專利名稱：一種替莫唑胺凍干制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種替莫唑胺凍干制劑，屬于藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
# 貞 P坐月安(Temozolomide) ^ 由 Cancer Research Campaign ( ^ 國)/ Schering-Plough(美國)創(chuàng)制的一口服細(xì)胞毒性烷化劑抗腫瘤藥，1999年首次在13個歐 洲國家和阿根廷、新西蘭、美國、加拿大等國上市，用于治療經(jīng)常規(guī)治療后病情出現(xiàn)發(fā)展或 復(fù)發(fā)的惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤及作為已轉(zhuǎn)移的晚期黑素瘤的一線治療藥物；替莫唑胺的出現(xiàn)是治 療惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的一大進(jìn)展。替莫唑胺(Temozolomide)化學(xué)名為3，4_ 二氫_3_甲基_4_氧代咪唑[5，l_d]并 1，2，3，5_四嗪-8-甲酰胺，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為 分子式C6H6N602分子量194.15替莫唑胺的合成是公知的，例如可參見Stevens et al.，J. Med. Chem，27， 196-201(1984) ；Wang et al.，J. Chem. Soc.，Chem. Commun.，1687-1688 (1994)；蔡霞，馮光 玲等，山東醫(yī)藥工業(yè)，第1頁，22卷第4期(2003年)。替莫唑胺的溶解性為在水中微溶，在甲醇中極微溶解，在乙醇、丙酮或氯仿中幾 乎不溶。替莫唑胺具有水中溶解性差、水溶液穩(wěn)定差的缺點，給替莫唑胺注射制劑制備帶來 了很大的難度。目前公開的文獻(xiàn)報道對替莫唑胺注射制劑的研究主要有以下幾個方面1、美國專利USP6251886中公開了一種以微?；膽腋∫盒问浇o藥的替莫唑胺注 射劑，但因為該懸浮制劑容易導(dǎo)致血管堵塞，該制劑并不成功；2、中國專利CN200510014962. 3中公開了一種替莫唑胺凍干粉針劑，該制劑通過 調(diào)節(jié)PH和加熱超聲使替莫唑胺溶解，整個溶解配制過程時間長，這對替莫唑胺溶液的穩(wěn)定 性是相當(dāng)不利的，配制過程中會產(chǎn)生大量水解產(chǎn)物；另外所形成的凍干制劑復(fù)溶性差，溶液 澄清度不合格，該注射制劑的使用有質(zhì)量安全隱患；3、中國專利CN03804363中公開了一種替莫唑胺凍干粉針劑，該制劑含有替莫唑 胺，以及至少一種足以溶解替莫唑胺的增溶劑，所述增溶劑是脲、L-組氨酸、L-蘇氨酸、 L-天冬酰胺酸、L"絲氨酸、L"谷氨酰胺或它們的混合物。該凍干制劑方法雖然縮短了替 莫唑胺的溶解時間，一定程度上減少了主藥的降解，增加了替莫唑胺溶液的穩(wěn)定性；但該制 備方法存在溶解后形成的溶液易于析出固體，專利中采用將溶液放置一段時間后，再次過濾的方法來解決此問題，但此方法存在二次過濾使一部分主成分浪費、含量不穩(wěn)定、操作繁 瑣、時間長、易于染菌等諸多缺點，工業(yè)化生產(chǎn)難以實現(xiàn)和批量重復(fù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供了一種替莫唑胺凍干制劑。本發(fā)明的替莫唑胺凍干制劑，每IOOml制劑中包括替莫唑胺1 2000mg、增溶劑 1 2000mg、聚山梨酯801 2000mg、甘露醇5 5000mg、緩沖劑1 2000mg、鹽酸0. 5 IOOOmg和余量的水，其中所說的增溶劑選自L-丙氨酸、L-丙氨酸鹽酸鹽、L-亮氨酸、L-亮氨酸鹽酸 鹽、L-甲硫氨酸或L-甲硫氨酸鹽酸鹽；所說的緩沖劑選自枸櫞酸、枸櫞酸鈉或枸櫞酸鉀。本發(fā)明的替莫唑胺凍干制劑的制備方法，包括下列步驟(1)先將增溶劑、聚山梨 酯80、甘露醇、緩沖劑和鹽酸完全溶于注射用水，再將替莫唑胺溶于其中，調(diào)節(jié)PH至3.0 6. 0 ； (2)除菌過濾，灌裝，冷凍干燥形成一種凍干制劑。優(yōu)選地，除菌過濾中采用0. 22 μ m微孔濾膜或0. 22 μ m除菌濾球進(jìn)行過濾除菌。上述制備方法中，凍干過程如下(1)凍結(jié)期將裝載藥瓶的盤子放入凍干箱預(yù)凍，溫度為-50士5°C，時間為2 5 小時；(2)升華期藥品凍結(jié)后，開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)_45°C時，開啟真空系統(tǒng)， 給藥品升溫使藥品溫度保持在-20士5°C，時間至少6小時。(3)干燥期將藥品逐漸升溫至40°C，保溫真空干燥6 8小時。本發(fā)明的制劑解決了凍干制劑溶解速度慢、復(fù)溶性差、操作繁瑣、溶液澄清度不合 格的缺點，具有如下技術(shù)效果1)本發(fā)明的制劑，復(fù)溶性好，凍干制劑加水稍許振搖(1分鐘之內(nèi))，固體即全部溶 解為澄清無色；經(jīng)HPLC檢測純度和含量，純度在99. 5%以上，單雜在0. 3%以下；該制劑經(jīng) 穩(wěn)定性考察試驗，本品有關(guān)物質(zhì)和含量未見明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定；2)本發(fā)明的制劑可用于治療惡性黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、淋 巴瘤、白血病等多種疾病，解決了該類疾病患者往往由于神智不清而拖延治療時間的問題， 降低了口服制劑因劑量大引起的毒副反應(yīng)，順應(yīng)了臨床用藥習(xí)慣，減輕了患者的痛苦。
具體實施例方式下面通過實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該正確理解的是本發(fā)明的實施例中的 方法僅僅是用于說明本發(fā)明而給出，而不是對本發(fā)明的限制，所以，在本發(fā)明的方法前提下 對本發(fā)明的簡單改進(jìn)均屬本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。實施例1 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(一 )制劑組成替莫唑胺250mgL-丙氨酸500mg聚山梨酯80400mg
1.5g
500mg
410mg
加水補(bǔ)足至100ml
甘露醇 枸櫞酸鈉 鹽酸
注射用水 (二)制備方法
稱取上述重量的L-丙氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入80ml注射 用水中，攪拌約2分鐘后，固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌約8min后，固體 全部溶解澄清，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至4. 0 ；加注射用水補(bǔ)足體積至100ml， 經(jīng)0. 22 y m微孔濾膜除菌過濾，取20ml進(jìn)行室溫溶液放置試驗，其他溶液分裝于30ml西林 瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一種凍干制劑。凍干過程如下(1)凍結(jié)將裝載藥瓶的盤子放入凍干箱預(yù)凍，溫度為_45°C，時間為2小時；(2)升華藥品凍結(jié)后，開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)_45°C時，開啟真空系統(tǒng)，給 藥品升溫使藥品溫度保持在-20士5°C，時間6小時。(3)干燥將藥品逐漸升溫至40°C，保溫真空干燥6小時。最后經(jīng)壓塞，關(guān)機(jī)，放入 濾過無菌空氣出箱。對照例1 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(參照中國專利CN2005100146962. 3方 法制備)(一 )制劑組成替莫唑胺凍干支撐劑(氯化鈉)PH調(diào)節(jié)劑(鹽酸)注射用水( 二)制備方法稱取氯化鈉5g，加入注射用水80ml，室溫下攪拌至溶解，加入替莫唑胺400mg， 40°C水浴攪拌至替莫唑胺完全溶解，加水至100ml，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH至3.0，用0. 22 y m微 孔濾膜過濾除菌，分裝，凍干；凍干操作同實施例1。對照例2 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(參照中國專利CN03804363. 7方法制
0. 01 2g 1 20g 適量 加水補(bǔ)足至100ml(一)制劑組成
替莫唑胺250mg
L-蘇氨酸400mg
聚山梨酯80300mg
甘露醇1.5g
枸櫞酸鈉588mg
濃鹽酸389mg
注射用水加水補(bǔ)足至100ml
(二)制備方法
稱取處方量的L-蘇氨酉1、聚山梨酯80、甘露醇、
、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入80ml注射用
5水中，攪拌約5分鐘后，固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌直至固體全部溶 解澄清，加注射用水補(bǔ)足體積至IOOml，攪拌混合均勻，經(jīng)0. 22 μ m微孔濾膜除菌過濾，溶液 放置8小時，再次通過0. 22 μ m微孔濾膜除菌過濾，將溶液分裝于西林瓶中，每支分裝IOml 溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一種凍干制劑。
凍干過程同實施例1。實施例2 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(一 )組成替莫唑胺IOOmgL-丙氨酸鹽酸鹽IOOmg聚山梨酯80IOOmg甘露醇0. 5g枸櫞酸鉀IOOmg鹽酸50mg注射用水加水補(bǔ)足至IOOml(二)制備方法稱取上述重量的L-丙氨酸鹽酸鹽、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入 80ml注射用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部 溶解澄清，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至6.0 ；加注射用水補(bǔ)足體積至100ml，經(jīng) 0. 22 μ m微孔濾膜除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝IOml溶液，放入凍干箱，冷凍 干燥形成一種凍干制劑。凍干過程如實施例1。實施例3 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(一)組成替莫唑胺IgL-亮氨酸鹽酸鹽800mg聚山梨酯80600mg甘露醇2g枸櫞酸700mg鹽酸300mg注射用水加水補(bǔ)足至IOOml( 二)制備方法稱取上述重量的L-亮氨酸鹽酸鹽、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸、鹽酸，加入80ml 注射用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部溶解澄 清，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至6.0 ；加注射用水補(bǔ)足體積至100ml，經(jīng)0. 22 μ m 微孔濾膜除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝IOml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成 一種凍干制劑。凍干過程如實施例1。實施例4 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(一 )處方組成
替莫唑胺20gL-甲硫氨酸20g聚山梨酯8020g甘露醇50g枸櫞酸鈉20g鹽酸10g注射用水加水補(bǔ)足至1000ml( 二)制備方法稱取上述重量的L-甲硫氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸、鹽酸，加入800ml注射 用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部溶解澄清，用 鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至4. 5 ；加注射用水補(bǔ)足體積至1000ml，經(jīng)0. 22 y m微孔 濾膜除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一種 凍干制劑。凍干過程如實施例1。實施例5 制備注射用替莫唑胺凍干制劑(一 )處方組成名稱替莫唑胺L-亮氨酸聚山梨酯80甘露醇枸櫞酸鹽酸注射用水(二)制備方法稱取上述重量的L-亮氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入800ml注射 用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部溶解澄清，用 鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至5. 0 ；加注射用水補(bǔ)足體積至1000ml，經(jīng)0. 22 y m微孔 濾膜除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一種
凍干制劑。
凍干過程如實施例1。
實施例6 制備注射用替莫唑胺凍干制劑
(一)制劑組成
替莫唑胺10g
L-亮氨酸10g
聚山梨酯8012g
甘露醇20g
枸櫞酸8g
鹽酸5g
投料量 15g 12g 10g 30g 10g 6g
加水補(bǔ)足至1000ml
注射用水加水補(bǔ)足至1000ml(二)制備方法稱取上述重量的L-亮氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加800ml注射用 水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部溶解澄清，用鹽 酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至4. 6 ；加注射用水補(bǔ)足體積至1000ml，經(jīng)0. 22 y m微孔濾 膜除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一種凍 干制劑。
凍干過程如實施例1。 實施例7 制備注射用替莫唑胺凍干制劑 (一)制劑組成
25g
替莫唑胺 L-甲硫氨酸鹽酸鹽
60g
50g 200g 60g
50g
加水補(bǔ)足至10000ml
聚山梨酯80
甘露醇 枸櫞酸 鹽酸
注射用水 (二)制備方法
稱取上述重量的L-甲硫氨酸鹽酸鹽、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入 8000ml注射用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部 溶解澄清，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至5. 0 ；加注射用水補(bǔ)足體積至10000ml，經(jīng) 0. 22um除菌濾球除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍 干燥形成一種凍干制劑。
0134]凍干過程如實施例1。
0135]實施例8 制備注射用替莫唑胺凍干制劑
0136](一)制劑組成
0137]替莫唑胺25g
0138]L_ 丙氨酸50g 聚山梨酯80 甘露醇 枸櫞酸 鹽酸
注射用水 (二)制備方法
稱取上述重量的L-丙氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸櫞酸鈉、鹽酸，加入8000ml注 射用水中，攪拌至固體全部溶解澄清，加入處方量的替莫唑胺，攪拌至固體全部溶解澄清， 用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至4. 5 ；加注射用水補(bǔ)足體積至10000ml，經(jīng)0. 22 y m除 菌濾球除菌過濾，分裝于30ml西林瓶中，每支分裝10ml溶液，放入凍干箱，冷凍干燥形成一 種凍干制劑。凍干過程如實施例1。
0139]
0140]
0141]
0142]
0143] 0144]
0145]
40g 150g 60g 40g
加水補(bǔ)足至10000ml
實施例9考察實施例1、對照例1、對照例2的制備過程中替莫唑胺的溶解速度，配 制過程中溶液的穩(wěn)定性依照實施例1 8、對照例1、對照例2的凍干制劑制備方法，在溶液配制過程中考 察替莫唑胺固體的溶解速度，通過高效液相色譜法來檢測溶液在放置0h、lh、2h、4h、8h后 的有關(guān)物質(zhì)和澄清度變化情況；溶液澄清度檢測方法為取本品，加水制成每Iml中含替莫唑胺2. 5mg的溶液，溶 液應(yīng)澄清無色。如顯渾濁，與標(biāo)準(zhǔn)濁度液比較(中國藥典2005版二部附錄)比較。研究結(jié)果如表1所示表1實施例1 8、對照例1、對照例2的制備過程中替莫唑胺的溶解速度以及配 制過程中溶液的穩(wěn)定性對比
項時間 有關(guān) 澄清有關(guān)物澄清有關(guān)澄清有關(guān)物澄清有關(guān)物澄清 \__物質(zhì)度 質(zhì) 度 物質(zhì)度 質(zhì)度 質(zhì) 度
實施例1 8min 0.07% 澄淸 0.25% 澄清 0.26% 澄清 0.28% 澄清 0.29% 澄清 實施例2 13min 0.05% 澄清 0.23% 澄清 0.26% 澄清 0.27% 澄清 0.29% 澄清 結(jié)論從以上研究結(jié)果可知，本發(fā)明的替莫唑胺凍干制劑(實施例1)的制備過程 中，加入的增溶劑L-丙氨酸可有效的加快替莫唑胺在溶液中的溶解速度，減少配制時間和溶液的存儲時間，降低了主成分替莫唑胺的降解，有關(guān)物質(zhì)較??；另外本發(fā)明所配制的溶液 在放置過程中明顯比現(xiàn)有技術(shù)(對照例1、對照例2)的溶液穩(wěn)定性好，澄清度好，有關(guān)物質(zhì) 低，這對放大生產(chǎn)是相當(dāng)有利的，因為批量生產(chǎn)時由于批量大，往往配制的溶液需要較長的 時間才能灌裝完畢，本制備工藝解決了制備灌裝過程中析晶和澄清度不合格的問題。實施例10考察實施例1 8、對照例1、對照例2制備的凍干制劑樣品的穩(wěn)定性依照實施例1 8、對照例1、對照例2制備所得的凍干制劑樣品，該制劑進(jìn)行高溫 (40 °C )穩(wěn)定性考察試驗，本發(fā)明純度和含量檢測可參照以下標(biāo)準(zhǔn)方法照高效液相色譜法測定(中國藥典 2005年版二部附錄)。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑；0. 三乙胺溶 液(量取三乙胺1. 0ml加水至1000ml，用磷酸調(diào)pH至3. 0)-甲醇(85 15)為流動相，檢 測波長為210nm。理論板數(shù)按替莫唑胺峰計算應(yīng)不低于5000。取本品，加流動相制成每1ml中含0. 2mg的溶液作為供試品溶液；精密量取適量， 加流動相稀釋制成每1ml含0. 002mg的溶液作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件， 取對照溶液20ul注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使主峰峰高為滿量程的20 25%， 保持靈敏度不變，分別取對照溶液和供試品溶液各20ul注入液相色譜儀。記錄色譜圖至主 成分峰保留時間的2倍。供試品溶液的色譜圖上若顯雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰面積之和，不 得大于對照溶液的主峰面積(0. 6% )，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積1/2倍 (0. 2% )。取本品加流動相適量，振搖使溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置 50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取20 yl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取替莫 唑胺對照品適量，加流動相溶解并制成每1ml含lOy g的對照品溶液，同法測定。按外標(biāo)法 以峰面積計算，即得。研究結(jié)果如表2所示。表2實施例1 8、對照例1、對照例2制備的凍干制劑樣品的穩(wěn)定性實驗結(jié)果 結(jié)論從以上研究結(jié)果可知，本發(fā)明一種替莫唑胺凍干制劑(實施例1)，有關(guān)物質(zhì) 低，純度高，在放置過程中，有關(guān)物質(zhì)和含量未見明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。
權(quán)利要求
一種替莫唑胺凍干制劑，其特征在于，每100ml制劑中包括替莫唑胺1～2000mg、增溶劑1～2000mg、聚山梨酯801～2000mg、甘露醇5～5000mg、緩沖劑1～2000mg、鹽酸0.5～1000mg和余量的水，其中所說的增溶劑選自L-丙氨酸、L-丙氨酸鹽酸鹽、L-亮氨酸、L-亮氨酸鹽酸鹽、L-甲硫氨酸或L-甲硫氨酸鹽酸鹽；所說的緩沖劑選自枸櫞酸、枸櫞酸鈉或枸櫞酸鉀。
2.一種替莫唑胺凍干制劑的制備方法，其特征在于，包括下列步驟(1)先將增溶劑、 聚山梨酯80、甘露醇、緩沖劑和鹽酸完全溶于注射用水，再將替莫唑胺溶于其中，調(diào)節(jié)PH至 3. 0 6. 0 ； (2)除菌過濾，灌裝，冷凍干燥形成一種凍干制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種替莫唑胺凍干制劑的制備方法，其特征在于除菌過濾中 采用0. 22 μ m微孔濾膜或0. 22 μ m除菌濾球進(jìn)行過濾除菌。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種替莫唑胺凍干制劑，每100ml制劑中包括替莫唑胺1～2000mg、增溶劑1～2000mg、聚山梨酯801～2000mg、甘露醇5～5000mg、緩沖劑1～2000mg、鹽酸0.5～1000mg和余量的水，本發(fā)明的制劑解決了凍干制劑溶解速度慢、復(fù)溶性差、操作繁瑣、溶液澄清度不合格的缺點，具有如下技術(shù)效果本發(fā)明的制劑，復(fù)溶性好，凍干制劑加水稍許振搖，固體即全部溶解為澄清無色；經(jīng)HPLC檢測純度和含量，純度在99.5％以上，單雜在0.3％以下；該制劑經(jīng)穩(wěn)定性考察試驗，本品有關(guān)物質(zhì)和含量未見明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號A61P35/00GK101869551SQ20101021201
公開日2010年10月27日 申請日期2010年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月28日
發(fā)明者宗在偉, 李謝, 趙俊, 魏佳 申請人:江蘇奧賽康藥業(yè)有限公司