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多靶點聯(lián)合的CAR?T細胞制劑與制備方法與流程

文檔序號:12613464閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種多靶點聯(lián)合的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于由以下步驟構成:

i.采用基因工程技術設計多個腫瘤抗原的組合,所述的腫瘤抗原的組合包括a.CD19;以及b.CD20、CD138、CD123中的一種或兩種,

ii.將腫瘤抗原的組合插入到載體序列的4513和4514位置之間構成CAR,載體序列的堿基序列如SEQ ID NO.1所示;

iii.將CAR進行病毒包裝;

iv.將CAR通過病毒轉染T細胞;

v.通過培養(yǎng)基進行培養(yǎng);

vi.將制備的CAR-T細胞與人血白蛋白、生理鹽水混合,其中CAR-T細胞濃度為0.5~1×106個/毫升,CAR陽性率在25%以上,活率在95%以上。

2.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于包括兩種不同的CD19,所述的CD19來自人源和/或鼠源。

3.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于包括兩種不同的CD123序列。

4.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD20。

5.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD138。

6.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD123。

7.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD20-CD138。

8.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD20-CD123。

9.如權利要求1所述的CAR-T細胞制劑的制備方法,其特征在于所述的腫瘤抗原組合為CD19-CD138-CD123。

10.一種多靶點聯(lián)合的CAR-T細胞制劑,由權利要求1~9任一所述的制備方法制備得到。

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