技術領域

本發(fā)明涉及治療受試者肺癌的方法，包括給予受試者一種抗癌劑(其為抗程序性死亡-1(PD-1)抗體)和另一種抗癌劑(例如抗-細胞毒性T淋巴細胞抗原-4(CTLA-4)抗體、靶向酪氨酸激酶抑制劑、抗VEGF抗體或基于鉑的雙重化學治療劑)的組合。

背景技術：

人類癌癥具有許多遺傳和表觀遺傳改變，產生可被免疫系統(tǒng)識別的新抗原(Sjoblom等人，2006)。適應性免疫系統(tǒng)，包括T和B淋巴細胞，具有強大的抗癌潛力，具有廣泛的能力和精細的特異性，以響應各種腫瘤抗原。此外，免疫系統(tǒng)表現(xiàn)出相當大的可塑性和記憶成分。成功利用適應性免疫系統(tǒng)的所有這些屬性將使免疫治療在所有癌癥治療模式中是獨特的。

直到最近，癌癥免疫治療已經將主要努力集中在通過激活的效應細胞的過繼轉移，針對相關抗原的免疫或提供非特異性免疫刺激劑如細胞因子來增強抗腫瘤免疫反應的方法上。然而，在過去十年中，開發(fā)特異性免疫檢查點途徑抑制劑的密集努力已經開始提供用于治療癌癥的新的免疫治療方法，包括開發(fā)結合并抑制CTLA的抗體(Ab)ipilimumab(YERVOY?)用于治療晚期黑色素瘤患者(Hodi等人，2010)和開發(fā)Ab例如nivolumab和pembrolizumab(以前的lambrolizumab; USAN Council Statement，2013)，其特異性結合程序性死亡-1(PD-1)受體和阻斷抑制性PD-1/PD-1配體途徑(Topalian等，2012a，b; Topalian等，2014; Hamid等，2013; Hamid和Carvajal，2013; McDermott和Atkins，2013)。

PD-1是由活化的T和B細胞表達的關鍵免疫檢查點受體并介導免疫抑制。PD-1是CD28受體家族的成員，其包括CD28，CTLA-4，ICOS，PD-1和BTLA。已經鑒定了PD-1的兩種細胞表面糖蛋白配體，程序性死亡配體-1(PD-L1)和程序性死亡配體-2(PD-L2)，它們在抗原呈遞細胞以及許多人類癌癥上表達，并且已顯示在結合PD-1時下調T細胞活化和細胞因子分泌。PD-1/PD-L1相互作用的抑制在臨床前模型中介導有效的抗腫瘤活性(美國專利號8,008,449和7,943,743)，并且PD-1/PD-L1相互作用的Ab抑制劑用于治療癌癥的用途已經進入臨床試驗(Brahmer等人，2010; Topalian等人，2012a; Topalian等人，2014; Hamid等人，2013; Brahmer等人，2012; Flies等人，2011; Pardoll, 2012; Hamid和Carvajal, 2013)。

Nivolumab(以前稱為5C4，BMS-936558，MDX-1106或ONO-4538)是完全人IgG4(S228P)PD-1免疫檢查點抑制劑Ab，其選擇性地阻止與PD-1配體(PD-L1和PD- L2)相互作用，從而阻斷抗腫瘤T細胞功能的下調(美國專利號8,008,449; Wang等，2014)。Nivolumab在多種晚期實體瘤中顯示出活性，包括腎細胞癌(腎腺癌或腎上腺樣瘤)、黑素瘤和非小細胞肺癌(NSCLC)(Topalian等，2012a; Topalian等，2014; Drake等，2013; WO 2013/173223)。

Ipilimumab(YERVOY?)是完全人IgG1單克隆抗體，其阻斷CTLA-4與其B7配體的結合，從而刺激晚期黑素瘤患者中的T細胞活化和改善總存活(OS)(Hodi等人，2010)。在1期臨床試驗中使用nivolumab和ipilimumab的并行治療在相當大比例的晚期黑素瘤患者中產生快速和深的腫瘤消退，并且比單獨的Ab顯著更有效(Wolchok等人，2013; WO2013/173223)。然而，迄今未知免疫調節(jié)性Ab的這種組合是否在其它腫瘤類型中同樣有效。

NSCLC是美國和全世界癌癥死亡的主要原因(NCCN GUIDELINES?，2013 - 非小細胞肺癌)。NSCLC對化療相對不敏感，但具有良好性能狀態(tài)(PS)的IV期疾病患者受益于用化療藥物治療，包括鉑藥物(例如順鉑、卡鉑)、紫杉烷藥物(例如紫杉醇、白蛋白結合的紫杉醇、多西他賽)、長春瑞濱、長春堿、依托泊苷、培美曲塞和吉西他濱，以及這些藥物的各種組合。

還開發(fā)了用于治療晚期肺癌的特異性靶向治療。例如，貝伐單抗(AVASTIN?)是阻斷血管內皮生長因子A(VEGF-A)的mAb。埃羅替尼(TARCEVA?)是表皮生長因子受體(EGFR)的小分子TKI?？诉蛱婺?Crizotinib, XALKORI?)是靶向ALK和MET的小分子TKI，并且用于在攜帶突變的ALK融合基因的患者中治療NSCLC。西妥昔單抗(ERBITUX?)是靶向EGFR的mAb。

如本文所述，在臨床試驗中已經證明了nivolumab與基于鉑的雙重化療、TKI埃羅替尼、VEGF-A mAb貝伐單抗或抗CTLA-4 mAb ipilimumab組合的顯著抗腫瘤活性。

發(fā)明概述

本公開提供了治療患有肺癌的受試者的方法，包括向受試者給予治療有效量的以下的組合：(a)特異性結合并抑制PD-1的Ab或其抗原結合部分；和(b)基于鉑的雙重化療、(c)EGFR靶向的TKI或(d)特異性結合并抑制CTLA-4的Ab或其抗原結合部分。在一些實施方案中，肺癌是非小細胞肺癌(NSCLC)。在本文公開的任何治療方法的某些實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是pembrolizumab。在本文公開的任何治療方法的某些其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab是ipilimumab。在其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab是tremelimumab。

在某些實施方案中，已經預先治療受試者的肺癌。在其它實施方案中，肺癌是晚期，轉移性和/或難治性癌癥。在一些實施方案中，給予所述Ab或其抗原結合部分和其它抗癌劑的組合在受試者中誘導持久的臨床反應。

本公開還提供了用于治療患有肺癌的受試者的試劑盒，所述試劑盒包含：(a)范圍為0.1-10 mg/kg體重的抗癌劑的劑量，所述抗癌劑是特異性結合PD-1受體并抑制PD-1活性的抗體或其抗原結合部分；(b)另一種抗癌劑的劑量，其是(i)基于鉑的雙重化療；(ii)EGFR靶向酪氨酸激酶抑制劑；(iii)貝伐單抗；或(iv)范圍為0.1-10 mg/kg體重的特異性結合并抑制CTLA-4的抗體或其抗原結合部分的劑量；和(c)使用抗PD-1抗體和其它抗癌劑治療受試者的說明書。

本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將從以下詳細描述和實施例中變得明顯，這些描述和實施例不應被解釋為限制性的。在本申請中引用的所有引用的參考文獻，包括科學論文、報紙報道、GenBank條目、專利和專利申請的內容明確地通過引用并入本文。

附圖簡述

圖1顯示CA209-012研究設計：nivolumab與基于鉑的雙重化療組合。

圖2顯示了用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者中治療組的OR的特征。

圖3顯示了用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的靶損傷相對于基線的百分比變化。

圖4顯示了用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的靶損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化。

圖5顯示了用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的PFS和OS。

圖6顯示了CA209-012研究設計：nivolumab與埃羅替尼組合。

圖7顯示了用nivolumab加埃洛替尼治療的NSCLC患者的OR的特征。

圖8顯示了用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者中靶損傷腫瘤負荷的百分比變化。A)損傷腫瘤負荷相對于基線的百分比變化；B)靶損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化。

圖9顯示了用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者中的PFS和OS。mPFS =中位PFS。mOS =中位OS。

圖10顯示CA209-012研究設計：nivolumab與ipilimumab組合。

圖11顯示了用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者中根據(jù)治療組的OR的特征。

圖12顯示了用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者的靶損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化。

圖13顯示了用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者的靶損傷相對于基線的百分比變化。

圖14顯示了用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者中的PFS和OS。

圖15顯示了用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者中根據(jù)PD-L1狀態(tài)的反應：A)靶損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化和B)PFS。

圖16顯示NSCLC患者中根據(jù)nivolumab劑量的OS。

圖17顯示NSCLC患者中根據(jù)組織學的OS。

圖18顯示了用nivolumab治療的NSCLC患者中根據(jù)組織學的反應的特征。

圖19顯示了根據(jù)EGFR和KRAS突變狀態(tài)的靶損傷腫瘤負荷的最佳變化。

圖20顯示了根據(jù)腫瘤PD-L1表達的靶損傷腫瘤負荷的最佳變化。

圖21顯示了根據(jù)患有NSCLC的患者中腫瘤PD-L1表達的PFS。

圖22顯示了根據(jù)患有NSCLC的患者中腫瘤PD-L1表達的OS。

圖23顯示了在未經過化療的IV期或復發(fā)性非小細胞肺癌(NSCLC)的受試者中，Nivolumab vs.基于鉑的雙重化療以及Nivolumab加Ipilimumab vs.基于鉑的雙重化療的開放標記、隨機化3期試驗的研究設計示意圖。

發(fā)明詳述

本發(fā)明涉及治療肺癌患者的方法，包括向患者給予抗PD-1 Ab和另一種抗癌劑的組合。

術語

為了可以更容易地理解本公開，首先定義某些術語。如本申請中所使用的，除非本文另有明確規(guī)定，否則以下術語中的每一個應具有下面給出的含義。在整個申請中闡述了其它定義。

“給予”是指使用本領域技術人員已知的各種方法和遞送系統(tǒng)中的任一種將包含治療劑的組合物物理引入受試者?？筆D-1 Ab的給藥途徑包括靜脈內，肌內，皮下，腹膜內，脊髓或其它腸胃外給藥途徑，例如通過注射或輸注。本文所用的短語“腸胃外給藥”是指除了腸內和局部給藥以外通常通過注射的給藥方式，包括但不限于靜脈內，肌內，動脈內，鞘內，淋巴內，損傷內，囊內，眶內，心內，皮內，腹膜內，經氣管，皮下，表皮下，關節(jié)內，囊下，蛛網膜下，脊柱內，硬膜外和胸骨內注射和輸注以及體內電穿孔。TKI通常通過非腸胃外途徑給藥，在一些實施方案中為口服。其它非腸胃外途徑包括局部，表皮或粘膜給藥途徑，例如鼻內，陰道，直腸，舌下或局部。給予也可以例如進行一次，多次和/或在一個或多個延長的時段上進行。

如本文所用的“不良事件”(AE)是與使用醫(yī)學治療相關的任何不利的和通常無意的或不期望的跡象(包括異常的實驗室發(fā)現(xiàn))、癥狀或疾病。例如，不良事件可能與在響應治療時免疫系統(tǒng)的激活或免疫系統(tǒng)細胞(例如，T細胞)的擴增相關。醫(yī)學治療可以具有一種或多種相關的AE，并且每種AE可以具有相同或不同的嚴重性水平。提及能夠“改變不良事件”的方法是指降低與使用不同治療方案相關的一種或多種AE的發(fā)生率和/或嚴重性的治療方案。

“抗體”(Ab)應包括但不限于糖蛋白免疫球蛋白，其特異性結合抗原并包含通過二硫鍵互連的至少兩條重(H)鏈和兩條輕(L)鏈，或其抗原結合部分。每條H鏈包含重鏈可變區(qū)(本文縮寫為V_H)和重鏈恒定區(qū)。重鏈恒定區(qū)包含三個恒定結構域C_H1、C_H2和C_H3。每條輕鏈包含輕鏈可變區(qū)(本文縮寫為V_L)和輕鏈恒定區(qū)。輕鏈恒定區(qū)包含一個恒定結構域C_L。V_H和V_L區(qū)可以進一步細分為稱為互補決定區(qū)(CDR)的高變區(qū)，其散布有更保守的稱為框架區(qū)(FR)的區(qū)域。每個V_H和V_L包含三個CDR和四個FR，從氨基末端到羧基末端按照以下順序排列：FR1，CDR1，F(xiàn)R2，CDR2，F(xiàn)R3，CDR3，F(xiàn)R4。重鏈和輕鏈的可變區(qū)含有與抗原相互作用的結合結構域。Ab的恒定區(qū)可介導免疫球蛋白與宿主組織或因子(包括免疫系統(tǒng)的各種細胞(例如效應細胞)和經典補體系統(tǒng)的第一組分(C1q))的結合。

免疫球蛋白可以衍生自任何通常已知的同種型，包括但不限于IgA，分泌型IgA，IgG和IgM。IgG亞類也是本領域技術人員熟知的，包括但不限于人IgG1，IgG2，IgG3和IgG4。“同種型”是指由重鏈恒定區(qū)基因編碼的Ab類或亞類(例如IgM或IgG1)。術語“抗體”包括，例如，天然存在的和非天然存在的Ab；單克隆和多克隆Ab；嵌合和人源化Ab；人或非人Ab；全合成Ab；和單鏈Ab。非人Ab可以通過重組方法人源化以降低其在人中的免疫原性。在沒有明確說明的情況下，并且除非上下文另有說明，否則術語“抗體”還包括任何上述免疫球蛋白的抗原結合片段或抗原結合部分，并且包括單價和二價片段或部分，以及單鏈Ab。

“分離的抗體”是指基本上不含具有不同抗原特異性的其它Ab的Ab(例如，與PD-1特異性結合的分離的Ab基本上不含與PD-1以外的抗原特異性結合的Ab)。然而，與PD-1特異性結合的分離的Ab可以與其它抗原(例如來自不同物種的PD-1分子)具有交叉反應性。此外，分離的Ab可以基本上不含其它細胞材料和/或化學品。

術語“單克隆抗體”(“mAb”)是指單一分子組成的Ab分子(即其一級序列基本上相同并且對于特定的表位顯示單一結合特異性和親和力的Ab分子)的非天然存在的制劑。mAb是分離的Ab的實例。MAb可以通過雜交瘤，重組，轉基因或本領域技術人員已知的其它技術產生。

“人”抗體(HuMAb)是指具有其中框架區(qū)和CDR區(qū)都源自人種系免疫球蛋白序列的可變區(qū)的Ab。此外，如果Ab包含恒定區(qū)，則恒定區(qū)也源自人種系免疫球蛋白序列。本發(fā)明的人Ab可以包括不由人種系免疫球蛋白序列編碼的氨基酸殘基(例如，通過體外隨機或位點特異性誘變或通過體內體細胞突變引入的突變)。然而，本文所用的術語“人抗體”不意圖包括其中來源于另一種哺乳動物物種(例如小鼠)的種系的CDR序列已被移植到人框架序列上的Ab。術語“人”Ab和“完全人”Ab同義使用。

“人源化抗體”是指其中非人Ab的CDR結構域外的一些、大部分或所有氨基酸被來源于人免疫球蛋白的相應氨基酸替換的Ab。在Ab的人源化形式的一個實施方案中，CDR結構域外部的一些、大多數(shù)或所有氨基酸已被來自人免疫球蛋白的氨基酸替換，而一個或多個CDR區(qū)內的一些、大多數(shù)或所有氨基酸未改變。氨基酸的小的添加、缺失、插入、置換或修飾是允許的，只要它們不消除Ab結合特定抗原的能力。“人源化”Ab保留類似于原始Ab的抗原特異性。

“嵌合抗體”是指其中可變區(qū)來源于一個物種并且恒定區(qū)來源于另一物種的Ab，例如其中可變區(qū)來源于小鼠Ab并且恒定區(qū)來源于人Ab的Ab。

“抗-抗原”Ab是指特異性結合抗原的Ab。例如，抗PD-1 Ab特異性結合PD-1，抗CTLA-4 Ab特異性結合CTLA-4。

Ab(也稱為“抗原結合片段”)的“抗原結合部分”是指保留與由整個Ab結合的抗原特異性結合的能力的Ab的一個或多個片段。

“癌癥”是指以身體中異常細胞的不受控制的生長為特征的廣泛的各種疾病。不受調節(jié)的細胞分裂和生長分裂和生長導致惡性腫瘤的形成，其侵入鄰近組織并且還可以通過淋巴系統(tǒng)或血流轉移到身體的遠端部分。

“細胞毒性T淋巴細胞抗原-4(CTLA-4)”是指屬于CD28家族的免疫抑制受體。CTLA-4在體內僅在T細胞上表達，并且結合兩種配體CD80和CD86(分別也稱為B7-1和B7-2)。本文所用的術語“CTLA-4”包括人CTLA-4(hCTLA-4)，hCTLA-4的變體、同種型和物種同源物，以及與hCTLA-4具有至少一個共同表位的類似物。完整的hCTLA-4序列可以在GenBank登錄號AAB59385下找到。

術語“免疫治療”是指通過包括誘導、增強、抑制或以其它方式修飾免疫反應的方法治療患有疾病或具有感染或遭受疾病復發(fā)的風險的受試者。受試者的“治療”或“療法”是指對受試者進行的任何類型的干預或過程，或給予受試者活性劑，目的在于逆轉、緩解、改善、抑制、減緩或預防癥狀、并發(fā)癥或病癥的發(fā)作、進展、發(fā)展、嚴重性或復發(fā)，或與疾病相關的生化指標。

“程序性死亡-1(PD-1)”是指屬于CD28家族的免疫抑制性受體。PD-1主要在體內先前活化的T細胞上表達，并且結合兩種配體PD-L1和PD-L2。本文使用的術語“PD-1”包括人PD-1(hPD-1)，hPD-1的變體、同種型和物種同源物，以及與hPD-1具有至少一個共同表位的類似物。完整的hPD-1序列可以在GenBank登錄號U64863下找到。

“程序性死亡配體-1(PD-L1)”是PD-1的兩種細胞表面糖蛋白配體之一(另一種是PD-L2)，其在結合PD-1時下調T細胞活化和細胞因子分泌。本文所用的術語“PD-L1”包括人PD-L1(hPD-L1)，hPD-L1的變體、同種型和物種同源物，以及與hPD-L1具有至少一個共同表位的類似物。完整的hPD-L1序列可以在GenBank登錄號Q9NZQ7下找到。

“受試者”包括任何人或非人動物。術語“非人動物”包括但不限于脊椎動物，例如非人靈長類動物，綿羊，狗和嚙齒動物，例如小鼠，大鼠和豚鼠。在一些實施方案中，受試者是人。術語“受試者”和“患者”在本文中可互換使用。

藥物或治療劑的“治療有效量”或“治療有效劑量”是當單獨使用或與另一種治療劑組合使用時保護受試者免于疾病發(fā)作或促進疾病消退的任何量的藥物，所述疾病消退通過疾病癥狀的嚴重性的降低，疾病無癥狀期的頻率和持續(xù)時間的增加，或由疾病痛苦引起的損傷或失能的預防來證明。治療劑促進疾病消退的能力可以使用本領域技術人員已知的多種方法來評價，例如在臨床試驗期間的人類受試者中，在預測人類功效的動物模型系統(tǒng)中，或通過在體外測定法中測定所述藥劑的活性。

舉例來說，“抗癌劑”促進受試者中的癌癥消退或防止進一步的腫瘤生長。在某些實施方案中，治療有效量的藥物促進癌癥消退至消除癌癥的程度?！按龠M癌癥消退”意指單獨或與抗腫瘤劑組合給予有效量的藥物導致腫瘤生長或大小減小，腫瘤壞死，至少一種疾病癥狀的嚴重性降低，疾病無癥狀期的頻率和持續(xù)時間的增加，或預防由于疾病痛苦引起的損傷或失能。此外，關于治療的術語“有效”和“有效性”包括藥理學效力和生理安全性。藥理學效力是指藥物在患者中促進癌癥消退的能力。生理安全性是指由給予藥物導致的細胞、器官和/或生物體水平的毒性水平或其它不利的生理效應(不良反應)。

作為對于治療腫瘤的實例，相對于未治療的受試者，治療有效量的抗癌劑可以將細胞生長或腫瘤生長抑制至少約20％，至少約40％，至少約60％，或至少約80％。在本發(fā)明的其它實施方案中，可觀察到腫瘤消退并持續(xù)至少約20天，至少約40天或至少約60天的時間。盡管這些治療效果的最終測量，免疫治療藥物的評價還必須考慮“免疫相關”反應模式。

“免疫相關”反應模式是指在用免疫治療劑治療的癌癥患者中經常觀察到的臨床反應模式，所述免疫治療劑通過誘導癌癥特異性免疫反應或通過修飾天然免疫過程而產生抗腫瘤效果。該反應模式的特征在于在腫瘤負荷的初始增加或新的損傷出現(xiàn)之后的有益的治療效果，其在傳統(tǒng)化療劑的評價中將被分類為疾病進展并且將與藥物失效同義。因此，免疫治療劑的適當評價可能需要長期監(jiān)測這些藥劑對目標疾病的影響。

藥物的治療有效量包括“預防有效量”，其為當單獨或與抗腫瘤劑組合給予給處于發(fā)展癌癥風險的受試者(例如具有惡化前病癥的受試者)或患有癌癥復發(fā)的受試者時，抑制癌癥的發(fā)展或復發(fā)的任何量的藥物。在某些實施方案中，預防有效量完全防止癌癥的發(fā)展或復發(fā)?！耙种啤卑┌Y的發(fā)展或復發(fā)意味著減少癌癥發(fā)展或復發(fā)的可能性，或完全阻止癌癥的發(fā)展或復發(fā)。

替代方案(例如，“或”)的使用應當被理解為意指替代方案中的一個、兩個或其任何組合。如本文所使用的，不定冠詞“一個”或“一種”應當理解為是指任何敘述或列舉的組分中的“一個或多個/一種或多種”。

術語“約”或“基本上由...組成”是指在本領域普通技術人員確定的特定值或組成的可接受誤差范圍內的值或組成，其將部分地取決于如何測量或測定值或組成，即，測量系統(tǒng)的限制。例如，“約”或“基本上由...組成”可以意指按本領域中的實踐，在1個或多于1個標準偏差內。或者，“約”或“基本上由...組成”可以意指至多10％或20％(即±10％或±20％)的范圍。例如，約3mg可以包括2.7mg至3.3mg(對于10％)或2.4mg至3.6mg(對于20％)之間的任何數(shù)目。此外，特別是關于生物系統(tǒng)或過程，該術語可以意味著數(shù)值的一個數(shù)量級或至多5倍。當在本申請和權利要求中提供特定值或組成時，除非另有說明，否則“約”或“基本上由...組成”的含義應認為在該特定值或組成的可接受誤差范圍內。

本文使用的術語“約每周一次”是指大約數(shù)，“約每周一次”可以包括每七天±兩天一次，即每五天一次至每九天一次。因此，“每周一次”的給藥頻率可以是每五天一次，每六天一次，每七天一次，每八天一次或每九天一次。

如本文所述，任何濃度范圍，百分比范圍，比率范圍或整數(shù)范圍應理解為包括所述范圍內的任何整數(shù)的值，并且在適當時包括其分數(shù)(例如整數(shù)的十分之一和百分之一)，除非另有說明。

在下面的小節(jié)中更詳細地描述本發(fā)明的各個方面。

抗PD-1抗體和抗PD-L1抗體

在美國專利8,008,449中公開了以高親和力特異性結合PD-1的HuMAb。其它抗PD-1 mAb已經描述于例如美國專利號6,808,710、7,488,802、8,168,757和8,354,509以及PCT公開號WO 2012/145493中。已經證明美國專利號8,008,449中公開的每種抗PD-1 HuMAb顯示出一種或多種以下特征：(a)以1×10^-7 M或更小的K_D結合人PD-1，如通過使用Biacore生物傳感器系統(tǒng)的表面等離子體共振測定的；(b)基本上不與人CD28、CTLA-4或ICOS結合；(c)在混合淋巴細胞反應(MLR)測定中增加T細胞增殖；(d)在MLR測定中增加干擾素-γ產生；(e)在MLR測定中增加IL-2分泌；(f)結合人PD-1和食蟹猴PD-1；(g)抑制PD-L1和/或PD-L2與PD-1的結合；(h)刺激抗原特異性記憶反應；(i)刺激Ab反應；和(j)在體內抑制腫瘤細胞生長?？捎糜诒景l(fā)明的抗PD-1 Ab包括特異性結合人PD-1并且表現(xiàn)出至少一個，在一些實施方案中，至少五個前述特征的mAb。在一些實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。在一個實施方案中，抗PD-1 Ab是pembrolizumab。

在一個實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。Nivolumab(也稱為“OPDIVO?”，以前稱為5C4，BMS-936558，MDX-1106或ONO-4538)是選擇性阻止與PD-1配體(PD-L1和PD-L2)相互作用從而阻斷抗腫瘤T細胞功能的下調的完全人IgG4(S228P)PD-1免疫檢查點抑制劑Ab(美國專利號8,008,449; Wang等人，2014 Cancer Immunol Res.2(9)：846-56)。

在另一個實施方案中，抗PD-1 Ab是pembrolizumab。Pembrolizumab(也稱為“KEYTRUDA?”，lambrolizumab和MK-3475)是針對人細胞表面受體PD-1(程序性死亡-1或程序性細胞死亡-1)的人源化單克隆IgG4抗體。Pembrolizumab描述于例如美國專利號8,354,509和8,900,587;另見(最后訪問：2014年12月14日)。Pembrolizumab已被FDA批準用于治療復發(fā)性或難治性黑素瘤。

在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是MEDI0608(以前的AMP-514)，其是單克隆抗體。MEDI0608描述于例如美國專利號8,609,089B2或(最后訪問：2014年12月14日)。

在一些實施方案中，抗PD-1抗體是Pidilizumab(CT-011)，其是人源化單克隆抗體。Pidilizumab描述于美國專利號8,686,119 B2或WO 2013/014668A1。

在所公開的方法中可用的抗PD-1 Ab還包括與人PD-1特異性結合并且與nivolumab交叉競爭結合人PD-1的分離的Ab(參見例如美國專利號8,008,449和8,779,105; WO 2013/173223)。Ab交叉競爭與抗原結合的能力表明這些Ab結合抗原的相同表位區(qū)并在空間上阻礙其它交叉競爭性Ab與該特定表位區(qū)的結合。由于它們與PD-1的相同表位區(qū)域的結合，預期這些交叉競爭性Ab具有非常類似于nivolumab的功能性質。交叉競爭性Ab可以基于它們在標準PD-1結合測定例如Biacore分析、ELISA測定或流式細胞術中與nivolumab交叉競爭的能力容易地鑒定(參見例如WO 2013/173223)。

在某些實施方案中，與nivolumab交叉競爭結合人PD-1或結合與nivolumab相同的人PD-1表位區(qū)的Ab是mAb。對于給予人類受試者，這些交叉競爭性Ab是嵌合Ab，或人源化或人Ab。這樣的嵌合、人源化或人mAb可以通過本領域熟知的方法制備和分離。

可用于公開的本發(fā)明方法中的抗PD-1 Ab還包括上述Ab的抗原結合部分。已充分證明Ab的抗原結合功能可以由全長Ab的片段進行。包括在術語Ab的“抗原結合部分”內的結合片段的實例包括(i)Fab片段，由V_L、V_H、C_L和C_H1結構域組成的單價片段；(ii)F(ab’)2片段，包含通過鉸鏈區(qū)的二硫鍵連接的兩個Fab片段的二價片段；(iii)由V_H和C_H1結構域組成的Fd片段；和(iv)由Ab的單臂的V_L和V_H結構域組成的Fv片段。

適用于所公開的方法或組合物的抗PD-1 Ab是以高特異性和親和力結合PD-1，阻斷PD-L1和/或PD-L2的結合并抑制PD-1信號傳導途徑的免疫抑制作用的Ab。在本文公開的任何組合物或方法中，抗PD-1“抗體”包括結合PD-1受體并在抑制配體結合和上調免疫系統(tǒng)中顯示出與整個Ab相似的功能特性的抗原結合部分或片段。在某些實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分與nivolumab交叉競爭結合人PD-1。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分是嵌合、人源化或人單克隆Ab或其部分。在某些實施方案中，Ab是人源化Ab。在其它實施方案中，Ab是人Ab?？梢允褂肐gG1，IgG2，IgG3或IgG4同種型的Ab。

在某些實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分包含人IgG1或IgG4同種型的重鏈恒定區(qū)。在某些其它實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分的IgG4重鏈恒定區(qū)的序列含有S228P突變，其將絞鏈區(qū)中的絲氨酸殘基替換為通常在IgG1同種型抗體中的相應位置上存在的脯氨酸殘基。存在于nivolumab中的該突變防止Fab臂與內源性IgG4抗體交換，同時保留低親和力，以激活與野生型IgG4抗體相關的Fc受體(Wang等，2014)。在其它實施方案中，Ab包含輕鏈恒定區(qū)，其是人κ或λ恒定區(qū)。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分是mAb或其抗原結合部分。在本文所述的包括給予抗PD-1 Ab的任何治療方法的某些實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是pembrolizumab。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab選自美國專利號8,008,449中描述的人抗體17D8、2D3、4H1、4A11、7D3和5F4。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是MEDI0608(以前稱為AMP-514)、AMP-224或Pidilizumab(CT-011)。

在某些實施方案中，用于方法中的抗PD-1抗體可以用另一種PD-1或抗-PD-L1拮抗劑替代。例如，由于抗PD-L1抗體阻止PD-1和PD-L1之間的相互作用，從而對PD-1的信號傳導途徑產生類似的作用，抗PD-L1抗體可以代替抗PD-1抗體在本文公開的方法中使用。因此，在一個實施方案中，本發(fā)明涉及治療患有肺癌的受試者的方法，包括向受試者給予治療有效量的以下的組合：(a)抗癌劑，其是特異性結合程序性死亡配體1(PD-L1)受體并抑制PD-L1活性的抗體或其抗原結合部分(抗PD-L1抗體)；和(b)另一種抗癌劑(例如，基于鉑的雙重化療，抗VEGF抗體，EGFR靶向的TKI或抗CTLA4抗體)。在某些實施方案中，抗PD-L1 Ab是BMS-936559(以前為12A4或MDX-1105)(參見例如美國專利號7,943,743; WO 2013/173223)。在其它實施方案中，抗PD-L1 Ab是MPDL3280A(也稱為RG7446)(參見例如Herbst;美國專利號8,217,149)，MEDI4736(也稱為Durvalumab; Khleif，2013，參見美國專利號8,779,108或US 2014/0356353，提交于2014年5月6日)或MSB0010718C(也稱為Avelumab;參見US 2014/0341917)。

抗CTLA-4抗體

本發(fā)明的抗CTLA-4抗體結合人CTLA-4，以便破壞CTLA-4與人B7受體的相互作用。因為CTLA-4與B7的相互作用轉導導致具有CTLA-4受體的T細胞失活的信號，所以相互作用的破壞有效地誘導，增強或延長這種T細胞的活化，從而誘導，增強或延長免疫反應。

在美國專利號6,984,720和7,605,238中公開了以高親和力特異性結合CTLA-4的HuMAb。其它抗PD-1 mAb已經描述于例如美國專利號5,977,318、6,051,227、6,682,736和7,034,121中。已經證明美國專利號6,984,720和7,605,238中公開的抗PD-1 HuMAb顯示出一種或多種以下特征：(a)以通過至少約10⁷ M^-1或約10⁹ M^-1或約10¹⁰ M^-1至10¹¹ M^-1或更高的平衡結合常數(shù)(K_a)反映的結合親和力特異性結合人CTLA-4，如通過Biacore分析測定的；(b)至少約10³、約10⁴或約10⁵ m^-1 s^-1的動力學結合常數(shù)(k_a)；(c)至少約10³、約10⁴或約10⁵ m^-1s^-1的動力學解離常數(shù)(k_d)；和(d)抑制CTLA-4與B7-1(CD80)和B7-2(CD86)的結合。可用于本發(fā)明的抗CTLA-4 Ab包括特異性結合人CTLA-4并顯示出至少一個，并且在一個實施方案中至少三個前述特征的mAb。示例性臨床抗CTLA-4 Ab是如在美國專利號6,984,720中公開的人mAb 10D1(現(xiàn)在稱為ipilimumab并且作為YERVOY?銷售)。Ipilimumab是用于本文公開的方法中的抗CTLA-4 Ab?？捎糜诒景l(fā)明方法的另一種抗CTLA-4 Ab是tremelimumab。

示例性臨床抗CTLA-4 Ab是如在美國專利號6,984,720中公開的人mAb 10D1(現(xiàn)在稱為ipilimumab并且作為YERVOY?銷售)。Ipilimumab是用于本文公開的方法中的抗CTLA-4 Ab。Ipilimumab是完全人IgG1單克隆抗體，其阻斷CTLA-4與其B7配體的結合，從而刺激晚期黑素瘤患者中的T細胞活化和改善總存活(OS)。

可用于本發(fā)明方法的另一種抗CTLA-4 Ab是tremelimumab(也稱為CP-675,206)。Tremelimumab是人IgG2單克隆抗CTLA-4抗體。Tremelimumab描述于WO/2012/122444、美國公開號2012/263677或國際公開號2007/113648 A2。

可用于所公開的方法中的抗CTLA-4 Ab還包括與人PD-1特異性結合并與ipilimumab或tremelimumab交叉競爭結合人CTLA-4或結合與ipilimumab或tremelimumab相同的人CTLA-4表位區(qū)的分離的Ab。在某些實施方案中，與ipilimumab或tremelimumab交叉競爭結合人CTLA-4或結合與ipilimumab或tremelimumab相同的人PD-1表位區(qū)域的Ab是包含人IgG1同種型的重鏈的Ab。對于給予人類受試者，這些交叉競爭性Ab是嵌合Ab，或人源化或人Ab?？捎玫目笴TLA-4 Ab還包括上述Ab的抗原結合部分，例如Fab，F(xiàn)(ab’)2，F(xiàn)d或Fv片段。

抗VEGF抗體

血管內皮生長因子(“VEGF”)是內皮細胞特異性促分裂原和血管發(fā)生的誘導劑。VEGF在血管發(fā)生和腫瘤生長和發(fā)展中具有顯著作用。在本發(fā)明的一些實施方案中，抗PD1抗體與抗VEGF拮抗劑組合給予。在某些實施方案中，抗VEGF拮抗劑是抗VEGF抗體，抗原結合分子或其片段。在某些實施方案中，抗VEGF抗體是貝伐單抗(描述于美國專利號7,169,901)或本領域已知的任何其它VEGF抗體，包括ranibizumab(美國專利號7,297,334)、VGX-100(美國專利號7,423,125)、r84(美國專利號8,034,905)、aflibercept(美國專利號5,952,199)、IMC-18F1(美國專利號7,972,596)、IMC-1C11(PCT/US2000/02180)和ramucirumab(美國專利號7,498,414)。

化療和基于鉑的化療

在一些實施方案中，抗PD1抗體與本領域已知的任何化療組合給予。在某些實施方案中，化療是基于鉑的化療?；阢K的化療是鉑的配位絡合物。在一些實施方案中，基于鉑的化療是鉑雙重化療。在一個實施方案中，化療以針對特定適應癥的批準劑量給予。在其它實施方案中，化療以本文公開的任何劑量給予。在一些實施方案中，基于鉑的化療是順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、沙鉑、吡鉑(picoplatin)、奈達鉑、三鉑(Triplatin)、Lipoplatin或其組合。在某些實施方案中，基于鉑的化療是本領域已知的任何其它基于鉑的化療。在一些實施方案中，化療是核苷酸類似物吉西他濱。在一個實施方案中，化療是葉酸抗代謝物。在一個實施方案中，葉酸抗代謝物是培美曲塞。在某些實施方案中，化療是紫杉烷。在其它實施方案中，紫杉烷是紫杉醇。在一些實施方案中，化療是本領域已知的任何其它化療。在某些實施方案中，與抗PD1抗體組合給予至少一種、至少兩種或更多種化療劑。在一些實施方案中，抗PD1抗體與吉西他濱和順鉑組合給予。在一些實施方案中，抗PD1抗體與培美曲塞和順鉑組合給予。在某些實施方案中，抗PD1抗體與吉西他濱和培美曲塞組合給予。在一個實施方案中，抗PD1抗體與紫杉醇和卡鉑組合給予。在一個實施方案中，另外給予抗CTLA4抗體。

酪氨酸激酶抑制劑

在某些實施方案中，抗PD-1抗體與酪氨酸激酶抑制劑組合給予。在某些實施方案中，酪氨酸激酶抑制劑是吉非替尼，埃羅替尼，其組合或本領域已知的任何其它酪氨酸激酶抑制劑。在一些實施方案中，酪氨酸激酶抑制劑作用于表皮生長因子受體(EGFR)。在一個實施方案中，另外給予抗CTLA4抗體。

肺癌的護理標準療法

用于不同類型的癌癥的護理標準療法是本領域技術人員公知的。例如，國家綜合癌癥網絡(NCCN)，一個美國21個主要癌癥中心的聯(lián)盟，公布了NCCN腫瘤學臨床實踐指南(NCCN GUIDELINES?)，其提供關于各種癌癥的護理標準治療的最新詳細信息(參見NCCN GUIDELINES?, 2014)。

NSCLC是美國和全世界癌癥死亡的主要原因，超過乳腺癌、結腸癌和前列腺癌的組合。在美國，估計228,190例肺和支氣管的新病例將在美國診斷，并且由于該疾病將發(fā)生約159,480例死亡(Siegel等，2013)。大多數(shù)患者(約78％)被診斷患有晚期/復發(fā)性或轉移性疾病。來自肺癌的腎上腺轉移常見發(fā)生，約33％的患者具有這種轉移。NSCLC療法已經逐步改善OS，但益處已達到平臺期(晚期患者的中位OS僅為1年)。1L治療后幾乎所有這些受試者都發(fā)生進展，在不顯療效的環(huán)境中5年存活率僅為3.6％。從2005年到2009年，美國肺癌的總體5年相對存活率為15.9％(NCCN GUIDELINES?，2014 - 非小細胞肺癌)。

手術、放射治療(RT)和化療是通常用于治療NSCLC患者的三種方式。作為一類，與小細胞癌相比，NSCLC對化療和RT相對不敏感。一般來說，對于I期或II期疾病的患者，手術切除提供最佳的治愈機會，化療在術前和術后都越來越多地使用。RT還可用作患有可切除NSCLC的患者的輔助治療，主要的局部治療或用于患有不可治愈NSCLC的患者的姑息治療。

具有良好表現(xiàn)狀態(tài)(PS)的IV期疾病患者受益于化療。許多藥物，包括鉑劑(例如順鉑，卡鉑)，紫杉烷劑(例如紫杉醇，白蛋白結合的紫杉醇，多西他賽)，長春瑞濱，長春堿，依托泊苷，培美曲塞和吉西他濱，可用于IV期NSCLC。使用許多這些藥物的組合產生30％至40％的1年存活率并且優(yōu)于單一藥劑。還開發(fā)了用于治療晚期肺癌的特異性靶向治療。例如，貝伐單抗(AVASTIN?)是阻斷血管內皮生長因子A(VEGF-A)的mAb。埃羅替尼(TARCEVA?)是表皮生長因子受體(EGFR)的小分子TKI?？诉蛱婺?XALKORI?)是靶向ALK和MET的小分子TKI，并且用于在攜帶突變的ALK融合基因的患者中治療NSCLC。西妥昔單抗(ERBITUX?)是靶向EGFR的mAb。

在具有鱗狀細胞NSCLC的患者中存在特定的未滿足的需求(代表高達所有NSCLC的25％)，因為在第一線(1L)治療之后幾乎沒有治療選擇。單一藥劑化療是用基于鉑的雙重化療(Pt-doublet)進展后的護理標準，導致中位OS約7個月。多西他賽仍然是這一治療方案中的基準治療，盡管埃羅替尼也可以以較低的頻率使用。培美曲塞也顯示產生臨床上等效的療效結果，但與晚期NSCLC患者的第二線(2L)治療中的多西他賽相比，副作用明顯更少(Hanna等人，2004)。目前沒有治療被批準用于超過第三線(3L)環(huán)境的肺癌。培美曲塞和貝伐單抗在鱗狀NSCLC中未被批準，并且分子靶向治療具有有限的應用。最近Oncothyreon和Merck KgaA的STIMUVAX?不能在3期試驗中改善OS，ArQule和Daiichi Sankyo的c-Met激酶抑制劑tivantinib不能滿足存活終點，Eli Lilly的ALIMTA?與羅氏的AVASTIN?聯(lián)用不能在晚期研究中改善OS，以及Amgen和Takeda Pharmaceutical在晚期試驗中用小分子VEGF-R拮抗劑motesanib未能滿足臨床終點，加重了晚期肺癌的未滿足的需求。

肺癌的免疫治療

顯然需要對于在多線靶向治療上進展的患者的有效藥劑，以及延長存活時間超過目前標準治療的療法。最近，涉及免疫治療，特別是阻斷免疫檢查點(包括CTLA-4，PD-1和PD-L1抑制途徑)的較新方法顯示出前景(Creelan等，2014)。因此，ipilimumab與化療組合在小細胞和非小細胞肺癌中同樣表現(xiàn)出令人鼓舞的結果。此外，雙重檢查點阻斷策略，例如組合抗PD-1和抗CTLA-4的那些已被證明在治療黑素瘤中是高度有效的(Wolchok等人，2013; WO2013/173223)，并且其它組合，包括抗PD-L1、抗LAG-3或抗KIR，經試驗以增加腫瘤反應的比例和持久性。通過類比于黑素瘤，NSCLC患者可以從不同免疫治療藥物的組合或這些藥物與靶向劑或其它治療(包括手術，放射，標準癌癥化療或疫苗)的組合中受益。然而，當免疫治療劑與其它抗癌劑組合時，有時觀察到令人驚訝和意想不到的并發(fā)癥。因此，免疫治療(包括免疫檢查點抑制劑藥物例如抗CTLA-4或抗PD-1 Ab)與其它抗癌劑的組合是不可預測的，并且必須在臨床試驗中仔細評估安全性和功效。雖然nivolumab和ipilimumab的組合已經證明在治療黑素瘤中是非常有效的，具有可控的毒性(Wolchok等人，2013)，但是迄今為止尚不知道這種組合在人受試者中是否比用單個藥劑治療NSCLC和其它癌癥顯著更有效。

藥物組合物和劑量

本發(fā)明的治療劑可以在組合物中構成，例如含有Ab或TKI和藥學上可接受的載體的藥物組合物。如本文所用，“藥學上可接受的載體”包括生理上相容的任何和所有溶劑、分散介質、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。在一個實施方案中，用于含有Ab的組合物的載體適于靜脈內、肌內、皮下、腸胃外、脊柱或表皮給予(例如通過注射或輸注)，而含有TKI的組合物的載體適合于非-腸胃外，例如口服給予。本發(fā)明的藥物組合物可以包括一種或多種藥學上可接受的鹽、抗氧化劑、水性和非水性載體，和/或佐劑，例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。

調節(jié)劑量方案以提供最佳的所需反應，例如最大治療反應和/或最小不良反應。對于給予抗PD-1 Ab，特別是與另一種抗癌劑組合，劑量范圍可以為約0.01至約20 mg/kg，約0.1至約10 mg/kg，約0.1至約5mg/kg，約1至約5 mg/kg，約2至約5 mg/kg，約7.5至約12.5 mg/kg或約0.1至約30 mg/kg受試者的體重。例如，劑量可以是約0.1，約0.3，約1，約2，約3，約5或約10 mg/kg體重，或約0.3，約1，約2，約3或約5 mg/kg體重。給藥方案通常設計成基于Ab的典型藥代動力學性質實現(xiàn)導致持續(xù)受體占有(RO)的暴露。示例性治療方案需要約每周一次，約每2周一次，約每3周一次，約每4周一次，約每月一次，約每3-6個月一次或更長時間一次給予。在某些實施方案中，將抗PD-1 Ab例如nivolumab約每2周一次給予受試者。在其它實施方案中，大約每3周一次給予Ab。劑量和安排可以在治療過程中改變。例如，抗PD-1單一療法的給藥方案可以包括按以下給予Ab：(i)在約6周的周期中約每2周；(ii)約每4周，持續(xù)約六次劑量，然后約每三個月；(iii)約每3周；(iv)約3-約10 mg/kg一次，然后每約2-3周約1 mg/kg。考慮到IgG4抗體通常具有2-3周的半衰期，本發(fā)明的抗PD-1 Ab的劑量方案包括通過靜脈內給予約0.3-1 mg/kg約0 mg/kg體重，1-5 mg/kg體重，或約1-約3 mg/kg體重，其中Ab在至多約6周或約12周周期中每約14-21天給予，直到完全反應或確定進行性疾病。在一些實施方案中，本文公開的抗體治療或任何組合治療持續(xù)至少約1個月，至少約3個月，至少約6個月，至少約9個月，至少約1年，至少約18個月，至少約24個月，至少約3年，至少約5年或至少約10年。

當與其它癌癥劑組合使用時，與單一療法劑量相比，抗PD-1 Ab的劑量可以降低。例如，顯著低于典型的約3 mg/kg約每3周，例如約0.1 mg/kg或更少約每3或4周的nivolumab的劑量被認為是亞治療劑量。接受0.3 mg/kg至10 mg/kg的nivolumab給藥的15名受試者的受體占有率數(shù)據(jù)表明在該劑量范圍內PD-1占有顯示出是劑量非依賴性的。在所有劑量中，平均占有率為85％(范圍，70％至97％)，平均平臺占有率為72％(范圍為59％至81％)(Brahmer等人，2010)。因此，0.3 mg/kg給藥可以允許足夠的暴露以導致最大的生物活性。

盡管在沒有達到最大耐受劑量(MTD)的情況下實現(xiàn)每兩周高達約10 mg/kg的更高的nivolumab單一治療劑量，但在檢查點抑制劑加上抗血管發(fā)生治療的其它試驗中報道的顯著毒性(參見例如Johnson等，2013; Rini等，2011)支持低于10 mg/kg的nivolumab劑量的選擇。

在某些實施方案中，抗PD1抗體(或抗PD-L1抗體)的劑量是藥物組合物中的固定劑量。在其它實施方案中，本發(fā)明的方法可以統(tǒng)一劑量(不考慮患者的體重而給予患者的劑量)使用。例如，nivolumab的統(tǒng)一劑量可以是約240mg。例如，pembrolizumab的統(tǒng)一劑量可以是約200mg。

Ipilimumab(YERVOY?)被批準用于治療黑色素瘤，以3 mg/kg靜脈內給予，每3周一次，持續(xù)4個劑量。因此，在一些實施方案中，約3 mg/kg是與抗PD-1 Ab組合使用的ipilimumab的最高劑量。然而，在某些實施方案中，當與nivolumab組合時，抗CTLA-4 Ab例如ipilimumab可以在約每兩或三周約0.3至約10 mg/kg，約0.5至約10 mg/kg，約0.5至約5 mg/kg或約1至約5 mg/kg體重的范圍內給予。在其它實施方案中，按照與nivolumab不同的劑量方案給予ipilimumab。在一些實施方案中，約每周，約每兩周，約每三周，約每四周，約每五周，約每六周，約每七周，約每八周，約每九周，約每十周，約每十一周，約每十二周或約每十五周給予ipilimumab。顯著低于批準的大約每3周約3 mg/kg的ipilimumab的劑量，例如約每3或4周約0.3 mg/kg或更少，被認為是亞治療劑量。已經顯示，3 mg/kg的nivolumab和3 mg/kg的ipilimumab的組合給藥超過黑色素瘤群體中的MTD，而1 mg/kg的nivolumab加3 mg/kg的ipilimumab或3 mg/kg的nivolumab加上1 mg/kg的ipilimumab的組合被發(fā)現(xiàn)在黑素瘤患者中是可耐受的(Wolchok等人，2013)。因此，盡管nivolumab每2周靜脈內給予可耐受高達10 mg/kg，但在某些實施方案中，當與ipilimumab組合時，抗PD-1 Ab的劑量不超過約3 mg/kg。在某些實施方案中，基于風險-益處和PK-PD評估，所用劑量包含約1 mg/kg的nivolumab加約3 mg/kg的ipilimumab，約3 mg/kg的nivolumab加約1 mg/kg的ipilimumab，或約3 mg/kg的nivolumab加約3 mg/kg的ipilimumab的組合，各以約每2-4周一次，在某些實施方案中約每3周一次的給藥頻率給藥。在某些其它實施方案中，給予約0.1，約0.3，約1，約2，約3或約5 mg/kg劑量的nivolumab與約0.1，約0.3，約1，約2，約3或約5 mg/kg劑量的ipilimumab的組合，約每2周一次，約每3周一次或約每4周一次。

在某些實施方案中，抗-PD-1 Ab和抗CTLA-4 Ab的組合在誘導期中每2或3周靜脈內給予受試者，進行1、2、3或4次給予。在某些實施方案中，nivolumab和ipilimumab的組合在誘導期中約每3周靜脈內給予約4次。誘導期之后是維持期，在此期間每兩或三周僅以約0.1，約0.3，約1，約2，約3，約5或約10 mg/kg的劑量向受試者給予抗PD-1 Ab，只要治療證明是有效的或直到不可控的毒性或疾病進展發(fā)生。在某些實施方案中，在維持期期間，約每2周以約3 mg/kg體重的劑量給予nivolumab。

在某些實施方案中，將抗PD1抗體和抗CTLA-4抗體配制為單一組合物，其中抗PD1抗體的劑量和抗CTLA04抗體的劑量以1：50、1：40、1：30、1：20、1：10、1：5、1：3、1：1、3：1、5：1、10：1、20：1、30：1、40：1或50：1的比率組合。在其它實施方案中，抗CTLA-4抗體的劑量是固定劑量。在某些實施方案中，抗CTLA-4抗體的劑量是統(tǒng)一劑量，其給予患者而不考慮體重。在具體實施方案中，抗CTLA-4抗體的統(tǒng)一劑量為約80mg。

對于nivolumab與其它抗癌劑的組合，這些藥劑以其批準的劑量給予。持續(xù)治療，只要觀察到臨床益處或直到不可接受的毒性或疾病進展發(fā)生。然而，在某些實施方案中，所給予的這些抗癌劑的劑量顯著低于批準的劑量，即亞治療劑量的藥劑與抗PD-1 Ab組合給予?？筆D-1 Ab可以以已顯示在臨床試驗中作為單一療法產生最高功效的劑量給予，例如約3 mg/kg的nivolumab每約三周給予一次(Topalian等，2012a; Topalian等，2012)，或以顯著更低的劑量，即亞治療劑量給予。

劑量和頻率根據(jù)受試者中Ab的半衰期而變化。通常，人Ab顯示最長的半衰期，其次是人源化Ab，嵌合Ab和非人Ab。給藥的劑量和頻率可以根據(jù)治療是預防性的還是治療性的而變化。在預防性應用中，通常在長時間內以相對不頻繁的間隔給予相對低的劑量。一些患者在他們的余生中繼續(xù)接受治療。在治療性應用中，有時需要以相對短的間隔的相對高的劑量，直到疾病的進展減少或終止，或者直到患者顯示疾病癥狀的部分或完全改善。此后，可以對患者給予預防性方案。

本發(fā)明的藥物組合物中活性成分的實際劑量水平可以變化，以獲得對于具體患者、組合物和給藥模式有效實現(xiàn)所需治療反應的活性成分的量，而對患者沒有過度毒性。所選擇的劑量水平將取決于多種藥代動力學因素，包括所使用的本發(fā)明的具體組合物的活性，給藥途徑，給藥時間，所使用的具體化合物的排泄速率，治療持續(xù)時間，與所使用的具體組合物組合使用的其它藥物、化合物和/或材料，所治療的患者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康和以前的病史，以及醫(yī)學領域中熟知的類似因素。本發(fā)明的組合物可以通過一種或多種給藥途徑使用本領域眾所周知的多種方法中的一種或多種給予。如本領域技術人員將理解的，給藥途徑和/或模式將根據(jù)期望的結果而變化。

本發(fā)明的方法

本公開提供了治療患有肺癌的受試者的方法，所述方法包括向受試者給予治療有效量的以下的組合：(a)抗癌劑，其是特異性結合PD-1受體并抑制PD-1活性的Ab或其抗原結合部分；和(b)另一種抗癌劑。由于NSCLC包含超過85％的肺腫瘤，在實施方案中，肺癌是NSCLC。在其它實施方案中，受試者是人類患者。在某些實施方案中，受試者是未接受化療的患者(例如，之前未接受任何化療的患者)。在其它實施方案中，受試者已經接受另一種癌癥療法(例如，化療)，但是對所述另一種癌癥療法具有抗性或難治性。在某些具體實施方案中，受試者具有表達EGFR或KRAS基因的突變形式的癌細胞。在某些實施方案中，受試者具有為PDL1 +的癌細胞。在某些實施方案中，受試者具有為PDL1-的癌細胞。在某些實施方案中，受試者具有鱗狀的癌細胞。在某些實施方案中，受試者具有非鱗狀的癌細胞。

在某些實施方案中，本發(fā)明的組合療法(例如，給予抗PD-1抗體和另一種抗癌劑)有效地增加受試者的存活持續(xù)時間。例如，當與僅用一種治療(例如，抗PD-1抗體或另一種抗癌劑)治療的另一個受試者相比時，受試者的存活持續(xù)時間增加至少約2個月。在某些實施方案中，本發(fā)明的組合療法(例如，給予抗PD-1抗體和另一種抗癌劑)有效地增加受試者的無進展存活的持續(xù)時間。例如，當與僅用一種治療(例如，抗PD-1抗體或另一種抗癌劑)治療的另一個受試者相比時，受試者的無進展存活期提高至少約2個月。在某些實施方案中，本發(fā)明的組合療法(例如，給予抗PD-1抗體和另一種抗癌劑)有效地增加一組受試者的反應率。例如，一組受試者中的反應率當與僅用一種治療(例如抗PD-1抗體或另一種抗癌劑)治療的另一組受試者相比時，增加至少約10％，至少約9％，至少約8％，至少約7％，至少約6％，至少約5％，至少約4％，至少約3％，至少約2％或至少約1％。在某些實施方案中，當與僅用一種療法治療的另一組受試者相比時，反應率增加至少約2％。

適用于所公開的方法的抗PD-1和抗PD-L1抗體

適合用于所公開的方法的抗PD-1 Ab是以高特異性和親和力結合PD-1，阻斷PD-L1和/或PD-L2的結合并抑制PD-1信號傳導途徑的免疫抑制作用的抗體。在本文公開的任何治療方法中，抗PD-1或抗CTLA-4“抗體”包括分別結合PD-1或CTLA-4受體，并且顯示類似于整個Ab在抑制配體結合和上調免疫系統(tǒng)中的功能特性的功能特性的抗原結合部分或片段。在某些實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分與nivolumab交叉競爭結合人PD-1。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分是嵌合，人源化或人單克隆Ab或其部分。在用于治療人受試者的某些實施方案中，Ab是人源化Ab。在用于治療人受試者的其它實施方案中，Ab是人Ab?？梢允褂肐gG1，IgG2，IgG3或IgG4同種型的Ab。

在某些實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分包含人IgG1或IgG4同種型的重鏈恒定區(qū)。在某些其它實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分的IgG4重鏈恒定區(qū)的序列含有S228P突變，其將絞鏈區(qū)中的絲氨酸殘基替換為通常在IgG1同種型抗體中的相應位置上存在的脯氨酸殘基。存在于nivolumab中的該突變防止Fab臂與內源性IgG4抗體交換，同時保留低親和力，以激活與野生型IgG4抗體相關的Fc受體(Wang等，2014)。在其它實施方案中，Ab包含輕鏈恒定區(qū)，其是人κ或λ恒定區(qū)。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab或其抗原結合部分是mAb或其抗原結合部分。在本文所述的包括給予抗PD-1 Ab的任何治療方法的某些實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是pembrolizumab。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab選自美國專利號8,008,449中描述的人抗體17D8、2D3、4H1、4A11、7D3和5F4。在其它實施方案中，抗PD-1 Ab是MEDI0608 (以前稱為AMP-514)，AMP-224或Pidilizumab(CT-011)。因為抗PD-1和抗PD-L1靶向相同的信號傳導途徑并且已經在臨床試驗中顯示出在多種癌癥(包括RCC)中表現(xiàn)出相似水平的功效(參見Brahmer等人，2012; Topalian等人，2012a; WO 2013/173223)，抗PD-L1 Ab可以在本文公開的任何治療方法中替代抗PD-1 Ab。在某些實施方案中，抗PD-L1 Ab是BMS-936559(以前為12A4或MDX-1105)(參見例如美國專利號7,943,743; WO 2013/173223)。在其它實施方案中，抗PD-L1 Ab是MPDL3280A(也稱為RG7446)(參見例如Herbst等人2013;美國專利8,217,149)或MEDI4736(Khleif，2013)。

抗PD-1 Ab與抗CTLA-4 Ab的組合，用于治療NSCLC

本公開還提供了用于治療RCC的組合治療方法，其中抗PD-1 Ab與另一種抗癌劑組合，所述另一種抗癌劑是特異性結合CTLA-4并抑制CTLA-4活性的Ab或其抗原結合部分。本文已經證明了抗PD-1 Ab，nivolumab和抗CTLA-4 Ab，ipilimumab的組合(參見實施例4)在NSCLC患者中產生早期，持久的抗腫瘤活性。因此，在某些實施方案中，與抗PD-1 Ab組合使用的抗CTLA-4 Ab是ipilimumab。在實施方案中，抗CTLA-4 Ab是tremelimumab。在其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab或其抗原結合部分是與ipilimumab交叉競爭結合人CTLA-4的Ab或其部分。在某些其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab或其抗原結合部分是嵌合，人源化或人mAb或其部分。在其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab或其抗原結合部分包含人IgG1或IgG4同種型的重鏈恒定區(qū)。在一些實施方案中，抗CTLA-4 Ab包含人IgG1同種型的重鏈恒定區(qū)。

對于抗PD-1和抗CTLA-4 Ab的組合，給藥方案包括誘導期(本文也稱為誘導階段)，在此期間一個或多個，在一些實施方案中約四個組合劑量的抗PD-1和抗CTLA-4抗體給予患者，隨后是維持期或階段，包括單獨給予抗PD-1 Ab，即不包括抗CTLA-4 Ab。在某些實施方案中，所述方法包括(a)誘導期，其中所述抗PD-1和抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分以約2、約4、約6、約8或約10個劑量組合給予，每個劑量范圍從約0.1至約10.0 mg/kg體重，約每2周至少一次，約每3周一次或約每4周一次給予，然后是(b)維持期，其中不給予抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分，并且抗PD-1抗體或其抗原結合部分以約0.1至約10 mg/kg，約1至約10mg/kg，約0.1至約5 mg/kg，約1至約5 mg/kg或約2.5至約12.5 mg/kg的劑量范圍，約每2周至少一次，約每3周一次，或約每4周一次重復給予。

在某些實施方案中，(a)誘導期包含以3周間隔給予至少約4個劑量，其中抗PD-1和抗CTLA-4 Ab以以下劑量給予：(i)約0.1 mg/kg抗PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (ii)約0.3 mg/kg抗PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (iii)約1 mg/kg抗PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (iv)約3 mg/kg抗PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (v)約5 mg/kg抗PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (vi)約10 mg/kg抗-PD-1 Ab和約3 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (vii)約0.1 mg/kg抗PD-1 Ab和約1 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (viii)約0.3 mg/kg抗PD-1 Ab和約1 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (ix)約1 mg/kg抗PD-1 Ab和約1 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (x)約3 mg/kg抗PD-1 Ab和約1 mg/kg抗CTLA-4 Ab; (xi)約5 mg/kg抗PD-1 Ab和約1 mg/kg抗CTLA-4 Ab;或(xii)約10 mg/kg抗-PD-1 Ab和約1 mg/kg抗-CTLA-4 Ab，和(b)維持期包括約每2周重復給予約3 mg/kg的劑量的抗PD-1 Ab。

因為先前通過抑制免疫檢查點用免疫治療證明的臨床效果的持久性(參見例如WO 2013/173223)，在替代實施方案中，維持期可以包括有限數(shù)量的劑量，例如約1-10個劑量，或可以包括以長的間隔給藥，例如約每3-6個月一次或約每1-2年一次或更長的間隔給藥。維持期可以繼續(xù)，只要觀察到臨床益處或直到發(fā)生不可控的毒性或疾病進展。

鑒于在12周后給予的ipilimumab是否有助于黑色素瘤的臨床益處的不確定性，以及美國食品和藥物管理局(FDA)和歐洲藥品管理局(EMA)批準的YERVOY?的時間表是每3周一次總共4個劑量的事實，在一些實施方案中，在誘導期期間約每3周一次給予抗CTLA-4 Ab，總共約4個劑量。因此，在某些實施方案中，所述方法包括(a)由以約3周的間隔給予的約4個組合劑量組成的誘導期，其中(i)所述抗PD-1抗體或其抗原結合部分以約3 mg/kg體重給予，并且抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分以約1 mg/kg體重給予; (ii)抗PD-1抗體或其抗原結合部分以約1 mg/kg體重給予，并且抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分以約3 mg/kg體重給予; (iii)抗PD-1抗體或其抗原結合部分以約1 mg/kg體重給予，并且抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分以約1 mg/kg體重給予;或(iv)抗PD-1抗體或其抗原結合部分以約3 mg/kg體重給予，并且抗CTLA-4抗體或其抗原結合部分以約3 mg/kg體重給予;和(b)維持期包括以約每2周約3 mg/kg的劑量重復給予抗PD-1抗體或其抗原結合部分。在這些方法的進一步的實施方案中，繼續(xù)維持期，只要觀察到臨床益處或直到不可接受或不可控的毒性或疾病進展發(fā)生。

在本發(fā)明方法的某些實施方案中，抗PD-1 Ab是nivolumab。在其它實施方案中，其是pembrolizumab。在其它實施方案中，抗CTLA-4 Ab是ipilimumab。在另外的實施方案中，抗CTLA-4 Ab是tremelimumab。通常，將抗PD-1和抗CTLA-4 Ab配制用于靜脈內給予。在某些實施方案中，當抗PD-1和抗CTLA-4 Ab組合給予時，它們在彼此30分鐘內給予?？梢允紫冉o予Ab，即，在某些實施方案中，在抗CTLA-4 Ab之前給予抗PD-1 Ab，而在其它實施方案中，在抗PD-1 Ab之前給予抗CTLA-4 Ab。通常，各Ab通過在60分鐘的時間段內靜脈內輸注給予。在某些實施方案中，抗PD-1和抗CTLA-4 Ab同時給予，作為單一組合物在藥學上可接受的制劑中混合用于同時給予，或作為在藥學上可接受的制劑中的各Ab的單獨組合物同時給予。

本發(fā)明方法的某些實施方案包括(a)誘導期，其包括約每3周通過靜脈內輸注給予nivolumab，然后通過靜脈內輸注給予ipilimumab，持續(xù)約4個組合劑量，隨后(b)誘導治療的第四個劑量后或第113天后(如果由于治療延遲而沒有給予誘導治療的第四個劑量)3周開始，約每2周靜脈內輸注給予nivolumab的維持劑量。

在某些實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分以亞治療劑量給予。在某些其它實施方案中，以亞治療劑量給予抗CTLA-4 Ab或其抗原結合部分。在另外的實施方案中，抗-PD-1 Ab或其抗原結合部分和抗CTLA-4 Ab或其抗原結合部分均以亞治療劑量給予。

試劑盒

用于治療用途的包含抗PD-1 Ab和另一種抗癌劑的試劑盒也在本發(fā)明的范圍內。試劑盒通常包括指示試劑盒內容物的預期用途的標簽和使用說明。術語標簽包括在試劑盒上或與試劑盒一起提供的任何書寫或記錄的材料，或者另外伴隨試劑盒的材料。因此，本公開提供了用于治療患有肺癌的受試者的試劑盒，所述試劑盒包含：(a)范圍約0.1至約10 mg/kg體重的抗癌劑的劑量，其為特異性結合PD-1受體并抑制PD-1活性的Ab或其抗原結合部分; (b)另一種抗癌劑的劑量，其是(i)基于鉑的雙重化療; (ii)EGFR靶向酪氨酸激酶抑制劑; (iii)貝伐單抗;或(iv)范圍約0.1至約10 mg/kg體重的特異性結合并抑制CTLA-4的抗體或其抗原結合部分的劑量;和(c)關于在本文公開的任何組合治療方法中使用抗PD-1 Ab和其它抗癌劑的說明書。在某些實施方案中，抗PD-1，抗CTLA-4 Ab和/或TKI可以共同包裝在單位劑型中。在用于治療人類患者的某些實施方案中，試劑盒包含本文公開的抗人PD-1 Ab，例如，nivolumab或pembrolizumab。在其它實施方案中，試劑盒包含本文公開的抗人CTLA-4 Ab，例如ipilimumab或tremelimumab。

通過以下實施例進一步說明本發(fā)明，這些實施例不應被解釋為進一步的限制。在本申請中引用的所有參考文獻的內容通過引用明確地并入本文。

實施例1

用Nivolumab組合基于鉑的雙重化療(PT-DC)治療非小細胞肺癌(NSCLC)

一線PT-DC已經證明在NSCLC中1年總體存活(OS)率高達54％;然而，仍然需要具有改善的長期總存活(OS)的治療。報道了1期多組研究(CA209-012; NCT01454102)的結果，該研究評估與PT-DC組合的nivolumab用于一線治療具有晚期NSCLC的未經化療的患者(pt)。

方法

在1期劑量遞減試驗中，根據(jù)組織學，將具有晚期NSCLC(例如IIIB或IV期NSCLC)的未經化療的患者(N = 56)分配到4個組的1個中(參見圖1的研究設計)。具體地，患者接受nivolumab 10 mg/kg IV Q3W(N10)加上同時的IV吉西他濱(gem)1250 mg/m² +順鉑(cis)75 mg/m²(鱗狀[sq.n = 12])或培美曲塞(pem) 500 mg/m² + cis 75 mg/m² (非鱗狀(非-sq); n=15)，或者nivolumab 10 mg/kg(N10，n = 15)或nivolumab 5 mg/kg(N5，n = 14)IV Q3W加IV紫杉醇(pac)200 mg/m² +卡鉑(carb)AUC 6(sq和非sq)以評價劑量限制性毒性(DLT)。PT-DC與nivolumab同時給予4個周期，然后單獨給予nivolumab(10 mg/kg或5 mg/kg，IV Q3W)直到進展或不可接受的毒性。如果研究者評估患者得到臨床益處和耐受研究治療，則允許患者繼續(xù)研究治療超過實體瘤的反應評價標準(RECIST)定義的進展。該研究使用基于修改的毒性概率區(qū)間方法的劑量遞減設計，其中在療法的前2個周期(6周)評價了nivolumab相關的劑量限制性毒性(DLT)。添加nivolumab 5 mg/kg +紫杉醇(Pac)/卡鉑(Carb)組基于方案修訂，而不是基于根據(jù)方案觀察到的DLT劑量遞減。

在第10周，第16周，第22周和之后每3個月使用實體瘤的反應評價標準(RECIST)1.1評價功效，直到疾病進展。通過治療組和劑量水平計算客觀反應率(ORR)，無進展存活(PFS)率和反應持續(xù)時間(DOR)。使用Kaplan-Meier方法估計時間-事件終點。根據(jù)National Cancer Institute(NCI)Common Terminology Criteria for Adverse Events(CTCAE)4.0版對不良事件(AE)進行分級。如果研究者評估AE與組合中的任何藥物相關，則認為AE與研究治療相關。與化療相關的高級AE通過在需要化療中止前進行最多2個劑量的化療減少進行控制。由于毒性而中止化療的患者被允許繼續(xù)使用單獨的nivolumab進行研究治療。滿足方案指定的對于nivolumab劑量中止的標準的高級AE需要停止所有研究治療。

結果

患者群體和處理

此分析基于2014年9月的數(shù)據(jù)庫鎖。共有56名患者在四組中進行治療(表1)。總體中位隨訪時間為82.6周(范圍為13.9-152.6周)。在各組中，中位隨訪時間范圍為50.5至114.9周。在分析時，53名患者(95％)已中止研究治療：39名(70％)由于疾病進展而中止；12名(21％)由于與任何研究藥物相關的AE而中止；剩余的2名患者由于最大臨床益處(n = 1)和治療醫(yī)學腫瘤學家選擇從研究治療的患者中撤出(n = 1)而中止。

表1.用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的基線特征

^a位點確定的EGFR突變試驗

EGFR = 表皮生長因子受體

功效

腫瘤反應率總結在表2中。在治療組中，ORR范圍為33-47％，并且在鱗狀和非鱗狀患者中觀察到。ORR在兩個nivolumab + Pac/Carb組之間是相似的。進行性疾病(PD)作為最佳總體反應是罕見的(用nivolumab 10 mg/kg + Gem/Cis、nivolumab 10 mg/kg + Pem/Cis、nivolumab 10 mg/kg + Pac/Carb和nivolumab 5 mg/kg + Pac/Carb，分別為0、0、27％和7％)。在nivolumab 5 mg/kg + Pac/Carb組中的一個患者表現(xiàn)出非常規(guī)的“免疫相關”反應，在新的損傷存在下靶損傷減少59％(未使用免疫相關反應標準[irRC])。

表2.用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的腫瘤反應

^a通過隨后根據(jù)RECIST 1.1的腫瘤評估來確認所有完全和部分反應

^b從第一次反應到記錄進展、在最后一個nivolumab劑量的100天內死亡或最后一次腫瘤評估(對于刪失+數(shù)據(jù))的時間。從Kaplan-Meier曲線確定估計的中位DOR

+ =反應持續(xù)；CI =置信區(qū)間; NR =未達到

OR的特征顯示于圖2中。在nivolumab 10 mg/kg + Gem/Cis、nivolumab 10 mg/kg + Pem/Cis、nivolumab 10 mg/kg + Pac/Carb和nivolumab 5 mg/kg + Pac/Carb組中分別在3/4、3/7、7/7和4/6名患者中觀察到通過第一次腫瘤評估(10周)的反應。24位反應者中的17位(71％)在第一次腫瘤評估時顯示出反應。對于因疾病進展以外的原因中止治療并在中止治療后繼續(xù)反應的6名有反應的患者，治療持續(xù)時間和反應見表3。

表3¹. 患者由于疾病進展以外的原因中止治療的持續(xù)時間和反應

+ = 持續(xù)反應

¹截至2014年3月數(shù)據(jù)庫鎖。

在圖3中顯示了每個治療組的靶損傷隨時間相對于基線的百分比變化。靶損傷腫瘤負荷的最佳百分比變化顯示在圖4中。到第18周時，nivolumab 10 mg/kg + Pem/Cis組中的一名患者和nivolumab 10 mg/kg + Pac/Carb組中的一名患者具有> 80％的腫瘤負荷降低。治療組中的PFS和OS結果顯示在表4和圖5中。24周時的PFS率范圍為38-71％，治療組的中位PFS為21.0-31.0周。一年OS率范圍為50-87％。18個月OS率范圍為33-86％。24個月OS率范圍為25-62％。在nivolumab 5 mg/kg + Pac/Carb組中，中位OS為NR。

表4.用nivolumab加基于鉑的化療治療的NSCLC患者的存活結果

安全性

在治療的前6周中沒有觀察到DLT?？傮w而言，所有四個治療組中93％的患者出現(xiàn)任何級別的治療相關AE(表5)。最常見的治療相關AE(在> 30％的患者中觀察到)，包括疲勞，惡心，食欲減退和脫發(fā)，通常與化療相關。45％的患者報告了治療相關的3/4級AE(表5)?？傮w而言，最常見的治療相關的3/4級AE是肺炎(4名患者，7％，通過方案算法管理)，疲勞和急性腎衰竭(各3名患者，5％)。nivolumab 10 mg/kg + Pac/Carb組的治療相關3/4級AE的發(fā)生率最高(11名患者，73％)；其中許多是實驗室異常(血紅蛋白減少，脂肪酶增加，中性粒細胞減少，嗜中性粒細胞計數(shù)減少，白細胞計數(shù)減少)，各自報告1名患者。在各治療組中，7名患者(13％)報告了任何級別的治療相關性肺炎，4名患者(7％)是3/4級。最常見的選擇AE類別(定義為具有需要更頻繁監(jiān)測和/或獨特干預的潛在免疫學病因的AE)是皮膚(34％任何級別；5％ 3/4級)、胃腸道(23％任何級別；4％ 3/4級)、輸注反應(23％任何級別；2％ 3/4級)、腎臟(14％任何級別；5％ 3/4級)和肺(13％任何級別；7％ 3/4級)。

表5.在用nivolumab加基于鉑的化療治療的所有NSCLC患者的≥15％中報告的治療相關AE

^a任何治療的患者的治療相關AE(任何級別)。在所有患者的10-15％中發(fā)生的治療相關的AE是：味覺障礙(14％)、超敏反應(14％; 1個3/4級事件)、嘔吐(14％)、粘膜炎癥(13％)、肌痛(13%)、肺炎(13%; 見正文)、輸注相關反應(11%)、白細胞減少(11%)、淋巴細胞減少(11％)、周圍感覺神經損傷(11％)和瘙癢(11％)。除非另有說明，均為1/2級。

結論

在未經化療的晚期NSCLC患者中，使用nivolumab組合不同的基于鉑的雙重化療方案的一線治療顯示類似于以前報道的基于鉑的標準雙重化療方案的抗腫瘤活性。這些結果表明，nivolumab加基于鉑的雙重化療與安全性概況有關，反映了nivolumab和化療的累加毒性。

實施例2

使用Nivolumab組合埃羅替尼治療表皮生長因子受體突變體(EGFR MT)NSCLC患者

臨床前研究顯示EGFR MT NSCLC中的EGFR信號傳導導致腫瘤PD-1配體1(PD-L1)的上調和抗腫瘤免疫的抑制。在EGFR MT鼠NSCLC模型中用抗PD-1抗體的治療緩解了免疫抑制，減少了腫瘤生長并促進了腫瘤細胞凋亡。EGFR酪氨酸激酶抑制劑(TKI)埃羅替尼被FDA批準用于EGFR MT NSCLC的一線治療，產生10.4個月的中位無進展存活(PFS)。本文報道了1期研究(CA209-003; NCT00730639)的中期結果，該研究評估在EGFR MT，未經化療的晚期NSCLC群組中nivolumab組合埃羅替尼的安全性和活性。

方法

未經化療的IIIB或IV期NSCLC患者每日接受nivolumab 3 mg/kg IV Q2W組合埃羅替尼150 mg PO，直到進展或不可接受的毒性(參見圖6的研究設計)?；颊呔哂蟹趋[狀組織學和EGFR MT NSCLC(基于位點確定的EGFR突變試驗)。允許先前使用EGFR TKI。使用實體瘤的反應評價標準(RECIST)1.1在第11周，第17周，第23周和之后每3個月評價功效，直到疾病進展。使用Kaplan-Meier方法估計時間-事件終點。根據(jù)National Cancer Institute(NCI)Common Terminology Criteria for Adverse Events(CTCAE)4.0版對不良事件(AE)進行分級。如果研究者評估AE與組合中的任何藥物相關，則認為AE與研究治療相關。滿足方案指定的對于nivolumab劑量中止的標準的高級AE，需要中止所有研究治療。由于埃羅替尼相關的毒性而中止埃羅替尼后，患者可繼續(xù)進行關于nivolumab單一療法的研究。埃羅替尼的劑量修改基于標簽中推薦的劑量。

結果

患者群體和處理

此分析基于2014年9月的數(shù)據(jù)庫鎖。用nivolumab和埃羅替尼治療的21名患者的基線特征顯示在表6中。

表6.用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者的基線特征

^a位點確定的EGFR突變試驗

^b第二突變

^c包括在20個患者的該亞組中的一個患者具有在數(shù)據(jù)分析時未報告的先前埃羅替尼治療

所有患者均有EGFR MT NSCLC。一名患者未接受過先前用埃羅替尼治療。中位隨訪時間為83.7周(范圍10.7，110.3周)。在分析時，17名患者(81％)已中止研究治療：12名(57％)由于疾病進展而中止；4(19％)由于與任何研究藥物相關的AE而中止治療；1名患者由于不良/不順應而中止。7名患者中止埃羅替尼和繼續(xù)單獨的nivolumab。

功效

腫瘤反應顯示在表7中。ORR為19％(中位反應持續(xù)時間[DOR] 70周;范圍60.1，83.7+周)。在9名患者(43％)中觀察到SD作為最佳總體反應。在20例獲得性埃羅替尼耐藥的患者中，3例(15％)獲得部分反應(表7)。9名患者(45％)具有SD作為最佳總體反應。7名患者的SD≥21周。一名患者表現(xiàn)出非常規(guī)的“免疫相關”反應(持續(xù)的;未使用免疫相關反應標準[irRC])，在非靶損傷(本文作為具有進行性疾病而包括在內)中進展后靶損傷減少50％。

表7.用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者的腫瘤反應

^a通過隨后根據(jù)RECIST 1.1的腫瘤評估來確認所有完全和部分反應

^b一個進行性疾病的患者具有持續(xù)的非常規(guī)反應，在非靶標損傷的初始最小生長后靶損傷減少50％。進展的具有反應的一個患者在進展部位(新的鎖骨上淋巴結)被移除后繼續(xù)治療

^c從第一次反應到記錄的進展、在最后一個nivolumab劑量的100天內死亡或最后一次腫瘤評估(對于刪失+數(shù)據(jù))的時間。從Kaplan-Meier曲線確定估計的中位DOR

+ =正在反應；CI =置信區(qū)間; NR =未達到

有反應患者的特征顯示在表8和圖7中。在先前接受多線EGFR抑制劑治療的患者以及具有T790M突變的患者中，觀察到反應。在分析時，2個患者正在反應中。在3個反應者(75％)中觀察到通過第一次腫瘤評估(第11周)的反應。隨著時間和根據(jù)靶損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化，顯示靶損傷腫瘤負荷相對于基線的百分比變化(圖8)。PFS和總存活(OS)結果顯示在表9和圖9中。24周時的PFS率為50％;中位PFS為29.4周。1年OS率為73％。18個月OS率為60％。24個月OS率為45％。中位OS為19.3個月。

表8.響應nivolumab加埃羅替尼的患者的特征

^a未經埃羅替尼治療的患者

^b一名患者表現(xiàn)出非常規(guī)的“免疫相關”反應(正在進行;未使用irRC)，在非靶損傷進展后靶損傷減少50％(本文作為具有進行性疾病包括在內)

+ =正在進行

表9.用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者的存活結果

注釋：OS率來自2015年3月的數(shù)據(jù)庫鎖。

安全性

在所有21名患者中報道了治療相關的AE(表10)。最常見的治療相關AE是皮疹，疲勞，甲溝炎，腹瀉和皮膚裂。大多數(shù)患者僅報告1級或2級AE(16/21名患者，76％)。未觀察到肺炎(任何級別)。24％的患者出現(xiàn)治療相關的3級AE(未報告4級AE)。這些是增加的天冬氨酸轉氨酶(AST; n = 2)，腹瀉(n = 2)，增加的丙氨酸轉氨酶(ALT; n = 1)和體重減少(n = 1)。治療相關的選擇AE(定義為具有潛在的免疫學病因的AE，需要更頻繁地監(jiān)測和/或獨特干預)大多數(shù)報告在皮膚(71％任何級別; 0 3/4級)、胃腸道(24％任何級別; 10％ 3/4級)、內分泌病(19％任何級別; 0個3/4級)和肝臟(14％任何級別; 10％ 3/4級)類別中。

治療相關AE導致4名患者(19％)中止任何研究藥物，3名患者(14％)有3/4級事件。個別AE是腹瀉(n = 2，均為3/4級)，增加的AST(n = 1，3/4級)和潮紅和腎小管間質性腎炎(各n = 1，1/2級)。一名患者出現(xiàn)3級腹瀉和2級潮紅。在分析時，8名患者死亡(都是由于疾病進展)。

表10.在用nivolumab加埃羅替尼治療的NSCLC患者的≥10％中報道的治療相關AE

結論

在具有EGFR TKI獲得性抵抗的晚期EGFR MT NSCLC的未經化療患者中，用nivolumab組合埃羅替尼的治療可提供持久的臨床益處。未經單一埃羅替尼治療患者的數(shù)據(jù)表明，nivolumab和埃羅替尼的組合作為EGFR MT晚期NSCLC患者的一線治療是可行的。這些中期結果表明，nivolumab與埃羅替尼組合與可控的安全性概況有關，反映了這兩種藥物的累加毒性。

實施例3

用Nivolumab維持作為單一療法或與貝伐單抗(BEV)組合，治療化療預治療的NSCLC患者

Nivolumab已經證明在未經化療和大量化療預治療的NSCLC患者(pt)中的持久反應和耐受性。BEV與CTLA-4免疫檢查點抗體ipilimumab組合在黑素瘤中顯示出耐受性和增強的活性。報道了1期研究的中期結果，其評估了轉變?yōu)閚ivolumab維持治療作為單一療法或與BEV組合，在具有晚期NSCLC的患者中的安全性和有效性，這些患者對一線基于鉑(PT)的化療有反應或具有穩(wěn)定的疾病。

方法

在完成≥4個周期的一線基于PT的化療(±BEV)的42天內無進展的患者被分配至nivolumab(N)5 mg/kg IV Q3W + BEV 15 mg/kg IV Q3W(僅非鱗狀的[非-sq]患者；n=12)，或N 3 mg/kg IV Q2W單一療法(sq組[n=8]或非-sq組[n=13])，直到進展/不可接受的毒性(根據(jù)方案定義的標準，允許超過進展的治療)。使用RECIST 1.1評價ORR。

結果

對于在sq患者中的N + BEV、N單一療法以及在非-sq患者中的N單一療法，中位隨訪分別為80.4、25.6和35.1周。任何級別的治療相關不良事件(AE)在變換至N + BEV的11/12(92％)患者中以及變換至N單一療法的13/21(62％)患者中發(fā)生(使用標準算法管理)。未報告治療相關的4級AE；3級AE為N + BEV的肺炎(n = 2)和咳嗽和腎小管間質性腎炎(各n = 1)；和N單一療法的肺炎(n = 2)和胸腔積液(n = 1)。由于治療相關的AE，N + BEV和N單一治療(非-sq)組中各四個患者中止。N + BEV的ORR為8％(1/12，正在進行;持續(xù)時間11.1+周)。N單一療法的ORR為10％(2/21;均為非-sq，范圍為15.7-18.3周)。中位無進展存活(PFS)為37.1周，N + BEV；16.0周，sq N單一療法；和21.4周，非-sq N單一療法。穩(wěn)定的疾病是在N + BEV的50％和N單一療法的48％(50％ sq，46％非-sq)中的最佳總體反應。N + BEV(范圍33.3-86.7+周)或N單一療法(范圍2.1+，-56.3+周)未達到中位OS; N + BEV的1年OS率為75％(未計算N單一療法[不足的隨訪])。

結論

變換至nivolumab作為單一治療或+ BEV，顯示PFS類似于在晚期NSCLC中在基于PT的化療后被批準作為維持治療的其它藥劑可見的PFS。這些初步數(shù)據(jù)支持進一步評估在化療治療的患者中變換至nivolumab維持治療的安全性和有效性。

實施例4

用Nivolumab與Ipilimumab組合治療NSCLC

通過組合使用nivolumab和ipilimumab阻斷PD-1和CTLA-4免疫檢查點途徑，Nivolumab(抗PD-1)和ipilimumab(抗CTLA-4)各自在晚期NSCLC中顯示活性，并且黑素瘤中的臨床數(shù)據(jù)顯示改善的反應，有希望2年存活率和可控的安全性概況(Wolchok等人，2013)。目前的I期研究評估了一線nivolumab加ipilimumab(N + I)在具有晚期NSCLC的未經化療患者(pt)中的安全性和有效性。

方法

基于組織學，將未經化療的IIIB或IV期NSCLC患者分配到四個不同組合劑量的組中的一個(參見圖10的研究設計)。具體來說，患者(n = 49)以1 + 3 mg/kg或3 + 1 mg/kg組合劑量IV Q3W接受4個周期的N + I(一個鱗狀[sq]和一個非-sq群/劑量水平)，然后是N 3 mg/kg IV Q2W，直到進展/不可接受的毒性。組合藥物劑量基于來自在患有晚期黑素瘤的患者中nivolumab與ipilimumab組合的1期CA209-004研究的安全性和活性數(shù)據(jù)(Wolchok等人，2013)。在方案修改后，招募1 + 1 mg/kg劑量組合群組(n = 31;在該分析時的數(shù)據(jù)不成熟)。使用實體瘤的反應評價標準(RECIST)1.1在第10周，第17周，第23周和之后每3個月評價功效，直到疾病進展。使用Kaplan-Meier方法估計時間-事件終點。根據(jù)National Cancer Institute(NCI)Common Terminology Criteria for Adverse Events(CTCAE)4.0版對不良事件(AE)進行分級。如果研究者評估AE與組合中的任何藥物相關，則認為AE與研究治療相關。不允許ipilimumab或nivolumab的患者內劑量減少。使用nivolumab和ipilimumab的免疫治療相關AE按照方案安全性指南進行管理。

結果

患者群體和處理

此分析基于2014年3月的數(shù)據(jù)庫鎖。共有49名患者在4個組中接受治療?；€特征顯示在表11中。患者處理顯示在表12中。

表12. 患者分布概述

功效

在治療組中，ORR為11-33％(表13)。與nivolumab 1 mg/kg + ipilimumab 3 mg/kg治療組相比，nivolumab 3 mg/kg + ipilimumab 1 mg/kg的ORR較高。僅在nivolumab 3 mg/kg + ipilimumab 1 mg/kg治療組(21周;范圍12-21)中達到中位反應持續(xù)時間(DOR)。在33％的總患者(22-56％的治療組患者)中報告了穩(wěn)定的疾病(SD)作為最佳總體反應; 7名患者SD持續(xù)≥24周。在各組中，進行性疾病作為最佳總體反應的發(fā)生率為0-44％。三名患者表現(xiàn)出非常規(guī)的“免疫相關”反應(免疫相關反應標準[irRC]未使用)。一名患者(nivolumab 1 mg/kg + ipilimumab 3 mg/kg鱗狀組)具有非靶標損傷的進展和新?lián)p傷的發(fā)展，同時減少靶損傷(最大減少55％，最近減少32％)。兩名患者(在nivolumab 3 mg/kg +ipilimumab 1 mg/kg組中；一名鱗狀和一名非鱗狀)在出現(xiàn)的新?lián)p傷的情況下分別具有56％和64％的靶損傷減少。

表13.用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者的腫瘤反應

^a通過隨后根據(jù)RECIST 1.1的腫瘤評估來確認所有完全和部分反應。未顯示未確認反應的患者

^b從第一次反應到記錄的進展、在最后一個nivolumab劑量的100天內死亡或最后一次腫瘤評估(對于刪失+數(shù)據(jù))的時間。從Kaplan-Meier曲線確定估計的中位DOR

+ =正在反應; CI =置信區(qū)間; NR =未達到

客觀反應(OR)的特征顯示在圖11中?？傊?，在分析時，6名患者(75％)正在進行反應。8名反應者中的6名(75％)發(fā)生了根據(jù)第一次腫瘤評估(10周)的反應。目標損傷腫瘤負荷相對于基線的最佳百分比變化示于圖12中?？傮w上，具有基線靶損傷和至少一個基線后靶損傷評估的大多數(shù)患者經歷腫瘤負荷降低(24/40; 60％)。到第18周，在一名患者(nivolumab 3 mg/kg + ipilimumab 1 mg/kg組;非鱗狀)中觀察到腫瘤負荷降低> 80％。圖13中顯示了靶損傷相對于基線隨時間的百分比變化。

各治療組中的PFS和OS結果示于表14和圖14中。24周時的PFS率范圍為20至51％。對于nivolumab 1 mg/kg + ipilimumab 3 mg/kg組，中位PFS為16.1周，而對于nivolumab 3 mg/kg + ipilimumab 1 mg/kg組為14.4周(圖14)；僅在nivolumab 1 mg/kg +ipilimumab3 mg/kg鱗狀組(44.3周)中達到中位OS。

表14.用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者的存活結果

探索性PD-L1分析

1. 來自預治療腫瘤活檢的PD-L1表達

在49名治療的患者中，38名患者在數(shù)據(jù)分析時測試了預治療腫瘤樣品的PD-L1表達?；?％PD-L1表達的測定截止值，16個是PD-L1 +，22個是PD-L1-。在16個PD-L1 +患者中，9個具有非鱗狀組織學，7個具有鱗狀組織學。在49名治療的患者中，11名在數(shù)據(jù)分析時沒有檢測其腫瘤樣品的PD-L1表達。

2. 根據(jù)PD-L1狀態(tài)的反應和結果

PD-L1 +和PD-L1-患者的ORR相似(表15)。在2個PD-L1 +患者和3個PD-L1-患者中正在進行反應。中位PFS在PD-L1 +和PD-L1-患者之間是相似的，并且在兩個亞組中，中位OS是NR。圖15顯示了相對于基線的靶損傷腫瘤負荷的最佳變化和根據(jù)PD-L1狀態(tài)的PFS。

表15.根據(jù)基線PD-L1狀態(tài)在用nivolumab加ipilimumab治療的NSCLC患者中的ORR，PFS和OS

^aPD-L1+定義為在至少5%的腫瘤細胞中PD-L1表達

^bORR僅基于證實的部分反應或完全反應(按照RECIST 1.1)

安全性

總體而言，88％的患者經歷了任何級別的治療相關AE(表16)。使用方案安全性指南管理AE。與維持期(nivolumab 3 mg/kg Q2W直至進展)相比，大多數(shù)毒性發(fā)生在誘導期(nivolumab + ipilimumab Q3W，四個周期)中。在誘導期期間在各組合劑量下，在36-54％的患者中報告3/4級AE，而在維持期期間為21-27％的患者。在各治療組中49％的患者中報道了3/4級治療相關的AE(表16)。3名患者(6％)觀察到治療相關的3/4級肺炎；所有病例均可用皮質類固醇和停藥進行逆轉。29名患者(36％)報道了任何級別的治療相關的嚴重AE(SAE)，22名患者(28％)為3/4級。最常見的3/4級SAE分別是肺炎(3名患者，6%)，腹瀉和結腸炎(各4名患者，8%)，以及增加的ALT和AST(各3名患者，6%)。

治療相關的選擇AE(定義為具有需要更頻繁監(jiān)測和/或獨特干預的潛在免疫學病因的AE)顯示于表17中。治療相關AE導致17名患者(35％)中的任何研究藥物的中止，包括肺炎(n = 4)，ALT或AST增加(各3例)，結腸炎(n = 3)，腹瀉(n = 3)和過敏性腎炎，潰瘍性結腸炎，胃排空受損，Miller Fisher綜合征和肺出血(各n = 1)。在nivolumab 1 mg/kg + ipilimumab 3 mg/kg非鱗狀組(6名患者，40％)中，與其它組(11-31％)相比，3/4級AE導致的中止率最高。大多數(shù)導致中止的治療相關AE(n = 16)發(fā)生在nivolumab +ipilimumab同時給藥(治療周期1-4)期間?？偣灿?名患者由于藥物相關毒性死亡，在一名患者中報告了以下的每一個：3級結腸炎后的呼吸衰竭；肺出血；和有潰瘍性結腸炎病史的患者中的毒性表皮壞死松解。

結論

這些結果表明用nivolumab +ipilimumab免疫療法治療可為診斷為晚期NSCLC的未經化療的患者提供可行的組合方案。nivolumab + ipilimumab方案提供了持久的ORR作為未經化療的NSCLC患者的一線治療，無論組織學如何。無論腫瘤PD-L1狀態(tài)如何，用nivolumab +ipilimumab觀察到活性，表明該組合可適用于PD-L1-或PD-L1 +患者。

實施例5

用Nivolumab治療NSCLC

在1期CA209-003研究中，用nivolumab治療導致晚期NSCLC10患者的持久客觀反應(OR)和長期穩(wěn)定疾病(SD)(Topalian SL等人)。本研究報告了整個NSCLC組和不同NSCLC亞組的OS結果和臨床活性，這為來自探索性分析的結果，以研究與nivolumab臨床活性相關的潛在預測標記，以及所有> 1年隨訪的患者的安全性。

方法

研究設計

在2008年10月至2012年1月之間招募的NSCLC患者在8周治療周期(4個劑量/周期至最多12個周期)中每2周(Q2W)靜脈內(IV)接受nivolumab 1、3和10mg /周)，在每個4劑量周期后進行腫瘤評估(實體瘤的反應評價標準[RECIST] 1.0)(Topalian SL等人)。該方案被修訂以收集OS數(shù)據(jù)(2012年1月)。當前的功效分析基于2013年9月的數(shù)據(jù)庫鎖。安全性結果基于2013年3月的數(shù)據(jù)庫鎖。

亞組分析

根據(jù)選擇的患者特征(年齡，性別，Eastern Cooperative Oncology Group性能狀態(tài)[ECOG PS]，組織學，以前治療的次數(shù)，之前的酪氨酸激酶抑制劑[TKI]治療，表皮生長因子受體[EGFR]和Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物[KRAS]突變狀態(tài))，分析客觀反應率(ORR)。

探索性PD-L1分析

使用Dako免疫組織化學(IHC)測定法測量存檔的腫瘤樣品中的PD-L1表達。用該測定的陽性染色定義為在任何強度下的腫瘤膜染色，并用1％和5％表達的截止值分析以評估PD-L1陽性(Butte MJ等人)。評估腫瘤PD-L1表達與臨床終點的潛在關聯(lián)。

結果

重要的患者特征

在NSCLC組中的129名患者的特征顯示在表18中。在這個大量預治療的NSCLC群體中，54％已經接受≥3種先前的治療。總共有33名患者接受了nivolumab 1 mg/kg，37名患者接受了nivolumab 3 mg/kg，59名患者接受了nivolumab 10 mg/kg。

表18.患有NSCLC的患者的基線特征

功效

在NSCLC組中，1年和2年OS率分別為42％(95％CI 34-51)和24％(95％CI 16-32)。根據(jù)nivolumab劑量的OS顯示于圖16中。在3 mg/kg nivolumab劑量下，1年和2年OS率分別為56％和45％。組織學之間的1年和2年OS率相似(圖17)。

在劑量間的中位OS為9.9個月，中位隨訪為27個月(基于在分析時仍然存活的35名患者;范圍為21-54個月)。中位OS在3 mg/kg nivolumab劑量下為14.9個月(目前在3期注冊研究中評價;表19)。對于鱗狀和非鱗狀NSCLC患者，中位OS分別為9.2和10.1個月(表20)。各劑量的ORR為17％，nivolumab 3 mg/kg的ORR為24％(表19)。中位反應持續(xù)時間為74周(17個月)。在各劑量下，10％的患者具有≥24周的SD，其中5％的這些患者維持SD≥48周。6名患者具有非常規(guī)的“免疫相關”反應，不作為反應者包括在內；這些患者的OS為7.3、11.2、12.4、23+、26.7和44.4+個月。ORR在組織學上相似(表20)。反應是持久的并且早期發(fā)生(圖18)。50％的OR患者(11/22)在第一次評估(8周)時顯示出反應。在分析時，45％的患者(10/22)正在進行反應。由于除疾病進展以外的原因而中止的6/16(38％)反應者在最后一次nivolumab劑量后響應> 30周；這些患者中的5/6(83％)在報告時正在進行反應。

表20. 在NSCLC患者中根據(jù)組織學的nivolumab單一療法的功效

^a一名患者具有未知組織學

^b在每個周期后根據(jù)RECIST v1.0評估腫瘤。具有非常規(guī)“免疫相關”反應的6名患者不作為反應者包括。使用Clopper-Pearson方法計算ORR和SD率的CI

^c使用Kaplan-Meier方法估計至事件的時間終點(PFS，OS，DOR)的中位值

^d回顧性收集存活數(shù)據(jù)

^eOS率使用Kaplan-Meier方法估計，95％CI基于Greenwood公式

患者亞組中的功效

選擇的患者亞組中的ORR顯示在表21中。在所分析的所有患者亞組中看到反應。在靶損傷腫瘤負荷的最佳變化與EGFR或KRAS突變狀態(tài)之間沒有觀察到明顯的關聯(lián)(圖19)。

表21.根據(jù)選擇的患者基線特征的ORR

^a使用Clopper-Pearson方法計算ORR的CI。

^b未知包括鱗狀和非鱗狀患者。

探索性分析：來自預治療腫瘤活檢的PD-L1表達

在129名治療的患者中，68名(53％)具有可評估的存檔腫瘤組織樣品，可測量其PD-L1表達(29名鱗狀，39名非鱗狀)。在這68名患者中，使用1％截止值，38名(56％)是PD-L1 +；和使用5％截止值，33名(49％)是PD-L1 +(表22)。61名患者由于缺乏用于分析的組織而具有未知的PD-L1表達狀態(tài)。

探索性分析：PD-L1表達與臨床結果的關聯(lián)

在患有PD-L1 +腫瘤的患者(表22和圖20)以及一些PD-L1-腫瘤患者(表22)中觀察到Nivolumab活性；相對于PD-L1-腫瘤患者，更多的PD-L1 +腫瘤患者具有腫瘤負荷減少(圖20)。在ORR和腫瘤組織學之間沒有明確的關聯(lián)(表23)。PD-L1表達顯示出與PFS(圖21)或OS(圖22)沒有明確的關聯(lián)。PD-L1 +和PD-L1-腫瘤患者的中位PFS分別為3.6個月和1.8個月。PD-L1 +和PD-L1-腫瘤患者的中位OS分別為7.8個月和10.5個月。

表22.患有NSCLC的患者中根據(jù)腫瘤PD-L1表達的ORR

^a對于PD-L1可評價的患者的ORR；ORR包括通過RECIST 1.0確定的完全或部分反應者

表23. 根據(jù)腫瘤PD-L1表達(5%截止值)和根據(jù)組織學的ORR

^a一些患者的PD-L1狀態(tài)在數(shù)據(jù)收集時是未知的：鱗狀的(n = 25)，非鱗狀的(n = 35)，NSCLC(全部; n = 61)

^bORR基于RECIST 1.0并定義為([完全反應+部分反應]÷n)×100

^c包括一名具有未知組織學的患者

安全性

在直至10 mg/kg的最大計劃劑量時未達到最大耐受劑量。NSCLC組中的治療相關不良事件(AE)的范圍、頻率和嚴重性與總群體(所有腫瘤類型)相似。3-4級治療相關AE的比率：NSCLC組(n = 129)和總體研究患者群體(N = 306)分別為14％和17％。與整體研究群體相似，NSCLC組中最常見的AE包括疲勞(24％)、食欲降低(12％)和腹瀉(10％)。選擇的AE，定義為具有需要更頻繁監(jiān)測和/或獨特干預的潛在免疫學病因的AE，示于表24中。12名(9％)患者具有治療相關的肺事件。4名(3％)患者有3-5級治療相關性肺炎。使用系統(tǒng)性糖皮質激素和/或其它免疫抑制劑可以控制毒性。發(fā)生了三起與治療相關的死亡；所有都與肺炎有關。在試驗初期發(fā)生了兩起死亡；第三起在數(shù)據(jù)庫鎖之后發(fā)生。算法適當?shù)貛椭缙谧R別和管理肺炎。

表24. 在用nivolumab治療的NSCLC患者(N = 129)中出現(xiàn)的治療相關的選擇AE類別(≥1%)^a

^a安全性結果基于2013年3月的數(shù)據(jù)庫鎖

^b 1-5級

^c兩名患者有治療相關的2級肺炎，發(fā)生在安全性分析日期之前，但不包括在表中，因為這些數(shù)據(jù)直到此分析后才得到。另外一名患者有治療相關的5級肺炎，但不包括在本表中，因為事件發(fā)生在安全性分析日期之后

結論

在這種大量預治療的晚期NSCLC群體中，nivolumab產生持久的反應和令人鼓舞的存活曲線，在治療中止后顯示出反應，并且顯示由方案算法管理的安全性概況，沒有新的安全性信號出現(xiàn)，所有患者具有> 1年的隨訪。不論組織學或KRAS或EGFR突變狀態(tài)如何，在一系列NSCLC患者群體中，包括大量預治療的患者和老年患者，觀察到對nivolumab的反應。在NSCLC中生物標志物與nivolumab活性的潛在關聯(lián)性的探索性分析中，在患有腫瘤PD-L1 +和PD-L1-表達的患者中觀察到了nivolumab臨床活性。

實施例6

用Nivolumab治療NSCLC

研究設計

此數(shù)據(jù)基于2015年3月的數(shù)據(jù)庫鎖。開發(fā)了一個組來測試nivolumab單一療法對NSCLC的作用?；颊哂? mg/kg nivolumab(nivo)q2w(每2周一次)治療?；颊叩幕€特性示于表25。

表25.基線特性.

每個患者的突變狀態(tài)和先前的系統(tǒng)治療可以在表26中看出。中位隨訪時間和受試者處理概述可參見表27。

表26.突變狀態(tài)和之前的系統(tǒng)治療

*每個受試者的一個以上的背景可能會反映在頻率中。

表27.隨訪時間和受試者處理概述

在大于5％的患者中報道的最常見的治療相關不良事件見表28。

表28.治療相關的不良事件

研究的各組的總體反應的概述見表29。

表29. BOR概述

反應持續(xù)時間、80%靶損傷減少、無進展存活和總體存活概述見表30。

表30. 結果概述

實施例7

用Nivolumab單一療法或Nivolumab + Ililimumab v.鉑雙重化療治療NSCLC

在3期CA209-227研究中，測試使用nivolumab單一療法或nivolumab組合ipilimumab的治療以確定在未經化療的IV期或復發(fā)性NSCLC受試者中與鉑雙重化療相比總存活(OS)是否改善。在實驗組之間進行OS的形式成對比較。

該研究還基于Blinded Independent Central Review(BICR)評估，比較了nivolumab單一療法和nivolumab組合ipilimumab的無進展存活期(PFS)和客觀反應率(ORR)與之前未治療的IV期或復發(fā)的NSCLC的受試者中的鉑雙重化療。評價了在患有IV期或復發(fā)性NSCLC的受試者中nivolumab組合ipilimumab和nivolumab單一療法之間的PFS和ORR的差異。

該研究還評估了PD-L1表達是否是OS或PFS的預測性生物標志物。并且如通過接受nivolumab單一療法、nivolumab組合ipilimumab的受試者和接受鉑雙重化療的受試者中的肺癌癥狀評分(LCSS)測量的，評估了到12周時表現(xiàn)疾病相關癥狀改善的治療患者的比例。

研究的其它目的包括：1)與鉑雙重化療相比，評估nivolumab和nivolumab與ipilimumab組合的總體安全性和耐受性; 2)表征nivolumab與ipilimumab組合的藥代動力學，并探討暴露-安全性和暴露-功效關系; 3)表征nivolumab與ipilimumab組合的免疫原性; 4)表征nivolumab、nivolumab與ipilimumab組合和鉑雙重化療的免疫相關性; 5)評估對nivolumab和nivolumab組合ipilimumab的臨床反應的預測性腫瘤和外周生物標志物;和6)在用nivolumab組合ipilimumab治療的受試者中以及用鉑雙重化療治療的受試者中使用EQ-5D指數(shù)和視覺模擬量表評估總體健康狀況。

方法

研究設計

該研究是在成年(大于或等于18歲)男性和女性受試者中的開放標記的4組、隨機、3期研究，其具有IV期或復發(fā)性非小細胞肺癌(NSCLC)、PD-L1陽性或陰性，以前對于晚期疾病未治療。

主要納入標準包括：1)大于或等于1的ECOG性能狀態(tài)；2)組織學證實的IV期或復發(fā)性NSCLC患者(根據(jù)第7屆國際肺癌研究協(xié)會，分類鱗狀或非鱗狀組織學)，沒有作為晚期或轉移性疾病的主要療法給予的在先全身抗癌治療(包括EGFR和ALK抑制劑)；和3)根據(jù)RECIST 1.1標準通過CT或MRI可測量的疾病。

主要排除標準包括：1)具有對可獲得的靶向抑制劑治療敏感的已知EGFR突變的受試者; 2)具有對可獲得的靶向抑制劑治療敏感的已知ALK易位的受試者; 3)具有未治療的CNS轉移的受試者; 4)具有活動性、已知或疑似的自身免疫性疾病的受試者(允許招募具有I型糖尿病、僅需要激素替代的甲狀腺功能減退、不需要全身治療的皮膚疾病(例如白癜風、牛皮癬或禿發(fā))或預期在不存在外部觸發(fā)劑的情況下不會復發(fā)的病況的受試者);和5)具有需要在隨機化14天內用皮質類固醇(> 10mg每日潑尼松等效物)或其它免疫抑制藥物的全身治療的病況的受試者(在不存在活動性自身免疫性疾病的情況下允許吸入或局部類固醇，和腎上腺替代類固醇> 10mg每日潑尼松等效物)。

受試者以1：1：1：1隨機化，并根據(jù)組織學(鱗狀與非鱗狀)和PD-L1狀態(tài)分層。通過在隨機化前提交的腫瘤樣品中的PDL-1蛋白的免疫組織化學(IHC)染色測定PD-L1狀態(tài)。如果在最少一百個可評估的腫瘤細胞中觀察到大于或等于5％的腫瘤細胞膜染色，則將受試者鑒定為PD-L1陽性，或者如果在最少100個可評估的腫瘤細胞中觀察到少于5％的腫瘤細胞膜染色，則將受試者鑒定為PD-L1陰性。

受試者從四個研究組之一接受開放標簽治療。給藥方案顯示在表31中。Nivolumab(B組)和任選的培美曲塞(D組)的維持方案示于表32中。

研究中腫瘤評估在隨機化后第6周(±7天)開始，并且每6周(±7天)進行直到第48周。在第48周后，每12周(±7天)進行腫瘤評估，直到進展或治療中止，以較晚發(fā)生者為準。接受nivolumab或nivolumab加ipilimumab超過研究者評估的RECIST 1.1定義的進展的受試者還必須繼續(xù)腫瘤評估，直到這種治療中止。登記將在約1200名受試者隨機化后結束。研究的主要終點是總存活(OS)。從開始登記到分析主要OS終點的研究持續(xù)時間預計約為48個月。

研究設計原理圖如圖23所示。

研究組

Nivolumab單一療法(A組)

每2周在每個周期的第1天，經30分鐘靜脈內(IV)給予Nivolumab 240mg，直至疾病進展，由于不可接受的毒性中止，同意撤回或研究結束。如果受試者具有研究者評估的臨床益處并且是耐受治療，則允許超過初始研究者評估的RECIST 1.1定義的進展的治療。完成給藥后，受試者進入隨訪階段。

如表33中概述的收集研究評估。

Nivolumab加ipilimumab(B組)

Nivolumab 1 mg/kg經30分鐘IV給藥，組合ipilimumab 1 mg/kg經30分鐘IV給藥，每3周x4，接著給予nivolumab 3 mg/kg每2周經30分鐘IV給藥。Nivolumab 1 mg/kg和ipilimumab 1 mg/kg將在每3周治療周期的第1天同時給予x4。在第4個治療周期后，每2周給予3 mg/kg的nivolumab，直到疾病進展，不可接受的毒性，同意撤回或研究結束。如果受試者具有研究者評估的臨床益處并且是耐受治療，則允許超過初始研究者評估的RECIST 1.1定義的進展的治療。完成給藥后，受試者進入隨訪階段。

如表34所概述收集研究評估。

Nivolumab加ipilimumab(組C)

Nivolumab 3 mg/kg每2周經30分鐘IV給予，并且在給予nivolumab后每6周以1 mg/kg經30分鐘IV給予ipilimumab 1 mg/kg直至進展，由于毒性中止，同意撤回或研究結束。受試者可以僅中止一次研究藥物，如果滿足某些情況，則繼續(xù)用另一種治療。如果受試者具有研究者評估的臨床益處并且是耐受治療，則允許超過初始研究者評估的RECIST 1.1定義的進展的治療。完成給藥后，受試者進入隨訪階段。

如表35中概述的收集研究評估。

鉑雙重化療和可選的繼續(xù)維持(組D)

鉑雙重化療以3周的周期IV給藥，最多達6個化療周期。化療持續(xù)到疾病進展，不可接受的毒性或4-6個周期的完成，以先到為準。鉑雙重化療方案取決于NSCLC組織學。具有混合組織學的受試者根據(jù)主要組織學分類。

給予鱗狀組織學受試者接受吉西他濱(1250mg/mg ²)與順鉑(75mg/m²);或吉西他濱(1000mg/mg ²)與卡鉑(AUC 5)。吉西他濱在每個周期的第1天和第8天給予。

非鱗狀組織學受試者接受培美曲塞(500mg/m²)與順鉑(75mg/m²)，在每個周期的第1天給予；或培美曲塞(500mg/m²)與卡鉑(AUC 6)，在每個周期的第1天給予。

在第4周期后具有穩(wěn)定的疾病或反應的具有非鱗狀組織學的受試者，允許單獨繼續(xù)培美曲塞作為維持治療，直到疾病進展或不可接受的毒性。完成化療后，受試者進入隨訪階段。

如表36中概述的收集研究評估

治療后隨訪

治療后隨訪開始于決定中止受試者接受所有治療時；這包括任選的繼續(xù)維持治療。因疾病進展以外的原因中止治療的受試者將繼續(xù)根據(jù)表37中的時間表進行腫瘤評估(如果臨床可行的話)，直到進展或任何后續(xù)治療的開始，以先發(fā)生者為準。跟蹤受試者的藥物相關毒性，直到這些毒性解決，恢復到基線或被認為是不可逆的。所有不良事件在研究藥物的最后一劑后至少記錄100天。在完成前兩次隨訪之后，每3個月追蹤受試者的存活。研究評估如表37所示收集。

樣品大小

計算樣本大小以比較Nivolumab和鉑雙重化療之間的OS，并且比較Nivolumab與ipilimumab組合和鉑雙重化療之間的OS，每種比較以0.0167(雙側)的I型誤差水平和90％效力進行。假設鉑雙重化療組中的指數(shù)分布和每個實驗治療組中的分段(piecewise)混合物分布，計算事件的數(shù)量和效力。

將約1200名受試者以1：1：1：1的比率隨機分入4個治療組。在對照組中發(fā)生257次事件后進行最終分析，并且這些事件將由支持DMC的未盲的獨立統(tǒng)計學家監(jiān)測。假設20％的篩選失敗率，估計將招募約1500名受試者以使1200名受試者隨機化。假設分段恒定增長率(第1至2月期間8個受試者/月，第3至4月期間40個受試者/月，第5至6月期間85個受試者/月，第7至8月期間138個受試者/月，第8月后170個受試者/月)，需要大約48個月才能獲得最終OS分析所需的死亡數(shù)量(14個月用于增長，34個月用于存活隨訪)。

終點

OS是本研究的主要終點。如果為至少一個比較證明OS優(yōu)勢，則對于關鍵次要終點的看守(gate keeping)測試方法將應用于如統(tǒng)計分析計劃中所描述的另外的實驗與對照比較。主要次要終點包括基于BICR評估的PFS和ORR。

三個主要OS分析中的每一個將使用雙側對數(shù)秩檢驗進行，其使用Hochberg的程序來解決多重性，在所有隨機化受試者中根據(jù)組織學和PD-L1狀態(tài)分層。使用Cox比例風險模型評估風險比(HR)和相應的雙側(1-調整α)％置信區(qū)間(CI)，將治療組作為單個協(xié)變量，通過上述因素分層。OS曲線，具有95％CI的OS中位數(shù)和具有95％CI的12和24個月的OS率將使用Kaplan-Meier方法進行估計。如果針對至少一個比較證明OS優(yōu)勢，則關鍵次要終點的看守(gate keeping)測試方法將應用于如統(tǒng)計分析計劃中所描述的另外的實驗與對照比較。將按以下分級順序測試關鍵次要終點：

1)使用在所有隨機受試者中根據(jù)組織學和PD-L1狀態(tài)分層的雙側對數(shù)秩檢驗來進行PFS(基于BICR評估)分析，以將三個實驗治療中的每一個與對照組進行比較。將使用Cox比例風險模型來估計HR和相應的雙側(1-調整的α)％CI，將治療組作為單個協(xié)變量，通過上述因素分層。PFS曲線，具有95％CI的PFS中位數(shù)，以及具有95％CI的6個月和12個月的PFS率將使用Kaplan-Meier方法進行估計。

2)使用通過PD-L1狀態(tài)和組織學分層的雙側Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)檢驗來進行ORR(基于BICR評估)分析，以將三個實驗治療中的每一個與對照組進行比較。還將計算相關的優(yōu)勢比和(1-調整的α)％CI。另外，對于四個治療組中的每一個，使用Clopper-Pearson方法計算ORR及其相應的95％精確CI。

3)使用根據(jù)組織學和PD-L1狀態(tài)分層的雙側對數(shù)秩檢驗進行實驗組間OS的成對比較。使用Cox比例風險模型來估計HR和相應的雙側(1-調整的α)％CI，將治療組作為單個協(xié)變量，通過上述因素分層。

將進行PFS和ORR的描述性分析以評價Nivolumab單一療法和Nivolumab組合Ipilimumab組之間的差異。這些包括具有對應的PFS的雙側95％CI的HR和中位數(shù)，以及具有相應95％CI的ORR優(yōu)勢比。

分析

PD-L1表達的分析將是描述性的?；诳傮w群體檢查PD-L1表達的分布。將評估PD-L1表達和功效測量(ORR，OS和PFS)之間的潛在關聯(lián)。如果存在有意義的關聯(lián)的指示，將進行進一步評價，以通過估計PD-L1表達和治療之間的相互作用來探測PD-L1表達作為預測性生物標志物。

結果將顯示在具有IV期或復發(fā)性NSCLC的未經化療的受試者中，與鉑雙重化療相比，給予nivolumab或nivolumab與ipilimumab組合將改善總存活(OS)。

本申請要求于2014年5月15日提交的美國臨時申請?zhí)?1/993,917、2014年5月30日提交的62/005,640；和2015年4月24日提交的62/152,669的權益，其全部內容通過引用并入本文。

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