本發(fā)明涉及軟膠囊制備方法領(lǐng)域，特別涉及一種蘿卜硫素軟膠囊的制備方法。
背景技術(shù)：
流行病學(xué)研究表明，食用十字花科蕓苔屬蔬菜，如西蘭花、羽衣甘藍(lán)、抱子甘藍(lán)、花椰菜、白菜等可預(yù)防胰腺癌、肺癌、直腸癌、乳腺癌及前列腺癌等多種癌癥的發(fā)生，這主要與蕓苔屬蔬菜體內(nèi)的硫代葡萄糖苷(硫苷)的水解產(chǎn)物—蘿卜硫素有關(guān)。
蘿卜硫素，(1-異硫氰基-4-甲基亞磺酰基丁烷，l-isothiocyanato-4-methyl sulfiny butane，sulfbraphane)，分子量177.3，分子式為C6H11S2NO。它是葡萄糖萊菔子苷(硫苷的一種)經(jīng)酶解后產(chǎn)生的,通過(guò)調(diào)控致癌物的代謝而作用，通過(guò)作用于人體內(nèi)的“Phase two enzymes”激發(fā)人體的自我抗癌機(jī)制，中和體內(nèi)某些致癌化學(xué)物質(zhì)，造成癌細(xì)胞阻滯，抑制其繁殖并誘導(dǎo)其死亡，可有效預(yù)防胰腺癌、肺癌、直腸癌、乳腺癌及前列腺癌等多種癌癥的發(fā)生。因此,它被認(rèn)為是迄今為止蔬菜中發(fā)現(xiàn)的抗癌效果最好、效力最強(qiáng)的天然活性物質(zhì)。作為藥品或食品的功效成分，具有很高的研究?jī)r(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景。
如何充分利用蘿卜硫素的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，提供其利用率，開(kāi)發(fā)具有保健功效的軟膠囊產(chǎn)品，滿足和豐富人們?nèi)找嬖鲩L(zhǎng)的物質(zhì)需求，是保健品領(lǐng)域亟待解決的問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的主要目的為了彌補(bǔ)上述問(wèn)題，提供一種全面提高免疫力、同時(shí)預(yù)防大多數(shù)癌癥的蘿卜硫素軟膠囊的制備方法。
本發(fā)明提出一種蘿卜硫素軟膠囊的制備方法，包括如下步驟：
S10，配制軟膠囊膠液：取一定量去離子水置于配膠罐中，加入濃度為0.15％的羥苯乙酯，濃度為0.3％的氧化鐵棕混勻后再與甘油混合，加入明膠浸漬2小時(shí)，在70—75℃水浴中加熱至溶解，然后在65—75℃條件下攪拌，密閉配膠罐，開(kāi)啟真空泵抽真空4—6小時(shí)至膠液氣泡脫凈，明膠全部溶解為止，真空度保持0.08Mpa；最后經(jīng)100目尼龍篩網(wǎng)過(guò)濾；其中，按質(zhì)量比計(jì)算，去離子水：甘油：明膠＝10:4:10；
S20，原料粉制備：取靈芝孢子粉、人參皂苷RH2干粉、淀粉過(guò)100目篩后與蘿卜硫素提取物一起投入混合機(jī)中混合均勻后得到原料粉；其中，過(guò)篩后的靈芝孢子粉、人參皂苷RH2干粉、淀粉與蘿卜硫素提取物的質(zhì)量比為4：2：1：8；
S30，軋制成型：取一定量的植物油加熱至75℃，加入蜂蠟熔融，邊攪拌邊加入步驟S20得到的原料粉以及吐溫-80，攪拌均勻后置于膠體磨中研磨15分鐘，冷卻至50℃后加入步驟S10得到的膠液，使用軟膠囊制丸機(jī)將混合物壓制成軟膠囊，每粒膠囊內(nèi)容物為500mg，經(jīng)定型、干燥、拋光后裝瓶；植物油與原料粉的質(zhì)量比為7：3。
優(yōu)選地，步驟S30中所述植物油為大豆油。
優(yōu)選地，步驟S20中所述蘿卜硫素提取物通過(guò)下述方法制備：
S21，取新鮮的西蘭花種子于75—80℃下脫水0.5—2小時(shí)，然后在55—65℃下烘干至含水量低于8％，用粉碎機(jī)粉碎至30—60目得到西蘭花種子粉末，并作為原材料加入過(guò)量正己烷脫脂，用高速勻漿機(jī)混合均勻，控制溫度20—40℃，時(shí)間30—50分鐘，過(guò)濾后得濾渣備用；
S22，向?yàn)V渣中加入0.05mol/mL的磷酸緩沖液調(diào)節(jié)PH至4.5—5.5，加入粗芥子硫苷酸酶，攪拌均勻后置于30—45℃條件下酶解0.5—1.5小時(shí)，所述濾渣與粗芥子硫苷酸酶的比例為1g：3mL；然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，經(jīng)超聲波振蕩提取10～60min，接著靜置30～45min后過(guò)30目篩，除去提取物殘?jiān)?，得到濾液；所述濾液經(jīng)真空抽濾除去雜質(zhì)后，得到抽提液；
S23，步驟S20得到的抽提液加水溶解后，用二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，過(guò)濾并收集濾液，將濾液置于35—40℃條件下真空濃縮得到蘿卜硫素粗品；所述加水溶解的量為抽提液的10倍量，萃取所用二氯甲烷的量為加水抽提液的2倍量；
S24，將上述制備得到的蘿卜硫素粗品采用硅膠柱層析，以體積分?jǐn)?shù)為10％的乙酸乙酯為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集蘿卜硫素餾分，35—40℃溫度下真空濃縮即得蘿卜硫素提取物。
優(yōu)選地，步驟S21中所述原材料的質(zhì)量與正己烷體積之比為1g:20—30mL。
本發(fā)明以從粉碎好的西蘭花種子提取蘿卜硫素為原料，并配加人參皂苷RH2，靈芝孢子粉，淀粉等幾種生物活性物質(zhì)制備蘿卜硫素軟膠囊，與蘿卜硫素優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，制成的軟膠囊具有良好的防癌抗癌作用，在提高機(jī)體免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞作用方面亦顯示出積極的效果。工藝可靠穩(wěn)定，并使原料中的營(yíng)養(yǎng)、保健和醫(yī)療有效成分最大限度地避免了破壞，產(chǎn)品安全。
具體實(shí)施方式
應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明提出一種蘿卜硫素軟膠囊的制備方法，其包括如下步驟：
S10，配制軟膠囊膠液：取一定量去離子水置于配膠罐中，加入濃度為0.15％的羥苯乙酯，濃度為0.3％的氧化鐵棕混勻后與甘油混合，加入明膠浸漬2小時(shí)，在70—75℃水浴中加熱至溶解，然后在65—75℃條件下保溫?cái)嚢?，密閉配膠罐，開(kāi)啟真空泵抽真空4—6小時(shí)至膠液氣泡脫凈，明膠全部溶解為止，真空度保持0.08Mpa；最后經(jīng)100目尼龍篩網(wǎng)過(guò)濾即得膠液；其中，按質(zhì)量比計(jì)算，去離子水：甘油：明膠＝10:4:10；
囊皮的選擇是保證軟膠囊質(zhì)量穩(wěn)定的關(guān)鍵。本發(fā)明蘿卜硫素軟膠囊囊殼材料采用明膠、甘油(增塑劑)、水，從而保證制成的囊皮質(zhì)量穩(wěn)定，不與內(nèi)容物發(fā)生反應(yīng)，且不會(huì)吸水或失水變質(zhì)；需要說(shuō)明的是，明膠與增塑劑(甘油)的比例要適當(dāng)。比例過(guò)大，制成的膠囊比較硬，影響囊體的崩解；比例過(guò)小，制成的膠囊比較軟，影響囊體的形成。具體地，本實(shí)施例中，明膠、甘油、水的質(zhì)量比為10：4：l0，結(jié)果良好，可以滿足膠囊成型要求。
考慮軟膠囊的外表美觀，在膠囊殼中使用適量的氧化鐵棕作為著色劑和遮光劑。且當(dāng)其含量為3％時(shí)，對(duì)軟膠囊內(nèi)容物的含量、崩解時(shí)限影響無(wú)明顯影響。
為了防止軟膠囊在貯藏過(guò)程中發(fā)霉，本發(fā)明還在囊殼中常加入濃度為0.15％羥苯乙酯作為防腐劑，有利于軟膠囊的保存。
S20，原料粉制備：取靈芝孢子粉、人參皂苷RH2干粉、淀粉過(guò)100目篩后與蘿卜硫素提取物一起投入混合機(jī)中混合均勻后得到原料粉；其中，過(guò)篩后的靈芝孢子粉、人參皂苷RH2干粉、淀粉與蘿卜硫素提取物的質(zhì)量比為4：2：1：8；
靈芝孢子粉，即靈芝的種子，它是靈芝在生長(zhǎng)成熟期，從靈芝菌褶中彈射出來(lái)的極其微小的卵形生殖細(xì)胞。味甘，性溫，無(wú)毒，溫補(bǔ)不燥，能夠促進(jìn)機(jī)體正常代謝，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，抑制腫瘤生長(zhǎng)，是目前癌癥患者康復(fù)治療的首選藥。
人參皂苷RH2干粉是人參中提取的天然活性成份，經(jīng)眾多國(guó)際權(quán)威專家論證具有良好防癌、抗癌活性功能，能抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，它也可有效增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞吞噬功能，可使癌細(xì)胞死亡，同時(shí)，它可以提高免疫力降低放化療的毒性。
S30，軋制成型：取一定量的植物油加熱至75℃，加入蜂蠟熔融，邊攪拌邊加入步驟S20得到的原料粉以及吐溫-80，攪拌均勻后置于膠體磨中研磨15分鐘，冷卻至50℃后加入前述制備得到的膠液，使用軟膠囊制丸機(jī)將混合物壓制成軟膠囊，每粒膠囊內(nèi)容物為500mg，經(jīng)定型、干燥、燈檢、拋光后裝瓶；植物油與原料粉的質(zhì)量比為7：3。
植物油作為原料粉稀釋劑，使原料粉分散均勻且有流動(dòng)性后方便后續(xù)壓片工藝。優(yōu)選地，植物油為大豆油。表面活性劑吐溫-80作為潤(rùn)濕劑，是原料粉微粒漂浮或下沉，從而均勻地分散于分散媒中。蜂蠟作為助懸劑。
具體地，壓丸機(jī)轉(zhuǎn)速保持2.5轉(zhuǎn)/分鐘，噴體溫度保持40℃，1g/粒；轉(zhuǎn)籠滾動(dòng)定型，定型溫度18—26℃，相對(duì)濕度20—35％，定型時(shí)間4小時(shí)；隨后將定型好的膠囊放入涼盤，推入干燥間，干燥36小時(shí)，干燥間的條件22—26℃，相對(duì)濕度20—35％；將干燥好的軟膠囊進(jìn)行燈檢，去除異形、漏油丸等不合格膠囊；將揀好的膠丸投入拋光機(jī)里進(jìn)行拋光；按企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)；合格的產(chǎn)品裝瓶。
更進(jìn)一步地，步驟S20中所述蘿卜硫素提取物通過(guò)下述方法制備：
S21，取新鮮的西蘭花種子于75—80℃下脫水0.5—2小時(shí)，然后在55—65℃下烘干至含水量低于8％，用粉碎機(jī)粉碎至30—60目得到西蘭花種子粉末，并作為原材料加入過(guò)量正己烷脫脂，用高速勻漿機(jī)混合均勻，控制溫度20—40℃，時(shí)間30—50分鐘，過(guò)濾后得濾渣備用；
優(yōu)選地，所述原材料的質(zhì)量與正己烷體積之比為1g:20—30mL。
本步驟中，西蘭花種子粉末需加入過(guò)量正己烷脫脂后再進(jìn)行提取。這是由于西蘭花種子中含有大量油脂,阻礙了硫代葡萄糖苷與酶的接觸,無(wú)法使蘿卜硫素完全釋放；而且由于混合液中含有大量的水溶性蛋白和多糖，沉淀物質(zhì)較多，溶液黏度很大,萃取和過(guò)濾都比較困難,導(dǎo)致部分蘿卜硫素留在濾渣中不容易被洗出來(lái),從而降低提取率。優(yōu)選地，原材料質(zhì)量與正己烷體積之比為1g:20—30mL。
為充分利用資源，本步驟中，過(guò)濾后，濾液為溶解有西蘭花種子油脂的正己烷，將其送至脫溶劑釜進(jìn)行脫正己烷處理，回收正己烷并獲得粗制西蘭花種子籽油，獲得的粗制西蘭花種子籽油可以進(jìn)行精煉處理，制備出精煉食用西蘭花種子籽油。
S22，向?yàn)V渣中加入0.05mol/mL的磷酸緩沖液調(diào)節(jié)PH至4.5—5.5，加入粗芥子硫苷酸酶，攪拌均勻后置于30—45℃條件下酶解0.5—1.5小時(shí)，所述濾渣與粗芥子硫苷酸酶的比例為1g：3mL；然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇，經(jīng)超聲波振蕩提取10～60min，接著靜置30～45min后過(guò)30目篩，除去提取物殘?jiān)?，得到濾液；所述濾液經(jīng)真空抽濾除去雜質(zhì)后，得到抽提液；
添加外源粗芥子硫苷酸酶，有利于促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)酶促反應(yīng)的發(fā)生，從而提高蘿卜硫素含量，提高生產(chǎn)效率。
優(yōu)選地，本步驟中，加入乙醇的質(zhì)量是混合物質(zhì)量的8—8.5倍；所述超聲震蕩頻率40kHz，功率200w。抽真空時(shí)，真空度為-0.06MPa至-0.08MPa，溫度為30℃—40℃。
S23，步驟S22得到的抽提液加水溶解后，用二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，過(guò)濾并收集濾液，將濾液置于35—40℃條件下真空濃縮得到蘿卜硫素粗品；所述加水溶解的量為抽提液的10倍量，萃取所用二氯甲烷的量為水層料液的2倍量；
二氯甲烷提取率最高，而且容易揮發(fā),在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)很容易除去,因此采用二氯甲烷作為萃取劑。需注意的是，二氯甲烷具有較大的毒性，因此當(dāng)提取的蘿卜硫素用作食品或藥品時(shí),還需要適量添加乙酸乙酯作為萃取劑。得到的蘿卜硫素粗品呈油狀。
S24，將上述制備得到的蘿卜硫素粗品采用硅膠柱層析，以體積分?jǐn)?shù)為10％的乙酸乙酯為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集蘿卜硫素餾分，35—40℃溫度下真空濃縮，180℃噴霧干燥即得蘿卜硫素提取物。
實(shí)施例：
S10，配制軟膠囊膠液：取去離子水200g于配膠罐中，加入濃度為0.15％的羥苯乙酯，濃度為0.3％的氧化鐵棕混勻后與80g甘油混合，加入200g明膠浸漬2小時(shí)，在75℃水浴中加熱至溶解，然后在70℃條件下保溫?cái)嚢?，密閉配膠罐，開(kāi)啟真空泵抽真空4小時(shí)至膠液氣泡脫凈，明膠全部溶解為止，真空度保持0.08Mpa；最后經(jīng)100目尼龍篩網(wǎng)過(guò)濾得到膠液；
S20，原料粉制備：取靈芝孢子粉80g、人參皂苷RH2干粉40g、淀粉20g過(guò)100目篩后與蘿卜硫素提取物160g一起投入混合機(jī)中混合均勻后得到原料粉；
S30，軋制成型：取植物油700g加熱至75℃，加入蜂蠟熔融，邊攪拌邊加入步驟S20得到的原料粉300g以及吐溫-80，攪拌均勻后置于膠體磨中研磨15分鐘，冷卻至50℃后加入前述制備得到的膠液，使用軟膠囊制丸機(jī)將混合物壓制成軟膠囊，每粒膠囊內(nèi)容物為500mg，經(jīng)定型、干燥、燈檢、拋光后裝瓶；
按上述優(yōu)選的工藝條件制備蘿卜硫素軟膠囊，進(jìn)行3批放大試驗(yàn)，結(jié)果成品率平均為93.2％，軟膠囊外觀、質(zhì)量差異限度、崩解時(shí)限均符合藥典規(guī)定；說(shuō)明本發(fā)明蘿卜硫素軟膠囊制備工藝穩(wěn)定可靠。
服用方案確定每日服用3次，每次2粒，共6粒。
本發(fā)明以從粉碎好的西蘭花種子提取蘿卜硫素為原料，并配加人參皂苷RH2，靈芝孢子粉，淀粉等幾種生物活性物質(zhì)制備蘿卜硫素軟膠囊，與蘿卜硫素優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，顯出良好的防癌抗癌作用，在提高機(jī)體免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞作用方面亦顯示出積極的效果。工藝可靠穩(wěn)定，并使原料中的營(yíng)養(yǎng)、保健和醫(yī)療有效成分最大限度地避免了破壞，產(chǎn)品安全。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。