復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域。本發(fā)明涉及復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的配方及制備方法。本發(fā)明通過(guò)制備得到的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒提高了吳茱萸堿的生物利用度，用于腫瘤及炎癥治療。
【專利說(shuō)明】復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥制劑領(lǐng)域，本發(fā)明涉及復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的配方及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]吳茱萸始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，為蕓香科植物吳茱萸石虎或疏毛吳茱萸的干燥近成熟果實(shí)。吳茱萸堿是該植物中的主要生物堿，國(guó)內(nèi)外研究表明吳茱萸堿具有擴(kuò)張血管抗炎鎮(zhèn)痛減肥，調(diào)節(jié)體溫，抗腫瘤以及抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移等藥理學(xué)活性，但吳茱萸堿的水溶性極差，生物利用度低，吳茱萸堿其大鼠口服生物利用度僅為0.1 %。磷脂復(fù)合物作為新型給藥系統(tǒng)，可增加中藥活性成分的口服吸收，提高其生物利用度。文獻(xiàn)(柳珊，譚群友，王紅，廖紅，張景勅.吳茱萸堿磷脂復(fù)合物的制備表征及體外抗腫瘤活性的研究.中國(guó)藥學(xué)雜志.2012,47 (4):517-523)通過(guò)將吳茱萸堿制備成吳茱萸堿磷脂復(fù)合物，可提高藥物溶解度3.4倍，促進(jìn)了藥物的吸收，有利于藥物生物利用度的提高。羥丙基-β-環(huán)糊精是β-環(huán)糊精衍生物，包合化合物可望提高被包合物的穩(wěn)定性、水溶性和生物利用度。
[0003]超分子藥物指兩個(gè)或兩個(gè)以上的分子通過(guò)非共價(jià)鍵形成的、用于預(yù)防、診斷和治療疾病的復(fù)合物。藥物的磷脂復(fù)合物及環(huán)糊精包合物均屬于超分子藥物。磷脂復(fù)合吳茱萸堿可稱為磷脂復(fù)合超分子吳茱萸堿。羥丙基-β -環(huán)糊精包合吳茱萸堿可稱為羥丙基環(huán)糊精包合超分子吳茱萸堿(目前尚未見(jiàn)羥丙基環(huán)糊精包合超分子吳茱萸堿的研究報(bào)道)。
[0004]經(jīng)查詢專利及 文獻(xiàn)，目前尚未見(jiàn)同時(shí)采用磷脂復(fù)合技術(shù)和羥丙基環(huán)糊精包合技術(shù)增加任何藥物的生物利用度的研究報(bào)道，更無(wú)同時(shí)采用磷脂復(fù)合技術(shù)和羥丙基-環(huán)糊精包合技術(shù)制備吳茱萸堿磷脂復(fù)合羥丙基-環(huán)糊精包合納米粒(即復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒)的研究報(bào)道，更無(wú)將此復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒用于增加吳茱萸堿的生物利用度，提高抗癌活性的研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法。復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒載體改善了藥物的溶解性，促進(jìn)了藥物的吸收，增加了藥物的生物利用度，提高了抗癌活性。本發(fā)明提供的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒制備工藝簡(jiǎn)單，成本較低，易于控制，易于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0006]本發(fā)明提供的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒，制劑中各組分重量百分比為:吳茱萸堿1-4.2份，羥丙基- β -環(huán)糊4.1-26.8份，磷脂7-83.1份，無(wú)水乙醇790份。本發(fā)明提供的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的制備方法如下:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基_β -環(huán)糊精、磷脂，溶于無(wú)水乙醇中，60°C恒溫磁力攪拌5h反應(yīng)后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無(wú)水乙醇，真空干燥除去殘留的無(wú)水乙醇，即得復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒。
[0007]用本發(fā)明制得的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒平均粒徑約為180.Snm(圖1)。大鼠口服給藥后體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)考察結(jié)果表明，相對(duì)于吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基- β -環(huán)糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復(fù)合物，復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的曲線下面積增大，峰濃度增大，在體內(nèi)的生物利用度明顯增加。復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的曲線下面積AUCchoo (μ g/L*h)為(4085.86± 17.21)，分別約是吳茱萸堿(870.3±8.87)、吳茱萸堿羥丙基-β -環(huán)糊精包合物(2166.72±25.06)和吳茱萸堿磷脂復(fù)合物(2280.43± 13.69)的4.7、1.9、1.8倍。復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒生物利用度分別是吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基-β -環(huán)糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復(fù)合物的469 %、188 %、180 %。
[0008]大鼠口服灌胃給藥復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒、吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基-β_環(huán)糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復(fù)合物，給藥劑量均為250mg/kg。分別于給藥后不同時(shí)間眼眶后靜脈叢取血，置于肝素化試管中，混勻，離心(12000r/min) 5min,分離上層血漿，于-20°C冰箱中保存?zhèn)溆?。血漿樣品的制備:吸取血漿樣品150 μ L，加入內(nèi)標(biāo)工作液(20 μ g.πι-1) 10 μ L，渦旋30s，加入氨水75 μ L，渦旋30s,加入乙醚750 μ L，渦旋3min (渦旋Imin后靜置30s,再渦旋Imin,如此三次，總計(jì)潤(rùn)旋時(shí)間為3min),4000r.mirT1潤(rùn)旋5min，取上清液600 μ L至離心管中，40°C水浴揮干乙醚后，加入甲醇100 μ L渦旋lmin，12000r ?mirT1離心1min,取上清液40 μ L進(jìn)樣檢測(cè)。結(jié)果代入回歸方程計(jì)算血藥濃度,得到藥時(shí)曲線，見(jiàn)圖2。
[0009]本專利不同于通常研究報(bào)道的藥物的納米載體的制備。本發(fā)明首次同時(shí)采用磷脂復(fù)合技術(shù)和羥丙基-β -環(huán)糊精包合技術(shù)制備了復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒(即吳茱萸堿磷脂復(fù)合羥丙基-環(huán)糊精包合納米粒)，明顯促進(jìn)了吳茱萸堿在體內(nèi)的吸收，增加了吳茱萸堿的生物利用度。本發(fā)明首次通過(guò)同時(shí)利用藥用輔料磷脂和羥丙基-β_環(huán)糊精，同時(shí)采用磷脂復(fù)合技術(shù)和羥丙基_β -環(huán)糊精包合技術(shù)，制備成吳茱萸堿磷脂復(fù)合羥丙基-β -環(huán)糊精包合納米粒，即復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒。此新型遞藥系統(tǒng)兼具了磷脂復(fù)合物和環(huán)糊精包合物的優(yōu)勢(shì)，一方面由于羥丙基-環(huán)糊精的存在，明顯改善了吳茱萸堿的溶解性能；另一方面磷脂的存在，促進(jìn)了吳茱萸堿能更好地從親水環(huán)境轉(zhuǎn)移至親脂環(huán)境，可有效提高吳茱萸堿的體內(nèi)吸收。復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒，融合了羥丙基環(huán)糊精和磷脂提高吳茱萸堿水溶性，促進(jìn)吸收的優(yōu)點(diǎn)，極大地提高了吳茱萸堿的生物利用度，延長(zhǎng)了藥物作用時(shí)間，吳茱萸堿磷脂復(fù)合羥丙基_β -環(huán)糊精包合納米粒(即復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒)的體內(nèi)生物利用度明顯高于游離吳茱萸堿、單獨(dú)采用磷脂復(fù)合技術(shù)得到的磷脂復(fù)合超分子吳茱萸堿、單獨(dú)采用羥丙基-環(huán)糊精包合技術(shù)得到的羥丙基-環(huán)糊精包合超分子吳茱萸堿，復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒為吳茱萸堿提供了一種生物利用度明顯提高的新型載藥系統(tǒng)，具有重要意義。
[0010]用本發(fā)明提供的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒進(jìn)行的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明復(fù)合超分子吳茱萸堿納米?？擅黠@提高吳茱萸堿殺死腫瘤細(xì)胞的能力(見(jiàn)圖3)，復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒和吳茱萸堿抑制50%腫瘤細(xì)胞的藥物濃度分別約為1.25 μ M和20 μ Μ,即復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的半數(shù)抑制濃度約為吳茱萸堿1/16。用本發(fā)明提供的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒進(jìn)行的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明裸鼠靜脈注射后具有明顯的腫瘤靶向性及抑瘤效果。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0011]圖1為本發(fā)明制得的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的粒徑。[0012]復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒平均粒徑為180.8nm。
[0013]圖2為本發(fā)明制得的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的大鼠口服灌胃給藥后體內(nèi)藥時(shí)曲線圖?？v坐標(biāo)為藥物濃度，橫坐標(biāo)為時(shí)間。
[0014]本發(fā)明制備得到的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒較吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基環(huán)糊精包合物、吳茱萸堿磷脂復(fù)合物有更大的曲線下面積，并且延長(zhǎng)了作用了時(shí)間，復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒生物利用度分別是吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基_β -環(huán)糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復(fù)合物的469%、188%, 180%。其生物利用度不僅較游離藥物，而且相對(duì)于單一技術(shù)制備的吳茱萸堿羥丙基_β -環(huán)糊精包合物、吳茱萸堿磷脂復(fù)合物都有明顯的提聞。
[0015]圖3為分別給予肺癌Η446細(xì)胞等量的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒、游離吳茱萸堿、空白納米粒后48小時(shí)的存活情況?？v坐標(biāo)為腫瘤細(xì)胞的存活率，橫坐標(biāo)為給予的制劑中的藥物濃度。復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒和吳茱萸堿抑制50%腫瘤細(xì)胞的藥物濃度分別約為1.25 μ M和20 μ Μ,即復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的半數(shù)抑制濃度約為吳茱萸堿1/16，說(shuō)明復(fù)合超分子吳茱萸堿納米?？擅黠@提高吳茱萸堿殺死腫瘤細(xì)胞的能力。
【具體實(shí)施方式】
[0016]為了進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明及其優(yōu)點(diǎn)，給出了下列特定的實(shí)施例，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅有于具體說(shuō)明而不是作為本發(fā)明范圍的限制。
[0017]實(shí)施例1:
[0018]配方中含有 的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.1份，羥丙基-環(huán)糊精4.6份，磷脂10.3份，無(wú)水乙醇410份。
[0019]制備方法包括下列步驟:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基-環(huán)糊精、磷脂，溶于無(wú)水乙醇中，60°C恒溫磁力攪拌5h反應(yīng)后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無(wú)水乙醇，真空干燥除去殘留的無(wú)水乙醇，即得復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒。
[0020]實(shí)施例2:
[0021]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.5份，羥丙基-β-環(huán)糊精12.1份，磷脂16.8份，無(wú)水乙醇600份。
[0022]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0023]實(shí)施例3:
[0024]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.8份，羥丙基-環(huán)糊精16.7份，磷脂12份，無(wú)水乙醇790份。
[0025]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0026]實(shí)施例4:
[0027]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿2.1份，羥丙基_β -環(huán)糊精5.3份，磷脂15.7份，無(wú)水乙醇800份。
[0028]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0029]實(shí)施例5:
[0030]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.9份，羥丙基-環(huán)糊精5.1份，磷脂7份，無(wú)水乙醇850份。[0031]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0032]實(shí)施例6:
[0033]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿2.5份，羥丙基-環(huán)糊精13.7份，磷脂10.6份，無(wú)水乙醇1200份。
[0034]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0035]實(shí)施例7:
[0036]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3份，羥丙基-環(huán)糊精13.9份，磷脂52.1份，無(wú)水乙醇1350份。
[0037]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0038]實(shí)施例8:
[0039]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3.1份，羥丙基_β -環(huán)糊精4.1份，磷脂9份，無(wú)水乙醇1400份。
[0040]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0041]實(shí)施例9:
[0042]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3.5份，羥丙基-環(huán)糊精26.8份，磷脂37.5份，無(wú)水乙醇1800份。
[0043]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0044]實(shí)施例10:
[0045]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.1份，羥丙基-環(huán)糊精11.5份，磷脂34.8份，無(wú)水乙醇2100份。
[0046]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0047]實(shí)施例11:
[0048]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.0份，羥丙基-β -環(huán)糊精26.7份，磷脂83份，無(wú)水乙醇2000份。
[0049]制備方法基本同實(shí)施例1。
[0050]實(shí)施例12:
[0051]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.2份，羥丙基-β-環(huán)糊精11.6份，磷脂15.6份，無(wú)水乙醇2400份。
[0052]制備方法基本同實(shí)施例1。
【權(quán)利要求】
1.一種復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒，其特征在于:制劑中各組分重量百分比為:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒的制備方法:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基-β -環(huán)糊精、磷脂，溶于無(wú)水乙醇中，40-60°C恒溫磁力攪拌3-5小時(shí)反應(yīng)后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無(wú)水乙醇，真空干燥除去殘留的無(wú)水乙醇，即得復(fù)合超分子吳茱萸堿納米粒。
【文檔編號(hào)】A61K9/14GK104027817SQ201410271043
【公開(kāi)日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月6日
【發(fā)明者】張景勍, 羅見(jiàn)春, 劉宏明, 熊華蓉, 胡雪原, 譚群友, 何丹 申請(qǐng)人:重慶醫(yī)科大學(xué)