本發(fā)明屬于保健食品
技術(shù)領(lǐng)域：
。更具體地，涉及一種具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：越來越多的醫(yī)學(xué)研究表明，自由基與多種疾病的發(fā)生和惡化有關(guān)，這些疾病包括心血管、胃腸道消化系統(tǒng)、癌癥、糖尿病、神經(jīng)退行性疾病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等，幾乎所有的慢性疾病都與人體內(nèi)累積過多的自由基有密切的聯(lián)系。在健康的生理狀態(tài)下，人體內(nèi)的自由基處在一種產(chǎn)生和清除的平衡狀態(tài)，然而隨著人們生活節(jié)奏的加快，生活壓力的加大，各種誘導(dǎo)自由基產(chǎn)生的外因和內(nèi)因不斷增多，導(dǎo)致體內(nèi)積累過量的自由基，危害人體健康。高血脂癥是指血液中的總膽固醇，甘油三脂，低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇等脂質(zhì)成分含量異常超出正常值。高血脂癥是引起冠心病、高血壓、動脈硬化等的直接原因，醫(yī)學(xué)專家稱其為導(dǎo)致心腦血管疾病的“導(dǎo)火線”。因此，高血脂癥、高血糖癥、高血壓癥并稱“三高”，對人體的危害非常大。隨著人們生活水平的提高，人們膳食營養(yǎng)成分過盛，高糖、高動物脂肪的大量攝入，加上缺乏運動、抽煙、大量飲酒等不健康的生活方式，高脂血癥的發(fā)生率不斷上升。隨著現(xiàn)代人生活水平的提高和保健意識的加強，通過飲食外攝入一定量的保健食品來清除過多自由基和預(yù)防高脂血癥來維持身體機能的健康成為了現(xiàn)代社會人群的一大訴求。茶葉富含多酚類、多糖類、生物堿類、維生素C類、維生素P類和維生素PP類，以及泛酸、肌醇、葉酸和二硫辛酸等，具有較好的保健作用。但是，效果單一且緩慢不明顯。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是以從紅茶和從紅茶中提取的天然產(chǎn)物為原料，提供一種具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物。本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：一種具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物，包含質(zhì)量比為5～8：2～4：1的紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素。具體地，上述紅茶復(fù)合物是以紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素為原料，經(jīng)烘干、滅菌后裝入膠囊獲得。優(yōu)選地，所述紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素的質(zhì)量比為6：3：1。另外，優(yōu)選地，所述紅茶超微粉是由紅茶經(jīng)過干燥、粉碎、過篩后，再進(jìn)行超微粉碎獲得。優(yōu)選地，所述干燥是40～60℃干燥。更優(yōu)選地，所述干燥是40℃干燥。優(yōu)選地，所述過篩是過30～300目篩。更優(yōu)選地，所述過篩是過40～200目篩。最優(yōu)選地，所述過篩是過40目篩。優(yōu)選地，所述紅茶水溶性提取物是通過如下方法制得：按照質(zhì)量體積比依次為1：8～12、1：4～6、1：4～6的茶水比，將紅茶分三次在沸蒸餾水中分別浸提5～15min，趁熱抽濾，合并浸提液，進(jìn)行真空濃縮，濃縮液冷淡干燥。更優(yōu)選地，所述紅茶水溶性提取物是通過如下方法制得：按照質(zhì)量體積比依次為1：10、1：5、1：5的茶水比，將紅茶分三次在沸蒸餾水中分別浸提10min，趁熱抽濾，合并浸提液，進(jìn)行真空濃縮，濃縮液冷淡干燥。優(yōu)選地，本發(fā)明所用紅茶為紅條茶。更優(yōu)選地，所述紅茶為英紅九號紅條茶。本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明提供了一種具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物，具體是一種膠囊產(chǎn)品，采用英紅九號紅條茶超微粉、英紅九號紅茶水溶性提取物和茶黃素復(fù)合物為原料，按照合適的比例進(jìn)行配伍，經(jīng)烘干、滅菌后裝入膠囊，獲得具有抗氧化和降血脂功效的紅茶膠囊產(chǎn)品，其中茶黃素含量高達(dá)5.39％。本發(fā)明的配方和制備工藝制備得到的紅茶復(fù)合物，顯著提高了產(chǎn)品的抗氧化和降血脂功效，具有很好的推廣使用前景。附圖說明圖1為制備具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物的工藝流程圖。具體實施方式以下結(jié)合說明書附圖和具體實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本
技術(shù)領(lǐng)域：
常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。除非特別說明，本發(fā)明所用試劑和材料均為市購。實施例1產(chǎn)品制備工藝1、紅茶超微粉取英紅九號紅條茶，經(jīng)過40℃干燥、植物粉碎機粉碎、過標(biāo)準(zhǔn)40目篩后，再進(jìn)行超微粉碎，得到紅茶超微粉。2、紅茶水溶性提取物按照質(zhì)量體積比依次為1：10、1：5、1：5的茶水比，將英紅九號紅條茶分三次在沸蒸餾水中分別浸提10min，趁熱抽濾，合并浸提液，進(jìn)行真空濃縮，濃縮液冷淡干燥，得到紅茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物按照附圖1所示的工藝流程，按照紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素的質(zhì)量比為6：3：1的比例，將三者烘干、滅菌后裝入膠囊。實施例2產(chǎn)品制備工藝1、紅茶超微粉取英紅九號紅條茶，經(jīng)過50℃干燥、植物粉碎機粉碎、過標(biāo)準(zhǔn)300目篩后，再進(jìn)行超微粉碎，得到紅茶超微粉。2、紅茶水溶性提取物按照質(zhì)量體積比依次為1：8、1：4、1：4的茶水比，將英紅九號紅條茶分三次在沸蒸餾水中分別浸提15min，趁熱抽濾，合并浸提液，進(jìn)行真空濃縮，濃縮液冷淡干燥，得到紅茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物按照附圖1所示的工藝流程，按照紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素的質(zhì)量比為5：2：1的比例，將三者烘干、滅菌后裝入膠囊。實施例3產(chǎn)品制備工藝1、紅茶超微粉取英紅九號紅條茶，經(jīng)過60℃干燥、植物粉碎機粉碎、過標(biāo)準(zhǔn)30目篩后，再進(jìn)行超微粉碎，得到紅茶超微粉。2、紅茶水溶性提取物按照質(zhì)量體積比依次為1：12、1：6、1：6的茶水比，將英紅九號紅條茶分三次在沸蒸餾水中分別浸提5min，趁熱抽濾，合并浸提液，進(jìn)行真空濃縮，濃縮液冷淡干燥，得到紅茶水溶性提取物。3、具有抗氧化和輔助降血脂功效的紅茶復(fù)合物按照附圖1所示的工藝流程，按照紅茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素的質(zhì)量比為8：4：1的比例，將三者烘干、滅菌后裝入膠囊。實施例4紅茶水溶性提取物和茶黃素的小鼠體內(nèi)抗氧化作用1材料與方法1.1材料與試劑英紅九號紅茶水溶性提取物自制(實施例1)。茶黃素復(fù)合物(TFs)購自杭州英仕利生物科技有限公司。MDA、SOD、GSH-Px檢測試劑盒購自南京建成生物研究所。其他試劑為分析純。1.2小鼠飼養(yǎng)本部分動物實驗在浙江大學(xué)動物實驗中心完成。購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司的昆明小鼠(重量18-22g)分成6組，分別標(biāo)記對照組，A組，B組，C組，D組，E組，每組分成高劑量，中劑量，低劑量各10只，以每只小鼠重20g計算。每組的高劑量組小鼠灌胃的劑量為0.5mL，濃度為2g/kg；中劑量組灌胃劑量為0.5mL，濃度為1g/kg；低劑量組灌胃劑量為0.5mL，濃度為0.5g/kg；對照組不灌胃，灌胃組每天灌胃，連續(xù)灌胃一個月。具體算法：高劑量：0.04g/只，共10只，共0.4g，溶解到5mL雙蒸水中，0.5mL/只；中劑量：0.02g/只，共10只，共0.2g，溶解到5mL雙蒸水中，0.5mL/只；低劑量：0.01g/只，共10只，共0.1g，溶解到5mL雙蒸水中，0.5mL/只。1.3處理方法取灌胃到期的小鼠，首先用乙醚麻醉，然后摘眼球取血，每只小鼠平均取得1.5mL血，然后4000轉(zhuǎn)離心5min，取上清，得到小鼠血清。取血后的小鼠斷頸處死后取部分肝臟放入10mL離心管中，同時加入9倍肝臟重量的冷生理鹽水稀釋，然后在組織勻漿儀上勻漿，離心，4000轉(zhuǎn)/10min，取上清，得到10％肝臟勻漿。檢測每只小鼠肝臟勻漿的蛋白濃度。上述工作做好后，檢測小鼠血清和肝臟中GSH-Px(需要當(dāng)天取，當(dāng)天測試)，SOD，MDA的含量。2結(jié)果與分析2.1小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表1小鼠血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表1所示為小鼠灌胃英紅九號紅茶提取物和TFs后血清中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量變化趨勢。結(jié)果表明，給藥組SOD和GSH-Px活性增加與對照組相比都達(dá)到了極顯著差異水平(p<0.01)，英紅九號紅茶提取物和TFs處理的MDA含量下降與對照組相比也有所下降，尤其是TFs作用最明顯。這也說明，英紅九號紅茶提取物和TFs能顯著提高小鼠血清中的抗氧化物質(zhì)SOD、GSH-Px的活性，以增強機體的抗氧化能力，減少機體損傷。2.2小鼠肝臟中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表2小鼠肝臟SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表2所示為小鼠灌胃英紅九號紅茶提取物和TFs后肝臟中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量變化趨勢。結(jié)果表明，給藥組SOD和GSH-Px活性增加與對照組相比都達(dá)到了極顯著差異水平(p<0.01)，與給藥后血清中MDA結(jié)果不同的是，英紅九號紅茶提取物和TFs處理后小鼠肝臟中的MDA含量下降與對照組相比也都有所下降。這也說明，英紅九號紅茶提取物和TFs都能顯著提高小鼠肝臟中的抗氧化物質(zhì)SOD、GSH-Px的活性，降低肝臟中脂質(zhì)過氧化程度，以增強機體的抗氧化能力，減少機體損傷。實施例5紅茶水溶性提取物對食蟹猴體內(nèi)抗氧化與降血脂的作用1材料與方法1.1材料以食蟹猴為試驗載體，以英紅九號紅茶為原料，按照人類飲茶習(xí)慣與飲茶量，飼喂食蟹猴四周后，考察食蟹猴體內(nèi)抗氧化與輔助降血脂的功能。本實驗遵守廣州寶瑞萊生物技術(shù)有限公司的實驗動物倫理委員會規(guī)定，并得到實驗動物倫理委員會的審批(審批代號BRL012-001)。1.2動物實驗1.2.1實驗猴種屬：食蟹猴性別：不限體重范圍(馴化開始時)：不低于7kg年齡(馴化開始時)：7-12歲原產(chǎn)地：中國使用動物數(shù)量：共39頭動物選擇的理由：廣州寶瑞萊生物技術(shù)有限公司具有豐富的食蟹猴資源及生物學(xué)特性數(shù)據(jù)，且食蟹猴生理特性符合本實驗的研究需要1.2.2飼養(yǎng)條件猴籠材質(zhì)：不銹鋼猴籠大?。悍蟄SDA標(biāo)準(zhǔn)，71cm(D)×62cm(W)×79cm(H)每籠飼養(yǎng)的猴數(shù)量：1頭飼料：每日上午的8時到10時30分之間，下午16時到17時30分之間給予顆粒飼料150g，次日上午8時到10時之間回收剩余的飼料飲水：利用自動給水裝置，自由飲水清潔方法：每日用水清洗動物室內(nèi)及猴籠1.3處理方法1.3.1供試品配制劑量組英紅九號紅茶低劑量1g干茶加入1000C純凈水200mL浸泡10分中劑量2g干茶加入1000C純凈水200mL浸泡10分高劑量4g干茶加入1000C純凈水200mL浸泡10分1.3.2給予方法(1)實驗組給予量：100mL/只/次給予頻率：6次/日，分別于早、中、晚各兩次給予周期：4周(2)對照組給予量：100mL/只/次的量給予純凈水給予頻率：6次/日，分別于早、中、晚各兩次給予周期：4周1.3.3檢測指標(biāo)取食蟹猴血液，檢測血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)等含量變化，并計算分析獲得動脈粥樣指數(shù)(AI)。2結(jié)果與分析2.1食蟹猴體重的變化表3食蟹猴喂食4周后體重下降值(kg)由表3可知，食蟹猴經(jīng)過飼喂4周后體重都會下降，對照組體重下降最少為0.75kg，喂食茶樣處理組體重下降均>0.75kg，所有處理中以喂食高劑量英紅九號紅茶體重下降最大2.26kg，最低的為英紅九號紅茶低劑量組，體重下降僅略高于對照組(0.79kg)，隨著劑量的增加體重下降增大。2.2食蟹猴血液中SOD、CAT、POD、GSH-PX活性和MDA含量表4食蟹猴血液中SOD和CAT含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表5食蟹猴血液中POD和GSH-PX含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。由表5可知，喂食英紅九號紅茶后，食蟹猴血液中POD酶活性變化規(guī)律不明顯，高劑量和低劑量組有下降的趨勢；英紅九號紅茶對血液中GSH-PX活性影響表現(xiàn)為低劑量處理時效果最佳。表6食蟹猴血液中MDA含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表6是喂食英紅九號紅茶后，食蟹猴體內(nèi)丙二醛MDA含量的變化，在高劑量和低劑量處理時，MDA含量的下降，中劑量時則有所上升。由表6可知，以英紅九號紅茶喂食食蟹猴4周后，猴體內(nèi)血液中SOD酶活性沒有升高，略有下降，但與對照相比未達(dá)顯著差異水平，這也說明英紅九號紅茶對食蟹猴血液中SOD酶活性影響不大；中高劑量茶樣卻導(dǎo)致了血液中CAT酶活性的升高。2.3食蟹猴血液中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量和AI指數(shù)的變化表7食蟹猴血液TC、HDL-C、LDL-C、TG和AI指數(shù)的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。喂食食蟹猴英紅九號紅茶4周后檢測猴血液中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量變化，根據(jù)以下公式計算分析獲得動脈粥樣指數(shù)(AI)：動脈硬化指數(shù)(AI)＝[總膽固醇(TC)-高密度脂蛋白(HDL-C)]÷高密度脂蛋白(HDL-C)。由表7可知，英紅九號紅茶處理都降低了食蟹猴血液中的總膽固醇TC和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量，其中都以高劑量處理效果最顯著；英紅九號紅茶對食蟹猴血液中甘油三酯TG和高密度脂蛋白HDL-C含量的影響較??；英紅九號紅茶高劑量組顯著降低了食蟹猴血液動脈硬化指數(shù)AI。實施例6本發(fā)明英紅九號紅茶復(fù)合物體內(nèi)抗氧化與降血脂作用研究1材料與方法1.1材料與試劑英紅九號紅茶超微粉，英紅九號紅茶水溶性提取物，茶黃素復(fù)合物(TFs)購自杭州英仕利生物科技有限公司。英紅九號紅茶復(fù)合物(即英紅九號紅茶復(fù)配物：如實施例1所述，由英紅九號紅條茶超微粉、紅茶水溶性提取物和茶黃素復(fù)合物為原料，按照6:3:1的重量比例進(jìn)行配伍所得)。試劑：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)檢測試劑盒購自南京建成生物研究所，其他試劑為分析純。1.2小鼠分組與給藥本部分動物實驗在浙江大學(xué)動物實驗中心完成。購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司的昆明小鼠(重量18-22g)分成5組，分別標(biāo)記為：A組：正常對照組；B組：英紅九號紅茶超微粉組；C組：英紅九號紅茶水溶性提取物組；D組：茶黃素復(fù)合物組；E組：英紅九號紅茶復(fù)配物組，每組各10只小鼠。給藥方式：以每只小鼠重20g，每天進(jìn)食量為3g來計算，B組的劑量為25g/kg·BW，即飼料中添加16.67％的英紅九號紅茶超微粉；C組的劑量為10g/kg·BW，即飼料中添加6.67％的英紅九號紅茶水溶性提取物；D組的劑量為10g/kg·BW，即飼料中添加6.67％的茶黃素復(fù)合物；E組的劑量為10g/kg·BW，即飼料中添加6.67％的英紅九號紅茶復(fù)配物，A組的飼料為普通維持飼料。小鼠自由取食，連續(xù)進(jìn)食一個月。1.3處理方法取給藥到期的小鼠，首先用乙醚麻醉，然后摘眼球取血，每只小鼠平均取得1.5mL血，然后4000轉(zhuǎn)離心5min，取上清，得到小鼠血清，置于-80℃冰箱保存。血清用于測定小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、GSH-Px(需要當(dāng)天取，當(dāng)天測試)，SOD，MDA的含量。取血后的小鼠斷頸處死后取部分肝臟放入10mL離心管中，同時加入9倍肝臟重量的冷生理鹽水稀釋，然后在組織勻漿儀上勻漿，離心，4000轉(zhuǎn)/10min，取上清，得到10％肝臟勻漿。檢測每只小鼠肝臟勻漿的蛋白濃度。上述工作做好后，檢測小鼠肝臟中GSH-Px(需要當(dāng)天取，當(dāng)天測試)，SOD，MDA的含量。2結(jié)果與分析2.1小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表8小鼠血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表8所示為小鼠進(jìn)食含英紅九號紅茶超微粉、英紅九號紅茶提取物、茶黃素復(fù)合物及英紅九號紅茶復(fù)配物飼料后血清中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量變化趨勢。結(jié)果表明，給藥組SOD和GSH-Px活性增加與對照組相比都達(dá)到了極顯著差異水平(p<0.01)，其中英紅九號紅茶復(fù)配物處理組的SOD和GSH-Px活性最高。英紅九號紅茶超微粉組和英紅九號紅茶復(fù)配物處理組的MDA含量下降與對照組相比也有所下降，但沒達(dá)到顯著差異。從以上結(jié)果來看，英紅九號紅茶復(fù)配物較之單一的紅茶成分更能顯著提高小鼠血清中的抗氧化物質(zhì)SOD、GSH-Px的活性，能更好地增強機體的抗氧化能力，減少機體損傷。2.2小鼠肝臟中SOD、GSH-Px活性和MDA含量表9小鼠肝臟SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。表9所示為小鼠進(jìn)食含英紅九號紅茶超微粉、英紅九號紅茶提取物、茶黃素復(fù)合物及英紅九號紅茶復(fù)配物飼料后小鼠肝臟中SOD、GSH-Px活性及MDA的含量變化趨勢。實驗結(jié)果表明，茶黃素復(fù)合物組和英紅九號紅茶復(fù)配物組的SOD活性明顯增加，與對照組相比均達(dá)到極顯著差異水平(p<0.01)；茶黃素復(fù)合物組的GSH-Px活性有所增加，達(dá)到顯著差異(p<0.05)，英紅九號紅茶復(fù)配物組的GSH-Px活性明顯地增加，達(dá)到了極顯著差異水平(p<0.01)。各給藥組肝臟中的MDA含量與正常對照組相比沒有顯著差異。以上結(jié)果表明，茶黃素復(fù)合物和英紅九號紅茶復(fù)配物都能顯著提高小鼠肝臟中的抗氧化物質(zhì)SOD、GSH-Px的活性，以增強機體的抗氧化能力，減少機體損傷。2.3小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量和AI指數(shù)的變化表10小鼠血清中TC、HDL-C、LDL-C、TG和AI指數(shù)的變化注：*p＜0.05，**p＜0.01，以正常組為對照。小鼠進(jìn)食含英紅九號紅茶超微粉、英紅九號紅茶提取物、茶黃素復(fù)合物及英紅九號紅茶復(fù)配物飼料4周后，測定血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量變化，根據(jù)公式動脈硬化指數(shù)(AI)＝[總膽固醇(TC)-高密度脂蛋白(HDL-C)]÷高密度脂蛋白(HDL-C)計算分析獲得動脈粥樣指數(shù)(AI)。由上表可知，各給藥組對小鼠血清TC和TG的含量影響不大，英紅九號紅茶提取物組和茶黃素復(fù)合物組的HDL-C水平明顯增加，與對照組相比達(dá)到顯著差異(p<0.05)，紅九號紅茶復(fù)配物組的HDL-C水平也明顯增加，并達(dá)到了極顯著差異(p<0.01)；各給藥組的LDL-C水平均有所下降，但達(dá)不到顯著差異。從AI指數(shù)來看，各給藥組的AI指數(shù)與對照組相比均有下降，其中紅九號紅茶復(fù)配物組的AI指數(shù)最低?？梢?，紅九號紅茶復(fù)配物可明顯地降低小鼠血液動脈硬化指數(shù)AI，具有良好的降血脂功效。當(dāng)前第1頁1 2 3