專利名稱：一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種滴丸的指紋圖譜及檢測方法，特別涉及一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法。
背景技術：
冠心七味滴丸是申請人在冠心七味片的基礎上，使用現(xiàn)在中藥制劑技術制成的新劑型，然而冠心七味片在質量控制方面只有性狀和片劑的相關檢查，基本不能控制產(chǎn)品的內在質量。本發(fā)明的冠心七味滴丸增加了鑒別、含量測定和指紋圖譜等方面的質量控制，能有效控制產(chǎn)品的質量，從而保證產(chǎn)品的療效。其中指紋圖譜用于冠心七味滴丸的質量控制
屬首創(chuàng)。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法。本發(fā)明是通過如下技術方案實現(xiàn)的一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，該方法包括如下步驟色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱hertsil 0DS-3 150X4. 6mm，5 μ m ；柱溫 25 45°C ；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0. 1 3. 0%甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，流速0. 5 1. 5ml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從0分鐘開始至45分鐘，流動相A由85%變?yōu)?0%，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20%變?yōu)?5%，并維持至 65分鐘，梯度均為線性梯度；參照峰制備取丹酚酸B對照品0. 005-0. 015重量份，精密稱定，加65 85%甲醇制成每0. 5-1. 5體積份含0. 0001-0. 0003重量份的溶液，即得；供試品溶液制備取冠心七味滴丸，研細，取0. 2 0. 4重量份，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入65 85%甲醇20 80體積份，稱定重量，功率220 350W，頻率20_60kHz 超聲處理7 23分鐘，放冷，再稱定重量，用65 85 %甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取參照品溶液和供試品溶液各5 15 μ 1，注入液相色譜儀， 紫外檢測器檢測，測定波長為^Onm，記錄色譜圖；將供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜進行比較，在供試品色譜圖中，應呈現(xiàn)14個與對照指紋圖譜對應的特征峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0. 90。本發(fā)明所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法包括如下步驟色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱hertsil 0DS-3 150X4. 6mm，5 μ m ；柱溫 350C ；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以1. 0%甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B， 流速1. Oml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從O分鐘開始至45分鐘，流動相A由85%變?yōu)?0 %，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20 %變?yōu)?5 %，并維持至65分鐘，梯度均為線性梯度；參照品溶液制備取丹酚酸B對照品0. 01重量份，精密稱定，加75%甲醇制成每1 體積份含0.001重量份的溶液，即得；供試品溶液制備取冠心七味滴丸，研細，取0. 3重量份，精密稱定，置錐形瓶中， 精密加入75%甲醇50體積份，稱定重量，功率^OW,頻率40kHz超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取參照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，紫外檢測器檢測，測定波長為^Onm，記錄色譜圖；將供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜進行比較，在供試品色譜圖中，應呈現(xiàn)14個與對照指紋圖譜對應的特征峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0. 90。本發(fā)明所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 170-0. 208，占參照峰的面積比1. 48% -28. 03% ；2號峰相對保留時間0. 199-0. 243，占參照峰的面積比1. 33% -25. 29% ；3號峰相對保留時間0. 332-0. 406，占參照峰的面積比0. 40% -7. 63% ；4號峰相對保留時間0. 772-0. 943，占參照峰的面積比1. 26% -23. 94% ；5號峰相對保留時間0. 811-0. 991，占參照峰的面積比1. 18% -22. 46% ；6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間0. 965-1. 180，占參照峰的面積比18. 69% -43. 61% ；8號峰相對保留時間1. 544-1. 887，占參照峰的面積比1. 33% -25. 22% ；9號峰相對保留時間1. 614-1. 973，占參照峰的面積比33. 20% -68. 96% ；10號峰相對保留時間1. 802-2. 203，占參照峰的面積比1. 22% -23. 21% ；11號峰相對保留時間2. 087-2. 550，占參照峰的面積比20. 10% -46. 90% ；12號峰相對保留時間2. 493-3. 047，占參照峰的面積比0. 50% -9. 48% ；13號峰相對保留時間2. 540-3. 104，占參照峰的面積比1. 50% -28. 44% ； 14號峰相對保留時間2. 958-3. 616，占參照峰的面積比13. 56% -31. 64%。本發(fā)明所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 170-0. 208，占參照峰的面積比8. 48% -20. 03% ；2號峰相對保留時間0. 199-0. 243，占參照峰的面積比7. 33% -20. 29% ；3號峰相對保留時間0. 332-0. 406，占參照峰的面積比2. 40% -5. 63% ；4號峰相對保留時間0. 772-0. 943，占參照峰的面積比8. 26% -19. 94% ；5號峰相對保留時間0. 811-0. 991，占參照峰的面積比8. 18% -18. 46% ；6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間0. 965-1. 180，占參照峰的面積比25. 69% -35. 61% ；8號峰相對保留時間1. 544-1. 887，占參照峰的面積比8. 33% -20. 22% ；9號峰相對保留時間1. 614-1. 973，占參照峰的面積比45. 20% -60. 96% ；10號峰相對保留時間1. 802-2. 203，占參照峰的面積比8. 22% -18. 21% ；11號峰相對保留時間2. 087-2. 550，占參照峰的面積比30. 10% -40. 90% ；
7
12號峰相對保留時間2. 493-3. 047，占參照峰的面積比3. 50% -6. 48% ；13號峰相對保留時間2. 540-3. 104，占參照峰的面積比10. 50% -20. 44% ；14號峰相對保留時間2. 958-3. 616，占參照峰的面積比18. 56% -28. 64%。本發(fā)明所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 189，占參照峰的面積比14. 75% ；2號峰相對保留時間0. 221，占參照峰的面積比13. 31% ；3號峰相對保留時間0. 369，占參照峰的面積比4. 02% ；4號峰相對保留時間0. 857，占參照峰的面積比12. 60% ；5號峰相對保留時間0. 901，占參照峰的面積比11. 82% ；6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間1. 073，占參照峰的面積比31. 15% ；8號峰相對保留時間1. 716，占參照峰的面積比13. 27% ；9號峰相對保留時間1. 793，占參照峰的面積比51. 08% ；10號峰相對保留時間2. 002，占參照峰的面積比12. 22% ；11號峰相對保留時間2. 318，占參照峰的面積比33. 50% ；12號峰相對保留時間2. 770，占參照峰的面積比4. 99% ；13號峰相對保留時間2. 822，占參照峰的面積比14. 97% ；14號峰相對保留時間3. 287，占參照峰的面積比22. 60%。本發(fā)明所述的冠心七味滴丸由如下方法制成本發(fā)明冠心七味滴丸的原料藥組成為丹參19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份廣棗6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份本發(fā)明冠心七味滴丸的原料藥組成優(yōu)選為丹參38. 4重量份檀香4. 3重量份降香8. 5重量份山柰6. 4重量份肉豆蔻12. 8重量份廣棗12. 8重量份沙棘12. 8重量份；或丹參21重量份檀香6重量份降香6重量份山柰8重量份肉豆蔻8重量份廣棗18重量份沙棘8重量份；或丹參50重量份檀香3重量份降香11重量份山柰4重量份肉豆蔻18重量份廣棗8重量份沙棘18重量份。本發(fā)明冠心七味滴丸的制備方法為 以上七味，將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取揮發(fā)油2-8小時，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小時，濾過，收集濾液，藥渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1_2小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和濾液，80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、2-10重量份的聚乙二醇400,20-28重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。本發(fā)明冠心七味滴丸的制備方法優(yōu)選為以上七味，將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取揮發(fā)油5小時，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用5倍量95%乙醇回流提取二次， 每次1小時，濾過，收集濾液，藥渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。本發(fā)明所述的重量份與體積份的對應關系為g/ml或kg/1。本發(fā)明冠心七味滴丸的檢測方法優(yōu)點在于(1)專屬性強，該指紋圖譜是冠心七味滴丸所獨有的，其反映的化學信息是具有高度的選擇性的。( 穩(wěn)定性好，該指紋圖譜是從多批冠心七味滴丸歸納出的共性，圖譜中的特征峰穩(wěn)定。( 重現(xiàn)性好，該指紋圖譜測定方法在規(guī)定測定條件下能再現(xiàn)冠心七味滴丸的指紋特征。控制冠心七味滴丸的質量和療效有重要意義。


圖1為對照指紋圖譜；圖2為參照品圖譜；圖3為對照指紋圖譜；圖4為樣品2圖譜；圖5為樣品3圖譜；圖6為樣品4圖譜；圖7為樣品5圖譜；圖8為樣品6圖譜；圖9為樣品7圖譜；圖10為樣品8圖譜；圖11為樣品9圖譜；圖12為樣品10圖譜；圖13為樣品11圖譜。下述實驗例用于進一步說明本發(fā)明，但不限于本發(fā)明。實驗例一色譜系統(tǒng)篩選實驗1、流動相的選擇選擇三種流動相進行試驗。第一種流動相以1. 0%甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，流速0. 8ml/min ； 按如下程序進行梯度洗脫從0分鐘開始至50分鐘，流動相A由90%變?yōu)?0%，從50分鐘開始至65分鐘，流動相A由10%變?yōu)?0%，并維持至75分鐘，梯度均為線性梯度。第二種流動相以水為流動相A，乙腈為流動相B，流速1. Oml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從O分鐘開始至45分鐘，流動相A由85%變?yōu)?0%，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20%變?yōu)?5%，并維持至65分鐘，梯度均為線性梯度。第三種流動相以1. 0%甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，流速1. Oml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從O分鐘開始至45分鐘，流動相A由85%變?yōu)?0%，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20%變?yōu)?5%，并維持至65分鐘，梯度均為線性梯度。試驗結果第三種流動相所得的指紋圖譜峰型和分離度均最好，而且采集時間也較少，所以選擇第三種流動相。

2、色譜柱的選擇選擇四種色譜柱進行試驗。第一種色譜柱A1ltech C18 250 X 4. 6mm，5 μ m。第二種色譜柱WatersC18 250X4. 6mm, 5 ym0第三種色譜柱依利特C18 250X4. 6mm，5 μ m。第四種色譜柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m試驗結果除第三種色譜柱所得的指紋圖譜峰型和分離度較差外，其余三種色譜柱均較好，而且第四種色譜柱所得的指紋圖譜峰型和分離度最好，所以最終確定使用第四種色譜柱(Inertsil 0DS-3 150 X 4. 6mm，5 μ m)。實驗例二、本發(fā)明冠心七味滴丸檢測方法實驗1、本發(fā)明冠心七味滴丸指紋圖譜試驗方法(1)色譜條件色譜柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m柱溫35°C流動相A、1%甲酸溶液B、乙腈按如下程序進行梯度洗脫流速1.0ml/min
時間 A Γ^ ~~085 15~
45 20 80~ 55 85 15~ 65 85 15~(2)、參照峰制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得。(3)、供試品溶液制備取冠心七味滴丸，研細，取約0. 3g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入75%甲醇 50ml，稱定重量，超聲處理(功率280W，頻率40kHz) 15分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(4)、測定法分別精密吸取參照品溶液和供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，紫外檢測器檢測，測定波長為280nm，記錄色譜圖。將供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜進行比較，在供試品色譜圖中，應呈現(xiàn)14個與對照指紋圖譜對應的特征峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0. 90。2、標準指紋圖譜(見圖1)儀器、色譜柱及積分參數(shù)Waters^95-2996高效液相色譜儀，Empower色譜工作站。色譜柱為 hertsil 0DS-3 (150mmX 4. 6mm, 5um)；柱溫!35°C。斜率50 ；峰寬30。3、對指紋圖譜的說明冠心七味滴丸由七味中藥制備而成，其中三味中藥丹參、廣棗和肉豆蔻的相關特征成分在指紋圖譜中均有體現(xiàn)。比如丹參中的成分丹參素O號峰)、原兒茶醛(3號峰)、丹酚酸B(S峰)；廣棗中的成分沒食子酸(1號峰)；肉豆蔻中的揮發(fā)性成分去氫二異丁香酚(11號峰)，在指紋圖譜中均體現(xiàn)。所以本方法對冠心七味滴丸的質量控制意義重大。4、樣品指紋圖譜測定(1)色譜條件色譜柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m柱溫35°C流動相A、1%甲酸溶液C、乙腈按如下程序進行梯度洗脫流速1.0ml/min
權利要求
1.一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱hertsil 0DS-3 150 X 4. 6mm，5 μ m ；柱溫25 450C ；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0. 1 3. 0%甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，流速0. 5 1. 5ml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從0分鐘開始至45分鐘，流動相 A由85%變?yōu)?0%，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20%變?yōu)?5%，并維持至65分鐘，梯度均為線性梯度；參照品溶液制備取丹酚酸B對照品0. 005-0. 015重量份，精密稱定，加65 85%甲醇制成每0. 5-1. 5體積份含0. 00005-0. 00015重量份的溶液，即得；供試品溶液制備取冠心七味滴丸，研細，取0. 2 0. 4重量份，精密稱定，置錐形瓶中， 精密加入65 85%甲醇20 80體積份，稱定重量，功率220 350W，頻率20_60kHz超聲處理7 23分鐘，放冷，再稱定重量，用65 85 %甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取參照品溶液和供試品溶液各5 15 μ 1，注入液相色譜儀，紫外檢測器檢測，測定波長為^Onm，記錄色譜圖；將供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜進行比較，在供試品色譜圖中，應呈現(xiàn)14個與對照指紋圖譜對應的特征峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0. 90。
2.如權利要求1所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱hertsil ODS-3 150X4. 6πιπι，5μπι ；柱溫35°C ； 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以1. O %甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，流速1. Oml/min ；按如下程序進行梯度洗脫從O分鐘開始至45分鐘，流動相A由85%變?yōu)?20 %，從45分鐘開始至55分鐘，流動相A由20 %變?yōu)?5 %，并維持至65分鐘，梯度均為線性梯度；參照品溶液制備取丹酚酸B對照品0. 01重量份，精密稱定，加75%甲醇制成每1體積份含0. 0001重量份的溶液，即得；供試品溶液制備取冠心七味滴丸，研細，取0. 3重量份，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入75%甲醇50體積份，稱定重量，功率^OW,頻率40kHz超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取參照品溶液和供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，紫外檢測器檢測，測定波長為280nm，記錄色譜圖；將供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜進行比較，在供試品色譜圖中，應呈現(xiàn)14個與對照指紋圖譜對應的特征峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0. 90。
3.如權利要求1或2所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 170-0. 208，占參照峰的面積比1. 48% -28. 03% ； 2號峰相對保留時間0. 199-0. 243，占參照峰的面積比1. 33% -25. 29% ； 3號峰相對保留時間0. 332-0. 406，占參照峰的面積比0. 40% -7. 63% ；4號峰相對保留時間0. 772-0. 943，占參照峰的面積比1. 26% -23. 94% ； 5號峰相對保留時間0. 811-0. 991，占參照峰的面積比1. 18% -22. 46% ； 6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間0. 965-1. 180，占參照峰的面積比18. 69% -43. 61% ； 8號峰相對保留時間1. 544-1. 887，占參照峰的面積比1. 33% -25. 22% ； 9號峰相對保留時間1. 614-1. 973，占參照峰的面積比33. 20% -68. 96% ； 10號峰相對保留時間1. 802-2. 203，占參照峰的面積比1. 22% -23. 21% ； 11號峰相對保留時間2. 087-2. 550，占參照峰的面積比20. 10% -46. 90% ； 12號峰相對保留時間2. 493-3. 047，占參照峰的面積比0. 50% -9. 48% ； 13號峰相對保留時間2. 540-3. 104，占參照峰的面積比1. 50% -28. 44% ； 14號峰相對保留時間2. 958-3. 616，占參照峰的面積比13. 56% -31. 64%。
4.如權利要求3所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 170-0. 208，占參照峰的面積比8. 48% -20. 03% ； 2號峰相對保留時間0. 199-0. 243，占參照峰的面積比7. 33% -20. 29% ； 3號峰相對保留時間0. 332-0. 406，占參照峰的面積比2. 40% -5. 63% ； 4號峰相對保留時間0. 772-0. 943，占參照峰的面積比8. 26% -19. 94% ； 5號峰相對保留時間0. 811-0. 991，占參照峰的面積比8. 18% -18. 46% ； 6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間0. 965-1. 180，占參照峰的面積比25. 69% -35. 61% ； 8號峰相對保留時間1. 544-1. 887，占參照峰的面積比8. 33% -20. 22% ； 9號峰相對保留時間1. 614-1. 973，占參照峰的面積比45. 20% -60. 96% ； 10號峰相對保留時間1. 802-2. 203，占參照峰的面積比8. 22% -18. 21% ； 11號峰相對保留時間2. 087-2. 550，占參照峰的面積比30. 10% -40. 90% ； 12號峰相對保留時間2. 493-3. 047，占參照峰的面積比3. 50% -6. 48% ； 13號峰相對保留時間2. 540-3. 104，占參照峰的面積比10. 50% -20. 44% ； 14號峰相對保留時間2. 958-3. 616，占參照峰的面積比18. 56% -28. 64%。
5.如權利要求3所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指紋圖譜中對應的14個特征峰為1號峰相對保留時間0. 189，占參照峰的面積比14. 75% ； 2號峰相對保留時間0. 221，占參照峰的面積比13. 31% ； 3號峰相對保留時間0. 369，占參照峰的面積比4. 02% ； 4號峰相對保留時間0. 857，占參照峰的面積比12. 60% ； 5號峰相對保留時間0. 901，占參照峰的面積比11. 82% ； 6號峰為參照峰；7號峰相對保留時間1. 073，占參照峰的面積比31. 15% ； 8號峰相對保留時間1. 716，占參照峰的面積比13. 27% ； 9號峰相對保留時間1. 793，占參照峰的面積比51. 08% ； 10號峰相對保留時間2. 002，占參照峰的面積比12. 22% ；11號峰相對保留時間2. 318，占參照峰的面積比33. 50% ； 12號峰相對保留時間2. 770，占參照峰的面積比4. 99% ； 13號峰相對保留時間2. 822，占參照峰的面積比14. 97% ； 14號峰相對保留時間3. 287,占參照峰的面積比22. 60%。
6.如權利要求1、2、4或5所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料藥組成為丹參19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份廣棗6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份。
7.如權利要求3所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料藥組成為丹參19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份廣棗6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份。
8.如權利要求6所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料藥組成為丹參38. 4重量份山柰6. 4重量份沙棘12. 8重量份； 或丹參21重量份山柰8重量份沙棘8重量份； 或丹參50重量份山柰4重量份沙棘18重量份。
9.如權利要求7所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料藥組成為丹參38. 4重量份山柰6. 4重量份沙棘12. 8重量份； 或丹參21重量份山柰8重量份沙棘8重量份； 或丹參50重量份山柰4重量份沙棘18重量份。
10.如權利要求6所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制備方法為將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取揮發(fā)油2-8小時，蒸餾后的水溶液另器檀香4. 3重量份降香8. 5重量份肉豆蔻12. 8重量份廣棗12. 8重量份檀香6重量份降香6重量份肉豆蔻8重量份廣棗18重量份檀香3重量份降香11重量份肉豆蔻18重量份廣棗8重量份檀香4. 3重量份降香8. 5重量份肉豆蔻12. 8重量份廣棗12. 8重量份檀香6重量份降香6重量份肉豆蔻8重量份廣棗18重量份檀香3重量份降香11重量份肉豆蔻18重量份廣棗8重量份收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次 0. 5-1. 5小時，濾過，收集濾液，藥渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和濾液， 80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、2-10重量份的聚乙二醇400、20-觀重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。
11.如權利要求7-9之一所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制備方法為將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取揮發(fā)油2-8小時，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次 0. 5-1. 5小時，濾過，收集濾液，藥渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和濾液， 80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、2-10重量份的聚乙二醇400、20-觀重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。
12.如權利要求10所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制備方法為將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取揮發(fā)油5小時，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用5倍量95%乙醇回流提取二次，每次1小時，濾過，收集濾液，藥渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。
13.如權利要求11所述的冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制備方法為將檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取揮發(fā)油5小時，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣與其余丹參、廣棗、沙棘三味藥材用5倍量95%乙醇回流提取二次，每次1小時，濾過，收集濾液，藥渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小時，濾過，收集濾液，分別濃縮各提取液至60°C時相對密度為1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C減壓干燥，粉碎成細粉，得浸膏粉，加入揮發(fā)油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油為冷卻劑，制成滴丸。
全文摘要
本發(fā)明公開一種冠心七味滴丸指紋圖譜的檢測方法，該檢測方法為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，進行梯度洗脫，紫外檢測器檢測。參照品溶液的制備，取丹酚酸B適量，加甲醇溶解，作為參照品溶液；供試品溶液的制備，取冠心七味滴丸，研細，取適量置錐形瓶中，加入甲醇超聲處理，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。樣品測定，分別精密吸取參照峰溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0.90。本發(fā)明冠心七味滴丸的檢測方法專屬性強、穩(wěn)定性好，并且重現(xiàn)性也好。
文檔編號A61K9/20GK102297923SQ20111013272
公開日2011年12月28日 申請日期2011年5月20日 優(yōu)先權日2011年5月20日
發(fā)明者余啟波, 張德奎, 張煜華, 梁隆, 王利春, 申志春, 程志鵬, 羅琴, 胡思玉 申請人:四川科倫藥物研究有限公司