用于接種抗金黃色葡萄球菌疫苗的方法和組合物相關(guān)申請(qǐng)的引用本申請(qǐng)要求于2011年7月22日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/510,896的優(yōu)先權(quán)益，該專(zhuān)利申請(qǐng)作為參考并入本文關(guān)于聯(lián)邦資助研究的聲明本發(fā)明受到美國(guó)陸軍醫(yī)學(xué)研究收購(gòu)活動(dòng)（TheU.S.ArmyMedicalResearchAcquisitionActivity），820ChandlerStreet,FortDetrickMD21702-5014（該地址還用作管理收購(gòu)辦公室）授予的陸軍部（theDepartmentoftheArmy）基金號(hào)W81XWH-10-2-0035的資助。本文所公開(kāi)信息的內(nèi)容并非必然地反映政府的立場(chǎng)或政策，并且不應(yīng)推斷為官方背書(shū)。政府對(duì)本發(fā)明具有一定的權(quán)利。

背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及抗金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的疫苗。金黃色葡萄球菌是皮膚和皮膚結(jié)構(gòu)感染（包括蜂窩組織炎和癤瘡）的主要原因，并且是造成菌血癥的最常見(jiàn)的原因。顯示出甲氧西林耐受性（MRSA）表型的金黃色葡萄球菌株是造成包括以下各項(xiàng)的護(hù)理獲得性感染和社區(qū)獲得性感染的主要原因：在有免疫能力的宿主中、在免疫抑制（例如，嗜中性粒細(xì)胞減少、實(shí)體器官或骨髓移植）中以及在表現(xiàn)出皮膚感染反復(fù)發(fā)作的遺傳性免疫功能障礙（例如，喬布綜合征（Job'ssyndrome）、慢性肉芽腫病）中的侵襲性疾病。鑒于甚至用適當(dāng)?shù)目刮⑸锆煼ㄅc侵襲性金黃色葡萄球菌疾病相關(guān)的高死亡率（例如，在菌血癥和心內(nèi)膜炎中15-40%），MRSA對(duì)公共衛(wèi)生的顯著影響是特別受關(guān)注的。危及生命的感染率的提高以及對(duì)抗生素敏感性的降低需要開(kāi)發(fā)針對(duì)金黃色葡萄球菌的有效疫苗。本發(fā)明滿足了該需要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明總體上涉及對(duì)哺乳動(dòng)物接種抗金黃色葡萄球菌疫苗的方法，包括以下步驟：a）鑒別具有發(fā)展金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物（例如，人或非人哺乳動(dòng)物，如家畜，例如，牛、馬、豬或綿羊，或者家養(yǎng)哺乳動(dòng)物，例如，狗或貓）；和b）向所述哺乳動(dòng)物施用免疫原性量的處于藥用介質(zhì)中的包括多肽的疫苗，所述多肽包括分離的凝集素樣序列（Als）3蛋白（Als3p）或其免疫原性片段。示例性多肽包括白色假絲酵母菌Als3p（例如，圖1A中所示的Als3p，例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2或者其免疫原性片段）。在其他實(shí)施方式中，所述多肽包括白色假絲酵母菌Als3p的N端結(jié)構(gòu)域或者其免疫原性片段。本文所公開(kāi)的方法對(duì)于接種抗金黃色葡萄球菌的甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌（MRSA）株的疫苗是特別有用的。本文所公開(kāi)的方法對(duì)于接種抗金黃色葡萄球菌的其他藥物耐受性金黃色葡萄球菌（例如，萬(wàn)古霉素耐受性、達(dá)托霉素耐受性等）株或甲氧西林敏感性金黃色葡萄球菌（MSSA）株的疫苗也是有用的。在其他實(shí)施方式中，所述多肽結(jié)合至載體，如鑰孔血藍(lán)素（KLH）、CRM197、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、白喉類(lèi)毒素、腸毒素B片段、腦膜炎奈瑟菌（N.meningitides）外膜蛋白復(fù)合物或者本領(lǐng)域中用于結(jié)合疫苗的任何其他載體蛋白。這些載體還可以包括噬菌體、酵母、病毒、病毒顆?；蛑亟M病毒樣顆粒。一般地，通過(guò)肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、口服或舌下施用來(lái)給予疫苗，或者以微顆粒制劑形式吸入來(lái)給予。如果需要的話，將疫苗作為加強(qiáng)劑量給予。所述疫苗可選地可以包括免疫刺激佐劑。在其他實(shí)施方式中，所述方法包括與疫苗聯(lián)合給予抗金黃色葡萄球菌的抗生素，例如，其中所述抗生素與疫苗共同配制或共同給予。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了對(duì)哺乳動(dòng)物（例如，人或非人哺乳動(dòng)物，如家畜，例如，牛、馬、豬或綿羊，或者家養(yǎng)哺乳動(dòng)物，例如，狗或貓）接種抗金黃色葡萄球菌疫苗的方法，包括以下步驟：a）鑒別具有發(fā)展金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物；和b）向所述哺乳動(dòng)物施用有效量的處于藥用介質(zhì)中的包括結(jié)合到適合的遞送載體中的編碼包括Als3p或其免疫原性片段的多肽的多核苷酸（例如，分離的多核苷酸）的疫苗，所述多核苷酸可以包括單鏈或雙鏈DNA或RNA、雙鏈DNA質(zhì)?；虿《据d體，其中所述多核苷酸在體內(nèi)表達(dá)并且所述哺乳動(dòng)物產(chǎn)生免疫應(yīng)答。含有多核苷酸的疫苗在哺乳動(dòng)物中引起免疫應(yīng)答，例如，產(chǎn)生對(duì)于Als3p顯示出特異性的抗Als3p抗體。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了分離的Als3蛋白或其免疫原性片段，用于在哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染的方法中。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了包含分離的Als3蛋白或其免疫原性片段的疫苗，用于在哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染的方法中。用于制備分離的蛋白或疫苗的這些Als3p包括在白色假絲酵母菌（Candidaalbicans）、克魯斯假絲酵母菌（Candidakrusei）、熱帶假絲酵母菌（Candidatropicalis）、光滑假絲酵母菌（Candidaglabrata）和近平滑假絲酵母菌（Candidaparapsilosis）中鑒別的那些以及在公開(kāi)可獲得的數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索中鑒別的那些Alsp3蛋白。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了分離的Als3蛋白，其中所述分離的Als3蛋白的氨基酸序列由SEQIDNO：2組成。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了包含分離的Als3蛋白的藥物組合物，（其中所述分離的Als3蛋白的氨基酸序列由SEQIDNO：2組成）和藥用賦形劑。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示了包含分離的Als3蛋白的疫苗，其中所述分離的Als3蛋白的氨基酸序列由SEQIDNO：2組成。在一些實(shí)施方式中，所述蛋白質(zhì)結(jié)合至載體，如鑰孔血藍(lán)素（KLH）、CRM197、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、白喉類(lèi)毒素、腸毒素B片段、腦膜炎奈瑟菌（N.meningitides）外膜蛋白復(fù)合物或者在本領(lǐng)域的結(jié)合疫苗中使用的任何其他載體蛋白。這些載體還可以包括噬菌體、酵母、病毒、病毒顆?；蛑亟M病毒樣顆粒。一般地，通過(guò)肌內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、口服或舌下施用來(lái)給予疫苗，或者以微顆粒制劑形式吸入來(lái)給予。如果需要，將疫苗作為加強(qiáng)劑量施用。所述疫苗可選地可以包括免疫刺激佐劑。在其他實(shí)施方式中，所述疫苗可以包括分離的Als3蛋白和一種或多種其他分離的Als蛋白（例如，由選自以下各項(xiàng)組成的組中的假絲酵母菌株得到的：白色假絲酵母菌（Candidaalbicans）、克魯斯假絲酵母菌（Candidakrusei）、熱帶假絲酵母菌（Candidatropicalis）、光滑假絲酵母菌（Candidaglabrata）和近平滑假絲酵母菌（Candidaparapsilosis））的組合。在另一個(gè)方面，本發(fā)明顯示處于藥用介質(zhì)中的包括引入到適合的遞送載體中的編碼包括Als3p或其免疫原性片段的多肽的多核苷酸（例如，分離的多核苷酸）的疫苗，所述多核苷酸可以包括單鏈或雙鏈DNA或RNA、雙鏈DNA質(zhì)?；虿《据d體，例如，可以從例如Als3基因或其片段，例如編碼Als3p免疫原性片段的片段制備免疫原性Als3多核苷酸疫苗，例如，其核酸序列包含或由SEQIDNO：3的部分或整體組成，并且其適合用作疫苗。所述疫苗還可以包括編碼與Als3p或其免疫原性片段共表達(dá)的免疫刺激多肽的多核苷酸?？梢岳缭趯?duì)于多核苷酸施用來(lái)說(shuō)生理學(xué)可接受的液體溶液或乳液中將這些多核苷酸疫苗制備為注射劑。多核苷酸可以作為核酸脂質(zhì)體（例如，如國(guó)際申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO93/24640中所述的）與脂質(zhì)體（如卵磷脂脂質(zhì)體或本領(lǐng)域已知的其他脂質(zhì)體）結(jié)合，或者所述多核苷酸可以與佐劑結(jié)合。包括陽(yáng)離子脂類(lèi)的脂質(zhì)體自發(fā)地并且快速地與聚陰離子（如DNA和RNA）相互作用，從而導(dǎo)致產(chǎn)生了捕獲多至100%的多核苷酸的脂質(zhì)體/核酸復(fù)合物。另外，所述聚陽(yáng)離子復(fù)合物與細(xì)胞膜融合，從而導(dǎo)致繞過(guò)溶酶體區(qū)室的降解酶的多核苷酸胞內(nèi)遞送。國(guó)際申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO94/27435描述了包括陽(yáng)離子脂類(lèi)和多核苷酸的用于基因免疫的組合物。可以有利地使用幫助多核苷酸細(xì)胞吸收的試劑，如鈣離子、病毒蛋白質(zhì)、電穿孔及其他轉(zhuǎn)染輔助劑。液體和將被重構(gòu)的冷凍干燥形式兩者優(yōu)選地包括適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)注射溶液pH的所需量的緩沖劑。“金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染”、“金黃色葡萄球菌SSTI”、“金黃色葡萄球菌皮膚/皮膚結(jié)構(gòu)感染”和“金黃色葡萄球菌SSSI”在本文中可互換使用，并且表示由于金黃色葡萄球菌在切傷、刮傷、咬傷或使皮膚破裂的其他傷口位點(diǎn)進(jìn)入體內(nèi)所造成的皮膚或軟組織感染（例如，蜂窩組織炎、軟組織膿腫、皮膚壞死、肌炎或其他感染）。在一些情況下，金黃色葡萄球菌SSSI是生活在身體上的金黃色葡萄球菌所造成的，并且可以在不存在皮膚損傷或創(chuàng)傷的可見(jiàn)位點(diǎn)的情況下自發(fā)地發(fā)生。這些感染可以影響皮膚層或更深層組織，如肌肉和結(jié)締組織（形成韌帶、腱及其他身體支持結(jié)構(gòu)的交織組織框架）。還可能在身體正在抵抗金黃色葡萄球菌感染的皮膚區(qū)域中發(fā)生皮膚膿腫。造成皮膚或軟組織感染的更重要的金黃色葡萄球菌株是稱(chēng)為甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌（MRSA）的抗生素耐受性葡萄球菌；金黃色葡萄球菌的萬(wàn)古霉素耐受性菌株和達(dá)托霉素耐受性菌株也可能造成SSSI。MRSA對(duì)普通抗生素耐受。金黃色葡萄球菌SSSI也可能是由甲氧西林敏感性金黃色葡萄球菌（MSSA）造成的。能夠以預(yù)防形式治療具有發(fā)展金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物?？商娲?，當(dāng)出現(xiàn)金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染癥狀時(shí)可以治療哺乳動(dòng)物。如本文所述的疫苗接種可以減輕癥狀的嚴(yán)重性，延緩或防止癥狀的發(fā)展。如果哺乳動(dòng)物住院或生活在制度化社區(qū)中，用抗生素治療或免疫抑制（包括患有HIV/AIDS或損害免疫功能的其他疾病的兒童，頻繁地與醫(yī)療系統(tǒng)接觸的個(gè)體，患有慢性疾?。ㄈ缣悄虿　┌Y、HIV/AIDS）的個(gè)體，非常年幼或非常年老的個(gè)體，頻繁使用抗生素的個(gè)體，具有開(kāi)放性傷口、皮炎或皮膚損害的個(gè)體、營(yíng)養(yǎng)不良或衛(wèi)生條件差的個(gè)體），則所述哺乳動(dòng)物具有較高的感染風(fēng)險(xiǎn)。其他具有風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物包括在擁擠的生活條件中生活的那些人、軍事人員（特別是部署的部隊(duì)）、運(yùn)動(dòng)員和監(jiān)獄犯人。具有發(fā)展金黃色葡萄球菌皮膚或軟組織感染風(fēng)險(xiǎn)的其他哺乳動(dòng)物為先前患有這些感染的個(gè)體或者安排或已經(jīng)進(jìn)行了手術(shù)或侵入式醫(yī)學(xué)程序的個(gè)體?！癆ls3p”是指與圖1A中所示序列的氨基酸序列例如，SEQIDNO:1或SEQIDNO:2，基本相同的多肽，或者與GenBank中鑒別的假絲酵母ALS3蛋白：XP_710431.1、XP_710435.1、AAO72959.1、XP_712646.1、XP_712666.1、EAK91173.1、EAK91169.1、AAO72958.1、EAK93494.1、EAK93472.1、O74623.1、AAD02580.1、EAK90704.1、XP_709985.1基本相同的多肽。所期望地，Als3p與圖1A中所示的序列（例如，SEQIDNO：1或者SEQIDNO：2）具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或者甚至100%的一致性?！癆ls3p片段”或“Als3p的片段”是指含有少于1050、1025、1000、975、950或945個(gè)氨基酸的Als3p多肽部分。在一些實(shí)施方式中，Als3p片段的長(zhǎng)度在300至350或者250至500個(gè)氨基酸之間。在一些實(shí)施方式中，所述片段少于1050、1025、1000、975、950或945、940、937、936、935、934、933、932、931或930、920、910、900、890、880、870、860、850、840、830、820、810、800、790、780、770、760、750、740、730、720、710、700、690、680、670、660、650、640、630、620、610、600、590、580、570、560、550、540、530、520、510、500、490、480、470、460、450、440、430、420、410、400、390、380、370、360、350、340、330、320、310、300、290、280、270、260、250、240、230、220、210、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、25、20、15或10個(gè)氨基酸，并且在一些情況下，所述片段是免疫原性的。示例性Als3p片段為如圖1A所示的SEQIDNO：2，或其片段。在一些情況下，Als3p片段的長(zhǎng)度在14至20個(gè)氨基酸之間。一般地，所述片段可以少于例如，325、320、310、300、290、280、270、260、250、240、230、220、210、200、190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30、25、20、19、18、17、16、15、14、13、12或11個(gè)氨基酸，并且期望地，所述片段是免疫原性的。在一些情況下，Als3p片段在14至20個(gè)氨基酸之間。另外，Als3p片段例如，可以在圖1A所示的序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）中含有一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸取代。其他所期望的Als3p片段在圖1A所示的序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）中含有一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸取代，和/或在圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）的N末端和/或C末端處含有至少一個(gè)側(cè)翼氨基酸（例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)側(cè)翼氨基酸）。其他優(yōu)選的Als3p片段含有圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）的7個(gè)或更多個(gè)連續(xù)氨基酸。Als3p片段的非限制性實(shí)例包括圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）的氨基酸1-40、10-50、20-60、30-70、40-80、50-90、60-100、70-110、80-120、90-130、100-140、110-150、120-160、130-170、140-180、150-190、160-200、170-210、180-220、190-230、200-240、210-250、220-260、230-270、240-280、250-290和260-300、270-310、280-320和290-331氨基酸；并且這些片段具有一種或多種下列特征：圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）中的一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸取代（例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個(gè)保守氨基酸取代）；從圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）的N末端和/或C末端截短的一個(gè)或多個(gè)氨基酸（例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16個(gè)氨基酸）；和在圖1A所示序列（例如，SEQIDNO：1或SEQIDNO：2）的N末端和/或C末端的至少一個(gè)側(cè)翼氨基酸（例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)側(cè)翼氨基酸）。“基本相同”是指顯示與參考序列至少50%一致性的氨基酸序列或核酸序列。這種序列一般在氨基酸水平或核酸水平上與參考序列具有至少例如，50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%的一致性。一般地，對(duì)于多肽，比較序列的長(zhǎng)度可以是至少5個(gè)氨基酸，例如，10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、125、150、175、200、250、300或更多個(gè)氨基酸，多至多肽的整個(gè)長(zhǎng)度。對(duì)于核酸，比較序列的長(zhǎng)度一般可以是至少10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、125、150、175、200、250、300、400、500、600、700、800、900或更多個(gè)核苷酸，多至核酸分子的整個(gè)長(zhǎng)度。應(yīng)理解的是為了確定序列一致性的目的，當(dāng)將DNA序列與RNA序列相比較時(shí)，胸腺嘧啶核苷酸等效于尿嘧啶核苷酸。還考慮了編碼本文中所列舉的任何Als3p多肽或其片段的核酸序列。如本文所使用的，當(dāng)多肽或核酸序列稱(chēng)為與參考序列具有“至少X%序列一致性”時(shí)，則它表示當(dāng)將序列最佳比對(duì)時(shí)，所述多肽或核酸中至少X%的氨基酸或核苷酸與參考序列中的那些相同?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)的多種方式確定序列的最佳比對(duì)，例如，SmithWaterman比對(duì)算法（Smith等人,J.Mol.Biol.147:195-7,1981）和BLAST（BasicLocalAlignmentSearchTool；Altschul等人,J.Mol.Biol.215:403-10,1990）。使用可公開(kāi)獲得的計(jì)算機(jī)軟件，如結(jié)合到GeneMatcherPlusTM（Schwarz和Dayhof,AtlasofProteinSequenceandStructure,Dayhoff,M.O.主編，第353-358頁(yè),1979）中的“BestFit”（SmithandWaterman,AdvancesinAppliedMathematics,482-489,1981）、BLAST、BLAST-2、BLAST-P、BLAST-N、BLAST-X、WU-BLAST-2、ALIGN、ALIGN-2、CLUSTAL或Megalign（DNASTAR），可使用這些及其他比對(duì)算法。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定測(cè)量比對(duì)的適當(dāng)參數(shù)，包括在所比較的序列長(zhǎng)度上實(shí)現(xiàn)最佳比對(duì)所需的任何算法。“佐劑”是指引起免疫系統(tǒng)刺激的一種或多種物質(zhì)。在這種情況下，佐劑用于增強(qiáng)對(duì)一種或多種疫苗抗原或抗體的免疫應(yīng)答?？梢越o予疫苗或抗體之前、與其結(jié)合或之后，將佐劑施用于受試者。用作佐劑的化合物實(shí)例包括，但不限于，鋁化合物（例如，明礬、鋁膠（Alhydrogel））、油劑、嵌段聚合物、免疫刺激復(fù)合物、維生素和礦物質(zhì)（例如，維生素E、維生素A、硒和維生素B12）、QuilA（皂苷）、細(xì)菌和真菌細(xì)胞壁組分（例如，脂多糖、脂蛋白和糖蛋白）、激素、細(xì)胞因子和共刺激因子。在結(jié)合物的情況下，“載體”是指適合于連接至或展示如本文所述多肽的部分或顆粒，例如，KLH、CRM197、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、白喉類(lèi)毒素、腸毒素B片段、腦膜炎奈瑟菌（N.meningitides）外膜蛋白復(fù)合物、任何其他載體蛋白、噬菌體、酵母、病毒、病毒顆粒、重組病毒樣顆粒?！敖Y(jié)合物”是指包括與以下其他部分或顆粒連接的本發(fā)明多肽的化合物：例如KLH、CRM197、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、白喉類(lèi)毒素、腸毒素B片段、腦膜炎奈瑟菌（N.meningitides）外膜蛋白復(fù)合物、任何其他載體蛋白、噬菌體、酵母、病毒、病毒顆粒、重組病毒樣顆粒?！懊庖咴浴笔侵改軌蛟谑茉囌咧姓T導(dǎo)免疫應(yīng)答的任何物質(zhì)。在疫苗的情況下，“免疫原性量”是指以臨床相關(guān)方式在受試者中誘導(dǎo)免疫應(yīng)答所需的疫苗量。根據(jù)施用方式、年齡、體重和受試者的一般健康狀況，用于實(shí)踐如本文所述的疫苗接種方法的疫苗的免疫原性量是不同的。最終，主治醫(yī)師將決定適當(dāng)?shù)牧亢徒o藥方案。“分離的”或“純化的”是指與其他天然伴隨成分分離。通常，當(dāng)化合物是至少按重量計(jì)60%不含與其天然結(jié)合的蛋白質(zhì)和/或天然發(fā)生的有機(jī)分子時(shí)，則化合物（例如，核酸、多肽、抗體或小分子）是基本上分離的。該定義還延伸至例如，與其側(cè)翼序列分離的多肽或核酸分子（例如，對(duì)于氨基酸序列，分離的是指在多肽中不含與該序列天然結(jié)合的側(cè)翼氨基酸的序列）。在一些情況下，化合物是按重量計(jì)至少75%、更優(yōu)選至少90%，并且最優(yōu)選至少99%分離的?？梢酝ㄟ^(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)獲得分離的化合物（例如，多肽），例如，通過(guò)從天然來(lái)源提?。ɡ?，從假絲酵母菌感染的細(xì)胞中純化）；在任何標(biāo)準(zhǔn)表達(dá)系統(tǒng)（包括，但不限于，大腸桿菌（E.coli）或釀酒酵母（Saccharomycescerevisiae））中通過(guò)表達(dá)編碼Als3p、Als3p片段或變體或者其融合蛋白的重組核酸；或者通過(guò)化學(xué)合成所述多肽。可以通過(guò)任何適當(dāng)?shù)姆椒?，例如，通過(guò)柱色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳或HPLC分析來(lái)測(cè)量純度。在結(jié)合物的情況下，“連接至”或“結(jié)合至”是指多肽和載體或融合配偶體之間的共價(jià)或非共價(jià)相互作用。非共價(jià)相互作用包括，但不限于，氫鍵作用、帶電基團(tuán)之間的離子相互作用、靜電結(jié)合、范德瓦爾斯相互作用、非極性基團(tuán)之間的疏水性相互作用、疏脂性相互作用和基于LogP的吸引力（LogP-basedattraction）。術(shù)語(yǔ)“肽”、“多肽”和“蛋白質(zhì)”可互換地使用，并且表示不考慮翻譯后修飾（例如，糖基化作用或磷酸化作用），構(gòu)成如本文所述的所有或部分的天然發(fā)生或非天然發(fā)生的多肽或肽的兩個(gè)或更多個(gè)天然或非天然氨基酸的任何鏈。術(shù)語(yǔ)“藥用載體”和“藥用賦形劑”可互換地使用，并且表示對(duì)于所治療的哺乳動(dòng)物是生理學(xué)可接受的載體或賦形劑，同時(shí)保留了與其一起施用的化合物的治療性質(zhì)。一種示例性藥用載體物質(zhì)是生理鹽水。其他生理學(xué)可接受的載體及其制劑是...