專利名稱：三葉豆苷的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開了野馬追中三葉豆苷作為唯一活性成分制備治療高血脂疾病藥物的 用途，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
野馬追是多年生草本植物，菊科澤蘭屬，可以全草入藥.所含主要成分為黃酮類、 生物堿、揮發(fā)油、香豆精等，傳統(tǒng)上用于清肺止咳平喘抗病毒等功效，在臨床上有廣泛運(yùn)用.野馬追中含有大量不同的化學(xué)組分，野馬追中黃酮類成分的研究(錢士輝等，中 國中藥雜志，2004. 1)報(bào)道了野馬追中含有黃芪苷、棕矢車菊素、山奈酚、槲皮素、三葉豆苷、 金絲桃苷，野馬追對(duì)大小鼠實(shí)驗(yàn)性高血脂癥的防治作用(周遠(yuǎn)大等，中國藥房，2007. 18.3) 報(bào)道了野馬追在治療高血脂病癥方面具有一定的療效。中國專利申請(qǐng)2006100009181公開 了野馬追在治療高血脂疾病中的應(yīng)用。盡管現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)對(duì)野馬追治療高血脂的功效展開了研究，但是其中所含的三 葉豆苷治療高血脂或用于制備治療高血脂藥物均未見有關(guān)報(bào)道，具體的三葉豆苷的功效也 未見有深入研究.

發(fā)明內(nèi)容
申請(qǐng)人:在對(duì)野馬追的藥理活性研究過程中，發(fā)現(xiàn)將其中的三葉豆苷作為唯一活性 成分用于治療高血脂疾病具有顯著效果，相對(duì)于野馬追原料藥和總黃酮提取物具有明顯的 優(yōu)勢(shì).基于該發(fā)現(xiàn)，申請(qǐng)人將三葉豆苷用于制備治療高血脂疾病藥物的用途.進(jìn)一步的，申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)三葉豆苷應(yīng)用于降低血清膽固醇、升高血清高密度蛋白效 果尤其顯著，因此申請(qǐng)人將三葉豆苷用于制備降低血清膽固醇和升高血清高密度蛋白藥物 的用途.申請(qǐng)人:的進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)將三葉豆苷應(yīng)用于治療急性高血脂疾病具有顯著 的效果，因此本申請(qǐng)還公開了將三葉豆苷用于制備治療急性高血脂疾病藥物的用途.本發(fā)明所述用途的藥物，可以是三葉豆苷與藥學(xué)上可接受的輔料采用常規(guī)的制劑 工藝制成特定劑型，劑型不受到限制，只要是三葉豆苷可以制成的劑型即可，包括但不限于 片劑、注射劑、粉針劑、膠囊、顆粒劑。上述輔料可以是崩解劑，包括但不限于羥丙基淀粉、羥丙基纖維素、羧甲基淀粉 鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)聚維酮等；可以是填充劑，包括但不限于乳糖、蔗糖、甘露醇、微 晶纖維素、糊精、淀粉等；可以是潤濕劑或粘合劑，包括但不限于膠化淀粉、聚維酮、羧甲基 纖維素鈉等；可以是潤滑劑，包括但不限于硬脂酸鎂、微粉硅膠、聚乙二醇4000、聚乙二醇 6000 等；本發(fā)明所述用途的藥物，制劑方法不受到限制，可以是制藥領(lǐng)域任何一種可采用 的制劑工藝。本發(fā)明所述用途的藥物，可以依據(jù)其自身特點(diǎn)采用不同的給藥方法，例如可以采用口服給藥的方法，其制劑劑型可以是片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、混懸液；也可以采 用腸胃外給藥途徑，其制劑劑型可以是注射用溶液、注射用混懸液等。發(fā)明人進(jìn)行的藥理實(shí)驗(yàn)顯示，三葉豆苷具有顯著的降血脂的作用，尤其是具有極 其顯著的降低膽固醇和升高血清高密度蛋白的作用。因此本發(fā)明所述用途的藥物臨床上應(yīng) 用于治療和/或預(yù)防高血脂癥，尤其是應(yīng)用于治療和/或預(yù)防高膽固醇和低血清高密度脂 蛋白血脂癥。申請(qǐng)人:的研究顯示，三葉豆苷用于治療急性高血脂疾病具有顯著效果。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例用于說明本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)方式，并不僅限于用下述方法實(shí)施。下述實(shí)施例中三葉豆苷可以采用常規(guī)的提取方法提取野馬追獲得，也可以購買三 葉豆苷化學(xué)試劑。本發(fā)明所用的三葉豆苷采購自上海尚誼化工科技有限公司，經(jīng)檢測(cè)其純 度為99. 3%;野馬追總黃酮提取物，購于江蘇安格藥業(yè)有限公司，純度為96% .三葉豆苷含 量為31% .

葉豆苷片劑的制備 10g
實(shí)施例1 三葉豆苷
麥芽糖100g
淀粉30g
硬脂酸鎂0. 5g
羧甲基纖維素鈉30g
將三葉豆苷與麥芽糖、淀粉混合形成均勻的混合物，加入適量的水并將粉末制粒。
干燥后將顆粒過篩與其余輔料混合，然后壓片.
實(shí)施例2 三葉豆苷 淀粉
50%乙醇葉豆苷顆粒的制備 5g 20g
適量 將淀粉過100目篩，將三葉豆苷、淀粉混合均勻，乙醇加入到上述混合物中混勻， 制成顆粒.
實(shí)施例3 i
三葉豆苷
大豆油
維生素E
卵磷脂
甘油
水
葉豆苷乳劑的制備 lg 20g 0. 8g 2g
2. 5g
力口至 1000ml 將卵磷脂、甘油分散于800ml水中形成水相。 將三葉豆苷、維生素E加入到大豆油中混合均勻形成油相。 水相和油相分別預(yù)熱至70度后將油相加入到水相中，高速攪拌均勻得初乳，用高
壓勻質(zhì)機(jī)勻乳后分裝滅菌。
4
實(shí)施例4三葉豆苷混懸液的制備三葉豆苷10g羧甲基纖維素鈉5g甘油100ml蒸餾水適量將三葉豆苷置于乳缽中加入甘油研磨成細(xì)泥糊狀物；將羧甲基纖維素鈉加入 200ml水中制成膠漿，在緩慢攪拌下加入到乳缽中研勻，移入容器中加蒸餾水至全量，攪勻 可得混懸劑。實(shí)施例5 三葉豆苷注射液三葉豆苷3g亞硫酸氫鈉20g依地酸二鈉5g注射用水至1000ml將三葉豆苷、亞硫酸氫鈉、依地酸二鈉分別加入到注射用水中混合均勻，滅菌后分 裝至西林瓶。藥效學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)一材料與用品三葉豆苷、野馬追總黃酮、洛伐他汀。方法KM小鼠，雌雄各半，共70只，隨機(jī)分組為第一組模型對(duì)照組；第二組空 白對(duì)照組；第三組低劑量三葉豆苷組；第四組中劑量三葉豆苷組；第五組高劑量三葉 豆苷組；第六組洛伐他汀陽性對(duì)照組；第七組野馬追總黃酮陽性對(duì)照組。除了空白對(duì)照組外，其他各組動(dòng)物均以高血脂飲食造模將10%膽固醇、20%豬 油、2%膽鹽、丙基硫氧嘧啶、10%蔗糖等高脂材料用15%吐溫、5%丙二醇制備成乳劑。 造模小鼠上午灌服高脂乳劑0. 5ml/g，下午各自給予受試藥物0. 2mg/10g?？瞻讓?duì)照組和模 型對(duì)照組均給予蒸餾水對(duì)照，連續(xù)造模。給藥14天后，停止造模，然后連續(xù)給藥7天，停藥 次日取血，測(cè)量血清甘油三酯(TC)、血清膽固醇(TG)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)下表1的結(jié)果可以看出，小鼠造模后血清TC、TG均升高，說明造模 成功。洛伐他汀和野馬追總黃酮提取物可降低高脂模型動(dòng)物的TC，但對(duì)TG效果不顯著。三葉豆苷各給藥組均顯示出良好的降血脂作用，尤其是對(duì)TC具有顯著的降低效 果，其中中高劑量組效果尤其明顯。表1不同藥物對(duì)小鼠血清血脂的影響
5 (*p < 0.05，表示與空白組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；Δρ < 0.05、Δ Δρ < 0.01，表 示與模型組相比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物鵪鶉，雄性，體重100士 10g，共70只，隨機(jī)分為7組后飼養(yǎng)。飼料采用0.12 12 12 12 0. 004 76的比例將膽固醇、豬油、蛋黃粉、
丙基硫氧嘧啶、基礎(chǔ)飼料混合，其中每單位飼料采用的膽固醇為36g，均勻分成300份，對(duì)每 只鵪鶉按照一份/天的量喂食。按照試驗(yàn)一的方法采用下述表格中量分組造模，前四周分 別在上午造模，下午給藥；后四周均為下午給藥。檢測(cè)指標(biāo)第八周給藥結(jié)束后次日于鵪鶉前壁靜脈處取血，測(cè)定血清中TC、TG、 LDL-C(血清低密度脂蛋白)、HDL-C(血清高密度脂蛋白)含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果從下述數(shù)據(jù)可以看出，中高劑量的三葉豆苷均可以明顯降低血清膽固 醇和明顯升高血清高密度脂蛋白的含量，高劑量三葉豆苷可以明顯降低血清膽固醇和血清 低密度脂蛋白的含量.同等劑量下，三葉豆苷效果優(yōu)于野馬追總黃酮提取物。表2不同藥物對(duì)鵪鶉血清蛋白的影響 (*p < 0.05，表示與空白組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；Δρ < 0.05、ΔΔρ<0. 01表 示與模型組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)藥效學(xué)試驗(yàn)三將ICR小鼠分為六組，每組十只?？瞻讓?duì)照組、模型對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組(分別按照實(shí) 施例1的劑量分組)、陽性對(duì)照組。除空白對(duì)照組外，其余各組分別為靜脈注射TRITI0N WR-1339(400mg/kg注射量)誘導(dǎo)血脂快速升高，正常對(duì)照組注射等量蒸餾水。注射后12小 時(shí)，實(shí)驗(yàn)組分別用三葉豆苷灌胃，陽性對(duì)照組以野馬追總黃酮灌胃。注射后24小時(shí)去眼球 采血，分離血清，測(cè)定血脂指標(biāo)。測(cè)試結(jié)果如下表三不同藥物對(duì)急性高血脂的治療效果 (*p < 0.05，表示與空白對(duì)照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；Δρ < 0.05、Δρ < 0.01
表示與模型組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)
根據(jù)上述數(shù)據(jù)可以看出，野馬追總黃酮對(duì)于治療急性高血脂沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的治療 效果，而三葉豆苷則在中高劑量下有有效。
權(quán)利要求
三葉豆苷作為唯一活性成分用于制備降血脂藥物的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，所述降血脂是降低血清膽固醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，所述降血脂是降低血清甘油三酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，所述降血脂是降低血清低密度脂蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，所述降血脂是升高血清高密度脂蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，所述降血脂是降低急性高血脂。
7.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，所述降血脂藥物是以三葉豆苷為唯一活性成分，加 入藥用輔料制成的制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，所述降血脂藥物是口服制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，所述降血脂藥物是腸胃外給藥制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了三葉豆苷用于制備治療高血脂疾病藥物的用途，尤其是降低血清膽固醇和升高血清高密度蛋白藥物類型的高血脂疾病，申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)三葉豆苷具有顯著療效，同時(shí)本發(fā)明公開了三葉豆苷用于制備治療急性高血脂疾病藥物的用途，本發(fā)明還提供了用于治療所述疾病的藥物。
文檔編號(hào)A61P3/06GK101890035SQ20101022371
公開日2010年11月24日 申請(qǐng)日期2010年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月1日
發(fā)明者郝守祝 申請(qǐng)人:北京世紀(jì)博康醫(yī)藥科技有限公司