本發(fā)明涉及透明質(zhì)酸
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，還涉及所述透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜的制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：速溶膜劑通常由水溶性成膜材料、增塑劑、崩解劑、填充劑、藥物等組成。成膜材料是速溶膜處方中占比重最大的輔料，可以占到膜劑干重的45％以上，其中支鏈淀粉，明膠和羥丙甲纖維素是最常用的成膜材料。其它常用的成膜材料還有聚卡波非，纖維素衍生物，普魯蘭多糖，黃原膠，豆角膠，瓜爾膠，角叉菜膠，海藻酸鈉，殼聚糖，聚環(huán)氧乙烯，聚乙烯醇等。不同的成膜材料會(huì)顯著影響膜劑的力學(xué)性質(zhì)和使用感受。目前的速溶膜劑產(chǎn)品主要在口腔中使用，涉及護(hù)膚領(lǐng)域的幾乎沒(méi)有?？谇凰偃苣┩ǔ＿€會(huì)加入矯味劑、著色劑等。皮膚護(hù)理膜在化妝品領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用效果，很大程度上取決于使用者在使用過(guò)程中的主觀感受，因此，溶解速度和感覺(jué)屬性(觸感性質(zhì))如容易鋪展、吸收速度、皮膚滋潤(rùn)度、皮膚感覺(jué)，及整體外觀是關(guān)鍵的因素。透明質(zhì)酸是構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì)的主要成分之一，隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)透明質(zhì)酸除保濕性能外，還具有營(yíng)養(yǎng)、修復(fù)損傷皮膚、清除自由基等功效。此外還具有獨(dú)特的潤(rùn)滑性和成膜性，含有透明質(zhì)酸的護(hù)膚品涂于皮膚時(shí)，在皮膚表面形成一層肉眼不可見(jiàn)的透氣水化膜，使皮膚產(chǎn)生很好的潤(rùn)滑感和滋潤(rùn)感。在以往普通劑型的護(hù)膚產(chǎn)品中，透明質(zhì)酸總是作為一種高端的保濕活性成分使用，也有一些膜劑產(chǎn)品中加入透明質(zhì)酸作為保濕或輔助性成膜材料，添加量都非常少，未見(jiàn)到用透明質(zhì)酸作為主要成膜材料的。專(zhuān)利CN101708176A公開(kāi)了一種在液體中可迅速溶解的固體薄膜，用于治療人體和營(yíng)養(yǎng)用途，含有25％-60％的藻酸鈉(成膜劑/乳化劑)、0.1％-20％的微晶纖維素(增稠劑/穩(wěn)定劑)、0.1-25％的植物蛋白(乳化劑/組織形成劑)。也含有屬于多元醇家族的潤(rùn)濕物質(zhì)，如甘油、山梨醇等，重量占比0-50％。其中也提到用糖胺聚糖(如透明質(zhì)酸)作為輔助性成膜物質(zhì)，在其中一個(gè)實(shí)施例中透明質(zhì)酸在干膜總重量中占比3.99％。CN101505719A在含有海藻膠和透明質(zhì)酸的乳化組合物中配合乙酰化透明質(zhì)酸(取代度2～4，分子量?jī)?yōu)選10～200萬(wàn)；實(shí)施例中用到的取代度為2.8～3.8，分子量約10萬(wàn))可得到具有潤(rùn)滑使用感的乳化組合物。CN103442684A一種水包油型乳化皮膚化妝品，含有乙?；该髻|(zhì)酸(取代度優(yōu)選2.6～3.8)、特定的聚甲基丙烯酰氧基乙基磷酰膽堿衍生物、交聯(lián)型硅氧烷、甘油等，提供了肌膚上的涂展、肌膚適應(yīng)性、無(wú)發(fā)粘感的程度、潤(rùn)膚感、緊致感、皺紋松弛改善等效果。制備成固體薄膜后使用時(shí)再溶解，同直接制備成乳化組合物，除了便于運(yùn)輸外，在原料組成及制備工藝上都是不同的。乳劑在成分體系上需要更多的油脂，并需要乳化劑及增稠劑等，這樣才能保持乳劑體系的穩(wěn)定性。且高速均質(zhì)乳化過(guò)程可能會(huì)降低或破壞活性成分的性能。因此，制備一種以透明質(zhì)酸為主要成分的速溶膜，可以填補(bǔ)此種產(chǎn)品的空白。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決以上現(xiàn)有技術(shù)中透明質(zhì)酸薄膜產(chǎn)品中存在的透明質(zhì)酸含量低，乳化組合物產(chǎn)品存在體系成分復(fù)雜、穩(wěn)定性差、運(yùn)輸攜帶不便等問(wèn)題，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N以透明質(zhì)酸及其衍生物為成膜材料的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜(以下簡(jiǎn)稱(chēng)護(hù)理膜或速溶膜)，透明質(zhì)酸同時(shí)也是一種主要的營(yíng)養(yǎng)活性成分，主要用途為用于皮膚美容和健康護(hù)理，可根據(jù)需要加入其它活性成分或藥物賦予速溶膜不同的護(hù)膚功效或治療疾病的作用。本發(fā)明還提供了所述透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜的應(yīng)用。本發(fā)明是通過(guò)以下步驟得到的：為了賦予透明質(zhì)酸一些獨(dú)特的性能，人們往往對(duì)透明質(zhì)酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)改性。乙?；该髻|(zhì)酸是指透明質(zhì)酸雙糖分子結(jié)構(gòu)中的羥基全部或部分被乙?；〈?，除了具有普通透明質(zhì)酸的良好保濕性能外，由于乙?；囊?，改善了透明質(zhì)酸的親脂性，提高了與皮膚的親和性，具有更好的潤(rùn)膚效果，且較低分子量的乙?；该髻|(zhì)酸也更易透過(guò)皮膚角質(zhì)層被吸收。高取代度的乙?；该髻|(zhì)酸還可以在不含乳化劑的情況下，提高油脂性潤(rùn)膚劑的溶解性，同時(shí)避免了大部分乳化劑所具有的細(xì)胞毒性或皮膚刺激性。一種透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，干膜中含有以下重量百分含量的成分：透明質(zhì)酸或其鹽12-36％，乙?；该髻|(zhì)酸或其鹽12-30％，水解透明質(zhì)酸或其鹽12-36％。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，干膜中含有以下重量百分含量的成分：透明質(zhì)酸或其鹽15-30％，乙?；该髻|(zhì)酸或其鹽15-30％，水解透明質(zhì)酸或其鹽15-30％。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，干膜中含有以下重量百分含量的成分：透明質(zhì)酸或其鹽15-20％，乙酰化透明質(zhì)酸或其鹽15-20％，水解透明質(zhì)酸或其鹽20-30％。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，干膜中含有以下重量百分含量的成分：透明質(zhì)酸或其鹽20％，乙酰化透明質(zhì)酸或其鹽20％，水解透明質(zhì)酸或其鹽20％。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，所述水解透明質(zhì)酸或其鹽，為以芽孢桿菌A50CGMCCNO.5744發(fā)酵培養(yǎng)得到的芽孢桿菌透明質(zhì)酸酶對(duì)透明質(zhì)酸或其鹽進(jìn)行降解得到的酶切寡聚透明質(zhì)酸或其鹽。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，乙?；该髻|(zhì)酸或其鹽取代度3.6-3.9，分子量10-100kDa，透明質(zhì)酸或其鹽分子量為200-1500kDa。優(yōu)選乙酰化透明質(zhì)酸或其鹽取代度為3.9，分子量20-80kDa，優(yōu)選20-50kDa，更優(yōu)選50kDa。透明質(zhì)酸或其鹽分子量為200-1000kDa，優(yōu)選200-800kDa，更優(yōu)選600kDa。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜，干膜中還含有保濕劑1％-30％、潤(rùn)膚劑0-20％、除透明質(zhì)酸外的其它活性成分0-20％。透明質(zhì)酸及其衍生物包括但不限于透明質(zhì)酸及其鹽，或水解透明質(zhì)酸及其鹽，或交聯(lián)透明質(zhì)酸及其鹽，或其它透明質(zhì)酸衍生物；上述所述的鹽包括但不限于鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋅鹽、季銨鹽、賴(lài)氨酸鹽等。該速溶膜在需要時(shí)加入潤(rùn)膚劑來(lái)改善速溶膜的滋潤(rùn)度及使用感受，并改善膜的物理性能。潤(rùn)膚劑包括但不限于，天然油脂及衍生物：如橄欖油、杏仁油、霍霍巴油、鱷梨油、乳木果油、茶籽油、葡萄籽油、小麥胚芽油等；合成油脂(酯)及衍生物：如礦物油(白油)、凡士林、棕櫚酸或肉豆蔻酸酯類(lèi)、辛酸/癸酸甘油酯類(lèi)、羊毛脂系列衍生物、硅油系列衍生物、角鯊?fù)榈取Ｔ撍偃苣ぶ羞€含有保濕劑，由甘油、丙二醇、丁二醇等多元醇的一種或多種組合而成，可得到不同透明度的膜，如透明膜、半透明膜或不透明膜。所述的透明質(zhì)酸皮膚護(hù)理膜的制備方法，將透明質(zhì)酸或其鹽、乙酰化透明質(zhì)酸或其鹽和水解透明質(zhì)酸或其鹽用保濕劑充分浸潤(rùn)，邊攪拌邊加入水中，加熱至50℃充分溶解，加入潤(rùn)膚劑及其他活性成分，混合均勻，涂布于不銹鋼板上，厚度0.02-1mm，50℃下干燥成膜。該速溶膜用于皮膚保濕、美白、緊致、抗衰、祛斑、祛痘等美容功效，及抗細(xì)菌/真菌感染、抗過(guò)敏、角質(zhì)軟化、創(chuàng)傷愈合等皮膚健康功效；還可用于毛發(fā)及頭皮護(hù)理。本發(fā)明產(chǎn)品根據(jù)使用方法分為貼膜和非貼膜。貼膜可剪裁成不同形狀，用于面部及身體不同部位，如全面部、下眼瞼部位、鼻翼兩側(cè)部位、唇周部位等；先將貼膜貼于使用部位，然后用適量水或溶液拍敷按摩使貼膜溶解吸收，或先噴涂適量水或溶液，再貼膜并按摩吸收亦可。非貼膜可先在手心或適當(dāng)容器中，用水或溶液將其溶解，然后涂抹于使用部位。本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下有益效果：(1)以透明質(zhì)酸及其衍生物為速溶膜中的主要成分，顯著改善膜的機(jī)械性能，增強(qiáng)柔韌性，兼具成膜劑、增稠劑、皮膚營(yíng)養(yǎng)保濕劑等功能，且透明質(zhì)酸對(duì)于加入的其它活性成分具有促進(jìn)吸收、協(xié)同增效的作用；現(xiàn)有產(chǎn)品通常是用高分子物質(zhì)作為主要成膜材料，普遍存在水溶后在皮膚上黏膩、緊繃、吸收差等問(wèn)題，膚感很差，本發(fā)明由不同分子量透明質(zhì)酸及乙酰化透明質(zhì)酸復(fù)配作為成膜材料，既解決了低分子量透明質(zhì)酸成膜性差的問(wèn)題，又解決了高分子量透明質(zhì)酸黏膩的問(wèn)題，膚感滑爽易吸收；而且溶解速度快，不需要崩解劑；(2)乙?；该髻|(zhì)酸，尤其是取代度>3.5，分子量<100kDa的高乙?；?、低分子量透明質(zhì)酸可以顯著增強(qiáng)透明質(zhì)酸的親脂性和透皮吸收性，因此對(duì)皮膚的親和性和吸附性增強(qiáng)，配合普通透明質(zhì)酸使用，可以顯著改善皮膚的各種老化現(xiàn)象；(3)本發(fā)明產(chǎn)品中含有超小分子的水解透明質(zhì)酸(鈉)，易透皮吸收，具有修復(fù)受損細(xì)胞，清除自由基，提高皮膚彈性，改善皮膚屏障功能等多重生物活性，可以深層護(hù)理皮膚；(4)本發(fā)明產(chǎn)品還在不添加乳化劑的情況下，加入油脂類(lèi)潤(rùn)膚劑，可以提高膜的機(jī)械性能，同時(shí)使產(chǎn)品具有更好的滋潤(rùn)度，進(jìn)一步提高了使用觸感，達(dá)到美容、健康護(hù)理的目的；(5)相比纖維素類(lèi)、聚乙二醇或聚環(huán)氧乙烷、淀粉等成膜材料，透明質(zhì)酸是人體內(nèi)的天然生物分子，安全性高，與皮膚的親和性更好，無(wú)皮膚刺激性；(6)本產(chǎn)品成膜干燥溫度低，最大程度地保留了功能性成分的活性，且有提高活性物穩(wěn)定性的作用；(7)本發(fā)明產(chǎn)品體積小、攜帶方便，形式新穎。附圖說(shuō)明圖1各實(shí)施例的抗皺效果；圖2各實(shí)施例改善皮膚彈性的效果。具體實(shí)施方式為更好地說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，特給出以下實(shí)施例，但本發(fā)明并不僅限于以下實(shí)施例。步驟一：1、試驗(yàn)乙?；该髻|(zhì)酸鈉:取代度優(yōu)選3.5-4.0，分子量?jī)?yōu)選10-100kDa，上表中各實(shí)施例選擇取代度為3.9，分子量50kDa左右。2、膜的制備方法各實(shí)施例分別配制100g溶液。將透明質(zhì)酸鈉、乙?；该髻|(zhì)酸鈉和水解透明質(zhì)酸用甘油充分浸潤(rùn)，邊攪拌邊加入純化水中，加熱至50℃充分溶解，加入甜菜堿及其他成分(需要時(shí))，混合均勻，涂布于不銹鋼板上，厚度0.1mm，50℃下干燥成膜，膜為半透明膜，切割分裝。3、對(duì)比例(乳化組合物)的制備按照實(shí)施例10中透明質(zhì)酸鈉、乙酰化透明質(zhì)酸鈉、水解透明質(zhì)酸鈉和甜菜堿相應(yīng)的量，加入水?dāng)嚢枞芙庾鳛樗?，為了保正乳液的穩(wěn)定性，在水相中再加入適量卡泊姆作為增稠劑。1％乳木果油、3％霍霍巴油及1％PEG-100硬脂酸酯加熱溶解作為油相。油相加入水相中，均質(zhì)，降溫，得對(duì)比例的乳化組合物。4、膜的機(jī)械性能測(cè)試采用萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)，對(duì)各實(shí)施例速溶膜進(jìn)行拉伸測(cè)試，膜寬度裁剪至2.0cm，夾具間距為3.0cm，拉伸速度5mm/min，對(duì)膜材料進(jìn)行縱向拉伸，直至膜斷裂，從儀器上讀取膜的拉伸強(qiáng)度、彈性模量和延長(zhǎng)百分比。耐折度測(cè)試，由同一測(cè)試人員，將各實(shí)施例膜片反復(fù)對(duì)折，直至膜表面出現(xiàn)裂縫，該對(duì)折次數(shù)即為其耐折度。結(jié)果：各實(shí)施例中，實(shí)施例10與其他實(shí)施例相比，還含有乳木果油油脂性潤(rùn)膚劑，增強(qiáng)了膜的柔韌性，對(duì)膜的機(jī)械性能改善最明顯。實(shí)施例2-5之間膜的機(jī)械性能差異不大，僅次于實(shí)施例10。5、溶解時(shí)間測(cè)試在6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加入3mL磷酸緩沖液(pH7.2)，將實(shí)施例1-8的膜裁剪成1cm×1cm的小塊，加入到6孔板的一個(gè)孔中，室溫下以60rpm轉(zhuǎn)速輕微震蕩，并開(kāi)始計(jì)時(shí)，記錄膜片完全溶解的時(shí)間。結(jié)果：本測(cè)試中，實(shí)施例3、4、5、10溶解速度比較快，明顯快于其他實(shí)施例。三種分子量以一定比例復(fù)配時(shí)可以一定程度上促進(jìn)高分子量透明質(zhì)酸的溶解。6、皮膚皺紋和彈性測(cè)試測(cè)試方法：每個(gè)樣品招募受試者10人，樣品(各實(shí)施例中的膜分別剪裁成相同尺寸2cm×2cm，用2ml水溶解)涂抹在眼角和面部，對(duì)比例乳化組合物直接涂抹，每天早晚各一次，持續(xù)4周。分別在使用前和使用4周時(shí)測(cè)試皺紋深度和皮膚彈性。皺紋深度用人體皮膚快速三維成像系統(tǒng)(Primos)對(duì)受試者眼角皺紋深度進(jìn)行拍照并計(jì)算評(píng)估，皮膚彈性用皮膚彈性測(cè)定儀MPA580(Courage+Khazaka公司，德國(guó))測(cè)定面頰部位(蘋(píng)果肌)的彈性變化狀況。皺紋深度計(jì)算方法：皮膚彈性計(jì)算方法：皺紋深度測(cè)試結(jié)果見(jiàn)圖1，皮膚彈性測(cè)試結(jié)果見(jiàn)圖2。7、皮膚滋潤(rùn)度評(píng)判方法：請(qǐng)20名受試者將各實(shí)施例的1cm×1cm方形膜片，分別用1ml純化水溶解后涂于前臂屈側(cè)，評(píng)價(jià)各樣品的吸收速度及干燥后的緊繃感，評(píng)分等級(jí)為1-10，其中10分為最好。結(jié)果：實(shí)施例10中在最優(yōu)組合的基礎(chǔ)上還含有潤(rùn)膚劑，故各項(xiàng)評(píng)分的總分最高，表明皮膚滋潤(rùn)度最好。其次是實(shí)施例2-5對(duì)皮膚的滋潤(rùn)度也明顯優(yōu)于其他實(shí)施例。步驟二：乳化劑對(duì)膜的性能的影響1、試驗(yàn)*乳化劑1為PEG-100硬脂酸酯；乳化劑2為吐溫60。2、細(xì)胞毒性測(cè)試：將實(shí)施例11-13樣品，分別剪裁成3cm×3cm大小，用10ml純化水溶解，0.2um濾膜過(guò)濾除菌。L-929小鼠成纖維細(xì)胞接種于24孔板，37℃培養(yǎng)48h，將樣品溶液加入96孔板中，繼續(xù)培養(yǎng)48h，MTT法檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)增殖率(RGR)。按表1分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)確定細(xì)胞毒性等級(jí)。樣品細(xì)胞毒性反應(yīng)程度不大于2級(jí)時(shí)，認(rèn)為其細(xì)胞毒性可接受。RGR值越小，表明細(xì)胞毒性越大。表1細(xì)胞毒性反應(yīng)分級(jí)(根據(jù)美國(guó)藥典)級(jí)別相對(duì)增殖率/％0≥100180～99250～79330～4940～29結(jié)果：根據(jù)細(xì)胞相對(duì)增殖率數(shù)值，實(shí)施例11和12因含有表面活性劑，雖然細(xì)胞毒性為2級(jí)在可接受范圍，但對(duì)細(xì)胞仍有一定的損傷作用。不含表活的實(shí)施例13無(wú)細(xì)胞毒性，對(duì)細(xì)胞增殖有一定的促進(jìn)作用。實(shí)施例細(xì)胞相對(duì)增殖率/％細(xì)胞毒性等級(jí)實(shí)施例1171.162實(shí)施例1266.462實(shí)施例13104.7702、機(jī)械性能測(cè)試：測(cè)試方法同步驟1。結(jié)果：不含表活的實(shí)施例13的各項(xiàng)機(jī)械性能均與含表活的實(shí)施例11和12相當(dāng)。實(shí)施例11實(shí)施例12實(shí)施例13拉伸強(qiáng)度(MPa)91.4589.7392.47延長(zhǎng)百分比(％)5.45.35.4耐折度(次)504849步驟三：乙?；疕A取代度、分子量對(duì)膜的性能的影響1、試驗(yàn)采用下表中的配方來(lái)制作皮膚護(hù)理膜采用上表中配方，乙?；〈?、分子量采用下表所示來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)。2、皮膚皺紋和彈性測(cè)試：步驟四：透明質(zhì)酸鈉分子量對(duì)膜的性能的影響1、試驗(yàn)采用下表中的配方來(lái)制作皮膚護(hù)理膜采用上表中配方，透明質(zhì)酸鈉分子量采用下表所示來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)。透明質(zhì)酸鈉實(shí)施例20實(shí)施例21實(shí)施例22實(shí)施例23實(shí)施例24實(shí)施例25分子量200kDa400kDa800kDa1000kDa1200kDa1500kDa2、皮膚皺紋和彈性測(cè)試：上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受實(shí)施例的限制，其它任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所做的改變、修飾、組合、替代、簡(jiǎn)化均應(yīng)為等效替換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3