專利名稱：一種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法，特別是涉及采用 鐵包金藥材精制純化而制成的用于保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
免疫調(diào)節(jié)藥品一直是科研人員研究重要方向。隨著社會發(fā)展步伐的加快，越來越多的人 持續(xù)在較大的壓力下工作，免疫力低下的人群有逐漸增多的趨勢。所以治療免疫力低下的藥 品具有良好的應(yīng)用前景。
肝是人類最重要的臟器之一，肝臟承擔(dān)著維持生命的重要功能，也是人體內(nèi)最大的內(nèi)臟 器官，而由于環(huán)境的惡化以及近年來病患用藥的隨意性，很多人的肝臟遭受化學(xué)藥物影響， 造成肝損傷，ALT升高。如何保護肝臟，減少肝損害也是新藥研發(fā)中的重要方向。
因此開發(fā)出一種具有確切免疫調(diào)節(jié)和保肝降酶作用的產(chǎn)品，保護肝臟，滿足過度勞累、
免疫力低下的人群的需求。這對于提高人群的生活水平具有積極的現(xiàn)實意義。
鐵包金又名鼠乳根、鴨公青、老鼠草、老鼠耳、烏金藤、烏龍根、勾兒茶、烏口仔、小
葉鐵包金、假橄仔、細紋勾兒茶，是鼠李科植物Berchemia lineate(L. )DC.的干燥根。鐵包
金分布廣泛，資源豐富?！度珖胁菟巺R編》《中藥大辭典》和《嶺南草藥錄》都有其藥用記
載，多為苗族、仫佬族、壯族和土家族用藥，民間用于治療肺結(jié)核、吐血、黃疸型肝炎、腹
痛、頭痛、跌打損傷、疔瘡腫毒等。但是至今國內(nèi)外研究者對鐵包金有效成分的分離及有效
成份制劑的研究尚少。因此對鐵包金的有效成份進行分離提取，并制成中藥制劑，對中藥的
發(fā)展將會有促進作用。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人根據(jù)鐵包金的藥性理論及民間用藥的功能與主治，認為鐵包金應(yīng)具有一定的護肝
保肝降酶、免疫調(diào)節(jié)的作用。為驗證該設(shè)想，本發(fā)明人完成了鐵包金提取物的相關(guān)的藥理研
究，對提取物的活性成份進行了研究，并篩選并提取出這些活性組份，作為制備護肝保肝降
酶、免疫調(diào)節(jié)制劑的原料，以這些原料制備成中藥制劑，從而更好地利用我國的中草藥資源, 豐富中草藥治療疾病的領(lǐng)域。
本發(fā)明的制備方法是按下述方法完成的，具體如下
1.將鐵包金粗粉加提取溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上
硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加入藥用輔料，制成中藥制劑。
2. 將鐵包金粗粉加提取溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液用大孔吸附樹脂吸附，
水洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到 鐵包金提取物，然后加入藥用輔料，制成中藥制劑。
3. 將鐵包金粗粉加提取溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液用預(yù)處理過的聚酰胺 樹脂吸附，水洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回 收溶劑得到鐵包金提取物，然后加入藥用輔料，制成中藥制劑。
4. 將鐵包金粗粉加提取溶劑提取2-4次，合并提取液，濃縮，濃縮液分別用石油醚、乙 酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取，棄去水液，得四種萃取液，萃取液回收溶劑得四種鐵包金提取 物，將上述提取物一種或幾種混合，加入藥用輔料，制成中藥制劑。
說明-
上述方法中所述提取溶劑是指中藥提取中常用的提取溶劑，包括甲醇、乙醇、水、丙酮 等常用溶劑。
上述方法中所述的中藥制劑為臨床上常見的口服劑型和注射制劑。
上述方法中所述的藥用輔料，是指符合國家法律法規(guī)規(guī)定，允許在醫(yī)藥產(chǎn)品中添加的輔 料及產(chǎn)品。包括常用的填充劑、矯味劑、潤滑劑、助懸劑、增溶劑、防腐劑等。
上述方法中所述的大孔吸附樹脂是指常規(guī)可用于中草藥有效成份分離的大孔吸附樹脂， 包括可以對蒽醌類成分進行有效分離的大孔吸附樹脂，如AB-8， NKA-9,X-5等。
以下是制備鐵包金提取物的例子。這些例子只是用來對本發(fā)明進行舉例說明，而不是對 本發(fā)明的提取方法的限制 原料:鐵包金藥材
提取前的處理:先將鐵包金原料粉碎，制成60目以上的粗粉。 提取方法一
藥材粗粉，加水提取4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用石 油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物。 提取方法二
藥材粗粉，加乙醇提取2次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物。 提取方法三
藥材粗粉，加甲醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物。 提取方法四
藥材粗粉，加丙酮提取4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物。 提取方法五
將鐵包金粗粉加乙醇提取4次，合并提取液，過濾，濾液用AB-8大孔吸附樹脂吸附，水 洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到鐵 包金提取物，
提取方法六
將鐵包金粗粉加乙醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液用預(yù)處理過的聚酰胺樹脂吸附， 水洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到 鐵包金提取物
提取方法七
將鐵包金粗粉加水提取4次，合并提取液，濃縮，濃縮液分別用石油醚、乙酸乙酯、氯 仿、正丁醇萃取，棄去水液，得四種萃取液，萃取液回收溶劑得四種鐵包金提取物
本發(fā)明所述方法提取得到的鐵包金提取物，在生產(chǎn)上，可根據(jù)需要，制備不同的制劑(或 劑型)口服給藥制劑，如口服液、片劑、膠囊、含片;注射制劑，如注射劑。
提取方法采用通常的制藥工藝和方法，不管以什么方法制備，均以提取物中含有保肝降 酶、免疫增強有效物質(zhì)為原則，即提取物中含有蒽醌類化合物，其它可能含有少量的生物堿、 皂苷類。
本發(fā)明的實質(zhì)性特點和顯著的進步為
1、 本發(fā)明實現(xiàn)鐵包金中有效成份的分離并篩選出有效成份。
2、 本發(fā)明提供了以鐵包金中的有效成份制備可以臨床上應(yīng)用治療疾病的制劑制備方法。
3、 實驗表明本發(fā)明的制劑療效確切。 藥理研究資料
1.鐵包金提取物免疫增強的實驗研究
采用小鼠碳粒廓清法。取小鼠60只，雌雄各半。隨機分為空白對照組，左旋咪唑(0. 05g/kg) 組，鐵包金樣品1一4 (0.4g/kg)組，每組10只。分別每日灌胃給藥一次，連續(xù)7天。于末次 給藥30 min后，小鼠尾靜脈注射20%印度墨汁0. 1 ml / 10 g體重，于注入后的2min和7 min 時分別從小鼠眼眶靜脈叢用微量吸管取血20 ul，溶于2 ml 0.1% Na2 C03溶液中搖勻，于722分光光度計上650 nm處測定吸光度(OD值)，按公式:I^(logOD1-logOD2)/(t2-tl)計算吞噬指 數(shù)K值，進行組間比較T檢驗，評價藥物對單核巨噬細胞吞噬功能。結(jié)果見表3。
表l鐵包金提取物對單核巨噬細胞吞噬功能的影響(x±s)
組別 鼠數(shù)(只)劑量(g/kg)吞噬指數(shù)(K值)
對照組10一0.017±0.015
左旋咪唑100.050.036±0.011**
樣品1100.40.029±0.006*
樣品2100.40.034士0.016*
樣品3100.40.029±0.013
樣品4100.40.034±0.019*
與對照組比較*P< 0. 05,**P< 0. 01
2.鐵包金提取物保肝降酶實驗結(jié)果
藥理實驗結(jié)果表明與對照組比較，模型組血清的ALT、 AST活性都比對照組明顯升高， 表明造模成功。樣品1、 2、 4 (0.4g /kg)和陽性藥聯(lián)苯雙酯能明顯降低CCl4致急性肝損傷 小鼠血清中的ALT、AST活性(P〈0. 05)，并能明顯升高血清中總蛋白和白蛋白含量(P〈0. 05)， 樣品3(0. 4g /kg)對AST活性也有一定抑制作用(P<0. 05)，但對ALT抑制不明顯(P>0. 05)。 提示鐵包金各提取物可抗CCl4所致的肝損，具有一定的保肝降酶作用。
與模型組比較，除樣品3 (0.4g /kg)降膽紅素作用稍差外(P>0.05)，樣品1、 2、 4 (0.4g /kg)及陽性藥聯(lián)苯雙酯組的T-BIL含量及ALT活性均明顯降低(P<0.05)，樣品3 具有明顯的降A(chǔ)LT作用，提示鐵包金樣品l、 2、 4具有明顯的退黃降酶作用，鐵包金各提取 物均具有明顯的降A(chǔ)LT作用，
具體實施例方式
以下是本發(fā)明實施的例子。這些例子只用于舉例說明本發(fā)明的實施，并不是對本發(fā)明的 限定。
制備實例一
藥材粗粉，加水提取4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用石 油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加適 量的水溶解，加入蔗糖，溶解，滅菌，分裝，制得口服液
制備實例二藥材粗粉，加乙醇提取2次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加 純水溶解，微孔過濾，分裝入凍干瓶，冷凍干燥，供注射用。
制備實例三
藥材粗粉，加甲醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加 適量淀粉制粒，制成片劑。
制備實例四
藥材粗粉，加丙酮提取4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用 石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加 入蔗糖，制成顆粒劑。
制備實例五
將鐵包金粗粉加乙醇提取4次，合并提取液，過濾，濾液用X-5大孔吸附樹脂吸附，水 洗柱后用20-85%乙醇_水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到鐵 包金提取物，加入淀粉制粒，裝入膠囊制成膠囊劑。
制備實例六
將鐵包金粗粉加乙醇提取3次，合并提取液，過濾，濾液用預(yù)處理過的聚酰胺樹脂吸附， 水洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到 鐵包金提取物，加入糊精適量，制成散劑。
制備實例七
將鐵包金粗粉加水提取4次，合并提取液，濃縮，濃縮液分別用石油醚、乙酸乙酯、氯 仿、正丁醇萃取，棄去水液，得四種萃取液，萃取液回收溶劑得四種鐵包金提取物，四種提 取物打粉，混勻，加入蔗糖粉，制粒，制成片劑。
臨床效果
因本發(fā)明僅處于研究階段，因此只在2例志愿者身上進行臨床應(yīng)用觀察。
例一，劉XX，男，廣西南寧市人，自述長期以來體乏無力，易感冒且痊愈期長。予以上
述制備實例七所制片劑每日3次，三日后體乏無力癥狀減輕，精神面貌漸佳。
例二，李XX，男，廣西南寧市人，肝功檢查Alt90。予以上述制備實例四所制顆粒劑口
服，每日三次，每次1袋，服七日后復(fù)檢止，Alt 25，檢査正常。
權(quán)利要求
1.一種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于先將鐵包金粗粉加提取溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液濃縮成稠膏，濕法上硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，回收溶劑，得鐵包金提取物，加入藥用輔料，制成中藥制劑。
2. —種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于先將鐵包金粗粉加提取 溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液用大孔吸附樹脂吸附，水洗柱后用20-85%乙醇-水溶液洗脫， 收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到鐵包金提取物，然后加入藥用輔料，制成中藥制劑。
3. —種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于先將鐵包金粗粉加提取 溶劑提取2-4次，合并提取液，過濾，濾液用預(yù)處理過的聚酰胺樹脂吸附，水洗柱后用20-85%乙醇-水溶 液洗脫，收集富含蒽醌類化合物的流份，洗脫液回收溶劑得到鐵包金提取物，然后加入藥用輔料，制成中 藥制劑。
4. 一種具有保肝降酶和免疫增強作用的中藥制劑的生產(chǎn)方法，其特征在于先將鐵包金粗粉加提取 溶劑提取2-4次，合并提取液，濃縮，濃縮液分別用石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取，棄去水液， 得四種萃取液，萃取液回收溶劑得四種鐵包金提取物，將上述提取物一種或幾種混合，加入藥用輔料，制 成中藥制劑。
5. 如權(quán)利要求l-4任一項所述的具有保肝降酶和免疫增強作用的鐵包金提取物制備的中藥制劑,其特 征在于所述的提取過程中所用的提取溶劑是指中藥提取中常用的提取溶劑，包括甲醇、乙醇、水、丙酮。
6. 如權(quán)利要求l-4任一項所述的具有保肝降酶和免疫增強作用的鐵包金提取物制備的中藥制劑，其特 征在于所述的中藥制劑為臨床上常見的口服劑型和注射制劑。
7 .如權(quán)利要求l-4任一項所述的具有保肝降酶和免疫增強作用的鐵包金提取物制備的中藥制劑，其 特征在于該中藥制劑在保肝降酶和免疫增強作用的方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以鐵包金提取物為原料制備中藥制劑的方法。該方法可將鐵包金的活性成份提取，并加入輔料制備成臨床上適用的劑型。該提取物具有純度高的優(yōu)點。該中藥制劑臨床上可起到保肝降酶和免疫增強作用。
文檔編號A61K36/72GK101642495SQ20091011437
公開日2010年2月10日 申請日期2009年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月8日
發(fā)明者吳玉強, 軼 羅, 林 蔣, 鄧家剛 申請人:廣西中醫(yī)學(xué)院制藥廠