專利名稱：一種生物殺菌滴眼液制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)用制劑領(lǐng)域，具體的說涉及ー種生物殺菌滴眼液制劑。
背景技術(shù)：
臨床常見感染性眼病，如眼結(jié)膜炎和角膜炎多以細菌性感染為主。大量的臨床病原學(xué)分析表明，革蘭氏陽性球菌，如表皮葡萄球菌金黃色葡萄球菌和微球菌等是主要致病菌；革蘭氏陰性桿菌，如銅綠假單胞菌和大腸埃希菌等次之。革蘭氏陽性菌感染的比例有逐年増高的趨勢，革蘭氏陰性桿菌呈下降趨勢。目前，細菌性眼病治療主要以抗生素滴眼液最為常用，但容易產(chǎn)生耐藥性。隨著抗生素的大量應(yīng)用，耐藥菌株也不斷増加。并且抗生素眼藥水因其副作用不宜長期使用。因此，研制新的用于治療細菌性眼病的眼用制劑就成為了研究的熱點。近幾年來，國內(nèi)外新型抗菌藥物-具有獨特殺菌活性的生物殺菌劑如溶葡萄球菌酶、溶菌酶以及抗菌肽越以及抗菌肽來越受到關(guān)注。溶葡萄球菌酶是Maphylococus Simulans葡萄球菌分泌于胞外的蛋白產(chǎn)物，分子量為27kDa，含246個氨基酸，是ー種肽鏈內(nèi)切酶，等電點為10. 4 11. 4，生理條件下帶正電荷。該酶可切斷葡萄球菌細胞壁肽聚糖中的五甘氨酸肽鍵橋結(jié)構(gòu)，從而達到迅速溶解并殺死細菌的目的。即使是耐藥性金黃色葡萄球菌，MRSA及“超級細菌”，溶葡萄球菌酶也同樣有很強的殺菌作用，而且不容易誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥菌株，且具有良好的生物相容性。溶菌酶(lysozyme)是ー類能使細菌、酰胺酵母菌或霉菌細胞壁溶解，導(dǎo)致微生物死亡的溶菌因子，等電點為10.7-11.0。革蘭氏陽性細菌細胞壁主要由肽聚糖(P^tidoglycan)等多糖和小分子肽蛋白組成，在細胞壁的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中糖苷鍵和肽鍵是其主要的連接鍵。溶菌酶可通過水解細胞壁和外膜層中肽聚糖的糖苷鍵 (N-乙酰胞壁酸C-I與N-乙酰葡萄糖胺C-4之間的β -1，4糖苷鍵、肽鍵如D-Ala與Lys間肽鍵等)和酰胺鍵(如N-乙酰壁酸與Ala間酰胺鍵等)，使細菌細胞壁網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)破壞，細胞壁溶解而死亡?？咕氖巧矬w內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的ー種具有生物活性的小分子多肽，分子量在2000 7000左右，由20 60個氨基酸殘基組成。這類活性多肽多數(shù)具有強堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點。由于傳統(tǒng)的眼用制劑存在一些明顯的缺點如藥物在眼部病變部位停留時間短， 吸收欠佳，需要頻繁給藥等。因此如何提高生物殺菌劑在眼部吸收，改善其治療指數(shù)，減少其不良反應(yīng)，是本發(fā)明需要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種在眼部滯留時間長，殺菌效能強的生物殺菌滴眼液制劑。本發(fā)明的構(gòu)思是這樣的微球或納米粒為載體的眼部給藥系統(tǒng)與傳統(tǒng)的滴眼液相比，可顯著提高藥物在眼部的生物利用度。另外，透明質(zhì)酸、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、硫酸軟骨素等具有生物黏附特性的聚合物可與結(jié)膜黏蛋白結(jié)合，延長藥物粒子在角膜前區(qū)的滯留時間。本發(fā)明中的生物殺菌劑(溶葡萄球菌酶、溶菌酶和抗菌肽)為ー種堿性蛋白質(zhì)或多肽，在體內(nèi)近于中性的PH 環(huán)境下帯有大量正電荷，可與帶負電荷的生物黏附材料經(jīng)正負電荷相互作用形成納米?；蛭⒘＃僧a(chǎn)生藥效的疊加效應(yīng)從而提高生物酶在眼部的殺菌效力。本發(fā)明的技術(shù)方案如下ー種生物殺菌滴眼液制劑，以重量百分比計，其組分包括生物殺菌成分 0. 0001 ；負電荷生物黏附材料0. 001 10%，抑菌劑0 0.4%，緩沖液余量。所述的生物殺菌劑為溶菌酶、溶葡萄球菌酶及抗菌肽中的ー種或以上。所述的負電荷生物黏附材料為透明質(zhì)酸鈉、硫酸葡聚糖、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、硫酸軟骨素、海藻酸鈉中的ー種或以上。所述的抑菌劑為洗必泰、三氯叔丁醇、苯氧乙醇ー種或以上。所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、吉斐氏緩沖液、醋酸鈉-硼酸緩沖液中的ー種。
具體實施例方式實施例1抗菌肽-硫酸軟骨素滴眼液的制備取抗菌肽12mg加Iml水溶解，0. 22 μ m濾膜過濾除菌。取硫酸軟骨素0. Ig加Iml 水溶解，0. 22 μ m濾膜過濾除菌。將過濾后的抗菌肽溶液和硫酸軟骨素溶液混合攪拌，以磷酸鹽緩沖液(PH 6. 5)稀釋1000倍，即得抗菌肽-硫酸軟骨素滴眼液。實施例2溶菌酶-透明質(zhì)酸鈉滴眼液的制備取溶菌酶120mg加Iml水溶解，0. 22 μ m濾膜過濾除菌。取透明質(zhì)酸鈉0. Ig加Iml 水溶解，0. 22 μ m濾膜過濾除菌。將過濾后的溶菌酶溶液和透明質(zhì)酸鈉溶液混合攪拌，以硼酸鹽緩沖液(PH 7. 4)稀釋1000倍，即得溶菌酶-透明質(zhì)酸鈉滴眼液。實施例3溶葡萄球菌酶-硫酸葡聚糖滴眼液的制備取溶葡萄球菌酶120mg加Iml水溶解，0. 22 μ m濾膜過濾除菌。取硫酸葡聚糖Ig 加Iml水溶解，0. 22μπι濾膜過濾除菌。將過濾后的溶葡萄球菌酶溶液和海藻酸鈉溶液混合攪拌，以醋酸鈉-硼酸緩沖液(PH 7.4)稀釋1000倍，即得溶葡萄球菌酶-硫酸葡聚糖滴眼液。實施例4抗菌肽-硫酸軟骨素滴眼液對金黃色葡萄球菌的殺菌作用在人工淚液中抗菌肽-硫酸軟骨素滴眼液與金黃色葡萄球菌(ATCC43300)耐藥菌株作用IOmin后，涂板計數(shù)，其殺菌率為99.9%。
權(quán)利要求
1.ー種生物殺菌滴眼液制劑，其特征在干，以重量百分比計，其組成包括生物殺菌成分 0. 0001 1%，負電荷生物黏附材料0. 001 10%，抑菌劑0 0.4%，緩沖液余量。
2.所述的生物殺菌劑為溶菌酶、溶葡萄球菌酶及抗菌肽中的ー種或以上。
3.如權(quán)利要求1所述的生物殺菌滴眼液制劑，其特征在干，所述的負電荷生物黏附材料為透明質(zhì)酸鈉、硫酸葡聚糖、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、硫酸軟骨素、海藻酸鈉中的ー種或以上。
4.如權(quán)利要求2所述的生物殺菌滴眼液制劑，其特征在干，所述的抑菌劑為洗必泰、三氯叔丁醇、苯氧乙醇ー種或以上。
5.如權(quán)利要求1所述的生物殺菌滴眼液制劑，其特征在干，所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、吉斐氏緩沖液、醋酸鈉-硼酸緩沖液中的ー種。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)用制劑領(lǐng)域，具體的說涉及一種生物殺菌滴眼液制劑。本發(fā)明公開的制劑組成及其重量百分含量包括生物殺菌成分0.0001～1％；負電荷生物黏附材料0.001～10％，緩沖液0.001～10％。本發(fā)明公開的殺菌滴眼液制劑與傳統(tǒng)的滴眼液相比，可顯著提高藥物在眼部的生物利用度，提高生物殺菌成分在眼部的殺菌效力。
文檔編號A61P31/04GK102552889SQ20101061670
公開日2012年7月11日 申請日期2010年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月27日
發(fā)明者崔福英, 蔣司嘉, 陸婉英, 黃青山 申請人:上海高科生物工程有限公司, 上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司, 昆山博青生物科技有限公司