專利名稱：以土大黃提取物為有效成份的抗焦慮藥物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種以傳統(tǒng)中藥土大黃為主要有效成份 制備的藥物制劑或保健食品，其制備方法及其在抗焦慮藥物和食品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
焦慮癥同抑郁癥一樣是一類嚴(yán)重危害人們生活質(zhì)量的精神系統(tǒng)疾病，且影響面較 抑郁癥更加廣泛。焦慮癥的發(fā)生與社會節(jié)奏加快、競爭更加激烈明顯相關(guān)，因此隨著社會發(fā) 展，焦慮癥的發(fā)病率在提高。據(jù)統(tǒng)計，我國城市人口中焦慮癥的發(fā)病率約為1_2%，而發(fā)達(dá) 國家近10%，且仍呈增長趨勢。據(jù)Decision Resources的一項(xiàng)最新研究，目前世界7個主 要醫(yī)藥市場(美國，法國，德國，意大利，西班牙，英國和日本)上有8700多萬焦慮癥病人。 公眾對焦慮癥，包括廣泛性焦慮癥、驚恐癥、強(qiáng)迫癥、社交焦慮癥和恐怖癥的認(rèn)識日益提高， 且敢于面對焦慮而不回避，加上醫(yī)學(xué)診斷水平的提高，將促進(jìn)對焦慮癥的診斷、治療和這一 市場藥物的使用。目前臨床應(yīng)用的抗焦慮藥種類繁多，概括起來主要有(1)苯二氮卓類藥 物(BDZs)，該類藥物的優(yōu)點(diǎn)是起效快(1-2周)，能迅速緩解軀體性焦慮，而且療效肯定，但 也有過度鎮(zhèn)靜、協(xié)調(diào)功能減退、警覺性下降和認(rèn)知功能損害等缺點(diǎn)，長期使用容易成癮。(2) 選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑，如氟西汀，該類藥物通過降低突觸前自身受體敏感性，減 少對5-HT神經(jīng)元的抑制，增加5-HT釋放及阻斷5-HT回吸收，提高突觸間隙內(nèi)5-HT水平， 從而治療焦慮癥。但該類藥物主要缺點(diǎn)是起效慢，達(dá)到最大療效所需時間較長。(3)單胺 氧化酶抑制劑，包括可逆性單胺氧化酶抑制劑和不可逆性單胺氧化酶抑制劑。該類藥物副 反應(yīng)發(fā)生率較高，比如性欲減退、早泄、眩暈、失眠、便秘、尿潴留等。(4)腎上腺素受體阻滯 劑，這類藥物可以選擇性的阻斷β受體，從而減輕心悸、臉紅、出汗等癥狀。被用于減輕局 限性社交焦慮障礙患者中與表現(xiàn)場合(例如公眾演講，音樂演奏等)相關(guān)的生理癥狀，局限 性較大，并且對有支氣管哮喘者、心力衰竭者以及糖尿病者均有使用禁忌。(5)阿扎哌隆類， 屬非BDZs抗焦慮藥，如丁螺環(huán)酮、坦度螺酮、伊沙毗隆和吉毗隆等。鹽酸丁螺環(huán)酮能夠激動 海馬和杏仁核突觸后膜的5-ΗΤ1Α受體，從而產(chǎn)生抗焦慮作用。丁螺環(huán)酮與苯二氮卓類抗焦 慮藥也一樣都具有良好的療效，而且鹽酸丁螺環(huán)酮不良反應(yīng)發(fā)生率明顯小于苯二氮卓類抗 焦慮藥，長期使用也無明顯的依賴性。但是就目前對本藥的研究結(jié)果看，大都是關(guān)于本藥對 廣泛性焦慮障礙的研究，而對于本藥對于社交焦慮障礙的研究資料尚不充分，有待于進(jìn)一 步研究總結(jié)。(6)抗驚厥藥，這類藥物大都具有較強(qiáng)的穩(wěn)定情緒的作用，臨床常被作為心境 穩(wěn)定劑用來治療躁狂及預(yù)防復(fù)發(fā)等。有報導(dǎo)抗癲癇藥加巴噴丁、拉莫三嗪對社交焦慮障礙 的療效優(yōu)于安慰劑，但這方面資料有限，療效尚不肯定，故沒有足夠證據(jù)證明該類藥物在社 交焦慮障礙的治療中能發(fā)揮作用。焦慮癥的普遍性與現(xiàn)有藥物的局限性形成明顯對比，因 此臨床上迫切需要研發(fā)療效高、毒副作用少的新型抗焦慮藥物。由于精神系統(tǒng)疾病的市場需求增加，抗焦慮藥物成為世界多個制藥公司的關(guān) 注。研發(fā)中所關(guān)注的主要靶點(diǎn)集中在Y-氨基丁酸受體(Y-GABA)、外周苯二氮卓受體、
35-HT受體、神經(jīng)類固醇、膽囊收縮素受體(CCKB)、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子受體(CFR)、 組胺H受體、NMDA受體和膽堿能離子通道等幾個方面。已有的研究表明以這些靶點(diǎn)為模 型用來發(fā)現(xiàn)和開發(fā)抗焦慮劑是可以成功的。理想的抗焦慮劑應(yīng)該是發(fā)現(xiàn)與這些焦慮靶點(diǎn) 相關(guān)的高選擇性配體?？菇箲]的動物模型多種多樣，但主要分為兩大類條件反應(yīng)性實(shí)驗(yàn) (conditionedresponse tests)禾口非條件反應(yīng)性實(shí)驗(yàn)(unconditioned responsetests)， 前者包括沖突實(shí)驗(yàn)和其他條件反應(yīng)性實(shí)驗(yàn)，測試動物在某些實(shí)驗(yàn)條件下的誘發(fā)行為；后者 種類較多，包括探究實(shí)驗(yàn)、群體實(shí)驗(yàn)、抗天敵實(shí)驗(yàn)和其他非條件反應(yīng)性實(shí)驗(yàn)，測試動物自發(fā) 的、本能的行為。高架十字迷宮是基于動物自發(fā)的、本能的探究實(shí)驗(yàn)，Vogel飲水沖突實(shí)驗(yàn) 是Vogel等人1971年在大鼠飲水動機(jī)與它同時所遭受的足電擊懲罰使大鼠處在沖突狀態(tài) 的一種簡便、快速條件反應(yīng)性實(shí)驗(yàn)。因?yàn)榻箲]的發(fā)病與緊張、恐懼等精神因素密切相關(guān)，而 上述兩種實(shí)驗(yàn)分別代表了抗焦慮實(shí)驗(yàn)非條件反應(yīng)和條件反應(yīng)性兩大類模型，并且不需要長 期訓(xùn)練動物，加上對抗焦慮藥物特異性好，因此上述模型成為發(fā)現(xiàn)抗焦慮藥物的經(jīng)典模型， 因此在篩選抗焦慮藥物研究中被廣泛采用。中醫(yī)藥自古有安神劑、定驚藥、補(bǔ)陽藥、補(bǔ)腎藥、理氣藥等，這些藥物的功效與焦慮 癥的發(fā)病病因有相似之處，因此某些安神劑等在臨床上治療焦慮癥是有效的。也因此借鑒 中醫(yī)藥智慧，從中尋找有效的抗焦慮藥物是可能的。酸模屬為蓼科一個大屬，我國該屬植物 資源極為豐富，羊蹄Rumex japonicus Houtt.、皺葉酸模Rumex crispusL.、巴天酸模Rumex patientia L.、尼泊爾酸?；蚺６簏SRumexn印alensis Spreng均稱為土大黃，它們含有 共性的化學(xué)成分如蒽醌、二苯乙烯和萘類等。尼泊爾酸模在我國民間以止血和治療疥癬著 稱，沿用已久。日本學(xué)者小谷功等從其根中分得酸模素，該化合物具有較強(qiáng)的抗真菌作用和 抗氧化作用。迄今為止，未發(fā)現(xiàn)關(guān)于尼泊爾酸模提取物具有抗焦慮作用的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗焦慮藥物或保健食品、其制備方法和以土大黃提取 物為主要有效成份制成的片劑、膠囊劑等口服劑型；另一目的在于提供其提取物在制備抗 焦慮藥物組合物或保健食品中的應(yīng)用。本發(fā)明的上述目的是通過下述的技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的土大黃提取物，由下述方法提取而得乙醇提取取土大黃，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、溫浸提取或加熱回流提取，過濾取 濾液，回收乙醇并濃縮得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙醇濃度10 95%， 乙醇加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2 10倍，冷浸時間1 10天；溫浸時間1 2小時，溫 度40 60°C，提取1 3次；所述加熱回流提取是每次提取20分鐘 4小時，提取1 3 次；水提取取土大黃，干燥、粉碎，用水冷浸、溫浸提取或加熱煎煮提取，過濾取濾液， 濃縮得浸膏；其中，所述水冷浸、溫浸提取是采用水的加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2 10 倍，冷浸時間1 10天；溫浸時間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；所述加熱煎 煮提取是每次加熱20分鐘 4小時，提取1 3次；正丁醇提取由上述步驟的乙醇或水提取物濃縮后用水適當(dāng)稀釋，用等體積的乙 酸乙酯萃取1 6次，水層用正丁醇萃取1 6次，并濃縮得正丁醇浸膏。
土大黃大孔樹脂洗脫物，用下述方法制成權(quán)利要求1所述的乙醇或水提取物濃 縮后用DlOl大孔樹脂吸附，然后用水，30%，50%，70%乙醇依次洗脫，每個梯度溶劑用量 為3個柱體積，收集50%乙醇洗脫部分。所述的土大黃提取物，其中乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙醇濃度70 95%，乙醇 加入量為土大黃藥材質(zhì)量的5 8倍，冷浸時間5 8天；溫浸時間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；加熱回流提取是每次提取20分鐘 2小時，提取3次。土大黃提取物的制備方法，包括下述步驟乙醇提取取土大黃，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、溫浸提取或加熱回流提取，過濾取 濾液，回收乙醇并濃縮得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙醇濃度70 95%， 乙醇加入量為土大黃藥材質(zhì)量的5 8倍，冷浸時間5 8天；溫浸時間1 2小時，溫度 40 60°C，提取1 3次；所述加熱回流提取是每次提取20分鐘 2小時，提取3次；水提取取土大黃，干燥、粉碎，用水冷浸、溫浸提取或加熱煎煮提取，過濾取濾液， 濃縮得浸膏；其中，所述水冷浸、溫浸提取是采用水的加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2 10 倍，冷浸時間1 10天；溫浸時間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；所述加熱煎 煮提取是每次加熱20分鐘 4小時，提取1 3次；正丁醇提取由上述步驟的乙醇或水提取物濃縮后用水適當(dāng)稀釋，用等體積的乙 酸乙酯萃取1 6次，水層用正丁醇萃取1 6次，并濃縮得正丁醇浸膏。上述方法中所用的土大黃為酸模屬Rumex植物。優(yōu)選尼泊爾酸模Rumex nepalensis 植物。抗焦慮藥物組合物，其中含有治療有效量的上述的土大黃提取物或洗脫物和藥學(xué) 上可接受的載體。保健食品，其中含有土大黃提取物或洗脫物和食品常用添加劑。土大黃提取物或洗脫物在制備抗焦慮藥物中的應(yīng)用。
土大黃提取物或洗脫物在制備抗焦慮保健食品中的應(yīng)用。本發(fā)明采用的土大黃為尼泊爾酸模Rumex nepalensis Spreng，屬蓼科酸模屬植 物。尼泊爾酸模在我國分布較廣，資源量極為豐富。本發(fā)明對其提取物和部位進(jìn)行了抗焦 慮研究。動物藥效學(xué)研究證明了尼泊爾酸模具有明確的藥效。同時對其萃取部位包括石油 醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位進(jìn)行了 NMDA受體拮抗活性的篩選，發(fā)現(xiàn)正丁醇部位活性最 好。因此尼泊爾酸?？菇箲]的作用機(jī)理基本是和NMDA受體拮抗活性相關(guān)。本發(fā)明的土大 黃提取物，其提取物中的化學(xué)成分特征為主要成分為萘類衍生物，而最大程度上避免了具 有泄瀉作用的蒽醌類成分的存在。本發(fā)明提取物所采用的制備方法其特征之一在于有效成份中所含有的化學(xué)成分 包括萘類結(jié)構(gòu)類似物，因此以萘類化合物為參照法，也可采用其它手段富集到總萘類有效 部位。本發(fā)明提取物可以單獨(dú)直接應(yīng)用，可以相互組合應(yīng)用，也可以與其它藥物包括植 物提取物組成復(fù)方的形式使用，可以使用不同的藥用輔料，制成多種固體制劑或液體制劑。 將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明的藥物可經(jīng)口服形式給藥。 使用量可根據(jù)給藥途徑、患者的年齡、體重、所治療疾病的類型和嚴(yán)重程度等變化進(jìn)行一次 或多次使用。
具體實(shí)施例方式下面用本發(fā)明的實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此來限定本 發(fā)明。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。實(shí)施例1 將干燥的土大黃(尼泊爾酸模Rumex nepalensis Spreng)粉碎成粉，稱取IOOOg 置于容器內(nèi)，用95%乙醇回流提取3次，每次40分鐘，每次6倍體積乙醇，過濾取濾液，回收 乙醇并減壓濃縮得干燥浸膏450g。實(shí)施例2 將干燥的土大黃(尼泊爾酸模Rumex nepalensis Spreng)粉碎成粉，稱取500g 取置于容器內(nèi)，用8倍水加熱煎煮提取2次，每次1小時，過濾取濾液，減壓濃縮得干燥浸膏 160g。實(shí)施例3 取實(shí)施例1中乙醇提取物150g，用適量水(SOOmL)混懸，依次用等體積的石油醚、 乙酸乙酯和正丁醇各萃取3次，減壓濃縮得正丁醇干燥萃取物60g。實(shí)施例4 取實(shí)施例1中乙醇提取物150g，用適量水(SOOmL)混懸，將樣品上柱體積規(guī)格為 8. 5cmX110cm(i.d.)的DlOl大孔樹脂柱，依次用水、30%、50 %、70%乙醇洗脫，每個梯度 溶劑用量為3個柱體積。收集50%乙醇洗脫部位，減壓濃縮得干燥浸膏為21g。實(shí)施例5 將干燥的土大黃(尼泊爾酸模Rumex nepalensis Spreng)粉碎成粉，稱取IOOOg 置于容器內(nèi)，用土大黃8倍體積75 %乙醇冷浸5天，過濾取濾液，減壓濃縮得干燥浸膏 370g。實(shí)施例6 將干燥土大黃(尼泊爾酸模Rumex nepalensis Spreng)粉碎成粉，稱取IOOOg置 于容器內(nèi)，用土大黃7倍體積85%乙醇溫浸，每次2小時，溫度50°C，提取3次，過濾取濾液， 減壓濃縮得干燥浸膏420g。實(shí)施例7 片劑取實(shí)施例1 6的方法制得的提取物為活性成分50mg、乳糖140mg、淀粉 55mg、硬脂酸鎂5mg。制備方法將活性成分、乳糖和淀粉混合，用水均勻濕潤，把濕潤后的混合物過篩 并干燥，再過篩，加入硬脂酸鎂，然后將混合物壓片，每片重250mg，活性成分含量為50mg。實(shí)施例8:膠囊劑取實(shí)施例1 6的方法制得的提取物為活性成分50mg、乳糖147mg、硬脂 酸鎂3mg。制備方法將活性成分與助劑混合，過篩，均勻混合，把得到的混合物裝入硬明膠 膠囊，每個膠囊重200mg，活性成分含量為50mg。實(shí)施例9 取實(shí)施例1 6的方法制得的提取物1份，20份聚合度為300的醋酸乙烯酯樹脂，2份鄰苯二甲酸丁酯，3份巴西棕蠟和20份麥芽糖，在捏機(jī)中于50°C混合3分鐘，再加入50 份砂糖，1份薄荷，混煉均勻后在50°C恒溫下，從擠出機(jī)中擠出口香糖，切割成規(guī)定厚度。實(shí)施例10 本發(fā)明提取物及其與藥用輔料組成的藥物或保健品組合物的抗焦慮作用小鼠高 架十字迷宮。(1)實(shí)驗(yàn)原理嚙齒類動物有探究新環(huán)境的特性，但又厭惡強(qiáng)光和開闊地。1985年 Pellow等人根據(jù)這一特性設(shè)計了高架十字迷宮，并漆成黑色。它包括兩個50cmX IOcm的相 對開臂(open arms)和兩個50cmX IOcmX 40cm的相對閉臂(closed arms)，閉臂上部是敞 開的。迷宮中央有一 IOcmXlOcm的開闊部，迷宮離地面50cm，以增加動物進(jìn)入開臂時的恐 懼?？菇箲]劑增加開臂探究活動，致焦慮劑則相反。高架十字迷宮是篩選抗焦慮劑的經(jīng)典 模型。(2)實(shí)驗(yàn)方法小鼠每天稱重，撫摸1分鐘，連續(xù)3天。隨機(jī)分組，正常組、藥物組 和陽性對照組，正常灌胃給藥，每天一次，連續(xù)5天，給藥組設(shè)低、中、高3個劑量，分別給予 各受試樣品，地西泮作為陽性對照藥(4mg/kg)，正常組給等劑量生理鹽水。末次給藥30分 鐘后，將小鼠置于迷宮中央開闊部，頭朝閉臂。啟動攝像監(jiān)視系統(tǒng)，記錄5分鐘內(nèi)小鼠進(jìn)入 開臂和閉臂的次數(shù)以及在兩臂停留的時間。(進(jìn)出臂標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)嚴(yán)格界定，以四肢全部入臂或兩 只前爪出臂為準(zhǔn))。計算小鼠進(jìn)入開臂的次數(shù)和時間分別占總次數(shù)(兩臂次數(shù)之和)和總 時間(在兩臂滯留時間之和)的百分比。以此作為評價焦慮的指標(biāo)。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果開臂次數(shù)和開臂滯留時間分別占總次數(shù)(兩臂次數(shù)之和)和總 時間(在兩臂滯留時間之和)的百分比如下表所示，由實(shí)施例1所得的乙醇提取物為 TDH-EtOH ；實(shí)施例3所得的正丁醇萃取部位為TDH-BuOH ；實(shí)施例4所得的大孔樹脂洗脫部 位為 TDH-DlOl。TDH-EtOH小鼠高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)(X士S)
組別η劑量 (mg/kg)入幵臂時間占兩臂滯 留總時間百分比(％)入開臂次數(shù)占入兩臂 總次數(shù)百分比(％)正常組12010±1021 士 14低劑量組1210028±16*27±11中劑量組1220032 土 2(Γ34士12*高劑量組1240026 士 1939士12"地西泮12456±24**52±17"**P < 0. 01，*P < 0. 05vs 正常組TDH-BuOH小鼠高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)(X士S)
權(quán)利要求
土大黃提取物，由下述方法提取而得乙醇提取取土大黃，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、溫浸提取或加熱回流提取，過濾取濾液，回收乙醇并濃縮得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙醇濃度10～95％，乙醇加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2～10倍，冷浸時間1～10天；溫浸時間1～2小時，溫度40～60℃，提取1～3次；所述加熱回流提取是每次提取20分鐘～4小時，提取1～3次；水提取取土大黃，干燥、粉碎，用水冷浸、溫浸提取或加熱煎煮提取，過濾取濾液，濃縮得浸膏；其中，所述水冷浸、溫浸提取是采用水的加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2～10倍，冷浸時間1～10天；溫浸時間1～2小時，溫度40～60℃，提取1～3次；所述加熱煎煮提取是每次加熱20分鐘～4小時，提取1～3次；正丁醇提取由上述步驟的乙醇或水提取物濃縮后用水適當(dāng)稀釋，用等體積的乙酸乙酯萃取1～6次，水層用正丁醇萃取1～6次，并濃縮得正丁醇浸膏。
2.土大黃大孔樹脂洗脫物，其特征在于它是用下述方法制成權(quán)利要求1所述的乙醇 或水提取物濃縮后用DlOl大孔樹脂吸附，然后用水，30%，50%，70%乙醇依次洗脫，每個 梯度溶劑用量為3個柱體積，收集50%乙醇洗脫部分。
3.如權(quán)利要求1所述的土大黃提取物，其特征在于所述乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙 醇濃度70 95%，乙醇加入量為土大黃藥材質(zhì)量的5 8倍，冷浸時間5 8天；溫浸時 間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；所述加熱回流提取是每次提取20分鐘 2 小時，提取3次。
4.土大黃提取物的制備方法，包括乙醇提取取土大黃，干燥、粉碎，用乙醇冷浸、溫浸提取或加熱回流提取，過濾取濾液， 回收乙醇并濃縮得浸膏；其中，所述乙醇冷浸、溫浸提取是采用乙醇濃度70 95%，乙醇加 入量為土大黃藥材質(zhì)量的5 8倍，冷浸時間5 8天；溫浸時間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；所述加熱回流提取是每次提取20分鐘 2小時，提取3次；水提取取土大黃，干燥、粉碎，用水冷浸、溫浸提取或加熱煎煮提取，過濾取濾液，濃縮 得浸膏；其中，所述水冷浸、溫浸提取是采用水的加入量為土大黃藥材質(zhì)量的2 10倍， 冷浸時間1 10天；溫浸時間1 2小時，溫度40 60°C，提取1 3次；所述加熱煎煮 提取是每次加熱20分鐘 4小時，提取1 3次；正丁醇提取由上述步驟的乙醇或水提取物濃縮后用水適當(dāng)稀釋，用等體積的乙酸乙 酯萃取1 6次，水層用正丁醇萃取1 6次，并濃縮得正丁醇浸膏。
5.如權(quán)利要求1或2所述的提取物或洗脫物，所用的土大黃為酸模屬Rumex植物。
6.如權(quán)利要求1或2所述的土大黃提取物或洗脫物，所用的土大黃為為尼泊爾酸模 Rumex nepalensis 植物。
7.抗焦慮藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1 2的土大黃提取物或洗脫 物和藥學(xué)上可接受的載體。
8.保健食品，其中含有權(quán)利要求1 2的土大黃提取物或洗脫物和食品常用添加劑。
9.權(quán)利要求1 2中土大黃提取物或洗脫物在制備抗焦慮藥物中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1 2中土大黃提取物或洗脫物在制備抗焦慮保健食品中的應(yīng)用。全文摘要
以土大黃提取物或有效部位為主要有效成份制備的藥物，以中藥材土大黃為主要有效成份制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液等口服給藥劑型，可加入其它成份和輔料組成復(fù)方制劑，具有顯著的抗焦慮效果，可用于焦慮癥的保健和治療。此外，還提供以土大黃提取物和食品添加劑組合成的保健食品，藥物和食品的制備方法。
文檔編號A61K36/70GK101972310SQ20101050621
公開日2011年2月16日 申請日期2010年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月14日
發(fā)明者梅任強(qiáng), 程永現(xiàn), 趙君, 陳小亮 申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所