專利名稱：一種能同時富集丹參脂溶性與水溶性有效部位的提取方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種丹參的提取方法。

背景技術：
丹參(Salvia miltionrrhiza Bge)為雙子葉唇形科植物，以根入藥，主要有祛瘀止痛、活血調(diào)經(jīng)、養(yǎng)血安神之功效，被廣泛應用于心血管疾病的治療。
丹參的主要活性成分包括脂溶性的丹參酮類和水溶性的丹參酚酸類，其中丹參酮類以丹參酮IIA為代表，具有良好的抗菌消炎、抗氧化、抗腫瘤等作用；丹參酚酸類主要以丹參酚酸B為代表，具有抗血小板聚集、抗血栓形成的作用，對脂質(zhì)過氧化引起的細胞膜損傷有明顯保護作用。這兩種主要活性成分在治療心血管疾病時起協(xié)同作用，一般被制成片劑、滴丸等。
目前生產(chǎn)上丹參制劑的提取工藝部分是基于2005年版中國藥典規(guī)定的復方丹參片的制法上加以改進。如艾相平等人在每次提取前都用溶劑浸泡1小時(中國藥事，2009，23(7)694-695)；如黃琳等人則改用70％乙醇先浸泡6小時，再分別提取2次，每次2小時(中成藥，2006，28(9)1385-1387)。這些制備工藝都經(jīng)過多次提取，工藝繁瑣、耗時長。也有是用同時含有丹參酮與丹參酚酸的提取物按要求進行制劑。現(xiàn)有文獻與專利報道的丹參提取物是分別得到丹參酮與丹參酚酸固體物后再進行混合勾兌配制；而且純化工藝主要采用醇沉法、絮凝法、大孔樹脂法、溶劑萃取法、超臨界二氧化碳萃取法等一種或多種方法聯(lián)合應用分別對酚酸類與丹參酮類進行純化，這些方法成本較高、設備投入大、工藝繁瑣、生產(chǎn)周期長，常引起溶劑殘留問題，容易在純化過程中造成有效成分的破壞或損失，特別是丹參酚酸類由于性質(zhì)不穩(wěn)定、易于氧化，常在純化過程中分解。如夏炎等人先用超臨界二氧化碳萃取工藝提取丹參酮IIA后，殘渣再用水和有機溶劑的混合液提取兩次得到丹參酚酸B(公開號為CN1951953A)；如石任兵等人則先用體積分數(shù)50％～90％乙醇先提取總丹參酮，殘渣再用體積分數(shù)0～50％乙醇提取總丹酚酸，分別經(jīng)過大孔樹脂法純化后再合并(公開號為CN101073599A)。
因此，目前報道純化丹參提取物的方法均不同程度存在成本高、設備投入大、工藝繁瑣、生產(chǎn)周期長、溶劑殘留、有效成分損失等問題，均難實現(xiàn)大規(guī)模的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術存在的不足，提供一種提取效率高，能耗低，工藝簡單，能同時富集丹參脂溶性與水溶性有效部位的提取方法。
本發(fā)明的提取方法包括以下步驟 (1)將丹參藥材粉碎成細粉； (2)藥材細粉加入水，在低于25℃下攪拌提取，提取過程控制提取液pH值，過濾，棄去濾液；丹參藥材中存在三大類成分丹參多糖類，丹參酚酸類，丹參酮類。據(jù)現(xiàn)有報道，丹參藥材祛瘀止痛、活血調(diào)經(jīng)、養(yǎng)血安神的成分為酚酸類與丹參酮類，所以在丹參治療心腦血管疾病制劑中，丹參多糖一般視為雜質(zhì)成分需除去。由于丹參多糖類，丹參酚酸類均為水溶性成分，酚酸類成分在低溫酸性水溶液中受pKa值影響以酸結(jié)合態(tài)形式存在，溶解度變小，在一定時間內(nèi)丹參多糖優(yōu)先溶出，本發(fā)明利用此原理成功純化丹參活性成分； (3)殘渣加入C1～C4低級醇或C1～C4低級醇水溶液，攪拌提取，過濾，濾液濃縮； (4)濃縮液干燥，粉碎，即得提取物。
在上述提取方法中，所述步驟(1)中細粉是采用生化的方法或機械破碎而成。
在上述提取方法中，所述步驟(2)中加入的水量是藥材的1～30倍體積，在低于25℃下攪拌提取10～300min，提取過程控制提取液pH＝1～7。最佳的條件是加入的水量是藥材的2～8倍體積，在5～20℃下攪拌提取10～40min，提取1次，提取過程控制提取液pH＝2～5。
在上述提取方法中，所述步驟(2)中的控制提取液pH值的酸溶液優(yōu)選為鹽酸、磷酸、硫酸、草酸中的一種或兩種以上的混合酸。
在上述提取方法中，所述C1～C4低級醇水溶液為體積百分比50％～95％甲醇水溶液或體積百分比50％～95％乙醇水溶液。
在上述提取方法中，所述步驟(3)中提取條件為加入殘渣5～40倍體積量的溶劑攪拌提取10～300min。
在上述提取方法中，所述步驟(3)中提取條件為加入殘渣10～20倍體積量的溶劑在40～90℃下攪拌提取30～90min，提取1次。
在上述提取方法中，所述步驟(4)的提取物加入輔料或不加輔料直接制成制劑。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果 1.中藥有效成分的溶出速度與藥物粉碎程度有關，用破碎技術粉碎而成的細粉對有效成分破壞或損失少，同時又能最大限度的快速溶出有效成份。本發(fā)明采用破碎技術粉碎原藥材，增加了藥材與溶劑的接觸面積，提高了有效成分的溶出率，提高了藥物的提取效率。
2.本發(fā)明在丹參有效成分提取前采用低溫除雜法，采用水在低溫下一步到位除雜，純化方式簡單，操作時間短，不會造成純化過程中破壞或改變有效成分問題。
3.本發(fā)明采用低級醇為溶劑進行提取，能高倍富集丹參藥材中的有效成分，所得提取物中丹參酮與丹參酚酸的百分含量是原藥材的4～10倍。最大限度的保護了丹參酚酸與丹參酮的穩(wěn)定性。本發(fā)明無需其它有機溶劑，真正做到無污染、安全、綠色生產(chǎn)。
4.本發(fā)明除用到傳統(tǒng)的提取、濃縮、干燥設備外，無需其它設備，簡單可行。

具體實施例方式 以下實施例中所用的丹參藥材中丹參酚酸類、丹參酮類含量見表1。
下述醇的濃度為體積百分比濃度。
實施例1 取破碎的丹參藥材細粉1000克加入2倍體積量的水，于5℃攪拌提取10min，提取過程用鹽酸控制提取液pH在2.0～2.5，過濾，藥渣加入藥材10倍體積量的80％乙醇于60℃提取30min，過濾，濾液減壓濃縮、干燥、粉碎即得丹參提取物。
丹參酮類含量測定方法高效液相色譜法測定丹參酮中丹參酮I、丹參酮IIA、隱丹參酮含量；色譜條件參照2005版中國藥典一部52頁丹參中丹參酮含測項。
丹參酚酸類含量測定方法高效液相色譜法測定丹參酚酸中丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸、咖啡酸、丹參酚酸A、丹參酚酸B；色譜條件為流動相A(乙腈)，B(2％甲酸水)0～10min 0.7ml/min A15％，B85％10～20min 0.7～1ml/min A15～20％，B85～80％20～30min 1ml/min A20％，B80％30～40min 1ml/min A20～30％，B80～70％ 色譜柱Kromasil C185μ 結(jié)果見表1。
實施例2 同實施例1，所不同的是藥材加入藥材5倍體積量的水，于10℃攪拌提取30min。結(jié)果見表1。
實施例3 同實施例1，所不同的是藥材加入藥材8倍體積量的水，于20℃攪拌提取40min。結(jié)果見表1。
實施例4 同實施例2，所不同的是加入藥材8倍體積量的水，控制提取液pH值為磷酸，pH值控制為4.5～5.0，藥渣加入藥材20倍體積量的70％乙醇。結(jié)果見表1。
實施例5 同實施例2，所不同的是加入6倍體積量的水后于20℃攪拌提取40min，控制提取液pH值為硫酸。結(jié)果見表1。
實施例6 同實施例4，所不同的是控制提取液pH值為草酸，藥渣加入15倍體積量的70％甲醇于90℃提取90min。結(jié)果見表1。
實施例7 同實施例2，所不同的是提取過程用鹽酸控制提取液pH在2.5～3.0，藥渣加入50％的乙醇于40℃提取80min。結(jié)果見表1。
實施例8 同實施例7，所不同的是藥材加入藥材7倍體積量的水，于15℃攪拌提取40min，藥渣加入95％的乙醇提取60min。結(jié)果見表1。
實施例9 同實施例4，所不同的是pH值控制為2.2～2.7，藥渣加入80％的甲醇在60℃下提取90min。結(jié)果見表1。
實施例10 同實施例2，所不同的是提取過程控制提取液pH在3.0～3.5，藥渣加入20倍體積量的70％乙醇在85℃下提取90min。結(jié)果見表1。
實施例11 同實施例4，所不同的是提取過程控制提取液pH在3.5～4.0，藥渣加入18倍體積量的75％乙醇在85℃下提取90min。結(jié)果見表1。
實施例12 同實施例2，所不同的是藥材量為300kg。結(jié)果見表1。
實施例13 同實施例9，所不同的是藥材量為150kg。結(jié)果見表1。
表1實施例含量測定結(jié)果(單位％)
權(quán)利要求
1.一種能同時富集丹參脂溶性與水溶性有效部位的提取方法，其特征在于包括以下步驟
(1)將丹參藥材粉碎成細粉；
(2)藥材細粉加入水，在低于25℃下攪拌提取，提取過程控制提取液pH值，過濾，棄去濾液；
(3)殘渣加入C1～C4低級醇或C1～C4低級醇水溶液，攪拌提取，過濾，濾液濃縮；
(4)濃縮液干燥，粉碎，即得提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(1)中細粉是采用生化的方法或機械破碎而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(2)中，加入的水量是藥材的1～30倍體積，在低于25℃下攪拌提取10～300min，提取過程控制提取液pH＝1～7。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(2)中，加入的水量是藥材的2～8倍體積，在5～20℃下攪拌提取10～40min，提取1次，提取過程控制提取液pH＝2～5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(2)中的控制提取液pH值的酸為鹽酸、磷酸、硫酸、草酸中的一種或兩種以上的混合酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述C1～C4低級醇水溶液為體積百分比50％～95％甲醇水溶液或體積百分比50％～95％乙醇水溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(3)中提取條件為加入殘渣5～40倍體積量的C1～C4低級醇或C1～C4低級醇水溶液攪拌提取10～300min。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提取方法，其特征在于所述步驟(3)中提取條件為加入殘渣10～20倍體積量的C1～C4低級醇或C1～C4低級醇水溶液在40～90℃下攪拌提取30～90min，提取1次。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步驟(4)的提取物加入輔料或不加輔料直接制成制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種能同時富集丹參脂溶性與水溶性有效部位的提取方法，包括(1)將丹參藥材粉碎成細粉；(2)藥材細粉加入水，在低于25℃下攪拌提取，控制pH值，過濾，棄去濾液；(3)殘渣加入C1～C4的低級醇，攪拌提取，過濾，濃縮；(4)濃縮液干燥，粉碎，即得提取物。本發(fā)明采用破碎技術粉碎原藥材，增加了藥材與溶劑的接觸面積，提高了有效成分的溶出率和藥物提取效率。本發(fā)明在丹參有效成分提取前采用低溫除雜法，純化簡單，時間短，純化過程中不會破壞有效成分。本發(fā)明采用低級醇為溶劑進行提取，能高倍富集丹參藥材中的有效成分，所得提取物中丹參酮與丹參酚酸的百分含量是原藥材的4～10倍。最大限度的保護了丹參酚酸與丹參酮的穩(wěn)定性。
文檔編號A61K36/185GK101757105SQ201010117050
公開日2010年6月30日 申請日期2010年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月23日
發(fā)明者黃裕, 周珊, 李金華, 周錦珂, 葛發(fā)歡, 黃展平, 汪濤, 全一思 申請人:廣州漢方現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司