降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合及制備方法
【專利摘要】降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物60-80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20-40份。本發(fā)明還提供了一種降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的制備方法。淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑隸屬于中藥和微生態(tài)制劑范疇，是國家倡導(dǎo)的替代抗生素等化學(xué)藥產(chǎn)品的有利替代者，具有安全高效、無殘留、不違禁等優(yōu)勢(shì)。該組合通過間接增強(qiáng)免疫功能、直接殺菌作用、以及提供營養(yǎng)成分，快速起到降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的效果，而且，本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單、易操作，最大程度的得到淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑，不破壞淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑的有效成分。
【專利說明】降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合及制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合及制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 乳房炎是困擾奶牛業(yè)的第一大疾病，臨床型乳房炎一般都是由隱性乳房炎進(jìn)一步 發(fā)展所致。而隱性乳房炎的一個(gè)主要特征往往是體細(xì)胞數(shù)的增加。體細(xì)胞數(shù)越高，隱性乳 房炎越嚴(yán)重，越容易轉(zhuǎn)化成臨床型乳房炎。
[0003] 體細(xì)胞數(shù)增加，說明有病原菌感染乳腺，奶牛免疫系統(tǒng)啟動(dòng)并處理病原菌，當(dāng)免疫 系統(tǒng)不能完全清除病原菌時(shí)，體細(xì)胞數(shù)會(huì)持續(xù)上升，產(chǎn)奶量顯著下降，并朝乳房炎的方向發(fā) 展。
[0004] 現(xiàn)在，越來越多的奶業(yè)公司開始關(guān)注體細(xì)胞數(shù)，當(dāng)牛奶中體細(xì)胞數(shù)超過一定數(shù)量 時(shí)，會(huì)降價(jià)收奶或拒絕收奶。因此開發(fā)降低體細(xì)胞數(shù)的產(chǎn)品尤為急迫。目前市面上降低體細(xì) 胞數(shù)的產(chǎn)品主要為中藥散劑、左旋咪唑，甚至是偷著添加的抗生素等。中藥散劑用量大，生 物利用度低，且效果不明顯，主要是以提高免疫力為主。左旋咪唑已經(jīng)禁止在奶牛藥物中添 力口?？股赜捎跉埩魡栴}更是明令禁止。因此，發(fā)明一種高效、綠色、無殘留的產(chǎn)品，能夠快 速降低體細(xì)胞數(shù)，并將其維持在較低水平，從而減少牧場(chǎng)及奶農(nóng)損失具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)中根據(jù)體細(xì)胞數(shù)增加的表現(xiàn)，奶牛乳房炎導(dǎo)致產(chǎn)奶量下 降、奶業(yè)經(jīng)濟(jì)效益降低，現(xiàn)有技術(shù)降低體細(xì)胞數(shù)的藥物效果不明顯的技術(shù)問題，設(shè)計(jì)了一種 安全、效果明顯的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合及制備方法。
[0006] 本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)其目的采用的技術(shù)方案是：
[0007] 降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提 取物60-80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20-40份。
[0008] 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物60份，乳酸菌發(fā)酵制劑40份。
[0009] 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物65份，乳酸菌發(fā)酵制劑35份。
[0010] 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物70份，乳酸菌發(fā)酵制劑30份。
[0011] 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物75份，乳酸菌發(fā)酵制劑25份。
[0012] 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20份。
[0013] 制備權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括 以下步驟：
[0014] A :將淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，然后將淫羊藿粉置于 8-10倍重量的70%乙醇中，回流提取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合 并，得到合并浸提液，利用酒精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于80-KKTC進(jìn) 行濃縮，直至濃縮至合并浸提液總體積的1/15-1/10,得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧 干燥，得淫羊藿提取物，備用；
[0015] B :將試管中保存的乳酸菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小時(shí)， 得乳酸菌液體種子，然后將該乳酸菌液體種子按體積百分比〇. 5 %的接種量接于液體改良 MRS培養(yǎng)基中，于30-32°C厭氧發(fā)酵60-72小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液于40-50°C濃縮至發(fā) 酵液原體積的1/10-1/6,得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得乳酸菌發(fā)酵 制劑，備用；
[0016] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑按比例混合均 勻，即得。
[0017] 所述的步驟A中粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100%通過10目篩， 98. 1-98. 9%不通過20目篩。
[0018] 所述的步驟B中乳酸菌菌種選自植物乳桿菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵中的一 種。
[0019] 所述的步驟B中MRS液體種子培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨10. Og/L、牛肉膏10. Og/L、 酵母膏5. Og/L、檸檬酸氫二銨2. Og/L、葡萄糖20. Og/L、吐溫一 801. OmL/L、乙酸鈉5. Og/L、 磷酸二氫鉀2. 0g/L、硫酸鎂0· 58g/L、硫酸錳0· 25g/L，溶劑為蒸餾水，pH值6. 2?6. 6 ;液 體改良MRS培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨12. 0g/L、牛肉膏5. 0g/L、酵母膏6. 0g/L、檸檬酸氫二 銨2. 0g/L、葡萄糖20. 0g/L、吐溫一 801. 0mL/L、乙酸鈉5. 0g/L、磷酸二氫鉀2. 0g/L、硫酸鎂 〇· 2g/L、硫酸錳0· 05g/L，溶劑為蒸餾水，pH值6. 2。
[0020] 本發(fā)明的有益效果是：淫羊藿提取物中含有多糖和蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分，這些多糖 及蛋白等成分可以作為乳酸菌的發(fā)酵基質(zhì)，促進(jìn)乳酸菌的快速增殖，乳酸菌增殖過程中產(chǎn) 生乳酸、乳酸菌素及抗菌肽等活性殺菌物質(zhì)，以及多種維生素等營養(yǎng)成分，經(jīng)過腸道吸收 后，迅速發(fā)揮作用。而多糖類成分經(jīng)過乳酸菌轉(zhuǎn)化，分子結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變，副作用降低，功效增強(qiáng)。 蛋白成分經(jīng)過乳酸菌分解酶的降解作用，生成小分子肽或氨基酸，從而增強(qiáng)免疫及營養(yǎng)功 能。
[0021] 淫羊藿提取物還富含淫羊藿苷、黃酮等物質(zhì)，通過和乳酸菌發(fā)酵制劑協(xié)同，可增加 組織中巨噬細(xì)胞的數(shù)量，顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活力；可增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)化； 另外，其對(duì)NK細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等也有明顯的增強(qiáng)作用。 各種免疫細(xì)胞的增強(qiáng)，可以更快更高效的吞噬和殺滅侵入乳腺和機(jī)體的病原菌，從而快速 降低體細(xì)胞數(shù)，提高奶牛的機(jī)體免疫能力、抑制體細(xì)胞數(shù)。
[0022] 該組合物具有增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能、直接殺滅入侵的病原菌，以及生成維生素、氨 基酸等營養(yǎng)成分三方面的功效，通過這三種功效，可快速降低體細(xì)胞，加快患病奶牛的機(jī)體 恢復(fù)。
[0023] 淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑隸屬于中藥和微生態(tài)制劑范疇，是國家倡導(dǎo)的替 代抗生素等化學(xué)藥產(chǎn)品的有利替代者，具有安全高效、無殘留、不違禁等優(yōu)勢(shì)。該組合通過 間接增強(qiáng)免疫功能、直接殺菌作用、以及提供營養(yǎng)成分，快速起到降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的效 果，連續(xù)使用7-10天，效果非常明顯。相較于現(xiàn)有技術(shù)不僅效果明顯而且迅速，通過本發(fā)明 的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，大大降低了奶牛體細(xì)胞數(shù)。
[0024] 本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單、易操作，最大程度的得到淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制 齊U，不破壞淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑的有效成分，其中的制備參數(shù)是通過長(zhǎng)期的研 究和嚴(yán)格的的實(shí)驗(yàn)總結(jié)得出的，對(duì)本產(chǎn)品組合物的有效成分和藥效有著關(guān)鍵的作用，是綜 合組合物的生物利用度、毒副作用、理化性質(zhì)以及結(jié)合后藥效的發(fā)揮、藥物濃度、奶牛的適 用性和安全性等多方面的考慮，而且本發(fā)明的各參數(shù)使得制得的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥 及微生態(tài)制劑組合應(yīng)用到奶牛中體細(xì)胞數(shù)大大降低，相較于現(xiàn)有的產(chǎn)品效果明顯而且迅 速。

【具體實(shí)施方式】
[0025] 本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)中根據(jù)體細(xì)胞數(shù)增加的表現(xiàn)，奶牛乳房炎導(dǎo)致產(chǎn)奶量下 降、奶業(yè)經(jīng)濟(jì)效益降低，現(xiàn)有技術(shù)降低體細(xì)胞數(shù)的藥物效果不明顯，設(shè)計(jì)一種安全、效果明 顯的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合及制備方法。下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā) 明作進(jìn)一步說明。
[0026] 實(shí)施例1.降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物60份，乳酸菌發(fā)酵制劑40份。
[0027] 制備上述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括以下步驟：
[0028] A :將7kg淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100% 通過10目篩，98. 1%不通過20目篩，然后將淫羊藿粉置于8倍重量的70%乙醇中，回流 提取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到合并浸提液163L，利用酒 精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于80°C進(jìn)行濃縮，直至合并浸提液濃縮至 16L，得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得淫羊藿提取物1. 38kg，備用。
[0029] B :將試管中保存的植物乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小 時(shí)，得植物乳桿菌液體種子，然后將植物乳桿菌液體種子180mL按體積百分比0. 5%的接種 量接于液體改良MRS培養(yǎng)基中，于30°C厭氧發(fā)酵62小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，得到發(fā)酵液34. 6L， 將發(fā)酵液于45°C濃縮至4. 7L，得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得植物 乳桿菌發(fā)酵制劑〇. 73kg，備用。
[0030] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和植物乳桿菌發(fā)酵制劑按比例，稱 取淫羊藿提取物1. lkg，植物乳桿菌發(fā)酵制劑0. 73kg，混合均勻，分裝即得。
[0031] 實(shí)施例2.降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物65份，乳酸菌發(fā)酵制劑35份。
[0032] 制備上述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括以下步驟：
[0033] A :將10kg淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100% 通過10目篩，98. 3%不通過20目篩，然后將淫羊藿粉置于8. 5倍重量的70%乙醇中，回流 提取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到合并浸提液185L，利用酒 精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于85°C進(jìn)行濃縮，直至合并浸提液濃縮至 15. 1L，得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得淫羊藿提取物1. 8kg，備用。
[0034] B :將試管中保存的屎腸球菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小 時(shí)，得屎腸球菌液體種子，然后將屎腸球菌液體種子200mL按體積百分比0. 5%的接種量接 于液體改良MRS培養(yǎng)基中，于30°C厭氧發(fā)酵64小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，得到發(fā)酵液39. 4L，將發(fā) 酵液于45°C濃縮至5. 5L，得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得屎腸球菌 發(fā)酵制劑〇.87kg，備用。
[0035] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和屎腸球菌發(fā)酵制劑按比例，稱取 淫羊藿提取物1. 58kg，屎腸球菌發(fā)酵制劑0. 85kg，混合均勻，分裝即得。
[0036] 實(shí)施例3.降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物70份，乳酸菌發(fā)酵制劑30份。
[0037] 制備上述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括以下步驟：
[0038] A :將15kg淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100% 通過10目篩，98. 8%不通過20目篩，然后將淫羊藿粉置于10倍重量的70%乙醇中，回流提 取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到合并浸提液277. 2L，利用酒 精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于90°C進(jìn)行濃縮，直至合并浸提液濃縮至 20. 7L，得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得淫羊藿提取物2. 7kg，備用。
[0039] B :將試管中保存的嗜酸乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小 時(shí)，得嗜酸乳桿菌液體種子，然后將嗜酸乳桿菌液體種子250mL按體積百分比0. 5%的接種 量接于液體改良MRS培養(yǎng)基中，于30°C厭氧發(fā)酵67小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，得到發(fā)酵液49. 3L， 將發(fā)酵液于48 °C濃縮至5L，得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得嗜酸乳 桿菌發(fā)酵制劑1. 2kg，備用。
[0040] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和嗜酸乳桿菌發(fā)酵制劑按比例，稱 取淫羊藿提取物2. 67kg，屎腸球菌發(fā)酵制劑1. 16kg，混合均勻，分裝即得。
[0041] 實(shí)施例4.降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物75份，乳酸菌發(fā)酵制劑25份。
[0042] 制備上述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括以下步驟：
[0043] A :將12kg淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100% 通過10目篩，98. 5%不通過20目篩，然后將淫羊藿粉置于9倍重量的70%乙醇中，回流提 取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到合并浸提液232. 3L，利用酒 精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于95°C進(jìn)行濃縮，直至合并浸提液濃縮至 18. 3L，得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得淫羊藿提取物2. 3kg，備用。
[0044] B :將試管中保存的嗜酸乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小 時(shí)，得嗜酸乳桿菌液體種子，然后將嗜酸乳桿菌液體種子200mL按體積百分比0. 5%的接種 量接于液體改良MRS培養(yǎng)基中，于30°C厭氧發(fā)酵69小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，得到發(fā)酵液42. 7L， 將發(fā)酵液于50°C濃縮至4. 3L，得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得嗜酸 乳桿菌發(fā)酵制劑1. 〇3kg，備用。
[0045] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和嗜酸乳桿菌發(fā)酵制劑按比例，稱 取淫羊藿提取物2. lkg，嗜酸乳桿菌發(fā)酵制劑0. 7kg，混合均勻，分裝即得。
[0046] 實(shí)施例5.降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20份。
[0047] 制備上述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，包括以下步驟：
[0048] A :將13kg淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100% 通過10目篩，98. 7%不通過20目篩，然后將淫羊藿粉置于9. 5倍重量的70%乙醇中，回流 提取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到合并浸提液245. 7L，利用 酒精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于l〇〇°C進(jìn)行濃縮，直至合并浸提液濃縮 至16. 4L，得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得淫羊藿提取物2. 43kg，備用。
[0049] B :將試管中保存的植物乳桿菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小 時(shí)，得植物乳桿菌液體種子，然后將植物乳桿菌液體種子220mL按體積百分比0. 5%的接種 量接于液體改良MRS培養(yǎng)基中，于30°C厭氧發(fā)酵72小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，得到發(fā)酵液44. 3L， 將發(fā)酵液于48°C濃縮至7. 3L，得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得植物 乳桿菌發(fā)酵制劑1. 12kg，備用。
[0050] C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和植物乳桿菌發(fā)酵制劑按比例，稱 取淫羊藿提取物2. 4kg，植物乳桿菌發(fā)酵制劑0. 6kg，混合均勻，分裝即得。
[0051] 選取600頭體細(xì)胞數(shù)較高的奶牛樣本，奶牛平均初始體細(xì)胞數(shù)為158. 2萬/mL，隨 機(jī)分成6組，分別為對(duì)照組和實(shí)施例組，每組100頭奶牛，按每頭奶牛每天投喂產(chǎn)品50g，對(duì) 照組投喂市場(chǎng)上現(xiàn)有的產(chǎn)品，實(shí)施例組分別投喂上述5組實(shí)施例產(chǎn)品，連用10天。每天采 用CMT檢測(cè)法進(jìn)行體細(xì)胞數(shù)測(cè)定，結(jié)果如下：
[0052] 投喂市場(chǎng)上現(xiàn)有產(chǎn)品的對(duì)照組奶牛的體細(xì)胞數(shù)測(cè)定值，見表1 :
[0053] 表 1 :
[0054]

【權(quán)利要求】
1. 降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于：其成分包括：按重量比 計(jì)，淫羊藿提取物60-80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20-40份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于： 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物60份，乳酸菌發(fā)酵制劑40份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于： 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物65份，乳酸菌發(fā)酵制劑35份。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于： 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物70份，乳酸菌發(fā)酵制劑30份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于： 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物75份，乳酸菌發(fā)酵制劑25份。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合，其特征在于： 其成分包括：按重量比計(jì)，淫羊藿提取物80份，乳酸菌發(fā)酵制劑20份。
7. 制備權(quán)利要求1所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的方法，其特征 在于：包括以下步驟： A :將淫羊藿藥材粉碎，得到粒度在10-20目的淫羊藿粉，然后將淫羊藿粉置于8-10倍 重量的70%乙醇中，回流提取兩次，每次30-60分鐘，將兩次回流提取的浸提液合并，得到 合并浸提液，利用酒精回收塔回收乙醇，并將合并浸提液通過濃縮罐于80-KKTC進(jìn)行濃縮， 直至濃縮至合并浸提液總體積的1/15-1/10,得到濃縮液，然后將濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得 淫羊藿提取物，備用； B :將試管中保存的乳酸菌菌種接種于MRS液體種子培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，得乳 酸菌液體種子，然后將該乳酸菌液體種子按體積百分比0.5 %的接種量接于液體改良MRS 培養(yǎng)基中，于30-32°C厭氧發(fā)酵60-72小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液于40-50°C濃縮至發(fā)酵 液原體積的1/10-1/6,得到發(fā)酵濃縮液，將所得發(fā)酵濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得乳酸菌發(fā)酵制 齊U，備用； C :將步驟A和步驟B分別制得的淫羊藿提取物和乳酸菌發(fā)酵制劑按比例混合均勻，即 得降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的制備方法，其 特征在于：所述的步驟A中粒度在10-20目的淫羊藿粉，粒度分布為：100%通過10目篩， 98. 1-98. 9%不通過20目篩。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的制備方法，其 特征在于：所述的步驟B中乳酸菌菌種選自植物乳桿菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵中的一 種。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的降低奶牛體細(xì)胞數(shù)的中藥及微生態(tài)制劑組合的制備方 法，其特征在于：所述的步驟B中MRS液體種子培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨10. Og/L、牛肉膏 10. Og/L、酵母膏5. Og/L、檸檬酸氫二銨2. Og/L、葡萄糖20. Og/L、吐溫一 801. OmL/L、乙酸鈉 5. 0g/L、磷酸二氫鉀2. 0g/L、硫酸鎂0· 58g/L、硫酸錳0· 25g/L，溶劑為蒸餾水，pH值6. 2? 6. 6 ;液體改良MRS培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨12. 0g/L、牛肉膏5. 0g/L、酵母膏6. 0g/L、檸檬 酸氫二銨2. 0g/L、葡萄糖20. 0g/L、吐溫一 801. 0mL/L、乙酸鈉5. 0g/L、磷酸二氫鉀2. 0g/L、 硫酸鎂0. 2g/L、硫酸錳0. 05g/L，溶劑為蒸餾水，pH值6. 2。
【文檔編號(hào)】A61K36/296GK104208118SQ201410463657
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月11日
【發(fā)明者】郭立佳, 徐立蕭, 田繼業(yè), 李定剛, 邵譜 申請(qǐng)人:保定冀中藥業(yè)有限公司