專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗肝纖維化的中藥組合物及其制備方法與藥物制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中成藥及其制備方法，特別涉及一種抗肝纖維化藥物組合物及其 制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)有關(guān)資料報(bào)道，我國(guó)是肝病高發(fā)國(guó)家，目前約有3,000萬(wàn)的慢性乙型肝炎患者 以及1.2億乙肝病毒攜帶者，分別占全國(guó)總?cè)丝诘?0%以上。近年來(lái)病毒性肝炎、肝 纖維化、脂肪肝、酒精性肝病變、藥物性肝損害及肝癌等肝病越來(lái)越成為威脅國(guó)人健 康的主要疾病。
肝纖維化(hepatic fibrosis)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一個(gè)病理學(xué)概念，是指肝臟內(nèi)彌漫性細(xì) 胞外基質(zhì)(特別是膠原纖維)過(guò)度增生、沉積。它不是一個(gè)獨(dú)立的疾病，而是許多慢性 肝臟疾病均可引起肝纖維化，其病因大致可分為感染性(慢性乙型、丙型和丁型病毒 性肝炎，血汲蟲(chóng)病等)，先天性代謝缺陷(肝豆?fàn)詈俗冃?、血色病、al-抗胰蛋白酶缺 乏癥等)及化學(xué)代謝缺陷(慢性酒精性肝病、慢性藥物性肝病)及自身免疫性肝炎、 原發(fā)性肝汁性肝硬化和原發(fā)性硬化性膽管炎等。肝纖維化臨床以脅部脹痛、黃疽、脅 下積塊等為主要臨床表現(xiàn)。
在臨床上，西醫(yī)抗肝纖維化的藥物主要為a干擾素、拉米夫定和阿德福韋。臨床 研究顯示a干擾素對(duì)在治療后能產(chǎn)生持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答的丙型肝炎患者來(lái)說(shuō)可以減輕 其肝纖維化的程度。干擾素和利巴韋林聯(lián)合應(yīng)用能清除半數(shù)以上丙型肝炎病毒，抗病 毒治療也能改善肝纖維化進(jìn)程，并可能逆轉(zhuǎn)肝硬化。a干擾素治療乙型肝炎也能改善 肝纖維化，肝纖維化的指標(biāo)明顯下降(P〈0.05)。
拉米夫定能有效抑制HBV DNA的復(fù)制，并有部分患者HBeAg/anti HBe的血 清轉(zhuǎn)換。治療2年后肝纖維化有不同程度的減輕，或延緩肝纖維化的進(jìn)程，但是拉米 夫定主要的局限性是變異，1年和5年的發(fā)生率分別為15~32%和67~69%。在變異 以后，組織學(xué)改變可能會(huì)加重。阿德福韋也能改善慢性乙肝纖維化程度。近年來(lái)，肝纖維化基因治療取得較大進(jìn)展，但目前存在的主要問(wèn)題是基因?qū)?的靶向性、表達(dá)效率。可調(diào)控性及安全性尚未完全解決，因此要將基因治療真正用于 臨床以逆轉(zhuǎn)或治愈肝纖維化可能還需要一個(gè)較長(zhǎng)的過(guò)程。
近年來(lái)，中醫(yī)藥治療肝纖維化研究取得了較大的成就，也顯示出較為明顯的優(yōu) 勢(shì)。雖然傳統(tǒng)的中醫(yī)學(xué)中無(wú)肝纖維化病名的記載，但結(jié)合臨床表現(xiàn)可將其歸屬"脅痛"、 "黃疽"、"鼓脹"等病范疇，另外亦可參考"廟積"、"癖血"、"積聚"等病證。傳統(tǒng)中醫(yī) 理論認(rèn)為，肝纖維化的形成與"正氣不足"亦密切相關(guān)。初期肝絡(luò)阻塞，氣滯血瘀，繼 則肝病傳脾，脾氣虛弱， 一方面氣血生化無(wú)源，正氣不足，邪氣易踞，加重血瘀；另 一方面，氣為血帥、氣虛則鼓動(dòng)無(wú)力，血行滯澀而瘀血內(nèi)生。在治療上，以活血化瘀 為主、益氣養(yǎng)陰為輔，并結(jié)合辨證論治的治療原則，活血化瘀、扶正固本為中醫(yī)藥抗 肝纖維化的基本治法。
目前治療肝纖維化的單味中藥主要有丹參、桃仁、當(dāng)歸、冬蟲(chóng)夏草、黃芪、柴 胡、姜黃、田三七以及漢防己甲素、丹酚酸A、桃仁提取物、葫蘆素B、齊墩果酸、 甘草皂甙、甘草次酸、蒼術(shù)酮等；復(fù)方中藥組合物有扶正化瘀方(上海中醫(yī)藥大學(xué))、 復(fù)方861 (北京友誼醫(yī)院)、復(fù)方鱉甲軟肝片(解放軍302醫(yī)院)、強(qiáng)肝膠囊(山西省 中醫(yī)研究所)、肝纖寧顆粒(湖南中醫(yī)學(xué)院)、軟堅(jiān)糖漿(湖北中醫(yī)學(xué)院)等。目前治 療肝纖維化的中藥作用療效不顯著，作用單一，針對(duì)性較差，用量偏大，價(jià)格昂貴等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題提供一種用于治療肝纖維化 的藥物組合物及其制備方法，該組合物針對(duì)肝纖維化的病因和病機(jī)，利用多種中 藥的活性成分的相互協(xié)同作用，通過(guò)清熱解毒，活血化瘀，扶正固本抗肝纖維化， 療效顯著。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明一方面提供一種抗肝纖維化的中藥組合物，主 要包括如下原料制成熊膽粉、丹參、姜黃、黃芪。
其中，所述抗肝纖維化的中藥組合物原料的重量份配比為 熊膽粉1-10、丹參10-50、姜黃20-100、黃芪30-200。
特別是，所述原料的重量份配比為熊膽粉l-5、丹參10-30、姜黃30-60、黃芪 50-80。尤其是，所述原料的重量份配比優(yōu)選為熊膽粉l、丹參20、姜黃40、黃芪60。
本發(fā)明抗肝纖維化的中藥組合物選擇熊膽粉、丹參、姜黃、黃芪進(jìn)行組合制備而 成，活血化瘀、扶正固本、清熱解毒，將這些中藥材組合使用，使得各藥材中的活性 成分產(chǎn)生協(xié)同作用，相互增進(jìn)保肝、護(hù)肝的功效，從而能夠有效地抑制、阻止肝臟組 織的纖維化。
其中，選用的熊膽為君藥，具有清熱解毒，利膽明目的功效，輔以丹參、姜黃活
血化瘀、行氣止痛；佐以黃芪扶正固本，共奏活血化瘀、扶正益氣、清熱解毒之功效。 熊膽為熊科動(dòng)物黑熊、東北馬熊或棕熊的干燥膽汁，性寒、味苦，歸肝、膽、心、 胃經(jīng)，具有清熱解毒、平肝明目、殺蟲(chóng)止血、止痙的功效，主要用于治療濕熱黃疸； 暑濕瀉??；熱病驚癇；目赤翳障；喉痹；鼻蝕；疔瘡；痔漏；疳疾；蛔蟲(chóng)，多種出血 癥。
熊膽中主要含有膽汁酸類(lèi)的堿金屬鹽、膽甾醇及膽色素。熊膽中可得約20%的牛 磺熊脫氧膽酸，?；切苊撗跄懰岜凰鈩t生成?；撬崤c熊脫氧膽酸。熊膽還含有少量 的鵝脫氧膽酸及膽酸。熊脫氧膽酸為鶴脫氧膽酸的立體異構(gòu)物，是熊膽的特殊成分。
現(xiàn)代藥理研究表明熊膽具有利膽作用，膽酸能促使膽汁的流量增大；解痙作用， 熊膽對(duì)以乙酰膽堿造成的痙攣，具有強(qiáng)效的解痙效果；熊膽中的熊脫氧膽酸鈉對(duì)士的 寧引起的小鼠中毒有解毒作用，與鵝脫氧膽酸鈉及膽酸鈉合用能增強(qiáng)其解毒作用熊 膽對(duì)松節(jié)油致熱有一定的解熱作用；對(duì)流感嗜血桿菌、大腸桿菌、肺炎球菌、甲型鏈 球菌、綠膿假單胞菌、卡他奈瑟菌等均有抑制作用。
丹參為唇形科植物丹參的干燥根及根莖，性微寒、味苦，歸心、肝經(jīng)，具有祛瘀 止痛，活血通經(jīng)，清心除煩的作用，主要用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕積聚，胸腹 刺痛，熱痹疼痛，瘡瘍腫痛，心煩不眠；肝脾腫大，心絞痛等。
丹參中含有脂溶性成分丹參酮I、 IIA、 IIB、異丹參酮I、 IIA、隱丹參酮、 異隱丹參酮、甲基丹參酮、羥基丹參酮IIA、丹參新醌A、 B、 C、 二氫異丹參酮I、 新隱丹參酮、去羥新隱丹參酮等；水溶性的酚性酸化合物丹參酸A、 B、 C，丹參 酚酸A、 B、 C、 D、 E、 G,迷迭香酸，迷迭香酸甲酯，紫草酸單甲酯，紫草酸二甲 酯，紫草酸乙酯，紫草酸，原兒茶醛，咖啡酸，異阿魏酸等。
丹參對(duì)肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，(1)丹參可使肝再生度，肝臟再生受到多種 激素的調(diào)節(jié)，尤其是胰島素和胰高血糖素具有明顯促進(jìn)肝再生的作用。丹參使肝細(xì)胞再生的作用機(jī)理與丹參改善血液循環(huán)的作用有關(guān)。丹參在全身及局部組織血液循環(huán)改 善的基礎(chǔ)上，使門(mén)脈血流增加，改善肝臟供血和營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)帶來(lái)較多的胰島素和胰高 血糖素，促進(jìn)肝再生，丹參注射液能夠促進(jìn)肝臟再生時(shí)的DNA的合成和細(xì)胞分裂增 殖，促進(jìn)肝再生；(2)丹參對(duì)急性肝損傷的作用，丹參治療肝損傷，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(SGPT) 活力明顯降低；肝內(nèi)甘油三酯含量明顯降低；丹參明顯減輕肝壞死和炎癥反應(yīng)；(3) 丹參對(duì)肝硬變的防治作用，丹參通過(guò)增加膠原酶含量、增強(qiáng)膠原酶的活性促進(jìn)膠原纖 維的降解，明顯降低肝臟硬化過(guò)程中的膠原蛋白含量及血清r球蛋白含量。羥脯氨酸 是膠原降解的產(chǎn)物，經(jīng)尿排出，尿中羥脯氨酸含量提高；(4)丹參對(duì)肝纖維重吸收 的作用，丹參使動(dòng)物的肝纖維化明顯減輕，且肝臟膠原蛋白含量顯著降低。說(shuō)明藥物 丹參有促進(jìn)肝纖維重吸收的作用，丹參抑制纖維增生與丹參促迸壞死肝細(xì)胞的修復(fù)和 及時(shí)再生有關(guān)；。
學(xué)者研究表明丹參可以刺激血漿纖維聯(lián)結(jié)蛋白(PFN)水平的升高，從而提高其 網(wǎng)狀內(nèi)層系統(tǒng)的吞噬功能及調(diào)理素活性，防止肝臟的免疫損傷，達(dá)到保護(hù)肝細(xì)胞和促 進(jìn)肝細(xì)胞再生的作用，丹參不單純是改善肝臟微循環(huán)，供給肝臟有益因子，更重要的 是丹參可以提高PFN水平，增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能和調(diào)理素活性，避免肝臟免 疫損傷，最終起到保護(hù)肝細(xì)胞和促進(jìn)肝細(xì)胞的再生作用。
姜黃為姜科植物姜黃或郁金的干燥根莖，性溫，味苦、辛，歸脾、肝經(jīng)，具有破 血行氣，通經(jīng)止痛之功效，用于胸脅剌痛，閉經(jīng)，癥瘕，風(fēng)濕肩臂疼痛，跌撲腫痛等 病癥。
姜黃的主要化學(xué)成分有(1)姜黃素類(lèi)化合物姜黃素、雙去甲氧基姜黃素、去 甲氧基姜黃素、二氫姜黃素等；(2)倍半萜類(lèi)化合物姜黃新酮、姜黃酮醇A、 B， 大牴牛兒酮-13醛，原莪術(shù)二醇，莪述雙環(huán)烯酮，去氫莪述二酮、a-姜黃酮等；(3)
酸性多糖姜黃多糖A、 B、 C、 D; (4)揮發(fā)油姜黃酮、姜油烯、水芹烯、1， 8-桉葉素、香檜烯、龍腦、去氫姜黃酮等；
現(xiàn)代藥理研究表明姜黃煎劑及浸劑能增加犬的膽汁分泌，使膽汁成分恢復(fù)正常， 并增加膽囊收縮；姜黃素或其鈉鹽有利膽作用，靜脈注射可減少固體成分的含量、增 加膽汁分泌量，膽鹽、膽紅素、膽甾醇分泌量均增加，脂肪酸成分保持恒定。姜黃醇 或醚提取物、姜黃素和揮發(fā)油灌胃，對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠和家兔都有明顯的降血漿 總膽固醇和B-脂蛋白的作用，并能降低肝膽固醇，糾正a-和B-脂蛋白比例失調(diào)，對(duì)降血漿甘油三酯的作用更為顯著，能使血漿中甘油三酯降低至正常水平以下。灌胃姜 黃素能降低肝重，減少肝中甘油三酯、游離脂肪酸、磷脂含量及血清總甘油三酯、極 低密度脂蛋白(VLDL) +低密度脂蛋白(LDL)甘油三酯，高密度脂蛋(HDL)白 甘油三酯、VLDL+LDL膽固醇和血中游離脂肪酸的含量，也能提高血清總膽固醇和 HDL膽固醇含量。姜黃還具有抗氧化作用，姜黃素對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化作用都有明顯對(duì)抗 作用，其抗氧化作用高于維生素E。
黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，性溫、味甘，歸肺、脾經(jīng)，具有 補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌的功能，主要用于氣虛乏力，食少便溏，中氣 下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃， 內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白尿，糖尿病等。
黃芪的化學(xué)成分為黃酮及黃酮甙如毛蕊異黃酮、2'，4'二羥基-5， 6-二甲氧基異 黃酮、3-羥基-9， 10- 二甲氧基紫檀烷，黃芪皂甙I、 V、 III;還含有大量的黃芪 多糖以及P-谷甾醇、亞油酸、亞麻酸、膽堿、甜菜堿、氨基酸、蔗糖、葡萄糖醛酸及 微量的葉酸等。
黃芪的藥理研究表明黃芪能加強(qiáng)正常心臟收縮，對(duì)衰竭的心臟有強(qiáng)心作用；能使 管狀血管和腎臟血管擴(kuò)張，并使全身末梢血管擴(kuò)張，皮膚循環(huán)暢盛，使高血壓患者血 壓下降；黃芪還有中等利尿、阻抑腎炎和抑制病菌的作用。
本發(fā)明另一方面提供一種抗肝纖維化的中藥組合物的制備方法，包括如下步驟
1) 制備黃芪干浸膏
首先:采用水或質(zhì)量百分比濃度為10-60%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)黃芪進(jìn)行加熱 提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后將濃縮后的提取液進(jìn)行干燥，得黃茛干 浸膏；
2) 制備姜黃干浸膏
首先:采用質(zhì)量百分比濃度為20-80%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)姜黃進(jìn)行加熱回流
提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后將濃縮后的姜黃提取液進(jìn)行千燥，得姜
黃干浸膏；
3) 制備丹參干浸膏
首先采用水或質(zhì)量百分比濃度為20-50%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)丹參進(jìn)行加熱 提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后向濃縮后的丹參提取液中加入乙醇進(jìn)行沉淀，過(guò)濾，最后濾液濃縮后進(jìn)行干燥，得丹參干浸膏； 4)制備中藥組合物
將黃芪、姜黃和丹參干浸膏混合，粉碎后加入熊膽粉，混合均勻，制得本發(fā)明藥 物組合物。
其中，步驟1)中每次進(jìn)行所述加熱提取時(shí)所采用提取溶劑(即水或質(zhì)量百分比 濃度為10-60%的乙醇溶液)的體積與黃芪的重量之比為8-10: 1，提取時(shí)間為l-3小 時(shí)/次，優(yōu)選為1-2.5小時(shí)/次；
特別是，采用質(zhì)量百分比濃度為10-60%的乙醇溶液加熱回流提取黃芪； 特別是，黃芪提取液在相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa(即以一個(gè)大氣壓為0，控制 減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa)，溫度為50-7(TC的條件下 進(jìn)行所述的濃縮；濃縮后黃芪提取液的體積與黃芪藥材的重量之比為0.5-1.5: 1，優(yōu)
選為l: 1，即黃疾藥材的重量與濃縮后黃賓提取液的體積之比為1: 0.5-1.5;
特別是，所述黃芪濃縮提取液干燥的溫度為40-60°C，相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa);黃芪干浸膏的含水率為0.5-2%。
其中，步驟2)中每次進(jìn)行所述加熱回流提取時(shí)所采用的提取溶劑的體積與姜黃
的重量之比為10-12: 1，提取時(shí)間為0.5-3小時(shí)/次；
特別是，姜黃提取液在相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa(即以一個(gè)大氣壓為0，控制 濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa)，溫度為40-60"C的條件下進(jìn)行 所述的濃縮；濃縮后姜黃提取液的體積與姜黃藥材的重量之比為0.5-1.5: 1,優(yōu)選為
1: 1，即姜黃藥材的重量與濃縮后姜黃提取液的體積之比為1: 0.5-1.5;
特別是，所述姜黃濃縮提取液的干燥溫度為40-60°C，相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa(即以一個(gè)大氣壓為0,控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa);姜黃干浸膏的含水率為0.3-1%。
其中，步驟3)中每次進(jìn)行所述加熱提取時(shí)所采用的提取溶劑的體積與丹參的重
量之比為8-10: 1，提取時(shí)間為1-3小時(shí)/次；
特別是，采用質(zhì)量百分比濃度為20-50%的乙醇溶液加熱回流提取丹參； 特別是，丹參提取液在相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa(即以一個(gè)大氣壓為0，控制 濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa)，溫度為50-70'C的條件下進(jìn)行
9所述的濃縮；濃縮后的丹參提取液的體積與丹參藥材的重量之比為0.5-1.5: 1，優(yōu)選 為0.6-1: 1;
特別是，向濃縮后的丹參提取液中加入乙醇，使得濃縮后的丹參提取液中乙醇的
質(zhì)量百分比含量為40-80%，然后靜置，進(jìn)行所述的沉淀，沉淀時(shí)間212小時(shí)； 尤其是，所述沉淀用乙醇選用無(wú)水乙醇、質(zhì)量百分比濃度為70-95的乙醇； 特別是，濾液在相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制濃縮時(shí) 的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa)，溫度為50-70。C的條件下進(jìn)行所述的 濃縮；濃縮后的丹參濾液的體積與丹參藥材的重量之比為0.3-1.5: 1，優(yōu)選為0.3-1: 1;所述干燥溫度為50-70°C，相對(duì)壓力為-0.07 -0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓為0， 控制干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07 -0.095MPa);丹參干浸膏的含水率為 0.1-1%。
本發(fā)明又一方面提供一種由上述任一所述中藥組合物和藥劑學(xué)上可接受的輔料 組合制成的預(yù)防和/或治療肝纖維化的藥物制劑。
其中，本發(fā)明的藥物組合物可以和藥劑學(xué)上可接受的輔料按傳統(tǒng)或現(xiàn)代生產(chǎn)工藝
制程臨床可以接受的口服機(jī)型。如膠囊劑、片劑、顆粒劑、、丸劑、口服液等。所用
的藥物輔料可以是淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維、明膠、蔗糖、硬脂酸鎂等。臨床上
需要長(zhǎng)期用藥，制成固體制劑貯存方便，患者服用便利，也更適應(yīng)市場(chǎng)需求。優(yōu)選的
劑型是膠囊劑、顆粒劑、片劑。
本發(fā)明再一方面提供一種上述任一所述中藥物組合物在制備治療和/或預(yù)防肝纖
維化的藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明藥物組合為具有如下優(yōu)點(diǎn)
1、 本發(fā)明藥物組方配伍科學(xué)，療效確切，安全性高，質(zhì)量可控；
2、 本發(fā)明藥物組合物具有活血化瘀、扶正益氣、清熱解毒的功效，具有優(yōu)異的 抗肝纖維化作用，能有效延緩肝纖維化進(jìn)程；
3、 本發(fā)明藥物組合物作用途徑多，藥物作用靶點(diǎn)多，作用機(jī)制獨(dú)特，藥物針對(duì) 關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)，藥物抗肝纖維化的療效顯著。
4、 本發(fā)明藥物用藥量低，成本低廉。
具體實(shí)施方式
以下通過(guò)試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗(yàn)例包括了本 發(fā)明藥物的藥效學(xué)試驗(yàn)。
試驗(yàn)例1本發(fā)明藥物對(duì)四氯化碳致大鼠肝纖維化的質(zhì)量作用 試驗(yàn)材料
本發(fā)明藥物膠囊劑，0.5g/粒(每粒含生藥10g);復(fù)方鱉甲軟肝片，批號(hào)20070516，
內(nèi)蒙古福瑞中蒙藥科技股份有限公司出品。
試驗(yàn)方法
取清潔級(jí)雄性SD大鼠62只，體重150-200g,全雄，取10只作為正常對(duì)照組(不 造模)，其余52只采用四氯化碳制備大鼠肝纖維化模型以15%四氯化碳溶液(以分 析純四氯化碳溶于植物油中，配成150ml/L溶液備用)lml/100g體重灌胃，2次調(diào)， 連續(xù)7周。造模7周后隨機(jī)處死2只大鼠，取肝臟做病理組織學(xué)檢査，證實(shí)己造成肝 纖維化模型。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為5組，即模型組、陽(yáng)性藥組、給藥高劑量組、 中劑量組、低劑量組，停止造模并開(kāi)始灌胃給藥。
給藥高、中、低劑量組分別灌胃給予本發(fā)明藥液，每日一次，給藥高劑量組灌胃 給予本發(fā)明膠囊劑12g生藥/kg;給藥中劑量組灌胃給予本發(fā)明膠囊劑6g生藥/kg;給
藥低劑量組灌胃給予本發(fā)明膠囊劑3g生藥/kg;陽(yáng)性藥組則灌胃給予復(fù)方鱉甲軟肝片
0.55g/kg，正常組及模型組均灌胃給予等容積的蒸餾水，所有大鼠灌胃容積均為 10ml/kg，連續(xù)灌胃給藥8周，每天觀(guān)察動(dòng)物一般情況，于末次給藥后次日空腹采血， 分離血清，以全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中AST、 ALT指標(biāo)(檢測(cè)結(jié)果件表l);以 放免法檢測(cè)血清中肝纖維化指標(biāo)HA、 PIIINP (檢測(cè)結(jié)果件表2);采血后處死動(dòng)物并 取肝臟，進(jìn)行病理組織學(xué)檢査取出肝臟組織，標(biāo)本經(jīng)常規(guī)10%福爾馬林液固定，石 蠟切片，H-E染色，光鏡下觀(guān)察各組大鼠肝組織的病理改變情況，并采用Masson染 色觀(guān)察肝組織內(nèi)纖維化程度。
正常組大鼠肝臟顏色深紅，表面光滑，邊緣銳利，質(zhì)地較軟。模型組大鼠肝臟腫 大，邊緣鈍，質(zhì)地硬，顏色較淺，但邊緣尚好，整個(gè)肝臟與周?chē)鞴僬尺B廣泛。各給 藥組大鼠肝臟形態(tài)與正常組接近，明顯好于模型組。
表l對(duì)四氯化碳所致肝纖維化大鼠肝功能及羥脯氨酸含量的影響(^±S)
組別 劑量 動(dòng)物數(shù) AST ALT 羥脯氨酸含量(g/kg)(n)(U/L)(U/L)
正常組/1085.2±19.4**30.5±9.6**201.3±18.9**
模型組/10154.3±25.4102.3±20.1547.9±102.7
陽(yáng)性藥組0.551090.2±25.7**53.6±12.5**399.6±85.2**
給藥高劑量組121088,7±30.2**55.6土20.3"305,7±79.5**
給藥中劑量組61099.8士17.9"63.1±26.7*401.2±113.2**
給藥低劑量組310137.8±34.291.4±33.4498.5±132.1
注與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01
表l檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明-
1、 由四氯化碳所誘導(dǎo)的肝纖維化模型大鼠的肝功能有明顯損傷，模型組大鼠血
清中AST、 ALT水平均極顯著地高于正常對(duì)照組(PO.Ol)。而本發(fā)明藥物治療后的大 鼠肝功能則有明顯恢復(fù)，其高、中劑量組大鼠血清中AST、 ALT水平與模型組相比均 有顯著降低(P0.05 0.01)。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，本發(fā)明中藥組合物對(duì)四氯化碳所誘導(dǎo)的肝 纖維化模型大鼠的肝功能有明顯的改善作用。
2、 模型組大鼠肝組織中羥脯氨酸含量顯著高于正常組(PO.Ol)，而本發(fā)明藥物 高、中劑量組大鼠的肝組織中羥脯氨酸含量與模型組相比較則有顯著的降低 (PO.Ol)。表明本發(fā)明藥物組合物對(duì)于肝纖維化大鼠肝組織中異常增高的羥脯氨酸 含量有明顯的降低作用。
表2對(duì)四氯化碳所致肝纖維化模型大鼠血清屮肝纖維化指標(biāo)的影響(^士S)
組別劑量 (g/kg)動(dòng)物數(shù) (n)HA (ng/ml)PI詩(shī) (ng/ml)肝纖維化評(píng)分
正常組/1065.8±21.2**32.2±6.6**1.00±0.00**
模型組/10165.3±32.155.4±7.83.60±0.70
陽(yáng)性藥組0.551066.3±20.3**36.6±9.9**2.67±0.82*
給藥高劑量組121071.4±26.7**38.0±7.1**2.67±0.82*
給藥中劑量組61099,5±20,3*40.9±7.2*2.70+0.82*
給藥低劑量組310142.6±33.752.7±7.92.卯±0.88
注與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01
由表2結(jié)果可見(jiàn)，肝纖維化模型大鼠血清中HA、 PIIINP水平均顯著高于正常大鼠(PO.Ol)，本發(fā)明高、中劑量均能明顯降低血清中的HA和PIIINP水平 (P<0.05~0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方對(duì)四氯化碳所致肝纖維化大鼠血清中相關(guān)肝纖維 化指標(biāo)均有一定的改善作用。
病理組織學(xué)檢査結(jié)果表明，正常對(duì)照組大鼠肝組織均未見(jiàn)明顯的病理改變，肝小 葉結(jié)構(gòu)存在，肝板排列整齊，個(gè)別例結(jié)構(gòu)稍紊亂，以中央靜脈為中心向周?chē)派錉钆?列，肝細(xì)胞多邊形，漿豐富，核大而圓，少見(jiàn)雙核，Masson染色見(jiàn)肝組織內(nèi)除中心 靜脈及小膽管周?chē)?jiàn)環(huán)形的膠原纖維外，其余處未見(jiàn)膠原纖維。而模型組10只大鼠 中有9例病變非常顯著，肝組織小葉結(jié)構(gòu)被破壞，可見(jiàn)大量纖維組織增生、穿插，將 肝組織分割為大小不等的圓形或橢圓形假小葉，Masson染色顯示肝組織內(nèi)大量纖維 組織增生。陽(yáng)性藥給藥組病變情況比模型組有一定減輕，個(gè)別例與正常組基本相似， 其余各例與模型組改變類(lèi)似，但肝組織內(nèi)纖維化及肝細(xì)胞脂肪變性均較模型組明顯好 轉(zhuǎn)。本發(fā)明藥物組合物高、中劑量組各例與模型組相比，肝組織內(nèi)纖維化程度均明顯 減輕，肝組織改變與正常組基本相似。
病理組織學(xué)檢査表明大鼠肝纖維化模型造模成功，模型組大鼠肝組織內(nèi)可見(jiàn)大 量增生的膠原纖維呈網(wǎng)狀分布。本處方高、中、低劑量對(duì)肝纖維化大鼠肝纖維組織增 生有顯著的改善作用，說(shuō)明本方具有明顯的抗肝纖維化作用。
試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明中藥組合物對(duì)于四氯化碳所誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠的肝功能有 明顯的保護(hù)作用，能顯著降低肝纖維化大鼠血清中AST、 ALT水平(P0.05 0.01)，能 顯著降低肝纖維化大鼠肝組織中羥脯氨酸含量(PO.Ol)，且呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性；能顯著 降低肝纖維化大鼠血清中異常升高的HA和PIIINP水平(P<0.05~0.01)。病理組織學(xué) 檢查結(jié)果表明本發(fā)明中藥組合物對(duì)肝纖維化大鼠肝纖維組織增生有顯著的改善作用， 說(shuō)明本發(fā)明中藥具有明顯的治療肝纖維化作用。
試驗(yàn)例2小鼠急性肝損傷試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法清潔級(jí)KM小鼠60只，體重18-20 g，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，即 正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組及給藥高、中、低劑量組。正常及模型組均灌胃給予 等容積的蒸熘水，高、中、低劑量組分別灌胃給予本發(fā)明藥物組合為24g生藥/kg， 12g生藥/kg， 6g生藥/kg，陽(yáng)性藥組灌胃給予復(fù)方鱉甲軟肝片l.lg/kg。每天灌胃給藥 一次，連續(xù)灌胃7天。末次給藥后lh，除正常對(duì)照組外，其余小鼠均腹腔注射D-氨
13空腹采血，分離血清， 以日立7060型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中AST、 ALT指標(biāo)，采血后處死動(dòng)物并取 肝臟，肝臟組織標(biāo)本經(jīng)常規(guī)10%福爾馬林液固定，石蠟切片，H-E染色，光鏡下觀(guān)察 各組大鼠肝組織的病理改變情況。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。
表3組合物對(duì)D-氨基半乳糖所致急性肝損傷小鼠血清生化指標(biāo)的影響(y±S)
組別劑量動(dòng)物數(shù)ALTAST
(g/kg)(n)(U/L)(U/L)
正常組/1022.7±5.1"101.3±22.5**
模型組/10551.3±109.2399.5±85.6
陽(yáng)性藥組1.1102卯.6±80.6**
給藥高劑量組2410303.2±88.7**280.6±90.7**
給藥中劑量組1210387.1±97.6**322.4±78.8**
給藥低劑量組610502.6±105.4387.6±99.5
注與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01
由表3可見(jiàn)，腹腔注射D-氨基半乳糖可造成小鼠肝功能明顯損傷，模型組小鼠 血清中AST、 ALT水平均極顯著地高于正常對(duì)照組(PO.Ol)。而給予本發(fā)明高、中、 低劑量的小鼠肝功能則有明顯恢復(fù)，其血清中AST、 ALT水平與模型組相比均有極 顯著降低(PO.Ol)。
小鼠肝臟病理組織學(xué)檢査結(jié)果表明由D-氨基半乳糖所造成的小鼠急性肝功能 損傷模型造模成功，模型組小鼠肝細(xì)胞呈凝固性壞死并伴有少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，肝組 織病變明顯，而本處方各給藥組小鼠肝臟組織病變程度均較模型組有明顯改善，尤 其以給藥高、中、低劑量組小鼠病變改善作用更為顯著。
本發(fā)明藥物。此結(jié)果提示本方對(duì)D-氨基半乳糖所引起的小鼠急性肝功能損傷有 明顯的防治作用。
試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明小鼠預(yù)防給藥給予本發(fā)明藥物，并經(jīng)腹腔注射D-氨基半乳糖造 成急性肝損傷模型，本發(fā)明藥物對(duì)于腹腔注射D-氨基半乳糖所造成的急性肝功能損 傷小鼠血清中異常升高的AST、 ALT水平均有極顯著的降低作用(PO.Ol)，對(duì)腹腔 注射D-氨基半乳糖所引起的小鼠急性肝功能損傷有明顯的防治作用；病理組織學(xué)檢 査結(jié)果表明本方預(yù)防給藥對(duì)D-氨基半乳糖所造成的急性肝功能損傷小鼠的肝臟有明顯的保護(hù)作用，其肝臟組織病理學(xué)改變與模型組相比有顯著的改善，說(shuō)明本發(fā)明藥 物具有明顯的保肝作用。
實(shí)驗(yàn)例3本發(fā)明中藥組合物對(duì)小鼠的護(hù)肝作用試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法清潔級(jí)KM小鼠60只，體重18-20g，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，即正常 對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組及高、中、低劑量給藥組。正常及模型組均灌胃給予等容 積的蒸餾水，高、中、低劑量組分別灌胃給予本發(fā)明藥物24g生藥/kg、 12g生藥/kg、 6g生藥/kg，陽(yáng)性藥組灌胃給予復(fù)方鱉甲軟肝片l.lg/kg。每天灌胃給藥一次，連續(xù)灌 胃7天。末次給藥后lh，除正常對(duì)照組外，其余小鼠均腹腔注射0.iy。四氯化碳0.1ml/10g 造成小鼠急性肝損傷模型。于造模后16h空腹采血，分離血清，以日立7060型全自動(dòng) 生化分析儀檢測(cè)血清中AST、 ALT指標(biāo)，采血后處死動(dòng)物并取肝臟，肝臟組織標(biāo)本經(jīng) 常規(guī)10%福爾馬林液固定，石蠟切片，H-E染色，光鏡下觀(guān)察各組大鼠肝組織的病理 改變情況。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。 1血液生化指標(biāo)的變化
表4組合物對(duì)四氯化碳所致急性肝損傷小鼠血清生化指標(biāo)的影響(Z士S)
組別劑量動(dòng)物數(shù)ALTAST
(g/kg)(n)(U/L)(U/L)
正常組/1024.6±5.1**85.8士18.1^
模型組/101133.2±105.9526.5±101.8
陽(yáng)性藥組1.110410.3±85.6**371.2士99.6"
給藥高劑量組2410523.6±88.1**331.2±74.6**
給藥中劑量組1210694.7±102.2**357.7±96.7**
給藥低劑量組6101025.3±301.1511.6±105.8
注-與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01。
由表4可見(jiàn)，腹腔注射四氯化碳可造成小鼠肝功能明顯損傷，模型組小鼠血清中 AST、 ALT水平均極顯著地高于正常對(duì)照組(PO.Ol)。而給予本發(fā)明高、中劑量藥物 的小鼠肝功能則比模型組有明顯改善，其血清中AST、 ALT水平與模型組相比均有 極顯著降低(PO.Ol)。
由病理組織學(xué)檢査結(jié)果可知由四氯化碳所造成的小鼠急性肝功能損傷的模型組小鼠肝細(xì)胞水腫、變性明顯，而本發(fā)明的高、中、低劑量給藥組小鼠肝臟組織病變程 度均較模型組有明顯改善，尤其以給藥高、中劑量組小鼠病變改善作用更為顯著。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明小鼠預(yù)防給藥給予本發(fā)明藥物組合物后經(jīng)腹腔注射四氯化碳造成急 性肝損傷模型，本發(fā)明高、中劑量給藥組對(duì)于腹腔注射四氯化碳所造成的急性肝功能 損傷小鼠血清中異常升高的AST、 ALT水平均有極顯著的降低作用(PO.Ol)，說(shuō)明本 發(fā)明藥物對(duì)腹腔注射四氯化碳所引起的小鼠急性肝功能損傷有明顯的防治作用；理組 織學(xué)檢查結(jié)果表明本發(fā)明藥物預(yù)防給藥對(duì)四氯化碳所造成的急性肝功能損傷小鼠的肝 臟有明顯的保護(hù)和預(yù)防作用，其肝臟組織病理學(xué)改變與模型組相比有顯著的改善，說(shuō) 明本方具有明顯的保肝作用。
本發(fā)明實(shí)施例中熊膽粉由福建歸真堂藥業(yè)股份有限公司提供；丹參、姜黃、黃芪 購(gòu)自南京市醫(yī)藥有限公司。 實(shí)施例1本發(fā)明藥物的膠囊劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg): 熊膽粉l、丹參20、姜黃40、黃芪60
2、 制備黃芪干浸膏
2-1)將黃芪加入到水中，加熱煎煮提取，共提取2次，合并兩次的黃芪提取液， 其中，第一次提取時(shí)加入的水的體積與黃芪的重量之比為10: 1，即lkg黃芪加入10L 水，第二次提取時(shí)加入的水的體積與黃芪的重量之比為8: 1，即lkg黃芪加入8L水， 提取時(shí)間為2h/次；
2-2)將黃芪提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液 的體積為60L，相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含1.0 g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮 提取液中含有l(wèi)kg黃芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為1: 1，然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，濃 縮溫度為50'C;真空干燥溫度為5(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即以一個(gè)大 氣壓為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07MPa)，黃芪干浸膏的含 水率為2%;
3、 制備姜黃干浸膏3-1)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為80%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次，
合并三次的姜黃提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1，即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，即lkg姜黃加入10L乙醇；第三次提取時(shí)乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1， 即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為3h/次；
3- 2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的
體積為40L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含1.0g姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提取
液中含有l(wèi)kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為1: 1;
然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫 度為60'C;真空干燥溫度為5(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，姜黃干浸膏的含水率 為1%;
4、制備丹參干浸膏
4- 1)將丹參加入到水中，加熱提取，共提取3次，合并三次的丹參提取液，其中， 第一次提取時(shí)的水的體積與丹參的重量之比為10: 1，即lkg丹參加入10L水；第二
次提取時(shí)水的體積與丹參的重量之比為8: 1， S卩l(xiāng)kg丹參加入8L水；第三次提取時(shí) 水的體積與丹參的重量之比為8: 1， B卩l(xiāng)kg丹參加入8L水；提取時(shí)間為lh/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為15.4L，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.3g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.3kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.3: 1，接著加入無(wú)水乙醇使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比濃度為80%，攪勻， 放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮 時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè) 大氣壓為-0.09MPa),濃縮溫度為60'C;丹參濃縮液的體積為20L，相當(dāng)于每毫升丹 參濃縮液中含有l(wèi)g丹參生藥，每升丹參濃縮液中含lkg丹參生藥，即生藥丹參的重 量與丹參濃縮液體積之比為1: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為5(TC， 千燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，丹參干浸膏的含水率為0.5%; 5、制備膠囊劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為80目的粉末后加入 熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料蔗糖粉、硬脂酸鎂混合后，裝入明膠硬膠囊即得。
實(shí)施例2本發(fā)明藥物的顆粒劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg): 熊膽粉2、丹參IO、姜黃30、黃芪60
2、 制備黃芪干浸膏
2-1)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為10%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并三次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1，
即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1， 即lkg黃芪加入8L乙醇；第三次提取時(shí)乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1，即lkg 黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.5h/次；
2- 2)將提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體積為 75L,相當(dāng)于每毫升濃縮提取液中含0.8g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮液中含0.8kg黃
芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為0.8: 1，然后進(jìn)行真空干
燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即以一個(gè)大氣壓為 0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫度為7(TC;真空 干燥溫度為4(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制干燥時(shí) 的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，黃芪干浸膏的含水率為2%;
3、 制備姜黃干浸膏
3- l)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為70%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1， 即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，
即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為2.5h/次；
3-2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的 體積為22L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含1.4g姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提取液中含有1.4kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為1.4: 1;
然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07MPa);濃縮溫 度為50。C;真空干燥溫度為5(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa，姜黃干浸膏的含 水率為0.5%;
4、 制備丹參干浸膏
4-1)將丹參加入到水中，加熱提取，共提取3次，合并三次的提取液，其中，第
一次提取時(shí)的水的體積與丹參的重量之比為10: 1，即lkg丹參加入10L水；第二次 提取時(shí)水的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg丹參加入8L水；第三次提取時(shí)水 的體積與丹參的重量之比為8: 1，艮卩l(xiāng)kg丹參加入8L水；提取時(shí)間為1.5h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為IOL，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.0g丹參生藥，或每升丹參濃縮提
取液中含有l(wèi).Okg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為1.0:
1，接著加入無(wú)水乙醇使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比濃度為40%，攪勻，放 置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮時(shí) 的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大 氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫度為70'C;丹參濃縮液的體積為5L，相當(dāng)于每毫升丹參濃 縮液中含有2g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含2kg丹參生藥，即生藥丹參的重量 與丹參濃縮液體積之比為2: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為7(TC， 干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于 一個(gè)大氣壓為-0.07MPa)，丹參干浸膏的含水率為0.8%;
5、 制備顆粒劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為60目的粉末后加入 熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料糊精混合后，壓制成顆粒劑。
實(shí)施例3本發(fā)明藥物的片劑制備
1、按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg):
19熊膽粉1.5、丹參20、姜黃30、黃芪50
2、 制備黃芪干浸膏
2-l)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為30%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1， 即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃疾的重量之比為8: 1,
即lkg黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為2.5h/次；
2- 2)將黃芪提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體 積為41.7L，相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含1.2g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮提取 液中含有1.2kg黃芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為1.2: 1， 然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，濃縮溫 度為60'C;真空干燥溫度為50。C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，黃芪干浸膏的含水率 為1%;
3、 制備姜黃干浸膏
3- l)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為60%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1， 即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，
即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為2.0h/次；
3- 2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的 體積為24L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含1.25g姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提 取液中含有1.25kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為 1.25: 1;然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為 -0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為 -0.08MPa)，濃縮溫度為5(TC;真空干燥溫度為5(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa
(即以一個(gè)大氣壓為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，姜 黃干浸膏的含水率為0.5%;
4、 制備丹參干浸膏
4- 1)將丹參加入到質(zhì)量百分比濃度為20%的乙醇中，加熱提取，共提取2次，合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與丹參的重量之比為10: 1，即 lkg丹參加入10L乙醇；第二次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg 丹參加入8L乙醇；提取時(shí)間為3.0h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為13.3L，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.5g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.5kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.5: 1，接著加入無(wú)水乙醇使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比含量為60%，攪勻， 放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮 時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè) 大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫度為5(TC;丹參濃縮液的體積為20L,相當(dāng)于每毫升丹 參濃縮液中含有l(wèi)g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含lkg丹參生藥，即生藥丹參的 重量與丹參濃縮液體積之比為1: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為6(TC， 干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于 一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，丹參干浸膏的含水率為0.6%;
5、制備片劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為100目的粉末后加 入熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料淀粉混合后，壓制成片劑。
實(shí)施例4本發(fā)明藥物的丸劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg): 熊膽粉l、丹參20、姜黃40、黃芪80
2、 制備黃芪干浸膏
2-1)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為40%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1， 即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1，
即lkg黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.0h/次；
2-2)將黃芪提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體積為88.9L,相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含0.9g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮提取 液中含有0.9kg黃茛生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為0.9: 1， 然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa(即 以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.095MPa)，濃縮溫 度為50°C;真空干燥溫度為60'C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa，黃芪干浸膏的含 水率為1%;
3、 制備姜黃干浸膏
3-1)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為60%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1， 即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，
即lkg姜黃加入10L乙醇；第三次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1， 即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為1.0h/次；
3- 2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的 體積為40L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含lg姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提取
液中含有l(wèi)kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為1: 1;
然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa，濃 縮溫度為6(TC;真空干燥溫度為4(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa，姜黃干浸膏 的含水率為0.3%;
4、 制備丹參干浸膏
4- 1)將丹參加入到質(zhì)量百分比濃度為30%的乙醇中，加熱提取，共提取3次，合 并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與丹參的重量之比為10: 1，即 lkg丹參加入10L乙醇；第二次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg
丹參加入8L乙醇；第三次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg丹參 加入8L水；提取時(shí)間為1.0h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為15.4L，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.3g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.3kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.3: 1，接著加入無(wú)水乙醇使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比含量為70%，攪勻， 放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一 個(gè)大氣壓為-0.095MPa)，濃縮溫度為6(TC;丹參濃縮液的體積為20L，相當(dāng)于每毫升 丹參濃縮液中含有l(wèi)g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含lkg丹參生藥，即生藥丹參 的重量與丹參濃縮液體積之比為1: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為6(TC， 干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa，(即以一個(gè)大氣壓為O，控制真空千燥時(shí)的壓力相對(duì) 于一個(gè)大氣壓為-0.095MPa)丹參干浸膏的含水率為0.3%;
5、制備丸劑
將黃芪、姜黃和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為100目的粉末后加入熊膽粉，混 合均勻，制得混合粉末；
將混合粉末和輔料加入到制丸機(jī)中，制成丸劑。
實(shí)施例5本發(fā)明藥物的膠囊劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg): 熊膽粉3、丹參30、姜黃60、黃芪30
2、 制備黃芪干浸膏
2-l)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為50%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1， 即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1，
即lkg黃芪加入8L乙醇；第三次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1，即 lkg黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.5h/次；
2-2)將黃芪提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體 積為25L，相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含1.2§黃芪生藥，或每升黃芪濃縮提取液
中含有1.2kg黃芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為1.2: 1，
然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，濃縮溫 度為6CTC;真空干燥溫度為50°C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，黃芪干浸膏的含水率 為1%;
233、 制備姜黃干浸膏
3-l)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為50%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并得提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1，即lkg 姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1,即lkg 姜黃加入10L乙醇；第三次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，即lkg 姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為2.0h/次；
3- 2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的 體積為30L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含2g姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提取
液中含有2kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為2: 1;
然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫 度為6(TC;真空干燥溫度為4(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.095MPa)，姜黃干浸膏的含水率 為0.5%;
4、 制備丹參干浸膏
4- 1)將丹參加入到質(zhì)量百分比濃度為40%的乙醇中，加熱提取，共提取2次，合 并得提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與丹參的重量之比為10: 1，即lkg
丹參加入10L乙醇；第二次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg丹 參加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.0h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為23.1L，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.3g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.3kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.3: 1，接著加入無(wú)水乙醇，使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比含量為50%，攪 勻，放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓 濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于 一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，濃縮溫度為60。C;丹參濃縮液的體積為IOL，相當(dāng)于每毫 升丹參濃縮液中含有3g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含3kg丹參生藥，即生藥丹 參的重量與丹參濃縮液體積之比為3: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為5(TC，
24干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì) 于一個(gè)大氣壓為-0.095MPa)，丹參干浸膏的含水率為0.1%; 5、制備膠囊劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為80-100目的粉末后 加入熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料淀粉混合后，裝入明膠硬膠囊，制成膠囊劑。
實(shí)施例6本發(fā)明藥物的膠囊劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg):
熊膽粉5、丹參50、姜黃20、黃芪80
2、 制備黃芪干浸膏
2-l)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為60%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1，
即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1， 即lkg黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.5h/次；
2- 2)將黃芪提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體 積為53.3L，相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含1.5g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮提取 液中含有1.5kg黃芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為1.5: 1， 然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫 度為50。C;真空干燥溫度為50。C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.095MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.095MPa)，黃芪干浸膏的含水率 為0.5%;
3、 制備姜黃干浸膏
3- l)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為30%的乙醇中，加熱回流提取，共提取2次， 合并2次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1，
即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1， 即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為1.0h/次；
3-2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的體積為22.2L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含0.9g姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提 取液中含有0.9kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為0.9: 1;然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，濃 縮溫度為6(TC;真空干燥溫度為5(TC，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa，姜黃干浸膏 的含水率為0.8%;
4、 制備丹參干浸膏
4-1)將丹參加入到質(zhì)量百分比濃度為50%的乙醇中，加熱提取，共提取3次，合 并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與丹參的重量之比為10: 1，即
lkg丹參加入10L乙醇；第二次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg 丹參加入8L乙醇；第三次提取時(shí)乙醇的體積與丹參的重量之比為8: 1， S卩l(xiāng)kg丹參 加入8L水；提取時(shí)間為1.5h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為38.5L，相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.3g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.3kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.3: 1，接著加入無(wú)水乙醇使誕生濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比含量為50%，攪勻， 放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮 時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè) 大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫度為6CTC;丹參濃縮液的體積為50L，相當(dāng)于每毫升丹 參濃縮液中含有l(wèi)g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含lkg丹參生藥，即生藥丹參的 重量與丹參濃縮液體積之比為1: 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為7(TC， 干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.08MPa (即以一個(gè)大氣壓為O，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于 一個(gè)大氣壓為-0.08MPa)，丹參干浸膏的含水率為0.6%;
5、 制備膠囊劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為100目的粉末后加 入熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料微晶纖維混合后，裝入明膠硬膠囊，制成膠囊劑。實(shí)施例7本發(fā)明藥物的顆粒劑制備
1、 按照如下重量配比準(zhǔn)備原料(kg): 熊膽粉IO、丹參IO、姜黃IOO、黃芪200
2、 制備黃芪干浸膏
2-l)將黃芪加入到質(zhì)量百分比濃度為40%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為10: 1，
即lkg黃芪加入10L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1， 即lkg黃芪加入8L乙醇；第三次提取時(shí)的乙醇的體積與黃芪的重量之比為8: 1，即 lkg黃芪加入8L乙醇；提取時(shí)間為1.5h/次；
2- 2)將黃芪提取液進(jìn)行濃縮，得到黃芪濃縮提取液，其中，黃芪濃縮提取液的體 積為200L，相當(dāng)于每毫升黃芪濃縮提取液中含1.0g黃芪生藥，或每升黃芪濃縮提取
液中含有l(wèi)kg黃芪生藥，即生藥黃芪的重量與黃芪濃縮提取液的體積之比為1: 1，
然后進(jìn)行真空干燥，制得黃芪干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.07MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫 度為60°C;真空干燥溫度為50°C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓 為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，黃芪干浸膏的含水率 為1%;
3、 制備姜黃千浸膏
3- 1)將姜黃加入到質(zhì)量百分比濃度為20%的乙醇中，加熱回流提取，共提取3次， 合并3次的提取液，其中，第一次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為12: 1， 即lkg姜黃加入12L乙醇；第二次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1，
即lkg姜黃加入10L乙醇；第三次提取時(shí)的乙醇的體積與姜黃的重量之比為10: 1， 即lkg姜黃加入10L乙醇；提取時(shí)間為1.0h/次；
3-2)姜黃提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到姜黃濃縮提取液，其中，姜黃濃縮提取液的 體積為100L，相當(dāng)于每毫升姜黃濃縮提取液中含lg姜黃生藥，或每升姜黃濃縮提取
液中含有l(wèi)kg姜黃生藥，即生藥姜黃的重量與姜黃濃縮提取液的體積之比為1: 1，
然后進(jìn)行真空干燥，制得姜黃干浸膏，其中，減壓濃縮時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即 以一個(gè)大氣壓為0，控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫 度為50°C;真空干燥溫度為50°C，干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓
27為0，控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè)大氣壓為-0.09MPa)，姜黃干浸膏的含水率 為0.6%;
4、 制備丹參干浸膏
4-1)將丹參加入到水中，加熱提取，共提取3次，合并3次的提取液，其中，第 一次提取時(shí)的水的體積與丹參的重量之比為10: 1，即lkg丹參加入10L水；第二次
提取時(shí)水的體積與丹參的重量之比為8: 1，即lkg丹參加入8L水；第三次提取時(shí)水 的體積與丹參的重量之比為8: 1，艮卩l(xiāng)kg丹參加入8L水；提取時(shí)間為1.0h/次；
4-2)將丹參提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮提取液，其中，丹參濃縮提取液 的體積為7.7L,相當(dāng)于每毫升丹參濃縮提取液中含1.3g丹參生藥，或每升丹參濃縮 提取液中含有1.3kg丹參生藥，即生藥丹參的重量與丹參濃縮提取液的體積之比為 1.3: 1，接著加入無(wú)水乙醇使丹參濃縮提取液中乙醇的質(zhì)量百分比含量為80%，攪勻， 放置12小時(shí)，沉淀，過(guò)濾，濾液進(jìn)行減壓濃縮，得到丹參濃縮液，其中，減壓濃縮 時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O,控制減壓濃縮時(shí)的壓力相對(duì)于一個(gè) 大氣壓為-0.09MPa)，濃縮溫度為60'C;丹參濃縮液的體積為10L,相當(dāng)于每毫升丹 參濃縮液中含有l(wèi)g丹參生藥，或每升丹參濃縮液中含lkg丹參生藥，即生藥丹參的 重量與丹參濃縮液體積之比為h 1;
4-3)將丹參濃縮液進(jìn)行真空干燥，制得丹參干浸膏，其中真空干燥溫度為6(TC， 干燥時(shí)的相對(duì)壓力為-0.09MPa (即以一個(gè)大氣壓為O,控制真空干燥時(shí)的壓力相對(duì)于 一個(gè)大氣壓為-0.09MPa),丹參干浸膏的含水率為0.5%;
5、 制備顆粒劑
將黃芪干浸膏、姜黃干浸膏和丹參干浸膏混合，粉碎成粒度為150目的粉末后加 入熊膽粉，混合均勻，制得藥物混合粉末；
將藥物混合粉末與輔料淀粉、糊精混合后，壓制成顆粒劑。
權(quán)利要求
1、一種抗肝纖維化中藥組合物，其特征是包括如下原料熊膽粉、丹參、姜黃、黃芪。
2、 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征是所述原料的重量份配比為熊膽粉1-10、丹參10-50、姜黃20-100、黃萬(wàn)30-200。
3、 如權(quán)利要求2所述的中藥組合物，其特征是所述原料的重量份配比選擇熊膽粉1-5、丹參10-30、姜黃30-60、黃茛50-80。
4、 如權(quán)利要求3所述的中藥組合物，其特征是所述原料的重量份配比選擇為熊膽 粉l、丹參20、姜黃40、黃芪60。
5、 一種如權(quán)利要求1-4任一所述抗肝纖維化中藥組合物的制備方法，包括如下進(jìn)行 的步驟1) 制備黃芪干浸膏首先采用水或質(zhì)量百分比濃度為10-60%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)黃芪進(jìn)行加熱提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后將濃縮后的提取液進(jìn)行干燥，得黃芪干浸2) 制備姜黃干浸膏首先采用質(zhì)量百分比濃度為20-80%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)姜黃進(jìn)行加熱回流 提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后將濃縮后的姜黃提取液進(jìn)行干燥，得姜黃 干浸膏；3) 制備丹參干浸膏首先采用水或質(zhì)量百分比濃度為20-50%的乙醇溶液為提取溶劑對(duì)丹參進(jìn)行加熱 提取2-3次，接著合并并濃縮提取液，然后向濃縮后的丹參提取液中加入乙醇進(jìn)行沉 淀，過(guò)濾，最后濾液濃縮后進(jìn)行干燥，得丹參干浸膏；4)制備中藥組合物將黃芪、姜黃和丹參干浸膏混合，粉碎后加入熊膽粉，混合均勻，制得本發(fā)明藥 物組合物。
6、 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是步驟1)中每次所述加熱提取所采用提 取溶劑的體積與黃芪的重量之比為8-10: 1，提取時(shí)間為1-3小時(shí)/次。
7、 如權(quán)利要求5或6所述的制備方法，其特征是步驟2)中每次所述加熱提取所采 用的提取溶劑的體積與姜黃的重量之比為10-12: 1，提取時(shí)間為0.5-3小時(shí)/次。
8、 如權(quán)利要求5或6所述的制備方法，其特征是步驟3)中每次所述加熱提取所采 用的提取溶劑的體積與丹參的重量之比為8-10: 1，提取時(shí)間為1-3小時(shí)/次。
9、 如權(quán)利要求5或6所述的制備方法，其特征是步驟l)中濃縮后黃芪提取液的體 積與黃芪藥材的重量之比為0.5-1.5: 1;步驟2)中濃縮后姜黃提取液的體積與姜黃 藥材的重量之比為0.5-1.5: 1;步驟3)中濃縮后的丹參提取液的體積與丹參藥材的 重量之比為0.5-1.5: 1。
10、 如權(quán)利要求1至4任一所述中藥物組合物在制備治療和/或預(yù)防肝纖維化的藥物的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種抗肝纖維化的中藥組合物及其制備方法，該抗肝纖維化的中藥組合物由如下原料制成熊膽粉、丹參、姜黃和黃芪。本發(fā)明制備的抗肝纖維化的組合物，可以被制備成任何一種常用的內(nèi)服劑型，對(duì)肝纖維化、肝炎、脂肪肝、肝硬化等的療效顯著，具有明顯的保肝、護(hù)肝，降低轉(zhuǎn)氨酶和抑制干細(xì)胞纖維化的藥理作用。
文檔編號(hào)A61K36/88GK101632829SQ20091009216
公開(kāi)日2010年1月27日 申請(qǐng)日期2009年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月3日
發(fā)明者陳志鴻 申請(qǐng)人:福建歸真堂藥業(yè)股份有限公司