專利名稱：乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸用原位凝膠制劑領(lǐng)域，具體涉及一種乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物，以及該組合物的制備方法。
背景技術(shù)：
乳酸環(huán)丙沙星(CiprofloxacinLactate, CPFL),為環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin)的乳酸鹽，易溶于水，屬于獸醫(yī)臨床應(yīng)用的喹諾酮類藥物中較強(qiáng)的廣譜抗菌藥。其具有抗菌譜廣、殺菌力強(qiáng)、良好的藥物動力學(xué)特點、不良反應(yīng)發(fā)生率低、抗菌后效應(yīng)(postantibioticeffect)時間較長、價格低廉、且無交叉耐藥性等優(yōu)點，而被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)臨床。臨床上廣泛用于控制由敏感病原體引起的胃腸道感染、肺部感染、產(chǎn)科感染和局部感染等，而獸醫(yī)臨床上用于全身各系統(tǒng)的感染，對消化道、呼吸道、泌尿生殖道、皮膚軟組織感染及支原體感染均有良效。目前，乳酸環(huán)丙沙星被廣泛用于畜禽、水產(chǎn)及昆蟲(如家蠶、蜜蜂等)的各類細(xì)菌性疾病防治。乳酸環(huán)丙沙星的常用劑型為注射液，及片劑、膠囊劑、可溶性粉等口服制劑。但是，CPFL注射液及口服制劑存在半衰期短、連續(xù)用藥療程比較長，給藥次數(shù)多等缺點。頻繁給藥不僅耗費人力和時間，而且會引起動物的應(yīng)激反應(yīng)。另外，常用口服制劑還存在首過效應(yīng)大、生物利用度低等不足。當(dāng)今集約化養(yǎng)殖業(yè)的飛速發(fā)展客觀上也需要高效、緩釋、經(jīng)濟(jì)和給藥方便的獸用新制劑。目前獸醫(yī)臨床中緩釋制劑所占比例還很小。因此，開發(fā)提高藥物生物利用度高、減少給藥次數(shù)的乳酸環(huán)丙沙星緩釋制劑尤其是注射型緩釋制劑就越來越受獸醫(yī)臨床的歡迎。原位凝膠(in situ gel)，又稱在體凝膠、在位凝膠、即型凝膠，是指含有藥物的高分子材料以溶液給藥后，在給藥部位對外界刺激(用藥部位的溫度、PH值、離子種類和濃度或光照度等變化)發(fā)生響應(yīng)，發(fā)生分散狀態(tài)或構(gòu)象的可逆轉(zhuǎn)化，形成半固體或固體的新型制劑。原位凝膠具有凝膠制劑的親水性三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)及良好的組織相容性，同時，獨特的溶液-凝膠轉(zhuǎn)變性質(zhì)使其兼有制備簡單、使用方便、與用藥部位特別是黏膜組織親和力強(qiáng)、滯留時間長等優(yōu)點，加之廣泛的用途和良好的控、釋藥性能，原位凝膠給藥系統(tǒng)已成為藥劑學(xué)領(lǐng)域的一個研究熱點。原位凝膠的形成機(jī)制是利用高分子材料對外界刺激，如溫度、pH、光照或離子強(qiáng)度等的響應(yīng)而使聚合物在生理條件下發(fā)生膠凝。根據(jù)外界刺激因素的不同，將其分為離子敏感型、pH敏感型、光敏感型和溫度敏感型等類型。相比之下,溫敏型原位凝膠(thermosensitive in situ gel)在應(yīng)用中比較方便,是一種僅隨忙藏條件或用藥部位的溫度變化而發(fā)生相轉(zhuǎn)變的原位凝膠。該系統(tǒng)在室溫條件下為自由流動的液體，在靶組織、靶器官、靶腔道給藥后，在給藥部位因溫度升高而快速形成凝膠，達(dá)到定向給藥或延緩藥物釋放的目的。其在生理溫度條件下形 成凝膠，并在所需的時間內(nèi)保持其完整性，而不需要有機(jī)溶劑、聚合交聯(lián)試劑以及其他外在因素觸發(fā)膠凝。溫敏性原位凝膠主輔料主要包括聚氧乙烯-聚氧丙稀嵌段共聚物[poly (ethylenoxide)-poly (propyleneoxide)-poly (ethylene oxide, ΡΕΟ-ΡΡΟ-ΡΕΟ,泊洛沙姆或普郎尼克)、聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物如PEG-PLA嵌段共聚物，纖維素類衍生物如乙羥基乙基纖維素，聚乙二醇聚己內(nèi)酯多嵌段共聚物、多糖類衍生物等。其中，非離子表面活性劑普郎尼克(pluronic)為聚氧乙烯(PEO)和聚氧丙烯(PPO)組成的ABA型嵌段共聚物,是研究最深入的制備溫度敏感型原位凝膠的高分子材料。尤其是普郎尼克F127 (又稱泊洛沙姆407，P407)在溫敏型原位凝膠領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛。泊洛沙姆407由聚氧乙烯和聚氧丙烯以7: 3的比例構(gòu)成，其一定濃度的水溶液具有特殊的反向熱膠凝性質(zhì)，即低溫時為自由流動的液體，體溫下成為凝膠。泊洛沙姆原位凝膠較之傳統(tǒng)給藥劑型具有顯著優(yōu)點:(I)組織相容性好，使用方便，可減少給藥 頻率，提高動物順應(yīng)性。(2)具有良好的膠凝強(qiáng)度和粘附能力，從而延長藥物在給藥部位的滯留時間(如眼部、鼻腔或直腸給藥)，提高生物利用度，降低藥物的毒副作用。此外，其經(jīng)直腸給藥還可以減少藥物的首過效應(yīng)。(3)具有良好的緩、控釋作用。外釋藥實驗表明，泊洛沙姆407即型凝膠的釋藥性質(zhì)雖受多種因素影響，但都表現(xiàn)出良好的緩釋性能。(4)水溶液在體外條件或是膠凝溫度下為易流動的液體狀態(tài)，使其易于灌裝和分劑量又便于工業(yè)化生產(chǎn)。(5)注射給藥后，可在注射部位膠凝形成半固體凝膠狀的藥物儲庫，組織定位性強(qiáng)，既能達(dá)到緩釋效果又可提高靶向性；且較之普通植入劑，還可減少創(chuàng)傷。正是因為原位凝膠具有可注射、創(chuàng)傷小、給藥方便、延緩藥物釋放、與組織接觸緊密、生產(chǎn)制備較為簡單、生理相容性好、給藥量易于控制和粘附性好等優(yōu)點(魏培等.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2007,38(12):890-894。張翠霞等.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26 (4):459-461)，近年來已廣泛應(yīng)用于直腸、注射、眼部和鼻部給藥系統(tǒng)。專利申請《治療奶牛乳房炎的原位凝膠緩釋制劑的制備方法》(公開號為:CN101664381A)公開了一種鹽酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠緩釋制劑，該發(fā)明藥物以微囊形式分布于高分子材料溶液中，存在穩(wěn)定性差，且制備無菌、重現(xiàn)性好的微囊所需工藝較為復(fù)雜、微球在注射部位有遷移的可能性等問題。孫海燕等在《環(huán)丙沙星溫度敏感原位凝膠的制備及質(zhì)量控制》(孫海燕等.中國藥房.2009.16)中報道了一種治療婦科及皮膚黏膜疾病的環(huán)丙沙星溫度敏感原位凝膠，該原位凝膠由乳酸環(huán)丙沙星、泊洛沙姆407(重量比為16%，重量體積比為19% )、甘露醇、苯扎溴銨及水組成。該組合物存在以下缺點。①組合物的膠凝溫度為29°C，而夏天氣溫常達(dá)29°C，制劑在該溫度環(huán)境未使用便已成為凝膠，需要給制劑降溫才能使用，同時對貯存溫度也有更高要求；②泊洛沙姆407的濃度較低，在使用部位的組織液或分泌液的稀釋作用下，膠凝溫度可能會明顯提高甚至失去膠凝能力缺少金屬離子絡(luò)合劑，影響制劑質(zhì)量，因為乳酸環(huán)丙沙星在適量重金屬離子如Fe3+作用下容易使制劑顏色變黃(譚日建.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2000，20 (3):175。何麗春.乳酸環(huán)丙沙星注射液制備的顏色控制.右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報.2001，(2):275-276。陳永禎.華西藥學(xué)雜志.1997，12 (I):34)，環(huán)丙沙星結(jié)構(gòu)中的4-酮氧基-3-羧基與高價鐵離子發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，生成使溶液變黃的螯合物是溶液變黃的原因。此外，環(huán)丙沙星結(jié)構(gòu)中的酮酸部分，在酸性加熱(環(huán)丙沙星的鹽酸鹽及乳酸鹽溶液均呈酸性，高壓滅菌時又可提供熱條件)及金屬離子存在條件下會發(fā)生降解-脫羧，也影響質(zhì)量(如色澤、雜質(zhì)、含量)。(王如山等.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1998，18(12):570)④缺少PH調(diào)節(jié)劑:CPFL在pH > 5.0時，溶液容易析出晶體(謝本樹.醫(yī)學(xué)文選，2004，23 (6):735-736)，使制劑質(zhì)量不達(dá)標(biāo)。⑤缺少抗氧化劑:大氣中的氧氣易引起藥物制劑的氧化，對于液體制劑而言更需要注意這點。⑥制劑中乳酸環(huán)丙沙星含量不超過3.7mg/mL，本制劑常具有較好的緩釋作用，原位凝膠伴隨凝膠的溶蝕而發(fā)生藥物的釋放。故其在給藥部位形成藥物貯庫后，還存在當(dāng)緩釋速率相對比較慢時，每小時內(nèi)釋放的藥物達(dá)不到有效劑量的問題(尤其是當(dāng)制劑緩釋周期比較長時)?！度樗岘h(huán)丙沙星眼用即型凝膠的研制》(孫建強(qiáng)等.中國抗生素雜志.2010年.04期)公開了一種由乳酸環(huán)丙沙星，泊洛沙姆407(重量體積比為22.25%)，甘油，5%的苯扎溴銨及水組成的乳酸環(huán)丙沙星眼用即型凝膠。該制劑的膠凝溫度為25.3°C，在室溫(25°C )及以上貯存時變得很粘稠或是已經(jīng)形成凝膠，進(jìn)而無法給藥，而制劑降溫處理恢復(fù)為液體后眼部給藥，但冷刺激又會使順應(yīng)性變差。此外，根據(jù)上述乳酸環(huán)丙沙星普通注射液的研究結(jié)果可知，因沒有金屬離子絡(luò)合劑，抗氧化劑及PH調(diào)節(jié)劑等，會使制劑質(zhì)量不可靠。經(jīng)檢索，沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)注射或直腸給藥用的乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠組合物的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。本發(fā)明另一目的在于提供上述乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下:一種乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物，其組成成分及其重量體積比(單位:g/mL,表示為:w/v,以下同)為:乳酸環(huán)丙沙星5 10%，泊洛沙姆407(普郎尼克F127)20 26%，泊洛沙姆188(普郎尼克F68)0.5 10%，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA_2Na)0.01 0.04%，抑菌劑0.009 0.03 %，抗氧化劑0.1 0.2%，溶劑為醋酸-醋酸鈉緩沖液；所述的重量體積比是指各組分的重量與溶劑的體積之間的比例,重量體積比的單位為:g/mL。上述乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物，還可以表示為:其組成成分及其重量體積比例為:每100mL醋酸-醋酸鈉緩沖液中加入乳酸環(huán)丙沙星5 10g，泊洛沙姆407 (普郎尼克F127) 20 26g，泊洛沙姆188 (普郎尼克F68) 0.5 10g,乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na) 0.01 0.04g，抑菌劑 0.009 0.03g，抗氧化劑 0.1 0.2g。上述原位凝膠組合物還可以在灌裝后充惰性氣體。所述的惰性氣體是指N2或CO2。所述的乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠組合物的膠凝溫度30 36.5°C。所述醋酸-醋酸鈉緩沖液是作為可注射用溶劑的緩沖溶液；醋酸-醋酸鈉緩沖液配制時所用的溶劑是注射用水。上述原位凝膠組合物中所述的泊洛沙姆407 (普郎尼克F127)的重量體積比優(yōu)選為22 25%，進(jìn)一步優(yōu)選為23% 24%。
上述原位凝膠組合物中所述的泊洛沙姆188(普郎尼克F68)的重量體積比優(yōu)選為
0.5 4%。上述原位凝膠組合物中所述的泊洛沙姆407(又稱普郎尼克F127)高分子中的聚氧乙烯鏈段在共聚物中的重量百分比為70%,分子量為10000 15000(平均分子量13021)。上述原位凝膠組合物中所述的泊洛沙姆188(又稱普郎尼克F68)高分子中的聚氧乙烯鏈段在共聚物中的重量百分比為80%，分子量為7680 9510(平均分子量為8601)。上述原位凝膠組合物中所述的乳酸環(huán)丙沙星的重量體積比優(yōu)選為8%。本發(fā)明可以制備乳酸環(huán)丙沙星濃度高達(dá)約64mg/mL的原位凝膠組合物。上述原位凝膠組合物中所述的抗氧劑的重量體積比優(yōu)選為0.15%。上述原位凝膠組合物中所述的抗氧劑是指焦亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉；優(yōu)選亞硫酸氫鈉。上述原位凝膠組合物中所述的抑菌劑的重量體積比優(yōu)選為0.01 %。所述的抑菌劑是指苯扎溴銨或尼泊金甲酯(化學(xué)名稱:對羥基苯甲酸甲酯)。所述的抑菌劑是指苯扎溴銨，其重量體積比優(yōu)選為0.009 0.03%。所述的抑菌劑是指尼泊金甲酯，其重量體積比優(yōu)選為0.009 0.015%。上述原位凝膠組合物中所述的EDTA_2Na的重量體積比優(yōu)選為0.03%。本發(fā)明中EDTA-2Na作為乳酸環(huán)丙沙星的穩(wěn)定劑，一方面可以避免鐵離子與環(huán)丙沙星鄰位酮基的羧酸(吡酮酸)結(jié)構(gòu)絡(luò)合，導(dǎo)致乳酸環(huán)丙沙星分解，另一方面又可絡(luò)合其它金屬離子，從而避免金屬離子與乳酸環(huán)丙沙星主結(jié)構(gòu)中喹諾酮螯合，從而使乳酸環(huán)丙沙星游離出來而還原其本身的理化性質(zhì)。上述原位凝膠組合物中所述的醋酸-醋酸鈉緩沖液的濃度為0.025 1.398mol/L，pH = 3.6。醋酸-醋酸鈉緩沖液的濃度優(yōu)選為0.2mol/L。醋酸-醋酸鈉緩沖液不僅在控制制劑的PH方面起著重要作用，而且是乳酸環(huán)丙沙星在原位凝膠制劑中保持穩(wěn)定的關(guān)鍵。上述乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備方法，包括以注射用水為溶劑配制醋酸-醋酸鈉緩 沖液，然后經(jīng)0.22μπι微孔濾膜過濾；按照重量體積比向醋酸-醋酸鈉緩沖液中加入抗氧化劑、EDTA-2Na、抑菌劑，攪拌溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星，攪拌溶解；再加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，靜置5 20min，攪拌均勻；置4°C冰箱中20 80min，取出，攪拌均勻，再置4°C冰箱中12 48小時，即得乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠組合物。本發(fā)明僅選擇了乳酸環(huán)丙沙星抗菌藥，其具有抗菌譜廣、殺菌力強(qiáng)，良好的藥物動力學(xué)特點、不良反應(yīng)發(fā)生率低、價格低廉、且無交叉耐藥性等優(yōu)點，比較有市場價值；其目前臨床常用的注射液及口服制劑不僅存在半衰期短、連續(xù)用藥療程比較長，給藥次數(shù)多等缺點，且口服制劑還存在生物利用度比較低、首過效應(yīng)大等不足。故其很適合作為具有緩、控釋特點的原位凝膠的模型藥物。其實除了乳酸環(huán)丙沙星，本發(fā)明也可用于其他抗菌藥物替代乳酸環(huán)丙沙星，如氨基糖苷類、林可霉素、喹諾酮類等易溶于水的藥物。本發(fā)明利用泊洛沙姆407溶液特殊的反向熱膠凝性質(zhì)，利用泊洛沙姆188對泊洛沙姆407溶液的膠凝溫度的調(diào)節(jié)能力，使得本發(fā)明溫度敏感型原位凝膠組合物能夠在室溫(25°C)條件下以液體狀態(tài)給藥，能滿足直腸、陰道、注射等給藥時所需的流動性。本發(fā)明乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠組合物液體狀態(tài)給藥后，在體溫的作用下較快的膠凝而形成具有緩釋作用的凝膠，因而可以達(dá)到在滯留部位緩慢釋放藥物(乳酸環(huán)丙沙星)的目的。本發(fā)明乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物在獸醫(yī)臨床預(yù)防或治療中的應(yīng)用方法包括:肌內(nèi)注射、直腸及陰道給藥。陰道或直腸給藥時，可以將單次使用劑量為3 5mL的本發(fā)明藥液通過前端為管狀結(jié)構(gòu)的瓶口注入陰道或直腸，后使患畜保持姿勢約一分鐘。本發(fā)明所具有的優(yōu)點和有益效果:(I)與陰道或直腸用的乳酸環(huán)丙沙星栓劑、片齊U、泡騰片劑、膠囊劑等這些依靠陰道或直腸內(nèi)分泌的液體來溶解和分散藥物的制劑相比，本發(fā)明的乳酸環(huán)丙沙星原位凝膠組合物經(jīng)陰道或直腸黏膜給藥，藥物分布性更好，不會有異物感，增加患畜的順應(yīng)性，同時也避免了缺乏黏膜粘附力的固體乳酸環(huán)丙沙星栓劑易滑向結(jié)腸，使所載乳酸環(huán)丙沙星經(jīng)歷首過效應(yīng)而減低療效的缺點；(2)同陰道軟膏、陰道栓齊U、陰道膜劑及陰道凝膠劑等具有一定粘度的基質(zhì)組合的乳酸環(huán)丙沙星制劑相比，本發(fā)明乳酸環(huán)丙沙星原位凝膠組合物藥物分布更均勻且沒有用藥死角；(3)同陰道洗劑、噴霧劑等可注入陰道內(nèi)的乳酸環(huán)丙沙星溶液相比，本發(fā)明原位凝膠組合物避免了乳酸環(huán)丙沙星溶液不能持續(xù)附著在陰道內(nèi)表面，易流失或聚積等缺點?？傊景l(fā)明的制劑具有均勻分布和生物粘附性好的特點，既融合了乳酸環(huán)丙沙星溶液和凝膠的優(yōu)點又避免了兩者的不足，克服了現(xiàn)有的乳酸環(huán)丙沙星制劑所共有的無法避免局部藥物濃度過高的情況出現(xiàn)的缺陷。同臨床常用的乳酸環(huán)丙沙星注射劑相比，本發(fā)明的注射用乳酸環(huán)丙沙星原位凝膠組合物有如下優(yōu)點:(I)減少了給藥頻率，提高了動物的順應(yīng)性；(2)具有良好的緩、控釋作用。外釋藥試驗表明，本發(fā)明原位凝膠釋藥性質(zhì)雖受振蕩頻率、釋放面積等因素影響，但都表現(xiàn)出良好的緩、控釋性能；(3)注射等方式給藥后，在給藥部位發(fā)生膠凝而形成半固體狀的乳酸環(huán)丙沙星貯庫，組織定位性強(qiáng)，可發(fā)揮一定的長效作用。同乳酸環(huán)丙沙星植入劑相t匕，本發(fā)明沒有植入劑因手術(shù)植入時帶來的創(chuàng)傷，又能達(dá)到緩釋效果。同臨床常用的乳酸環(huán)丙沙星可溶性粉、片劑、膠囊劑等普通口服制劑相比本發(fā)明的優(yōu)點是:(I)起效更快，可以用于病情急、病情嚴(yán)重的患畜給藥；(2)沒有可溶性粉等口服制劑適口性差而使動物常可能在藥物治療劑量下使用，導(dǎo)致防治效果不好，增加耐藥菌株出現(xiàn)(若長期亞治療劑量)， 進(jìn)而縮短乳酸環(huán)沙星的使用壽命；(3)沒有乳酸環(huán)丙沙星常用口服制劑生物利用度低、首過效應(yīng)大的缺點；(4)與口服制劑相比，給藥更加方便；(5)可以減少給藥頻率從而可以節(jié)省勞力及減少動物的應(yīng)激反應(yīng)。本發(fā)明的膠凝溫度在室溫(藥典規(guī)定10°C 30°C )之上體溫之下，因此其在室溫時既具有注射液易于分劑量、給藥方便的特點。本發(fā)明的膠凝溫度均在30°C 37°C之間，可以保證其在動物體溫下發(fā)生膠凝；還有在動物體溫作用下膠凝迅速的特點，從而避免突釋效應(yīng)，用藥更加安全。本發(fā)明膠凝溫度高于現(xiàn)有的環(huán)丙沙星原位凝膠，從而方便環(huán)境溫度為20°C 30°C時制劑的制備、分裝及臨床給藥。本發(fā)明原位凝膠組合物中含有苯扎溴銨或尼泊金甲酯等抑菌劑，不但可以保證藥齊U的穩(wěn)定性，也能防止外源微生物對藥劑的污染。本發(fā)明原位凝膠組合物中含有FDTA-2Na，可以絡(luò)合制劑過程中引入的金屬離子，從而防止金屬離子如鐵離子對本發(fā)明組合物的性狀及含量產(chǎn)生影響，從而保證制劑的質(zhì)量。本發(fā)明組合物中含有抗氧化劑，從而可以避免本發(fā)明組合物中的乳酸環(huán)丙沙星在制備、貯藏及使用中受空氣中氧的影響而氧化。為此本發(fā)明以乳酸環(huán)丙沙星為模型藥物，制成溫敏型原位凝膠，用于肌肉、皮下或腹腔注射，直腸及陰道等黏膜，局部注射或經(jīng)皮給藥，為獸醫(yī)臨床引入原位凝膠新劑型，為乳酸環(huán)丙沙星增加新制劑，以使廣譜殺菌藥乳酸環(huán)丙沙星得到更加廣泛且充分的應(yīng)用。


圖1.乳酸環(huán)丙沙星原位凝膠室溫時為自由流動的液體照片。圖2.乳酸環(huán)丙沙星原位凝膠膠凝溫度時轉(zhuǎn)為凝膠的照片。圖3.組合物1、2、3凝膠經(jīng)時溶蝕曲線圖。圖4.組合物4、5、6凝膠經(jīng)時溶蝕曲線圖。圖5.組合物1、2、3藥物經(jīng)時釋放曲線圖。圖6.組合物4、5、6藥物經(jīng)時釋放曲線圖。圖7.組合物I不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線8.組合物2不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線圖。圖9.組合物3不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線圖。圖10.組合物4不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線圖。圖11.組合物5不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線圖。圖12.組合物6不同時間點累積百分溶蝕率對百分釋藥率線性回歸曲線圖。
具體實施例方式以下通過實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不對本發(fā)明保護(hù)范圍構(gòu)成限制。實施例1醋酸-醋酸鈉緩沖溶液的制備按照如下方法進(jìn)行:(I)將1.6410g的分析純醋酸鈉加入到IOOmL注射用水中溶解，混勻，經(jīng)0.22 μ m的微孔濾膜過濾，即得0.2mol/L的醋酸鈉溶液。(2)將12.0lOOg或吸取11.5mL的無水醋酸加入到注射用水IOOOmL中溶解，混勻，經(jīng)0.22 μ m的微孔濾膜過濾，即得0.2mol/L的醋酸溶液。(3)將⑴中醋酸鈉溶液75mL和⑵中醋酸溶液925mL混合均勻，經(jīng)0.22 μ m的微孔濾膜過濾，即得0.2mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(pH = 3.6)，約為1L。實施例2乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物I)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.012g、亞硫酸氫鈉0.060g、5 %苯扎溴銨溶液80微升(5%苯扎溴銨溶液是按照重量百分比將苯扎溴銨溶于注射用水中而得。此處相當(dāng)于苯扎溴銨的重量體積比為0.01 %)加入實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向所得濾液中加入泊洛沙姆407 (德國BASF公司)9.60g和泊洛沙姆188 (德國BASF公司)0.80g,靜置20min，攪拌均勻；而后置4°C冰箱中60min，取出，攪拌均勻；再置4°C冰箱中20小時，即得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例3乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物2)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.008g、亞硫酸氫鈉0.080g、5 %苯扎溴銨溶液120微升(此處苯扎溴銨的重量體 積比為0.015% )加入到實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，再向濾液中加入泊洛沙姆407(德國BASF公司)9.60g和泊洛沙姆188(德國BASF公司)1.20g,靜置15min，攪拌均勻，而后置4°C冰箱中80min，取出，攪拌均勻，再置4°C冰箱中24小時，便得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例4乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠制劑的制備(組合物3)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.012g、亞硫酸氫鈉0.040g、5 %苯扎溴銨溶液100微升(此處苯扎溴銨的重量體積比為0.0125% )加入到實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向濾液中加入泊洛沙姆407(德國BASF公司)9.20g和泊洛沙姆188(德國BASF公司)0.40g,靜置lOmin，攪拌均勻，而后置4°C冰箱中30min，取出，攪拌均勻，再置4°C冰箱中15小時，便得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例5乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物4)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.012g、亞硫酸氫鈉0.070g、尼泊金甲酯0.006g加入實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向所得濾液中加入泊洛沙姆407 (德國BASF公司)9.60g和泊洛沙姆188 (德國BASF公司)0.80g,靜置20min，攪拌均勻；而后置4°C冰箱中60min，取出，攪拌均勻；再置4°C冰箱中24小時，即得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物約50mL。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例6乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物5)
按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.012g、亞硫酸氫鈉(λ 060g、尼泊金甲酯(λ 004g加入到實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向所得濾液中加入泊洛沙姆407 (德國BASF公司)9.60g和泊洛沙姆188 (德國BASF公司)0.800g，靜置20min，攪拌均勻；而后置4°C冰箱中60min，取出，攪拌均勻；再置4°C冰箱中24小時，即得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物約50mL。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例7乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物6)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.008g、亞硫酸氫鈉0.080g、尼泊金甲酯0.006g加入到實施例1制備的0.2mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星3.2g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向所得濾液中加入泊洛沙姆407 (德國BASF公司)9.60g和泊洛沙姆188 (德國BASF公司)0.80g，靜置30min，攪拌均勻；而后置4°C冰箱中60min，取出，攪拌均勻；再置4°C冰箱中20小時，即得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例8乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備(組合物7)按照如下方法制備:將EDTA_2Na 0.012g、亞硫酸氫鈉0.060g、尼泊金甲酯0.004g加入到實施例1制備的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40mL中，攪拌使其溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星2.4g，攪拌溶解；0.45 μ m微孔濾膜過濾，向所得濾液中加入泊洛沙姆4079.20g和泊洛沙姆1880.80g，靜置20min，攪拌均勻；而后置4°C冰箱中60min，取出，攪拌均勻；再置4°C冰箱中24小時，即得澄明的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物。115°C高壓滅菌20min，放冷，產(chǎn)品檢驗合格后無菌分裝。實施例9本發(fā)明溫敏型原位凝膠組合物的膠凝溫度鑒定試驗按照如下方法進(jìn)行:分別取實施例2 8制備的原位凝膠組合物溶液(分別編號為組合物1、組合物2、組合物3、組合物4、組合物5、組合物6、組合物7)3mL分別置于不同的IOmL試管中，插入精度為0.1°C的精密溫度計，溫度計的水銀球須完全浸沒在凝膠溶液中。將試管置于水浴中，同時保證水浴液面高出試管中的凝膠溶液至少2cm，緩慢升溫，升溫速率約為每I 2min升高1°C。將試管傾斜90°，觀察內(nèi)容物不流動時的溫度即為膠凝溫度。每個組合物測定4次，結(jié)果取其平均值。結(jié)果(見表I)顯示組合物1、2、3、4、5、6、7的膠凝溫度分別為 32.5 °C、33.5 °C、31.4°C、32.5 V、32.7 V、32.4 V、32.5 V，在室溫(25 V )條件下為自由流動的液體(見圖1)，體溫時形成凝膠(見圖2)，符合注射用在體膠凝的要求，能滿足臨床實際需要。表I本發(fā)明原位凝膠組合物的膠凝溫度測定結(jié)果(均值百分位四舍五入)
權(quán)利要求
1.一種乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物，其特征在于其組成成分及其重量體積比為: 乳酸環(huán)丙沙星5 10%， 泊洛沙姆40720 26%， 泊洛沙姆1880.5 10%， EDTA-2Na0.01 0.04%， 抑菌劑0.009 0.03%， 抗氧化劑0.1 0.2%， 溶劑為醋酸-醋酸鈉緩沖液；其中所述的重量體積比是指各組成成分的重量與溶劑的體積之間的比例，重量體積比的單位為:g/mL。
2.按照權(quán)利要求1所述的原位凝膠組合物，其特征在于在權(quán)利要求1所述的凝膠組合物灌裝后充惰性氣體。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于泊洛沙姆407的重量體積比為22 25% ;所述的泊洛沙姆407分子中聚氧乙烯鏈段在共聚物中的重量百分比為70%，分子量為10000 15000。
4.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的泊洛沙姆188的重量體積比為0.5 4% ;所述的泊洛沙姆188分子中聚氧乙烯鏈段在共聚物中的重量百分比為80%，分子量為76 80 9510。
5.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的乳酸環(huán)丙沙星的重量體積比為8%。
6.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的抗氧劑的重量體積比為0.15% ;所述的抗氧劑是指焦亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉。
7.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的抑菌劑的重量體積比為0.01% ;所述的抑菌劑是指苯扎溴銨或尼泊金甲酯。
8.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的EDTA-2Na的重量體積比為0.03%。
9.按照權(quán)利要求1或2所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的醋酸-醋酸鈉緩沖液的濃度為 0.025 1.398mol/L, pH = 3.6。
10.按照權(quán)利要求9所述的原位凝膠組合物，其特征在于所述的醋酸-醋酸鈉緩沖液的濃度為0.2mol/L。
11.權(quán)利要求1所述的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物的制備方法，其特征在于包括以注射用水為溶劑配制醋酸-醋酸鈉緩沖液，然后經(jīng)0.22μπι微孔濾膜過濾；按照重量體積比向醋酸-醋酸鈉緩沖液中加入抗氧化劑、EDTA-2Na和抑菌劑，攪拌溶解；然后加入乳酸環(huán)丙沙星，攪拌溶解；再加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，靜置5 20min，攪拌均勻；置4°C冰箱中20 80min，取出，攪拌均勻，再置4°C冰箱中12 48小時，即得乳酸環(huán)丙沙星溫度敏感型原位凝膠組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了屬于獸藥制劑領(lǐng)域的乳酸環(huán)丙沙星溫敏型原位凝膠組合物，它的組成成分及其重量體積比(g/mL)為乳酸環(huán)丙沙星5～10％，泊洛沙姆407 20～26％，泊洛沙姆188 0.5～10％，乙二胺四乙酸二鈉0.01～0.04％，抑菌劑0.009～0.03％，抗氧化劑0.1～0.2％，溶劑為醋酸-醋酸鈉緩沖液。本發(fā)明還公開了其制備方法。本發(fā)明原位凝膠組合物在室溫下為液體，膠凝溫度和體溫相近，因而給藥方便，膠凝速度快；其次，膠凝強(qiáng)度和黏附作用好，可定位準(zhǔn)確給藥，減少藥物損失；此外，本發(fā)明具有緩釋和長效作用，用藥量少，給藥次數(shù)少，并且本發(fā)明沒有一般使用植入劑帶來的創(chuàng)傷，減少了患者痛苦。
文檔編號A61K47/34GK103156805SQ20111042601
公開日2013年6月19日 申請日期2011年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月19日
發(fā)明者江善祥, 曹禮華, 張東娟, 彭麟, 季輝, 萬榮峰, 蔡冬, 張軍忍, 施宗傲 申請人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 南京威泰琺瑪獸藥研究所有限公司