專利名稱：包含益母草堿鹽和甘草酸銨藥物制劑及在黃褐斑中用途的制作方法
專利說明包含益母草堿鹽和甘草酸銨藥物制劑及在黃褐斑中用途 發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及用于益母草堿鹽和甘草酸銨的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑。這類制劑可用于治療黃褐斑。本發(fā)明還涉及這類聯(lián)合單位劑量制劑的制備方法和這類聯(lián)合制劑在黃褐斑治療中的用途。

背景技術(shù)：
黃褐斑為臨床常見的一種獲得性色素增加性皮膚病，多表現(xiàn)為形狀不規(guī)則的淡褐色或淡黑色斑，對稱分布于額、眉、頰、鼻、上唇等顏面皮膚，因形似蝴蝶，故又名蝴蝶斑；中醫(yī)稱“面塵”、“黧黑斑”，也可發(fā)生于其它曝光部位，如手臂和背部，發(fā)展緩慢。引起黃褐斑的原因很多，主要有遺傳因素、紫外線照射、妊娠、口服避孕藥或抗癲癇藥物等。黃褐斑好發(fā)于女性，大約70％的妊娠婦女會出現(xiàn)黃褐斑。黃褐斑病程較長嚴重影響美觀，現(xiàn)已成為醫(yī)學和美容界共同面臨的難題。治療黃褐斑的機制主要與其抑制黑素細胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性，提高機體SOD活性、清除多余超氧自由基、調(diào)節(jié)微量元素含量、改善血液流變學的異常、調(diào)節(jié)機體性激素水平有密切關(guān)系。目前，西醫(yī)、西藥治療以其療程長、復發(fā)率高且長期應用易引起永久脫色及藥源性黃褐斑等毒副作用而限制了應用。近年來中醫(yī)藥對本病的治療日益顯示出優(yōu)勢。
益母草堿(Leonurine)是益母草中的主要有效活性成分，因其含量低，目前主要為人工合成，本發(fā)明所指益母草堿鹽即為益母草堿或其鹽酸鹽，化學名3，5-二甲氧基-4-羥基-苯甲酸(4-胍基)-1-丁酯一水合物鹽酸鹽，英文名Leonurine hydrochloride，英文化學名4-(Diaminomethylideneamino)butyl 4-hydroxy-3，5-dimethoxy-benzoate hydrochloride，分子式C14H21O5N3·HCl·H2O?，F(xiàn)有的一些研究表明，益母草堿鹽能調(diào)節(jié)性激素水平，改善微循環(huán)，治療黃褐斑。
甘草酸(glycyrrhizic acid，GL)又名甘草甜素(glycyrrhizin)，是甘草中含量最高，且具有廣泛而較強生物活性(如抗炎、抗變態(tài)反應、抗腫瘤、抗病毒、保肝、抗?jié)兊?的有效成分，也是甘草的主要甜味成分。通常所說的甘草酸，即天然甘草酸多為順式甘草酸，其化學名為18β-甘草酸。甘草中也存在微量的反式甘草酸(18α-甘草酸，18α-GL)，甘草酸以其原形和單鉀、二鉀、二鈉、三鈉、單銨鹽等形式，作為藥品、藥用輔料和食品添加劑被廣泛使用。由于甘草酸極性大，在溶液中又易形成聚合體，故消化道吸收差。而差向異構(gòu)體18α-GL不易形成聚合體，在胃腸道中呈單體，相對易被吸收，因此又開發(fā)出了甘草酸二銨(即18α-GL)用于臨床。本發(fā)明所指甘草酸銨即為甘草酸單銨鹽和/或甘草酸二銨。甘草酸臨床用于黃褐斑治療有單用甘草酸的霜劑、或與熊果苷組合復方、或與半胱氨酸和甘氨酸等組合成復方制劑，但與益母草堿鹽組成復方制劑尚未見報道。
由于黃褐斑是由多種因素誘發(fā)，目前聯(lián)合用藥體現(xiàn)出較大優(yōu)勢。我們研究表明，益母草堿鹽和甘草酸銨聯(lián)合用藥，在黃褐斑治療上存在明顯協(xié)同增效作用。
對于單獨使用益母草堿鹽或甘草酸銨時控制不佳患者，可以以類似市售各獨立產(chǎn)品的方式由相同單位劑量制劑提供治療量的益母草堿鹽和甘草酸銨的化學和物理穩(wěn)定的劑型在臨床黃褐斑治療中極其有益于控制其發(fā)生和發(fā)展。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及用于益母草堿鹽和甘草酸銨的聯(lián)合遞送的單位劑量制劑，這類制劑可用于治療黃褐斑。本發(fā)明還涉及這類聯(lián)合單位劑量制劑的制備方法和這類聯(lián)合制劑在黃褐斑治療中的用途。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的益母草堿鹽1～50重量份，甘草酸銨5～200重量份。在實施方案中，本發(fā)明涉及單位劑型形式藥物組合物，包含與益母草堿鹽結(jié)合的甘草酸銨；和任選一種或多種可藥用賦形劑；制備成搽劑、霜劑、透皮劑、口服液、膠囊劑、膠丸、片劑、滴丸和緩控釋制劑。
本發(fā)明益母草堿鹽和甘草酸銨的聯(lián)合遞送的單位劑量制劑經(jīng)實驗觀察，對黃褐斑具有更好治療作用。益母草堿鹽和甘草酸銨的聯(lián)合運用，可以協(xié)同增效和/或互補。
(1)益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨抗紫外線照射致黃褐斑模型小鼠皮膚氧化作用 采用波長為320nm的中波紫外線(UVB)每日照射小鼠1次，照射時間60min，連續(xù)1個月，制備小鼠黃褐斑模型，然后給予益母草堿鹽和甘草酸銨治療1個月，檢測小鼠受試皮膚組織中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、過氧化脂質(zhì)(LPO)、脂褐質(zhì)、羥脯氨酸和酪氨酸的含量。表1結(jié)果顯示，益母草堿鹽和甘草酸銨聯(lián)合治療能顯著升高UVB誘發(fā)黃褐斑模型小鼠皮膚中SOD和羥脯氨酸的含量(p＜0.001)，顯著降低MDA、LPO和脂褐質(zhì)的含量(p＜0.01)，且比益母草堿鹽或甘草酸銨單用作用更強(p＜0.05～p＜0.01)。
表1益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨抗紫外線照射致黃褐斑模型小鼠皮膚氧化作用(x±s)
(2)益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨抗黃體酮致黃褐斑模型小鼠皮膚黑色素沉著作用 采用肌注5mg/kg黃體酮攻擊雌性小鼠1月，制備小鼠黃褐斑模型，然后給予益母草堿鹽和甘草酸銨治療1個月，檢測皮膚、肝臟組織酪氨酸含量和皮膚黑色素細胞病理形態(tài)學指標。表2結(jié)果顯示，黃體酮致黃褐斑模型小鼠皮膚黑色素陽性目標的平均灰度值極顯著低于正常組，平均光密度、積分光密度和表皮酪氨酸含量極顯著高于正常對照組(p＜0.001)。益母草堿鹽和甘草酸銨聯(lián)合治療后能顯著升高黃體酮誘發(fā)黃褐斑模型小鼠皮膚黑色素陽性目標的平均灰度值(p＜0.01)，顯著降低平均光密度、積分光密度和表皮酪氨酸含量(p＜0.01)，且比益母草堿鹽或甘草酸銨單用作用更強(p＜0.05)。表3結(jié)果顯示，黃體酮致黃褐斑模型小鼠表皮黑色素沉著面積、數(shù)量和細胞核數(shù)目均極顯著高于正常對照組(p＜0.001)，益母草堿鹽和甘草酸銨聯(lián)合治療后能顯著顯著降低表皮黑色素沉著面積、數(shù)量和細胞核數(shù)目(p＜0.01)，且比益母草堿鹽或甘草酸銨單用作用更強(p＜0.05)。
表2益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨對黃體酮致黃褐斑模型小鼠表皮黑色素沉著深淺度和酪氨酸含量影響(x±s)
表3益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨對黃體酮致黃褐斑模型小鼠表皮黑色素沉著面積、數(shù)量和細胞核數(shù)目的影響
(3)益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨干預UVB誘導黃褐斑模型豚鼠皮膚色素沉著的作用 以亞紅斑劑量(16.5mJ/d)UVB照射豚鼠背部10天建立皮膚無急性損傷色素沉著黃褐斑動物模型后，給予益母草堿鹽和甘草酸銨治療1個月，期間用表面色度計測定皮膚色度L值改變。治療結(jié)束后皮膚取材觀察黑素細胞數(shù)量、形態(tài)和功能的改變。表4和表5結(jié)果顯示，益母草堿鹽和甘草酸銨聯(lián)合治療能極顯著升高UVB誘發(fā)黃褐斑模型豚鼠皮膚色度L值(p＜0.001)，顯著降低皮膚黑素細胞(MC)和黑素含量指數(shù)(p＜0.01)，且比益母草堿鹽或甘草酸銨單用作用更強(p＜0.05～p＜0.01)。
表4益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨干預UVB誘導黃褐斑模型豚鼠皮膚色度L值變化的作用(x±s)
表5益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨對UVB誘導黃褐斑模型豚鼠皮膚黑素細胞(MC)和黑素含量影響(x±s)
(4)益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨治療黃褐斑的臨床效果觀察 參照黃褐斑診斷標準，即①面部淡褐色至深褐色界限清楚的斑片，通常對稱性分布，無炎癥表現(xiàn)及鱗屑；②無明顯自覺癥狀；③主要發(fā)生在青春期后，女性多發(fā)；④病情有一定季節(jié)性，夏重冬輕；⑤排除其它疾病，如顴部褐青色痣Riehl黑變病及色素性光化性扁平苔蘚等引起的色素沉著；⑥色素沉著區(qū)域的平均光密度值大于自身面部平均光密度值的20％以上，篩選患者，然后分組給予益母草堿鹽和甘草酸銨藥物治療4周。療效判定標準，即①基本治愈肉眼視色斑消退＞90％，顏色基本消失；②顯效肉眼視色斑消退＞60％，顏色明顯變淡；③好轉(zhuǎn)肉眼視色斑消退＞30％，顏色變淡；④無效肉眼視色斑消退＜30％，顏色沒有明顯改變。表6結(jié)果顯示，益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨治療組顯效例數(shù)明顯比單用組更好(p＜0.05)。
表6益母草堿鹽聯(lián)合甘草酸銨治療黃褐斑的臨床效果觀察

權(quán)利要求
1.一種治療黃褐斑的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑，其特征在于其中含有有效劑量的益母草堿鹽和甘草酸銨以及兩者藥學上可接受的賦形劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑，其中含有的益母草堿鹽為益母草堿或其鹽酸鹽，甘草酸銨為甘草酸單銨鹽和/或甘草酸二銨。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑，其包含1～50重量份益母草堿鹽，5～200重量份甘草酸銨。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-2所述的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑，其特征在于和任選一種或多種可藥用賦形劑，制備成搽劑、霜劑、透皮劑、口服液、膠囊劑、膠丸、片劑、滴丸和緩控釋制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的聯(lián)合遞送的單位劑量聯(lián)合制劑，其特征在于用于黃褐斑治療。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于益母草堿鹽和甘草酸銨的聯(lián)合遞送的單位劑量制劑，這類制劑可用于治療黃褐斑。本發(fā)明還涉及這類聯(lián)合單位劑量制劑的制備方法和這類聯(lián)合制劑在黃褐斑治療中的用途。
文檔編號A61K31/704GK101816671SQ200910263430
公開日2010年9月1日 申請日期2009年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月16日
發(fā)明者楊奎, 張懷莉, 柯玥珺, 毛旭華, 馬宣毅, 張明洪, 李亞麗, 向靚, 黃薇, 閔志強, 鄔春久, 劉如練, 陳科 申請人:成都百康醫(yī)藥工業(yè)藥理毒理研究院