β-發(fā)夾肽模擬物的制作方法
【專利說明】(3 -發(fā)夾肽模擬物
[0001] 本發(fā)明提供具有CXCR4拮抗活性的0 -發(fā)夾肽模擬物。
[0002] 本發(fā)明的0 _發(fā)夾肽模擬物是二硫鍵在Cys4和Cys 11之間的環(huán)（_Tyr i-His^Xaa3 -Cys4-Ser5-Xaa6-DPro 7-Xaa8-Arg9-Tyr10-Cysn-Tyr 12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Pro 16-)及其可藥用 鹽，其中Xaa3是Tyr、如下文所述的Tyr (Me)或如下文所述的Tyr (CF 3)，Xaa6是Ala或如下 文所述的Acc，Xaa8是如下文所述的Orn(iPr)，Xaa 13是Gin或Glu，Xaa 14是如下文所述的 Lys (iPr)，Xaa15是如下文所述的DPro或DLys (iPr);條件是如果Xaa6是Ala，則Xaa 15是如 下文所述的DLys (iPr)。
[0003] 此外，本發(fā)明提供一種高效合成方法，其中如果需要，可以通過所述合成方法以平 行文庫模式產(chǎn)生這些化合物。這些發(fā)夾肽模擬物具有有利的藥理學(xué)特性，此外，顯示合 適的血漿蛋白結(jié)合作用和適宜的清除率。因此它們可以作為有效成分以低量用于全部種類 的藥物制劑，尤其延長釋放的藥物制劑。
[0004] 許多醫(yī)學(xué)意義的生物學(xué)過程由總體上涉及趨化因子及其受體并且尤其涉及間質(zhì) 衍生因子1(SDF-1/CXCL12)及其受體CXCR4的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)介導(dǎo)。
[0005] CXCR4及其配體SDF-1參與B細(xì)胞、造血干細(xì)胞（HSC)和造血祖先細(xì)胞（HPC) 的運(yùn)輸。例如，CXCR4在⑶34+細(xì)胞上表達(dá)并且已經(jīng)涉及⑶34+細(xì)胞移行和歸巢過程 (S.M. Watt, S.P.Forde, Vox sanguinis 2008,94,18-32)。還已經(jīng)顯示 CXCR4 受體在干 細(xì)胞和祖先細(xì)胞從骨髓釋放至外周血中發(fā)揮重要作用（L. M. Pelus, S. Fukuda, Leukemia 2008, 22, 466-473)。CXCR4的這種活性可能對外周血干細(xì)胞的高效血漿分離置換采集非常 重要。在血液惡性腫瘤和實(shí)體瘤患者中施用大劑量化療或放療法后，自體外周血細(xì)胞提供 自體移植后快速和持久的造血恢復(fù)（W. C. Liles等人，Blood2003, 102, 2728-2730)。
[0006] 最近，已經(jīng)展示SDF-1在損傷的動物模型中局部上調(diào)，所述損傷包括局部缺血發(fā) 作、全腦性缺血、心肌梗死和后肢局部缺血，以及參與外周局部缺血后或肝、腎或肺損傷后 的恢復(fù)（A.E. Ting, R.W. Mays, M.R. Frey, W. Van' t Hof, S.Medicetty，R. Deans, Critical Reviews in Oncology/Hematology 2008,65,81-93and literature cited herein ； F. Lin, K. Cordes, L. Li, L. Hood, ff. G. Couser, S. J. Shankland 等人，J. Am. Soc. Nephrol. 2003, 14, 1188-1199 ；C. C. Dos Santos, Intensive Care Med. 2008, 34, 619-630) 〇 這些結(jié)果表明對于組織和器官修復(fù)/再生而言，SDF-1可能是CXCR4陽性干細(xì)胞 的趨化劑（M.Z.Ratajczak，M.Kucia，R.Reca，M.Majka，A.Janowska_Wieczorek，J. Ratajczak, Leukemia 2004, 18, 29-40)。因此，借助 CXCR4 抑制劑調(diào)節(jié) SDF-1/CXCR4 軸應(yīng)當(dāng) 通過利用釋放的干細(xì)胞來調(diào)節(jié)組織修復(fù)，產(chǎn)生顯著的治療益處。
[0007] 最近，已經(jīng)顯示，通過CXCR4抑制劑破壞CXCR4/SDF-1軸在從骨髓差異性 動員祖先細(xì)胞如HPC、內(nèi)皮祖先細(xì)胞（EPC)和間質(zhì)祖先細(xì)胞（SPC)方面發(fā)揮關(guān)鍵作 用（S.C.Pitchford，R.C. Furze, C.P. Jones, A.M. Wegner, S.M. Rankin, Cell Stem Cell 2009, 4, 62)。此外，骨髓衍生的CXCR4+極小胚樣干細(xì)胞（VSEL)在急性心肌梗死患者中 動員，提不一種假定性代償機(jī)制（1.￥〇」&1?)￥81^；[，]\11611(1四，]\11(11(^3，￡.2油3-3111'1]1&，￡. Paczkowska, J. Ciosek, M. Halasa, M. Krol, M. Kazmierski, P. Buszman, A. Ochala, J. Ratajczak, B. Machalinski, M. Z. Ratajczak, J. Am. Coll. Cardiol. 2009, 53, 1)?？梢允抢?這些研宄結(jié)果以便為組織再生提供有效的干細(xì)胞治療。
[0008] 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC)是具有分化成多種組織如骨和軟骨的能力的非造血性祖先 細(xì)胞O.J.Prockop，Science 1997,276,71)。由于小比例的MSC強(qiáng)烈地表達(dá)功能上有活性 的CXCR4,因此調(diào)節(jié)CXCR4/SDF-1軸可以介導(dǎo)這些細(xì)胞的特異性移行和歸巢（R. F. Wynn，C. A. Hart, C. Corradi-Perini, L. 0? Neill, C. A. Evans, J. E. Wraith, L. J. Fairbaim, I. Bellant uono,Blood2004, 104, 2643)〇
[0009] 存在日益增加的以下證據(jù)，所述證據(jù)顯示趨化因子總體上以及SDF-1/CXCR4 相互作用特別在血管生成中發(fā)揮關(guān)鍵作用。趨化因子通過結(jié)合其內(nèi)皮細(xì)胞上的同族 受體直接誘導(dǎo)血管生成或通過促進(jìn)輸送其他生血管刺激的炎性細(xì)胞浸潤，間接地誘 導(dǎo)血管生成。已經(jīng)顯示許多促炎趨化因子（包括白介素8(IL-8)、調(diào)節(jié)生長的癌基 因、間質(zhì)細(xì)胞衍生因子1 (SDF-1)、單核細(xì)胞趨化蛋白1 (MCP-1)、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因 子1和1-309)充當(dāng)血管生成的直接誘導(dǎo)物仏0^11，14.86此161'，1'.6.]^(：1〇11(1，八. Loehfelm, L. Yang, H. F. Dong, 0. Y. Chertov, R. Salcedo, J. J. Oppenheim, 0. M. Howard. Clin. Cancer Res.2003,9 (8), 3115-3123 ；R. Salcedo,J.J. Oppenheim, Microcirculation 2003, (3-4), 359-370)〇
[0010] 最近獲得的結(jié)果顯示，CXCR4受體參與癌細(xì)胞趨化活動，如乳腺癌轉(zhuǎn)移，或參與 以下癌的轉(zhuǎn)移：卵巢癌（A. Muller, B. Homey, H. Soto, N. Ge, D. Catron, M. E. Buchanan, T. Me Clanahan, E. Murphey, ff. Yuan, S. N. Wagner, J. L. Barrera, A. Mohar, E. Verastegui, A. Zlotnik,Nature 2001,50,410 ；J. M. Hall,K.S.Korach, Molecular Endocrinology 2003,17,792-803)、非霍奇金淋巴瘤沉86忖〇11111，(：.〇6111§11〇1&，？.]\&111118(3〇，(：. Rabascio, A. Burlini, S. Monestiroli, A. Gobbi, G. Pruneri, G. Martinelli, Cancer Research 2002,62,3106-3112)或肺癌（T.Kijima，G.Maulik，P.C.Ma，E.V.Tibaldi，R. E. Turner, B. Rollins, M. Sattler, B. E. Johnson, R. Salgia, Cancer Research 2002, 62, 6304-6311)、黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、胰腺癌、多發(fā)性骨髓瘤、 慢性淋巴細(xì)胞白血病、肝細(xì)胞癌、結(jié)直腸癌、子宮內(nèi)膜癌和生殖細(xì)胞腫瘤（H. Tamamura等 人 FEBS Letters2003, 550, 79-83,援引才參考文獻(xiàn)；Z. Wang, Q. Ma, Q. Liu, H. Yu, L. Zhao, S. Shen, J. Yao, British Journal of Cancer 2008, 99, 1695 ；B. Sung, S. Jhurani, K. S. Ahn, Y. Mastuo, T. Yi, S. Guha, M. Liu, B. Aggarwal, Cancer Res. 2008, 68, 8938 ；H. Liu, Z. Pan, A. Li, S. Fu, Y. Lei, H. Sun, M. Wu, W. Zhou, Cellular and Molecular Immunology，2008, 5, 373 ; C. Rubie, 0. Kollmar, V. 0. Frick, M. Wagner, B. Brittner, S. GrSbei% M.K.Schilling,Scandinavian Journal of Immunology 2008, 68, 635 ;S. Gelmini，M. Mangoni,F.Castiglioe,C. Beltrami,A. Pieralli, K. L. Andersson, M. Fambrini, G. I. Taddie, M. Serio, C. Orlando, Clin. Exp. Metastasis 2009, 26, 261 ；D. C. Gilbert, I. Chandler, A. McIntyre, N. C. Goddard, R. Gabe, R. A. Huddart, J. Shipley, J. Pathol. 2009, 217, 94)。用CXCR4抑制劑阻斷趨化活性應(yīng)當(dāng)終止癌細(xì)胞移行并因此終止轉(zhuǎn) 移。
[0011] CXCR4也已經(jīng)涉及實(shí)體瘤和白血病/淋巴瘤的生長和增生。顯示CXCR4受 體的激活對惡性神經(jīng)元腫瘤和神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤的生長均至關(guān)重要。另外，全身性施 用CXCR4拮抗劑AMD3100抑制顱內(nèi)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和髓母細(xì)胞瘤異體移植物的生長， 原因在于增加凋亡并減少腫瘤細(xì)胞的增殖（J. B. Rubin，A. L Kung，R. S Klein，J. A. Chan, Y. Sun, K. Schmidt, M. ff. Kieran, A. D. Luster, R. A. Segal, Proc Natl Acad Sci USA. 2003, 100 (23), 13513-13518 ；S. Barbero, R. Bonavia, A. Bajetto, C. Porcile, P. Pirani, J. L. Ravetti, G. L. Zona, R. Spaziante, T. Florio, G. Schettini, Cancer Res. 2003, 63(8), 1969-1974 ；T. Kijima, G. Maulik, P. C. Ma, E. V. Tibaldi, R. E. Turner, B. Rollins, M. Sattler, B. E. Johnson, R. Salgia. Cancer Res. 2002, 62 (21), 6304-6311) 〇 CXCR4抑制劑也在以下癌中顯不有前景的體外和體內(nèi)功效：乳腺癌、小細(xì)胞肺癌、膜腺癌、 胃癌、結(jié)直腸癌、惡性黑色素瘤、卵巢癌、橫紋肌肉瘤、前列腺癌以及慢性淋巴細(xì)胞白血病、 急性髓細(xì)胞白血病、急性淋巴性白血病、多發(fā)性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤（J. A. Burger, A. Peled, Leukemia 2009, 23, 43-52 及其中援引的文獻(xiàn)）。
[0012] 充分確立了趨化因子參與許多炎性疾病并且它們中的一些在破骨細(xì)胞發(fā)育調(diào)節(jié) 中顯示關(guān)鍵作用。在來自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)樣品和骨關(guān)節(jié)炎（0A)樣品的滑膜和骨組 織活組織檢查樣品上針對SDF-1 (CXCL12)的免疫染色已經(jīng)揭示出炎性病癥下趨化因子的 表達(dá)水平強(qiáng)烈增加（F. Grassi, S. Cristino, S. Toneguzzi, A. Piacentini, A. Facchini, G. Lisignoli,J. Cell Physiol. 2004 ;199 (2), 244-251)。CXCR4 受體似乎可能在炎性疾病 如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、多發(fā)性硬化、阿爾茨海默病、帕金森病、動脈粥樣硬化或眼病如 糖尿病性腎病和年齡相關(guān)性黃斑變性中發(fā)揮重要作用（K. R. Shadidi等人，Scandinavian Journal of Immunology 2003, 57, 192-198 ；J. A. Gonzalo, J. Immunol. 2000, 165, 499-508 ； S. Hatse 等人，F(xiàn)EBS Letters2002, 527, 255-262 及援引的文獻(xiàn)，A. T. Weer