專利名稱：人miR-504的反義寡聚核苷酸及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)材料技術(shù)領(lǐng)域和藥物領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及一種microRNAs (miRNA)反義寡聚核苷酸,尤其是涉及人microRNA-504 (人miR-504)反義寡聚核苷酸及其應(yīng)用。該反義寡聚核苷酸可與人miR-504互補，從而抑制人miR-504的表達而起到抗腫瘤的作用。本發(fā)明還涉及包含該miRNA反義寡聚核苷酸的藥物組合物。
背景技術(shù)：
miRNAs (又稱為microRNA或微小RNA)是小的非編碼RNA，長度為20_25bp，通常是由RNA聚合酶II (Pol II)轉(zhuǎn)錄的，一般最初產(chǎn)物為大的具有帽子結(jié)構(gòu)(7MGpppG)和多聚腺苷酸尾巴(MAAA)的pri-miRNA(primary miRNA,初級miRNA)。這些pri-miRNA在RNase IIIDrosha和其輔助因子Pasha的作用下被處理成70個核苷酸組成的前體miRNA (precursormiRNA, pre-mi RNA)。RAN-GTP和export in 5 (輸出蛋白5)將這種前體分子輸送到細胞質(zhì) 中。隨后，另一個RNase III Dicer(核糖核酸內(nèi)切酶)將其剪切產(chǎn)生約為22個核苷酸長度的雙鏈。這種雙鏈很快被引導(dǎo)進入miRISC(miRNA-induced silencing complex, miRNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物)復(fù)合體中，其中含有Argonaute蛋白(AGO蛋白)，并且成熟的單鏈miRNA保留在這一復(fù)合物中。成熟的miRNA結(jié)合到與其互補的mRNA的位點并通過兩種依賴于序列互補性的機制負(fù)調(diào)控基因表達，與靶mRNA不完全互補的miRNA在蛋白質(zhì)翻譯水平上抑制其表達。然而，最近也有證據(jù)表明，這些miRNA也有可能影響mRNA的穩(wěn)定性。使用這種機制的miRNA結(jié)合位點通常在mRNA的3’端非翻譯區(qū)。如果miRNA與靶位點完全互補(或者幾乎完全互補)，那么這些miRNA的結(jié)合往往引起祀分子mRNA的降解。miRNAs在物種進化中相當(dāng)保守，在動物，植物和真菌等中發(fā)現(xiàn)的miRNAs表達均有嚴(yán)格的組織特異性和時序性。目前，只有很小一部分miRNAs的生物學(xué)功能得到闡明。這些miRNAs調(diào)節(jié)細胞生長和組織分化，與生物生長發(fā)育有關(guān)。一系列的研究表明miRNAs在細胞生長和凋亡、血細胞分化、同源異形盒基因調(diào)節(jié)、神經(jīng)元的極性、胰島素分泌、大腦形態(tài)形成、心臟發(fā)生和胚胎后期發(fā)育等過程中發(fā)揮重要作用。例如，miR-273參與線蟲的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程;miR-430參與斑馬魚的大腦發(fā)育；miR-181控制哺乳動物造血細胞分化為B細胞；miR-375調(diào)節(jié)哺乳動物胰島細胞發(fā)育和胰島素分泌；miR-143在脂肪細胞分化起作用；miR-196參與了哺乳動物四肢形成，miR-1與心臟發(fā)育有關(guān)。另有研究人員發(fā)現(xiàn)許多神經(jīng)系統(tǒng)的miRNAs在大腦皮層培養(yǎng)中受到時序調(diào)節(jié)，表明其可能控制著區(qū)域化的mRNA翻譯。miRNA表達與多種癌癥相關(guān)，并且這些基因可能起到腫瘤抑制基因或是癌基因作用。最先在B細胞慢性淋巴性白血病(CLL)中發(fā)現(xiàn)有miRNA表達水平的改變，隨后陸續(xù)在各種人類腫瘤中均檢測到miRNA表達水平的變化。研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs與腫瘤形成相關(guān)，既能發(fā)揮腫瘤抑制基因的作用(如miR-15a和miR-16-l)，又能起到癌基因的作用(如miR-155和miR-17-92簇)。目前認(rèn)為，在腫瘤細胞中，有些miRNA成熟體或前體表達水平異常，而表達異常的miRNA通過影響靶mRNA翻譯發(fā)揮作用，參與腫瘤形成過程，并起重要作用。如Ras原癌基因受let-7家族的調(diào)控，BCL2抗凋亡基因受miR-15a-miR-16_l簇調(diào)控，E2F1轉(zhuǎn)錄因子受miR-17-92簇調(diào)控，BCL6抗凋亡基因受miR-127的調(diào)控等。miRNAs的表達下調(diào)也和腫瘤發(fā)生有密切關(guān)系，這預(yù)示著miRNA具有癌基因的功能。例如，miR-143和miR-145在結(jié)腸癌中明顯下調(diào)。有趣的是，其發(fā)夾結(jié)構(gòu)的前體分子在腫瘤和正常組織中含量相似，這表明,miRNAs的表達下調(diào)可能是由于其加工過程受到破壞。但是,miR-143和miR-145的腫瘤抑制基因功能可能不僅僅局限于結(jié)腸癌，在乳腺癌、前列腺癌、子宮癌、淋巴癌等細胞系中其表達量也明顯下調(diào)。另一個報道表明，miR-21在膠質(zhì)母細胞瘤中表達增加。這個基因在腫瘤組織中的表達量比在正常組織中高5-100倍。miRNAs是天然的反義作用因子，能夠調(diào)控與真核生物生存和增殖相關(guān)的多種基因。在腫瘤治療方面，miRNA的應(yīng)用前景光明。在利用miRNA作為治療靶點方面，已有實驗數(shù)據(jù)支持如在吉西他濱(gemcitabine)治療的過程中，出現(xiàn)miRNA表達譜的變化；調(diào)控部分miRNA的表達水平(如使miR-21過表達)，能增進膽管癌細胞對化療藥物的敏感性。通過引入與具有癌基因特性的miRNA互補的合成的反義寡聚核苷酸一抗miRNA寡聚核苷酸(AMOs)—可能有效的滅活腫瘤中的miRNAs，延緩其生長。臨床上，可以通過經(jīng)常的或者持續(xù)的2’ -O-甲基化或者鎖核酸(LNA)等修飾的反義寡聚核苷酸給藥使miRNA失活。這些修飾使得寡核苷酸更穩(wěn)定，比其他治療手段毒性更低。使用antag0mirS(與膽固醇偶聯(lián) 的AMOs)注射小鼠后可以在不同器官有效抑制miRNA活性，因而可能成為一種有希望的治療藥物。相反的，過表達那些具有腫瘤抑制基因作用的miRNAs，如let-7家族，也可以用于治療某些特定的腫瘤。反義寡聚核苷酸(FlanaganWM. Antisense comes of age. Cancer MetastasisReviews 1998 ;17(2) :169-76)是指一段可以與其靶基因的堿基互補的核苷酸。反義寡聚核苷酸可以抑制相應(yīng)基因的表達。人microRNA-504 (hsa-miR-504)位于 X 號染色體，前體序列為 GCUGCUGUUGGGAGACCCUGGUCUGCACUCUAUCUGUAUUCUUACUGAAGGGAGUGCAGGGCAGGGUUUCCCAUACAGAGGGC (SEQ IDNo. I)。含有一個成熟 microRNA hsa-miR-504 (MIMAT0002875,序列為AGACCCUGGUCUGCACUCUAUC(SEQ ID No. 2))。Hu 等報道 miR-504 可以抑制 p53 的表達(Hu等，2010)。Gao等利用芯片技術(shù)和Taqman RealtimePCR技術(shù)報道了 miR-504在鱗狀細胞肺癌腫瘤組織中的表達量較正常組織要高出2倍(Gao等，2010)。Haller等利用芯片技術(shù)和qRT-PCR發(fā)現(xiàn)miR-504在胃腸道間質(zhì)瘤中表達異常(Haller等，2010)。Huang等發(fā)現(xiàn)miR-504能夠通過結(jié)合DRDl的3' UTR從而上調(diào)該基因的表達(Huang等，2009)。但在膠質(zhì)瘤中還沒有關(guān)于miR-504的功能和表達水平的研究報道。近三十年，盡管臨床上腫瘤的綜合治療已很普遍，但都是以手術(shù)為主、放化療為輔的綜合治療，其對腫瘤患者的生存率提高并不明顯。5年總體生存率仍然較低，徘徊在30% 55%左右，也并沒有顯著提高，中晚期患者的5年生存率更低，約為20%。而且這些方法都存在各自的局限性，特別是對中晚期和復(fù)發(fā)患者療效不佳，對伴有遠處轉(zhuǎn)移者療效更差。因此，尋找更安全有效的治療途徑是提高腫瘤患者生存率和生存質(zhì)量所亟待解決的難題。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明設(shè)計了一系列可以結(jié)合于miR-504不同位置的反義寡聚核苷酸分子，并在培養(yǎng)細胞U87/MG中，驗證對miR-504表達特異性抑制的反義寡聚核苷酸對細胞生長能力和增殖能力的影響，本發(fā)明的反義寡聚核苷酸分子長度可以包含13 22個核苷酸殘基，對人腫瘤細胞的生長能力和增殖能力均有不同程度的抑制。其中最短的反義寡聚核苷酸長度為13個堿基，不同長度的反義核酸均具有良好的腫瘤細胞生長及增殖抑制活性。因此，上述反 義寡聚核苷酸均可用來制備抑制腫瘤細胞生長能力、增殖能力的制劑，其中優(yōu)選miR-504高表達的腫瘤細胞。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的一個目的是提供一組新的用于抑制人miR-504表達的反義寡聚核苷酸(抑制劑)，從而高效、低毒或無毒地抑制miR-504的表達，進而治療由miR-504過度表達引發(fā)的疾病，包括腫瘤，尤其為腦膠質(zhì)瘤。本發(fā)明的另一個目的是提供上述反義寡聚核苷酸在制備治療mir-504過度表達的相關(guān)疾病的藥物中的用途。本發(fā)明的再一個目的是提供一種包含上述反義寡聚核苷酸的藥物組合物。本發(fā)明人通過廣泛而深入的研究，設(shè)計并合成了一系列專一性針對miR-504不同區(qū)域的長度不同的反義核酸(反義寡聚核苷酸)，并在培養(yǎng)細胞中驗證具有抑制效果的反義核酸。研究顯示，這些反義核酸能夠抑制腫瘤細胞的生長和惡性增殖能力。本發(fā)明的第一方面，提供了一種miR-504的反義寡聚核苷酸，所述反義寡聚核苷酸抑制人細胞內(nèi)miR-504的表達。通常，所述反義寡聚核苷酸與5’ -AGACCCUGGUCUGCACUCUAUC-3’中連續(xù)13 22個核苷酸序列互補。通常反義寡聚核苷酸的長度為13 35bp，對于miRNA成熟體來說，較佳的反義寡聚核苷酸長度為18 22bp。本發(fā)明的反義寡聚核苷酸的長度沒有特別限制，一般來說，為了達到雜交的專一性，本發(fā)明的反義寡聚核苷酸需要至少13個單體組成的核苷酸。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述反義寡聚核苷酸的長度為18 22個核苷酸。更佳地，所述反義寡聚核苷酸的序列為5GAUAGAGUGCAGACCAGG⑶CU-3， (SEQ ID No.3)。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方式中，本發(fā)明所述的反義寡聚核苷酸中的核苷酸可以為核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸或者核糖核苷酸與脫氧核糖核苷酸的嵌合體。從目前來看，核酸雜交中RNA與miRNA的雜交親和力比DNA與miRNA雜交的親和力要高，具有很高的藥用價值。但是人工合成DNA的成本遠遠比合成RNA的成本低，也具有很好的市場潛力。而且也可以采用核糖RNA單體與脫氧核糖DNA單體嵌合相連而成的反義核酸作為藥物進行開發(fā)。本發(fā)明設(shè)計的一系列反義核酸分子，既包括DNA分子,也包括RNA分子,兩種分子均具有抑制miR-504表達的活性。本發(fā)明設(shè)計的反義核酸，其序列具有特異性生物學(xué)活性，其對于某一基因互補的位點的反義核酸所互補的長度有很大關(guān)系，如互補的長些，則生物學(xué)活性會更高些，抑制效果也會更好一些，在增加或減少一個至數(shù)個堿基而互補于同一基因位點的反義核酸，同樣也具有不同程度的生物學(xué)活性，也可達到不同程度的抑制腫瘤細胞生長與增殖的作用，本發(fā)明的研究表明，最短可達13個堿基仍然具有抑制miR-504表達的作用。在本發(fā)明的反義核酸研究中，各種化學(xué)修飾方法很多，包括選自核糖修飾、堿基修飾和磷酸骨架修飾中的一種或幾種的組合等。應(yīng)當(dāng)明確的是，任何能夠增加反義核酸穩(wěn)定性和生物利用度的修飾方法都可以應(yīng)用，如選自膽固醇修飾、PEG修飾、硫代修飾和2’ -甲氧基修飾中的一種或幾種等。本文中所述反義寡聚核苷酸經(jīng)過2’-甲氧基取代修飾。
本發(fā)明的上述反義核酸具有抑制miR-504表達的效果。當(dāng)將上述反義核酸轉(zhuǎn)染到miR-504高表達的細胞株U87中后，能夠有效抑制腫瘤細胞的生長和惡性增殖能力。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它含有安全有效量的本發(fā)明寡聚核苷酸以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括但不限于鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇及其組合。藥物制劑應(yīng)與給藥方式相匹配。本發(fā)明的藥物組合物可以被制成針劑形式，例如用生理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液通過常規(guī)方法進行制備。所述“有效量”是指可對人和/或動物產(chǎn)生功能或活性且可被人和/或動物所接受的量。所述“藥學(xué)上可接受的”成分是適用于人和/或動物而無過度不良副反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))的，即有合理的效益/風(fēng)險比的物質(zhì)。 在本發(fā)明的第三方面，提供了本發(fā)明的反義寡聚核苷酸在用于制備治療以下疾病的藥物中的用途，其中，所述反義寡聚核苷酸與其他治療藥物聯(lián)合施用。所述疾病為與人體miR-504過表達有關(guān)的疾病，包括腫瘤,優(yōu)選為腦膠質(zhì)瘤。如本文所用，“反義寡聚核苷酸”指反義的核苷酸寡聚物。反義寡聚核苷酸通過堿基互補(A-T，A-U, G-C)配對與雙鏈DNA形成三鏈(反基因)，或與單鏈RNA形成雜交雙鏈(反義)，從而阻斷基因的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后mRNA的加工和翻譯。同時，雙鏈RNA能被細胞內(nèi)的核糖核酸酶H(RNaseH)所降解，從而更有效地阻斷靶基因的表達。由于反義核苷酸只能與反向互補的靶序列結(jié)合，因此具有專一性高，副作用小的特點。本發(fā)明提供的人miR-504的反義寡聚核苷酸可與人miR-504互補，從而抑制人miR-504的表達而起到抗腫瘤的作用，其具有如下優(yōu)點I、本發(fā)明提供的反義寡聚核苷酸作用于特異性的靶位點，非特異性結(jié)合的位點很少，專一'丨生高；2、本發(fā)明提供的反義寡聚核苷酸經(jīng)過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾，具有毒性低、副作用小和半衰期長等特點；3、本發(fā)明提供的反義寡聚核苷酸具有很好的抑制效果，對腫瘤細胞生長的抑制率超過50%。


圖I顯示了人miR-504的反義寡聚核苷酸抑制腫瘤細胞U87/MG細胞的生長和增殖，其中，圖IA為轉(zhuǎn)染了 FAM標(biāo)記的陰性對照后的U87/MG細胞顯微圖(20X);圖IB為轉(zhuǎn)染了 FAM標(biāo)記的陰性對照后的U87/MG細胞顯微圖(20 X，熒光下)；圖IC 為轉(zhuǎn)染陰性對照(5’-CAGUACUUUUGUGUAGUACAA-3’)后 U87/MG 細胞狀態(tài)的顯微圖(IOX);圖 ID 為轉(zhuǎn)染miR-504反義寡聚核苷酸(5’-GAUAGAGUGCAGACCAGG⑶CU-3’)后U87/MG細胞狀態(tài)的顯微圖(IOX)。
具體實施例方式本發(fā)明的反義寡聚核苷酸，其序列與5 ’ -AGACCCUGGUCUGCACUCUAUC-3 ’中連續(xù)13 22個核苷酸序列互補，并且亦不與其他基因的RNA序列互補。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述反義寡聚核苷酸的序列為5’-GAUAGAGUGCAGACCAGGGUCU-3’。本發(fā)明提供的反義寡聚核苷酸可以為修飾產(chǎn)物，它含有至少兩個，通常至少4個，較佳的至少6個，更佳的為至少8個核苷酸沒有毒性副作用的修飾的核苷酸，所述修飾方式包括2位甲氧基取代、硫代修飾等。為了增加反義寡聚核苷酸的細胞攝取率，還可以在上述修飾的基礎(chǔ)上對反義寡聚核苷酸進行膽固醇修飾或者PEG化修飾。上述修飾后的寡聚核苷酸能繼續(xù)與靶序列有效配對，而且比普通的未經(jīng)修飾的核糖核酸或者脫氧核糖核酸在體內(nèi)具有更長的半衰期。下面將結(jié)合實施例及附圖進一步詳細地描述本發(fā)明。然而應(yīng)當(dāng)理解，列舉這些實施例只是為了說明本發(fā)明，而并不是用來限制本發(fā)明的范圍。
實施例miR-504的反義寡聚核苷酸對人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞系U87/MG抑制活性檢測首先，由上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司合成miR-504反義寡聚核苷酸，序列為5’ -GAUAGAGUGCAGACCAGGGUCU-3’。在實施例中涉及的所用序列均由上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司合成。細胞培養(yǎng)將U87/MG細胞(人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤，購自中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫)在10% FBS-DMEM培養(yǎng)基(DMEM( —種常規(guī)培養(yǎng)基)購自Hyclone，F(xiàn)BS (胎牛血清)購自Gibco)中，于37°C，5% CO2條件下培養(yǎng)。收集生長狀態(tài)良好的U87/MG細胞，離心計數(shù)，以2X IO3每孔鋪于96孔板內(nèi)，37°C,5% CO2培養(yǎng)24h。轉(zhuǎn)染I)轉(zhuǎn)染前一天，在96孔板中用適量不含抗生素的培養(yǎng)基接種培養(yǎng)細胞，使轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度達到30 50% ;2)轉(zhuǎn)染樣品按照如下方法準(zhǔn)備寡聚物-Lipofecta mine 2000 (—種轉(zhuǎn)染試劑)復(fù)合物a.用25 μ I不含血清的Opti-MEM I培養(yǎng)基(Gibco)分別稀釋miR-504反義寡聚核苷酸(5’ -GAUAGAGUGCAGACCAGGGUCU-3’ )、陰性對照(SEQ ID No. 4 5’ -CAGUACUUUUGUGUAGUACAA-3’)、FAM標(biāo)記的陰性對照，加入孔內(nèi)后終濃度為50nM，輕輕混勻，每個轉(zhuǎn)染設(shè)3個復(fù)孔；b.使用前輕輕混勻 Lipofecta mine 2000 (Invitrogen),并取 O. 25 μ I 用Opti-MEM I培養(yǎng)基將其稀釋至25 μ 1，輕輕混勻后在室溫下孵育5min ；c.孵育5min后，稀釋的Lipofecta mine 2000分別與稀釋的反義核苷酸及對照混合，輕輕混勻后在室溫下孵育20min，以允許復(fù)合物的形成；3)將復(fù)合物加入到每一個包含細胞和培養(yǎng)基的孔中，輕輕地前后搖動培養(yǎng)板混合；反義核苷酸及對照的終濃度為75nM。4) 37°C ,5% CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)孵育72小時后，顯微鏡觀察U87/MG細胞，照相。如圖I所示，轉(zhuǎn)染72小時后，超過80%的U87/MG細胞成功轉(zhuǎn)染了 FAM標(biāo)記的陰性對照(圖1A，圖1B);轉(zhuǎn)染陰性對照后，U87/MG細胞完整，透光性強(圖1C);轉(zhuǎn)染miR-504反義寡聚核苷酸后大部分U87/MG細胞死亡(圖1D)?；贛TT的細胞毒性實驗向上一步驟中得到的細胞,加入配制好的MTT(Sigma) 5mg/ml (用O. 9%的生理鹽水配制)，每孔加入20 μ 1，37°C，5% CO2孵育4小時后吸去培養(yǎng)基及MTT，每孔加入DMSO100 μ I并通過酶標(biāo)儀讀取0D570-0D630的吸光度值(表I)。表 I
權(quán)利要求
1.一種人miR-504的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述反義寡聚核苷酸包含與下述核苷酸序列中13 22個連續(xù)的核苷酸互補的序列5’ -AGACCCUGGUCUGCACUCUAUC-3’。
2.如權(quán)利要求I所述的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述反義寡聚核苷酸序列為5， -GAUAGA⑶GCAGACCAGG⑶CU-3，。
3.如權(quán)利要求I所述的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述反義寡聚核苷酸為核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸或者核糖核苷酸與脫氧核糖核苷酸的嵌合體。
4.如權(quán)利要求I 3中任一項所述的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述反義寡聚核苷酸進一步被修飾。
5.如權(quán)利要求4所述的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述修飾選自核糖修飾、堿基修飾和磷酸骨架修飾中的一種或幾種。
6.如權(quán)利要求5所述的反義寡聚核苷酸，其特征在于，所述修飾選自硫代修飾、2’-甲氧基修飾和膽固醇修飾中的一種或幾種。
7.如權(quán)利要求I 3中任一項所述的反義寡聚核苷酸在用于制備治療miR-504過度表達的相關(guān)疾病的藥物中的用途。
8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述反義寡聚核苷酸與其他治療藥物聯(lián)合施用。
9.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述miR-504過度表達的相關(guān)疾病為腫瘤。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述miR-504過度表達的相關(guān)疾病為腦膠質(zhì)瘤。
11.一種藥物組合物，其特征在于，包含治療有效量的權(quán)利要求I 3中任一項所述的反義寡聚核苷酸以及藥學(xué)上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抑制人microRNA-504表達的反義寡聚核苷酸及其應(yīng)用。該反義寡聚核苷酸特異性結(jié)合于人miR-504，包含與下述核苷酸序列中13～22個連續(xù)核苷酸互補的序列5’-AGACCCUGGUCUGCACUCUAUC-3’，特別是其包含序列5’-GAUAGAGUGCAGACCAGGGUCU-3’。本發(fā)明的反義寡聚核苷酸可以為核糖核苷酸、脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸與脫氧核糖核苷酸的嵌合體，并可對鏈中任一核苷酸進行修飾。本發(fā)明的miR-504反義寡聚核苷酸能夠有效抑制人腦膠質(zhì)瘤細胞中miR-504表達，抑制其生長和增殖，從而有效治療腦膠質(zhì)瘤及其他miR-504高表達的腫瘤。
文檔編號A61P35/00GK102643813SQ20111004105
公開日2012年8月22日 申請日期2011年2月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月18日
發(fā)明者丁侃, 張佩琢, 李捷, 沈孝坤 申請人:中國科學(xué)院上海藥物研究所, 蘇州吉瑪基因藥物科技有限公司