泛素特異性蛋白酶7的選擇性和可逆性抑制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及式(I’)的喹唑啉-4-酮化合物，其制備過程和其用途。此類化合物作為泛素特異性蛋白酶，特別是USP7的選擇性和可逆性抑制劑是有效的而用于治療如癌癥、神經(jīng)退行性疾病、炎性病癥和病毒感染。
【專利說明】泛素特異性蛋白酶7的選擇性和可逆性抑制劑
[0001]本發(fā)明涉及泛素特異性蛋白酶的新的選擇性和可逆的抑制劑的發(fā)現(xiàn)，其制備過程和其治療用途。
[0002]泛素特異性蛋白酶(USP)是屬于去泛素化酶(DUB)家族的半胱氨酸蛋白酶。
[0003]泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的失調(diào)已經(jīng)牽涉于多種人類疾病的發(fā)病機理，包括癌癥(Hoeller 等人 Nat Rev Cancer2006, 6 (10), 776-788),神經(jīng)退行性疾病(Rubinsztein,Nature2006,443 (7113) ,780-786)和病毒感染(Gao&Luo Can J Physiol Pharmaco12006,
84(1),5-14).在多發(fā)性骨髓瘤和套細胞淋巴瘤的治療上蛋白酶體抑制劑Veleadee
(硼替佐米)的市場成功，已經(jīng)建立起該系統(tǒng)作為癌癥治療的有效靶標(Adams，Nat RevCancer2004，4(5)，349-360)。有前途的替代物靶向蛋白酶體本身將會干擾上游泛素共軛/去共軛機制，以產(chǎn)生更特異性的，低毒性抗癌劑。
[0004]單和多泛素化可以通過特異性切割泛素的羧基端的異肽鍵的去泛素化酶被逆轉(zhuǎn)。泛素特異性蛋白酶和泛素羧基端水解酶(UCH)酶是DUB家族的最佳表征成員(Komander 等人 Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2009，10(8)，550-63 ;Nijman 等人 Cell2005,123 (5)，773-786)。UCH被認為是優(yōu)先切割小蛋白質(zhì)底物及主要是參與泛素的加工和回收利用，但其具體功能仍然知之甚少。USP構(gòu)成DUB的最大亞家族，有超過60個成員。其從特定的蛋白質(zhì)底物中去除泛素， 因此防止了其靶向蛋白酶體或調(diào)節(jié)其亞細胞定位和激活(Daviet&Colland, Biochimie2008,90 (2), 270-83)?；谄涞鞍酌富钚约皡⑴c多種人類疾病，USP正在成為泛素調(diào)節(jié)機制的藥理干預(yù)的潛在祀標(Colland, BiochemSoc Trans2010,38，137-43)。
[0005]USP7 (泛素特異性蛋白酶7) /HAUSP (皰疹相關(guān)泛素特異性蛋白酶)是USP家族的135kDa蛋白。USP7已被證明與病毒蛋白質(zhì)相互作用，所述病毒蛋白質(zhì)如ICPO (VMWllO)、刺激病毒裂解周期的起始的單純皰疹病毒立即早期基因(Everett等人，J Virol73，1999，417-426)、和 EBNAl (EB 核抗原-1, Epstein-Barr Nuclear Antigen-1) (Ho1waty 等人，J Biol Chem2003，278，29987-29994 和 47753-47761)。人類蛋白質(zhì)，如 p53 和 p53 的主要E3連接酶，MDM2，也被鑒定為USP7的伴侶和底物(Cummins等人Nature2004，486，Cummins&Vogelstein, Cell Cycle，2004，3，689-692 ;Li 等人 Mol Cell2004，13，879-886 ;Li等人Nature2002，416，648-653)。更廣泛地，USP7可以使不同的靶標去泛素化，所述靶標包括Mdm2和p53,且此類后期祀標的網(wǎng)絡(luò)去泛素化(net deubiquitination)最終決定了功能性P53的水平。與最近的報道一致的是USP7沉默也已顯示出通過促進Mdm2降解以增加穩(wěn)態(tài)p53的水平。最近顯示出TSPYL5調(diào)節(jié)USP7和p53的結(jié)合，所述TSPYL5是通過與p53競爭結(jié)合至USP7上的相同區(qū)域而潛在參與乳腺癌形成的蛋白質(zhì)(Epping等人，Nat CellBiol.2011,13(1):102-8) ο最近，通過產(chǎn)生組成性的高p53水平，USP7的上調(diào)和下調(diào)均被證明抑制體外結(jié)腸癌細胞的增殖和體內(nèi)腫瘤的生長(Becker等人Cell Cycle2008, 7 (9)，1205-13)。
[0006]USP7還通過Bmi 1/Mel 18的穩(wěn)定以改變pl6INK4a腫瘤抑制因子的水平(Maertens等人，Embo J.201029，2553-2565)。USP7還穩(wěn)定其它參與基因組完整性/調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)，如DNMT1DNA 甲基化酶和 Claspin 銜接子(Du 等人,Science Signaling2010, 3 (146):ra80 ；Faustrup 等人，J.Cell Biol.2009, 184(1):13-9) ? 重要地是，USP7 和 DNMTl 的豐度在人結(jié)腸癌中相互關(guān)聯(lián)，所述DNMTl為參與維持涉及發(fā)育和癌癥的基因沉默所需的表觀基因甲基化的蛋白質(zhì)(Du等人,Science Signaling, 2010, 3 (146):ra80)。USP7還被證明在人細胞中使著名的腫瘤抑制因子基因PTEN去泛素化，從而引起PTEN的核輸出及其之后的失活(Song等人，Nature2008，455 (7214)，813-7)。更重要的是，已首次報道了在前列腺癌中的USP7的過表達，且該過表達與腫瘤的侵襲性直接相關(guān)(Song等人，Nature2008，455 (7214)，813-7)。
[0007]USP7還被證明在人細胞中使F0X04去泛素化，從而引起F0X04的核輸出及其之后的失活；因此激活了致癌的PI3K/PKB信號轉(zhuǎn)導通路(vander Horst等人，NatCellBiol.2006，8，1064-1073)。最后，USP7在p53介導的細胞應(yīng)答中對多種類型的應(yīng)激，如DNA損傷和氧化應(yīng)激，起到重要作用(Marchenko等人，Embo J.200726，923-934，Meulmeester 等人 MolCell2005,18, 565-576.，van der Horst 等人,Nat CellBiol.2006,8，1064-1073)。
[0008]已報道了包含多肽部分P1-Gly-P3-Ser的USP7蛋白質(zhì)結(jié)合的合成抑制劑，其中P1是谷氨酸殘基或帶有非極性側(cè)鏈的氨基酸，且P3是甘氨酸殘基或帶有非極性側(cè)鏈的氨基酸(W02006072048)。
[0009]與USP7沉默相關(guān)的表型以及USP7和必須病毒蛋白質(zhì)和致癌通路(諸如p53/Mdm2和PI3K/PKB通路)之間的已知關(guān)系強烈暗示了以小分子抑制劑靶向USP7可能有助于癌癥和病毒性疾病的治療(Sippl等人，F(xiàn)uture 0ncology2011，7，619-32)。針對USP7的抑制劑最近被報道(Colland等人Molecular Cancer Therapeutics2009，8，2286-95和EP1749822和 PCT/EP2011/050523.2)。
[0010]然而，迄今，似乎還未有特異性和可逆性的USP7小分子抑制劑的報道。
[0011]根據(jù)第一個目的，本發(fā)明涉及一種式(I)化合物:
[0012]
【權(quán)利要求】
1.一種
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中A是C= O。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R7是OR、OR9、NRR’或SR。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至2所述的化合物，其中R7是OH或OR9。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至2所述的化合物，其中R7是0H。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的化合物，其中每一個R1是相同的或不同的，R1選自由直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、鹵素、01?、殿1?’、0隊0&、(:(0)1?、(:(0)(?、(:(0)殿1?’ 或 NHC (O)R組成的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的化合物，其中每一個R1是相同的或不同的，R1選自由直鏈或支鏈C1-C6 (烷基)、鹵素、OH或直鏈或支鏈-O- (C1-C6)烷基組成的組。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的化合物，其中R3、R4、R8、R8’各自是相同的或不同的，R3、R4、R8、R8’各自選自由K-(C1-C6)烷基、OH組成的組。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的化合物，其中L2是直鏈或支鏈C1-C6(亞烷基)或直鏈或支鏈-[C1-C6 (亞烷基)]-O-。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的化合物，其中R6選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基或H組成的組，其中所述芳基、雜芳基或環(huán)烷基任選地被鹵素、直鏈或支鏈O- (C1-C6)烷基取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的化合物，其中p+n= 4。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的化合物，其中P是2且η是2。
13.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項所述的化合物，其中L1是CH2。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項所述的化合物，選自由下列組成的組: 3-({4_羥基-1-[3-(2-甲氧基苯基)丙?；鵠哌啶-4-基}甲基)-3，4_ 二氫喹唑啉-4-酮 7-氯-3- {[1- (2-乙基丁?；?-4-羥基哌啶-4-基]甲基} -3，4- 二氫喹唑啉-4-酮 3-({1-[2-(3-氟苯氧基)乙?；鵠-4-羥基哌啶-4-基}甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 3-{[4-羥基-1-(2-甲基丙酰基)哌啶-4-基]甲基}-6，7-二甲氧基-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 3-{[4-羥基-1-(2-甲基丙?；?哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 4-羥基-1-[2-甲基-3-(噻吩-2-基)丙酰基]哌啶_4-基}甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 7-氯-3-{[1-(3-環(huán)戊基丙酰基)-4-羥基哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氫喹唑啉-4-酮3-{[1-(3-環(huán)戊基丙?；?-4-羥基哌啶-4-基]甲基}-3，4_ 二氫喹唑啉-4-酮 7-氯-3-{[4-羥基-1-(3-苯基丙?；?哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 3-{[4-羥基-1-(3-苯基丙?；?哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氫喹唑啉-4-酮 7-氯-3-({4-羥基-1-[2-甲基-3-(噻吩-2-基)丙?；鵠哌啶_4-基}甲基)_3，4-二氧喧唑琳-4-麗 3-({4-羥基-1-[3-(噻吩-2-基)丙?；鵠哌啶_4-基}甲基)-3，4-二氫喹唑啉-4-酮3- {[1- (2-芐基丙?；?-4-羥基哌啶-4-基]甲基} -3，4- 二氫喹唑啉-4-酮3- {[1- (2-芐基丙?；?-4-羥基哌啶-4-基]甲基} -7-氯-3，4- 二氫喹唑啉-4-酮或它們的藥學上可接受的鹽或它們的光學異構(gòu)體、外消旋體、非對映異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或互變異構(gòu)體。
15.-—種用于制備根據(jù)權(quán)利要求1至14的化合物的方法，包括式(II)化合物與式(III)化合物反應(yīng)
16.-—種用于制備根據(jù)權(quán)利要求1至14的化合物的方法，包括式(IV)化合物與式(V)化合物反應(yīng)
17.一種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至14的式(I)化合物與藥學上可接受的賦形劑。
18.如權(quán)利要求1至14中任一項所定義的式(I)化合物用于抑制去泛素化酶的用途。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的使用的用途，所述用途為抑制USP7(泛素特異性蛋白酶7)/HAUSP (皰疹相關(guān)泛素特異性蛋白酶)。
20.根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項所述的化合物，用于治療和/或預(yù)防癌癥及轉(zhuǎn)移、神經(jīng)退行性疾病、如阿爾茨海默氏病和帕金森氏病、免疫疾病、糖尿病、骨和關(guān)節(jié)疾病、骨質(zhì)疏松癥、關(guān)節(jié)炎的炎性病癥、心血管疾病、病毒感染和疾病、和/或病毒傳染和/或潛伏、細菌感染和疾病。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的化合物的用途，其中所述病毒感染和疾病選自單純皰疹-1或-2病毒感染、甲型肝炎、丙型肝炎、SARS冠狀病毒感染和疾病、EB病毒、鼻病毒感染和疾病、腺病毒感染和疾病、脊髓灰質(zhì)炎。
22.—種組合，其包含如權(quán)利要求1至14中任一項所定義的式(I)化合物和一種或多種活性劑，所述一種或多種活性劑選自抗癌劑、神經(jīng)學劑、血栓溶解劑、抗氧化劑、抗糖尿病劑、抗感染劑、抗 高血壓劑、利尿劑、血栓溶解劑、免疫抑制劑、心血管劑、免疫調(diào)節(jié)劑、抗炎劑、抗病毒劑、抗菌劑。
【文檔編號】A61P31/00GK103930415SQ201280054148
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2012年8月29日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月2日
【發(fā)明者】弗雷德里克·科蘭德, 瑪麗－伊迪絲·古德爾 申請人:海布里詹尼克斯股份公司