本發(fā)明屬于生理活性物質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法。
背景技術(shù)：
總黃酮，是黃酮類化合物的總稱，包括黃酮、黃酮醇、雙氫黃(醇)、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等。天然來(lái)源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過(guò)血腦屏障，能進(jìn)入脂肪組織，進(jìn)而具有幫助人體防御輻射、消除疲勞、保護(hù)血管、防動(dòng)脈硬化、擴(kuò)張毛細(xì)血管、疏通微循環(huán)、活化大腦及其他臟器細(xì)胞、抗脂肪氧化、抗衰老的功能。
葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素，是一類含脂的色素家族，位于類囊體膜。葉綠素結(jié)構(gòu)與人類和大多數(shù)動(dòng)物體內(nèi)血液中紅色素結(jié)構(gòu)極其相似，具有促進(jìn)傷口愈合、造血、脫臭、改善便秘、降解膽固醇、提供維生素、解毒、抗病等諸多功能。
由于總黃酮和葉綠素具備上述多種優(yōu)異的功效，如何從植物中獲取總黃酮和葉綠素就成為了研究人員的一個(gè)研究方向。芹菜中含有豐富的黃酮類化合物和葉綠素，是現(xiàn)有技術(shù)中常用的提取黃酮類化合物和葉綠素的物質(zhì)。
現(xiàn)有技術(shù)中，從芹菜中提取總黃酮和葉綠素的方法主要是將芹菜粉末溶于相應(yīng)的有機(jī)提取液中，通過(guò)加熱回流、恒溫溫浸或者超聲分別提取總黃酮和葉綠素。這類方法雖然能夠提取總黃酮和葉綠素，但是這類方法無(wú)法一次性完成兩種物質(zhì)的提取，只能分別提取兩種物質(zhì)，操作繁瑣；提取過(guò)程需要加熱，容易造成功效成分流失；工業(yè)化程度相對(duì)較復(fù)雜，成本較高；有機(jī)提取液易殘留對(duì)人體造成不必要的傷害；且總黃酮種類多，單一的有機(jī)提取液很難提取完全，可能會(huì)造成某種或某些黃酮類化合物的遺失。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中，從芹菜中提取總黃酮及葉綠素的方法操作復(fù)雜、成本高、提取不完全、易造成功效成分流失、存在對(duì)人體造成不必要傷害的隱患的技術(shù)問(wèn)題，提供一種芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法。
本發(fā)明的一種芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法，步驟如下：
步驟一、將清洗后的芹菜莖葉切成1～4cm的小段，然后加入密封避光的榨汁機(jī)中榨汁，得到芹菜漿；
步驟二、先將芹菜漿置于潔凈容器中，然后按芹菜漿與純凈水的體積比為1:(1～1.5)，向潔凈容器中加入純凈水，4～20℃靜止48～72h，得到沉淀完全的芹菜漿；
所述潔凈容器的容積為芹菜漿和純凈水的體積之和的二倍到三倍；
步驟三、將沉淀完全的芹菜漿傾去上清液，沉淀物過(guò)70～90目篩絹后，-30～-35℃冷凍干燥至水分含量小于等于4％，取出，粉碎成細(xì)粉，得到總黃酮及葉綠素。
優(yōu)選的，步驟三中，所述沉淀物過(guò)80目絹布。
優(yōu)選的，步驟三中，所述冷凍干燥的時(shí)間為30h。
優(yōu)選的，步驟三中，粉碎得到的細(xì)粉過(guò)200目篩，得到總黃酮及葉綠素。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
本發(fā)明的芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法，利用葉綠素和總黃酮不溶于水的特性，將含有該成分的芹菜組織進(jìn)行濃集，用物理方法同時(shí)提取出總黃酮和葉綠素，部分保留了芹菜的原生形態(tài)；提取過(guò)程中無(wú)高溫加熱過(guò)程，且在避光下進(jìn)行，避免了葉綠素和總黃酮等成分因高溫及光照等原因?qū)е鹿πС煞值慕到?，提高了有效成分的利用度，?00g芹菜計(jì)，提取的葉綠素的量能夠達(dá)到80～300mg，提取的總黃酮的量能夠達(dá)到100～350mg；提取過(guò)程中不接觸任何有機(jī)試劑，提取后的葉綠素和總黃酮無(wú)毒、有效、安全。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明的芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法的工藝流程圖。
具體實(shí)施方式
為了進(jìn)一步了解本發(fā)明，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案進(jìn)行描述，但是應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明專利要求的限制。
本發(fā)明的一種芹維康膠囊中總黃酮及葉綠素的提取方法，步驟如下：
步驟一、將清洗后的芹菜莖葉切成1～4cm的小段，盡量切斷芹菜組織中的維管束，加入密封避光的榨汁機(jī)中榨汁，得到芹菜漿；
其中，芹菜新鮮，不得腐爛，滿足GB 2763的要求，一般選擇長(zhǎng)白山地區(qū)產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)新鮮芹菜；芹菜去除根，保留芹菜完整莖及葉片；一般采用飲用水清洗芹菜莖葉，去除泥沙；密封避光的榨汁機(jī)能夠避免芹菜漿氧化。
步驟二、密閉且避光條件下，先將芹菜漿置于潔凈容器中，然后按芹菜漿與純凈水的體積比為1:(1～1.5)向潔凈容器中加入純凈水，4～20℃靜止48～72h，得到沉淀完全的芹菜漿(含有上清液和沉淀物)；
其中，潔凈容器的容積為芹菜漿和純凈水的體積之和的二倍到三倍，即保證芹菜漿和純凈水加入后，具有一定的液面高度，以利于芹菜漿沉淀分層；
在4～20℃靜止48～72h，是本發(fā)明必須要保證的實(shí)驗(yàn)條件，如果溫度低于4℃，會(huì)造成芹菜漿結(jié)凍，變質(zhì)，如果溫度高于20℃，微生物活動(dòng)頻繁，也會(huì)造成芹菜漿變質(zhì)，如果靜止時(shí)間低于48h，芹菜漿無(wú)法沉淀充分，如果高于72h，芹菜漿會(huì)受環(huán)境影響，氧化，降低有效成分含量。
步驟三、將沉淀完全的芹菜漿傾去上清液，沉淀物過(guò)70～90目，優(yōu)選80目篩絹后，過(guò)濾后的沉淀物加入冷凍干燥機(jī)中，在-35～-30℃冷凍干燥至水分含量小于等于4％，一般需要30h，取出凍干物，加入粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉，過(guò)200目篩，得到總黃酮及葉綠素；
其中，如果沉淀物篩絹超過(guò)90目，會(huì)降低總黃酮及葉綠素的得率，如果低于70目，會(huì)引入雜質(zhì)。
以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1
步驟一、將100g清洗瀝干后的芹菜莖葉切成4cm小段，加入密封避光的榨汁機(jī)中榨汁，得到50mL的芹菜漿；
步驟二、密閉且避光條件下，將芹菜漿置于250mL錐形瓶中，向錐形瓶中加入75mL的純凈水，20℃靜止48h，得到沉淀完全的芹菜漿；
步驟三、將沉淀完全的芹菜漿傾去上清液，沉淀物過(guò)80目篩絹后，過(guò)濾后的沉淀物加入冷凍干燥機(jī)中，在-35℃冷凍干燥30h，得到水分含量為4％的凍干物，加入粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉，過(guò)200目篩，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為256mg，葉綠素為310mg。
實(shí)施例2
步驟一、將100g清洗瀝干后的芹菜莖葉切成1cm小段，加入密封避光的榨汁機(jī)中榨汁，得到60mL的芹菜漿；
步驟二、密閉且避光條件下，將芹菜漿置于250mL錐形瓶中，向錐形瓶中加入60mL的純凈水，4℃靜止72h，得到沉淀完全的芹菜漿；
步驟三、將沉淀完全的芹菜漿傾去上清液，沉淀物過(guò)80目篩絹后，過(guò)濾后的沉淀物加入冷凍干燥機(jī)中，在-30℃冷凍干燥30h，得到水分含量3％的凍干物，加入粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉，過(guò)200目篩，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為262mg，葉綠為素305mg。
對(duì)比例1
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，60℃烘干，粉碎后過(guò)80目篩，得到芹菜粉末；
步驟二、將芹菜粉末置于500mL錐形瓶中，以芹菜粉末與乙醇水溶液(濃度70％)的料液比為1g:50mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度70％)，70℃恒溫水浴提取1.5h后速冷，過(guò)濾，離心分離得上清液，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為175mg，葉綠素為55mg。
對(duì)比例2
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，粉碎；
步驟二、將粉碎的芹菜莖葉置于500mL錐形瓶中，以粉碎的芹菜莖葉與乙醇水溶液(濃度40％)的料液比為1g:18mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度40％)，65℃提取3次，每次1h，冷卻，過(guò)濾，濾液于50℃水浴中蒸發(fā)濃縮至呈粘稠膏狀，移至真空十燥箱內(nèi)50℃干燥2h，取出，冷卻至室溫，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為166mg，葉綠素為49mg。
對(duì)比例3
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，粉碎；
步驟二、將粉碎的芹菜莖葉置于500mL錐形瓶中，以粉碎的芹菜莖葉與乙醇水溶液(濃度40％)的料液比為1g:50mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度40％)，85℃水浴1h，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為192mg，葉綠素為45mg。
對(duì)比例4
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，粉碎；
步驟二、將粉碎的芹菜莖葉置于500mL錐形瓶中，以粉碎的芹菜莖葉與乙醇水溶液(濃度40％)的料液比為1g:50mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度40％)，60℃超聲提取25min，超聲功率為200W，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為176mg，葉綠素為49mg。
對(duì)比例5
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，粉碎；
步驟二、將粉碎的芹菜莖葉置于500mL錐形瓶中，以粉碎的芹菜莖葉與乙醇水溶液(濃度40％)的料液比為1g:50mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度40％)，45℃恒溫浸提1h，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為183mg，葉綠素為42mg。
對(duì)比例6
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，粉碎；
步驟二、將粉碎的芹菜莖葉置于500mL錐形瓶中，以粉碎的芹菜莖葉與乙醇丙酮混合水溶液(濃度90％，乙醇與丙酮體積比1:1)的料液比為1g:30mL向錐形瓶中加入乙醇丙酮混合水溶液(濃度90％，乙醇與丙酮體積比1:1)，50℃恒溫浸提20min，過(guò)濾，即得產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為48mg，葉綠素為199mg。
對(duì)比例7
步驟一、取100g與實(shí)施例2的芹菜來(lái)源相同的清洗瀝干后的芹菜莖葉，將芹菜莖葉切成1cm小段，加入密封避光的榨汁機(jī)中榨汁，得到60mL的芹菜漿；
步驟二、將芹菜漿置于500mL錐形瓶中，以芹菜漿與乙醇水溶液(濃度40％)的用量比為1g:50mL向錐形瓶中加入乙醇水溶液(濃度40％)，85℃水浴1h，得到產(chǎn)物。
經(jīng)分析產(chǎn)物，100g芹菜提取的總黃酮為192mg，100g芹菜提取的葉綠素為126mg。
通過(guò)對(duì)比實(shí)施例2和對(duì)比例1～7可以看出，本發(fā)明的提取方法能夠同時(shí)提取總黃酮和葉綠素，且提取量遠(yuǎn)高于現(xiàn)有技術(shù)。