本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，側(cè)重于多肽類化合物分子，具體涉及一種魚精蛋白類似活性肽及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：魚精蛋白是一類從深海魚的精巢內(nèi)提取出來(lái)的多聚陽(yáng)離子堿性蛋白，分子量主要分布在4000～10000道爾頓之間。魚精蛋白的氨基酸組成中約有三分之二為堿性氨基酸，其等電點(diǎn)pi在10～12之間。自從1937年就已發(fā)現(xiàn)魚精蛋白具有抑菌功效，其后不斷地研究已將魚精蛋白的應(yīng)用推廣到食品防腐、臨床拮抗肝素中。魚精蛋白作為多聚陽(yáng)離子蛋白其抑菌機(jī)理主要涉及：魚精蛋白與細(xì)菌外壁上的肽聚糖及細(xì)胞膜起反應(yīng)，引起菌壁及胞膜的性質(zhì)發(fā)生變異，從而使細(xì)菌外壁的結(jié)構(gòu)遭到破壞，細(xì)菌形態(tài)發(fā)生改變，擾亂細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)吸收、蛋白質(zhì)合成及能量轉(zhuǎn)化，最終導(dǎo)致細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制和死亡。報(bào)道顯示，魚精蛋白在中性和堿性介質(zhì)中顯示出很強(qiáng)的抑菌能力，并有較高的熱穩(wěn)定性，在210℃條件下加熱1小時(shí)仍具有活性，同時(shí)抑菌范圍和食品防腐范圍均較廣，它對(duì)枯草桿菌、芽孢桿菌、干酪乳桿菌、胚芽乳桿菌、乳酸菌、霉菌、芽抱耐熱菌和革蘭氏陽(yáng)性菌等均有較強(qiáng)的抑制作用，但對(duì)革蘭氏陰性菌抑制效果不明顯。雖然魚精蛋白在常溫及高溫下表現(xiàn)出良好的熱穩(wěn)定性，在中性及堿性環(huán)境中也表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性，作為天然防腐劑已廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中。但是由于魚精蛋白具有以下缺陷，因此將其抑菌性能限制在僅能應(yīng)用于生物體外：1.由于魚精蛋白來(lái)源于不同種屬的魚精巢提取物，其分子量呈非均一彌散狀特征，各種魚精蛋白混雜，制備批次之間的質(zhì)量難以恒定，作為藥物存在不可控性；2.如此混雜的天然魚精蛋白大分子容易產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)，存在用藥安全性問(wèn)題。魚精蛋白在臨床上作為拮抗肝素藥物使用時(shí)，需要直接靜脈注射，由于魚精蛋白存在以上缺陷，使用時(shí)風(fēng)險(xiǎn)很大，會(huì)引起患者低血壓、心動(dòng)過(guò)緩、肺動(dòng)脈高壓、呼吸困難、器官衰竭，甚至導(dǎo)致死亡；但是魚精蛋白是目前唯一能夠用于治療因注射肝素過(guò)量所引起的出血的藥物，且無(wú)其他藥品可替代，所以在給患者使用時(shí)需要十分謹(jǐn)慎，用藥安全性過(guò)低。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)缺陷，第一方面，提供一種魚精蛋白類似活性肽，其結(jié)構(gòu)式為：(rn)2-kx，n為自然數(shù)；其中，r代表精氨酸；k代表賴氨酸，n為r的數(shù)目，x為空或能夠與賴氨酸形成肽鍵的任意一個(gè)或多個(gè)氨基酸或化學(xué)基團(tuán)。x為g，其結(jié)構(gòu)式為：(rn)2-kg，g代表甘氨酸。n為5～9。當(dāng)n＝5，x為g時(shí)，魚精蛋白類似活性肽結(jié)構(gòu)式為(rrrrr)2-kg，見式1：當(dāng)n＝7，x為g時(shí)，魚精蛋白類似活性肽結(jié)構(gòu)式為(rrrrrrr)2-kg，見式2：當(dāng)n＝9，x為g時(shí)，魚精蛋白類似活性肽結(jié)構(gòu)式為(rrrrrrrrr)2-kg，見式3：還包括所述魚精蛋白類似活性肽與有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸形成的鹽類化合物；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的羥基可形成但不限于所形成的醚、酯、苷或甙等的化合物；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的巰基可形成但不限于所形成的硫醚、硫苷，或與半胱氨酸或含半胱氨酸的肽所形成的含有二硫鍵的化合物；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的氨基可形成但不限于所形成的?；?、烴化物、與糖類物質(zhì)所形成的苷類物質(zhì)等；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的羧基可形成但不限于所形成的酯、酰胺類化合物等；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的亞氨基可形成但不限于所形成的苷、?；?、烴化物等；所述的魚精蛋白類似活性肽所帶有的酚羥基可形成但不限于所形成的酯、醚、苷、甙類化合物，與有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿所形成的鹽類化合物；所述的魚精蛋白類似活性肽與金屬離子所形成的配合物、絡(luò)和物或螯合物；所述的魚精蛋白類似活性肽所形成的水合物或溶劑物。第二方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，其含有上述的魚精蛋白類似活性肽、其幾何異構(gòu)體、其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化合物以及可藥用載體或賦形劑的藥物組合物。第三方面，本發(fā)明提供一種制備上述魚精蛋白類似活性肽的方法，先把x固定在固相樹脂上，得到x-固相樹脂，對(duì)x-固相樹脂進(jìn)行fmoc脫保護(hù)，縮合1個(gè)fmoc-lys(dde)-oh，完成k-y-固相樹脂肽骨架的制備；再對(duì)k-y-固相樹脂肽骨架進(jìn)行側(cè)鏈氨基dde及fmoc脫保護(hù)，在k-y-固相樹脂自由氨基上同步進(jìn)行r的延伸引入，獲得(rn)2kx-固相樹脂；將合成完畢的(rn)2kx從固相樹脂上裂解下來(lái)得到肽粗品，經(jīng)過(guò)高效液相色譜純化得到魚精蛋白類似活性肽(rn)2kx。第三方面，本發(fā)明提供一種上述魚精蛋白類似活性肽在制備粘膜清洗消毒藥物中的應(yīng)用。所述粘膜為動(dòng)物或人的粘膜表面或粘膜腔或傷口創(chuàng)面；所述粘膜表面或粘膜腔如口腔、鼻咽腔、眼睛粘膜、腸粘膜、消化道、生殖道粘膜等。所述粘膜清洗消毒藥物的劑型為呼吸道給藥劑型、粘膜給藥劑型或腔道給藥劑型；如：所述粘膜給藥劑型為滴眼劑、滴鼻劑、眼用軟膏劑、含漱劑、舌下片劑、粘貼片及貼膜劑等；優(yōu)選的，所述藥物為液體或固體的(優(yōu)選膏體)通過(guò)粘膜給藥的藥物；可選的，所述液體的通過(guò)粘膜給藥的藥物為滴鼻液、鼻噴劑、氣霧劑、滴眼劑、洗眼液、陰道清洗劑、尿道清洗劑及創(chuàng)口清洗劑；可選的，所述固體的通過(guò)粘膜給藥的藥物為吸入劑、鼻噴劑、氣霧劑、陰道栓劑、陰道凝膠、眼藥膏或創(chuàng)口涂抹劑。本發(fā)明提供了一種魚精蛋白類似活性肽及其制備方法與應(yīng)用，該魚精蛋白類似活性肽是人為設(shè)計(jì)，經(jīng)過(guò)人工合成獲得的非天然結(jié)構(gòu)的多肽分子，它不同于現(xiàn)有技術(shù)采取生物提取獲得的天然魚精蛋白的混雜分子制劑，也不同于目前報(bào)道的利用人工合成方式制備獲得的單鏈形式的魚精蛋白模擬肽rn。本發(fā)明提供的魚精蛋白類似肽以其更加穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)可作為粘膜清洗消毒藥物應(yīng)用在人或動(dòng)物的粘膜處，發(fā)揮抑菌效果，緩解和治療人或動(dòng)物外源致病微生物、物理或化學(xué)類物質(zhì)造成的氣霧、粉塵、顆粒對(duì)粘膜的損害及刺激；還可用于緩解和治療人或動(dòng)物粘膜表面或創(chuàng)面由于自身分泌物造成的損傷及刺激，有望成為粘膜清洗消毒藥物，并廣泛應(yīng)用。用魚精蛋白類似活性肽作為粘膜清洗消毒藥物，可采用人工合成的方式大批量產(chǎn)業(yè)化制備、原料供應(yīng)渠道穩(wěn)定、工藝流程確定、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)恒定、產(chǎn)品質(zhì)量批次之間無(wú)差異、產(chǎn)品產(chǎn)量可控。此外，魚精蛋白類似活性肽分子序列及結(jié)構(gòu)明確、分子量相對(duì)小、化學(xué)穩(wěn)定性良好、不易產(chǎn)生致敏反應(yīng)，使用安全性高。具體實(shí)施方式目前常用的消毒劑原料成份中的抗菌素、激素會(huì)對(duì)機(jī)體及環(huán)境造成藥物殘留，產(chǎn)生不良后果。消毒劑中的刺激性化學(xué)物質(zhì)，如碘、氯、高錳酸鉀、雙氧水等化學(xué)物質(zhì)也不適于接觸嬌嫩的粘膜。本發(fā)明中使用的魚精蛋白類似活性肽是經(jīng)過(guò)人為設(shè)計(jì)，通過(guò)人工合成，制備而成的非天然結(jié)構(gòu)的肽分子。這種魚精蛋白類似活性肽既具有魚精蛋白的化學(xué)性質(zhì)及功能，分子量可控，保持均一，不易產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)，使得魚精蛋白類似活性肽有潛力成為粘膜清洗消毒藥物的主要功效成分。哺乳動(dòng)物的精蛋白與魚精蛋白的分子性狀、功能及所具有的缺陷均相同，哺乳動(dòng)物的精蛋白在體內(nèi)的使用安全性低，也無(wú)法將其抑菌性能發(fā)揮在人或動(dòng)物體的體內(nèi)。1963年美國(guó)洛克菲勒大學(xué)生物化學(xué)教授r.brucemerrifield開創(chuàng)性地發(fā)明了便利省時(shí)高效的多肽固相合成技術(shù)，使得人工合成多肽分子易于實(shí)施，為開展多肽研究及開發(fā)多肽藥物提供了便利及可能，由于r.brucemerrifield教授建立的多肽固相合成技術(shù)對(duì)蛋白質(zhì)多肽的研究具有里程碑意義因此榮獲了1984年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。多肽固相合成的原理是將擬合成的肽鏈羧基端(c端)的氨基酸共價(jià)連接(固定)在不溶性樹脂上，然后從被“固定”在樹脂上的氨基酸的氨基端(n端)與目標(biāo)肽鏈中的氨基酸羧基進(jìn)行縮合連接，逐一縮合連接目標(biāo)氨基酸達(dá)到延長(zhǎng)肽鏈的目的。簡(jiǎn)而言之，固相合成肽鏈就是從多肽鏈的羧基端(c端)逐個(gè)向肽鏈的氨基端縮合連接氨基酸進(jìn)行肽鏈的延長(zhǎng)。因此在進(jìn)行氨基酸的縮合反應(yīng)時(shí)，要將有待連接的氨基酸上的氨基及側(cè)鏈基團(tuán)保護(hù)起來(lái)避免發(fā)生反應(yīng)。目前常用的有叔丁氧羰基(boc)保護(hù)法和芴甲氧羰基(fmoc)保護(hù)法，因此每連接上一個(gè)氨基酸就要經(jīng)歷一次脫保護(hù)的過(guò)程(即固相載體上的氨基先脫保護(hù)，再同過(guò)量的有待連接的下一個(gè)目標(biāo)氨基酸的羧基發(fā)生縮合反應(yīng)以延長(zhǎng)肽鏈)。通過(guò)這樣的步驟反復(fù)多次地進(jìn)行下去，即：縮合、洗滌、脫保護(hù)、中和、洗滌，再進(jìn)入下一輪縮合(接上一個(gè)目標(biāo)氨基酸)，直至達(dá)到所需要合成的目標(biāo)肽鏈長(zhǎng)度。合成完成后采用tfa法將目的多肽從樹脂上裂解下來(lái)，得到目的肽的粗品。目的肽的粗品還要經(jīng)過(guò)純化，純化過(guò)程如下：采用色譜柱型號(hào)daisoc18(10μm,50x250mm)，色譜操作流動(dòng)相a為(按體積百分含量，含0.05％三氟乙酸，2％乙腈的水溶液)，流動(dòng)相b為乙腈與水的體積比為9:1的乙腈水溶液，流速為每分鐘25毫升，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)220納米。收集流出峰溶液，獲得目的肽純品溶液。收集到的目的肽純品溶液經(jīng)過(guò)冷凍干燥呈白色絮狀固體，即目的肽純品，其純度可達(dá)99％以上。目的肽純品經(jīng)密封包裝后放入冰箱保存待用。本發(fā)明提到的魚精蛋白類似活性肽是一種主要由精氨酸組成的多肽鏈，2分支非天然結(jié)構(gòu)的多肽分子，其多肽分子式為(rn)2kg，其中r代表堿性氨基酸中的精氨酸(arg，r),n代表多聚精氨酸的數(shù)量，k代表賴氨酸(lys，k)，g代表甘氨酸(gly，g)。精氨酸的個(gè)數(shù)n為5～9，即(r5)2kg～(r9)2kg。(rn)2kg的表達(dá)式定義了魚精蛋白類似活性肽是一個(gè)2分支含有10～18個(gè)精氨酸的多肽，可按照常規(guī)多肽固相合成的方法制備，因此在此不再贅述,固相合成采用fmoc-aa(boc)-oh進(jìn)行肽鏈的延長(zhǎng)，aa代表任意氨基酸。魚精蛋白類似活性肽(r5)2kg～(r9)2kg的最大分子量為3014.59道爾頓，pi為13.33,凈電荷為19。在(r5)2kg～(r9)2kg范圍內(nèi)隨著精氨酸(arg,r)數(shù)量的增加提升了抑菌能力。(r9)2kg肽分子表現(xiàn)出良好的抑菌活性。多肽合成及純化的原理和操作參考盛樹力主編，科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社(1998年)出版的“多肽激素的當(dāng)代理論和應(yīng)用”中的第三章“多肽的化學(xué)合成和純化”。本發(fā)明合成制備多肽化合物的方式可以參照以上固相合成方式，但并不局限于此合成方式。鼻咽腔是機(jī)體呼吸道的首要門戶，在空氣污染，沙塵暴、霧霾、流行病的環(huán)境中，鼻咽腔是最先接收及蓄積外源微生物(包括致病微生物)、煙塵顆粒，粉塵等異物的場(chǎng)所。女性陰道同樣也是機(jī)體與外界相通的場(chǎng)所，易遭到外源致病微生物的侵?jǐn)_。因此，需要及時(shí)清洗去除鼻咽腔、陰道接觸蓄積的外源致病微生物、異源物質(zhì)，此時(shí)就要使用粘膜清洗消毒藥物對(duì)鼻咽腔、陰道進(jìn)行清洗或消毒，使用魚精蛋白類似活性肽作為粘膜清洗消毒藥物不僅對(duì)機(jī)體粘膜無(wú)刺激、無(wú)毒副作用、還能維護(hù)機(jī)體健康，減少疾病發(fā)生，提高生活質(zhì)量，具有重要意義。同理，也可使用魚精蛋白類似活性肽作為粘膜清洗消毒藥物及時(shí)清洗去除哺乳動(dòng)物家畜及家禽鼻咽腔中接觸蓄積的外源致病微生物、異源物質(zhì)，對(duì)維護(hù)機(jī)體健康，預(yù)防疾病，提高生存率，提升經(jīng)濟(jì)效益同樣具有重要意義。實(shí)驗(yàn)例一、魚精蛋白類似活性肽對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用金黃色葡萄球菌(staphylococcusaureus)屬于革蘭氏陽(yáng)性菌(g+)，是造成人類傷口化膿感染的最常見的病原菌，也是引起腸炎、肺炎、敗血癥、膿毒癥的元兇。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)魚精蛋白類似活性肽對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制率，體現(xiàn)魚精蛋白類似活性肽的抑菌效果。lb培養(yǎng)液的配制：胰蛋白胨(tryptone)10g/l、酵母提取物(yeastextract)5g/l、氯化鈉(nacl)10g/l，加蒸餾水至1000ml，溫和搖動(dòng)直至內(nèi)容物溶解，使用錫箔紙包裹瓶口，經(jīng)高溫高壓滅菌后即可使用。1、分別稱取以下2mg魚精蛋白類似活性肽凍干粉樣品：(r9)2kg，分子量3014.8,純度>98％；(r8)2kg，分子量2702.21,純度>98％；(r7)2kg，分子量2390.05,純度>98％；(r6)2kg，分子量2077.47,純度>98％；(r5)2kg，分子量1765.29,純度>98％；將各種樣品分別加入2ml的lb培養(yǎng)液中，配成1mg/ml的母液，編號(hào)#0；2、每種樣品為一組，記為a組-e組，每組取無(wú)菌消毒培養(yǎng)管5個(gè)，分別加入1mllb培養(yǎng)液，編號(hào)#1、#2、#3、#4、#5；3、取1mla組中的母液(1mg/ml)加入a組#1培養(yǎng)管中混勻后,再取1mla組#1培養(yǎng)管中的肽溶液加入a組#2培養(yǎng)管中混勻,以此類推得到逐級(jí)對(duì)半稀釋的肽溶液，其濃度見表1，b組-e組也進(jìn)行相同操作：表1編號(hào)#0-#5培養(yǎng)管中肽溶液的魚精蛋白類似活性肽濃度試管編號(hào)#0#1#2#3#4#5肽濃度/μg/ml100050025012562.531.254、接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒冷卻后挑取少許金黃色葡萄球菌置于1ml生理鹽水中混勻，得到菌液，分別吸取100μl菌液加入a組-e組的#0-#5各個(gè)培養(yǎng)管中得到培養(yǎng)液；5、37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)觀察各培養(yǎng)液中的細(xì)菌生長(zhǎng)情況(即抑制情況)，培養(yǎng)管中的培養(yǎng)液呈現(xiàn)渾濁的為細(xì)菌生長(zhǎng)陽(yáng)性(+)，培養(yǎng)液呈現(xiàn)清亮的為細(xì)菌生長(zhǎng)陰性(-)；呈現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)陰性的最小肽濃度即為肽分子最小抑菌濃度mic(minimuminhibitoryconcentration)，以(r5)2kg、(r7)2kg、(r9)2kg的結(jié)果為例，結(jié)果見表2。表2魚精蛋白類似活性肽對(duì)金黃色葡萄球菌的檢測(cè)結(jié)果肽濃度/μg/ml100050025012562.531.25(r5)2kg++----(r7)2kg+++---(r9)2kg++++--實(shí)驗(yàn)例二、魚精蛋白類似活性肽對(duì)綠膿桿菌的抑制作用綠膿桿菌(pseudomonasaeruginosa)屬于革蘭氏陰性菌(g-)，是臨床上常見的造成燒傷創(chuàng)面、傷口感染化膿的主要病原菌，是引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、肺炎等疾病的主要致病菌。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)魚精蛋白類似活性肽對(duì)綠膿桿菌的抑制率，體現(xiàn)魚精蛋白類似活性肽的抑菌效果。步驟1-3同實(shí)驗(yàn)例一；4、接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒后挑取少許綠膿桿菌置于1ml生理鹽水中混勻，得到菌液，吸取100μl菌液加入a組-e組的#0-#5培養(yǎng)管中得到培養(yǎng)液；5、37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)觀察各培養(yǎng)液中的細(xì)菌生長(zhǎng)情況(即抑制情況)，培養(yǎng)液呈現(xiàn)渾濁的為細(xì)菌生長(zhǎng)陽(yáng)性(+)，培養(yǎng)液呈現(xiàn)清亮的為細(xì)菌生長(zhǎng)陰性(-)；呈現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)陰性的最小的肽濃度即為肽分子最小抑菌濃度mic(minimuminhibitoryconcentration)，以(r5)2kg、(r7)2kg、(r9)2kg的結(jié)果為例，結(jié)果見表3。表3魚精蛋白類似活性肽對(duì)綠膿桿菌的檢測(cè)結(jié)果肽濃度/μg/ml100050025012562.531.25(r5)2kg++----(r7)2kg+++---(r9)2kg++++--實(shí)驗(yàn)例一和實(shí)驗(yàn)例二抑菌結(jié)果顯示，本發(fā)明涉及的非天然結(jié)構(gòu)、人工合成的肽類抑菌分子——魚精蛋白類似活性肽對(duì)引起臨床粘膜創(chuàng)傷，傷口感染等的常見致病菌，革蘭氏陽(yáng)性菌(g+)金黃色葡萄球菌與革蘭氏陰性菌(g-)綠膿桿菌均具有抑制作用，且其抑制作用隨著分子量的增加而增強(qiáng)，因此魚精蛋白類似活性肽有潛力成為清洗消毒類藥物的有效成分。本發(fā)明的魚精蛋白類似活性肽對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌mic與生化提取的天然來(lái)源的魚精蛋白分子接近，對(duì)綠膿桿菌的抑菌mic比天然魚精蛋白低幾倍；且本發(fā)明的魚精蛋白類似活性肽具有明確的分子結(jié)構(gòu)及氨基酸序列、人工合成制備肽分子的工藝可控、各批次之間質(zhì)量穩(wěn)定，滿足產(chǎn)業(yè)化制藥的標(biāo)準(zhǔn)和要求。實(shí)驗(yàn)例三、魚精蛋白類似活性肽的致敏性檢測(cè)1、取8周健康新西蘭白兔4只分為2組(2只/組)：魚精蛋白類似肽組和天然魚精蛋白組(硫酸魚精蛋白注射液，50mg/5ml，購(gòu)自北京悅康凱悅制藥有限公司)，兩組中的免疫抗原分別為魚精蛋白類似肽和天然魚精蛋白；2、初次免疫：在每組白兔的背部分3點(diǎn)皮下注射含1mg/1ml免疫抗原的弗氏全佐劑乳化液；第一次加強(qiáng)免疫：初次免疫4周后，每組白兔再次分3點(diǎn)皮下注射含1mg/1ml免疫抗原的弗氏不完全佐劑乳化液；第二次加強(qiáng)免疫：第一次加強(qiáng)免疫2周后，每組白兔再次分3點(diǎn)皮下注射含1mg/1ml免疫抗原的弗氏不完全佐劑乳化液。3、第二次加強(qiáng)免疫2周后，每只兔子耳緣靜脈取血1ml，室溫放置3h后移至冰箱存放過(guò)夜，次日收集血清。4、將血清用pbs緩沖液稀釋1000倍，用免疫抗原包被elisa板檢測(cè)兔抗血清稀釋液的抗體含量。以(r9)2kg為例，結(jié)果顯示免疫天然魚精蛋白的兔血清中均含有抗體(2/2)，而免疫本發(fā)明的魚精蛋白類似肽的兔血清中均無(wú)抗體檢出(0/2)，免疫其它魚精蛋白類似肽的兔血清中也無(wú)抗體檢出。分析該結(jié)果可知：本發(fā)明的魚精蛋白類似肽由于分子較小抗原性弱，未檢出抗體。而天然魚精蛋白的分子量分布從4000-10000，分布區(qū)間大，成分組成復(fù)雜，具有顯著的抗原性?？梢?，本發(fā)明的魚精蛋白類似肽比天然魚精蛋白明顯不具有抗原性，表明本發(fā)明的魚精蛋白類似肽致敏性更低，作為藥物用作體內(nèi)更加安全，有潛力成為作用于粘膜的清洗消毒類藥物。綜上，以魚精蛋白類似活性肽(r9)2kg為例，其由20個(gè)氨基酸組成，具備明確的分子結(jié)構(gòu)、分子質(zhì)量和成品一致性，經(jīng)過(guò)生理環(huán)境中的酶解變成更小的肽分子，2肽，3肽及游離氨基酸，成為機(jī)體基本營(yíng)養(yǎng)元素可被直接吸收利用。以明確的魚精蛋白類似活性肽作為藥物，其優(yōu)點(diǎn)在于分子的化學(xué)性質(zhì)明確，分子比天然魚精蛋白分子小，背景清晰、降解產(chǎn)物易于分析和追蹤，因此其毒性、致敏性、刺激性相比天然魚精蛋白更低，對(duì)機(jī)體的生理環(huán)境更為親善友好，具有很好的應(yīng)用安全性。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12