAC疼痛評分在第3周獲得超過最大改善效果90％的改善效果，并算出了表示交聯(lián)HA衍生物組和PBS組在統(tǒng)計學上具有顯著性的p值(表5)。所有評分中，p值均小于0.05(p＜0.05)，表明在統(tǒng)計學上具有顯著性差異。表5第3周的p值WOMAC疼痛評分0.0065WOMAC全項目評分0.0129WOMAC身體機能評分0.0205WOMAC僵硬評分0.0336此外，在給予交聯(lián)HA衍生物和PBS后13周的觀察結束后，進行又一個13周的延伸繼續(xù)觀察，驗證了初次給藥后26周交聯(lián)HA衍生物給藥組的有效性。初次給藥后，進行16周、19周、22周、26周后的WOMAC疼痛評分，不符合以下標準的患者作為初次給藥的有效性持續(xù)組，用Cox危險模型對各治療組進行存活分析。標準A：在WOMAC疼痛評分中，有VAS40mm以上的疼痛。標準B：在WOMAC疼痛評分中，有VAS40mm以上，并且距離初次給藥前基準值具有不到20mm的改善。使用Cox危險分析時，根據(jù)上述兩個標準，顯示交聯(lián)HA衍生物給藥組具有26周的有效性(標準A：p＝0.019，標準B：p＝0.027)。結論確認了交聯(lián)HA衍生物的單次注射在注射后顯示至少26周的持續(xù)改善效果。不僅在疼痛評分中，而且在身體機能評分等評分中，相對于PBS組，交聯(lián)HA衍生物組顯示顯著的改善作用，確認其對關節(jié)疾病具有多方面的有效性。此外，可確認在注射后第3周快速顯示疼痛改善效果，相對于PBS組，還顯示出統(tǒng)計學上的顯著性差異。此外，交聯(lián)HA衍生物顯示出13周甚至26周的顯著的改善效果。并且，交聯(lián)HA衍生物給藥組中，不良事件的發(fā)生率與PBS給藥組沒有統(tǒng)計學上的顯著性差異，也沒有嚴重的副作用，確認交聯(lián)HA衍生物作為關節(jié)內(nèi)注射劑具有高度的安全性。工業(yè)實用性本發(fā)明提供了一種新型關節(jié)疾病疼痛抑制劑，該抑制劑在給藥后快速地顯示疼痛抑制效果，并且在第13周至第26周具有長期的持續(xù)效果。由于是極大改善患者負擔的持續(xù)性關節(jié)疾病治療藥物，因此，在醫(yī)藥工業(yè)等工業(yè)上有可利用性。當前第1頁1 2 3