專利名稱：：治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥品的質(zhì)量控制方法，特別是涉及一種治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：婦科炎癥是指婦女生殖系統(tǒng)感染所引起的疾病。全世界約87%的成年女性不同程度的感染過(guò)婦科炎癥，臨床常見(jiàn)的婦科炎癥有陰道炎、宮頸炎、盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎等，往往經(jīng)久不愈，影響生活質(zhì)量和夫妻生活，并會(huì)導(dǎo)致不孕、誘發(fā)腫瘤等，后患無(wú)窮。婦科炎癥已成為困擾現(xiàn)代女性的一大疾病，據(jù)世界衛(wèi)生組織對(duì)中國(guó)婦女的調(diào)査我國(guó)育齡女性約為1.52億，其中約41%的女性患有不同程度的婦科炎癥，已婚女性發(fā)病率更高達(dá)70%。由于女性生殖器官的特殊性，婦科炎癥為成年女性的常見(jiàn)、多發(fā)病，其臨床表現(xiàn)多種多樣，病因復(fù)雜且常伴有多種嚴(yán)重并發(fā)癥，對(duì)女性的生活和工作帶來(lái)了很大影響。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)和文化的發(fā)展以及女性自我保健意識(shí)的增強(qiáng)，婦科炎癥用藥市場(chǎng)近年來(lái)增長(zhǎng)很快，婦科炎癥用藥市場(chǎng)的格局也發(fā)生了很大變化。較高的發(fā)病率使得我國(guó)婦科炎癥用藥的市場(chǎng)穩(wěn)步增長(zhǎng)，年度增幅在10%左右。中成藥由于副作用小，適于長(zhǎng)期用藥，適應(yīng)了婦科炎癥容易復(fù)發(fā)的特點(diǎn)，臨床應(yīng)用非常廣泛。本發(fā)明的發(fā)明人在專利申請(qǐng)?zhí)枮镃N2006102003230的專利申請(qǐng)中請(qǐng)求保護(hù)了一種治療婦科炎癥的藥物及其制備方法，其中膠囊制劑是這樣制備的頭花蓼400g、地稔400g、黃柏300g、延胡索50g、當(dāng)歸150g、五指毛桃100g和益母草50g，加水煎煮兩次，每次加10倍量水煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至6(TC相對(duì)密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩，加入淀粉適量，以75%乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，每粒裝0.25g，制成1000粒。該藥物組合主要由地稔、頭花蓼、黃柏、當(dāng)歸、五指毛桃、益母草等藥味組成，具有清熱解毒，除濕止帶，散淤止痛的功效。用于婦女帶下等癥，帶下癥相當(dāng)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的婦女盆腔炎、附件炎、宮頸炎等婦科生殖器官炎癥。由于該藥物是一種新藥，目前還沒(méi)有有效的質(zhì)量控制方法。發(fā)明人對(duì)該藥物的膠囊制劑進(jìn)行了研究，以期探索如何有效控制膠囊制劑的質(zhì)量，以確保膠囊制劑的臨床療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，包括性狀、鑒別、檢査和含量測(cè)定，所制定的質(zhì)量控制方法能全面有效地控制膠囊制劑的質(zhì)量，從而確保了膠囊制劑的臨床療效。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法包括性狀、鑒別、檢査和含量測(cè)定，其中鑒別包括地稔、頭花蓼、黃柏、五指毛桃和延胡索的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法對(duì)膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定。具體的質(zhì)量控制方法為性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕褐色顆粒及粉末，氣微，味苦、微澀；鑒別以地稔對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿一甲醇一水的下層液為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別地稔；以頭花蓼對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以石油醚一醋酸乙酯一甲酸為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別頭花蓼；以黃柏對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿一醋酸乙酯一甲酸為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別黃柏；以補(bǔ)骨脂素對(duì)照品為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以正己烷一甲苯一醋酸乙酯為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別五指毛桃；以延胡索對(duì)照藥材為對(duì)照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以正己烷一氯仿一甲醇為展開(kāi)劑照薄層色譜法鑒別延胡索；檢査符合中國(guó)藥典2005年版一部附錄IL中膠囊劑項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定以沒(méi)事子酸對(duì)照品為對(duì)照，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇一0.04%磷酸溶液為流動(dòng)相照高效液相色譜法測(cè)定膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量。前述鑒別由以下項(xiàng)組成(1)地稔鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)?0ml水溶解，以醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，制得供試品溶液；另取地稔對(duì)照藥材lg，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏，同供試品溶液制備方法制成地稔對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和地稔對(duì)照藥材溶液各IOy1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為17:2:2的氯仿-甲醇-水的下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)頭花蓼鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加丙酮20ml，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取頭花蓼對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制得對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為30:40:1的6(TC9(TC石油醚-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以6%三氯化鐵乙醇溶液，放置3060秒后觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)黃柏鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)觢。/。鹽酸20ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以氯仿提取2次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，制得供試品溶液；另取黃柏對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液，再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含O.lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:4:2的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和10分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)五指毛桃鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，力口70%乙醇501111，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸至9llml，加水10ml，用氯仿提取4次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)覱.5ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，制得對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:5:2的正己烷-甲苯-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(5)延胡索鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，力口80%乙醇301111，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取延胡索對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液，再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，制得對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為15:8:2的正己烷-氯仿-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。前述膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定方法具體為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為4:96的甲醇-O.04%磷酸溶液作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm，理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每lml含15yg的溶液，制得對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密稱定裝量差異項(xiàng)下膠囊內(nèi)容物0.4g，精密加入50。/。甲醇50ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，即得供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。每粒治療婦科炎癥的膠囊制劑中含地稔和頭花蓼以沒(méi)食子酸(C7H605)計(jì)，不少于0.20mg。為了研究治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，發(fā)明人進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)以篩選最佳方案，具體如下一、性狀的研究根據(jù)樣品的試驗(yàn)結(jié)果擬定，三批中試樣品均與擬定結(jié)果描述一致，列入質(zhì)量控制方法正文。二、鑒別方法的研究2.1處方中地稔的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)?0ml水溶解，以醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，作為供試品溶液。另取地稔對(duì)照藥材lg，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏，同供試品制備方法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺地稔樣品3g，同供試品制備方法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10yl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為17:2:2的氯仿-甲醇-水的下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下在254nm檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，專屬性強(qiáng)，故將其收入質(zhì)量控制方法正文。2.2處方中頭花蓼的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加丙酮20ml，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取頭花蓼對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺頭花蓼樣品3g，同供試品制備方法制成陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為30:40:l的石油醚(6(TC9(TC)-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以6%三氯化鐵乙醇溶液，放置3060秒后觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。供試品色譜與對(duì)照藥材色譜對(duì)應(yīng)整齊，斑點(diǎn)分離清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，故將其收入質(zhì)量控制方法正文。2.3處方中黃柏的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)?%鹽酸20ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以氯仿提取2次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，作為供試品溶液。另取黃柏對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺黃柏樣品2g，同供試品制備方法制成陰性對(duì)照溶液。再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:4:2的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和10分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下在254nm檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。主斑點(diǎn)分離圓正、清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，故將其收入質(zhì)量控制方法正文。2.4處方中五指毛桃的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，力n70。/。乙醇50ml，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸至約10ml，加水10ml，用氯仿提取4次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)覱.5ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取缺五指毛桃樣品2g，同供試品制備方法制成陰性對(duì)照溶液。再取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:5:2的正己烷-甲苯-醋酸乙酯為展開(kāi)齊IJ，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下在254nm檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。主斑點(diǎn)分離圓正、清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，故將其收入質(zhì)量控制方法正文。2.5處方中延胡索的薄層色譜鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，力口80%乙醇301111，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取缺延胡索樣品2g，同供試品制備方法制成陰性對(duì)照溶液。再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為15:8:2的正己烷-氯仿-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。主斑點(diǎn)分離圓正、清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。經(jīng)3批中試樣品驗(yàn)證，此方法重復(fù)性好，故將其收入質(zhì)量控制方法正文。三、檢査項(xiàng)的研究3.1崩解時(shí)限按《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄XIIA崩解時(shí)限檢査法"測(cè)定，規(guī)定本品應(yīng)在30分鐘內(nèi)全部崩解，本品三批檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表l，均符合規(guī)定。3.2水分檢査按《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄KH水分測(cè)定法第一法"測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1，3批樣品均符合規(guī)定。3.3裝量差異檢査依據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版一部"附錄IL膠囊劑"項(xiàng)下進(jìn)行檢査，結(jié)果見(jiàn)表l，3批樣品均符合規(guī)定。3.4重金屬檢査照《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IXE重金屬檢査法第二法操作。3.4.1標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備精密稱取在105。C干燥至恒重的硝酸鉛0.160g，置1000ml容量瓶中，加硝酸5ml，水50ml，溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液。臨用時(shí)，精密量取前貯備液10ml，置100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml相當(dāng)于10ug的鉛)。3.4.2供試品溶液的制備精密稱取本品內(nèi)容物lg，置坩鍋中，電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸lml，使恰濕潤(rùn)，用低溫加熱至硫酸除盡，加硝酸O.5ml，蒸干，放冷，馬弗爐中50060(TC熾灼使完全灰化，放冷加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至酚酞指示劑顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，微熱溶解后，移至納氏比色管中，加水稀釋成25ml。3.4.3陽(yáng)性對(duì)照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液lml，再加水稀釋成25ml。3.4.4空白對(duì)照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，再加水稀釋成25ml。3.4.5比色供試品溶液、陽(yáng)性對(duì)照液和空白對(duì)照液的3支納氏比色管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，供試品液顯出的顏色與陽(yáng)性對(duì)照液比較，顏色更淺，空白對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)表l。結(jié)果表明，3批樣品重金屬含量均小于10卯m，故未列入正文。3.5砷鹽檢査照《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IXF砷鹽檢査法第一法操作。3.5.1標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備稱取三氧化二砷O.132g，置1000ml量瓶中，力020%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml相當(dāng)于lyg的As)。3.5.2供試品溶液的制備精密稱取本品內(nèi)容物lg，置坩堝中，加入氫氧化鈣0.5g，混勻，加水濕潤(rùn)，烘干，在小火上小心熾灼，(注意不使內(nèi)容物濺出)至煙霧除盡，移入馬弗爐中在50060(TC熾灼至灰化，放冷，加鹽酸5ml和水23ml，水浴上加熱溶解，作為供試品溶液。3.5.3陽(yáng)性對(duì)照液的制備精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置坩鍋中，同3.5.2方法制得陽(yáng)性對(duì)照液。3.5.4空白對(duì)照液的制備另取坩鍋一只，加入氫氧化鈣0.5g，同供試品溶液的制備方法制得空白對(duì)照液。3.5.5砷斑的制備將供試品溶液、陽(yáng)性對(duì)照液、空白對(duì)照液分別移至測(cè)砷瓶中，再分別加碘化鉀試液5ml，酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，3(TC水浴中反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，觀察砷斑顏色，結(jié)果供試品溶液砷斑淺于標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色。結(jié)果見(jiàn)表l。結(jié)果表明，3批樣品砷鹽含量均小于2卯m，故未列入正文。表l三批樣品檢查結(jié)杲表。..<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3.6微生物檢査方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)材料生化培養(yǎng)箱、立式壓力蒸汽消毒器、雙筒實(shí)目顯微鏡。陽(yáng)性對(duì)照菌及常規(guī)微生物檢驗(yàn)用化學(xué)試劑和玻璃儀器等。營(yíng)養(yǎng)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、曙紅亞甲藍(lán)瓊脂、膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基、膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基(以上均為中國(guó)北京三科科技開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)，按CP05版規(guī)定配制及滅菌)、四-甲基傘形酮葡萄糖苷酸(中國(guó)北京牛?；蚣夹g(shù)有限公司)；大腸埃希菌[CMCC(B)44102]、金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]，以上菌種均來(lái)源于貴州省藥品檢驗(yàn)所。供試液制備按規(guī)定取膠囊內(nèi)容物，充分搖勻后混合，取膠囊內(nèi)容物10g，加入pH7.0的無(wú)菌氯化鈉一蛋白胨緩沖液至100ml，即為l:IO供試液。驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表2至表5。表2細(xì)菌、S菌及薛母菌計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證回收試驗(yàn)記錄<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>回收率=(試驗(yàn)組平均菌落數(shù)-供試品對(duì)照組平均菌落數(shù))/菌液組平均菌落數(shù)X100%表3采用培養(yǎng)基稀釋法0.2nL/皿<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表5控制菌檢査方^法驗(yàn)證記錄(大腸菌群)<table>complextableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由驗(yàn)證試驗(yàn)可知，本品可采用常規(guī)法進(jìn)行霉菌和酵母菌、大腸埃希菌、大腸菌群檢驗(yàn)，用培養(yǎng)基稀釋法(0.2mL/皿)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢驗(yàn)。按驗(yàn)證方法對(duì)本品的三批樣品微生物限度進(jìn)行了檢査，結(jié)果均符合規(guī)定。結(jié)論由以上實(shí)驗(yàn)可知，可采用常規(guī)方法對(duì)膠囊制劑進(jìn)行檢査項(xiàng)下的各項(xiàng)檢査。四、膠囊制劑中沒(méi)食子酸含量測(cè)定的研究本品中主藥地稔和頭花蓼均含有沒(méi)食子酸，現(xiàn)代研究表明，沒(méi)食子酸具有收斂、抗炎的藥理作用，因此，它是地稔和頭花蓼的有效成分，本品采用高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定了其含量，測(cè)定方法參照藥材地稔和頭花蓼中沒(méi)食子酸測(cè)定方法進(jìn)行。4.l儀器與試藥高效液相色譜儀SeriesIII泵(美國(guó))，Mode500紫外檢測(cè)器(美國(guó))；TG332A(十萬(wàn)分之一)天平(上海)；甲醇(色譜純，天津大茂)；水(重蒸餾，臨用前制備)，磷酸(分析純，天津大茂)，沒(méi)食子酸(中檢所，批號(hào)110831-200302)。樣品三批(批號(hào)2005001、2005002、2005003)。4.2色譜條件Diamonsilds柱(5ym)，流動(dòng)相甲醇-0.04%磷酸溶液(4:96)，波長(zhǎng)274nm，流速lml/min，柱溫35°C。4.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分別取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液、供試品溶液及缺地稔和頭花蓼的雙陰性對(duì)照溶液各10ul注入液相色譜儀，記錄色譜。從圖譜可知，在此色譜條件下，沒(méi)食子酸峰與其他組分峰分離完全，在與沒(méi)食子酸峰相同的保留時(shí)間處，陰性對(duì)照無(wú)干擾。4.4供試品溶液的制備本試驗(yàn)對(duì)供試品處理方法作了以下考察4.4.1提取方法選擇方法l:取本品內(nèi)容物，置回流瓶中，以4mol/L鹽酸溶液為提取溶劑，以回流提取為處理方法，考察了不同提取時(shí)間內(nèi)容物沒(méi)食子酸含量。結(jié)果見(jiàn)表6。表6提取方法l考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>方法2:取本品內(nèi)容物，以50%甲醇為提取溶劑，以超聲為處理方法，考察了不同提取時(shí)間內(nèi)容物沒(méi)食子酸含量。結(jié)果見(jiàn)表7。表7提取方法2考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果表明，本品采用50%甲醇超聲提，[又效率高、耗時(shí)短、操f戸簡(jiǎn)便，且供試品溶液不含酸，能有效保護(hù)色譜柱，可采用其為本品供試品處理方法，根據(jù)不同提取時(shí)間考察結(jié)果，確定超聲時(shí)間為45分鐘。4.4.2提取溶劑比較取本品內(nèi)容物，分別以水、50%甲醇、乙醇50ml和4mol/l鹽酸溶液為溶劑，超聲提取30分鐘，過(guò)濾，濾液經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，作為供試品溶液，測(cè)定沒(méi)食子酸含量，結(jié)果溶劑水和50%甲醇的提取效率相當(dāng)，而乙醇的提取效率較低，由于以水為溶劑制備的供試品較以甲醇為溶劑制備的供試品顏色深，考慮到對(duì)色譜柱的保護(hù)，我們選擇50%甲醇為樣品提取溶劑，結(jié)果見(jiàn)表8。表8提取溶劑考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>4.5線性關(guān)系考察精密稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品15.50mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得O.0124mg/ml的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液，分別精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液2.5yl、5yl、lOyl、15yl、20y1，注入色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積積分值，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表9，并以對(duì)照品進(jìn)樣量X(yg)為橫坐標(biāo)，峰面積值Y(mv.s)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明，沒(méi)食子酸在0.0310.248yg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。表9沒(méi)食子酸線性關(guān)系考察<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>4.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取一供試品(批號(hào)2005001)，按質(zhì)量質(zhì)量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。在室溫下每隔一段時(shí)間進(jìn)樣10ul，測(cè)定沒(méi)食子酸峰面積值，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，沒(méi)食子酸在12小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定(RSD=0.43%)，結(jié)果見(jiàn)表ll。表ll穩(wěn)定往試^S果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>4.8重復(fù)性試驗(yàn)精密取本品(批號(hào)2005001)各0.4g，共5份，按質(zhì)量質(zhì)量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。精密吸取供試品溶液各10y1，測(cè)定沒(méi)食子酸峰面積積分值，計(jì)算含量，求相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果表明，重復(fù)性良好(RSD=1.04%)。見(jiàn)表12表12重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.9中間精密度取同一批樣品(批號(hào)2005001)，分兩組由不同操作人員在不同設(shè)備上對(duì)本品進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明，中間精密度良好(RSD=1.4%)。結(jié)果見(jiàn)表13。A組LC-2010A高效液相色譜儀；B組SSI高效液相色譜儀。表13中間^度，結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>兩組結(jié)果平均值1.2QnisARSD:0.16%4.10回收率試驗(yàn)采用加樣回收法試驗(yàn)，取已知含量的同一批樣品(批號(hào)2005001)6份，精密稱取各約0.25g，精密加入沒(méi)食子酸對(duì)照品適量，按供試品溶液制備方法制備成供試品溶液，精密吸取供試品溶液各10ul，照上述色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量，結(jié)果表明，沒(méi)食子酸的回收率良好，結(jié)果見(jiàn)表14。表14加樣回收試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.11樣品測(cè)定取3批中試樣品，按質(zhì)量控制方法正文測(cè)定其中沒(méi)食子酸含量(結(jié)果見(jiàn)表15)。按下式計(jì)算含量50XA樣X(jué)C對(duì)XM裝量含量(mg/粒)=-A對(duì)XM祥式中A樣一供試品沒(méi)食子酸峰面積積分值A(chǔ)對(duì)一沒(méi)食子酸對(duì)照品峰面積積分值C對(duì)一沒(méi)食子酸對(duì)照品濃度(mg/ml)M樣—供試品取樣量(g)M裝量一平均裝量(g)50-供試品稀釋體積(ml)表153批樣品中i，食子酸的含領(lǐng)隨果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>樣品中含量限規(guī)定本品處方中地稔和頭花蓼共800g，兩者沒(méi)食子酸含量限均為O.10%，由中試結(jié)果可知，本品在生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)食子酸轉(zhuǎn)移率均不低于30%，按下式計(jì)算本品每粒膠囊沒(méi)食子酸含量限含量限(mg/粒)二藥材量X藥材含量限X轉(zhuǎn)移率/制成量艮口含量限(mg/粒)=800gX0.1%乂30%/1000粒=0.24mg/?？紤]到生產(chǎn)和貯存過(guò)程對(duì)藥品的影響，我們規(guī)定本品每粒含地稔和頭花蓼以沒(méi)食子酸計(jì)，不得少于O.20mg。五、質(zhì)量控制方法中所用到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)沒(méi)食子酸對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110831-200302，供含量測(cè)定用。鹽酸小檗堿對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110713-200208，供含量測(cè)定用。補(bǔ)骨脂素對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110739-200310，供含量測(cè)定用。延胡索乙素對(duì)照品購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110726-200208，供含量測(cè)定用。地稔對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121239-200401，供鑒別用。頭花蓼對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)121282-200402，供鑒別用。黃柏對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120937-200305，供鑒別用。延胡索對(duì)照藥材購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120928-0301，供鑒別用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明建立了治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，對(duì)膠囊制劑的性狀、鑒別、檢査和含量測(cè)定進(jìn)行了研究和篩選，所采用的質(zhì)量控制方法科學(xué)合理，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，能全面有效地控制質(zhì)量婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量，確保該制劑的臨床療效。具體實(shí)施方式本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法如下性狀本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕褐色顆粒及粉末，氣微，味苦、微澀；鑒別(1)地稔鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)?0ml水溶解，以醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，制得供試品溶液；另取地稔對(duì)照藥材lg，加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏，同供試品溶液制備方法制成地稔對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和地稔對(duì)照藥材溶液各10yl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為17:2:2的氯仿-甲醇-水的下層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(2)頭花蓼鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，加丙酮20ml，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取頭花蓼對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制得對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為30:40:l的6(TC9(TC石油醚-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以6%三氯化鐵乙醇溶液，放置3060秒后觀察，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)黃柏鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)覹鹽酸20ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以氯仿提取2次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)觢ml乙醇溶解，制得供試品溶液；另取黃柏對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液，再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含O.lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各5U1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:4:2的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，預(yù)飽和10分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)五指毛桃鑒別取膠囊內(nèi)容物2g，力口70%乙醇501111，回流提取l小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸至9llml，加水10ml，用氯仿提取4次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)覱.5ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，制得對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為5:5:2的正己烷-甲苯-醋酸乙酯為展開(kāi)齊lJ，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下254nm檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(5)延胡索鑒別取膠囊內(nèi)容物3g，力口80%乙醇301111，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml溶解，用氨水調(diào)PH至9，以乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)觢ml甲醇溶解，制得供試品溶液；另取延胡索對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液，再取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，制得對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各10y1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為15:8:2的正己烷-氯仿-甲醇為展開(kāi)齊IJ，展開(kāi)，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。檢査符合中國(guó)藥典2005年版一部附錄IL中膠囊劑項(xiàng)下的各項(xiàng)規(guī)定；含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為4:96的甲醇-O.04%磷酸溶液作為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm，理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000;對(duì)照品溶液的制備精密稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每lml含15yg的溶液，制得對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備精密稱定裝量差異項(xiàng)下膠囊內(nèi)容物0.4g，精密加入50。/。甲醇50ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，即得供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。每粒膠囊含地稔和頭花蓼以沒(méi)食子酸(C7H605)計(jì)，不少于0.20mg。功能主治清熱解毒，除濕止帶，散瘀止痛。用于濕熱蘊(yùn)結(jié)所致的盆腔炎、附件炎、宮頸炎、陰道炎及泌尿系感染。癥見(jiàn)赤白帶下，陰部瘙癢，下腹疼痛等。用法用量口服。一次3粒，一日3次。規(guī)格每粒裝0.25g注意事項(xiàng)孕婦忌服。本品處方中地稔、頭花蓼、當(dāng)歸、延胡索和益母草皆有活血功效，因此規(guī)定本品孕婦忌服。貯藏密封，防潮。因本品為中藥提取浸膏，容易吸潮變質(zhì)，故需密封。權(quán)利要求1.一種治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，這種膠囊這樣制備頭花蓼400g、地稔400g、黃柏300g、延胡索50g、當(dāng)歸150g、五指毛桃100g和益母草50g，加水煎煮兩次，每次加10倍量水煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮至60℃相對(duì)密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過(guò)80目篩，加入淀粉適量，以75％乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，每粒裝0.25g，制成1000粒；其特征在于質(zhì)量控制方法由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成，其中鑒別是對(duì)地稔、頭花蓼、黃柏、五指毛桃和延胡索的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法對(duì)膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，該質(zhì)量控制方法是由性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定組成，其中鑒別包括地稔、頭花蓼、黃柏、五指毛桃和延胡索的鑒別，含量測(cè)定是用高效液相色譜法對(duì)膠囊制劑中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明建立了治療婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，對(duì)膠囊制劑的性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定進(jìn)行了研究和篩選，所采用的質(zhì)量控制方法科學(xué)合理，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，能全面有效地控制質(zhì)量婦科炎癥的膠囊制劑的質(zhì)量，確保該制劑的臨床療效。文檔編號(hào)A61K36/185GK101181406SQ20071020272公開(kāi)日2008年5月21日申請(qǐng)日期2007年11月27日優(yōu)先權(quán)日2007年11月27日發(fā)明者吳海濤,強(qiáng)周,王利平,皮海燕申請(qǐng)人:貴陽(yáng)春科藥業(yè)技術(shù)研發(fā)有限公司