專利名稱：：選擇性β-2腎上腺素受體激動劑的鹽的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-l-輕基乙基]-4-羥基-l,3-苯并噻唑-2(3/7)-S同的新的鹽形式，含有所述新的鹽形式的組合物，制備所述鹽形式的方法和所述鹽形式在治療病癥(例如，呼吸系統(tǒng)病癥(respiratorydiseasestates),例如哞喘或COPD)中的用途。
背景技術：
：7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-酮游離堿及其二(三氟乙酸)鹽、二氬溴酸鹽和二乙酸鹽是(32腎上腺素受體激動劑，并披露在PCT/SE2006/000981(現(xiàn)在公開為WO2007/027134)中。PCT/SE2006/000981中的實施例25制備了在本發(fā)明稱作7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-輕基-1，3-苯并噻唑-2(3//)-酮的二氫溴酸鹽的多晶型形式A的化合物。這些化合物對P2腎上腺素受體的選擇性是對腎上腺素能alD、腎上腺素能pi和多巴胺D2的至少10倍。
發(fā)明內容本發(fā)明提供了7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3//)-酮的藥用鹽，條件是所述鹽不是二(三氟乙酸)鹽、二氫溴酸鹽或二乙酸鹽。藥用鹽包括例如鹽酸鹽(例如二鹽酸鹽)、硫酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、丙酮酸鹽、琥珀酸鹽、草酸鹽、甲磺酸鹽、對曱苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙二酸鹽、昔萘曱酸鹽(xinafoate)、抗壞血酸鹽、油酸鹽、煙酸鹽、糖精酸鹽(saccharinate)、己二酸鹽、曱酸鹽、幾乙酸鹽、L-乳酸鹽、D-乳酸鹽、天冬氨酸鹽、蘋果酸鹽、L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、硬脂酸鹽、2-糠酸鹽、3-糠酸鹽、萘二磺酸鹽(萘-l,5-二磺酸鹽或萘—1_(磺酸)_5—磺酸鹽)、乙二磺酸鹽(乙烷-1,2-二磺酸鹽或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸鹽)、羥乙磺酸鹽(2-羥基乙基磺酸鹽)、均三曱苯-2-磺酸鹽或萘-2-磺酸鹽。藥用鹽包括例如鹽酸鹽(例如二鹽酸鹽)、硫酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽或昔萘曱酸鹽。本發(fā)明的鹽可作為溶劑化物(例如水合物)存在，本發(fā)明涵蓋所有這樣的溶劑化物。7-[(1"-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]_4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3用-酮的二氫溴酸鹽的多晶型形式(多晶型形式A)具有如下X-射線粉末衍射(XRPD)圖，所述圖含有如下特征峰8.0(士0.r),lO.O(士O.r),".9(士0.10),16.0(士0.r),18.9(士0.1。)和22,65(士0,。)2e。本發(fā)明一個具體的方面提供7-[(17)-2-({2_[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]—4-羥基-l,3-苯并噻唑-2(37^)-S同的二氬溴酸鹽的多晶型形式(多晶型形式B),其X-射線粉末衍射(XRPD)圖含有下述特征峰7.4(士0.1。)，13.2(±0.1。)，14.1(士0.1。),16.6(±0.1。)，21.0(士0.1。)和21.5(士0.n26。本發(fā)明另一個方面提供制備7-[(li)-2-({2_[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3/7)-酮的二氫溴酸鹽的多晶型形式B的方法，包括將HBr于乙腈中的水溶液加入到7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑_2(3^)-酮于乙腈中的溶液中，以及使產(chǎn)物形成為固體。本發(fā)明另一個方面提供7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-雍基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-酮的二鹽酸鹽的第一物料形式(A型)，其X-射線粉末衍射(XRPD)圖含有如下特征峰10.7(±0.1。),11.1(±0.1。)，13.6(±0.1。)，20.9(±0.1。),22.1(士0.1。)和25.3(±0.1。)20。本發(fā)明另一個方面提供7-[(li)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//>酉同的二鹽酸鹽的第二物料形式(B型)，其X-射線粉末衍射(XRPD)圖含有如下特征峰15.2(±0.1。)，16.5(士0.1。)，18.2(土0.1。)和19.0(±0.1°)20。本發(fā)明另一個方面提供7-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-酮的二鹽酸鹽的第三物料形式(C型)，其X-射線粉末衍射(XRPD)圖含有如下特征峰:6.2(±0.1。)，7.4(±0.1。)，12.5(±0.1。)，13.2(±0.1。)，18.6(士0.1。)和22.8(±0.1。)28。本發(fā)明又一方面提供7-[(1"-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3/7)-酮的藥用鹽，例如二鹽酸鹽、單昔萘曱酸鹽、單-富馬酸鹽、硫酸鹽或單檸檬酸鹽。7'[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3/7)-酮的其它鹽可通過本領域已知的方法制備。例如，所述二氫溴酸鹽可用堿處理以釋放7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3//)-酮，然后將其在合適的溶劑(例如，脂肪族醇(例如曱醇))中用適當?shù)乃崽幚?，產(chǎn)生所期望的本發(fā)明的鹽可通過使用或調整在如下"制備或實施例"中呈現(xiàn)的方法進行制備，或通過文獻中描述的方法制備。本發(fā)明的鹽和多晶型物可用于治療如下疾病1.呼吸道氣道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支氣管哮喘、過敏性哮喘、內源性哮喘、外源性哮喘、運動誘發(fā)性哮喘、藥物誘發(fā)性(包括阿司匹林和NSAID誘發(fā)的)哮喘和粉塵誘發(fā)性嗜喘，間歇性哮喘和持續(xù)性哮喘，以及各種嚴重度的哮喘，及其它原因引起的氣道高反應性；慢性阻塞性肺病(COPD);支氣管炎，包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣肺；支氣管擴張；嚢性纖維化；結節(jié)??；農(nóng)民肺及相關疾??；超敏感性肺炎；肺纖維化，包括隱原性纖維化肺泡炎、特發(fā)性間質性肺炎、抗胂瘤治療和慢性感染(包括結核病和曲霉病及其它真菌感染)并發(fā)的纖維化；肺移植的并發(fā)癥；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺動脈高壓；鎮(zhèn)咳活性，包括治療與氣道炎癥和分泌情況相關的慢性咳嗽及醫(yī)源性咳嗽；急性鼻炎和慢性鼻炎，包括藥物性鼻炎和血管運動性鼻炎；常年性(perennial)過敏性鼻炎和季節(jié)性過敏性鼻炎，包括神經(jīng)性鼻炎(花粉癥)；鼻息肉??；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠狀病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；或嗜酸性食管炎(eosinophilicesophagitis)2.骨和關節(jié)與骨關節(jié)炎/骨關節(jié)病相關或包括骨關節(jié)炎/骨關節(jié)病的關節(jié)炎，包括原發(fā)性關節(jié)炎和繼發(fā)性關節(jié)炎，例如先天性髖關節(jié)發(fā)育不良；6頸和腰脊推炎及腰背痛和頸部疼痛；骨質疏松；類風濕性關節(jié)炎和斯蒂爾病(Still，sdisease);血清陰性脊柱關節(jié)病，包括強直性脊柱炎、牛皮癬性關節(jié)炎、反應性關節(jié)炎和未分化脊柱關節(jié)??；膿毒性關節(jié)炎和其它感染相關的關節(jié)病和骨疾病，例如結核病，包括波特病(Potts'disease)和蓬塞綜合征(Poncet，ssyndrome);晶體誘發(fā)的急性和慢性滑膜炎，包括尿酸鹽沉積病、焦磷酸4丐沉積病和釣磷灰石相關的腱、粘液嚢和滑膜炎癥；貝切特病(Behcet'sdisease);原發(fā)性和繼發(fā)性斯耶格倫綜合征(Sjogren'ssyndrome);全身性硬化和局限性硬皮??；系統(tǒng)性紅斑狼瘡、混合性結締組織病和未分化結締組織?。谎仔约〔。ㄆぜ⊙缀投嗉⊙?；風濕性多肌痛；幼年型關節(jié)炎，包括分布在任何關節(jié)的特發(fā)性炎性關節(jié)炎及相關綜合征和風濕熱及其全身性并發(fā)癥；血管炎(vasculitis),包括巨細胞性動脈炎、高安動脈炎(Takayasu，sarteritis)、丘-施綜合4i(Churg-Strausssyndrome)、結節(jié)性多動脈炎、顯微鏡性多動脈炎和與病毒感染、超敏反應、冷球蛋白和異蛋白相關的血管炎；腰背痛；家族性地中海熱、穆-韋綜合征(Muckle-Wellssyndrome)和家族性愛爾蘭熱(FamilialHibernianFever)、菊池病(Kikuchidisease);藥物誘發(fā)性關節(jié)痛、腱炎和肌??；、骼疾病關節(jié)炎(例如類風濕性^關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、痛風或晶體性關節(jié)病)、其它關節(jié)疾病(例如推間盤變性或顳下頜關節(jié)變性)、骨再造疾病(例如骨質疏松、佩吉特病(Paget，sdisease)或骨壞死)、多軟骨炎、硬皮病、混合性結締組織病、脊推關節(jié)病或牙周病(例如牙周炎)；4.皮膚牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎或其它濕滲性皮膚病及遲發(fā)型超敏反應；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、皰滲樣皮炎、扁平莒癬、萎縮性硬化性苔痺、壞疽性膿皮癥、皮膚結節(jié)病、盤狀紅斑狼瘡、天皰瘡、類天皰瘡、大皰性表皮松解、蕁麻滲、血管性水腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚嗜酸粒細胞增多、斑殼、男性型脫發(fā)、斯威特綜合征(Sweet，ssyndrome)、韋-克綜合征(Weber-Christiansyndrome)、多形性紅斑；蜂窩組織炎，包括傳染性和非傳染性蜂窩組織炎；脂膜炎；皮膚淋巴瘤、非黑素瘤皮膚癌和其它發(fā)育不良性損傷；藥物誘發(fā)的疾病，包括固定性藥滲；5.眼瞼炎；結膜炎，包括常年性過敏性結膜炎或春季過敏性結膜炎；虹膜炎；前色素層炎和后色素層炎；脈絡膜炎；自身免疫；影響視網(wǎng)膜的變性或炎性疾??；眼炎，包括交感性眼炎；結節(jié)病；感染，包括病毒、真菌和細菌感染；6.胃腸道舌炎、齦炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃腸炎、肥大細胞增多、克羅恩病(Crohn'sdisease)、結腸炎包括潰瘍性結腸炎、直腸炎、肛門瘙癢；腹部疾病、腸應激綜合征，以及具有遠離腸作用的食物相關的變態(tài)反應(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)；7.腹部肝炎，包括.自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纖維化和硬化；膽嚢炎；胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎；8.生殖泌尿系統(tǒng)腎炎，包括間質性腎炎和腎小球性腎炎；腎病綜合征；膀胱炎，包括急性和慢性(間質性)膀胱炎和杭納潰瘍(Hunner'sulcer);急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、卵巢炎和輸卵管炎；女陰陰道炎；佩倫涅病(Peyronie'sdisease);勃起機能障礙(男性和女性)；9.同種異體移植物排斥在例如腎臟、心臟、肝臟、肺臟、骨髓、皮膚或角膜移植后或在輸血后出現(xiàn)的急性和慢性同種異體移植物排斥；或慢性移4直物抗宿主病；10.CNS:阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease)和其它癡呆疾病包4舌CJD和nvCJD;淀粉樣變性??；多發(fā)性硬化和其它脫髓鞘綜合征；腦動脈粥樣硬化和血管炎；顳動脈炎；重癥肌無力；急性和慢性疼痛(急性、間歇性或持續(xù)性疼痛，無論是中樞源性的還是外周源性的)，包括內臟痛、頭痛、偏頭痛、三叉神經(jīng)痛、不典型面痛、關節(jié)和骨痛、由癌癥和胂瘤侵入引起的疼痛、神經(jīng)性疼痛綜合征包括糖尿病性、皰滲后和HIV相關的神經(jīng)病；神經(jīng)性肉樣瘤病；惡性、感染性或自身免疫性過程的中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥；11.其它自身免疫性和變態(tài)反應性疾病，包括橋本甲狀腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、才各雷夫斯病(Graves'disease)、阿狄森病(Addison，sdisease)、糖尿病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE綜合征、抗磷脂綜合征；12.其它帶有炎性或免疫性組成的疾病，包括獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、麻風病、塞扎里綜合征(Sezarysyndrome)和瘤外綜合征；13.心血管影響冠脈和外周循環(huán)的動脈粥樣爿硬化；心包炎；心"幾炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌結節(jié)病；缺血性再灌注損傷；心內膜炎、心瓣炎和主動脈炎，包括傳染性(例如梅毒性)的；血管炎；近端和外周靜脈的疾病，包括靜脈炎和血栓形成包括深靜脈血纟全形成及靜脈曲張的并發(fā)癥；14.腫瘤對一般癌癥的治療，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、腸和結腸、胃、皮膚和腦腫瘤及影響骨髓(包括白血病)和淋巴增生系統(tǒng)的惡性腫瘤(例如何杰金(Hodgkin，s)和非何杰金淋巴瘤)；包括對轉移性疾病和腫瘤復發(fā)及瘤外綜合征的預防和治療；和15.胃腸道腹部疾病、直腸炎、嗜酸性胃腸炎、肥大細胞增生、克羅恩病、潰瘍性結腸炎、顯微鏡性結腸炎、不確定性結腸炎、腸應激病、腸應激綜合征、非炎性腹瀉、具有遠離腸作用的食物相關的變態(tài)反應(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)。因此，本發(fā)明提供上述定義的鹽，其用于治療。另一方面，本發(fā)明提供如上定義的鹽在制備用于治療的藥物中的用途。另一方面，本發(fā)明提供如上定義的鹽在治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哞喘或鼻炎中的用途。在本申請說明書的上下文中，除非另有相反的具體說明，術語"治療"也包括"預防"。術語"治療的"和"治療地"也可相應地解釋。預防被認為與患有所述疾病或病癥的先前發(fā)作的人員的治療特別有關，或被認為與處于所迷疾病或病癥的增加危險之中的人員的治療特別有關。處于形成具體疾病或病癥的危險之中的人員，通常包括具有該疾病或病癥的家族史的那些人員，或已經(jīng)通過遺傳學試驗或篩選確定為對特別易患該疾病或病癥的那些人員。本發(fā)明還提供治療炎癥性疾病或病癥(包括可逆的阻塞性氣道疾病或病癥)或降低所述疾病或病癥風險的方法，所述方法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的如上定義的鹽。具體地，本發(fā)明化合物可用在治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘和鼻炎中。對于上述治療用途，劑量當然會隨所采用的化合物、給藥模式、所期望的治療和所指出的紊亂而變化。例如，如果吸入給藥，本發(fā)明化合物的劑量可在0.05微克/千克體重(嗎/kg)至100微克/千克體重(嗎/kg)的范圍內。9可選擇地，如果化合物口服給藥，則本發(fā)明化合物的每日劑量可在0.01微克/千克體重(嗎/kg)至100毫克/千克體重(mg/kg)的范圍內。本發(fā)明的鹽可單獨使用，但通常以藥物組合物的形式給藥，其中所述鹽(活性成分)與藥用助劑、稀釋劑或載體結合。用于選擇和制備合適藥物制齊'J的常頭見方法描述在例^口"Pharmaceuticals-TheScienceofDosageFormDesigns",M.E.Aulton,ChurchillLivingstone,1988中。依賴于給藥模式，所述藥物組合物可包含例如0.05至99。/。w(重量百分比)，例如0.05至80。/。w，例如0.10至70%w,以及例如0.10至50%w活性成分，所有重量百分比都基于組合物總重量。本發(fā)明也提供藥物組合物，其包含如上所定義的鹽和藥用助劑、稀釋劑或載體。本發(fā)明還提供制備本發(fā)明組合物的方法，所述方法包括將如上所定義的鹽與藥用助劑、稀釋劑或載體混合。所述藥物組合物可以局部給藥(例如給藥至皮膚或給藥至肺和/或氣道)，例如以乳膏劑、溶液劑、混懸劑、七氟代烷(HFA)氣霧劑和干粉制劑(例如在稱為Turbuhale^的吸入裝置中的制劑)的形式局部給藥；或全身給藥，例如以片劑、膠嚢劑、糖漿劑、粉劑或顆粒劑的形式口服給藥；或溶液劑或混懸劑的形式胃腸外給藥；或皮下給藥；或以栓劑的形式直腸給藥；或經(jīng)皮給藥。本發(fā)明鹽的干粉制劑和加壓HFA氣霧劑可通過口或鼻吸入給藥。就吸入而言，化合物理想的是微細分散的。例如，微細分散的化合物的質量中值直徑小于10pm,并且可在分散劑(例如CrC2。脂肪酸或其鹽(例如油酸)、膽汁鹽、磷脂、烷基糖、全氟化或聚乙氧基化表面活性劑或其它藥用分散劑)的輔助下，將微細分散的化合物懸浮于噴射劑混合物中。本發(fā)明的鹽也可通過干粉吸入器的途徑給藥。所述吸入器可以是單一或多劑量吸入器，以及可以是呼吸驅動的干粉吸入器。一種可能性是混合微細分散的本發(fā)明的鹽與載體物質例如單糖、二糖或多糖、糖醇或另一種多元醇混合。合適的載體為糖例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麥芽醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇或淀粉?？晒┻x擇地，微細分散的化合物可用另一種物質包衣。也可將該粉末混合物分裝到硬明膠膠嚢中，每個膠嚢均包含所需劑量的活性化合物。另一種可能性是將微細分散的粉末制成球，所述球在吸入操作期間碎裂?？蓪⑦@種球化粉末裝到多劑量吸入器(例如稱為Turbuhale,)的儲藥器中，其中計量給藥單元計量出所需的劑量，所需的劑量然后會被患者吸入。利用該系統(tǒng)，在存在或不存在載體物質的情況下，將活性化合物給予患者。對于口服給藥，本發(fā)明的鹽可與輔料或載體混合，所述輔料或載體為例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如馬鈴薯淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉；纖維素衍生物；粘合劑，例如明膠或聚乙烯吡咯烷酮，和/或潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等，然后壓制成片。如果需要包衣片，那么如上所述制備的片芯可用濃的糖溶液包衣，所述糖溶液可包含例如阿拉伯膠、明膠、滑石和二氧化鈦。可供選擇地，片可用溶解在易揮發(fā)有機溶劑中的合適聚合物包衣。為了制備軟明膠膠嚢，可將本發(fā)明的鹽與，例如植物油或聚乙二醇混合。硬明膠膠嚢可包含所述化合物的顆粒，所述顆粒使用用于片劑的任一上述賦形劑。也可將本發(fā)明化合物的液體或半固體制劑裝到硬明膠膠嚢中。用于口服給藥的液體制劑的形式可以是糖漿劑或混懸劑，例如包含本發(fā)明的鹽以及余量為糖以及乙醇、水、甘油和聚丙二醇的混合物的溶液。任選地，這些液體制劑可包含著色劑、調味劑、糖精和/或作為增稠劑的羧曱基纖維素或本領域技術人員已知的其它賦形劑。本發(fā)明的鹽也可與其它用于治療上述病癥的化合物結合給藥。因此，本發(fā)明還涉及聯(lián)合治療，其中本發(fā)明的鹽或包含本發(fā)明的鹽的藥物組合物或制劑與另一種治療劑或多種治療劑同時或先后給予，或與另一種治療劑或多種治療劑一起作為組合制劑來給予，用于治療所列出病癥中的一種或多種。具體地，為了治療炎癥疾病，例如(但不局限于)類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、哮喘、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、牛皮癬和炎性腸病，可將本發(fā)明的鹽與以下藥物之一組合非甾類抗炎藥(在下文中為NSAIDs)，包括無論局部應用還是全身應用的非選擇性環(huán)氧化酶COX-l/COX-2抑制劑(例如吡羅昔康；雙氯芬酸；丙酸類，例如萘普生、氟比洛芬、非諾洛芬、酮洛芬和布洛芬；芬那酸類，例如曱芬那酸、吲味美辛、舒林酸、阿扎丙宗(azapropazone);吡唑酮類，例如保泰松；水楊酸鹽(酯)，例如阿司匹林)；選擇性COX-2抑制劑(例如美洛昔康、塞來考昔、羅非考昔、伐地考昔、魯馬考昔(lumarocoxib)、帕瑞考昔和艾托考昔)；抑制環(huán)氧化酶的一氧化氮供體(CINODs);糖皮質激素(無論通過局部、口服、肌內、靜脈內途徑還是通過關節(jié)內途徑來給藥)；曱氨蝶呤；來氟米特；羥氯喹；d-青霉胺；金諾芬或其它胃腸外或口服金制劑；鎮(zhèn)痛藥；雙醋瑞因(diacerein);關節(jié)內治療劑，例如透明質酸衍生物；和營養(yǎng)補劑，例如氨基葡萄糖。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合細胞因子或細胞因子功能的激動劑或拮抗劑(包括作用于細胞因子信號傳導路徑的藥物，例如SOCS系統(tǒng)的調節(jié)劑)，包括ot-、(3-和，干擾素；I型胰島素樣生長因子(IGF-1);白介素(IL),包括IL1至17和白介素拮抗劑或抑制劑(例如阿那白滯素)；a腫瘤壞死因子(TNF-a)抑制劑，例如抗TNF單克隆抗體(例如英夫利昔單抗(infliximab),阿達木單抗(adalimumab)和CDP-870)和TNF受體拮抗劑(包括免疫球蛋白分子(例如依那西普)和低分子量藥物(例如己酮可可堿(pentoxyfylline)))。另外，本發(fā)明涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合靶向于B淋巴細胞的單克隆抗體(例如CD20(利妥昔單抗(rituximab))、MRA-alL16R)和靶向于T淋巴細胞的單克隆抗體(CTLA4-Ig、HuMax11-15)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合趨化因子受體功能調節(jié)劑，例3口CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(C-C家族)的拮抗劑；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(C-X-C家族)的拮抗劑；和CX3CR1(C-X3-C家族)的拮抗劑。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合基質金屬蛋白酶(MMPs)即溶基質蛋白酶(stromelysin)、膠原酶和明膠酶及蛋白聚糖酶(aggrecanase)(尤其是膠原酶-1(MMP-1)、膠原酶-2(MMP-8)、膠原酶-3(MMP-13)、溶基質蛋白酶-l(MMP-3)、溶基質蛋白酶-2(MMP-IO)和溶基質蛋白酶-3(MMP-11)及MMP-9和MMP-12)的抑制劑，包括藥物，例如多西環(huán)素。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合白三烯生物合成抑制劑、5-脂肪氧化酶(5-LO)抑制劑或5-脂肪氧化酶活化蛋白(FLAP)拮抗劑，例如齊留通；ABT-761;芬留頓；替泊沙林；Abbott-79175;Abbott-85761;N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺酰胺；2,6-二-叔丁基苯酚腙；曱氧基四氫吡喃，例如ZenecaZD-2138;化合物SB-210661;吡啶基取代的2-氰基萘化合物，例如L-739,010;2-氰基喹啉化合物，例如L-746,530;或吲哚或p奎啉化合物，例如MK-591、MK-886和BAYxl005。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合白三烯(LT)B4、LTC4、LTD4和LTE4的受體拮抗劑，選自吩噻嗓-3-基化合物，例如L-651,392;脒基化合物，例如CGS-25019c;苯并噁胺(benzoxalamine),例如昂哇司特；笨曱脒(benzenecarboximidamide)，例如BIIL284/260;和化合物，例如扎魯司特、阿魯司特、孟魯司特、普侖司特、維魯司特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、伊拉司特(CGP45715A)和BAYx7195。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合磷酸二酯酶(PDE)抑制劑，例如甲基黃。票呤(methylxanthanine),包括茶堿和氨茶堿；選擇性PDE同工酶抑制劑，包括PDE4抑制劑、同工型PDE4D抑制劑或PDE5抑制劑。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合組胺1型受體拮抗劑，例如西替利。秦、氯雷他定、地氯雷他定、非索非那定、阿伐斯汀、特非那定、阿司咪唑、氮萆斯汀、左卡巴斯汀、氯苯那敏、異丙嗪、賽克力嗪(cyclizine)或咪唑斯?。豢诜?、局部或胃腸外給藥。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合質子泵抑制劑(例如奧美拉唑)或胃保護性組胺2型受體拮抗劑。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合組胺4型受體拮抗劑。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合al/a2腎上腺素受體激動劑、血管收縮藥、擬交感神經(jīng)藥，例如丙己君(propylhexedrine)、苯福林、苯丙醇胺、麻黃堿、偽麻黃堿、鹽酸萘曱唑啉、鹽酸幾曱唑啉、鹽酸四氫唑啉、鹽酸木曱唑啉、鹽酸曲馬唑啉或鹽酸乙基去曱腎上腺素。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合抗膽堿能藥，包括毒蕈堿受體(M1、M2和M3)拮抗劑，例如阿托品、東萊菪堿、格隆銨(glycopynrolate)、異丙4乇5臭銨(ipratropiumbromide)、p塞4乇5臭銨(tiotropiumbromide)、氧托溴按(oxitropiumbromide)、派侖西平(pirenzepine)或替侖西平(telenzepine)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合色原酮，例如色甘酸鈉或奈多羅米鈉。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合糖皮質激素，例如氟尼縮松、曲安奈德、二丙酸倍氯美松、布地奈德、丙酸氟替卡松、環(huán)索奈德或糠酸莫米松。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合調節(jié)核激素受體(例如PPARs)的藥物。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合免疫球蛋白(Ig)或Ig制品；或調節(jié)Ig功能的拮抗劑或抗體，例如抗IgE(例如奧馬珠單抗(omaizumab))。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合另一種全身或局部應用的抗炎藥，例如沙利度胺(thalidomide)或其衍生物、類維生素A、地蒽酚(dithmnol)或卡泊三酉事(calcipotriol)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合氨基水楊酸鹽(S旨)和磺胺吡咬(例如柳氮磺吡啶、美沙拉喚、巴柳氮和奧沙拉嗪)的組合；和免疫調節(jié)藥，例如硫代嘌呤和皮質類固醇(例如布地奈德)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合抗菌藥，例如青霉素衍生物、四環(huán)素、大環(huán)內酯、p-內酰胺、氟喹諾酮、曱硝唑、吸入性氨基糖苷；抗病毒藥，包括阿昔洛韋、泛昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、西多福韋、金剛烷胺、金剛乙胺、利巴韋林、扎那米韋(zanamavir)和特敏服(oseltamavir);蛋白酶抑制劑，例如茚地那韋、奈非那韋、利托那韋和沙奎那韋；核苷逆轉錄酶抑制劑，例如去羥肌苷、拉米夫定、司他夫定(stavudine)、扎西他賓或齊多夫定；或非核苷逆轉錄酶抑制劑，例如奈韋拉平(nevirapine)或依法韋侖(efavirenz)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合心血管藥，例如鈣通道阻斷劑、(3-腎上腺素受體阻斷劑、血管緊張素轉化酶(ACE)抑制劑、血管緊張素2受體拮抗劑；降脂藥，例如抑制素或貝特類；血細胞形態(tài)學調節(jié)劑，例如配妥西菲林(pentoxyfylline);溶栓藥或抗凝藥，例如血小板聚集抑制劑。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合CNS藥，例如抗抑郁藥(例如舍曲林)、抗帕金森藥(例如丙炔苯丙胺、L-多巴、羅匹尼羅、普拉克索、MAOB抑制劑(例如司來吉蘭和雷沙吉蘭)、comP抑制劑(例如托卡朋(tasmar))、A-2抑制劑、多巴胺重4聶取抑制劑、NMDA拮抗劑、尼古丁激動劑、多巴胺激動劑或神經(jīng)元一氧化氮合酶抑制劑)或抗阿耳茨海默藥(例如多奈哌齊(donepezil)、利伐斯的明、他克林、COX-2抑制劑、丙戊茶堿或美曲14磷酯)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合用于治療急性或慢性疼痛的藥物，例如在中樞或外周發(fā)揮作用的止痛藥(例如阿片樣物質或其衍生物)、卡馬西平、苯妥英、丙戊酸鈉、阿米替林(amitryptiline)或其它抗抑郁藥、對乙酰氨基朌或非甾類抗炎藥。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合胃腸外或局部應用的(包括吸入的)局麻藥，例如利諾卡因或其衍生物。本發(fā)明的鹽也可與以下物質聯(lián)用抗骨質疏松藥，包括激素藥物(例如雷洛昔芬(mloxifene))或二膦酸鹽(例如阿倫膦酸鹽(alendronate))。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質的組合(i)類胰蛋白酶(tryptase)抑制劑；(ii)血小板活化因子(PAF)拮抗劑；(iii)白介素轉化酶(ICE)抑制劑；(iv)IMPDH抑制劑；(v)粘附分子抑制劑，包括VLA-4拮抗劑；(vi)組織蛋白酶；(vii)激酶抑制劑，例如酪氨酸激酶(例如Btk、Itk、Jak3或MAP)抑制劑(例如吉非替尼(gefitinib)或曱磺酸伊馬替尼(imatinib))、絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑(例如MAP激酶(例如p38,JNK,蛋白激酶A、B或C,或IKK)抑制劑)或在細胞周期調節(jié)中牽涉的激酶(例如細胞周期蛋白依賴性激酶)的抑制劑；(viii)葡萄糖-6磷酸脫氫酶抑制劑；(ix)激肽B！受體或激肽B2受體拮抗劑；(x)抗痛風藥，例如秋水仙堿；(xi)黃噪呤氧化酶抑制劑，例如別噪醇；(xii)排尿酸藥，例如丙磺舒、磺吡酮或苯溴馬隆；(xiii)生長激素促分泌劑；(xiv)轉化生長因子(TGF(3);(xv)血小板源性生長因子(PDGF);(xvi)成纖維細胞生長因子，例如基本的成纖維細胞生長因子(bFGF);(xvii)粒細胞巨p藍細胞集落刺激因子(GM-CSF);(xviii)辣材又素油(capsaicincream);(xix)速激肽NK'受體或速激肽NK3受體拮抗劑，例如NKP-608C、SB-233412(他奈坦(talnetant))或D-4418;(xx)彈性酶抑制劑，例如UT-77或ZD-0892;(xxi)TNF-a轉化酶抑制劑(TACE);(xxii)誘導的一氧化氮合酶(iNOS)抑制劑；(xxiii)TH2細胞上表達的化學引誘物受體同源分子(例如CRTH2拮抗劑)；(xxiv)P38的抑制劑；(xxv)調節(jié)Toll樣受體(TLR)功能的藥物；(xxvi)調節(jié)嘌呤能受體活性的藥物，例如P2X7;(xxvii)轉錄因子活化抑制劑，例如NFkB、API或STATS;或(xxviii)糖皮質激素受體激動劑。一般制備方法在Varian/"ova400MHz或VarianMercwr,VX300MHz設備上記錄'HNMR光譜。將氯仿-c^H7.27ppm)、二甲基亞砜-^(&2.50ppm)、乙腈-^(&1.95ppm)或曱醇-力(Sh3.31ppm)的中間峰用作內標。使用硅膠(0.040-0.063mm,Merck)進行柱色語法。除非另有說明，起始物質是商購的。所有的溶劑和商購試劑都是實驗室級的并原樣使用。下述方法用于LC/MS分析設備Agilent1100;柱WatersSymmetry2.1x30mm;質量APCI;流速0.7ml/min;波長254nm;溶劑A:水+0.1。/。TFA;溶劑B:乙腈+0.1%TFA;梯度15至95%/B進行8分鐘，95%B進行1分鐘。采用如下方式進行分析性色譜法在SymmetryC,8-柱(2.1x30mm,3.5ium粒徑)上運行，用乙腈/水/0.1%三氟乙酸作為流動相，歷時8分鐘，梯度為5%至95%乙腈，流速為0.7ml/min。i殳備細節(jié)〇XRPD(X-射線粉末衍射)-0-0構造的PhilipsX-PertMPD機器，在2°至40°20的掃描范圍內，100-秒暴露/0.03°增量。通過在45kV和40mA操作的銅制長-細聚焦管(long-finefocustube)產(chǎn)生X-射線。銅X-射線的波長為1.5405A(Ka,)和1.5444A(Ka2)。將數(shù)據(jù)收集到零背景支持器(zerobackgroundholder)上，其上放置2mg化合物。所述支持器由單晶硅制成，已經(jīng)沿非衍射平面對其進行切割，然后在光學平面拋光機(opticallyflatfmish)上進行拋光。入射在該表面上的X-射線被Bragg消散(extinction)抵消。XRPD數(shù)據(jù)呈現(xiàn)在下表中，以及提供了反射角度(。2e)和D-間隔(A)數(shù)據(jù)(括號內的)。〇DSC(示差掃描量熱法)熱分析圖是使用具有鋁盤和穿孔蓋(piercedlid)的TAQ1000機器測量的。樣品重量在1至5mg之間變化。所述方法在氮氣流(50ml/min)中進行，研究的溫度以10。C/分鐘的恒定溫度增加速率從25。C增加至300。C。〇TGA(熱解重量分析法)熱分析圖是使用TAQ500機器(具有鉑盤)測量的。樣品重量在2至15mg之間變化。所述方法在氮氣流(60ml/min)中進行，研究的溫度以10。C/分鐘的恒定溫度增加速率從25。C增加至300°C。〇13CCPMAS(交叉極化幻角自旋(CrossPolarisationMagicAngleSpinning))固態(tài)NMR光譜是使用BrukerAvance400WB機器獲得的。使用4mm探針并在下述參數(shù)條件對樣品進行分析傾斜的交叉極化(rampedcrosspolarization),tppml5復合脈沖，&去偶合(decoupling),接觸時間2ms,以及自旋速率5kHz。〇拉曼光譜是使用JobinYvonHoribaLabRamHR拉曼顯微鏡測量的。將固體樣品(0.1mg)放置在玻片上，激光束集中在代表整裝樣品的單個顆粒上。在200至2000cm"范圍內，記錄2-4分鐘采集的光譜。〇IR光譜是使用配備SpecacATR附件的PerkinElmerSpectmmgXFT-IR系統(tǒng)機器記錄的。將固體樣品(lmg)放置在ATR的金剛石表面上，并施加70cN-M的壓力。在4000至625cm"范圍內，記錄64次掃描的光譜，間隔為lcm"，分辨率為4cm'1。OGVS分布圖是使用動態(tài)蒸汽吸收(DynamicVapourSorption)DVS-1設備測量的。將約4-10mg的固體樣品放置在玻璃容器上，在混合循環(huán)步驟方法(40至90至0至90至0%相對濕度(RH)，步長為10%RH)中在25。C記錄樣品重量。〇離子-化學計量法是使用KOH梯度和具有電化學4企測的DionexAS11柱和DionexIC3000設備進行的。該技術僅用于化合物B的二氬溴酸補JUL。〇手性HPLC在Agilent1100LC上運行，4吏用ChiralcelOJ-H250x4.6mm柱，流速為1ml/min。溶劑A為含有0.1%二乙胺的異己烷，溶劑B為含有0.1%二乙胺的乙醇。所述方法以20。/。B在溫度40。C等梯度運行，運行時間為31分鐘。通過在波長220nm的吸光度進4亍斥全測。用在下面實施例中的縮寫或術語具有如下含義SCX:使用磺酸吸附劑的固相萃取法HPLC:高效液相色譜DMF:A^V-二曱基曱酰胺化合物A:7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3i7)-酮二氫溴酸鹽化合物B:7-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-l-羥基乙基]-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3司-酉同制備l74(1/)-2-({2-〖(3-{『2-(2-氯苯基〗乙基1氨基}丙基)硫基l乙基l氨基)-l-羥基乙基1-4-羥基-1,3-苯并噻唑-20^-酮■二氫渙酸鹽17a)1-氯-2-[(￡)-2-硝基乙?；綄?-氯苯甲醛(購自Aldrich)(lO.Og)與硝基甲烷(26.05g)和乙酸銨(21.92g)混合在乙酸(200mL)中，將混合物在回流溫度加熱40分鐘。使混合物冷卻至室溫，真空除去大部分乙酸。將殘余物溶解在二氯曱烷中，用水洗滌，然后用碳酸鉀溶液(x2)洗滌，然后再用水洗滌。有機物用無水硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)，得到所期望的物質，其為橙色油狀物(12.83g)。'H畫RS(cDc。)8.41(d,1H)，7.62-7.57(m,2H)，7.52-7.48(m,1H)，7.43(dt，1H),7.34(ddd，1H)b)2-(2-氯苯基)乙胺通過如下方式制備氫化鋁在0-10。C和氮氣氣氛中，將硫酸(8.40mL)于無水THF(四氫呋喃，60mL)中的溶液滴加到攪拌著的濃度為l.OM的氫化鋁鋰于THF(314mL)中的溶液中。在5°C攪拌30分鐘后，滴力。1-氯-2-[(￡)-2-硝基乙烯基]苯(12.83g)于無水THF(160mL)中的溶液，保持內部溫度在0°C至10。C之間。加入結束后，將反應混合物在回流溫度加熱5分鐘。使混合物冷卻至室溫，然后冷卻至0°C,小心滴加異丙醇(22mL),保持溫度低于20。C。小心滴加濃度為2M的氫氧化鈉溶液(35mL),保持溫度低于20°C。將混合物在室溫攪拌30分鐘，然后過濾通過硅藻土層，硅藻土層隨后用THF(x3)洗滌。蒸干濾液。使用硅膠柱色譜法對殘余物進行純化(使用乙酸乙酯裝載物質，然后使用10%三乙胺/乙酸乙酯，接著使用10%三乙胺于45%乙醇45%乙酸乙酯中的溶液作為洗脫劑)，得到所期望的物質(4.66g)。'HNMR5(CDC13)7.36(dd，1H)，7.25-7.13(m,3H),2.98(dt，2H),2.91-2.87(m:2H)^[2-(2-氯苯基)乙基氨基曱酸叔丁酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>在環(huán)境溫度和氮氣氣氛中，歷時10分鐘向攪拌著的2-(2-氯苯基)乙胺(25.57g)和三乙胺(22.87mL)于無水THF(300mL)中的溶液中加入一縮二,友酸二叔丁酯(35.85g)于無水THF(50mL)中的溶液。將反應混合物在室溫攪拌3小時。真空除去溶劑，得到所期望的物質，其為黃色油狀物(42.0g)。'H雨RS(CDC13)7.35(d,1H)，7.25-7.14(m,3H),4.57(s,1H)，3.43-3.35(m,2H)，2.95(t,2H)，1.43(d,9H)d)烯丙基[2-(2-氯苯基)乙基#^曱酸叔丁酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>在35。C和氮氣氣氛中，歷時15分鐘向氫化鈉(60%，于礦物油中)(7.23g)(已經(jīng)用乙醚(ether)洗涂三次)于無水DMF(200mL)的懸浮液中加入[2-(2-氯苯基)乙基]氨基曱酸叔丁酯(42.0g)于無水DMF(50mL)中的溶液。當加入結束時，將混合物在50。C攪拌90分鐘。使混合物冷卻至室溫，然后緩慢加入烯丙基溴化物(15.63mL)，保持溫度在25。C(使用外部冷卻)。將混合物在室溫攪拌2小時，然后用水稀釋，用乙酸乙酯(x3)萃取。合并有機物，用水洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。使用硅膠柱色譜法對殘余物進行純化(用1%乙酸乙酯于異己烷中的溶液裝柱，然后使用含有乙酸乙酯(0%,1%,2%，5%)的異己烷作為洗脫劑)得到所期望的物質(27.0g)。有幾個混雜的餾分，因此將這些餾分合并，并如上所述使用硅膠柱色譜法重新純化，得到另外4g所期望的物質。將這兩批產(chǎn)物合并，總共得到31.0g。麗R5(CDCI3)7.36-7.31(m,1H),7.21-7.12(m，3H)，5.83-5.68(m,1H),5.17-5.05(m，2H),3.86-3.66(m,2H),3.41(t,2H),3.03陽2.90(m,2H),1.43(s,9H)HPLC:95.90%@220nm[M+H-Boc]+^196.1(計算值二295.1339)(多模式e)[2-(2-氯苯基)乙基j{3-[(2-羥基乙基)疏基丙基)M甲酸叔丁酯將烯丙基[2-(2-氯苯基)乙基]氨基曱酸叔丁酯(31.0g)與2-巰基乙醇(7.37mL)和AIBN(偶氮二異丁腈，U5g)混合，并在65°C攪拌45分鐘。將混合物冷卻并加入更多的巰基乙醇(lmL)和AIBN(200mg)。然后將混合物在65。C再加熱30分鐘。通過硅膠柱色譜法對物質進行純化(用20%乙酸乙酯于異己烷中的溶液裝載物質，然后用20%乙酸乙酯于異己烷中的溶液洗脫，變化到50%),得到所期望的物質(31.94g)。'HNMRS(CDC13)7.38-7.32(m,1H),7.22-7.13(m，3H)，3.75-3.68(m,2H)3,41(t，2H)，3.32-3.14(m,2H),3.03-2.9l(m,2H),2.72(t,2H),2.54-2.36(m，2H),1.85-1.71(m,2H),1.42(s,9H)HPLC:92.31%@220nm[M+H-Boc]+^274.1(計算值-373.1478)(多模式+)f)[2-(2-氯苯基)乙基{3-[(2-氧代乙基)硫基丙基}氨基甲酸叔丁酯將三氧化硫:p比。定絡合物(30.52g)溶解在DMSO(二甲基亞砜，200mL)中，在室溫和氮氣氣氛中攪拌15分鐘。加入DCM(二氯曱烷，100mL),然后加入[2-(2-氯苯基)乙基]{3-[(2-羥基乙基)硫基]丙基}氨基曱酸叔丁酯(23.9g)和許尼希堿(Hunigsbase)(63.5mL)于DCM(160mL)中的溶液(該溶液一次性加入(放熱的))。將所得混合物在環(huán)境溫度攪拌15分鐘。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，接著先后用1NHC1和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并真空除去溶劑。通過硅膠柱色語法對物質進行純化(用20%乙酸乙酯于異己烷中的溶液洗脫)得到所期望的物質(12.43g)。'H雇R5(CDC13)9.46(t,1H),7.36-7.32(m,1H),7.21-7.13(m,3H),3.40(t,2H),3.29-3.13(m,4H)，3.02-2.卯(m，2H),2.45-2.34(m,2H)，1.82-1.69(m，2H),l唇1.36(m，9H)g)[2-(2-氯苯基)乙基(3-[(2-([(2i)-2-羥基-2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基氨基}乙基)硫基I丙基}絲甲酸叔丁酯將[2-(2_氯苯基)乙基]{3-[(2-氧代乙基)硫基]丙基}氨基曱酸叔丁酯(11.32g)溶解在甲醇(200mL)和乙酸(1.74ml)的混合物中。向溶液中加入7-[(li)-2-氨基-1-羥基乙基]-4-幾基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-S同鹽酸鹽(8.0g),然后將混合物在室溫和氮氣氣氛中攪拌1小時。加入氰基硼氮化鈉(1.92g),將混合物再攪拌2小時。真空除去溶劑，殘余物用水稀釋，用0.880氨水堿化并用乙酸乙酯(x3)萃取(在萃取過程中過濾通過硅藻土)。合并有機物，用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到棕色殘余物(15.5g)。使用硅膠柱色譜法對物質進行純化(使用含有MeOH(2%,5%，10%,20%和30%的DCM作為洗脫劑，它們都含有1%的0.880NH3水溶液)，得到所期望的物質(6.67g)(38。/。收率)。畫R5(DMSO)7.43-7.38(m,1H),7.30-7.21(m，3H),6.86(d,1H)，6.69(d,1H),4.56(dd，1H)，3.23-3.10(m,2H)，2.88(t,2H),2.71-2.48(m，8H),2.46-2.39(m,2H),1.72-1.62(m,2H),l唇1.22(m,9H)HPLC:97.46°/。@220nm[M+H]+:582.1(計算值-582.1863X多模式+)h)7-[(1及)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基I乙基}氨基)-1-羥基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3用-酮■二氫溴酸鹽在0°C，向攪拌著的、來自g)部分的Boc化合物(^又丁氧羰基化合物)(5.93g)于DCM(20mL)中的懸浮液中加入三氟乙酸(20mL),將所得混合物在氮氣氣氛中攪拌30分鐘。混合物用曱苯稀釋，并除去溶劑，然后用曱苯(x2)共沸。將殘余物溶解在乙腈中，用48%HBr水溶液酸化并真空濃縮(不濃縮至干)。將混合物進一步用乙腈稀釋，過濾收集沉淀的固體，用乙腈洗滌并真空干燥，得到6.35g。存在3.8%雜質(來自e)部分的異構體)，因此將物質重新溶解在乙腈:水的1:1混合物中，使用制備性HPLC(Sunfire30x80mmC8柱;NH40Ac緩沖液；歷時10分鐘，從乙腈5%至50%)進行純化。將所得物質在千燥器(dessicator)中在10毫巴用KOH和H2S04干燥。將所得二乙酸鹽溶解在水中，并用0.880氨水堿化。形成白色的膠狀物，因此將水溶液潷出，并將膠狀物真空干燥，得到游離堿(4.11g)。將所得物質溶解在熱乙醇中，過濾溶液，然后使其冷卻至室溫。溶液用48%HBr水溶液酸化并使其結晶。過濾收集白色固體，用乙醇洗滌，并真空干燥得到3.81g，其為批次l。'HNMR5(DMSO)11.67(s,1H),10.15(s,1H),8.70(s,4H)，7.50-7.30(m,4H),6.94(d,1H),6.78(d,1H)，6.45(s,1H),4.96-4.90(m,1H)，3,22-3.02(m，IOH)，2.86-2.76(m，2H)，2.66(t,2H),1.91(五重峰，2H)HPLC:99.63%@220nm[:\4+11]+=482(計算值=482,1339)(多模式+)元素分析CHNS計算值41.044.706.539.96實測值1:41.074.696.679.722:41.084.686.749.673:40.964.686,759.67蒸干母液，然后用乙腈研磨。過濾收集固體，得到719mg，其為批次2(總共為4.53g)。'H麗R5(DMSO)11,67(s，1H),10.15(s,1H),8.80-8.60(m,4H),7.50-7.29(m,4H),6.94(d，1H),6.78(d,1H),6.45(s,1H),4.96-4.89(m,1H)，3.22-3.00(m,10H),2.85畫2.76(m,2H),2.66(t,2H),1.90(五重峰，2H)HPLC:99.20%@220nm[1^+司+=482(計算值=482.1339)(多模式+)元素分析CHNS計算值41.044.706.539.96實測〗直1:40.904.696.789.602:41.014.706.839.603:40.974.696.769.63對映體純度97.78%通過XRPD對批次1進行分析，發(fā)現(xiàn)其為部分結晶多晶型物A。將22800mg的批次1漿化在無水乙醇(20ml)中，持續(xù)9天，得到670mg高度結晶的固體，通過XPRD鑒別為多晶型物A。HPLC:99.04%@220nm[1\4+司+=482.1(計算值=482.1339)(多模式+)對映體純度98.61%<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>圖1.化合物B.二-HBr鹽的多晶型物A的XRPD下述實施例用于示例本發(fā)明。實施例17-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)疏基乙基}氨基)-1-羥基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3^0-酮二氫溴酸鹽-多晶型物Ba)A^-p-0氯苯基)乙基丙烯酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>將2-(2-氯苯基)乙胺(購自Aldrich)(l當量，491g,3.16mol)溶解在二氯曱烷(2500ml)中。將溶液冷卻至0。C，加入許尼希堿(l當量，522ml，3.16mo1)。滴加烯丙酰氯(l當量，257ml,3.16mol),在整個2個小時的加入過程中保持溫度在0°C至5。C之間。使反應混合物溫熱至環(huán)境溫度并攪拌過夜?；旌衔镉枚葧跬?1500ml)稀釋，并先后用濃度為2M的HC1溶液(2x1000ml)和水(lx1000ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到所期望的物質，其為白色蠟狀固體(646g)(97。/。收率)。'H畫RS(CDC13)3.01(t，^7.1Hz，2H),3.61(q,/=6.8Hz，2H),5.62(d,7=10.6Hz，2H)，6.08(dd,J-17,6,10.6Hz,1H),6.25(d,/=17.6Hz,1H),7.18-7.24(m,3H),7.34-7.38(m,1H)HPLC:94.02%@220nm[1^1+司+=210.1(計算值=210.0685)(多模式+)b)[(3-{2-(2-氯苯基)乙基氬基}-3-氧代丙基)硫基乙酸1.ffEtONaOEt,EtOH2.H20100%將巰基乙酸乙酯(l當量，138ml，1.25mol)溶解在乙醇(750ml)中，加入乙醇鈉(21%重量的乙醇溶液)(l當量，405ml,1.25mol)，整個過程中保持內部溫度低于30。C。將反應混合物攪拌l小時，然后滴加A42-(2-氯苯基)乙基]丙烯酰胺(l當量，261.8g,1.25mol)于乙醇(2250ml)中的溶液(沒有觀察到溫度升高)。將混合物攪拌18小時。加入另一批巰基乙酸乙酯(0.15eq)和乙醇鈉(0.15當量)，并將混合物再攪拌24小時。加入另一等份的乙醇鈉(20ml),然后緩慢加入水(1000ml),保持溫度低于20°C。然后將混合物在環(huán)境溫度攪拌24小時。LC-MS顯示完全轉化成酸。真空濃縮混合物至體積為1升，向混合物中再加入另一升水?；旌衔镉檬宥』鶗趸严礈臁Ｓ脻釮C1將水層酸化至pH1，然后用叔丁基甲基醚(lx2升，lx1.5升)萃取。合并有機物，用水(lx1升)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到所期望的物質，其為黃'HNMR5(CDC13)2.51(t,>7.6Hz，2H),2.93(t,J=7.2Hz,2H),2.97(t,J=7.2Hz，2H),3.26(s，2H)，3.55(q，《/=6.4Hz,2H),6.12(s,1H),7.15-7.25(m，3H),7.33-7.36(m，1H)HPLC:86.02%@220nm[M+H]+:302.1(計算值二302.0617)(多模式+)c)2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氛基}丙基)硫基乙醇將[。-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}-3-氧代丙基)硫基]乙酸(107.7g,357mmol)溶解在THF(l升)中，歷時4小時滴加濃度為1M的硼烷于THF中的溶液(購自Aldrich)(1.5升)。整個加入過程中保持內部溫度為30。C士5。C。然后將反應混合物在攪拌下加熱至65。C(內部溫度)過夜。滴加曱醇(500ml),然后加入濃度為2M的HC1溶液(500ml),將反應混合物輕微回流4小時。冷卻反應混合物，真空濃縮至體積為1升，向混合物中加入1升水。將該混合物用叔丁基曱基醚(2x500ml)洗滌。用固體氫氧化鈉將水層石成化至pH9，然后用叔丁基曱基醚(3x500ml)萃取。合并有機物，用水(lx500ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到所期望的物質(85.3g)(87。/。收率)。'H麗R5(cDd3)1.73-1.82(五重峰，2H)，1.96(s,1H),2.63(t,/=7.2Hz,2H),2.72(t,J=5.8Hz,2H),2.78(t,聲6.8Hz,2H)，2,83-2.97(m,4H),3.74(t,/=5.9Hz,2H),7.12-7.25(m,3H),7.33-7.36(m,1H)HPLC:89.70%@220nm[M+H]+二274.1(計算值二274.1032)(多模式+)d)[2-(2-氯苯基)乙基]{3-[(2-羥基乙基)硫基丙基}氨基甲酸叔丁酯將2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙醇(1當量，85.0g,312mmol)溶解在二氯曱烷(600ml)中并在冰浴中冷卻。加入許尼希堿(l當量,51.5ml，312mmo1)，然后加入一縮二碳酸二叔丁酯(l當量，68.1g,312mmo1)于二氯曱烷(250ml)中的溶液，將該溶液歷時-2小時滴加使得內部溫度保持為5。C。移去冷卻浴，使反應混合物攪拌過夜，溫熱至環(huán)境溫度。加入二氯曱烷(500ml)，將反應混合物用水(2x500ml)、濃度為2M的HC1溶液(2x500ml)洗滌，然后再用水(2x500ml)洗滌，隨后用無水石克酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到所期望的物質，其為淺黃色油狀物(116g)(100。/。收率)。'HNMR5(CDC13)1.42(s,9H),1.74-1.84(m，2H),2.46畫2.53(m，2H),2.72(t,■7=6.7Hz，2H)，2.92-3.00(m,2H),3.15-3.32(m，2H),3.41(t，盧7.3Hz,2H),3.71(q,/=6.0Hz,2H),7.15畫7.21(m,3H),7.33-7.37(m，1H)e)2-(2-氯苯基)乙基l{3-[(2-氧代乙基)硫基丙基}^&曱酸叔丁酯三氧化好u:吡啶復合物57%將[2-(2-氯苯基)乙基]{3-[(2-羥基乙基)硫基]丙基}氨基曱酸叔丁酯(1當量，228g,0.61mol)溶解在DMSO(1.5升)中，并用三乙胺(IO當量，850ml，6.1mol)處理。將混合物劇烈攪拌，然后加入三氧化硫:吡啶絡合物(3當量，291g,1.83mol)于DMSO(1.5升)中的溶液，加入速度是使內部溫度不超過25。C(約40分鐘)。將反應混合物倒入水/濃HCl(4升，2M)的混合物中，倒入的速度使得溫度保持低于30°C。該混合物用叔丁基甲基醚(2x1.5升，1x1.2升)萃取。合并有機萃取物，用水(3xl.25升)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。將殘余物分成兩個相等的部分，使每一部分通過1kg硅膠墊(用異己烷乙酸乙酯(4:l)洗脫)得到所期望的物質(130g)(57。/o收率)。'H麗RS(DMSO)9.40(t,/=3.5Hz,1H),7.42畫7.40(m,1H)，7.28-7.24(m,3H),3.39-3,33(m，2H),3.21-3.15(m，2H),2.91-2.86(m,2H)，2.42-2，33(m,2H)，1.73-1.62(m，2H),1.35-1.18(m，IIH)。f)[2-(2-氯苯基)乙基1{3-[(2-{[(2及)-2-羥基-2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基氨基}乙基)硫基丙基}氨基曱酸叔丁酯在環(huán)境溫度，向攪拌著的7-[(17)-2-氨基-l-羥基乙基]-4-羥基-l,3-苯并噻唑-2(3/7)-酉同乙酸鹽(l當量，92.1g,0.297mol)于DCM(1200ml)中的懸浮液中加入三乙胺(5.7當量，237ml，1.7mol)。歷時20分鐘逐份加入三曱基氯硅烷(4.4當量，141g,164ml,1.3mol)-首次加入20ml產(chǎn)生放熱，溫度升至40。C，因此使用水/水浴以保持溫度在25。C。將混合物在室溫攪拌4小時。向反應混合物中一次性加入無水硫酸鎂(98g)，將所得物攪拌15分鐘，然后歷時90分鐘滴加[2-(2-氯苯基)乙基]{3-[(2-氧代乙基)硫基]丙基}氨基曱酸叔丁酯(1.1當量，120g,0.323mol)于DCM(800ml)中的溶液。一次性加入三乙酰氧基硼氬化鈉(1.2當量，75g,0.35mol)，保持溫度在26°C。將混合物在環(huán)境溫度攪拌16小時。逐份加入曱醇(350ml)，然后加入乙酸(70ml)，將混合物在室溫攪拌2小時。真空除去溶劑，通過曱苯(600ml)共沸的方式除去乙酸。殘余物在水(1000ml)和乙酸乙酯(400ml)之間分配，分層，水層進一步用乙酸乙酯(2x200ml)萃取。合并有^/L物并用水(400ml)洗涂，經(jīng)無水^琉酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到黑色油狀物(93g)。加入異己烷(200ml),將所得焦油用刮伊撥弄。將焦油與異己烷潷出，并將該過程重復兩次。將殘余物分成2批，并使用硅膠柱色謙法純化(大的Biotage75)(用5%MeOH/DCM(2.5柱體積)，10%MeOH/DCM(5柱體積)，然后16%MeOH/DCM(2.5柱體積)洗脫)，得到所期望的物質(86.9g)(46。/。收率)。4函R(300MHz,DMSO)51.27-1.36(m，附)，1.64-1.74(m，2H),2.44-2.49(m,2H),2.75-2.85(m,2H)，2.86-3.02(m,4H),3.14-3.23(m,2H),3.32-3.41(m,4H),4.82(t,J=6.1Hz,1H),6.76(d,>8.4Hz,1H),6.90(d,^8.4Hz:IH),7.27(s,3H),7.41(d,聲7.2Hz,IH)HPLC:92.25%@220nm[M+H]+二582(計算值-582.1863)(多模式+)g)7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥基乙基卜4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3/0-酮■二氫溴酸鹽的多晶型物B1.甲酸/水2.HBr水溶液將曱酸(54ml)與水(6ml)混合，放置使之陳化數(shù)小時。將[2-(2-氯苯基)乙基]{3_[(2-{[(2"-2-羥墓-2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)硫基]丙基)氨基甲酸叔丁酯(6.0g,10.3mmol)溶解在甲酸水溶液中，在室溫攪拌18小時。真空除去溶劑，將殘余物溶解在乙腈:水(10ml)的4:1混合物中，過濾，用更多的乙腈:水(4ml)(4:l)洗滌，然后^f吏用反相HPLC在30x100Sunfire柱上純化，每次運行注射2ml(500mg)，并歷時8分鐘用5-50%乙腈于0.2%TFA水溶液中的溶液洗脫，收集15ml餾分。合并合適的餾分，蒸發(fā)得到5.88g。將該物質溶解在乙腈(120ml)(有時形成懸浮液)中，用48%HBr水溶液于乙腈(25ml)中的30%溶液酸化。將所得懸浮液攪拌，放置15分鐘，然后過濾收集固體，用乙腈(x5)洗滌，干燥得到所期望的物質(4.45g)(67。/。收率)，其為高度結晶的固體，通過XPRD鑒別為多晶型物B。HPLC:98.42%@220nm[^4+司+=482.1(計算值=482.1339)(多模式+)元素分析C,HNS計算值41.044.706.539.96實測4直40.814.726.7310.4對映體純度97.58%28<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>圖2.化合物B.二-HBr鹽的多晶型物B的XRPD實施例27-(1/0-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基1氨基}丙基)硫基l乙基}氨基)-1-幾基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3^)-酮.鹽酸鹽-A型將37wt/wt。/o的鹽酸溶液(175.77^L)加入到7-[(1"-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3//)-酮(0.5§)于曱醇(511^)中的懸浮液中。將混合物超聲處理，然后在室溫攪拌16小時。接著真空除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯(20mL)處理并在室溫攪拌1小時。過濾分離標題化合物，用乙酸乙酯(5mL)洗滌并真空干燥(0.45g)。4畫R(300MHz，DMSO)57.45(m，2H),7.32(m,2H),6.93(d,1H),6.79(d，1H)，4.98(m,1H),3.16(m,6H),3.03(m,4H),2.84(t，2H),2.68(t,2H),1.96(m,2H)。對映體純度96.7。/。(i);3.3%(5)。XRPD(圖3.)26(d間隔)10.7(8.3)U(8.0)13.6(6.5)15.3(5.8)15.9(5.6)17.4(5.1)19.1(4.7)20.3(4.37)20.9(4.25)2.32(4.7)22.1(4.01)25.3(3.5)26.3(3.39)27.0(3.30)27.6(3.23)圖3.化合物B二-HCl鹽的A型的XRPD實施例37-(1及)-2-({2-[(3-{[2_(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥基乙基l-4-羥基-l，3-苯并瘞唑-2(3^)-酮鹽酸-B型將20mgA型物質(實施例2)放置在小瓶中，向其中加入乙醇(lml)。使混合物在蓋著蓋子的小瓶中在室溫攪拌1周。然后將所得懸浮液離心，收集固體并使其在通風櫥中干燥過夜。XRPD(圖4.)29(d間隔)7.6(11.7)15.2(5.8)15.9(5.6)16.5(5.4)7.4(5.〗)18.2(4.88)19.0(4.66)20.2(4.39)24.6(3.6巧25.3(3.52)26.3(3.38)27.6(3.23)28.1(3.18)30.6(2.92)圖4.化合物B二-HCl鹽的B型的XRPD實施例47-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥基乙基I-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3/0-酮.鹽酸鹽-C型將20mgA型物質(實施例2)放置在小瓶中，向其中加入水(lml)。使所得混合物在蓋著蓋子的小瓶中在室溫攪拌1周。然后將所得懸浮液離心，收集固體并使其在通風櫥中干燥過夜。XRPD(圖5.)2e(d間隔)6.2(14.3)7.4(12.0)12.5(7.1)13.2(6.7)13.9(6.4)14.7(6.0)15.1(5.9)15.9(5.6)17.4(5.1)18.2(4.86)18.6(4.76)20.3(4.38)22.8(3.91)25.8(3,45)26.7(3.34)30.2(2.96)30.9(2.90)圖5.化合物B二-HCl鹽的C型的XRPD實施例57-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥31基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3用-酮單昔萘曱酸鹽將1-羥基-萘-2-曱酸(394.31mg)加入到7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)小羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3^)-酮(0.5g)于甲醇(5mL)中的懸浮液中。對混合物進行超聲處理，然后在室溫攪拌16小時。接著真空除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯(20mL)處理并在室溫攪拌1小時。過濾混合物，但是沒有固體物質可以分離出來，因此將在過濾器上收集的物質和濾液重新合并在曱醇中，然后蒸干。將殘余物在乙醚(30mL)中攪拌2小時。過濾分離標題化合物，用乙醚(10mL)洗滌，真空干燥，得到非結晶產(chǎn)物(0.53g)。JHNMR(300MHz,DMSO)58.20(d,1H),7.74(m,2H)，7.48(m,2H),7.40(m,2H),7.33(m,2H),7.04(d,1H)，6.93(d，1H)，6.78(d,1H),4.95(m，1H),3.16-3.00(m,IOH)，2.83(m,2H),2.66(t，2H)，1.93(m,2H)。對映體純度:97.3%(i);2.7%(5)。鹽化學計量-通過'HNMR確定為單昔萘曱酸鹽。實施例67-[(1/)-2-({2-[(3-{[2_(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥基乙基卜4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3^)-酮.單富馬酸鹽將富馬酸(120.39mg)加入到7-[(1"-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-酮(0.5g)于曱醇(5mL)中的懸浮液中。然后將混合物在室溫攪拌2小時。真空除去溶劑，將殘余物懸浮在乙酸乙酯(20mL)中，并在室溫攪拌48小時。過濾分離標題化合物，用乙酸乙酯(5mL)洗滌，真空干燥，得到非結晶產(chǎn)物(0.59g)。&固R(300MHz，DMSO)S7.43(m,2H)，7.31(m,2H),6.91(d，1H)，6.76(d,1H),6.55(s，2H)，4，84(t,1H),3.07(s，4H),2.96(m,6H),2.74(t，2H),2.62(t,2H),1.90(五重峰，2H)。對映體純度97.2%(i);2.8%(S)。鹽化學計量-通過'HNMR確定為單富馬酸鹽。實施例77-(1/)-2-({2-(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基乙基}氨基)-1-羥基乙基1-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3//)-酮.硫酸鹽將濃硫酸(510.68nL)加入到7-[(li0-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3/^)-酮(0.5g)于曱醇(5mL)中的懸浮液中。將混合物超聲處理，然后在室溫攪拌2小時。真空除去溶劑，將殘余物懸浮在乙醚(20mL)中，在室溫攪拌l小時。過濾分離標題化合物，用乙醚(5mL)洗滌，真空干燥得到非結晶產(chǎn)物。}HNMR(300MHz，DMSO)S7.45(m，2H)，7.32(m,2H),6.93(d,1H),6.77(d,1H)，4.95(m，1H),3.50-3.00(m，numberofprotonscouldnotbedetermined),2.83(m,2H)，2.65(m，2H),L92(m，2H)。對映體純度90.5%(iO;9.5%0S)。實施例87-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3^)-酮.檸檬酸鹽將檸檬酸(199.27mg)加入到7-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3//)-酮(0.5g)于曱醇(5mL)中的懸浮液中。將混合物超聲處理，然后在室溫攪拌2小時。真空除去溶劑，將殘余物懸浮在乙醚(20mL)中，并在室溫攪拌l小時。過濾收集標題化合物，用乙醚(5mL)洗滌并真空干燥，得到非結晶產(chǎn)物。4麗R(300MHz,DMSO)S7.44(m，2H),7.33(m，2H),6.93(d,1H)，6.79(d，1H),4.92(m,1H),3.32-3.01(m，質子數(shù)目不能確定)，2.79(m，2H),2.67-2.49(m,質子數(shù)目不能確定)，1.91(m，2H)。對映體純度93.6%(iO;6.4%(5)。實施例97-[(1及)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基氨基}丙基)硫基1乙基}氨基)-1-羥基乙基-4-羥基-l，3-苯并噻唑-2(3^)-酮磷酸鹽將磷酸(l19.58mg)加入到7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3/^)-酮(0.5g)于曱醇(5mL)中的懸浮液中。然后將混合物在室溫攪拌1小時。真空除去溶劑，將殘余物懸浮在乙醚(20mL)中，在室溫攪拌16小時。已經(jīng)蒸發(fā)溶劑，因此殘余物用更多的乙醚(5mL)處理。過濾分離標題化合物，用乙醚(5mL)洗滌并真空干燥，得到非結晶產(chǎn)物(0.47g)。&畫R(300MHz,DMSO)S7.44(m,2H),7.31(m,2H),6.92(d,1H),6.76(d,1H),4.93(t,1H),3.17-2.91(m,10H),2.88-2.56(m,4H),1.95(m，2H)。對映體純度93.3。/。(i);6.7%(5)。生物測定腎上腺素能B2介導的cAMP生成細胞制備在培養(yǎng)箱中，在37°C和5。/。C02下，H292細胞在225cm2燒瓶中在包含10。/。(v/v)FBS(胎牛血清)和2mML-谷氨酰胺的RPMI培養(yǎng)基中生長。實驗方法通過用AccutaseTM細胞脫附溶液處理15分鐘，使附著的H292細胞從組織培養(yǎng)燒瓶脫離。在加濕培養(yǎng)箱中，在37°C和5。/。C02下，將燒瓶孵育15分鐘。以0.05xl()S個細胞/mL,將脫附的細胞重新懸浮在RPMI培養(yǎng)基(包含10%(v/v)FBS和2mML-谷氨酰胺)中。將5000個細胞(100^d)加至組織培養(yǎng)處理96孔板的每個孔，在加濕培養(yǎng)箱中，在37。C和5。/。C02下，將細胞聘育過夜。將培養(yǎng)基取出，細胞用100^1測定緩沖液洗滌兩次，用50|il測定緩沖液(包含10mMHEPES(pH7.4)和5mM葡萄糖的HBSS溶液)置換。在室溫，將細胞放置20分鐘，在此之后，添加25|iil的咯利普蘭(在包含2.4%(v/v)二曱基亞砜的測定緩沖液中制成，濃度為1.2mM)。將細胞與咯利普蘭一起醉育10分鐘，在此之后，添加試驗化合物，在室溫將細胞孵育60分鐘。測定液中最終的咯利普蘭濃度為300^iM,最終的載體濃度為1.6。/。(v/v)二曱基亞s風。反應通過除去上清液來停止，用100^1測定緩沖液洗滌一次，用50^1細胞溶解緩沖液置換。將細胞單層冷凍于-80。C,保持30分鐘(或過夜)。AlphaScreencAMP檢測使用AlphaScreenTM方法學，測定細胞溶解物中cAMP(環(huán)腺苷酸)的濃度。在板振蕩器上，使冷凍的細胞板解凍20分鐘，然后將10(il的細胞溶解物轉移至96-孔白色板。將40^1與生物素化cAMP—起預孵育的混合的AlphaScreenTM檢測珠子加至每個孔，將板在室溫避光孵育IO小時。按照制造商所推薦的設置，使用EnVision分光光度計(Perkin-ElmerInc.)測量AlphaScreenTM信號。通過參考在相同實驗中使用標準cAMP濃度所確定的校正曲線來確定cAMP濃度。構建激動劑的濃度響應曲線，將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定pECso和內在活性。在每個實驗中，將內在活性表達成對福莫特羅而確定的最大活性的分數(shù)。選擇性測定腎上腺素能alD膜制備膜從表達重組人ab受體的人胚腎293(HEK293)細胞來制備。將這些月莫稀釋在測定緩沖液(50mMHEPES,lmMEDTA,0.1%明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結合之間提供明顯窗口(clearwindow)。實驗方法測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將lO)ilpH]-哌唑嗪(0.3nM最終濃度)和10(il的試驗化合物(10x最終濃度)加至每個試—驗孔。對于每塊測定板，就在存在lOptl載體(10。/。(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結合)或10jiLBMY7378(10pM最終濃度；定義非特異性結合(NSB))情況下的卩H]-哌唑。秦結合而言，得到8個重復樣。然后，添加膜，^吏最終體積為100piL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預浸1小時)上。在4°C，用250W洗滌緩沖液(50mMHEPES,lmMEDTA,pH7.4)洗滌五次，以除去未結合的力文射性物質。將板干燥，然后使用Packard板密封劑(platesealer),從下面將板密封，將MicroScint-O(50)al)加至每個孔。將板密封(TopSealA)，用閃爍計數(shù)器(TopCount,PackardBioScience)，使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結合的放射性。通過從平均最大結合減去平均NSB，確定總特異性結合(B。)。也從所有其它孔的值減去NSB值。將這些數(shù)據(jù)表達成占Bo的百分比。使用通常范圍為O.lnM至10pM的系列稀釋度，確定化合物濃度-效應曲線(對[3司-哌唑噪結合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pICs。(對卩H]-哌唑溱結合產(chǎn)生50%抑制作用的摩爾濃度的負對數(shù))。腎上腺素能pi膜制備包含重組人腎上腺素能pi受體的膜得自Euroscreen。將這些膜稀釋在測定緩沖液(50mMHEPES，lmMEDTA,120mMNaCl，0.1%明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結合之間提供明顯窗口。實驗方法測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將10^1[1251]-碘代氰基吲咮洛爾(Iodocyanopindolol)(0.(B6nM最終濃度)和10^1的試'險化合物(10x最終濃度)加至每個試驗孔。對于每塊測定板，就在存在10^1載體(10。/。(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結合)或1(Vl普萘洛爾(10pM最終濃度；定義非特異性結合(NSB))情況下的[^I]-碘代氰基吲哚洛爾結合而言，得到8個重復樣。然后，添加膜，使最終體積為100pL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預浸1小時)上。在4。C，用250(al洗滌緩沖液(50mMHEPES,lmMEDTA,120mMNaCl，pH7.4)洗滌五次，以除去未結合的放射性物質。將板干燥，然后使用Packard板密封劑，從下面將板密封，將MicroScint-O(50|al)加至每個孔。將板密封(TopSealA),用閃爍計數(shù)器(TopCount,PackardBioscience),使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結合的放射性。通過從平均最大結合減去平均NSB，確定總特異性結合(Bo)。也從所有其它孔的值減去NSB值:將這些數(shù)據(jù)表達成占Bo的百分比。使用通常范圍為O.lnM至10|iM的系列稀釋度，確定化合物濃度-效應曲線(對[1251]-碘代氰基吲哚洛爾結合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pICso(對[^I]-碘代氰基吲哚洛爾結合產(chǎn)生50%抑制作用的摩爾濃度的負對數(shù))。多巴胺D2膜制備包含重組人多巴胺D2s亞型受體的膜得自PerkinElmer。將這些膜稀釋在測定緩沖液(50mMHEPES，lmMEDTA,120mMNaCl，0.1%明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結合之間提供明顯窗口。實驗方法測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將30^1[3H]-螺哌隆(spiperone)(0.16nM最終濃度)和30pl的試驗化合物(10x最終濃度)加至每個試驗孔。對于每塊測定板，就在存在30Ml載體(10。/。(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結合)或30i:i1氟代哌啶醇(10fiM最終濃度；定義非特異性結合(NSB))情況下的卩H]-螺哌隆結合而言，得到8個重復樣。然后，添加膜，使最終體積為300|aL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預浸1小時)上。在4。C,用250(il洗滌緩沖液(50mMHEPES,lmMEDTA,120mMNaCLpH7.4)洗滌五次，以除去未結合的放射性物質。將板干燥，然后使用Packard板密封劑，從下面將板密封，將MicroScint-O(50W)加至每個孔。將板密封(TopSealA)，用閃爍計數(shù)器(TopCount,PackardBioscience),使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結合的放射性。通過從平均最大結合減去平均NSB，確定總特異性結合(Bo)。也從所有其它孔的值減去NSB值。將這些數(shù)據(jù)表達成占Bo的百分比。使用通常范圍為O.lnM至10(xM的系列稀釋，確定化合物濃度-效應曲線(對[3司-螺哌隆結合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pIC5o(對卩H]-螺哌隆結合產(chǎn)生50%抑制作用的摩爾濃度的負對數(shù))。對于化合物A，上述測定的結果顯示在表l中。表1化合物(32pEC50P2IntActotl結合pIC50pl結合pIC50D2結合pIC50A9.20.87.66.95.8開始測定(Onsetassay)Qunkin-Hartley豚鼠(交付時為200g至300g)由指定的飼養(yǎng)機構提供。這些豚鼠通過頸脫位法來處死，將氣管分離。將粘連的結締組織除去，然后將每根氣管都切成四個環(huán)。然后，將這些組織環(huán)連接到等長傳感器。將這些組織洗滌，然后將lg的力施加給每個環(huán)。在所有實驗中，都使用成對的曲線設計(pairedcurvedesign)。將致敏劑量的lpM醋曱膽堿施加給這些組織。然后，將組織洗滌(三次，各次洗滌間隔一分鐘)，重新施加維持不變的lg張力，使組織保持l小時，達到平衡。然后，用lpM醋曱膽堿使組織收縮，一旦得到穩(wěn)定的響應，就構建異丙腎上腺素的蓄積濃度響應曲線(1(T9M-10-5M)。然后，將組織洗滌(三次，各次洗滌間隔一分鐘)，然后放置休息一'h時。在此之后，用lnM醋曱膽堿使組織收縮，添加p[A]5o濃度的試驗化合物。一旦組織已達到最大松弛，就添加30xp[A]5o濃度的試驗化合物。一旦組織響應已達到坪值，就將10|iM索他洛爾加至上述浴中，以確認松弛是(32介導的。使用ADInstrumentschart4forwindows軟件來收集數(shù)據(jù)，所述軟件測量37激動劑的每個濃度所產(chǎn)生的最大張力。對于異丙腎上腺素蓄積濃度曲線的每個濃度，都將響應值計算成醋曱膽堿所引起收縮的松弛百分比。將曲線描繪成log，o[激動劑](M)與對醋甲膽堿所引起收縮的抑制百分比。然后，將這些數(shù)據(jù)擬合成非線性回歸曲線擬合。對于每個實驗，都利用以下形式的4參數(shù)對數(shù)函數(shù)來對E/[A]曲線進行擬合E和[A]分別為藥理作用(松弛百分比)和激動劑的濃度；a、(3、[A]50和m分別為漸近線參數(shù)、基線參數(shù)、位置參數(shù)和斜率參數(shù)。每條異丙腎上腺素曲線的p[A]5o和IA都從這種擬合來確定，以確定組織是否可用于得出試驗化合物的起效時間。對于每個試驗化合物的p[A]M)濃度,都將響應值計算成醋曱膽堿所引起收縮的松弛百分比。將結果描繪成松弛百分比與時間，計算并且記錄達到90%松弛值所消耗的時間。添加30xp[A]5o濃度，這使得能確定個體組織中的最大化合物作用。因此，計算并且記錄p[A]5o濃度時的化合物作用占最大化合物作用的百分比。大鼠的藥物動力學使用合適的給藥載體，制備試驗化合物的給藥溶液。給藥溶液中化合物的濃度通過以下方法來確定將等份液稀釋至50嗎'mr1的標稱濃度(nominalconcentration),并且憑借以此濃度雙重注射標準溶液和QC標準來進行校正?；衔锿ㄟ^推注到尾靜脈內而以靜脈內的方式給予到多組大鼠(每組由三只250-350g大鼠組成)(約lml'kg")。對于口服給藥，另一組動物(由2或3只動物組成)通過經(jīng)口管飼法來給藥(3ml.kg力。所遞送的劑量通過失重來估計。通常在給藥之前沒有對動物禁食，雖然如果需要的話就對這種情況進行研究。從尾靜脈將血液樣品(0.25ml)采集到lml注射器中，在樣品采集之后，立即將其轉移至EDTA試管，通過離心(5min,13000rpm)來制備血漿，之后貝i存在-20。C。典型的采樣時間為2、4、8、15、30、60、120、180、240、300分鐘或直到準確地描述了終末半衰期(terminalt1/2)。血漿中分析物(或多種分析物)的濃度通過定量性質譜來測定。以曱醇中38lmg/ml的濃度來制備標準和質控儲備溶液。將一定范圍的通過系列稀釋來制備的標準和QC儲備液加至對照大鼠血漿(50iil)。此濃度范圍覆蓋了大鼠樣品中分析物的水平的范圍。使用包含內標(被選擇為與分析物非常相似)的50^1有機溶劑和100^1有機溶劑，對標準物、QC物和樣品進行液體提取。然后，樣品通過反復倒置來混合，在-20。C貯存至少1小時，然后在離心機中以3500rpm離心20分鐘。轉移每種樣品的等份液(12(^1),用于通過LC-MSMS進行分析。覆蓋試驗樣品中濃度范圍的標準和質控樣品處于上述標稱濃度的25%。利用WinNonlin來進行藥物動力學數(shù)據(jù)分析。利用標準的非房室分析(non-compartmentalanalysis)來4古i十參凄t，侈'H口Tmax、Cmax、人一z、t/2一入一z、AUCall、AUC膨(觀察到的)、Cl(觀察到的)、Vss(觀察到的)。權利要求1.7-[(1R)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3H)-酮的藥用鹽，條件是所述鹽不是二(三氟乙酸)鹽、二氫溴酸鹽或二乙酸鹽。2.權利要求1所述的藥用鹽，其中所述鹽為鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、丙酮酸鹽、琥珀酸鹽、草酸鹽、曱磺酸鹽、對曱苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙二酸鹽、昔萘曱酸鹽、抗壞血酸鹽、油酸鹽、煙酸鹽、糖精酸鹽、己二酸鹽、曱酸鹽、羥乙酸鹽、L-乳酸鹽、D-乳酸鹽、天冬氨酸鹽、蘋果酸鹽、L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、硬脂酸鹽、2-糠酸鹽、3-槺酸鹽、萘二磺酸鹽(萘-l，5-二磺酸鹽或萘-l-(磺酸)-5-磺酸鹽)、乙二磺酸鹽(乙烷-l，2-二磺酸鹽或乙烷-l-(磺酸)-2-磺酸鹽)、羥乙磺酸鹽(2-羥基乙基磺酸鹽)、均三曱苯-2-磺酸鹽或萘-2-磺酸鹽。3.權利要求1所述的藥用鹽，其中所述鹽為鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽或昔萘曱酸鹽。4.7-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(3//)-酮的二氫溴酸鹽的多晶型形式(多晶型形式B)，其X-射線粉末衍射(XRPD)圖含有如下特征峰7.4(±0.1°),13.2(±0.1。),14.1(士0.1。),16.6(±0.1。),21.0(士0.1。)和21.5(±0.1。)26。5.—種制備權利要求3所述的7-[(1/)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-l,3-苯并噻唑-2(37/)-酮的二氫溴酸鹽的多晶型形式B的方法，包括將HBr于乙腈中的水溶液加入到7-[(17)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基)氨基)-l-羥基乙基]_4-羥基-1,3-苯并噻唑-2(377)-酮于乙腈中的溶液中，并使產(chǎn)物形成為固體。6.—種藥物組合物，其包含權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物，以及結合有藥用助劑、稀釋劑或載體。7.權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物，其用于治療。8.權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物在制備用于治療對腎上腺素受體活性的調節(jié)是有益的人類疾病或病癥的藥物中的用途。9.權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物在制備用于治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哞喘或鼻炎的藥物中的用途。10.權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物用于治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、譯喘或鼻炎的用途。11.治療對P2腎上腺素受體活性的調節(jié)是有益的疾病或病癥或降#^斤述疾病或病癥風險的方法，所迷方法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物。12.法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的權利要求1所述的藥用鹽或權利要求4所述的化合物。13.權利要求11或權利要求12所述的方法，其中所述疾病或病癥為成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣肺、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、譯喘或鼻炎。全文摘要本發(fā)明披露了7-[(1R)-2-({2-[(3-{[2-(2-氯苯基)乙基]氨基}丙基)硫基]乙基}氨基)-1-羥基乙基]-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3H)-酮的藥用鹽，條件是所述鹽不是二(三氟乙酸)鹽、二氫溴酸鹽或二乙酸鹽；以及披露了所述化合物作為藥物的用途(例如，用在治療呼吸系統(tǒng)疾病(例如，哮喘或COPD)中)。文檔編號A61K31/428GK101687826SQ200880014424公開日2010年3月31日申請日期2008年2月29日優(yōu)先權日2007年3月1日發(fā)明者簡·威思納爾,羅伯特·惠托克申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司