本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及抑制VEGF的式Ⅰ化合物及鹽的氣霧劑藥物組合物，在藥物上的用途和藥用制劑，特別是針對(duì)腫瘤、血管新生的治療。本發(fā)明也涉及該化合物的合成方法。
背景技術(shù)：
：：血管新生包括兩個(gè)概念：胚胎期的血管發(fā)生(vasculogenesis，VG)和出生后的血管生成(ang1ogenesis，AG)。VG指的是在沒(méi)有血管系統(tǒng)的情況下，由血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelialprogenitorcell，EPCs)或成血管細(xì)胞(angloblasts)分化成內(nèi)皮細(xì)胞，并形成血管網(wǎng)。AG指的是在成體血管，由已經(jīng)存在的成熟內(nèi)皮細(xì)胞沖破管壁基質(zhì)遷移，增殖和重構(gòu)，以發(fā)芽方式使血管樹(shù)枝持續(xù)延長(zhǎng)。本發(fā)明中的血管新生是指出生后的血管生成(anglogenesis，AG)。血管新生(anglogenesis)不但是正常生理變化中(如生長(zhǎng)、傷口愈合)所必需有的過(guò)程，近年來(lái)科學(xué)家們也發(fā)現(xiàn)它和腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病的發(fā)展有密切的關(guān)系。抑制病理性的血管新生，可以治療或減緩腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病。目前臨床治療腫瘤的方法大多是針對(duì)不同腫瘤采用不同的方法，并且絕大部分是針對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行治療。而腫瘤生長(zhǎng)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，它受到多種因素的影響，其中包括腫瘤血管網(wǎng)的建立。許多研究已經(jīng)證明腫瘤生長(zhǎng)必須依賴血管生成，通過(guò)抑制血管生成的某些環(huán)節(jié)或整個(gè)過(guò)程，進(jìn)而控制腫瘤的生長(zhǎng)，對(duì)腫瘤治療和防止腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有重要意義。70年代初隨著腫瘤生長(zhǎng)依賴于血管形成概念的提出，也相應(yīng)提出了抗血管形成治療的概念，即通過(guò)阻止新生血管的發(fā)生和/或新生血管網(wǎng)的擴(kuò)展和/或破壞新生血管來(lái)阻止小的實(shí)體瘤的產(chǎn)生或建立，以阻止腫瘤生長(zhǎng)、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。國(guó)外報(bào)道較多的肝素加氫化可的松.被公認(rèn)為能有效地抑制血管生成。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，其二者聯(lián)合應(yīng)用能抑制雞胚絨毛尿囊膜上血管的生成，井能使腫瘤消退和阻止轉(zhuǎn)移，還可抑制腫瘤引起的兔角膜血管新生。而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是一類多功能的生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)血管形成的作用，一般認(rèn)為抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)可以治療或減緩病理性血管新生。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)與新生血管有關(guān)的疾病如腫瘤、眼部新生血管疾病、惡性血液病、支氣管哮喘等疾病有密切關(guān)系，通過(guò)抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)，可以治療或減緩這些疾病，大量文獻(xiàn)均有這方面的報(bào)道如《綜述VEGF的結(jié)構(gòu)特征及生物學(xué)功能》(中華臨床醫(yī)學(xué)研究雜志,2007年13卷3期,388)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在婦科疾病中的研究進(jìn)展》(河北醫(yī)藥2006年28卷12期，1192-1194)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與腫瘤關(guān)系研究進(jìn)展》(廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006年23卷2期，333-335)、《VEGF相關(guān)抗腫瘤治療的研究現(xiàn)狀》(吉林醫(yī)學(xué)，2006年27卷5期，454-457)、《靶向VEGF治療惡性腫瘤的研究進(jìn)展》(現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2006年14卷3期，370-372)、《VEGF和PEDF對(duì)眼底新生血管的共同調(diào)節(jié)作用》(國(guó)外醫(yī)學(xué)：臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),2005年26卷11期,819-821)、《眼底新生血管防治的研究進(jìn)展》(眼科新進(jìn)展,2000年20卷6期,449-451)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體與眼內(nèi)新生血管性疾病》(眼科研究,2003年21卷1期,103-106)、《VEGF與惡性血液病的關(guān)系》(國(guó)外醫(yī)學(xué)：生理病理科學(xué)與臨床分冊(cè)，2004年24卷2期，183-185)、《腦白質(zhì)疏松患者血清VEGF水平的研究》(疑難病雜志,2007年6卷1期,10-11)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與支氣管哮喘》(實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2007年第23卷第3期，433)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：：我們驚奇的發(fā)現(xiàn)，含有化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽與一種或幾種藥物輔料的藥物組合物具有作為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑的藥物中的應(yīng)用和治療病理性血管新生疾病的藥物中的應(yīng)用。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以認(rèn)為，本文所涉及的“治療”可以延伸為疾病的預(yù)防和以確定疾病的治療。一種氣霧劑藥物組合物，含有化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽、一種或幾種適用于的吸入氣霧劑給藥的藥用輔料，所述的藥用輔料為適用于氣霧劑的可藥用的拋射劑和其它可選附加劑，R＝含有3-10個(gè)碳原子的一個(gè)雜原子的環(huán)烷基，其中雜原子為N、O、S。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述的拋射劑為氟烴類化合物中的一種或幾種。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷(HFA134a)和1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)中的一種或其組合。述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷(HFA134a)和1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)中的組合。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是附加劑中含有溶劑，溶劑選自甘油，丙二醇、聚乙二醇、乙醇或油酸中的一種或幾種。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述溶劑為乙醇。1,1,1,2－四氟乙烷的縮寫(xiě)為HFA134a。1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷的縮寫(xiě)為HFA227。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R為含有3-8個(gè)碳原子的雜原子環(huán)烷基。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R中的雜原子為N。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R中的雜原子為O或S。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺,5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)辛烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)丁烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)辛烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)辛烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)丁烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)辛烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的生理學(xué)上可接受的鹽為從以下酸形成的鹽：鹽酸、氫溴酸、硫酸、枸櫞酸、酒石酸、磷酸、甲磺酸、苯乙酸、富馬酸、馬來(lái)酸、苯磺酸、蘋(píng)果酸、谷氨酸、羥乙磺酸中的一種。上述藥物組合物作為治療疾病的藥物中的應(yīng)用。上述藥物組合物作為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑的藥物中的應(yīng)用。上藥物組合物在制備治療病理性血管新生疾病的藥物中的應(yīng)用。上述藥物組合物在制備治療腫瘤類疾病藥物的應(yīng)用。上述藥物組合物在制備治療呼吸道炎癥的藥物中的應(yīng)用。上述藥物組合物在制備治療惡性血液病的藥物中的應(yīng)用。上述的藥物組合物在制備治療哮喘的藥物中的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽作為治療疾病的藥物中的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽作為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑的藥物中的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽在于制備治療病理性血管新生疾病的藥物中的應(yīng)用。血管新生性疾病，主要涉及腫瘤、眼部新生血管、惡性血液病、支氣管哮喘、腦白質(zhì)疏松疾病。腫瘤主要是各種實(shí)體腫瘤如胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝部腫瘤、各種腺體腫瘤、鼻部腫瘤、眼部腫瘤、咽部腫瘤、喉部腫瘤等；惡性血液病是指血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤及惡性組織細(xì)胞病等。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽在制備治療腫瘤類疾病藥物的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽在制備治療呼吸道炎癥的藥物中的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽在制備治療惡性血液病的藥物中的應(yīng)用。上述的化合物Ⅰ或其生理學(xué)上可接受的鹽在制備治療哮喘的藥物中的應(yīng)用。一種制備上述雜原子為N的式Ⅰ化合物的方法：步驟一：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物1加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時(shí)后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機(jī)醚類溶劑萃取后棄去，合并有機(jī)相，過(guò)濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應(yīng)瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應(yīng)液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過(guò)濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物4加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入化合物3，反應(yīng)2小時(shí)，TLC顯示原料消失后，向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個(gè)碳的醇中，通氫氣進(jìn)行硝基還原反應(yīng)，反應(yīng)畢過(guò)濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物7和化合物8加入1-3個(gè)碳的醇中，加熱反應(yīng)，反應(yīng)畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物9；步驟六：制備化合物Ⅰ將化合物9加入1-3個(gè)碳的常溫液態(tài)鹵代烷中攪拌，然后加入HCl/二氧六環(huán)，攪拌反應(yīng)半小時(shí)，用有機(jī)堿調(diào)節(jié)PH>7后過(guò)濾，得化合物Ⅰ。一種制備上述雜原子為O或S的式Ⅰ化合物的方法：步驟一：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物1加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時(shí)后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機(jī)醚類溶劑萃取后棄去，合并有機(jī)相，過(guò)濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應(yīng)瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應(yīng)液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過(guò)濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物4加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入化合物3，反應(yīng)2小時(shí)，TLC顯示原料消失后，向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個(gè)碳的醇中，通氫氣進(jìn)行硝基還原反應(yīng)，反應(yīng)畢過(guò)濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物7和化合物8加入1-3個(gè)碳的醇中，加熱反應(yīng)，反應(yīng)畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物Ⅰ。一種制備上述式Ⅰ化合物的鹽方法為將化合物Ⅰ溶于1-3個(gè)碳的常溫為液態(tài)的鹵代烷中，相應(yīng)的酸溶于8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚或醇中，混合后調(diào)節(jié)PH值為酸性，室溫?cái)嚢璋胄r(shí)后過(guò)濾，即可得到化合物Ⅰ的鹽。一種制備上述雜原子為N的式Ⅰ化合物酸鹽的方法：步驟一：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物1加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應(yīng)結(jié)束后，向反應(yīng)液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時(shí)后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機(jī)醚類溶劑萃取后棄去，合并有機(jī)相，過(guò)濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應(yīng)瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應(yīng)液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過(guò)濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物4加入8個(gè)碳以內(nèi)的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入化合物3，反應(yīng)2小時(shí)，TLC顯示原料消失后，向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個(gè)碳的醇中，通氫氣進(jìn)行硝基還原反應(yīng)，反應(yīng)畢過(guò)濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物7和化合物8加入1-3個(gè)碳的醇中，加熱反應(yīng)，反應(yīng)畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物9；步驟六：制備化合物Ⅰ的鹽化合物9→化合物Ⅰ的鹽將化合物9加入1-3個(gè)碳的常溫液態(tài)鹵代烷中攪拌，然后加入相應(yīng)酸/5個(gè)碳以內(nèi)的醚，調(diào)節(jié)PH值為酸性，攪拌反應(yīng)半小時(shí)，過(guò)濾，得化合物Ⅰ的鹽。D90粒徑是指一個(gè)樣品的累計(jì)粒度分布百分?jǐn)?shù)達(dá)到90％時(shí)所對(duì)應(yīng)的粒徑。具體實(shí)施方式：本發(fā)明中柱層析方法：層析柱的長(zhǎng)度最少70cm，內(nèi)部裝填254-硅膠，并將需要分離的有機(jī)物全溶于最少量的氯仿：甲醇＝1：1中，用最少量254-硅膠將該溶液吸收后置于層析柱內(nèi)硅膠的上部，使用流動(dòng)相洗脫，層析柱下用若干個(gè)10ml試管接經(jīng)過(guò)柱層析得到的溶液，控制流速為10ml/3min，將每個(gè)試管的溶液用HPLC進(jìn)行分析，將保留時(shí)間相同的試管溶液合并，取主點(diǎn)的化合物進(jìn)行重結(jié)晶，得到相應(yīng)的產(chǎn)物。確定主點(diǎn)的方法：將需要分離的有機(jī)物用HPLC進(jìn)行分析，除原料點(diǎn)外峰面積最大的點(diǎn)確定為主點(diǎn)，其保留時(shí)間為主點(diǎn)的保留時(shí)間。本發(fā)明中手性柱分離相應(yīng)的手性化合物柱的方法：采用CHIRALPAKAS-H粒徑5u4.6mm(id)X250mm分析柱，流動(dòng)相：正己烷：異丙醇：乙二胺＝90:9:0.1，檢測(cè)波長(zhǎng)：紫外300納米，柱溫：25℃流速：1.0ml/min將實(shí)施例中的RS化合物分離出R或S的手性化合物。13C，400MHz，DMSO-d6，1位至13位碳的δ數(shù)值:C的位置123413C-NMR161.3-163.6143.6-144.5118.7-119.4169.5-171.0C的位置567813C-NMR110.2-112.0160.1-160.8110.3-110.8128.9-129.7C的位置910111213C-NMR110.3-110.8160.1-160.8123.8-124.9149.6-150.9C的位置1313C-NMR146.8-148.2實(shí)施例1-1至1-22中的R見(jiàn)上表。實(shí)施例1-1化合物Ⅰ的步驟一：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物1(20g，0.235mol)加入干燥的100ml乙醚中攪拌溶解，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰(0.24mol)，滴加過(guò)程中保持在0℃以下，滴加完成后保溫反應(yīng)直至無(wú)化合物1。向反應(yīng)液中滴加溴素(0.5mol)，滴加過(guò)程中保持在0℃以下，滴加完成后緩慢升至室溫，攪拌半小時(shí)后向其中加入鹽酸溶液(2N，500ml)淬滅反應(yīng)。分層，水相用乙醚(200ml*3)萃取后棄去，合并有機(jī)相，連二亞硫酸鈉溶液洗滌(100ml*2)、無(wú)水硫酸鈉干燥、過(guò)濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟二：將1mol化合物2加入裝置中，冷至0℃以下。將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)緩慢滴加入反應(yīng)瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應(yīng)液傾入碎冰中，有黃色固體析出。過(guò)濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品。所得粗品柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/20-1/10)純化后得白色固體化合物3。步驟三：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將1mol化合物4加入乙醚中，然后加入1.1molNaH室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后加入化合物3(0.8mmol)，反應(yīng)至TLC顯示原料消失后，向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/10-1/5)純化得黃色固體化合物6。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟四：將1mol化合物6和60g5％Pd/C加入甲醇中，通氫氣進(jìn)行硝基還原反應(yīng)，反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)，反應(yīng)畢過(guò)濾，濾液減壓濃縮得化合物7。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟五：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將1.3mol化合物7和1mol化合物8加入500ml甲醇中，加熱反應(yīng)，反應(yīng)畢，減壓濃縮至干。剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/5-1/2)純化得化合物9。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟六：將1mol化合物9加入氯仿中攪拌，然后加入2NHCl/二氧六環(huán)，攪拌反應(yīng)半小時(shí)，三乙胺調(diào)節(jié)pH>7后過(guò)濾，用氯仿洗滌后烘干，得化合物Ⅰ。本步驟中氯仿還可以用二氯甲烷、1，2-二氯乙烷等溶劑代替。實(shí)施例1-1鹽酸鹽的制備方法-10.1mol化合物Ⅰ溶于氯仿中，然后加入2NHCl/1,4-二氧六環(huán)中，并將PH調(diào)節(jié)為低于5-6后，減壓濃縮，過(guò)濾，得到化合物Ⅰ的鹽酸鹽。本步驟中1,4-二氧六環(huán)還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、乙醚等溶劑代替。實(shí)施例1-1鹽酸鹽的制備方法-2將1mol化合物9加入二氯甲烷中溶解，然后加入2NHCl/1,4-二氧六環(huán)中，混合后調(diào)節(jié)PH值為5-6，攪拌反應(yīng)0.5小時(shí)后過(guò)濾，濾餅用甲醇洗滌后烘干，得化合物I的鹽酸鹽。本步驟中1,4-二氧六環(huán)還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、乙醚等溶劑代替。本步驟中氯仿還可以用二氯甲烷、1，2-二氯乙烷等溶劑代替。實(shí)施例1-2至1-12化合物1-2至1-12的制備方法同實(shí)施例1-1的制備方法。實(shí)施例1-13的制備方法實(shí)施例1-13化合物Ⅰ的步驟一：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將化合物1(20g，0.235mol)加入干燥的100ml乙醚中攪拌溶解，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰(0.24mol)，滴加過(guò)程中保持在0℃以下，滴加完成后保溫反應(yīng)直至無(wú)化合物1。向反應(yīng)液中滴加溴素(0.5mol)，滴加過(guò)程中保持在0℃以下，滴加完成后緩慢升至室溫，攪拌半小時(shí)后向其中加入鹽酸溶液(2N，500ml)淬滅反應(yīng)。分層，水相用乙醚(200ml*3)萃取后棄去，合并有機(jī)相，連二亞硫酸鈉溶液洗滌(100ml*2)、無(wú)水硫酸鈉干燥、過(guò)濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟二：將1mol化合物2加入裝置中，冷至0℃以下。將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)緩慢滴加入反應(yīng)瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應(yīng)液傾入碎冰中，有黃色固體析出。過(guò)濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品。所得粗品柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/20-1/10)純化后得白色固體化合物3。步驟三：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將1mol化合物4加入乙醚中，然后加入1.1molNaH室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后加入化合物3(0.8mmol)，反應(yīng)至TLC顯示原料消失后，向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/10-1/5)純化得黃色固體化合物6。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟四：將1mol化合物6和60g5％Pd/C加入甲醇中，通氫氣進(jìn)行硝基還原反應(yīng)，反應(yīng)至無(wú)原料點(diǎn)，反應(yīng)畢過(guò)濾，濾液減壓濃縮得化合物7。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟五：氮?dú)獗Ｗo(hù)下將1.3mol化合物7和1mol化合物8加入500ml甲醇中，加熱反應(yīng)，反應(yīng)畢，減壓濃縮至干。剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/7-1/3)純化得化合物Ⅰ。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。實(shí)施例1-14至1-22化合物1-14至1-22的制備方法同實(shí)施例1-13的制備方法實(shí)施例1-2至1-22的鹽的制備方法化合物1-2至1-22的鹽的制備方法同實(shí)施例1-1的鹽酸鹽制備方法-1或2的方法。上述鹽均通過(guò)元素分析進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)施例1-1至1-22中的R見(jiàn)上表。微粒實(shí)施例1將化合物溶于乙醇，過(guò)濾后，濾液噴霧干燥，微粉化使之D90粒徑達(dá)到2μm。工藝條件為：進(jìn)口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內(nèi)徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進(jìn)樣速度50mL/h?；衔餅閷?shí)施例1-1至1-22中化合物、實(shí)施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實(shí)施例2將化合物溶于乙醇，過(guò)濾后，濾液噴霧干燥，微粉化使之D90粒徑達(dá)到4μm。工藝條件為：進(jìn)口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內(nèi)徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進(jìn)樣速度50mL/h?；衔餅閷?shí)施例1-1至1-22中化合物、實(shí)施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實(shí)施例3將化合物溶于乙醇，過(guò)濾后，濾液噴霧干燥，使之D90粒徑達(dá)到7μm。工藝條件為：進(jìn)口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內(nèi)徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進(jìn)樣速度50mL/h?；衔餅閷?shí)施例1-1至1-22中化合物、實(shí)施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實(shí)施例4取化合物用流能磨微粉化至D90粒徑10μm?；衔餅閷?shí)施例1-1至1-22中化合物、實(shí)施例1-1至1-22的鹽中的一種。氣霧劑的配制，所用乙醇為無(wú)水乙醇，所用活性成分為微粉化至D90粒徑為0.5-20μm。采用不同規(guī)格的劑量閥門(mén)系統(tǒng)使得制得的氣霧劑能夠達(dá)到所需的每撳劑量。1,1,1,2－四氟乙烷的縮寫(xiě)為HFA134a。1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷的縮寫(xiě)為HFA227。制劑實(shí)施例1-1至1-44處方：活性成分活性成分：1g輔料：代碼F1f2F3F4F5附加劑甘油丙二醇聚乙二醇乙醇油酸代碼P1P2拋射劑HFA227HFA134a制備方法：制備工藝：將處方量的活性成分加入乙醇，攪拌均勻，分劑量灌裝，封接劑量閥門(mén)系統(tǒng)，分別再加壓注入拋射劑，即得。劑量每撳活性成分100μg。藥理實(shí)施例1：體外實(shí)驗(yàn)采用生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的雞胚絨毛尿囊膜(CAM)血管增生模型觀察式I化合物對(duì)血管增生的影響，了解式I化合物對(duì)血管生成的作用。實(shí)驗(yàn)材料：受精3日齡雞胚玻璃纖維濾紙血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)Chem1con公司產(chǎn)品將實(shí)施例1-13所制成的化合物先用DMSO溶解，再用PBS稀釋至所需要的濃度(DMSO濃度<0.1％)實(shí)驗(yàn)方法1.CAM模型的建立：75％乙醇清洗雞胚卵殼于超凈臺(tái)中吹干，水平放置5min后，在100mm培養(yǎng)皿邊緣小心將卵殼敲碎，卵內(nèi)容物置于培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿中預(yù)先加有10mlDMEM培養(yǎng)基)。將此培養(yǎng)皿放入150mm大培養(yǎng)皿中(大培養(yǎng)皿中加少許水)，蓋上皿蓋，置于37℃、5％CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.對(duì)CAM血管增生的影響用打孔機(jī)將玻璃纖維濾紙制成直徑3mm的小圓片，濕熱滅菌,將試劑各10μl滴于玻璃纖維濾紙上，制成藥膜，吹干備用。雞胚培養(yǎng)3d后，隨機(jī)分組，每組10個(gè)，將給藥組(1g/L)同時(shí)給予生長(zhǎng)因子(2μg/L)，以及生長(zhǎng)因子(VEGF，2μg/L)單獨(dú)刺激組(陽(yáng)性對(duì)照組)和PBS(磷酸鹽緩沖液，pH7.4)刺激組(陰性對(duì)照組)。將藥膜貼于CAM和卵黃囊膜(yolksacmembrane，YSM)外2/3處血管較少的部位。加藥48h后，顯微鏡下觀察，計(jì)數(shù)藥膜周圍5mm內(nèi)大、中、小血管數(shù)。表1對(duì)CAM血管增生的影響表(n＝10)注：統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以表示.組間比較應(yīng)用t檢驗(yàn)3.結(jié)果1式I化合物對(duì)VEGF誘導(dǎo)的CAM血管增生的影響結(jié)果見(jiàn)表1，PBS組血管生長(zhǎng)良好.VEGF組小血管增生明顯，式I化合物的各組血管增生明顯受到抑制.小血管顯著減少，基本回到正常水平。CAM是經(jīng)典的血管生成評(píng)價(jià)模型，具有方法簡(jiǎn)便、易觀察、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn).是目前最常用的在體模型。VEGF是重要的促血管生成因子，能刺激內(nèi)皮細(xì)胞的增生和遷移，促進(jìn)血管生成，且在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)過(guò)度表達(dá)。本研究表明：式I化合物抑制VEGF誘導(dǎo)的CAM血管增生，表明式I化合物具有抑制VEGF的促血管生成作用。式I化合物對(duì)血管生成有抑制作用，進(jìn)一步證實(shí)了具有抑制腫瘤血管生成的潛力。尤其是通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，化合物中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，抑制VEGF的促血管生成作用相對(duì)較低。藥理實(shí)施例2：體內(nèi)抗肺癌實(shí)驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及瘤株實(shí)驗(yàn)選用中國(guó)大耳白兔，體重2.5±0.1Kg，分組，每組2只。2.肺癌模型制備方法根據(jù)文獻(xiàn)《兔VX2肺癌模型的建立及MR觀察》(包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013年第29卷第2期，7-9頁(yè))中的方法制備兔VX2肺癌模型。3.治療及分組：按下列表格給與藥物活性成分按照實(shí)施例1的處方和制備方法制備吸入制劑，試驗(yàn)分組情況表注：實(shí)施例試驗(yàn)組中給藥量按活性成分計(jì)。3.3統(tǒng)計(jì)方法：運(yùn)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，采用q檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.給藥方式每天在5升左右的玻璃罩中進(jìn)行給藥，實(shí)驗(yàn)組是將的藥物裝入吸入裝置中按照吸入途徑同時(shí)給予藥物，對(duì)照組不給藥。5.模型動(dòng)物生存情況平均生存情況比較結(jié)果表2吸入制劑對(duì)肺癌的抑制作用組別平均生存天數(shù)組別平均生存天數(shù)對(duì)照組27.72250.6DDP組562342.5133.92441.3235.82538.5338.02637.8437.22743.7540.42837.2642.22938.3742.03039.08443141.1943.03243.71041.13340.31130.83437.71231.23537.11342.63635.61444.23751.51545.13848.01646.73948.11743.64048.61840.14147.71948.24251.12042.74346.82149.64445.55結(jié)論通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，式I化合物及其生理上的鹽能夠顯著提高試驗(yàn)肺癌動(dòng)物的生存時(shí)間，但提高時(shí)間的存在明顯的差別，尤其是通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，化合物中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，抑制腫瘤生長(zhǎng)作用相對(duì)較低。藥理實(shí)施例3哮喘藥理實(shí)驗(yàn)1、動(dòng)物模型選取健康雄性Wistar大鼠(對(duì)檢查出存在細(xì)菌、細(xì)菌感染的大鼠不予選用)，體重為200±10g，放入5升左右的玻璃罩中，以400mmHg的壓力噴入3％氯化乙酞膽堿和0.1％磷酸組織胺容積混合液15秒鐘。噴霧停止后，觀察大鼠的引喘潛伏期(即發(fā)生哮喘、呼吸極度困難，直至抽搐跌倒的時(shí)間)，引喘潛期小于70秒或大于120秒的大鼠不予選用。2、實(shí)驗(yàn)方法取經(jīng)測(cè)定引喘潛伏期合格的大鼠，按照下表中的組別進(jìn)行隨機(jī)分組，每組10只，每天在5升左右的玻璃罩中進(jìn)行給藥，實(shí)驗(yàn)組是將實(shí)施例1-1至1-44中的藥物裝入吸入裝置中按照吸入途徑同時(shí)給予藥物，模型組1不給藥，給藥的第10天當(dāng)給予全部藥物后1.5小時(shí)后噴霧給予0.3％二鹽酸組織胺，觀察給藥物前后引喘潛伏期及抽搐發(fā)生率的變化(引喘時(shí)動(dòng)物6分鐘內(nèi)不出現(xiàn)跌倒者以引喘伏期為360秒計(jì)算)。本藥理實(shí)施例中實(shí)驗(yàn)組號(hào)與活性成分對(duì)照方式與藥理實(shí)施例2相同。3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果：動(dòng)物發(fā)生哮喘、直至抽搐跌倒的時(shí)間見(jiàn)下表。表1-1對(duì)照實(shí)施例實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n＝10，mean±SD)通過(guò)藥理實(shí)施例3體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，式I化合物能夠提高動(dòng)物引喘潛伏期時(shí)間，實(shí)施例組的引喘潛伏期和模型組的引喘潛伏期相比，兩者差距明顯，所以說(shuō)明式I化合物通過(guò)抑制新生血管生成，具有治療哮喘、慢性阻塞性肺炎等呼吸道炎癥疾病的作用。尤其是通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，式I化合物及其生理上的鹽中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，提高動(dòng)物引喘潛伏期時(shí)間相對(duì)較高，療效明顯好。通過(guò)藥理實(shí)施例1、2、3中的數(shù)據(jù)可以證明，式I化合物及其生理上的鹽對(duì)血管新生和VEGF具有抑制作用，可以治療或預(yù)防與此有關(guān)的疾病，能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)與增殖，提高引喘潛伏期等。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3