專利名稱：連翹酯苷a在制備治療流感藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術領域，具體涉及連翹酯苷A的醫(yī)藥新用途。
背景技術：
連翹酯苷A (Forsythoside A)是從木犀科連翹屬植物連翹(Fructus Forsythiae) 中提取的有效成分。以前是以連翹苷作為考察連翹提取工藝的指標，近年來隨著連翹有效 成分研究的深入，發(fā)現(xiàn)連翹苷無抗菌活性，發(fā)揮抗菌活性的是連翹酯苷A，其結構式如下 近年來，有文獻報道，連翹酯苷有良好的抗菌作用如王宏軍等報道連翹酯苷在體 外和對引發(fā)奶牛乳房炎的主要致病菌金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、無乳鏈球菌均有較好 的抑制作用；如馮淑怡等報道，連翹酯苷對綠膿桿菌、大腸桿菌、金黃色葡菌球菌致病的模 型小鼠具有很好地抗感染作用。連翹酯苷中幾乎全部是連翹酯苷A在起作用。目前現(xiàn)有技術對連翹酯苷A的抗病毒藥理活性研究很少。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供連翹酯苷A在制藥中的新用途，具體涉及連翹 酯苷A在制備治療流感藥物中的用途。本發(fā)明通過連翹酯苷A抗流感病毒試驗，觀察連翹酯苷A抗流感病毒的藥效作用。 本發(fā)明試驗方案分別采用了連翹酯苷A的凍干粉針劑和口服制劑。本發(fā)明隨后的連翹酯苷A抗流感病毒試驗結果表明連翹酯苷A對小鼠流感病毒 具有明顯抑制作用，效果與劑量呈現(xiàn)量效關系。
具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。這些實施例應理解為僅用于說明本發(fā) 明而不用于限制本發(fā)明的保護范圍。在閱讀了本發(fā)明記載的內容之后，本領域技術人員可 以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等效變化和修飾同樣落入本發(fā)明權利要求所限定的范圍。實施例1 (連翹酯苷A抗流感病毒試驗)一、試驗目的
觀察連翹酯苷A對小鼠流感病毒抑制試驗的藥效作用。二、試驗材料受試藥物連翹酯苷A凍干粉針劑，由上海玉森新藥開發(fā)有限公司提供，批號 060909。連翹酯苷A的制備方法可參見中國專利CNlO 1081855A、CNlO 1081856A、 CN101081857A、CN1899382A 或 CN101209286A。陽性對照藥物利巴韋林。動物昆明小鼠，體重18 20克，雌雄兼用。復旦大學實驗動物科學部提供，許可 證號SCXK (滬)2007-0002。毒株流感病毒Al型(HlNl)鼠肺適應株FM1，由北京中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技 術研究所提供。6、受試藥物藥液配制(1)連翹酯苷A供試液 A，400mg/kg劑量組取連翹酯苷A凍干粉用生理鹽水溶解配成40mg/ml連翹酯苷 A溶液(a液)，每次給藥0. 2ml/20g小鼠；B, 200mg/kg劑量組取上述a液用生理鹽水稀釋1倍，配成20mg/ml連翹酯苷溶 液(b液)每次給藥0. 2ml/20g小鼠；C，100mg/kg劑量組取上述b液用生理鹽水稀釋1倍，配成10mg/ml連翹酯苷A溶 液每次給藥0. 2ml/20g小鼠。(2)利巴韋林供試液(每支利巴韋林溶液100mg/ml)50mg/kg劑量組取利巴韋林0. 5ml，用生理鹽水稀釋至10ml，每次給藥0. 2ml/20g小鼠。三、試驗方法1，連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護試驗取小鼠，隨機分組，每組6只，雌雄分組，實驗設(1)、正常對照組生理鹽水，0. 2ml/10g/dX6(2)、病毒對照組；(3)、陽性對照組利巴韋林靜脈注射50mg/kg劑量組口服給藥100mg/kg(4)、靜脈注射給藥組①、400mg/kg劑量組②、200mg/kg劑量組③、100mg/kg劑量 組，口服給藥①、1000mg/kg②、500mg/kg③、250mg/kg劑量組除正常對照組外小鼠均滴鼻感染8 10LD50病毒量，靜脈注射組2小時后即尾靜 脈注射給藥，每日一次，共給藥四天；口服組2小時后口服給藥，每日一次，共給藥七天。觀 察二周，記錄死亡數(shù)，作統(tǒng)計學處理，計算P值并計算平均生活日和生命延長百分比。2，連翹酯苷A對流感病毒感染小鼠引起的肺病變的影響試驗取小鼠，每組8只，雌雄分組，分組與給藥次數(shù)及感染病毒量同上試驗，感染給藥 后第4-5天左右解剖小鼠，觀察小鼠肺病變情況，與病毒對照組比較肺病變百分比，計算藥 物對小鼠肺病變抑制率百分比。并稱取小鼠體重和肺重，計算肺指數(shù)。并取肺用血凝法進 行病毒毒力(滴度)的檢測。四、試驗結果
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1，靜脈注射連翹酯苷A抗流感病毒對生命的保護靜脈注射給藥400、200、100mg/kg連翹酯苷A對流感病毒感染的小鼠有生命保 護作用，雌性小鼠生命延長89.8%,57.6%,33.9%,雄性小鼠生命延長68. 7 %、41. 8 %和 23.9%。鑒于病毒組小鼠感染第9天時全數(shù)死亡，計算連翹酯苷A對流感病毒感染雌性小鼠 生命保護的半數(shù)有效濃度(EC50)為256mg/kg，雄性小鼠生命保護的半數(shù)有效濃度(EC50) 為292mg/kg，平均半數(shù)有效濃度(EC50)為272mg/kg。表1靜脈注射連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護(I) * :p < 0. 05 :p < 0. 01表2靜脈注射連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護(II) * :p < 0. 05 ；** :p < 0. 01表3靜脈注射連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護(匯總表) * :p < 0. 05 ；** :p < 0. 01表4連翹酯苷A抗流感病毒ED50的計算(陽性時間限(天)彡9) ED50 = 256mg/kg (雌性) ED50 = 292mg/kg (雄性) ED50 = 272mg/kg2，口服連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護(表5、6)表5 口服連翹酯苷A對小鼠流感病毒感染后生命保護 * :p < 0. 05 ；** :p < 0. 01表6連翹酯苷A抗流感病毒ED50的計算(陽性時間限(天)彡9) 由于藥物組動物生存?zhèn)€數(shù)都沒有達到50%的陽性，因此無法計算ED50。3，連翹酯苷A對流感病毒感染小鼠肺指數(shù)和肺病變的影響(表7、表8)流感病毒感染小鼠給藥后，解剖結果與病毒對照組相比，給藥400、200、100mg/kg 連翹酯苷A，肺指數(shù)分別減輕了 39.6%，18. 2%，20.9%，肺部病變減輕了 61. 1%,37.8%, 12. 9%。表7連翹酯苷A對流感病毒感染小鼠肺指數(shù)的影響 * :p < 0. 05 ；** φ < 0. 01 (η = 8)肺指數(shù)=(肺重 / 總重)X 100%肺指數(shù)減小率={(病毒對照肺指數(shù)-給藥組肺指數(shù))/病毒對照肺指數(shù)} X 100%表8連翹酯苷A對流感病毒感染小鼠肺病變的影響 * :p < 0. 05 ；# φ < 0. 01 ；肺病變減輕率={(病毒對照病變率_給藥組肺病變 率)/病毒對照肺病變率} X 100% 4，連翹酯苷A抗流感病毒對肺病毒毒力的影響病毒感染5天，和病毒組相比，連翹酯苷A給藥組400mg/kg，200mg/kg，100mg/kg, 肺部病毒滴度下降了 80. 2%，60. 9%，30. 7%。表9連翹酯苷A抗流感病毒對肺病毒毒力的影響 * :P < 0. 05，** :P < 0. 01，(η = 8)平均稀釋倍數(shù)越大，代表著病毒毒力越強。五、試驗結論試驗顯示連翹酯苷A對小鼠流感病毒有抑制，效果與劑量呈現(xiàn)量效關系。與病毒 對照組比較，給藥400、200、100mg/kg連翹酯苷A可抑制流感病毒，對雄性小鼠生命延長 68. 7%、41. 8%和23. 9%，對雌性小鼠生命延長89. 8%, 57. 6%, 33. 9% 連翹酯苷A對流 感病毒感染雌性小鼠生命保護的半數(shù)有效濃度(EC50)為256mg/kg，流感病毒感染雄性小 鼠生命保護的半數(shù)有效濃度(EC50)為292mg/kg，平均半數(shù)有效濃度(EC50)為272mg/kg。 流感病毒感染小鼠給藥后，解剖結果與病毒對照組相比，給藥400、200、100mg/kg連翹酯苷 A，肺指數(shù)分別減輕了 39.6%，18. 2%，20.9%，肺部病變減輕了 61. 1 %，37. 8%，12. 9%，肺 部病毒滴度下降了 80. 2%，60. 9%，30. 7%?？诜o藥對流感病毒的抑制作用較弱。試驗結論表明，連翹酯苷A在小鼠顯示對流感病毒的有效抑制。
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權利要求
連翹酯苷A在制備治療流感藥物中的用途。
2.連翹酯苷A在制備抑制流感病毒藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了連翹酯苷A在制備治療流感藥物中的用途。連翹酯苷A的抗流感病毒試驗表明，連翹酯苷A能夠有效抑制流感病毒。
文檔編號A61K31/7032GK101879174SQ20091005077
公開日2010年11月10日 申請日期2009年5月7日 優(yōu)先權日2009年5月7日
發(fā)明者玄振玉 申請人:上海玉森新藥開發(fā)有限公司