專利名稱：：一種二氫黃酮類化合物在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：3至今未見有關(guān)異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-P-D-葡萄糖苷具有防治糖尿病活性的報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明對異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-(3-D-吡喃葡萄糖苷提供一種制備防治糖尿病藥物的用途。本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證明，異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-P-D-吡喃葡萄糖苷具有明顯的抑制a-淀粉酶的活性。因此可用于制備防治糖尿病藥物。'本發(fā)明采用碘法，選用葡萄糖檢測試劑盒(葡萄糖氧化酶一過氧化物酶法，.上海榮盛生物技術(shù)有限公司，20070722)，檢測異奧卡寧或異奧卡寧-7-ap—D-吡喃葡萄糖苷對a-淀粉酶的抑制作用，以顯示其降糖活性。方法如下將異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-(3-D-吡喃葡萄糖苷配制成一定濃度的溶液，向待測樣品溶液中分別加入27.8mg/L的a-淀粉酶溶液，37。C溫孵10min，再加入0.16°/。的淀粉溶液，37。C溫孵10min后加500ML顯色試劑，同時反應(yīng)終止，在630nm波長下測定吸光度(A),吸光度A所反映的是被酶水解的淀粉的量，直接反映淀粉酶的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-p-D-吡喃葡萄糖苷具有顯著的抑制a-淀粉酶的活性，亦即能抑制ci-淀粉酶將淀粉分解為糖，顯示了其降糖活性，因此可用于制備防治糖尿病藥物。本發(fā)明為尋找防治糖尿病藥物提供了一種新的來源。具體實(shí)施例方式下面通過體外實(shí)驗(yàn)，對本發(fā)明作詳細(xì)描述。異奧卡寧體外降糖活性試驗(yàn)1、試驗(yàn)藥物異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-p-D-吡喃葡萄糖苷從鬼針草中分離得到，制備方法詳見MeeJungJung,etal.ArchPharmRes，2004，27(6):593-599;Dziedzic,etal"JournalofAgriculturalandFoodChemistry,1985,33(2)，244;王建平，等，中草藥，'1992,23(5):229-231。2試劑和材料葡萄糖檢測試劑盒(葡萄糖氧化酶—過氧化物酶法，上海榮盛生物技術(shù)有限公司，20070722);阿卡波糖(BayerAG,Wuppertal,German);a-淀粉酶(WakoPureChemicalsInd.,Ltd.，Osaka,Japan);其他試劑(分析純)。3實(shí)驗(yàn)儀器酶標(biāo)儀(Elx800，Biotek);96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning/Costar)4、實(shí)驗(yàn)方法將異奧卡寧和異奧卡寧-7-0-P-D-吡喃葡萄糖苷分別用DMSO配制成10mg/ml的溶液，再用水逐級稀釋成高、中、低三個濃度，依次為0.062mg/ml、0.185mg/ml、0.556mg/ml;將阿卡波糖用蒸餾水配制成濃度為0.556mg/ml溶液；將a-淀粉酶用25mM的PIPES緩沖液配制成濃度為27.8mg/L溶液，PH6.9;將淀粉用蒸餾水配制成濃度為0.16%的淀粉溶液。顯色劑先將苯甲酸鈉10.8克，碘化鉀5克溶于400ml水中，然后定溶至500mL。用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，實(shí)驗(yàn)分5組，空白對照組、陽性對照組(阿卡波糖組)、異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-^-D-吡喃葡萄糖苷高(0.556mg/ml)、中(0.185mg/ml)、低(0.062mg/ml)劑量組。分別將上述異奧卡寧或異奧卡寧-7-0-0-D-吡喃葡萄糖苷高、中、低三個濃度的溶液及阿卡波糖溶液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上編組的相應(yīng)各孔，每孔25pl樣品溶液，空白對照組加等量蒸餾水，每組各設(shè)6個復(fù)孔，分別于其中三個孔中加入12.5^ilcx-淀粉酶溶液，另三個孔加12.5pl蒸餾水，然后于每個孔中加入12.5(il淀粉溶液，于37r溫孵10min，再分別于各孔加入500pL顯色試劑，反應(yīng)同時被終止，按常規(guī)在630nm波長下測定吸光度(J)，抑制率(％)計算公式如下抑制率(％)=[1-(樣品不加酶-樣品加酶)/(空白對照小細(xì)-空白對照加酶)&100%5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果異奧卡寧試驗(yàn)結(jié)果見表l。6表1異奧卡寧對a-淀粉酶的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表1可見，異奧卡寧高劑量組對a-淀粉酶具有明顯的抑制作用，其抑制率接近陽性對照組。因此異奧卡寧可用于制備防治糖尿病藥物。異奧卡寧-7-0-f3-D-吡喃葡萄糖苷的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表2異奧卡寧-7-0-(3-D-葡萄糖苷對a-淀粉酶的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表2可見，異奧卡寧-7-0-P-D-吡喃葡萄糖苷高劑量組對a-淀粉酶的抑制率接近陽性對照組。因此也可用于制備防治糖尿病藥物。權(quán)利要求1、一種二氫黃酮類化合物在制備防治糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所說二氫黃酮類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如下其中，R基團(tuán)表示H或C6H11O5。全文摘要本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，是鬼針草中二氫黃酮類化合物異奧卡寧或異奧卡寧-7-O-β-D-葡萄糖苷用于制備防治糖尿病藥物的用途。本發(fā)明通過建立α-淀粉酶反應(yīng)體系，對異奧卡寧或異奧卡寧-7-O-β-D-葡萄糖苷單體化合物進(jìn)行了體外降糖活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，它們均具有顯著降糖活性，因此可用于制備防治糖尿病藥物。本發(fā)明為尋找防治糖尿病藥物提供了一種新的來源。文檔編號A61K31/7048GK101548982SQ20091005100公開日2009年10月7日申請日期2009年5月12日優(yōu)先權(quán)日2009年5月12日發(fā)明者劉建國,孫連娜,楊小唯,趙衛(wèi)權(quán),金永生,陳海生,黃敏珠申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)