本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學和藥物化學領(lǐng)域，具體涉及去氫紫堇堿在制備抗炎鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)背景

疼痛是一個世界性的難題，眾多研究表明，炎癥反應(yīng)參與了疼痛的產(chǎn)生與維持。炎癥反應(yīng)是一種警戒信號和機體自我保護的一種防御反應(yīng)，表示機體已經(jīng)發(fā)生損傷或預(yù)示即將遭受損傷，炎癥反應(yīng)的持續(xù)性存在可以導(dǎo)致長期的慢性疼痛的產(chǎn)生，嚴重降低患者生活質(zhì)量甚至產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟和社會問題。炎癥與疼痛是一個連鎖反應(yīng)，二者互相影響，由此產(chǎn)生了抗炎鎮(zhèn)痛藥物，目前市場上主流抗炎鎮(zhèn)痛藥物為非甾體抗炎藥物(NSAIDS)，其通過抑制環(huán)氧合酶，減少前列腺素的合成而發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用。然而，非甾體抗炎藥物的眾多嚴重副反應(yīng)如胃腸道損害，腎臟毒性等限制了其應(yīng)用。因此，開發(fā)新的抗炎鎮(zhèn)痛藥物刻不容緩。

去氫紫堇堿屬于異喹啉衍生物類生物堿，是來源于延胡索的塊莖、細深山紫堇全草的黃色粉末狀化合物，其化學結(jié)構(gòu)式如(Ⅰ)所示。

研究表明，去氫紫堇堿有廣泛的生理活性，在心肌保護、擴張冠脈、抗?jié)兗翱鼓[瘤方面有顯著效果，但目前尚未有將去氫紫堇堿用作抗炎鎮(zhèn)痛藥的相關(guān)報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種去氫紫堇堿在制備抗炎鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的上述目的是通過如下方案予以實現(xiàn)的：

去氫紫堇堿在市面上有純品銷售。因此，本發(fā)明對去氫紫堇堿的制備不做權(quán)利要求。本發(fā)明采用市售的去氫紫堇堿(批號:VIC449,微科曼得生物有限公司)進行鎮(zhèn)痛、抗炎的活性檢測。

本發(fā)明與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

1、本發(fā)明的去氫紫堇堿對炎癥性疼痛有較好的治療作用；

2、本發(fā)明的去氫紫堇堿有較好的抗炎作用；

3、本發(fā)明的去氫紫堇堿對重要臟器無明顯毒性作用。

附圖說明

圖1為醋酸扭體法測定去氫紫堇堿鎮(zhèn)痛活性折線圖(a)和柱狀圖(b)(其中，*表示與對照組相比p<0.05，**表示與對照組相比p<0.01)。

圖2為醋酸扭體法測定去氫紫堇堿抑制小鼠首次扭體時間柱狀圖。

圖3為福爾馬林足底炎性痛法測定去氫紫堇堿鎮(zhèn)痛活性折線圖(a)和柱狀圖(b)(其中，*表示與對照組相比p<0.05，**表示與對照組相比p<0.01)。

圖4為福爾馬林足底腫脹法測定去氫紫堇堿抗炎活性柱狀圖(其中，*表示與對照組相比p<0.05，**表示與對照組相比p<0.01)。

圖5為去氫紫堇堿對重要臟器的毒性作用柱狀圖(其中，*表示與對照組相比p<0.05，**表示與對照組相比p<0.01)。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實例對本發(fā)明做進一步解釋，但具體實例并不對本發(fā)明構(gòu)成任何限定。

實驗動物：SPF級雄性ICR小鼠，體重20-30g，由南京大學附屬鼓樓醫(yī)院實驗動物中心提供

本實例設(shè)計的各實驗試劑如下：甲醛，冰醋酸，二甲基亞砜(DMSO)，雙氯芬酸鈉注射液，鹽酸嗎啡注射液。

各實驗組的劑量設(shè)置：

(1)去氫紫堇堿藥理實驗設(shè)高中低三個劑量組，分別為10mg/kg、6mg/kg、3.6mg/kg；

(2)對照組給10％DMSO；

(3)嗎啡給藥濃度為1mg/kg(實施例1)、10mg/kg(實施例2、3)；

(4)雙氯芬酸鈉給藥濃度為10mg/kg(實施例1)、20mg/kg(實施例2、3)；

上述各組均為腹腔注射給藥(i.p.)

實施例1醋酸扭體法測定去氫紫堇堿鎮(zhèn)痛活性

本實例由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過醋酸扭體法對去氫紫堇堿的鎮(zhèn)痛活性進行測定。

選擇60只雄性小鼠，分為10％DMSO組、雙氯芬酸鈉組、嗎啡組、去氫紫堇堿低劑量組(3.6mg/kg)、去氫紫堇堿中劑量組(6mg/kg)、去氫紫堇堿高劑量組(10mg/kg)，其中10％DMSO組為對照組，雙氯芬酸鈉和嗎啡組為陽性對照組。

給藥15min后，腹腔注射1％的醋酸，體積為10ml/kg，記錄小鼠首次扭體時間，并且計數(shù)30min內(nèi)每5min小鼠的扭體次數(shù)，扭體反應(yīng)具體表現(xiàn)為腹部收縮伴隨后肢的伸展和軀干的拉長。

實驗結(jié)果：如圖1、2所示，去氫紫堇堿和陽性藥物都顯著的抑制醋酸引起的扭體反應(yīng)，使小鼠扭體次數(shù)減少，延長小鼠首次扭體時間，說明使用藥物都有鎮(zhèn)痛作用。去氫紫堇堿的鎮(zhèn)痛活性具有劑量依賴性，其中低中高劑量組的抑制率分別為16.5％、34.0％、52.6％，雙氯芬酸鈉和嗎啡的抑制率分別為52.0％和54.6％。

實施例2福爾馬林足底炎性痛法測定去氫紫堇堿鎮(zhèn)痛活性

本實例由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過福爾馬林足底炎性痛法對去氫紫堇堿的鎮(zhèn)痛活性進行測定。

選擇48只雄性小鼠，分為10％DMSO組、雙氯芬酸鈉組、嗎啡組、去氫紫堇堿低劑量組(3.6mg/kg)、去氫紫堇堿中劑量組(6mg/kg)、去氫紫堇堿高劑量組(10mg/kg)，其中10％DMSO組為對照組，雙氯芬酸鈉和嗎啡組為陽性對照組。

給藥10min后，足底注射20μl 5％福爾馬林，記錄45min內(nèi)每5min小鼠舔/咬腳時間。實驗結(jié)果：如圖3所示，去氫紫堇堿在10mg/kg的劑量下對該模型的第一相痛有顯著的鎮(zhèn)痛效果，去氫紫堇堿在10mg/kg、6mg/kg、3.6mg/kg的劑量下對第二相痛有顯著的鎮(zhèn)痛效果。其中10mg/kg的去氫紫堇堿抑制福爾馬林炎性疼痛的效果優(yōu)于陽性對照藥——嗎啡和雙氯芬酸鈉。說明了去氫紫堇堿對急慢性痛均有療效。

實施例3福爾馬林足底腫脹法測定去氫紫堇堿抗炎活性

本實例由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過福爾馬林足底腫脹法對去氫紫堇堿的抗炎活性進行測定。選擇48只雄性小鼠，分為10％DMSO組、雙氯芬酸鈉組、嗎啡組、去氫紫堇堿低劑量組(3.6mg/kg)、去氫紫堇堿中劑量組(6mg/kg)、去氫紫堇堿高劑量組(10mg/kg)，其中10％DMSO組為對照組，雙氯芬酸鈉和嗎啡組為陽性對照組。

給藥10min后，足底注射20μl 5％福爾馬林液，記錄福爾馬林注射前和注射后60min小鼠腳掌厚度。

實驗結(jié)果：如圖4所示，去氫紫堇堿可以劑量依賴性的降低福爾馬林導(dǎo)致的足底腫脹， 其中10mg/kg的去氫紫堇堿抑制足底腫脹的效果優(yōu)于陽性對照藥雙氯芬酸鈉。

實施例4去氫紫堇堿對重要臟器的毒性作用

本實例由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過常規(guī)操作對去氫紫堇堿引起的臟器毒性進行測定。

選擇24只雄性小鼠，分為10％DMSO組、去氫紫堇堿高劑量組(10mg/kg)

給藥后，觀察24h，包括小鼠的行為、活動、飲食、體重、毛發(fā)、糞便，然后處死小鼠，觀察大體解剖，取肝、腎、心、肺、腎、脾、腦測量臟器的濕重

實驗結(jié)果：給藥后小鼠沒有顯示出行為、活動、飲食、體重、毛發(fā)、糞便的異常，大體解剖無明顯異常，肝、腎、心、肺、腎、脾、腦測量臟器無明顯的改變，如圖5所示，臟器系數(shù)與對照組相比無顯著差異。說明了去氫紫堇堿對重要臟器無明顯的毒性作用。