專利名稱：：金不換總生物堿及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及金不換藥材提取物——金不換總生物堿，同時(shí)本發(fā)明還涉及金不換總生物堿的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：金不換為防己科植物廣西地不容St印haniakwangsiensisH.S.Lo、小花地不容StephaniamicranthaH.S丄oetM.Yang或桂南地不容StephaniakuinanensisH.S.LoetM.Yang的干燥塊根。功能清熱解毒，散瘀消腫，健胃止痛；用于胃、十二指腸潰瘍疼痛，上呼吸道感染，急性胃腸炎，菌痢，牙痛，神經(jīng)痛，癰瘡腫毒，跌打腫痛。'研究表明金不換藥材主含生物堿，主要是延胡索乙素、L一四氫巴馬、巴馬汀、去氫千金藤堿、千金藤堿、青風(fēng)藤堿、青藤堿、藥根堿、木蘭花堿等生物堿。延胡索乙素對(duì)于治療胃腸道疾病、肝膽系統(tǒng)疾病所引起疼痛的效果較好；對(duì)頭痛和腦震蕩頭痛有一定療效。L一四氫巴馬汀(羅通定)藥理作用與延胡索乙素類似，其鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于延胡索乙素。巴馬汀具有廣譜抗菌、抗病毒作用，具有明顯增加白細(xì)胞吞噬細(xì)菌的能力；具有良好的解熱消炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫力作用；較強(qiáng)的快速降血壓作用。藥根堿具有消炎抗菌作用；具有抗實(shí)驗(yàn)性心率失常的作用；具有一定程度的降壓作用。青藤堿是鎮(zhèn)痛消炎藥，主要應(yīng)用于治療風(fēng)濕及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及抗心律失常，還有鎮(zhèn)痛、抗炎和免疫等作用。由以上各化學(xué)成分的理化性質(zhì)及藥理作用可知，金不換藥材中的生物堿有水溶性和脂溶性兩大類，水溶性生物堿主要有消炎抗菌、降壓作用，脂溶性生物堿主要有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解痙作用。通過(guò)分析金不換藥材的化學(xué)成分及所含單個(gè)成分的藥理作用，本發(fā)明者們查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，未見(jiàn)有關(guān)金不換總生物堿藥理作用及臨床應(yīng)用方面的報(bào)道。結(jié)合現(xiàn)代的提取分離純化技術(shù)和藥理試驗(yàn)方法，進(jìn)行總生物堿提取純化研究，并采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了抗炎鎮(zhèn)痛、抗胃潰瘍和實(shí)驗(yàn)性痛經(jīng)模型的藥理實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果達(dá)到了預(yù)期的效果。將中藥材提取成有效部位，結(jié)合藥理學(xué)研究結(jié)果及根據(jù)不同疾病的用藥特點(diǎn)制備成不同的制劑，在治療胃病、關(guān)節(jié)炎、心血管疾病方面中的應(yīng)用，以起到最大的社會(huì)效益。如用于胃病的治療時(shí)本發(fā)明制成胃漂浮片，即可增加胃部藥物濃度，增強(qiáng)鎮(zhèn)痛和抗菌的效果，又可延緩巴馬汀等成分的降壓作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種成分明確、質(zhì)量可控、安全性好、純度較高的金不換藥材提取物——金不換總生物堿。本發(fā)明的另一目的是提供工藝簡(jiǎn)單、提取率高的金不換總生物堿的制備方法。本發(fā)明的還有一個(gè)目的是提供金不換總生物堿在制備治療胃病、關(guān)節(jié)炎、痛經(jīng)等疾病的藥物方面的應(yīng)用。金不換為防己科植物，根據(jù)已有研究結(jié)果顯示金不換藥材含延胡索乙素、L一四氫巴馬、巴馬汀、去氫千金藤堿、千金藤堿、青風(fēng)藤堿、青藤堿、藥根堿、木蘭花堿等生物堿。總結(jié)分析各生物堿的藥理作用研究結(jié)果可知金不換藥材中的生物堿有水溶性和脂溶性兩大類，其中水溶性生物堿主要有抗炎、抗菌、降壓作用，脂溶性生物堿主要有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解痙等作用。進(jìn)一步結(jié)合各成分的理化性質(zhì)，本發(fā)明設(shè)計(jì)了下述制備方法獲同時(shí)含有水溶性和脂性兩種生物堿的總生物堿，具體方法如下(1)提取取金不換藥材粗粉，加入814倍量的7595%乙醇滲漉或回流，收集乙醇液，減壓回收乙醇，得提取液；上述提取溶媒還可采用酸性乙醇。(2)純化可選擇以下方法中的任一種a.將提取液濃縮為稠膏(相對(duì)密度1.30，5(TC)，用15%硫酸溶解，濾過(guò)，過(guò)大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至中性，再用7095%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，真空千燥，得金不換總生物堿；b.將提取液濃縮為稠膏(相對(duì)密度1.251.30，5CTC)，用O.12%硫酸溶解，濾過(guò)，過(guò)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱吸附，水洗除雜，取出樹(shù)脂，用510%氨水乙醇回流提取，提取液減壓濃縮，真空干燥，得金不換總生物堿；c.將提取液濃縮為稠膏(相對(duì)密度1.251.30，50'C)，用15%酸溶解，濾過(guò)，濾液用弱堿調(diào)pH值為911，靜置2448小時(shí)，濾過(guò)，取濾渣，用水洗至中性，再用1016倍量重量的90%100%乙醇溶解，減壓回收乙醇，真空干燥，得金不換總生物堿。采用上述方法制備所得的金不換總生物堿提取物中金不換總生物堿百分?jǐn)?shù)含量以延胡索乙素計(jì)為5595%，其中含延胡索乙素不少于20fflg/g、含鹽酸巴馬汀不少于8mg/g。本發(fā)明對(duì)金不換藥材制備所得的金不換總生物堿(后面簡(jiǎn)稱JB-2)，進(jìn)行了抗炎鎮(zhèn)痛、抗胃潰瘍、痛經(jīng)模型的藥理學(xué)研究，結(jié)果表明金不換總生物堿對(duì)胃病、關(guān)節(jié)炎、女性痛經(jīng)方面均可起到良好的治療作用。通過(guò)相關(guān)藥理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明1、對(duì)熱或醋酸所致疼痛有明顯抑制作用，作用強(qiáng)于阿斯匹林；對(duì)二甲苯所致炎癥有明顯抑制作用，作用強(qiáng)于阿斯匹林。提示JB-2具較強(qiáng)的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。2、給小鼠分別灌胃給藥JB-2100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg三個(gè)劑量組，連續(xù)三天，對(duì)酒精性胃損傷有明顯的保護(hù)作用，效果強(qiáng)于三九胃泰膠囊。給大鼠分別灌胃給藥60fflg/kg、30mg/kg、15呢/kg三個(gè)劑量組，連續(xù)三天，對(duì)幽門(mén)結(jié)扎胃潰瘍模型大鼠有明顯保護(hù)作用，JB-2各劑量組可明顯減少幽門(mén)結(jié)扎引起潰瘍個(gè)數(shù)；胃液分析可見(jiàn)給大鼠不同劑量的JB-2后，胃液量與胃液總酸度明顯小于模型組，但未達(dá)到假手術(shù)對(duì)照組水平。提示JB-2對(duì)胃潰瘍有明顯的治療作用。3、給雄性大鼠腹腔注射催產(chǎn)素后不出現(xiàn)痛經(jīng)現(xiàn)象，雌性大鼠可出明顯痛經(jīng)現(xiàn)象。給雌性大鼠灌服JB—215、30、60mg/kg三種劑量均可顯著抑制催產(chǎn)素所致痛經(jīng)模型雌性大鼠30分內(nèi)扭體次數(shù)，高劑量還可顯著減少痛經(jīng)的發(fā)生率。試驗(yàn)進(jìn)一步表明JB—2100、50、25mg/kg劑量組可顯著降低小鼠子宮平滑肌收縮幅度，提示JB—2具有舒張子宮平滑肌的功效，可作為女性痛經(jīng)的治療藥物。本發(fā)明提供的金不換總生物堿在制備治療胃病、關(guān)節(jié)炎、女性痛經(jīng)等疾病方面的藥物中的應(yīng)用，可以是將所得金不換總生物堿加入藥用輔料制成各種普通制劑或緩釋、控釋劑型，普通制劑可以是片劑、膠囊、顆粒劑、滴丸、貼劑或注射劑，緩釋制劑可以是緩釋片、膠囊或微丸，緩釋制劑的組分及重量百分比含量為金不換總生物堿1030%，骨架材料1040%，稀釋劑1550%，潤(rùn)滑劑0.53%，各組分的重量百分比含量總和為100%。上述骨架材料為羥丙基甲基纖維素，丙烯酸樹(shù)脂n、in、iv，羧甲基纖維素和乙基纖維素等中的一種或幾種；稀釋劑為聚維酮K3(j，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，羧甲基淀粉鈉，十八醇，十六醇，硬脂酸，微晶纖維素，淀粉，甘露醇和碳酸氫鈉等中的一種或幾種；潤(rùn)滑劑為硬脂酸鎂、滑石粉或微粉硅膠等。本發(fā)明按上述組方比例制成胃漂浮片作為胃瘍潰的治療藥物，即可增加胃部藥物濃度，增強(qiáng)鎮(zhèn)痛和抗菌的效果，又可延緩巴馬汀等藥物的降壓作用，本發(fā)明提供了一項(xiàng)治療胃潰瘍藥物的新思路。.本發(fā)明還通過(guò)一般藥物制劑的方法將金不換總生物堿制成膠囊、貼劑或注射劑，結(jié)合其抗炎鎮(zhèn)痛、抗胃病、抗痛經(jīng)等作用，為其在治療胃病、關(guān)節(jié)炎、女性痛經(jīng)等病疾方面藥物中的應(yīng)用提供良好的前景。具體的實(shí)施方式下面結(jié)合最佳的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于以下實(shí)施例。實(shí)施例1取金不換藥材粗粉l.OKg，加入12倍量的75%乙醇以30ml/min/Kg藥材的速度滲漉，收集滲漉液。減壓回收乙醇，濃縮為稠膏(相對(duì)密度1.30，50°C),用5X硫酸溶至1000ml，濾過(guò)，過(guò)D101大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至中性，再用95%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，真空干燥，得金不換總生物堿55g，含總生物堿以延胡索乙素計(jì)為75.8%。實(shí)施例2取金不換藥材粗粉lKg,加入16倍量的95%乙醇以20ml/min/Kg藥材的速度滲漉，收集滲漉液。減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.28(5CTC)，用5%硫酸溶液溶解，濾過(guò)，濾液用氨水調(diào)pH值至911，靜置24小時(shí)，濾過(guò)，取濾渣，用水洗至中性，再用12倍量重量的95%乙醇溶解，減壓回收乙醇，真空干燥，得金不換總生物堿48g，含總生物堿以延胡索乙素計(jì)為68.2%。實(shí)施例3取金不換藥材粗粉lKg，加入10倍量的80%乙醇回流二次，濾過(guò)，合并乙醇液，減壓回收乙醇，濃縮為稠膏(相對(duì)密度1.30，50°C)，用0.5%硫酸8000ml溶解，濾過(guò)，過(guò)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱吸附，水洗除雜，取出樹(shù)脂，加2倍量5%氨水乙醇回流提取三次，每次1.5小時(shí)，提取液減壓濃縮，真空干燥，得金不換總生物堿40g，含總生物堿以延胡索乙素計(jì)為86.1%。實(shí)施例4取金不換總生物堿150g,加入羥丙基甲基纖維素150g、聚維酮K3o45g、十八醇150g、硬脂酸鎂5g，混和均勻，干法制粒，壓片，制成胃漂浮緩釋片(1000片)。每片含金不換總生物堿150mg。實(shí)施例5取金不換總生物堿200g，加入羧甲基纖維素80g、羥丙基甲基纖維素20g、甲基纖維素50g、甘露醇30g，用10X聚維酮K3o乙醇液濕法制粒，.加入硬脂酸鎂4.5g，混和均勻，壓片，制成緩釋片(1000片)。每片含金不換總生物堿200mg。實(shí)施例6取金不換總生物堿200g，微晶纖維素20g，淀粉80g，羧甲基淀粉鈉15g，混合均勻，用50%藥用乙醇制軟材，過(guò)24目篩制粒，6(TC條件下干燥4小時(shí)，20目篩整粒，加入3g微粉硅膠，填充膠囊，得金不換總生物堿膠囊928粒。每片含金不換總生物堿200mg。實(shí)施例7取60g卡波姆9400加水適量，使充分溶脹，備用；另取10g聚乙烯124加水適量，于8(TC下加熱使溶解，備用。再取60g高嶺土與20g聚丙烯酸鈉加甘油300ml，攪勻，再加適量水，攪拌均勻，加入卡波姆9400和聚乙烯124兩種溶液，攪勻，得基質(zhì)。取冰片10g、肉桂油15ml與金不換總生物堿50g加95%乙醇200ml使溶解，將溶液加入上述基質(zhì)中，攪勻。取硝酸鋁加水適量，使溶解，加入上述藥物與基質(zhì)混合物中，用檸檬酸調(diào)pH值為5.0，涂布于無(wú)紡布上，加蓋聚丙烯保護(hù)膜，即得。金不換總生物堿藥效學(xué)試驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)材料1、藥物金不換總生物堿(JB-2)，由本發(fā)明人制備，批號(hào)070501。實(shí)驗(yàn)前，以純水將藥液配制成實(shí)驗(yàn)所需濃度，放入4'C冰箱中貯存?zhèn)溆谩Ｈ盼柑┠z囊，由三九醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z44020704，批號(hào)為200340731;阿斯匹林，廣州僑光制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)20015784;月月舒痛經(jīng)寶顆粒，宛西制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)040807。2、試劑與儀器縮宮素注射液，上海第一生化藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)051105;己烯雌酚片，天津力生制藥股份有限公司生，產(chǎn)批號(hào)0507019;苯甲酸雌二醇注射液，上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)050104。乙醇、二甲苯、醋酸均為分析純，由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。PS—12pH計(jì)；HBL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；JH-2型張力傳感器，北京航人醫(yī)學(xué)下程研究所生產(chǎn)。3、動(dòng)物清潔級(jí)昆明種小鼠，雌雄各半，粵檢證字第2005A048號(hào)。清潔級(jí)SD大鼠，雌雄各半，粵檢證字第2005A060號(hào)，均由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。飼養(yǎng)條件動(dòng)物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，分籠飼養(yǎng)，每籠5只，由專人飼養(yǎng)管理。動(dòng)物室光照充足，通風(fēng)和空調(diào)設(shè)備良好，室溫控制在20-25°C，相對(duì)濕度為50-70%，實(shí)驗(yàn)室按常規(guī)定期消毒。二、試驗(yàn)方法與結(jié)果1JB-2對(duì)胃潰瘍的防治作用1.1對(duì)酒精引起的小鼠胃粘膜損傷的影響方法昆明種小鼠60只，體重18-22克，雌雄各半，分成6組，分別為對(duì)照組(給予等體積蒸鎦水)，三九胃泰400mg/kg組，JB-2100mg/kg:50mg/kg、25tng/kg三個(gè)劑量組，灌胃給藥，連續(xù)3日，末次給藥前24小時(shí)禁食，不禁水。末次給藥后30分鐘用無(wú)水乙醇灌胃，0.1ml/10g，l小時(shí)后斷頸處死大鼠，取胃洗凈置W甲醛中固定24h，計(jì)數(shù)潰瘍個(gè)數(shù)作為潰瘍指數(shù)。結(jié)果表l試驗(yàn)結(jié)果表明與對(duì)照組比較，JB-2高、中、低三個(gè)劑量組對(duì)乙醇所致小鼠胃潰瘍具有明顯的抑制潰瘍的作用，使乙醇引起的潰瘍數(shù)顯著減少，統(tǒng)血程度減輕。表lJB-2對(duì)無(wú)水乙醇引起的胃粘膜損傷的影響(7±s，n=10)組別劑量(mg/kg)潰瘍指數(shù)統(tǒng)血指數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>對(duì)照組比較，**服01.1.2對(duì)幽門(mén)結(jié)扎型胃潰瘍的作用方法取大鼠60只，體重200-250克，雌雄各半，分成6組，分別為假手術(shù)對(duì)照組，模型對(duì)照組，三九泰胃組，JB-260mg/kg、30mg/kg、15mg/kg三個(gè)劑量組，預(yù)先給藥3d，實(shí)驗(yàn)前禁食24h，可自由飲水和給與受試藥物。第三次給藥l小時(shí)后用乙醚麻醉，固定在鼠板上，相對(duì)無(wú)菌條件下自胸骨劍突下沿腹中線行腹腔切開(kāi)，暴露胃，結(jié)扎幽門(mén)，十二指腸再給藥一次，縫合切口，停止供水供食。經(jīng)18h后處死大鼠，打開(kāi)腹腔，結(jié)扎食道將胃取出，收集胃液(1500r/min離心15min后收集胃液)，并測(cè)其體積，以pH計(jì)測(cè)胃液酸度，用0.Qlmol/LNaOH滴定胃酸，測(cè)總酸度。將胃體浸泡于W甲醛中固定24h，檢査胃粘膜面，記錄潰瘍個(gè)數(shù)。結(jié)果由表2可見(jiàn)經(jīng)幽門(mén)結(jié)扎后大鼠明顯出現(xiàn)潰瘍，三九胃泰膠囊對(duì)幽門(mén)結(jié)扎所致大鼠胃潰瘍表現(xiàn)出了明顯抑制，JB-2各劑量組也可明顯減少幽門(mén)結(jié)扎引起潰瘍個(gè)數(shù)；胃液分析可見(jiàn)給大鼠不同劑量的JB-2后，胃液量與胃液總酸度明顯小于模型組，但未達(dá)到假手術(shù)對(duì)照組水平。表明JB-2對(duì)幽門(mén)結(jié)扎型胃潰瘍有較好的預(yù)防作用。表2JB-2對(duì)幽門(mén)結(jié)扎引起的胃潰瘍的影響(I土s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2JB-2的抗炎、鎮(zhèn)痛作用研究2.1JB-2對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹急性炎癥的作用方法取昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分為空白組(給蒸餾水)、陽(yáng)性對(duì)照組(阿斯匹林0.2g/kg)和JB-2100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg三個(gè)劑量組，灌胃給藥，0.2ml/10g體重，連續(xù)3日，末次給藥后1.0h后，右耳涂二甲苯20nl，15min后用6mm打孔器于左右耳同一部位取材，稱重，計(jì)算兩耳片重差和抑制率。結(jié)果由表3結(jié)果可見(jiàn)涂二甲苯的右耳出現(xiàn)明顯紅腫，重量明顯大于左耳，兩耳片重差達(dá)8.81mg,JB-2高、中、低三個(gè)劑量和陽(yáng)性藥物組對(duì)耳廓腫脹均有抑制作用，其中高、中劑量組有顯著差異。提示JB-2對(duì)熱所二甲苯致所致炎癥有明顯抑作用。表3JB-2對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的作用G士s，n=10)組別劑量(mg/kg)兩耳片重差(mg)抑制率(%)""模型對(duì)照組^8.81±2.901阿斯匹林組2004.26±1.77**51.6JB-2(高)組ioo3.31±2.15林62.4JB-2(中)組504.07士1.67林53.8JB-2(低)組_^_4.41±2.24_49.8與模型對(duì)照組比較，承p〈0.05'林p〈0.012.2JB-2對(duì)醋酸致小鼠炎性疼痛的作用方法取昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分空白組(給蒸餾水)、陽(yáng)性對(duì)照組阿斯匹林200mg/kg組，JB-2100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg三個(gè)劑量組，采用灌胃給藥，0.2ml/10g體重，再連續(xù)用藥三天，末次給藥后1.0h后，腹腔注射1.0%醋酸0.2ml/只，以觀察記錄腹腔注射醋酸后最早扭體時(shí)間及5-15min內(nèi)扭體次數(shù)，并計(jì)算抑制率。抑制率(％)=(對(duì)照組扭體次數(shù)一給藥組扭體次數(shù))/對(duì)照組扭體次數(shù)XIOO%結(jié)果由表4結(jié)果可見(jiàn)模型對(duì)照小鼠出明顯的痛覺(jué)反應(yīng)，平均扭體次數(shù)達(dá)21.3次，JB-2高、中、低三個(gè)劑量和陽(yáng)性藥物組對(duì)耳廓腫脹均有明顯抑制作用。提示JB-2對(duì)醋酸所致炎性疼痛有明顯抑作用。表4JB-2對(duì)醋酸小鼠疼痛的作用(；土s，n=10).<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>與模型對(duì)照組比較，*p<0.05，林p〈0.012.3JB-2對(duì)小鼠熱致鎮(zhèn)痛的作用方法用55士0.5'C熱板篩選痛閾在530s的雌性小鼠40只，隨機(jī)分5組，即空白組(給蒸餾水)、陽(yáng)性對(duì)照組阿斯匹林200mg/kg，JB-2100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg三個(gè)劑量組，采用灌胃給藥，0.2ml/10g體重，給藥1小時(shí)后測(cè)各組小鼠的痛閾。結(jié)果由表5結(jié)果可見(jiàn)模型對(duì)照小鼠出明顯的痛覺(jué)反應(yīng)，JB-2高、中、低三個(gè)劑量和陽(yáng)性藥物組對(duì)熱所致疼痛均有明顯抑制作用。提示JB-2對(duì)熱所疼痛有明顯抑作用。表5JB-2對(duì)小鼠熱板法致痛的抑制作用(；士s，n=10)組別劑量(mg/kg)痛域值(s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3JB—2對(duì)痛經(jīng)動(dòng)物模型的影響3.1對(duì)催產(chǎn)素所致大鼠痛經(jīng)模型的影響方法雌性SD大鼠50只，腹部刮毛脫毛，隨機(jī)分為5組，各組大鼠均皮下注射乙烯雌酚連續(xù)10天，每天1次，第1天及第10天0.8mg/只，第2至第9天0.2mg/只，第6天開(kāi)始分別給予以下5種藥物，純化水、月月舒痛經(jīng)寶顆粒2g/kg及JB—260、30、15mg/kg,灌胃給藥，連續(xù)5天。另取同批雄性大鼠同法注射乙烯雌酚作為陰性對(duì)照。末次給乙烯雌酚后24小時(shí)，給藥后半小時(shí)，大鼠ip催產(chǎn)素2u/只，觀察并記錄30分鐘內(nèi)大鼠痛經(jīng)扭體反應(yīng)率，以扭體反應(yīng))大鼠腹部收縮內(nèi)凹，軀干與后肢伸展，臀部與一側(cè)肢體內(nèi)旋)為子宮收縮痛經(jīng)指標(biāo)o,結(jié)果由表6可見(jiàn)，雄性陰性大鼠，ip催產(chǎn)素后不出現(xiàn)痛經(jīng)現(xiàn)象，JB—215、30、60mg/kg三個(gè)劑量組均可顯著抑制催產(chǎn)素所致痛經(jīng)模型雌性大鼠30分內(nèi)扭體次數(shù)，高劑量可顯著減少痛經(jīng)的發(fā)生率。月月舒痛經(jīng)寶顆粒3g/kg也可顯著減少模型小鼠扭體次數(shù)。'表6JB--2對(duì)催產(chǎn)素所致大鼠痛經(jīng)模型的影響(5土SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注痛經(jīng)發(fā)生率，經(jīng)y檢驗(yàn)，扭體次數(shù)經(jīng)t檢驗(yàn)。*p<0.05**p<0.01與空白基質(zhì)比較3.2JB—2對(duì)小鼠催產(chǎn)素所致子宮平滑肌收縮的作用方法取健康無(wú)孕雌性小白鼠50只，體重25-30g,按體重隨機(jī)分為5組，每組10只。模型組給予等體積的純水；月月舒痛經(jīng)寶顆粒3g/kg;JB-2100、50、25mg/kg各劑量組連續(xù)ig給藥7天，于實(shí)驗(yàn)前連續(xù)兩天，每天腹腔注射1次乙烯雌酚0.2ml/只，用戊巴比妥鈉40fflg/kg腹腔注射麻醉，在下腹部切l(wèi)cm左右的切口，打開(kāi)腹腔，找出一側(cè)子宮角，輕輕剝離周圍組織，在其中點(diǎn)用連有棉線的蛙心夾輕輕夾住，連在張力換能器上，用生理記錄儀描記曲線，待曲線穩(wěn)定后，在子宮上滴加縮宮素lml，觀察藥物對(duì)子宮平滑肌的影響。結(jié)果表7結(jié)果可見(jiàn)JB—2100、50、25mg/kg劑量組均可顯著降低子宮平滑肌收縮幅度，陽(yáng)性對(duì)照月月舒痛經(jīng)寶顆粒作用也很顯著，提示其具有舒張子宮平滑肌的功效。表7JB-2對(duì)子宮平滑肌的影響(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>與模型組比較*P〈0.05，**P〈0.014小結(jié)(1)JB-2具有較強(qiáng)的抗炎、鎮(zhèn)痛作用對(duì)熱或醋酸所致疼痛有明顯抑制作用，作用強(qiáng)于阿斯匹林；對(duì)二甲苯所致炎癥有明顯抑制作用，作用強(qiáng)于阿斯匹林。(2)JB-2對(duì)胃潰瘍有明顯治療作用給小鼠分別灌胃給藥JB-'2100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg三個(gè)劑量組，連續(xù)三天，對(duì)酒精性胃損傷有明顯的保護(hù)作用，效果強(qiáng)于三九胃泰膠囊；給大鼠分別灌胃給藥60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg三個(gè)劑量組，連續(xù)三天，各劑量組可明顯減少幽門(mén)結(jié)扎引起潰瘍個(gè)數(shù)；胃液分析可見(jiàn)給大鼠不同劑量的JB-2后，胃液量與胃液總酸度明顯小于模型組，但未達(dá)到假手對(duì)照組水平。(3)JB-2對(duì)痛經(jīng)有明顯治療作用給雌性大鼠灌服JB—215、30、60mg/kg三種劑量均可顯著抑制催產(chǎn)素所致痛經(jīng)模型雌性大鼠30分內(nèi)扭體次數(shù)，高劑量還可顯著減少痛經(jīng)的發(fā)生率。JB—2100、50、25mg/kg劑量組可顯著降低小鼠子宮平滑肌收縮幅度，陽(yáng)性對(duì)照藥月月舒痛經(jīng)寶顆粒的作用也很顯著，提示JB一2具有舒張子宮平滑肌的功效，可作為女性痛經(jīng)的治療藥物。權(quán)利要求1、一種金不換總生物堿，其特征在于由金不換藥材提取制備獲得，金不換總生物堿重量百分?jǐn)?shù)含量以延胡索乙素計(jì)為金不換總生物堿提取物的55～95％。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的金不換總生物堿，其特征在于含延胡索乙素重量百分?jǐn)?shù)不少于2%，含鹽酸巴馬汀重量百分?jǐn)?shù)不少于0.8%。3、權(quán)利要求1所述的金不換總生物堿的制備方法，其特征在于包括如下步驟(1)提取取金不換藥材粗粉，加入814倍量的7595%乙醇滲漉或回流，收集乙醇液，減壓回收乙醇，得提取液；(2)純化選擇以下方法中的任一種a.將提取液濃縮為稠膏，用15%硫酸溶解，濾過(guò)，過(guò)大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至中性，再用7095%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，真空干燥，得金不換總生物堿；b.將提取液濃縮為稠膏，用0.12%硫酸溶解，濾過(guò)，過(guò)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱吸附，水洗除雜，取出樹(shù)脂，用510%氨水乙醇回流提取，提取液減壓濃縮，真空干燥，得金不換總生物堿；c.將提取液濃縮為稠膏，用15%酸溶解，濾過(guò)，濾液用弱堿調(diào)pH值為911，靜置2448小時(shí)，濾過(guò)，取濾渣，用水洗至中性，再用1016倍量重量的90100%乙醇溶解，減壓回收乙醇，真空干燥，得金不換總生物堿。4、權(quán)利要求1所述的金不換總生物堿在制備治療胃病、關(guān)節(jié)炎或女性痛經(jīng)疾病方面的藥物中的應(yīng)用。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于與藥學(xué)可接受的輔料組合制成緩釋制劑、控緩制劑或普通制劑。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于所述的普通制劑是片劑、膠囊、顆粒劑、滴丸、貼劑或注射劑。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于所述的緩釋制劑為緩釋片、膠囊或微丸，其組分及重量百分比含量為金不換總生物堿1030%，骨架材料1040%，稀釋劑1550%，潤(rùn)滑劑0.53%，各組分的重量百分比含量總和為100%。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于所述的骨架材料為羥丙基甲基纖維素，丙烯酸樹(shù)脂n、m、iv，羧甲基纖維素和乙基纖維素中的一種或幾種。9、根據(jù)權(quán)利要求7所述金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于所述的稀釋劑為聚維酮K30、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、十八醇、十六醇、硬脂酸、微晶纖維素、淀粉、甘露醇和碳酸氫鈉中的一種或幾種。10、根據(jù)權(quán)利要求7所述金不換總生物堿的應(yīng)用，其特征在于所述的潤(rùn)滑劑為硬脂酸鎂、微粉硅膠或滑石粉。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種金不換總生物堿，金不換總生物堿含量以延胡索乙素計(jì)為金不換總生物堿提取物的55～95％，其中含延胡索乙素重量百分?jǐn)?shù)不少于2％，含鹽酸巴馬汀重量百分?jǐn)?shù)不少于0.8％。本發(fā)明還公開(kāi)了金不換總生物堿的制備方法取金不換藥材粗粉，加入乙醇滲漉或回流，取醇提液，減壓回收乙醇，濃縮為稠膏，用酸溶解，濾過(guò)，得濾液，將濾液過(guò)大孔樹(shù)脂柱或強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱吸附，水洗除雜，洗脫劑提取，收集洗脫液，減壓回收提取液，濃縮，干燥，即得金不換總生物堿；還可將滲漉液減壓回收乙醇，濃縮，用酸溶解，過(guò)濾，濾液用弱堿調(diào)pH值，使產(chǎn)生沉淀，過(guò)濾，取濾渣，加乙醇溶解，減壓回乙醇，干燥，即得總生物堿。對(duì)所得總生物堿進(jìn)行藥理學(xué)研究，結(jié)果表明金不換總生物堿有很好的解痙、鎮(zhèn)痛、消炎抗菌、活血等作用，可同藥學(xué)上可接受的成分組合制成各種緩釋、控釋劑型或其它劑型。文檔編號(hào)A61K31/4745GK101234141SQ20081002577公開(kāi)日2008年8月6日申請(qǐng)日期2008年1月14日優(yōu)先權(quán)日2008年1月14日發(fā)明者紅鄒,陳健文,馬仁強(qiáng)申請(qǐng)人:馬仁強(qiáng)