本發(fā)明涉及一種包含魚精蛋白水解物與萜烯醇的組合的具有抗真菌活性的組合物。該抗真菌活性組合物可以在用于進(jìn)行真菌感染癥的預(yù)防、治療的功能性食品、化妝品及藥品或準(zhǔn)醫(yī)藥品等中廣泛地利用。
背景技術(shù)：
：酵母及絲狀菌為真核生物，與屬于原核生物的細(xì)菌不同，被稱作真菌。這些真菌中的某種對(duì)于人顯示出病原性，成為真菌感染癥的病原菌。已知在真菌當(dāng)中，念珠菌屬的真菌在人的消化管中廣泛地發(fā)育，通常不顯示出病原性，然而隨著宿主機(jī)體防御能力的降低，會(huì)引起各種各樣的感染癥。特別是，口腔及咽、食道念珠菌癥是隨著唾液分泌的降低、糖尿病、抗生素或免疫抑制劑的長(zhǎng)期給藥、口腔衛(wèi)生管理的降低等而常發(fā)的疾病。以往，對(duì)于作為內(nèi)用抗真菌劑用于真菌癥的治療中的抗真菌劑，在臨床中使用多烯系的兩性霉素b、氟吡啶系的氟胞嘧啶、咪唑系(唑系)的咪康唑及三唑系(唑系)的氟康唑、唑系的伊曲康唑等。成為這些抗真菌劑的對(duì)象的病原真菌的種類和藥劑感受性隨著各個(gè)抗真菌劑而不同，對(duì)于這些成為對(duì)象的病原真菌的種類，例如念珠菌屬、隱球菌屬、帚狀曲霉屬、毛癬菌屬、馬拉色霉菌屬、球孢子菌屬等為代表性的種類。但是，在使用了這些抗真菌劑的治療中，雖然暫時(shí)性地治愈由真菌造成的感染，然而會(huì)有大多數(shù)可以看到復(fù)發(fā)、隨著長(zhǎng)期使用而出現(xiàn)抗藥菌等問題，因此希望引入新的治療法。另外，在老年人、特別是假牙佩戴者中可以看到的口腔念珠菌癥等是只要引起易感染性的原因沒有被去除、則即使暫時(shí)有療效也會(huì)復(fù)發(fā)的疾病，需要開發(fā)出替代抗真菌劑的口內(nèi)清洗劑或功能性食品等新的預(yù)防法(非專利文獻(xiàn)1)。另一方面，魚精蛋白是從魚類的精巣(魚白)得到的具有抗菌活性的堿性蛋白質(zhì)，是來自于天然物的食品防腐劑(專利文獻(xiàn)1)。成為魚精蛋白的原料的魚白被作為火鍋類食物用的食材食用等，自古以來就有食用經(jīng)驗(yàn)，實(shí)施過對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)、對(duì)大鼠的亞慢性毒性試驗(yàn)等(非專利文獻(xiàn)2)，其安全性得到了確認(rèn)，由于此等原因，魚精蛋白是在安全方面優(yōu)異的抗菌劑(非專利文獻(xiàn)3)。已知魚精蛋白在微生物當(dāng)中，對(duì)芽孢桿菌屬、乳酸菌等革蘭氏陽性細(xì)菌也顯示出特別強(qiáng)的抗菌活性(非專利文獻(xiàn)4)，對(duì)酵母、絲狀菌的抗真菌活性非常弱(非專利文獻(xiàn)5)。為了提高魚精蛋白的抗真菌活性，已知有將魚精蛋白水解的方法，報(bào)告過其水解物中所含的以下的(1)～(3)的各肽或其鹽具有抗真菌活性(專利文獻(xiàn)1)。(1)由以ileargargargargproargarg表示的序列編號(hào)：1的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。(2)由以serargargargargargargglyglyargargargarg表示的序列編號(hào)：2的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。(3)由以valserargargargargargargglyglyargargargarg表示的序列編號(hào)：3的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。另一方面，通過將魚精蛋白水解而得的包含特定的氨基酸序列的肽雖然在生物體外顯示出高的抗菌活性，然而在生物體內(nèi)的特別是高鹽濃度下可以看到活性降低的趨勢(shì)(非專利文獻(xiàn)1)。因而，為了提高生物體內(nèi)的抗菌活性，報(bào)告過合成肽而進(jìn)行環(huán)狀化的方法(非專利文獻(xiàn)6)。另一方面，已知某種植物精油或精油成分會(huì)提高其他的藥劑的皮膚滲透性。報(bào)告過若為了提高以往的抗真菌劑的治療效果而將抗真菌劑與具有抗真菌活性的精油或萜烯醇并用，則藥劑的皮膚透過性提高，其血中濃度明顯升高(專利文獻(xiàn)2)。此處所說的所謂萜烯醇，是指1個(gè)分子中的碳原子數(shù)為10個(gè)的單萜烯醇、和15個(gè)的倍半萜烯醇。例如，玫瑰草油及其主成分的香葉醇分別明顯地提高向皮膚給藥的抗真菌劑特比萘芬的血中濃度，另外，對(duì)于薰衣草油及其主成分的里那醇、廣藿香油及其主成分的廣藿香醇、釣樟油及其副成分的橙花叔醇，也已知雖然程度各自不同然而也具有相同的效果(專利文獻(xiàn)2)。皮膚或粘膜的念珠菌癥、特別是老年人的口腔念珠菌癥、以及女性的陰道念珠菌癥各自的發(fā)病頻率非常高，一般是通過使抗真菌藥直接接觸患部來進(jìn)行治療，然而屬于難治病，且容易反復(fù)發(fā)作。由此，為了抑制復(fù)發(fā)而長(zhǎng)期使用藥劑，其結(jié)果是，產(chǎn)生肝功能障礙等副作用，或出現(xiàn)抗藥菌的風(fēng)險(xiǎn)變大?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1：日本專利第4520477號(hào)說明書專利文獻(xiàn)2：日本特開2010－126532號(hào)公報(bào)非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)1：安部茂：小鼠口腔念珠菌癥模型的開發(fā)及其應(yīng)用(マウス口腔カンジダ癥モデルの開発とその応用)，真菌志45，227－231(2004)非專利文獻(xiàn)2：多田幸恵等：天然防腐劑魚白蛋白對(duì)大鼠的亞慢性毒性試驗(yàn)，東京都立衛(wèi)生研究所研究年報(bào)，(天然保存料しらこたん白のラットによる亜慢性毒性試験,東京都立衛(wèi)生研究所研究年報(bào))49，267－276(1998)非專利文獻(xiàn)3：庵原啟司，根本erika：魚白蛋白(魚精蛋白)在食品中的利用(根本えりか：しらこたん白(プロタミン)の食品への利用)，月刊foodchemical4月號(hào)，24－32(2006)非專利文獻(xiàn)4：bulletinofthejapanesesocietyofscientificfisheries，50，1715(1984)非專利文獻(xiàn)5：bulletinofthejapanesesocietyofscientificfisheries，52，1061(1986)非專利文獻(xiàn)6：第57次日本醫(yī)真菌學(xué)會(huì)總會(huì)·學(xué)術(shù)集會(huì)抄錄集(第57回日本醫(yī)真菌學(xué)會(huì)総會(huì)·學(xué)術(shù)集會(huì)抄録集)，98(2013)技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的問題利用了通過將魚精蛋白水解而得的肽或精油成分的治療出現(xiàn)副作用或抗藥菌的危險(xiǎn)低，這一點(diǎn)是優(yōu)勢(shì)，然而如此一來這樣的來自于天然的成分會(huì)有抗真菌活性低于以被化學(xué)合成的非肽化合物作為有效成分的抗真菌劑的情況，此種情況下，需要使抗真菌活性進(jìn)一步增強(qiáng)。另外，如非專利文獻(xiàn)6中公開所示，用于確保生物體內(nèi)的高鹽濃度下的活性的肽的環(huán)狀化會(huì)在被環(huán)狀化了的肽的合成中增加成本，因此是不適于壓縮成本的抗真菌劑的產(chǎn)業(yè)化的方法。本發(fā)明的目的在于，提供一種作為有效成分包含魚精蛋白水解物的具有抗真菌活性的組合物，其抗真菌活性得到進(jìn)一步增強(qiáng)，并且壓縮了成本，適于產(chǎn)業(yè)化。用于解決問題的方法本發(fā)明的具有抗真菌活性的組合物(抗真菌組合物)的特征在于，作為有效成分包含魚精蛋白水解物和萜烯醇。本發(fā)明還包含以下的各方式。(1)一種抗真菌劑，其包含上述的抗真菌組合物。(2)一種食品，其包含上述的抗真菌組合物。(3)一種藥品或準(zhǔn)醫(yī)藥品，其包含上述的抗真菌組合物。(4)一種化妝品，其包含上述的抗真菌組合物。(5)一種方法，其作為用于獲得抗真菌活性的有效成分在食品或化妝品的制造中使用上述的抗真菌組合物。(6)一種方法，其作為用于獲得抗真菌活性的有效成分在藥品或準(zhǔn)醫(yī)藥品的制造中使用上述的抗真菌組合物。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明，利用因魚精蛋白的水解而得的魚精蛋白水解物與萜烯醇的協(xié)同作用，抗真菌活性得到明顯的提高，可以提供沒有抗藥菌的出現(xiàn)或副作用的問題、并且安全性極高的具有抗真菌活性的組合物。作為抗真菌組合物，可以考慮作為具有抗真菌效果的口腔護(hù)理材料(含漱劑、牙膏、假牙清洗劑等)、針對(duì)包括褥瘡、陰道念珠菌癥或食道念珠菌癥等的真菌感染癥的藥品(抗真菌劑)、準(zhǔn)醫(yī)藥品(漱口劑、口腔清洗劑、藥用牙膏等)、化妝品(軟膏、液劑、懸浮劑、乳劑、氣溶膠、泡沫劑、顆粒劑、粉末劑、片劑、膠囊等)的利用?？谇荒钪榫Y是尤其會(huì)在老年人、口腔干燥癥患者中發(fā)作的癥狀，在今后的老齡化社會(huì)中的需求很大。另外，不僅可以有效地應(yīng)用于口腔念珠菌癥，還可以有效地應(yīng)用于褥瘡、陰道念珠菌癥或食道念珠菌癥等念珠菌癥、馬拉色霉菌癥、以及隱球菌癥等其他的真菌感染癥，可以實(shí)現(xiàn)由此帶來的病狀的改善、治療、以及感染的預(yù)防。另外，由于魚精蛋白被收錄于食品防腐劑的現(xiàn)有添加物表格中，因此不僅可以作為藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品利用，還可以作為口內(nèi)清洗劑或健康食品、特定保健用食品等功能性食品利用，對(duì)于患者而言也有容易獲取、容易使用的優(yōu)點(diǎn)。附圖說明圖1是表示魚精蛋白水解物與檜木醇的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖2是表示魚精蛋白水解物與4－萜烯醇的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖3是表示魚精蛋白水解物與香葉醇的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖4是表示魚精蛋白水解物與薄荷醇的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖5是表示魚精蛋白水解物與肉桂醛的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖6是表示魚精蛋白水解物與癸酸的并用下的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖7是表示魚精蛋白水解物單獨(dú)使用的體外評(píng)價(jià)中的抗菌活性的相對(duì)值的圖。圖8是表示魚精蛋白水解物與檜木醇的并用下的體內(nèi)評(píng)價(jià)中的舌評(píng)分的值的圖(＊：steeldwass的方法中p＜0.05)。圖9是表示由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果的圖。圖10是表示由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果的圖。圖11是表示各種魚精蛋白分解物的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果的圖。圖12是表示由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的舌組織切片的光學(xué)顯微鏡觀察的結(jié)果的圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明人等為了解決上述的來自于天然的成分所存在的問題，發(fā)現(xiàn)通過將對(duì)魚精蛋白進(jìn)行水解而得到的魚精蛋白水解物與萜烯醇并用，可以明顯地增強(qiáng)抗真菌活性，其增強(qiáng)效果是在由單純的并用帶來的相加作用以上的協(xié)同作用，從而形成了本發(fā)明。已知魚精蛋白水解物和萜烯醇分別可以單獨(dú)地發(fā)揮抗念珠菌作用，然而迄今為止沒有報(bào)告過若將它們一起使用則會(huì)協(xié)同地提高抗真菌活性的見解。一般而言，對(duì)微生物并用抗菌物質(zhì)時(shí)的協(xié)同作用的定義是指顯示出明顯大于2種藥的獨(dú)自作用之和的作用的情況。作為評(píng)價(jià)有無協(xié)同作用的基準(zhǔn)，可以舉出由2種藥的mic值求出的fic系數(shù)(fractionalinhibitoryconcentrationindex)作為一例。fic系數(shù)可以利用以下的式(1)求出。fic系數(shù)的求法：fic系數(shù)＝a1/a0+b1/b0····(1)a0：a藥單獨(dú)使用的mica1：a藥、b藥并用時(shí)的a藥的micb0：b藥單獨(dú)使用的micb1：a藥、b藥并用時(shí)的b藥的mic基于fic系數(shù)的并用效果的評(píng)價(jià)：fic≤0.5：協(xié)同作用0.5＜fic≤1.0：相加作用1.0＜fic≤2.0：無關(guān)2.0＜fic：拮抗作用此外，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)，由魚精蛋白水解物與萜烯醇的并用帶來的抗真菌活性增強(qiáng)的協(xié)同作用不僅在以往的體外評(píng)價(jià)體系中得到發(fā)揮，而且在使用了口腔念珠菌癥模型小鼠的生物體模型中也得到發(fā)揮，從而完成了本發(fā)明。即發(fā)現(xiàn)，利用若使小鼠出現(xiàn)口腔念珠菌癥則可以在舌中觀察到白苔(念珠菌的菌絲)的現(xiàn)象，并用魚精蛋白水解物和萜烯醇而經(jīng)口給藥，由此可以明顯地抑制白苔在小鼠舌上的形成，可以協(xié)同地增強(qiáng)抗真菌活性。另外，本發(fā)明人等確認(rèn)，魚精蛋白水解物具有對(duì)于馬拉色霉菌屬的真菌的抗菌活性。在上述的協(xié)同作用的研究時(shí)，首先，利用體外評(píng)價(jià)體系篩選了與魚精蛋白水解物并用的候選材料的精油類。其結(jié)果是確認(rèn)，通過將魚精蛋白水解物與檜木醇、4－萜烯醇、香葉醇、薄荷醇等萜烯醇類并用，可以協(xié)同地增強(qiáng)抗真菌活性。另一方面，若是與肉桂醛、癸酸等不是分類為萜烯醇的精油類并用，則看不到抗真菌活性的增強(qiáng)。因而，利用使用了口腔念珠菌癥模型小鼠的生物體模型評(píng)價(jià)了魚精蛋白水解物與檜木醇的并用，其結(jié)果是確認(rèn)，可以看到由協(xié)同作用造成的舌評(píng)分的明顯改善，即使在生物體內(nèi)的高鹽濃度下也可以維持協(xié)同活性。根據(jù)以上內(nèi)容可以發(fā)現(xiàn)，魚精蛋白水解物與萜烯醇的并用即使是與以往的使用肽組合物、精油類時(shí)的使用量相同程度或遠(yuǎn)低于其的用量，也可以增強(qiáng)抗真菌活性，因此本發(fā)明人等認(rèn)為在實(shí)用方面與以往技術(shù)相比具有進(jìn)步性，從而形成了本發(fā)明。下面，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)記述。作為魚精蛋白水解物的原料的魚精蛋白是在大馬哈魚、鯡魚、鱒魚等魚類的精子核中結(jié)合有脫氧核糖核酸的作為核魚精蛋白存在的強(qiáng)堿性蛋白質(zhì)，根據(jù)原料的不同，例如被稱作大馬哈魚精蛋白(大馬哈魚)、鯡魚精蛋白(鯡魚)等，結(jié)構(gòu)分別略有不同，然而任意一種魚精蛋白均可以使用。作為魚精蛋白的水解方法，可以使用酸、堿、蛋白質(zhì)分解酶，或者也可以利用基于它們的組合的分解，優(yōu)選使用蛋白質(zhì)分解酶。更具體而言如下所示。在利用酸或堿的水解中，在強(qiáng)酸或強(qiáng)堿下對(duì)魚精蛋白在可以獲得作為目標(biāo)的大小(長(zhǎng)度)的肽的條件下進(jìn)行加熱處理后，進(jìn)行中和，由此可以得到作為目標(biāo)的大小(長(zhǎng)度)的肽。向魚精蛋白中加入去離子水，加入氫氧化鈉或鹽酸而將ph調(diào)整為可以獲得酶活性的ph，優(yōu)選調(diào)整為最佳ph。將反應(yīng)溶液加溫到可以獲得酶活性的溫度、優(yōu)選為酶的最佳溫度后，添加酶，一邊攪拌一邊進(jìn)行酶反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液加溫到80～100℃而使之加熱失活5～60分鐘，將ph調(diào)整為中性區(qū)后，冷凍干燥反應(yīng)液，就可以得到魚精蛋白水解物。水解酶反應(yīng)進(jìn)行至可以得到由5～14個(gè)左右的氨基酸殘基構(gòu)成的富含精氨酸的肽，優(yōu)選利用酶的加熱失活使之停止?？梢詫⑷缟纤龅氐玫降聂~精蛋白水解物中所含的各成分作為抗真菌用組合物的有效成分利用。因而，魚精蛋白水解物可以以下面舉出的形態(tài)進(jìn)行利用。(1)在上述的酶加熱失活后進(jìn)行了ph調(diào)整的反應(yīng)液(2)上述的反應(yīng)液的冷凍干燥品(3)從上述的反應(yīng)液或冷凍干燥品中除去酶蛋白而得的調(diào)制物(4)將上述的反應(yīng)液、冷凍干燥品或調(diào)制物中的肽變換為所期望的鹽的形態(tài)而得的調(diào)制物。作為本發(fā)明中可以在水解中使用的蛋白質(zhì)分解酶，例如可以舉出芽孢桿菌(bacillus)屬(例如枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)、嗜熱蛋白溶解桿菌(bacillusthermoproteolyticus)、地衣形芽孢桿菌(bacilluslicheniformis)等所產(chǎn)生的酶、曲霉(aspergillus)屬(例如米曲霉(aspergillusoryzae)、黑曲霉(aspergillusniger)、蜂蜜曲霉(aspergillusmelleus)等)所產(chǎn)生的酶、根霉(rhizopus)屬(例如雪白根霉(rhizopusniveus)、戴爾根霉(rhizopusdelemar)等)所產(chǎn)生的酶、胃蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶等。這些酶可以單獨(dú)使用，或者組合使用2種以上。另外，蛋白質(zhì)分解酶被分類為特異性地識(shí)別并切斷蛋白質(zhì)的內(nèi)部序列的肽鏈內(nèi)切酶、和從末端每次切斷1～2個(gè)氨基酸殘基的肽鏈端解酶。因而，根據(jù)需要，可以利用肽鏈內(nèi)切酶與肽鏈端解酶的組合，生成各種各樣的肽鏈。在利用酶進(jìn)行水解的情況下，相對(duì)于底物，添加0.001～10質(zhì)量％的酶，將溶液水解為所使用的酶的最佳ph。魚精蛋白水解物中所含的肽根據(jù)需要可以制成與無機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽、與無機(jī)堿或有機(jī)堿的鹽的形態(tài)，作為抗真菌劑的有效成分使用。作為酸、堿，可以根據(jù)鹽的用途來選擇，若考慮在食品、化妝品、藥品等中的用途，則優(yōu)選以下舉出的藥學(xué)上容許的鹽。作為酸加成鹽，例如可以舉出鹽酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、以及與乙二酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、或富馬酸等二羧酸的鹽、以及與乙酸、丙酸、或丁酸等單羧酸的鹽等。另外，適于本發(fā)明中得到的肽化合物的鹽的形成的無機(jī)堿例如為氨、鈉、鋰、鈣、鎂、鋁等的氫氧化物、碳酸鹽及重碳酸鹽等。作為與有機(jī)堿的鹽，例如可以舉出甲胺、二甲胺、三乙胺之類的單－、二－及三－烷基胺鹽、單－、二－及三－羥基烷基胺鹽、胍鹽、n－甲基葡萄糖胺鹽等。肽成分被變換為鹽的形態(tài)的魚精蛋白水解物也包含于本發(fā)明的魚精蛋白水解物中。本發(fā)明的具有抗真菌活性的組合物、即抗真菌組合物作為抗真菌活性的有效成分包含魚精蛋白水解物和萜烯醇，優(yōu)選抗真菌活性的有效成分由魚精蛋白水解物和萜烯醇構(gòu)成。作為利用魚精蛋白的水解處理得到的具有抗真菌活性的肽，可以舉出分類為以下的(1)～(6)的肽。因而，作為與萜烯醇組合的魚精蛋白水解物，優(yōu)選包含選自以下的(1)～(6)中的至少1種肽化合物(即肽或其鹽)。(1)由以ileargargargargproargarg表示的序列編號(hào)：1的氨基酸序列構(gòu)成的肽及其鹽。(2)由以serargargargargargargglyglyargargargarg表示的序列編號(hào)：2的氨基酸序列構(gòu)成的肽及其鹽。(3)由以valserargargargargargargglyglyargargargarg表示的序列編號(hào)：3的氨基酸序列構(gòu)成的肽及其鹽。(4)由序列編號(hào)：1的氨基酸序列中缺失了1到6個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。(5)由序列編號(hào)：3的氨基酸序列中缺失了1到4個(gè)氨基酸的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。(6)由序列編號(hào)：3的缺失序列以argargargargargargglyglyargargargarg(序列編號(hào)：4)、argargargargargglyglyargargargarg(序列編號(hào)：5)、或argargargargglyglyargargargarg(序列編號(hào)：6)表示的氨基酸序列構(gòu)成的肽或其鹽。另外，作為魚精蛋白水解物，更優(yōu)選包含選自上述(1)～(3)中的至少1種肽化合物的魚精蛋白水解物，進(jìn)一步優(yōu)選為包含選自上述(1)中的至少1種肽化合物、選自上述(2)中的至少1種肽化合物、和選自上述(3)中的至少1種肽化合物的魚精蛋白水解物。而且，也可以將不同組成的具有抗真菌活性的魚精蛋白水解物的2種以上混合使用。繼而，作為本發(fā)明中所用的萜烯醇，優(yōu)選1個(gè)分子中的碳原子數(shù)為10個(gè)的單萜烯醇、或15個(gè)的倍半萜烯醇。雖然還有其他具有抗真菌活性的精油及精油成分，然而均報(bào)告過副作用，在安全性方面有問題。例如，桂皮油及作為其成分的肉桂醛、香茅草油及作為其成分的檸檬醛、百里香油及作為其成分的百里酚、牛至油及作為其成分的香芹酚的皮膚刺激性均很強(qiáng)。另外，迷迭香油及作為其成分的樟腦、留蘭香油及作為其成分的香芹酮等也有抗真菌活性，然而均報(bào)告過對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的刺激作用。但是，香葉醇、里那醇、橙花叔醇之類的萜烯醇沒有應(yīng)當(dāng)特別注意的副作用，安全性高。另外如前所述，抗真菌活性也高，因此最適于與魚精蛋白水解物并用。本發(fā)明中所用的植物精油及其成分如下所示。檜木油與作為其主成分的檜木醇、茶樹油與作為其主成分的4－萜烯醇、玫瑰草油與作為其主成分的香葉醇、薄荷油與作為其主成分的薄荷醇及其衍生物、薰衣草油與作為其主成分的里那醇、廣藿香油與作為其主成分的廣藿香醇、釣樟油與作為其副成分的橙花叔醇。而且，作為薄荷醇衍生物，可以舉出乳酸薄荷酯、薄荷氧基丙二醇、羥基丁酸薄荷酯、薄荷氧基呋喃、薄荷基葡糖苷等。另外玫瑰木油、玫瑰天竺葵油、檸檬桉葉油、胡椒薄荷油、橙花油之類的植物精油也分別可以期待相同的效果地使用。作為單萜烯醇，優(yōu)選使用選自檜木醇、香葉醇、4－萜烯醇、薄荷醇、薄荷醇衍生物及里那醇中的至少1種。單萜烯醇更優(yōu)選為檜木醇、香葉醇、4－萜烯醇、薄荷醇、薄荷醇衍生物或里那醇。倍半萜烯醇優(yōu)選為廣藿香醇和/或橙花叔醇。本發(fā)明的抗真菌組合物例如可以在精油或精油成分中直接溶解或懸浮魚精蛋白水解物的原末(例如冷凍干燥品)而得到。雖然也可以將如此得到的組合物作為抗真菌劑給藥，然而在實(shí)用上軟膏或凝膠劑之類的涂布劑、或噴霧制品之類的外用劑的形態(tài)更容易使用。本發(fā)明的抗真菌組合物可以與其給藥形態(tài)對(duì)應(yīng)地含有賦形劑、稀釋劑、載體(carrier)等的至少1種。精油或精油成分可以通過使用乙醇、丙二醇之類的適當(dāng)?shù)娜軇┒鳛橥耆该鞯囊后w制備。另外也可以使用凝膠性質(zhì)等水性凝膠劑或增溶劑(solbiraizer)之類的精油分散劑懸浮在水中。在以個(gè)人或家庭使用的情況下，考慮刺激性、經(jīng)濟(jì)性而將精油或精油成分預(yù)先稀釋在媒介油(carrieroil)中后給藥是實(shí)際的做法。作為用于該操作的媒介油，可以舉出爐油、荷荷巴油、甜杏仁油、苦楝油、圣約翰藥草浸泡油等植物油。另外通過向熱水中加入抗真菌組合物并實(shí)施足浴也可以期待相同的效果。本發(fā)明的以魚精蛋白水解物和萜烯醇雙方作為有效成分的抗真菌組合物對(duì)至少一種真菌具有高抗真菌活性，特別是優(yōu)選以成為真菌感染癥的病原菌的念珠菌(candida)屬、馬拉色霉菌(malassezia)屬的真菌作為對(duì)象，除此以外，例如，也可以將隱球菌(cryptococcus)屬、曲霉(aspergillus)屬、毛癬菌(trichophyton)屬、球孢子菌(coccidioides)屬等作為對(duì)象。可以使用屬于這些屬的真菌株，利用常法，例如基于后述的實(shí)施例中舉出的方法確認(rèn)本發(fā)明的抗真菌活性。對(duì)于肽化合物而言，由于認(rèn)為難以出現(xiàn)抗藥菌，因此魚精蛋白水解物適于作為真菌癥預(yù)防劑的主成分使用。另外，魚精蛋白水解物及萜烯醇的安全性也得到確認(rèn)，它們適于用作抗真菌組合物的有效成分。通過作為抗真菌劑的有效成分使食品、藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品中含有本發(fā)明的抗真菌組合物，就可以獲得真菌感染癥的預(yù)防、緩解或治療等效果。此外，可以將本發(fā)明的抗真菌組合物作為真菌感染癥的預(yù)防和/或治療用的組合物的有效成分利用。本發(fā)明的抗真菌組合物可以作為包括將本發(fā)明的抗真菌組合物的有效量向真菌感染癥的預(yù)防和/或治療對(duì)象者給藥的操作的真菌感染癥的預(yù)防和/或治療方法中的有效成分利用。對(duì)于抗真菌組合物的形態(tài)沒有特別限定。例如，作為內(nèi)用劑或外用劑的典型形態(tài)，可以舉出軟膏、液劑、懸浮劑、乳劑、氣溶膠、泡沫劑、顆粒劑、粉末劑、片劑、膠囊、噴霧劑。另外，為了用于注射等中，也可以制成用于在即將使用前溶解于生理鹽水或適當(dāng)?shù)木彌_液(例如pbs)等中而制備藥液的冷凍干燥物、造粒物?？拐婢鷦┲兴妮d體根據(jù)抗真菌劑的形態(tài)而不同。而且，以魚精蛋白水解物及萜烯醇(有效成分)、以及各種載體(副成分)作為材料制備各種形態(tài)的藥劑(組合物)的制劑過程本身只要依照以往公知的方法即可，該制劑方法本身并非對(duì)本發(fā)明附加特征的內(nèi)容，因此省略詳細(xì)的說明。作為與配方有關(guān)的詳細(xì)的信息源，例如可以舉出comprehensivemedicinalchemistry、corwinhansch主編、pergamonpress出版(1990)?？拐婢M合物中的作為有效成分的具有抗真菌活性的魚精蛋白水解物和萜烯醇的含量可以根據(jù)其用途，從能夠獲得本發(fā)明中作為目標(biāo)的它們的協(xié)同作用的范圍中選擇。此外，對(duì)于在成為賦予作為抗真菌劑的功能的對(duì)象的藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、食品及化妝品中的這些有效成分的配合量，也可以同樣地從能夠獲得協(xié)同作用的范圍中選擇。利用本發(fā)明提供的抗真菌組合物可以以與其形態(tài)及目的對(duì)應(yīng)的方法、用量使用。例如，利用本發(fā)明提供的抗真菌組合物可以作為液劑通過向靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、皮內(nèi)或腹腔內(nèi)的注射或灌腸來向患者給藥?；蛘呖梢詫⑵瑒┑裙腆w形態(tài)的藥劑經(jīng)口給藥。另外，在出于皮膚表面、口腔內(nèi)、陰道內(nèi)、或衛(wèi)生陶瓷表面的消毒(殺菌)或食品的防腐目的使用的情況下，可以將含有較多量的魚精蛋白水解物(例如作為肽化合物的量為1～100mg/ml)的液劑向?qū)ο笪锏谋砻嬷苯訃婌F，或者用以該液劑潤(rùn)濕了的紗布或布、紙來擦拭對(duì)象物的表面。這些只不過是例示，可以應(yīng)用與以往的以肽系抗生素或肽作為構(gòu)成成分的農(nóng)藥、準(zhǔn)醫(yī)藥品等相同的形態(tài)、使用方法。例如，對(duì)于接受放射線治療的癌癥患者、艾滋病患者，預(yù)防及治療微生物所致的感染癥是重大的關(guān)心事項(xiàng)。此處公開的抗真菌組合物可以對(duì)作為感染癥的原因的真菌(例如念珠菌屬的真菌)顯示出高抗真菌作用。由此，本發(fā)明的抗真菌組合物作為抗真菌劑的主成分而言有用。作為進(jìn)行本發(fā)明的真菌感染癥的預(yù)防、緩解或治療等的方法，可以作為食品、功能性食品、藥品、準(zhǔn)醫(yī)藥品、化妝品使用，可以舉出向口香糖、粒狀糖、片狀糖、薄膜、噴霧劑、健康食品、特定保健用食品、口腔或牙科衛(wèi)生用器具、假牙清洗劑或假牙穩(wěn)定劑組合物中的添加、含漱劑、口腔清洗劑、藥用牙膏、化妝水、乳霜、粉劑、乳液、噴霧劑、涂布劑等各種形態(tài)。實(shí)施例下面，給出實(shí)施例而對(duì)用于實(shí)施本發(fā)明的最佳形態(tài)進(jìn)行詳細(xì)記述，然而本發(fā)明并不限定于以下的實(shí)施例。以下的真菌株可以從以下的單位公開獲取。而且，用于試驗(yàn)抗菌性的真菌株并不限定于以下所示的菌株，可以利用普遍所用的菌株。－candidaalbicansnbrc1594獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤機(jī)構(gòu)生物技術(shù)中心(聯(lián)系方式：生物資源利用促進(jìn)科)·住所：日本國(guó)〒292－0818千葉縣木更津市かずさ鎌足2－5－8(http://www.nite.go.jp/nbrc/cultures/)－candidaalbicanstimm1768及malasseziafurfurtimm10020帝京大學(xué)醫(yī)真菌研究中心住所：日本國(guó)〒192－0395東京都八王子市大塚359(http://www.teikyo－u.ac.jp/timm/research/r01.html？page＝research)(實(shí)施例1)(利用魚精蛋白的酶分解的魚精蛋白水解物的制備)向來自于白鮭(大馬哈魚(oncorhynchusketa))的魚白的魚精蛋白(proserve；(株)maruhanichiro制)50g中加入去離子水80ml，并加入氫氧化鈉而調(diào)整為ph8.0。加溫到65℃后，添加嗜熱菌蛋白酶(nacalaitesque(株)制，來自嗜熱蛋白溶解桿菌(bacillusthermoproteolyticus))1.5mg，一邊攪拌2小時(shí)一邊進(jìn)行酶反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液加溫到95℃而使之加熱失活30分鐘，將ph調(diào)整為8.5。其后，冷凍干燥反應(yīng)液，得到魚精蛋白水解物。(實(shí)施例2)(魚精蛋白水解物的活性級(jí)分的分離收集和活性肽的分析)將依照實(shí)施例1制備的魚精蛋白水解物用去離子水制成50000ppm溶液后，使用hplc在下述的分離條件下分離收集各級(jí)分。使用candidaalbicansnbrc1594評(píng)價(jià)該級(jí)分的抗念珠菌活性，得到2個(gè)級(jí)分的活性級(jí)分。繼而，將該活性級(jí)分用于lcms－it－tof分析，確定了以下的3個(gè)肽的結(jié)構(gòu)。(1)ileargargargargproargarg(8個(gè)殘基；分子量1164.7541)(2)serargargargargargargglyglyargargargarg(13個(gè)殘基；分子量1780.0966)(3)valserargargargargargargglyglyargargargarg(14個(gè)殘基；分子量1879.1650)。＜hplc分離條件＞·hplc系統(tǒng)：(株)島津制作所制prominence系列(系統(tǒng)控制器：cbm－20a、自動(dòng)進(jìn)樣器：sil－10af、輸液泵：lc－8a×2臺(tái)、柱溫箱：cto－20a、pda檢測(cè)器：spd－m20a(測(cè)定波長(zhǎng)190～400nm))·流速：1.0ml/min·流動(dòng)相a：0.1％三氟乙酸·流動(dòng)相b：乙腈·色譜柱：inertsilods－25μm4.6mm×250mm(glscience制)·梯度：用0～60分鐘從b液0容量％到b液15容量％的線性梯度?！z測(cè)波長(zhǎng)：214nm。＜lcms－it－tof解析條件＞·hplc系統(tǒng)：(株)島津制作所制prominence系列(系統(tǒng)控制器：cbm－20a、自動(dòng)進(jìn)樣器：sil－20a、輸液泵：lc－20abbinarypump、柱溫箱：cto－20a、pda檢測(cè)器：spd－m20a(測(cè)定波長(zhǎng)190～400nm))·流速：0.2ml/min·流動(dòng)相a：0.1％甲酸(關(guān)東化學(xué)制，lc－ms用)·流動(dòng)相b：乙腈(關(guān)東化學(xué)制，lc－ms用)·色譜柱：atlantishilicsilica，3μmcolumn(waters制)·梯度：用0～30分鐘從b液60容量％到b液0容量％的線性梯度?！ぷ⑷肓浚?0μl·it－tofms系統(tǒng)：(株)島津制作所制lcms－it－tof(離子化模式：esi－、霧化氣體流量：1.5l/min、dryinggas壓力0.15mpa、施加電壓4.5kv、cdl溫度：200℃、bh溫度：200℃、測(cè)定范圍ms：m/z500～2，000)。(實(shí)施例3)(協(xié)同作用材料的體外篩選)·菌株candidaalbicanstimm1768·試驗(yàn)物質(zhì)將檜木醇((有)kiseitec制)、4－萜烯醇(東京化成工業(yè)(株)制)、香葉醇(關(guān)東化學(xué)(株)制)、薄荷醇(和光純藥工業(yè)(株)制)、肉桂醛(和光純藥工業(yè)(株)制)、癸酸(和光純藥工業(yè)(株)制)分別溶解于rpmi培養(yǎng)基中，使得試驗(yàn)物質(zhì)中的濃度為0.008、0.04、0.2、1mg/ml，并溶解依照實(shí)施例1制備的魚精蛋白水解物，使得試驗(yàn)物質(zhì)中的魚精蛋白水解物的濃度為0、0.125、2.0mg/ml，用于試驗(yàn)。另外，將魚精蛋白水解物單獨(dú)的0.002、0.008、0.031、0.125、0.5、2、8、32mg/ml溶液用于試驗(yàn)。·評(píng)價(jià)方法將c.albicanstimm1768株以達(dá)到2.5×105cells/well的方式向96well微孔板中各添加200μl，在5％co2下、37℃培養(yǎng)2.5～3.5小時(shí)。培養(yǎng)后，抽吸除去培養(yǎng)基，添加200μl/well的各試驗(yàn)物質(zhì)。在37℃靜置10分鐘后，抽吸除去樣品溶液，加入200μl/well的rpmi培養(yǎng)基，在5％co2下、37℃培養(yǎng)2.5小時(shí)。培養(yǎng)后，進(jìn)行結(jié)晶紫染色并測(cè)定出620nm的吸光度。抗菌活性是以將空白的吸光度設(shè)為1時(shí)的各試驗(yàn)區(qū)的相對(duì)值來表示。·結(jié)果圖1～6中表示出由魚精蛋白水解物與萜烯醇類的并用帶來的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果，圖7中表示出魚精蛋白水解物單獨(dú)使用的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果。圖1～6中，◆表示萜烯醇類單獨(dú)使用的結(jié)果，■表示與魚精蛋白水解物0.125mg/ml并用的結(jié)果，▲表示與魚精蛋白水解物2.0mg/ml并用時(shí)的結(jié)果。檜木醇即使在單獨(dú)使用時(shí)也顯示出抗菌活性，被認(rèn)為可以看到由與魚精蛋白水解物的組合帶來的活性增強(qiáng)的協(xié)同作用。4－萜烯醇和香葉醇、薄荷醇雖然單獨(dú)使用時(shí)的活性低，然而會(huì)因與魚精蛋白水解物的并用而略微增強(qiáng)活性，因此被認(rèn)為具有協(xié)同作用。肉桂醛、癸酸在單獨(dú)使用時(shí)基本上不顯示出抗菌活性，也沒有看到由與魚精蛋白水解物的并用帶來的協(xié)同作用。而且，雖然已知癸酸顯示出強(qiáng)的抗真菌活性，然而此次的體外評(píng)價(jià)體系為了模擬生物體內(nèi)，將藥劑與菌的接觸時(shí)間設(shè)定為非常短的10分鐘，因此可以認(rèn)為癸酸無法發(fā)揮充分的抗真菌作用。根據(jù)以上的結(jié)果可以確認(rèn)，魚精蛋白水解物在精油當(dāng)中與檜木醇、4－萜烯醇、香葉醇等萜烯醇類顯示出協(xié)同作用。(實(shí)施例4)(體內(nèi)評(píng)價(jià)體系中的效果確認(rèn))·菌株candidaalbicanstimm1768·實(shí)驗(yàn)動(dòng)物icr小鼠、雌性、6周齡(日本charlesriver(株))·試驗(yàn)物質(zhì)依照實(shí)施例1制備的魚精蛋白水解物檜木醇((有)kiseitec制)·組構(gòu)成陰性對(duì)照(1％甲基纖維素)6只魚精蛋白水解物25mg/ml(1％tween80)6只檜木醇0.4mg/ml(1％tween80)6只檜木醇2mg/ml(1％tween80)6只魚精蛋白水解物25mg/ml+檜木醇0.4mg/ml(1％tween80)6只魚精蛋白水解物25mg/ml+檜木醇2mg/ml(1％tween80)6只·評(píng)價(jià)方法在c.albicans的感染前一天，皮下注射100mg/kg的免疫抑制劑(氫化潑尼松)。為了防止c.albicans以外的感染，使自來水中含有15mg/ml的鹽酸金霉素，使之自由攝取。在感染當(dāng)天，肌肉注射14.4mg/kg的氯丙嗪鹽酸鹽后，以使c.albicans為2×108cells/ml的方式用fbs－rpmi液體培養(yǎng)基稀釋，將稀釋了的菌液用棉棒涂布于小鼠口腔內(nèi)。在感染3、24、27小時(shí)后，使用經(jīng)口探棒給予50μl的各試驗(yàn)物質(zhì)。在感染48小時(shí)后，使小鼠安樂死，進(jìn)行了舌癥狀的評(píng)分。而且，舌評(píng)分是若利用目視在舌中完全看不到白苔則設(shè)為0分，若在舌的20％以下的部分看到白苔則設(shè)為1分，若為21～90％則設(shè)為2分，若為91％以上則設(shè)為3分，若在91％以上并且呈層狀地看到白苔則設(shè)為4分?！そY(jié)果圖8中表示出由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的體內(nèi)評(píng)價(jià)的結(jié)果。對(duì)于舌評(píng)分，在魚精蛋白水解物25mg/ml與檜木醇2.0mg/ml的組合中可以看到明顯的評(píng)分的改善，與分別單獨(dú)地給藥的情況相比舌評(píng)分改善，可以看到由協(xié)同作用造成的抗真菌活性的增強(qiáng)。由于魚精蛋白水解物被暗示過以低濃度附著于菌體表面而顯示出抑菌作用的作用機(jī)理，另一方的檜木醇被報(bào)告過膜功能的阻礙和呼吸的抑制作用，根據(jù)這些機(jī)理的差別，可以認(rèn)為魚精蛋白水解物與檜木醇的并用并非單純的相加作用，而是發(fā)揮出協(xié)同作用后增強(qiáng)了抗菌活性。(參考例1)(利用馬拉色霉菌的效果確認(rèn))·菌株malasseziafurfurtimm10020·評(píng)價(jià)方法將在mlna培養(yǎng)基中培養(yǎng)的malasseziafurfur用生理鹽水調(diào)整為macfarland1.0，將該調(diào)整液100μl、橄欖油50μl涂布在mlna瓊脂平板上。在皿中央向厚8mm的抗生素測(cè)試用紙片滴下試驗(yàn)試樣(將魚精蛋白水解物用滅菌水調(diào)整為40mg/ml)50μl，在32℃培養(yǎng)7天?！そY(jié)果在滴下了50μl的魚精蛋白水解物40mg/ml的紙片的周圍，看到了14mm×14mm(紙片為8mm)的阻止圓。在對(duì)照的滅菌水中沒有看到阻止圓，因此確認(rèn)魚精蛋白水解物具有對(duì)馬拉色霉菌的抗菌效果。(實(shí)施例5)(關(guān)于與檜木醇的并用的詳細(xì)分析)·菌株candidaalbicanstimm1768·試驗(yàn)物質(zhì)將檜木醇((有)kiseitec制)溶解于rpmi培養(yǎng)基中，使試驗(yàn)物質(zhì)中的濃度為0、0.004、0.008、0.016、0.031、0.063、0.125、0.25、0.5、1μg/ml，將依照實(shí)施例1制備的魚精蛋白水解物溶解，使試驗(yàn)物質(zhì)中的魚精蛋白水解物的濃度為0、0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10μg/ml，用于試驗(yàn)。·評(píng)價(jià)方法將c.albicanstimm1768株以達(dá)到5.0×103cells/ml的方式用rpmi培養(yǎng)基稀釋后，向96well微孔板中各添加100μl。各添加50μl/well的魚精蛋白水解物溶液后，各添加50μl/well的檜木醇。在5％co2下、37℃培養(yǎng)16小時(shí)后，進(jìn)行結(jié)晶紫染色并測(cè)定出620nm的吸光度。抑制活性是根據(jù)將陰性對(duì)照(未添加魚精蛋白水解物及檜木醇)的吸光度設(shè)為1時(shí)的各試驗(yàn)區(qū)的相對(duì)值算出。另外，也一并算出表1中所示的各濃度的檜木醇((有)kiseitec制)及魚精蛋白水解物“pro”的fic指數(shù)?！そY(jié)果圖9及圖10中表示出由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果。表1中表示出fic指數(shù)的算出結(jié)果。[表1]表1ic90檜木醇profic05.951.000.00150.840.0043.90.660.0083.80.650.0162.950.520.0313.20.580.0552.50.490.0632.450.490.1252.350.560.252.30.710.51.650.930.631.251.030.730.6251.050.80.3131.090.540.1560.730.7701.00其結(jié)果是，在低濃度的檜木醇與魚精蛋白水解物的組合中顯示出fic≤0.5的協(xié)同作用。根據(jù)以上的結(jié)果可以確認(rèn)，魚精蛋白水解物顯示出與檜木醇的協(xié)同作用。(實(shí)施例6)(來自于其他魚種魚白的魚精蛋白水解物的體外評(píng)價(jià))·菌株candidaalbicanstimm1768·試驗(yàn)物質(zhì)將依照實(shí)施例1制備的來自于各魚種(細(xì)鱗大馬哈魚、鯡魚)的魚精蛋白水解物、以及來自于大馬哈魚魚白的魚精蛋白的菠蘿蛋白酶分解物溶解于rpmi培養(yǎng)基中，使得試驗(yàn)物質(zhì)中的魚精蛋白水解物的濃度為0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80、160μg/ml，用于試驗(yàn)?！ぴu(píng)價(jià)方法將c.albicanstimm1768株以達(dá)到5.0×103cells/ml的方式用rpmi培養(yǎng)基稀釋后，向96well微孔板中各添加100μl。各添加50μl/well的魚精蛋白水解物溶液后，各添加50μl/well的rpmi培養(yǎng)基。在5％co2下、37℃培養(yǎng)16小時(shí)后，進(jìn)行結(jié)晶紫染色并測(cè)定出620nm的吸光度。抑制活性是根據(jù)將陰性對(duì)照(未添加魚精蛋白水解物)的吸光度設(shè)為1時(shí)的各試驗(yàn)區(qū)的相對(duì)值算出。·結(jié)果圖11中表示出各種魚精蛋白水解物的體外評(píng)價(jià)的結(jié)果。任意一種試驗(yàn)物質(zhì)均顯示出與來自于大馬哈魚魚白的魚精蛋白水解物同等的活性。根據(jù)該結(jié)果，顯示出魚精蛋白分解物的魚種通用性。(實(shí)施例7)(利用體內(nèi)評(píng)價(jià)體系的并用效果確認(rèn))·菌株、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試驗(yàn)物質(zhì)、組構(gòu)成、評(píng)價(jià)方法使用了與實(shí)施例4相同的菌株、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試驗(yàn)物質(zhì)、組構(gòu)成及評(píng)價(jià)方法。由感染48小時(shí)后安樂死的小鼠依照常法制作出舌組織切片，在染色后，利用光學(xué)顯微鏡拍攝而得到染色圖像?！そY(jié)果圖12中表示出由魚精蛋白水解物與檜木醇的并用造成的舌組織觀察的結(jié)果。在舌組織圖像中，雖然魚精蛋白分解物單獨(dú)使用時(shí)在舌表面的粘膜內(nèi)殘存有菌絲，然而可以在組合試驗(yàn)區(qū)中清楚地確認(rèn)菌絲的抑制。sequencelisting<110>瑪魯哈日魯株式會(huì)社<110>學(xué)校法人帝京大學(xué)<120>含有抗真菌肽和萜烯醇的抗真菌組合物<130>15-0073-mn<150>jp2014-186288<151>2014-9-12<160>6<210>1<211>8<212>prt<213>大馬哈魚<400>1ileargargargargproargarg15<210>2<211>13<212>prt<213>大馬哈魚<400>2serargargargargargargglyglyargargargarg1510<210>3<211>14<212>prt<213>大馬哈魚<400>3valserargargargargargargglyglyargargargarg1510<210>4<211>12<212>prt<213>大馬哈魚<400>4argargargargargargglyglyargargargarg1510<210>5<211>11<212>prt<213>大馬哈魚<400>5argargargargargglyglyargargargarg1510<210>6<211>10<212>prt<213>大馬哈魚<400>6argargargargglyglyargargargarg15102當(dāng)前第1頁12