專利名稱：一種紅茴香注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種紅茴香注射液的制備方法。
背景技術(shù)：
紅茴香系木蘭科八角屬植物莽草(Lllicium lanceolatum A. C Smith)干燥的根或莖的皮，具有消腫散瘀、活血止痛的功效，用于跌打損傷，風濕類風濕性關(guān)節(jié)炎的治療。目前除民間偶有粉劑，酒劑口服或外用 治療上述疾病外，現(xiàn)有浙江泰康藥業(yè)集團有限公司獨家生產(chǎn)紅茴香注射液，原工藝為醇提水沉法，存在有效部位使用不完全的問題(特別是揮發(fā)油部分)，故該紅茴香注射液的制備工藝亟需改進。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述不足之處提供一種紅茴香注射液的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下方式實現(xiàn)的一種紅茴香注射液的制備方法，該方法包括以下步驟將紅茴香的根皮或莖皮粗粉采用水蒸氣蒸餾提取得到揮發(fā)油提取液，另存；過濾剩余藥液，濃縮至藥材的廣2倍量，為濃縮水液，另存；將過濾出的藥渣用濃度為90°/Γ95%乙醇加熱回流提取得到醇提液，將揮發(fā)油提取液、水提液、醇提液三部分合并，制成注射液。所述的水蒸氣蒸餾提取得到揮發(fā)油提取液的步驟如下紅茴香根皮或莖皮粗粉用藥材1(Γ15倍量的水浸泡Γ8小時，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，收集藥材5飛倍量的揮發(fā)油提取液。上述乙醇加熱回流提取具體為將藥渣用濃度為90°/Γ95%乙醇加熱回流提取2 3次，每次用藥材2 3倍量的濃度為90°/Γ95%的乙醇，每次提取時間I小時，合并乙醇提取液。所述的揮發(fā)油提取液、水提液、醇提液三部分合并制成注射液的步驟為向乙醇提取液中加入濃縮水液，攪拌均勻，靜置冷藏24小時以上，過濾，濾液回收乙醇至無醇味得到濃縮液，再加濃縮液2 3倍量的濃度為95%的乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，回收乙醇后的藥液加藥材4飛倍量的注射用水，并加活性炭脫色，冷藏24小時以上，過濾，濾液調(diào)PH至7. (Γ7. 5，加入揮發(fā)油提取液，得油水混合液，再加混合液重量2%的吐溫-80攪拌溶解，靜置冷藏24小時以上，過濾，再調(diào)pH至9. 7，加注射用水至全量，攪拌過濾，灌封，滅菌，即得。上述方法中采用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)pH值。與現(xiàn)有技術(shù)比較本發(fā)明的有益效果本發(fā)明制備方法為先用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油部位，再用水提-醇提結(jié)合法提取其余有效部位，加入揮發(fā)油部位制成注射液。本發(fā)明方法充分利用藥材的各個有效部位，制備得到的注射液具有消腫散瘀，活血止痛的功效，用于治療腰肌勞損，關(guān)節(jié)或肌肉韌帶傷痛及風濕痛等具有顯著療效且安全、療效持久。
具體實施例方式下面通過具體的實施例對本發(fā)明進一步說明，應(yīng)當指出，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干變型和改進，這些也應(yīng)視為屬于本發(fā)明的保護范圍。實施例I紅茴香莖皮50g加工成粗粉，加藥材10倍量的水浸泡8小時，水蒸氣蒸餾，收集揮發(fā)油提取液300mL，另存；將蒸餾揮發(fā)油后的剩余藥液過濾，濃縮至50mL (即藥材的I倍量)為濃縮水液，另存。過濾后的藥渣用濃度為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次乙醇用量為IOOmL,每次提取時間I小時，合并乙醇提取液，加入濃縮水液攪拌均勻，靜置冷藏24小時，過濾，濾液回收乙醇至無醇味得到濃縮液，再加濃縮液2倍量濃度為95%的乙醇沉淀24小時以上,過濾,濾液回收乙醇至無醇味，回收乙醇后的藥液加注射用水300mL，并加5g活性炭脫色，冷藏，過濾，濾液用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)pH至7. (Γ7. 5，加入前述揮發(fā)油提取液，得油水混合液，加混合液重量2%的吐溫-80攪拌溶解，靜置冷藏24小時，過濾，再用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)pH至9. 7，加注射用水至IOOOmL,攪拌過濾，灌封，滅菌，即得。實施例2 紅茴香莖皮50g加工成粗粉，加藥材15倍量的水浸泡4小時，水蒸氣蒸餾，收集揮發(fā)油提取液300mL，另存。蒸餾揮發(fā)油后的剩余藥液過濾，濃縮至IOOmL (即藥材的2倍量)為濃縮水液，另存。過濾后的藥渣用濃度為90%的乙醇加熱回流提取3次，每次乙醇用量為150mL，每次提取時間I小時，合并乙醇提取液，加入濃縮水液攪拌均勻，靜置冷藏24小時以上，過濾，濾液回收乙醇至無醇味得到濃縮液，再加濃縮液3倍量濃度為95%的乙醇沉淀24小時以上，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，回收乙醇后的藥液加注射用水300mL，并加8g活性炭脫色，冷藏過濾，濾液用濃度為10%Na0H溶液調(diào)pH至7. (Γ7. 5，加入前述揮發(fā)油提取液，得油水混合液，加混合液重量2%的吐溫-80攪拌溶解，靜置冷藏24小時，過濾，再用濃度為10%Na0H溶液調(diào)pH至9. 7，加注射用水至IOOOmL,攪拌過濾，灌封，滅菌，即得。以下通過藥效實驗進一步說明本發(fā)明注射劑的效果試驗例I采用小鼠尾壓鎮(zhèn)痛實驗、小鼠耳腫脹實驗和大鼠足跖腫脹實驗觀察紅茴香莖皮揮發(fā)油提取部位(HHX-I)、水提醇沉部位(HHX-2)、本發(fā)明實施例I組(本發(fā)明方法制備的紅茴香注射液)、本發(fā)明實施例2組(本發(fā)明方法制備的紅茴香注射液)、對比例組(市售浙江泰康藥業(yè)集團有限公司生產(chǎn)的紅茴香注射液)的鎮(zhèn)痛抗炎作用。紅茴香莖皮揮發(fā)油提取部位(HHX-1):取紅茴香莖皮50g加工成粗粉，加藥材10倍量的水浸泡8小時，水蒸氣蒸餾，收集揮發(fā)油提取液300mL。紅茴香莖皮水提醇沉部位(HHX-2):將按照實施例I方法蒸餾揮發(fā)油后的剩余藥液過濾，濃縮至50mL為濃縮水液，另存。過濾后的藥渣用濃度為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次乙醇用量為IOOmL,每次提取時間I小時，合并乙醇提取液，加入濃縮水液攪拌均勻，靜置冷藏24小時，過濾，濾液回收乙醇至無醇味得到濃縮液，再加濃縮液2倍量無水乙醇沉淀24小時以上，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，加水至300mL，即得。I對小鼠尾壓痛痛閾值的影響選取體重18 22g的SPF級KM小鼠，將小鼠置于固定器內(nèi)，尾部和四肢暴露在固定器外，待動物安靜后進行實驗。測痛前在小鼠尾部距尾尖1/3處作為施壓點標記，施壓時以小鼠出現(xiàn)掙扎或撕叫作為疼痛反應(yīng)指標，此壓力值即為該鼠痛閾值，連測二次，取平均值作為對照值。共挑選80只小鼠，隨機分成8組(10只/組)，雌雄 各半，即空白組、云南白藥組^!!!!^/!^乂扶他林組^。!!^/!^)、HHX-I 組(500mg/kg)、HHX-2 組(500mg/kg)、本發(fā)明實施例I組(500mg/kg)、本發(fā)明實施例2組(500mg/kg)、對比例組(500mg/kg)。給藥時用微量注射器將藥物涂抹于小鼠尾部受壓點，5mL/kg,測定給藥 后15min、30min痛閾值,計算Δ痛閾(Δ痛閾=藥后痛閾值-藥前痛閾值)。結(jié)果表明HHX-2組在給藥后15min能顯著提高小鼠尾壓痛閾值(P〈0. 05)，HHX-I組未見顯著增加小鼠尾壓痛閾值；本發(fā)明方法制備的紅茴香注射液及對比例組紅茴香注射液在給藥后15min均能顯著提高小鼠尾壓痛閾值(P〈0. 05)，但本發(fā)明方法制備的紅茴香注射液鎮(zhèn)痛效果更好，且本發(fā)明與對比例組比較具有十分顯著的差異，具體見表1-1。表1-1對小鼠壓痛痛閾值的影響(Γ土S，n=10)
Μ|,給藥前痛給藥后15min Δ痛閾(給藥 :" Δ痛閾(給藥
閾值痛W值后 15min)后 30min)
____
空 R組0.60 士0.33 0.70士0.31 0.10 士0.29 0.59士0.25 -0.02±0.41
云南白藥組0.67±0.15 0.81±0.19 0.13±0.22 0.95士0.30 0.27士 0.25
扶他林組0.52±0.27 0.77±0.35 0.25±0.42 0.95士0.35 0.42士0.36*
HHX-I 組0.59±0.27 0.86±0.27 0.28±0.46 0.94±0.37 0.35士0.48
HHX-2 組0.59土0.30 1.05土0.35 0.46±0.42* 0.95±0.42 0.36±0.47
本發(fā)明實施例 I 組 0.62±0.34 1.29±0.35 0.67±0.27**Δ 1.07±0.39 0.45士0.28* 本發(fā)明實施例 2 組 0.60±0.43 1.24±0.35 0.64=b0.31**A 1.06士0.18 0.46士0.35*
對比例組0.62±0.25 1.09±0.35 0.47士0.28* 0.98士0.29 0.36士 0.31注與空白組比較，*P< 0.05。與對比例組比較，Λ P < O. 05。2對小鼠耳腫脹的影響取SPF級雄性KM小鼠，體重18 22g，隨機分為8組(10只/組)，即空白組、云南白藥組(5mL/kg)、扶他林組(50mg/kg)、HHX-I 組(500mg/kg)、HHX-2 組(500mg/kg)、本發(fā)明實施例I組(500mg/kg)、本發(fā)明實施例2組(500mg/kg)、對比例組(500mg/kg)。給藥時用微量注射器將藥物涂抹于小鼠左右耳廓，5mL/kg。耳廓給藥30min后，利用微量注射器將O. 05mL二甲苯分別滴于右耳兩側(cè)，保證所滴位置一致，左耳作對照。3h后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9_的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓形耳片，稱重，求左右耳片重量之差作為腫脹度，與空白組比較組間差異。結(jié)果表明與空白組比較，HHX-I和HHX-2組均能減輕二甲苯所致小鼠耳腫脹程度(P〈0. 05);本發(fā)明方法制備的紅茴香注射液能極顯著減輕二甲苯所致小鼠耳腫脹程度(P〈0. OI)，且本發(fā)明與對比例組比較具有十分顯著的差異，比對比例組紅茴香注射液抗炎效果顯著，具體見表1-2。表1-2對小鼠耳腫脹的影響(Y±S，n=10)
權(quán)利要求
1.一種紅茴香注射液的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟將紅茴香的根皮或莖皮粗粉采用水蒸氣蒸餾提取得到揮發(fā)油提取液，另存；過濾剩余藥液，濃縮至藥材的Γ2倍量，為濃縮水液，另存；將過濾出的藥渣用濃度為90°/Γ95%乙醇加熱回流提取得到醇提液，將揮發(fā)油提取液、水提液、醇提液三部分合并，制成注射液。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的水蒸氣蒸餾提取得到揮發(fā)油提取液的步驟如下紅茴香根皮或莖皮粗粉用藥材1(Γ15倍量的水浸泡Γ8小時，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，收集藥材5飛倍量的揮發(fā)油提取液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的將藥渣用濃度為909Γ95%乙醇加熱回流提取2 3次，每次用藥材2 3倍量的濃度為909Γ95%的乙醇，每次提取時間I小時，合并乙醇提取液。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述的揮發(fā)油提取液、水提液、醇提液三部分合并制成注射液的步驟為向乙醇提取液中加入濃縮水液，攪拌均勻，靜置冷藏24小時以上，過濾，濾液回收乙醇至無醇味得到濃縮液，再加濃縮液2 3倍量的濃度為95%的乙醇，靜置沉淀，過濾，濾液回收乙醇至無醇味，回收乙醇后的藥液加藥材4飛倍量的注射用水，并加活性炭脫色，冷藏24小時以上，過濾，濾液調(diào)pH至7. (Γ7. 5，加入揮發(fā)油提取液，得油水混合液，再加混合液重量2%的吐溫-80攪拌溶解，靜置冷藏24小時以上，過濾，再調(diào)PH至9. 7，加注射用水至全量，攪拌過濾，灌封，滅菌，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)pH值。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種紅茴香注射液的制備方法，該方法是將紅茴香的根皮或莖皮粗粉用水蒸氣蒸餾法收集揮發(fā)油提取液(A液)另存；蒸餾后剩余藥液過濾，濃縮后作為濃縮水液(B液)另存；藥渣用乙醇回流提取，得乙醇提取液(C液)，將A液、B液、C液合并制成注射液。本發(fā)明方法制備得到的注射液具有消腫散瘀，活血止痛的功效，可用于治療腰肌勞損，關(guān)節(jié)或肌肉韌帶傷痛及風濕痛等。
文檔編號A61P19/02GK102895311SQ20121045868
公開日2013年1月30日 申請日期2012年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月14日
發(fā)明者陳劍美 申請人:浙江泰康藥業(yè)集團有限公司