本發(fā)明屬生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及抗病毒藥物,具體涉及一種宿主AhR受體蛋白抑制劑黃芩苷類化合物或與其它抗病毒藥物組合物，在用于制備臨床治療多種病毒感染疾病藥物中的用途。

背景技術(shù)：

據(jù)研究報道，病毒快速變異耐藥及病毒感染發(fā)病機(jī)制不明確等因素致使目前靶向病毒的特異性預(yù)防和治療手段陷入了困境。以流感病毒為例，病毒株快速變異和大流行預(yù)測手段的缺失，導(dǎo)致預(yù)防性流感疫苗效果大幅降低，也引發(fā)了日漸廣泛的耐藥現(xiàn)象，這使得流感預(yù)防與治療都面臨極大挑戰(zhàn)。另一重大傳染病病毒HBV，則在中國乃至全球有數(shù)億存量感染者，該疾患對預(yù)防性疫苗無應(yīng)答，主流的核苷類似物治療由于病毒變異而耐藥現(xiàn)象日趨普遍，這嚴(yán)重影響乙型肝炎治療效果。而更多感染性病毒，如RSV,HSV，EV71，Norovirus等，由于對病毒分子感染復(fù)制機(jī)制認(rèn)知不清晰，目前還沒有靶向病毒的特異性預(yù)防和治療藥物的產(chǎn)生。這些問題也是在病毒性傳染病新發(fā)和再發(fā)的社會環(huán)境下，發(fā)展靶向病毒藥物所需要面對的嚴(yán)峻問題。

靶向宿主的藥物研發(fā)是目前抗病毒研究的新方向。宿主系統(tǒng)作為病毒感染的交互主體，其在病毒感染復(fù)制發(fā)病的整個環(huán)節(jié)都扮演著非常重要的角色，其優(yōu)勢在于宿主應(yīng)答模式的保守性，不隨病毒的變異而改變。如流感病毒感染致病致死性主要源于病毒誘發(fā)的宿主過度應(yīng)激，應(yīng)激環(huán)節(jié)的阻斷對削弱病毒復(fù)制和提供宿主保護(hù)的設(shè)想已經(jīng)獲得了初步證實：通過鞘氨醇類似物阻斷炎癥應(yīng)激可明顯削弱病毒病理進(jìn)程，本課題組前期也證實了抑制TNF-alpha炎癥通路能減輕流感病毒復(fù)制和損傷。另，干預(yù)宿主CCR5受體能顯著阻斷高突變HIV病毒復(fù)制感染，這預(yù)示HIV預(yù)防和治療的新方向。目前，EV71病毒感染也無特效藥物，但研究顯示干預(yù)轉(zhuǎn)錄激活因子可抑制病毒的復(fù)制。這些證據(jù)都提示基于宿主的靶向藥物研 發(fā)對抗病毒研究而言，可能是一個非常有希望的方向，而尋找合適的靶位及高效的藥物分子則是研究熱門。

中藥寶庫中大量的藥效分子則是開發(fā)具有中國特色的新抗病毒藥物最有利的物質(zhì)保障。目前已經(jīng)有大量研究證實許多中藥成分具有多種藥理學(xué)活性，如黃酮類,皂苷類,生物堿,多糖類等均顯示了抗炎、抗病毒的作用。但是抗病毒中藥研發(fā)的困難在于研究大多集中在各自的藥效分析，無法提供一致性機(jī)制解釋，導(dǎo)致相應(yīng)構(gòu)效關(guān)系研究缺乏，這些問題嚴(yán)重制約了中國傳統(tǒng)中藥研發(fā)進(jìn)程。從中藥藥效學(xué)分析，靶向宿主的調(diào)節(jié)機(jī)制是傳統(tǒng)中藥最有可能的作用機(jī)制。

于本發(fā)明相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有：

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技術(shù)實現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的目的是提供天然活性物質(zhì)中的抗病毒藥物，具體涉及一種AhR受體蛋白抑制劑在制備抗病毒藥物中的用途，尤其是，天然活性物質(zhì)黃芩類化合物在制備抗多種病毒的活性藥物中的用途

本發(fā)明提供了天然活性物質(zhì)黃芩類化合物在制備抗多種病毒的活性藥物中的用途。

本發(fā)明中，黃芩苷類化合物包含但不限于黃芩苷、黃芩素、高黃芩素，野黃芩苷，野黃芩素、千層素等。

千層紙素A-7-O-β-D-葡萄糖苷

本發(fā)明中，所述病毒包含但不限于乙肝病毒，流感病毒，皰疹病毒，合胞病毒等。

本發(fā)明進(jìn)行了下述試驗：(1)黃芩苷抑制流感病毒試驗；(2)黃芩苷抑制HBV試驗；(3)黃芩苷下調(diào)AhR受體蛋白轉(zhuǎn)錄水平；(4)黃芩苷類化合物抗不同病毒效果。

本發(fā)明對以黃芩苷類化合物為代表的中藥單體和提取物作進(jìn)行了抗多種病毒的活性的試驗，結(jié)果明確證實了黃芩苷能對抗流感H1N1/H3N2及乙肝病毒HBV等病毒，研究表明，所述的黃芩苷作用模式可能非病毒特異性作用模式，更可能通過干預(yù)宿主某個應(yīng)答環(huán)節(jié)對病毒的復(fù)制產(chǎn)生影響，使黃芩苷具備拮抗不同種屬病毒感染的能力。

本發(fā)明中，實驗顯示黃芩苷能抑制流感病毒誘導(dǎo)的自噬行為，達(dá)到干擾流感病毒H3N2復(fù)制的作用，而其作用靶位可能在通路蛋白mTOR上游的信號環(huán)節(jié)；抗乙肝病毒試驗發(fā)現(xiàn)黃芩苷不僅可以抑制HBV-RNA的轉(zhuǎn)錄水平，而且其作用不受病毒耐藥突變的影響，且與核苷類似物發(fā)生協(xié)同，這提示黃芩苷的作用機(jī)制區(qū)別于核苷類似物；進(jìn)一步研究顯示黃芩苷能有效抑制與病毒轉(zhuǎn)錄密切相關(guān)的核轉(zhuǎn)錄因子HNF水平，進(jìn)而干擾HBV-DNA的復(fù)制進(jìn)程；結(jié)果表明，黃芩苷可能通過干預(yù)宿主應(yīng)答的上游途徑(如自噬通路mTOR上游信號，核轉(zhuǎn)錄因子上游信號)，達(dá)到抗多種病毒的效果。

本發(fā)明基于芳香烴受體蛋白(Aryl hydrocarbon receptor，AhR)是一種存在哺乳動物細(xì)胞胞漿中配體激活轉(zhuǎn)錄因子，它激活核轉(zhuǎn)錄信號通路，參與組織細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡等細(xì)胞生理病理行為，經(jīng)研究驗證了黃芩苷能下調(diào)流感病毒感染過程中AhR的轉(zhuǎn)錄水平，證實黃芩苷具有抗多種病毒的能力，主要通過干預(yù)AhR受體信號通路，調(diào)控宿主對病毒應(yīng)答。

本發(fā)明中，研究結(jié)果還顯示了不同黃芩苷類化合物中均具備不同抗病毒作用，黃芩苷能抑制病毒誘導(dǎo)的AhR受體蛋白轉(zhuǎn)錄水平，直接或間接抑制多種病毒的復(fù)制，基于該特異性作用，黃芩苷類化合物可與其它抗病毒藥物聯(lián)合或制成藥物組合物，，增強(qiáng)抗病毒藥物的效果；進(jìn)一步用于制備臨床治療多種病毒感染疾病的藥物。

所述的藥物組合物其組合方式，可以不改變現(xiàn)有藥物劑型下，黃芩類化合物與其它抗病毒藥物分別以單獨(dú)成藥的方式組合干預(yù)，也可以將黃芩類化合物與其它抗病毒藥物制成同一劑型，其給藥途徑或制劑包括且不限定于以下方式：口服、注射、粘膜給藥，注射液、氣霧劑等。

本發(fā)明的優(yōu)點在于：

證實黃芩苷可明顯干擾宿主AhR轉(zhuǎn)錄水平，且黃芩類化合物具有多種抗病毒活性，如，具有干擾宿主AhR受體蛋白信號通路，阻斷病毒復(fù)制，進(jìn)而拮抗多種病毒的活性。作為AhR受體蛋白抑制劑，所述黃芩苷類化合物可用于制備抗多種病毒藥物的用途。

下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

附圖說明

圖1顯示了黃芩苷明顯減弱流感病毒在肺泡上皮細(xì)胞A549、巨噬細(xì)胞ana-1的復(fù)制及減輕MDCK的細(xì)胞病變。

圖2顯示了黃芩苷能抑制hepG2.2.15分泌HBsAg、HBeAg和胞內(nèi)的HBV-RNA水平。

圖3顯示了黃芩苷在野生型HBV(HepG2.2.15細(xì)胞)和耐藥突變株HBV轉(zhuǎn)染細(xì)胞株模型中都能有效與ETV產(chǎn)生組合效應(yīng)。

圖4顯示了黃芩苷能下調(diào)流感病毒感染細(xì)胞中AhR轉(zhuǎn)錄水平。

具體實施方式

實施例1黃芩苷抗流感病毒H3N2病毒試驗

將H3N2病毒在肺泡上皮細(xì)胞A549、巨噬細(xì)胞ana-1培養(yǎng)復(fù)制，加黃芩苷干預(yù)，并設(shè)不含藥物對照，常規(guī)觀察后，結(jié)果顯示，黃芩苷明顯減弱流感病毒在肺泡上皮細(xì)胞A549、巨噬細(xì)胞ana-1的復(fù)制及減輕MDCK的細(xì)胞病變(如圖1所示)。

實施例2黃芩苷抑制HBV試驗

常規(guī)培養(yǎng)hepG2.2.15細(xì)胞，加黃芩苷干預(yù)，并設(shè)不含藥物對照，常規(guī)觀察后，結(jié)果顯示，黃芩苷能抑制hepG2.2.15分泌HBsAg、HBeAg和胞內(nèi)的HBV-RNA水平(如圖2所示)。

實施例3黃芩苷下調(diào)AhR受體蛋白轉(zhuǎn)錄水平試驗

在野生型HBV(HepG2.2.15細(xì)胞)和耐藥突變株HBV轉(zhuǎn)染細(xì)胞株模型中加黃芩苷干預(yù)，并設(shè)不含藥物對照，常規(guī)觀察后，結(jié)果顯示，黃芩苷在野生型HBV(HepG2.2.15細(xì)胞)和耐藥突變株HBV轉(zhuǎn)染細(xì)胞株模型中都能有效與ETV產(chǎn)生組合效應(yīng)(如圖3所示)。

實施例4黃芩苷類化合物抗不同病毒效果。

分別采用黃芩苷、千層紙素A，千層紙素A-7-O-β-D-葡萄糖苷對不同病毒進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示，黃芩苷類化合物具有抗不同病毒的效果。

表1 黃芩苷類似物結(jié)構(gòu)變化對抗病毒藥效的影響