一種紫蘇總黃酮的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種紫蘇總黃酮的制備方法，具體涉及一種采用酶-微波法提取紫蘇總黃酮的方法。其處理步驟包括：將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量1~2%的復(fù)合酶，混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于30~40℃發(fā)酵3~5天；取出，加入50~70%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取20~40min，減壓濃縮，回收乙醇，得濃縮液；將所得濃縮液經(jīng)大孔樹脂上柱、洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮。本發(fā)明以乙醇為溶劑，既價(jià)廉又無(wú)毒，其純化物總黃酮的含量可達(dá)70%以上，且重現(xiàn)性好，樹脂可重復(fù)使用。
【專利說(shuō)明】一種紫蘇總黃酮的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種紫蘇總黃酮的制備方法，屬于中藥有效成分提取領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002]紫蘇葉為唇形科植物紫蘇的葉，又稱蘇葉，為一年生草本植物。其含有多種化學(xué)成分，如花色素苷、黃酮、黃酮苷等16種黃酮類化合物，以及迷迭香酸、紫蘇醛、紫蘇酮、欖香素、石竹烯等。
[0003]黃酮類化合物是指基本母核為2-苯基色原酮的系列化合物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分，種類繁多，具有多種生物活性，除具有抗菌、消炎、抗病變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有顯著效果，是一種重要的具有開發(fā)前景的天然有機(jī)抗氧化劑。近年來(lái)黃酮類化合物的研究?jī)A向于其藥用價(jià)值的開發(fā)，更多地涉及提取工藝的應(yīng)用研究、黃酮類化合物的含量測(cè)定及制劑制備。
[0004]目前國(guó)內(nèi)外黃酮的提取、純化方法主要有:回流提取法、超臨界流體萃取法、聚酰胺柱層析法等。這些方法均存在諸多不足:回流提取法，具有耗時(shí)長(zhǎng)、有效成分提取率低、操作復(fù)雜的缺點(diǎn)；超臨界流體萃取法雖然具有無(wú)溶劑殘留、提取率高、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，但其提取條件苛刻，設(shè)備昂貴，維修困難，不適合工業(yè)化生產(chǎn)；而聚酰胺純化法對(duì)黃酮類成分的不可逆吸附值高，其得率低，且洗脫麻煩。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，旨在提供一種高效性和選擇性、操作簡(jiǎn)便、產(chǎn)率高、副產(chǎn)物少、可工業(yè)化實(shí)現(xiàn)的制備紫蘇總黃酮的方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案按照下列步驟進(jìn)行:
a.將紫蘇葉陰干，粉碎；
b.向上述原料中加入原料重量廣2%的復(fù)合酶，混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于3(T40°C發(fā)酵3飛天；
c.取出，加入3飛倍的50?70%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取，于功率40(T600W的條件下萃取2(T40min，過濾，濾液減壓濃縮，回收乙醇，得濃縮液；
d.將所得濃縮液上大孔樹脂柱，經(jīng)Γ6倍樹脂體積的6(Γ70%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮。
[0007]步驟b中所述的復(fù)合酶為比例0.5:0.3:0.2的纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的混合物。
[0008]步驟d中所述的樹脂用量與原料的質(zhì)量比為1:1。
[0009]步驟d中所述的大孔樹脂類型為HPD-100、HPD-400、AB-8。
[0010]黃酮類化合物是胞內(nèi)物質(zhì)，選用復(fù)合酶來(lái)分解構(gòu)成細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)的纖維素、半纖維素和果膠質(zhì)，使其細(xì)胞壁水解破裂，從而增大了有效成分的擴(kuò)散面積，有利于細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的溶出。而微波是一種超高速電磁波，具有很強(qiáng)的穿透作用，使植物細(xì)胞中的水分或有機(jī)溶劑迅速升溫升壓，細(xì)胞壁穿孔，使成分從細(xì)胞中溶出，以增加紫蘇中有效成分在溶劑中的溶解，而且微波電磁場(chǎng)使分子運(yùn)動(dòng)短時(shí)間內(nèi)加劇，從而縮短了時(shí)間，提高了提取率。本發(fā)明利用酶法和微波提取兩種技術(shù)聯(lián)用，優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，大大地提高了紫蘇總黃酮的提取率，再結(jié)合大孔吸附樹脂的純化技術(shù)，即可得到高得率、高含量的紫蘇總黃酮。
[0011]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
[0012]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量1%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶=0.5:0.3:0.2)，混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于30°C發(fā)酵3天。取出，加入3倍的50%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取，于功率400W的條件下萃取20min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質(zhì)量的HPD-100大孔樹脂柱，經(jīng)4倍樹脂體積的60%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為80.1%，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮的含量為70.6%。
[0013]實(shí)施例2:
將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量2%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶=0.5:0.3:0.2)，混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于40°C發(fā)酵4天。取出，加入4倍的60%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取，于功率500W的條件下萃取30min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質(zhì)量的AB-8大孔樹脂柱，經(jīng)5倍樹脂體積的70%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為85.2%，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮的含量為75.4%。
[0014]實(shí)施例3:
將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量1.5%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶=0.5:0.3:0.2),混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于35°C發(fā)酵5天。取出，加入5倍的70%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取，于功率600W的條件下萃取40min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質(zhì)量的HPD-400大孔樹脂上柱，經(jīng)6倍樹脂體積的65%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為83.1%，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮的含量為75.2%。
【權(quán)利要求】
1.一種紫蘇總黃酮的制備方法，其特征在于: a.將紫蘇葉陰干，粉碎； b.向上述原料中加入原料重量廣2%的復(fù)合酶，混合均勻，噴灑蒸餾水，達(dá)到手握成團(tuán)即可，薄膜包裹，于3(T40°C發(fā)酵3飛天； c.取出，加入3飛倍的50?70%的乙醇溶液，進(jìn)行微波萃取，于功率40(T600W的條件下萃取2(T40min，過濾，濾液減壓濃縮，回收乙醇，得濃縮液； d.將所得濃縮液上大孔樹脂柱，經(jīng)Γ6倍樹脂體積的6(Γ70%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種紫蘇總黃酮的制備方法，其特征在于:步驟b中所述的復(fù)合酶為比例0.5:0.3:0.2的纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫蘇總黃酮的制備方法，其特征在于:步驟d中所述的樹脂用量與原料的質(zhì)量比為1:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫蘇總黃酮的制備方法，其特征在于:步驟d中所述的大孔樹脂類型為HPD-100、HPD-400、AB-8。
【文檔編號(hào)】A61K127/00GK104173438SQ201410450520
【公開日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】蘇劉花, 楊存 申請(qǐng)人:南京澤朗生物科技有限公司