專利名稱：銀、殼聚糖和/或其衍生物納米復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化工及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米 復(fù)合物粉劑的制備方法及在治療女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛、褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、 燙傷、創(chuàng)傷、及其他皮膚炎癥、手足癬等藥物上的應(yīng)用，還可用于制備各種外傷敷料如薄 膜、海綿、婦科用栓劑、貼膜等。
背景技術(shù)：
殼聚糖是甲殼素的脫乙跣化產(chǎn)物，是自然界中存在的堿性氨基性多糖。近年來，國內(nèi) 外學(xué)者的研究表明，殼聚糖及其衍生物具有止血、止痛、調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞和成纖細(xì)胞生長和 廣泛的抑菌作用，并且，具有及良好的生物相容性，因此，許多學(xué)者將其作為創(chuàng)面愈合的 促進劑，各種研究也證實殼聚糖及其衍生物能夠促進創(chuàng)面愈合。不同濃度、不同來源的殼 聚糖及其衍生物一方面促進纖維細(xì)胞的增殖，有利于新生修復(fù)組織的結(jié)構(gòu)重塑和構(gòu)建，能 增強或恢復(fù)傷口愈合后的力學(xué)強度；另 一方面抑制成纖細(xì)胞的過度繁殖，防止疤痕增生， 有利于外觀和功能的恢復(fù)，使傷口得到高質(zhì)量愈合。Kweon， ( 2003 )、 0kamoto (2002; 1995)、 Ueno (1999) ( Kweon DK， Song SB， Park YY. Preparation of water-soluble chitosan/heparin complex and its application as wound healing accelerator. Biomaterials. 2003 Apr; 24 (9): 1595-601; 0kamoto Y， WatanabeM， MiyatakeK， MorimotoM， Shigemasa Y， Minami S. Effects of chitin/chitosan and their oligomers/monofflers on migrations of fibroblasts and vascular endothel ium. Biomaterials. 2002 May; 23 (9): 1975-9; Okamoto Y， Shibazaki K， Minami S， Matsuhashi A, Tanioka S， Shigeraasa Y. Evaluation of chitin and chitosan on open would healing in dogs.J Vet Med Sci. 1995 Oct; 57 (5): 851-4; Ueno H， Yaraada H， Tanaka I， Kaba N， Matsuura M， Okumura M， Kadosawa T， Fujinaga T. Accelerating effects of chitosan for healing at early phase of experimental open wound in dogs. Biomaterials. 1999 Aug; 20 (15): 1407-14.)等在實驗中都發(fā)現(xiàn)殼聚糖能 夠促進動物皮膚創(chuàng)傷處上皮化，形成肉芽組織，促進多形核細(xì)胞的浸潤及成纖維細(xì)胞合成 月交原，,人而促進傷口愈合。Wittaya-Areekul S等(2006 ) (Wittaya—Areekul S, Prahsarn C. Development and in vitro evaluation of chitosan-polysaccharides composite wound dressings. 2006 Feb 17;)以殼聚糖為原料，加入玉米淀粉或右旋糖苦，制備的殼聚糖傷 口敷料具有較佳的特性，劉德伍(劉德伍，幾種生物材料對人表皮細(xì)胞DNA合成的影響， 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床.2003, 7 (3). 133-134 )的研究結(jié)果證實，殼聚糖對人表皮細(xì)胞DNA合 成具有促進作用。王曉芽等報道(王曉芹，王貴波等，殼聚糖膠原生物敷料對深n度燒傷 創(chuàng)面脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的影響及意義，中國臨床康復(fù).2002， 6(l4). 2075_2076。王秀芹，林 麗，王曉芹，李曉輝，殼聚糖膠原生物敷料應(yīng)用后深H度燒傷創(chuàng)面N0和N0S變化及意義， 中華醫(yī)學(xué)寫作雜志.2003， 10(5)M04-407 ),殼聚糖與鼠尾膠原分別按1: 9和1: 1配成敷料原液并制成殼聚糖膠原生物敷料，殼聚糖膠原生物敷料組各時相點創(chuàng)面愈合率較自然愈 合組高；殼聚糖膠原生物敷料對大鼠深n度燒傷創(chuàng)面有促愈合作用并呈劑量相關(guān)性，使 用殼聚糖膠原生物敷料后，創(chuàng)面脂質(zhì)過氧化反應(yīng)程度減輕、EGF和bFGF表達(dá)增強、 一氧化 氮(NO )含量和一氧化氮合酶(N0S )活性降低。動物實驗和臨床應(yīng)用均表明，殼聚糖對慢 性頑固性、污染傷口有效。
納米銀具有較強抑菌、殺菌作用及其廣鐠的抗菌活性，且由于量子效應(yīng)、小尺寸效應(yīng) 和具有極大的比表面積，因而具有傳統(tǒng)無機抗菌劑無法比擬的抗菌效果，成為很有發(fā)展前 景的新一代抗菌藥物。納米銀作為抗菌材料在醫(yī)用導(dǎo)管、手術(shù)器械、牙科抗菌材料、生殖 健康、計劃生育用具以及創(chuàng)傷敷料等方面的應(yīng)用也日趨廣泛，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用的 前景。以殼聚糖及其衍生物作為載體、分散劑和保護劑的銀一一殼聚糖及其衍生物納米復(fù) 合物粉劑的制備方法及應(yīng)用未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的之一是提供一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納 米復(fù)合物及其制備方法。
本發(fā)明的目的之二是提供上述銀、殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物粉劑在制備治療皮膚 潰瘍、褥瘡、燒傷、治療女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛、皮膚炎癥、手足褲等的藥物中
的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的之三是提供上述銀、殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物粉劑在制備各種外傷 敷料如薄膜、海綿、婦科用栓劑、貼膜等中的應(yīng)用。 本發(fā)明的技術(shù)方案是
一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，采用固相合成法制備，步驟如下
(1) 將殼聚糖及殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉；
(2) 將硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨l ~ 3小時，殼聚糖 和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 - 0. 5 (優(yōu)選100: 0.005 - 0.3， 更優(yōu)選100: 0.05 - 0.2 );
(4)加入還原劑，還原劑與竭酸銀的還原當(dāng)量比為l: 1-2: 1，充分研磨2-6小時， 即得銀粒徑為l-100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；
所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧曱基曱殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種；
所述還原劑為葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、檸檬酸鈉、抗壞血酸、異抗壞血酸、水合 肼、曱醛、糊精或右旋糖苷等。
本發(fā)明的另 一種不同的技術(shù)方案是
一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，采用固相合成法制備，步驟如下
(1) 將殼聚糖及殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉；
(2) 將硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨l ~ 3小時，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~ 0. 5 (優(yōu)選100: 0. 005 ~ 0.3, 更優(yōu)選100: 0.05 - 0.2 );
(4 )將步驟(3 )得到的細(xì)粉進一步研磨l ~ 6小時，暴露于光源下24 ~ 48小時，即得銀 粒徑為l ~ 100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；
所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧曱基曱殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰曱殼素中的一種或數(shù)種，
所述光源為-與鴒燈光、紫外燈光或自然光。
本發(fā)明的另一種不同的技術(shù)方案是
一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，采用液相合成法制備，步驟如下 (1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物溶于弱酸性水溶液或水，充分?jǐn)嚢?，使其質(zhì)量濃度 為l ~ 3%;
(2 )將硝酸銀配置成質(zhì)量濃度為O. 001 ~ 1°/。(優(yōu)選0. 01 ~ 0. 5%,更優(yōu)選0. 1 ~ 0. 5% ) 的硝酸4艮水溶液或銀氨水溶液；
(3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1)所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水 溶液或銀氨水溶液，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~ 0. 5 (優(yōu)選100: 0.005 - 0.3,更優(yōu)選100: 0.05 - 0.2 )，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1 6 小時；
(4)在劇烈攪拌下，向步驟(3)所得溶液逐滴緩慢加入還原劑水溶液，還原劑與硝 酸銀的還原當(dāng)量比為l: 1~2: 1,滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1 6小時；
所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧曱基曱殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種，
所述還原劑水溶液為葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、檸檬酸鈉、抗壞血酸、異抗壞血 酸、水合肼、曱醛、糊精或右旋糖苷等的水溶液；
(5 )向步驟(4 )所得溶液加入有機溶劑沉淀脫水，千燥成粉，即得銀粒徑為l ~ 100nm 的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。
前面所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，在優(yōu)選的方案中，步驟U) 中所述弱酸性水溶液為質(zhì)量濃度為O. 5%~ 1°/。的醋酸水溶液。
前面所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，在優(yōu)選的方案中，步驟(5) 中所述有機溶劑為乙醇或丙酮等。
本發(fā)明的另 一種不同的技術(shù)方案是 一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，采用液相合成法制備，步驟如下 (1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物溶于水或弱酸性水溶液，充分?jǐn)嚢?，使其質(zhì)量濃度 為1~3°/。；
(2 )將硝酸銀配置成質(zhì)量濃度為0. 001 ~ 1% (優(yōu)選0. 01 ~ 0. 5%，更優(yōu)選0. 1 ~ 0. 3% ) 的硝酸銀水溶液或銀氨水溶液；
(3)在劇烈攪拌下，向步驟(1)所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸^l艮水 溶液或銀氨水溶液，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~0. 5(優(yōu)選100: 0.005 - 0.3,更優(yōu)選100: 0.05 - 0.2 ),滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1 6 小時；
(4)向步驟(3)所得溶液加入有機溶劑沉淀脫水，干燥成粉，暴露于光源下24 48 小時，即得銀粒徑為l-100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；
所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧甲基甲殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種，
所述光源為碘鵠燈光、紫外燈光或自然光。
前面所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，在優(yōu)選的方案中，步驟(4) 所述有機溶劑為乙醇或丙酮等。
前面所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物既 作為穩(wěn)定劑和分散劑，也作為功能物質(zhì)。
所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物在制備治療陰道炎、宮頸炎、宮頸糜 爛、褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創(chuàng)傷、皮膚炎癥、手足褲的藥物上的應(yīng)用。
所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物在制備各種外傷敷料如薄膜、海綿、 婦科用栓劑、貼膜中的應(yīng)用。
上述銀、殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物，其主要成分為殼聚糖或殼聚糖衍生物及納米 銀，殼聚糖及其衍生物在制備過程中即作為穩(wěn)定劑、分散劑，也作為功能物質(zhì)。所得復(fù)合 物具有抗菌語廣、高效、無毒、抗菌持久、止血止痛、促進創(chuàng)面修復(fù)、潰瘍愈合、并且有 良好的透氣性和吸濕性?？梢约涌炱つw潰瘍、褥瘡、燒傷等創(chuàng)面的愈合，提高愈合質(zhì)量， 降低毒副作用，減少抗生素的使用，防止細(xì)菌對抗生素繼發(fā)耐藥的產(chǎn)生。也可用于制備各 種外傷敷料如薄膜、海綿、婦科用栓劑、貼膜等。
除此之外，本發(fā)明的優(yōu)良效果還表現(xiàn)在
7,同時具有納米銀制劑及殼聚糖或其衍生物的功能及優(yōu)勢。
么在制備過程中以殼聚糖或其衍生物作為Ag+的栽體，Ag+首先和殼聚糖或其^f汙生物作 用，生成配合物或銀鹽，使其分散更為均勻，加入還原劑或暴露于光源后生成納米銀顆粒 在納米數(shù)量級并粒度均勻，殼聚糖或其衍生物對生成的納米銀粒子具有保護作用。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護范圍不限于此。 一、銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物的固相合成(化學(xué)還原法)。 實施例1
一種銀、殼聚糖納米復(fù)合物，制備方法步驟如下
(1)將10g殼聚糖研磨為細(xì)粉；
(2 )將O. 005g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨l小時；
(4)加入抗壞血酸O. 005克，繼續(xù)充分研磨2小時，即得銀粒徑為l-100nra的銀、殼聚 糖納米復(fù)合物(樣品l)。實施例2
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1 )將10g羧曱基殼聚糖研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 005g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將羧曱基殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨2小時；
(4)加入葡萄糖O. 005克，繼續(xù)充分研磨2. 5小時，即得銀粒徑為l 100nm的銀、殼聚 糖衍生物納米復(fù)合物(樣品2)。 實施例3
一種銀、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1 )將7g殼聚糖及3g羥丙基殼聚糖研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 005g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3)將殼聚糖及羥丙基殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨2小時； (4 )加入N-乙酰氨基葡萄糖O. 005克，繼續(xù)充分研磨6小時，即得銀粒徑為l ~ 100nm的 銀、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。 實施例4
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1)將10g羥丙基曱殼素研磨為細(xì)粉； (2 )將O. Olg硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3) 將羥丙基曱殼素細(xì)粉與硝酸^J田粉混勻，充分研磨l小時；
(4) 加入檸檬酸鈉O. Ol克，繼續(xù)充分研磨2小時，即得銀粒徑為l ~ lOOnm的銀、殼聚糖 衍生物納米復(fù)合物(樣品3 )。
實施例5
一種銀、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1)將3g殼聚糖、3g羥丙基殼聚糖及4g琥珀酰曱殼素研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 005g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3) 將殼聚糖、羥丙基殼聚糖及琥珀酰曱殼素細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨3小時；
(4) 加入水合肼O. 002克，繼續(xù)充分研磨4小時，即得銀粒徑為l 100nm的銀、殼聚糖 及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。
實施例6
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1 )將6g羧曱基甲殼素及4g琥珀酰甲殼素研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 009g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將羧曱基甲殼素及琥珀酰曱殼素細(xì)粉與硝酸4艮細(xì)粉混勻，充分研磨2. 5小時； (4)加入糊精0. 5克，繼續(xù)充分研磨4. 5小時，即得銀粒徑為l-100nm的銀、殼聚糖衍 生物納米復(fù)合物。
二、銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物的固相合成(光還原法)。 實施例7一種銀、殼聚糖納米復(fù)合物，制備方法步驟如下
(1)將100g殼聚糖研磨為細(xì)粉；
(2 )將O. G005g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨2小時；
(4)將步驟(3)得到的細(xì)粉進一步研磨3小時，暴露于碘鵠燈光下24小時，即得銀粒 徑為l 100nra的銀、殼聚糖納米復(fù)合物。 實施例8
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1 )將100g琥珀酰殼聚糖研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 008g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3 )將琥珀酰殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨3小時；
(4)將步驟(3)得到的細(xì)粉進一步研磨3. 5小時，暴露于紫外燈光下24小時，即得銀 粒徑為l ~ 100nm的銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。 實施例9
一種4艮、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1)將50g殼聚糖、20g琥珀酰殼聚糖及30g羧曱基殼聚糖研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 05g硝酸銀研磨為細(xì)粉；
(3) 將殼聚糖、琥珀酰殼聚糖及羧甲基殼聚糖細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨l小時；
(4) 將步驟(3)得到的細(xì)粉進一步研磨6小時，暴露于自然光下36小時，即得銀粒徑 為l ~ 100nm的4艮、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物(樣品4 )。
實施例10
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下 (1 )將70g鞋丙基殼聚糖及30g羧甲基曱殼素研磨為細(xì)粉； (2 )將O. 3g硝酸4艮研磨為細(xì)粉；
(3) 將羥丙基殼聚糖及羧曱基甲殼素細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨2小時；
(4) 將步驟(3)得到的細(xì)粉進一步研磨4小時，暴露于自然光下48小時，即得銀粒徑 為1 ~ 100nm的銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物(樣品5 )。
三、銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物的液相合成(化學(xué)還原法)。 實施例11
一種銀、殼聚糖納米復(fù)合物，制備方法步驟如下
(1) 將2g殼聚糖溶于質(zhì)量濃度為0. 5% 100ml醋酸水溶液中，充分?jǐn)嚢枞芙猓?br> (2) 準(zhǔn)確稱取硝酸銀O. OOl克于另一燒杯中，加蒸餾水50ml，攪拌溶解；
(3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1)所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水 溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)l小時；
(4) 準(zhǔn)確稱取抗壞血酸O. OOl克于一燒杯中，加蒸餾水50ml攪拌溶解；在劇烈攪拌下， 向步驟(3)所得溶液逐滴緩慢加入抗壞血酸水溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時；
(5) 向步驟(4)所得溶液加入1000ml95y。乙醇沉淀脫水，干燥成粉，即得銀粒徑為1 100nm的銀、殼聚糖納米復(fù)合物(樣品6)。 實施例12
一種銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下
(1) 將l. 5g羥丙基殼聚糖與0. 5g琥珀酰殼聚糖溶于質(zhì)量濃度為iy。 100ml醋酸水溶液 中，充分?jǐn)嚢枞芙猓?br> (2) 準(zhǔn)確稱取硝酸銀O. OOOl克于另一燒杯中，加蒸餾水10ml，攪拌溶解；
(3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1 )所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水 溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時；
(4)準(zhǔn)確稱取曱醛O. OOOl克于一燒杯中，加蒸餾水100ml攪拌溶解；在劇烈攪拌下， 向步驟(3)所得溶液逐滴緩慢加入甲醛水溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時；
(5 )向步驟(4 )所得溶液加入1000ml丙酮沉淀脫水，干燥成粉，即得銀粒徑為1- 100nm 的銀、殼聚糖納米復(fù)合物。 實施例13
一種4艮、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，制備方法步驟如下
(1) 將lg殼聚糖、lg羥丙基曱殼素和lg琥珀酰殼聚糖溶于100ml蒸餾水中，充分?jǐn)嚢?br> 溶解；
(2) 準(zhǔn)確稱取硝酸銀O. Ol克于另一燒杯中，加蒸餾水10ml，攪拌溶解；
(3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1 )所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水 溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)6小時；
(4) 準(zhǔn)確稱取異抗壞血酸O. Ol克于一燒杯中，加蒸餾水100ml攪拌溶解；在劇烈攪拌 下，向步驟(3)所得溶液逐滴緩慢加入異抗壞血酸水溶液，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)6 小時；
(5) 向步驟(4)所得溶液加入1000ml95y。乙醇沉淀脫水，真空干燥成粉，即得4艮粒徑 為l ~ 100nm的銀、殼聚糖及殼聚糖衍生物納米復(fù)合物(樣品7 )。
實施例14
準(zhǔn)確稱取殼聚糖粉末2克于燒杯中，加0. 5%醋酸水溶液100ml,攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取 硝酸銀0. 001克于另一燒杯中，力。5y。氨水溶液50ml，攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取抗壞血酸0. 001 克于一燒杯中，加蒸餾水50ml攪拌溶解；將銀氨水溶液逐滴緩慢加入殼聚糖溶液中，同時 快速攪拌1小時；再將抗壞血酸溶液逐滴加入，同時快速攪拌1 ~ 6小時后，加入1000ml95% 乙醇得沉淀，真空干燥，制得銀一一殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物粉劑13。
實施例15
準(zhǔn)確稱取羧曱基殼聚糖粉末2克于燒杯中，加蒸餾水100ml,攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取硝 酸銀0. 001克于另一燒杯中，加5%氨水溶液50ml，攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取抗壞血酸0. 001克 于一燒杯中，加蒸餾水50ml攪拌溶解；將銀氨水溶液液逐滴緩慢加入羧曱基殼聚糖溶液中， 同時快速攪拌1小時；再將抗壞血酸溶液逐滴加入，同時快速攪拌1~6小時后，加入 1000ml95y。乙醇得沉淀，真空干燥，制得銀一一殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物粉劑"。
四、銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物的液相合成(光還原法)。實施例16
準(zhǔn)確稱取殼聚糖粉末、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰曱殼素各0. 5g于燒杯中，加0. 5%醋酸 水溶液100ml，攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取硝酸銀0. 001克于另一燒杯中，加蒸餾水50ml，攪拌 溶解；將硝酸4艮溶液逐滴緩慢加入殼聚糖溶液中，同時快速攪拌1 ~ 6小時；加入750ml95% 乙醇得沉淀，真空干燥，置平亞中，暴露于光源24小時，制得銀、殼聚糖及其衍生物納米 復(fù)合物(樣品8)。 '
實施例17
準(zhǔn)確稱取羧曱基殼聚糖粉末2克于燒杯中，加蒸餾水lOOral,攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取灘 酸銀0. 001克于另一燒杯中，加蒸餾水50ml，攪拌溶解；將硝酸銀溶液逐滴緩慢加入羧曱 基殼聚糖溶液中，同時快速攪拌1-6小時；加入750ml丙酮得沉淀，真空干燥，置平皿中， 暴露于紫外燈光48小時，制得銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物粉劑。
實施例18
準(zhǔn)確稱取殼聚糖粉末2克于燒杯中，加0. 5%醋酸水溶液100ml,攪拌溶解；準(zhǔn)確稱取 硝酸銀0. 001克于另一燒杯中，加5。/。氨水溶液50m1,攪拌溶解；將銀氨水溶液逐滴緩慢加 入殼聚糖溶液中，同時快速攪拌l小時；加入750ml95。/。乙醇得沉淀，真空干燥，置平亞中， 暴露于硤鵠燈光36小時，制得銀、殼聚糖納米復(fù)合物粉劑(樣品9)。
實施例19
準(zhǔn)確稱取羧曱基殼聚糖粉末、羧曱基曱殼素各1克于燒杯中，加蒸餾水100ml,攪拌 溶解；準(zhǔn)確稱取硝酸銀O. G01克于另一燒杯中，加5y。氨水溶液50ml，攪拌溶解；將銀氨水 溶液逐滴緩慢加入羧曱基殼聚糖溶液中，同時快速攪拌l小時；加入750ml95y。乙醇得沉淀， 真空干燥，置平亞中，暴露于自然光源24小時，制得銀、殼聚糖衍生物納米復(fù)合物粉劑(樣 品10)。
試驗例l
本發(fā)明樣品1-10納米銀粒子的紫外一可見光譜分析結(jié)果見表l.
表l:樣品納米銀粒子的紫外一可見光鐠分析:
樣品1樣品2樣品5樣品6樣品7樣品8樣品9樣品10
入max 409.00408. 00410. 00414, 00402. 50404. 50412. 00413, 00
nmnmrnnnmnmnmnm
由表l可知金屬納米粒子在紫外可見光區(qū)有吸收帶或者吸收區(qū)，納米銀粒子的紫外吸 收峰位置一般在410nm左右。因此認(rèn)為該方法制備的納米銀粒度均勻，銀粒徑且在l 100nm 納米。
試驗例2
本發(fā)明樣品1-1 O抑菌作用研究
G^球菌金黃色葡萄球菌；G—桿菌大腸桿菌、綠膿桿菌。
取13支裝有1.0ml營養(yǎng)肉湯的已滅菌試管分別編號l、 2、 3..... 13，另取l支滅菌空 試管作為空白對照管編號14, 于第l管中加入l. Oml樣品溶液，混勻后取1.0ml加入第2 管中，同法稀釋至第12管。第13管不加藥液作陽性對照管。從管l2管中吸取1.0混合液于第14管中作陰性對照。取l(^cfu/ml菌液0. lml分別加入l ~ 13試驗管中搖勻，將上述各 組試驗管置30 - 35。C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16- 24h，溶液澄清為最低抑菌濃度(M IC),取溶液 澄清O. lml,接種到各菌所需的營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基表面，用無菌L棒涂布均勻，每個濃度 接種3 4平板，將培養(yǎng)物置37。C恒溫箱中培養(yǎng)，24 h后，沒有菌落生長為最小殺菌濃(MBC)。 真菌白色念珠菌按藥理學(xué)實驗方法學(xué)(徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理學(xué)實驗方 法學(xué).北京人民衛(wèi)生出版社，第三版，2006: 1705-1717 ),測得最低抑菌濃度(M IC)和最 小殺菌濃(MFC)
結(jié)果表明銀、殼聚糖及其衍生物納米復(fù)合物粉劑樣品對革蘭氏陽性菌(其代表菌林 為金黃色葡萄球菌)和革蘭氏陰性菌(其代表菌抹為腸桿菌、綠膿桿菌)，以及真菌(其代 表菌抹為白色念珠菌)均具有很好的殺菌作用，結(jié)果如表2所示。金黃色葡萄球菌、大腸 桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌是外科、皮膚、及婦科感染(如陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛、 褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創(chuàng)傷、皮膚炎癥、手足癬)常見致病菌種。 表2:樣品抑菌作用研究(樣品Ag濃度嗎/ml )__
樣品1樣品2樣品5沖*品6樣品7樣品8樣品9樣品10
金黃色MIC0. 51.40. 71.40. 6i.00. 61. 0
葡萄球MBC0. 62.00. 81.80. 6i.20. 71. 2
菌
大腸桿MIC0. 51.20. 61.20. 6i.00. 61. 0
菌MBC0. 71.20. 81.20. 7i.00. 71. 2
綠膿桿MIC0. 51.41. 01.40. 7i.00. 70. 8
菌MBC0. 92.01. 21.80. 9i.00. 90. 9
白色念MIC1. 22.42. 04.■ 01. 82.02. 22. 8
珠菌MFC1. 42.62. 24.22. 02.42. 63. 0
然后應(yīng)當(dāng)指出的是，以實施方式是本發(fā)明比較有代表性的例子，顯然本發(fā)明的技術(shù)方 案不限于上述實施例。還可以有很多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，從此以發(fā)明中所公開 能提到或是其聯(lián)想到的，均應(yīng)認(rèn)為是本專利所要保護的范圍。
權(quán)利要求
1.一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，采用固相合成法制備，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉；(2)將硝酸銀研磨成細(xì)粉；(3)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨1～3小時，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100∶0.0005～0.5；(4)加入還原劑，還原劑與硝酸銀的還原當(dāng)量比為1∶1～2∶1，充分研磨2～6小時，即得銀粒徑為1～100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基甲殼素、羧甲基殼聚糖、羧甲基甲殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種；所述還原劑為葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、檸檬酸鈉、抗壞血酸、異抗壞血酸、水合肼、甲醛、糊精或右旋糖苷。
2. —種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，采用固相合成法制備， 步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細(xì)粉； (2 )將硝酸銀研磨成細(xì)粉；(3 )將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨l ~ 3小時，殼聚糖 和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~ 0. 5;(4)將步驟(3)得到的細(xì)粉進一步研磨l-6小時，暴露于光源下24 - 48小時，即得銀 粒徑為l 100mn的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧曱基曱殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種，所述光源為》典鎮(zhèn)燈光、紫外燈光或自然光。
3. —種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，采用液相合成法制 備，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物溶于水或弱酸性水溶液，充分?jǐn)嚢?，使其質(zhì)量濃度 為l ~ 3%;(2 )將硝酸銀配置成質(zhì)量濃度為O. 001 ~ 1%的硝酸銀水溶液或銀氨水溶液；(3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1)所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水溶液或銀氨水溶液，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~0. 5,滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)l-6小時；(4)在劇烈攪拌下，向步驟(3)所得溶液逐滴緩慢加入還原劑水溶液，還原劑與硝酸銀的還原當(dāng)量比為l: 1~2: 1,滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1 6小時；所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧曱基殼聚糖、羧曱基曱殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種，所述還原劑水溶液為葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、檸檬酸鈉、抗壞血酸、異抗壞血 酸、水合肼、曱醛、糊精或右旋糖苷的水溶液；(5 )向步驟(4 )所得溶液加入有機溶劑沉淀脫水，干燥成粉，即得4艮粒徑為1 ~ 100nm 的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，步 驟(1)中所述弱酸性水溶液為質(zhì)量濃度為O. 5%~ 1°/。的醋酸水溶液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，步 驟(5)中所述有機溶劑為乙醇或丙酮。
6. —種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于，釆用液相合成法制 備，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物溶于水或弱酸性水溶液，充分?jǐn)嚢瑁蛊滟|(zhì)量濃度 為l ~ 3%;(2 )將硝酸銀配置成質(zhì)量濃度為O. 001 ~ ly。的硝酸銀水溶液或銀氨水溶液； (3 )在劇烈攪拌下，向步驟(1)所得溶液中逐滴緩慢加入步驟(2 )所得的硝酸銀水 溶液或銀氨水溶液，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100: 0. 0005 ~ 0.5， 滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)l ~ 6小時；(4)向步驟(3)所得溶液加入有機溶劑沉淀脫水，干燥成粉，暴露于光源下24 48 小時，即得銀粒徑為l 100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物；所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基曱殼素、羧甲基殼聚糖、羧曱基曱殼素、 琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數(shù)種， 所述光源為-典鵠燈光、紫外燈光或自然光。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征在于， 步驟(4)所述有沖幾溶劑為乙醇。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物，其特征 在于殼聚糖和/或殼聚糖衍生物既作為穩(wěn)定劑和分散劑，也作為功能物質(zhì)。
9. 權(quán)利要求1-7任一所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物在制備治療陰 道炎、宮頸炎、宮頸糜爛、褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創(chuàng)傷、皮膚炎癥、手足癬的藥 物上的應(yīng)用。
10. 權(quán)利要求1-7任一所述的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物在制備外傷敷 料如薄膜、海綿、婦科用栓劑、貼膜中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物及其制備方法。是將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物細(xì)粉與硝酸銀細(xì)粉混勻，充分研磨1～3小時，殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與硝酸銀的重量比例為100∶0.0005～0.5；加入還原劑，還原劑與硝酸銀的還原當(dāng)量比為1∶1～2∶1，充分研磨2～6小時，即得銀粒徑為1～100nm的銀、殼聚糖和/或殼聚糖衍生物納米復(fù)合物。其具有促進創(chuàng)面愈合、止血、止痛、抗炎殺菌作用，可用于女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛、褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創(chuàng)傷、及其他皮膚炎癥、手足癬等，還可用于制備各種外傷敷料如薄膜、海綿、婦科用栓劑、貼膜等。
文檔編號A61K33/38GK101618047SQ200910017600
公開日2010年1月6日 申請日期2009年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月11日
發(fā)明者付式州, 輝 張, 青 桑, 玄紅專, 秦東風(fēng) 申請人:聊城大學(xué)