專利名稱：具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種中藥提取物，具體涉及ー種具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
黃蜀葵花為錦葵科黃蜀葵(Abelmoschus manihot L. Medicus)的干燥花冠，具有清熱解毒、化瘀、消炎鎮(zhèn)痛等功效，主治諸惡瘡、水腫、小便淋痛、燙火傷、腮腺炎等疑難雜癥。目前，對黃蜀葵花的相關(guān)研究主要集中在黃酮類化合物的藥學(xué)及藥效學(xué)研究；然而黃蜀葵花中另ー類重要的化學(xué)成分多糖類物質(zhì)的研究相對滯后。目前尚未見系統(tǒng)地完成黃蜀葵花多糖類物質(zhì)制備、結(jié)構(gòu)鑒定及藥理活性分析的報(bào)道。大量研究資料表明，天然多糖具有很好的抗腫瘤生物活性，因此非常有必要系統(tǒng)地完成黃蜀葵花多糖類物質(zhì)制備、結(jié)構(gòu)鑒定及 藥理活性分析，開發(fā)出ー種具有抗腫瘤活性且不良反應(yīng)低的黃蜀葵花多糖。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供ー種結(jié)構(gòu)新穎，抗腫瘤活性強(qiáng)，不良反應(yīng)低的黃蜀葵花多糖，本發(fā)明另ー個(gè)目的是提供該黃蜀葵花多糖的制備方法和其應(yīng)用。技術(shù)方案為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為ー種具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖，該多糖由摩爾比為1:0.91:2. 14:1.0的β -D-卩比喃匍萄糖、a -D-卩比喃甘露糖、a -D-半乳糖和a ~L~卩比喃巖操糖構(gòu)成，該多糖的基本單元的結(jié)構(gòu)式
權(quán)利要求
1.一種具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖，其特征在于，該多糖由摩爾比為1:0.91:2. 14:1.0的β-D-吡喃葡萄糖、a-D-吡喃甘露糖、a-D-半乳糖和a-L-吡喃巖藻糖構(gòu)成，該多糖的基本單元的結(jié)構(gòu)式為
2.權(quán)利要求I所述的具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)脫脂處理 稱取黃蜀葵花藥材，用總藥材總量8 16倍的無水乙醇，在5(T70°C水浴溫浸泡6 12小時(shí)，趁熱抽濾，得藥渣揮盡乙醇后6(T70°C干燥，得脫脂黃蜀葵花藥材； (2)粗多糖的提取 取步驟(I)脫脂后的黃蜀葵花藥材，加入藥材總重量8 12倍量的水，在6(T70°C溫度下浸潰提取I 3次，每次6 8h，濾過，合并濾液，在200(T3000rpm離心l(T20min，得上清液在65 70°C下減壓濃縮至原體積的1/10，然后加濃度為95%乙醇使乙醇的濃度達(dá)70%，然后在4°C靜置24h后濾取沉淀，沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，減壓干燥，得黃蜀葵花粗多糖； (3)粗多糖脫蛋白質(zhì) 取步驟(2)制備得到的黃蜀葵花粗多糖，完全溶解于蒸餾水中，然后加入濃度30%的三氯乙酸溶液至三氯乙酸終濃度為3%，在4°C靜置5 8h，然后300(T3500rpm離心l(Tl5min，除去沉淀，得上清液用NaOH溶液調(diào)pH至中性，減壓濃縮，濃縮液透析，截取分子量SOOODa以上成分，得除蛋白的粗制多糖溶液； (4)DEAE-52纖維柱層析 取步驟(3)脫蛋白后的粗多糖溶液，上樣于DEAE-52纖維層析柱中，然后分別用蒸餾水、O. 05 mol/L NaCl.O. I mol/L NaCl、0. 25 mol/L NaCl、0· 5 mol/L NaCl 進(jìn)行分段洗脫，控制流速O. 5mL/min，分別收集洗脫液，采用硫酸-苯酚法跟蹤檢測多糖部位，合并多糖洗脫部位； (5)SephadexG-IOO 凝膠柱層析 取步驟(4)經(jīng)DEAE-52纖維柱純化后的黃蜀葵花多糖上S^hadexG-IOO凝膠柱，用蒸餾水洗脫，控制流速O. 3mL/min，收集洗脫液，采用硫酸_苯酚跟蹤檢測，得精制的黃蜀葵花多糖。
3.權(quán)利要求I所述的具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖在制備防治腫瘤藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖在制備防治腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為人胃癌或人肝癌。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖在制備防治腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，把黃蜀葵花多糖和藥學(xué)上可接受的載體制成片劑、膠囊劑、顆粒劑或微囊劑劑型的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有抗腫瘤活性的黃蜀葵花多糖及其制備方法，該多糖是由摩爾比為1:0.91:2.14:1.0的β-D-吡喃葡萄糖、α-D-吡喃甘露糖、α-D-半乳糖和α-L-吡喃巖藻糖構(gòu)成，分子量為8867。該多糖的基本單元的結(jié)構(gòu)式為α-D-吡喃半乳糖(1→6)，和α-D-吡喃甘露糖(2→6)為主鏈及甘露糖C-3分支連接α-L-吡喃巖藻糖(1→3)連接β-D-吡喃葡萄糖(→1)。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)優(yōu)選提取分離工藝，首先采用水提醇沉法得到粗多糖，再脫蛋白，然后DEAE-52纖維素樹脂和SephadexG-100凝膠樹脂聯(lián)用進(jìn)行純化，制得純度高的黃蜀葵花多糖，經(jīng)過抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的黃蜀葵花多糖具有很好的抗腫瘤活性，并且長期使用無不良反應(yīng)，可以方便和藥學(xué)上可接受的載體制備成各種劑型的藥物，臨床上服用方便。
文檔編號A61K31/715GK102964466SQ201210551228
公開日2013年3月13日 申請日期2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月18日
發(fā)明者劉志輝, 李爽, 王瓊, 祈明浩, 錢芳, 陸超, 嚴(yán)海兵 申請人:江蘇省中醫(yī)院