專利名稱：：一種穩(wěn)定的艾塞那肽制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及exendin激動劑制劑，特別涉及一種穩(wěn)定的艾塞那肽制劑及其制備方法和其用途，所述的制劑可通過注射和非注射途徑給藥，用于防治包括I型和II型糖尿病在內(nèi)的糖尿病，以及用于防治得益于降低血漿血糖水平、有效延遲和/或減慢胃排空或減少攝取食物的病癥。
背景技術(shù)：
：根據(jù)WHO在1997年的報(bào)告，1995年全球約有1.35億名糖尿病患者，預(yù)測到2025年將猛增到2.99億，糖尿病(II型糖尿病，NIDDM)己成為繼腫瘤、心腦血管病之后第三位嚴(yán)重危害人類健康的慢性病。近年來，我國糖尿病發(fā)病率不斷上升、患者低齡化的情況日益突出。1997年，我國ll省市的調(diào)查結(jié)果表明，糖尿病(DM)標(biāo)化患病率3.21%，糖耐量減低(IGT)標(biāo)化患病率為4.76%，據(jù)推測，我國現(xiàn)有II型糖尿病患者和糖耐量減低者5000萬人，至少有1/4-1/2的糖尿病患者未被診斷，只有1/3的己診斷患者得到理想控制。因此，研究開發(fā)理想的糖尿病臨床用藥非常重要。艾塞那肽(代號AC-2993，化學(xué)名exenatide，又稱艾塞那肽)為Exendin-4類激動劑，是大毒蜥(美國西南部產(chǎn))在進(jìn)食時(shí)分泌唾液中所含有的類胰高血糖素類肽-1(Glucagon-likeP印tide-1，GLP-1)物質(zhì)的人工合成物，可通過模擬腸促胰島素的作用在體內(nèi)發(fā)揮作用，從而達(dá)到控制血糖的效果。艾塞那肽的氨基酸序列為H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu_Glu-Glu_Ala-VaJ-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2，為39個氨基酸的多肽，分子量為4186.6道爾頓，在水、甲醇或乙醇中易溶，比旋度為-61°_68°。艾塞那肽可由標(biāo)準(zhǔn)固相肽合成技術(shù)(如自動或半自動肽合成法)制備得到，首先由美國Amylin和禮萊制藥公司共同開發(fā)，為含有39個氨基酸的多肽，也是首個獲準(zhǔn)的腸降血糖素類似物(incretinmimetics)藥物，其新藥上市申請于2005年4月獲得美國FDA批準(zhǔn)，商品名Byetta忠，可有效控制血糖、剌激胰島素分泌、抑制高血糖紊分泌和減緩胃的排空速度，降低食欲，減少食物攝入和減輕體重，非常適用于n型糖尿病的治療，例如，用于改善和控制二甲雙胍和磺酰脲類藥物治療不理想的II型糖尿病患者的血糖。艾塞那肽的己知藥理作用包括(l)顯著增加葡萄糖依賴性促胰島素分泌，在血糖水平正?；虻脱菚r(shí)并不刺激胰島素的分泌，僅在血糖水平較高時(shí)刺激胰島素分泌；(2)抑制II型糖尿病患者胰高血糖素的分泌，并在高血糖時(shí)降低血清中胰高血糖素濃度，但不減弱正常胰高血糖素對低血糖的反應(yīng)；(3)抑制餐后胃腸動力及分泌功能，延遲胃排空，從而有利于餐后血糖的控制；(4)降低食欲，減少食物的攝入；(5)刺激e細(xì)胞增生或胚胎胰島素成熟分化，抑制e細(xì)胞凋亡，從而增加e細(xì)胞的數(shù)量；(6)恢復(fù)II型糖尿病患者喪失的胰島素第一時(shí)相反應(yīng)，顯著增加第一時(shí)相及第二時(shí)相胰島素的分泌，改善II型糖尿病患者的空腹及餐后血糖水平。在一項(xiàng)為期30周的隨機(jī)雙盲安慰劑對照研究中，733例聯(lián)合使用二甲雙胍及磺酰脲類降糖藥治療不能有效控制血糖的患者[HbAk的基線水平在(8.2±1.0)%]，首先2次/日皮下注射艾塞那肽5ug或安慰劑；4周后，艾塞那肽組分為A組和B組，A組繼續(xù)維持艾塞那肽劑量不變，B組改用2次/日，每次10ug;安慰劑組在整個研究中均按照2次/日使用；研究期間，二甲雙胍治療組仍維持原有劑量，磺酰脲類治療組則隨機(jī)分成有效劑量(MAX)和最低推薦劑量(MIN)組。結(jié)果顯示，治療30周時(shí)，患者HbA,顯著降低，療效與艾塞那肽呈現(xiàn)量效關(guān)系，且2個劑量給藥組患者體重均顯著減輕。另外，艾塞那肽用于II型糖尿病患者的臨床研究提示，患者的耐受性良好，與劑量相關(guān)的最常見不良反應(yīng)為惡心，不良反應(yīng)多為輕度和中度，并在隨后的持續(xù)治療中，患者的惡心、嘔吐發(fā)生率及其嚴(yán)重程度都隨之下降。艾塞那肽為一種全新的GLP-1類似物，可降低II型糖尿病患者餐后和空腹血糖，并能使HbAk水平維持在正常范圍內(nèi)，并且僅在血糖水平較高時(shí)才刺激胰島素分泌，能控制對常用降糖藥無應(yīng)答患者的血糖水平，降低大部分患者的體重，且患者的耐受性好，不良反應(yīng)較輕，適用于飲食調(diào)節(jié)和其他降糖藥不能控制的II型糖尿病患者。中國發(fā)明專利申請00804847.9公開了艾塞那肽的皮下注射劑、靜脈內(nèi)注射劑或靜脈內(nèi)輸注制劑，其全文內(nèi)容及其引用文獻(xiàn)所公開的內(nèi)容均作為本申請的參考。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種穩(wěn)定的艾塞那肽制劑，所述制劑包括艾塞那肽、防腐劑、抗氧劑、絡(luò)合劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、緩沖劑和pH調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明的制劑可以有效減慢糖尿病患者的胃排空和降低其血漿葡萄糖水平。進(jìn)一步，制劑中艾塞那肽的含量為0.005-0.4X(w/v)，優(yōu)選為0.010-0.10%(w/v)，更優(yōu)選為0.015-0.05%(w/v),最優(yōu)選為0.025%(w/v)。進(jìn)一歩，所述的防腐劑為本領(lǐng)域常用的防腐劑，優(yōu)選防腐劑選自間甲酚、芐醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸苯酯、苯酚、甲酚、三氯叔丁醇、對氯間甲酚的任一種或其組合，更優(yōu)選為間甲酚、對氯間甲酚的任一種或其組合。本發(fā)明所述防腐劑的用量為0.1%(w/v)-2%(w/v)，優(yōu)選0.2%(w/v)-0.5%(w/v)。進(jìn)一步，所述的抗氧劑為本領(lǐng)域常用的抗氧劑，優(yōu)選抗氧劑選自甲硫氨酸、Vc、半胱氨酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、二丁基苯酸、VE、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚、谷維素、黃酮類、枸櫞酸的任一種或其組合，更優(yōu)選為甲硫氨酸、Vc、半胱氨酸的任一種或其組合。本發(fā)明所述抗氧劑的用量為0.2%(Wv)-5%(w/v)，優(yōu)選為0.5%(w/v)-2%(w/v)。進(jìn)一步，所述的絡(luò)合劑為本領(lǐng)域常用的絡(luò)合劑，優(yōu)選絡(luò)合劑選自乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸鈣鈉或l，2-二氨基環(huán)己烷四乙酸的任一種或其組合。本發(fā)明所述絡(luò)合劑的用量為0.01%(w/v)-0.1%(w/v)，優(yōu)選為0.05%(w/v)-0.075%(w/v)。進(jìn)一步，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑為本領(lǐng)域常用的滲透壓調(diào)節(jié)劑，如碳水化合物、多元醇或鹽，優(yōu)選滲透壓調(diào)節(jié)劑選自半乳糖、阿拉伯糖、乳糖或任何其它碳水化合物、山梨醇、甘露醇、肌醇、甘油、木糖醇、聚丙二醇/乙二醇共聚物、聚乙二醇200(PEG200)、PEG400、PEG1450、PEG3350、PEG4000、PEG6000、PEG8000、氯化鈉、葡萄糖的任一種或其組合，使得制劑的水連續(xù)相為等張或等滲溶液，有效穩(wěn)定制劑中的蛋白質(zhì)，并抵抗溫度升高、凍融或凍干工藝引起的蛋白質(zhì)變性。本發(fā)明所述碳水化合物對糖尿病患者沒有副作用，不會代謝形成高濃度的血糖；更優(yōu)選為山梨醇、甘露醇、木糖醇的任一種或其組合。進(jìn)一步，所述的緩沖劑為本領(lǐng)域常用的緩沖劑，優(yōu)選緩沖劑選自醋酸鹽緩沖齊U、磷酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑或谷氨酸鹽緩沖劑的任一種或其組合。進(jìn)一步，所述的pH調(diào)節(jié)劑為本領(lǐng)域常用的pH調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選pH調(diào)節(jié)劑選自氨丁三醇、鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀、氫氧化鈉、枸櫞酸鈉、三乙醇胺的任一種或其組合，更優(yōu)選為氨丁三醇或三乙醇胺。進(jìn)一步，本發(fā)明的艾塞那肽制劑還可包括溶媒，所述溶媒為本領(lǐng)域常用的溶媒，如注射用水，以獲得需要濃度的溶液。進(jìn)一歩，所述制劑的pH為3.0-7.0，優(yōu)選為4.0-6.0，更優(yōu)選4.0-5.0，以減少制劑對患者的刺激。進(jìn)一步，所述制劑選自液體制劑、凍干制劑或其改進(jìn)制劑，可用于經(jīng)口、鼻、頰、注射、舌下、氣管內(nèi)、肺傳遞或皮膚貼片等途徑給藥，例如鼻給藥制劑、經(jīng)肺給藥制劑、口服給藥制劑、氣管內(nèi)給藥制劑、舌下給藥制劑或經(jīng)頰給藥制劑，優(yōu)選為液體制劑為胃腸外液體制劑，如注射劑，所述注射劑可選自皮下注射劑、靜脈內(nèi)注射劑或靜脈內(nèi)輸注劑。本發(fā)明所述的凍干制劑選自凍干單位制劑或凍干多用制劑?？刹捎帽绢I(lǐng)域熟知的制劑技術(shù)手段制備得到本發(fā)明的制劑。必要時(shí)，本發(fā)明組合物中還包含其他藥學(xué)上可接受的載體，用于保持艾塞那肽及其制劑的穩(wěn)定性，所述藥學(xué)上可接受的載體為本領(lǐng)域熟知的用于制備上述制劑的常用賦形劑或輔料，其用量、種類根據(jù)組合物中有效成分的理化性質(zhì)和含量、制劑類型等因素而定。另外，還可將活性成分與藥學(xué)上可接受的緩控釋載體按其制備要求加以混合，再按照本領(lǐng)域熟知的緩控釋制劑的制備方法，如加入阻滯劑包衣或?qū)⒒钚猿煞治⒛一笤僦瞥晌⑼?，如緩釋微丸或控釋微丸；所述的緩控釋載體包括但不僅限于油脂性摻入劑、親水膠體或包衣阻滯劑等，所述的油脂性摻入劑為單硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、礦油、聚硅氧烷、二甲基硅氧烷；所述的親水膠體為羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素等纖維素衍生物，或PVP、阿拉伯膠、西黃耆膠或卡波普等；所述的包衣阻滯劑為乙基纖維素(EC)、羥丙甲基纖維素(HMPC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、鄰苯二甲酸醋酸纖維素(CAP)、丙稀酸類樹脂等。本發(fā)明的凍干制劑穩(wěn)定，可含有凍干賦形劑，以改善制劑的成形性，并利于制劑的穩(wěn)定和/或緩解注射疼痛，以及包含有益于結(jié)塊特性和/或復(fù)溶的表面活性劑。所述凍干賦形劑選自約L0-10X(w/v)碳水化合物、多元醇、生理鹽水的任一種或其組合，例如山梨醇、甘露醇、木糖醇、葡萄糖的任一種或其組合；所述表面活性劑為本領(lǐng)域常用的表面活性劑，優(yōu)選約0.1-約1.0M(w/v)吐溫80或其它非離子去垢劑。本發(fā)明還包括用于經(jīng)口、頰、舌下、氣管內(nèi)、鼻和肺傳遞的固體劑型，如液體制劑和/或干粉制劑。干粉制劑可含有增量劑和/或鹽類，有助于形成的一定大小的顆粒和合適的顆粒大小分布，以及利于干粉顆粒形態(tài)學(xué)特性和/或促進(jìn)組織攝取所述活性成分。當(dāng)本發(fā)明的制劑基于患者體重的劑量范圍為約0.005ug/kg/劑至約0.2ug/kg/齊!j，優(yōu)選為約0.02ug/kg/劑至約0.1Pg/kg/劑，更優(yōu)選為約0.05Ug/kg/劑至約0.1yg/kg/劑，以及推薦給藥頻率1-4次/天，優(yōu)選為1-2次/天。用于注射給藥時(shí)，其推薦給藥劑量和方式為約0.1ug/Kg-約0.5ug/Kg，以l-3次/天形式給藥，優(yōu)選為2-3次/天，更優(yōu)選為2次/天。按照本發(fā)明的口服劑量包括約50至約100倍的所述活性成分，也就是說以單劑或多劑給藥的劑量為每天約500至約12,000ug、優(yōu)選每天約500至約5,000yg。按照本發(fā)明的肺部給藥劑量包括約10至約IOO倍的所述活性成分，也就是說以單劑或多劑給藥的劑量為每天約100至約12,000ug，優(yōu)選每天約500-1000yg。按照本發(fā)明的鼻、頰和舌下給藥劑量也包括約10至約100倍的所述活性成分，也就是說以單劑或多劑給藥的劑量為每天約100至約12,000ug。例如，經(jīng)鼻給藥的優(yōu)選劑量為每天約10-1000至約1200-12,000Pg，經(jīng)頰給藥的優(yōu)選劑量為每天約10-1000至約1200-12,000yg，舌下給藥的優(yōu)選劑量為每天約10-1000至約1200-8,000ug。本發(fā)明的另一目的在于提供一種測定艾塞那肽制劑含量的方法，其特征在于，采用高效液相色譜法測定制劑中艾塞那肽的含量，以十八烷基硅垸鍵合硅膠C18150X4.6隱300A為色譜柱填充劑，由流動相進(jìn)行梯度洗脫，流速為LOml/min，檢測波長為220nm，以艾塞那肽計(jì)，理論板數(shù)不低于2000，所述流動相由流動相A和流動相B組成,所述流動相A為含O.05Q/。三氟乙酸的水，所述流動相B為含0.05%三氟乙酸的乙腈。進(jìn)一步，所述的測定方法還包括，取制劑適量，精密稱定，用0.05%三氟乙酸水溶液溶解并稀釋成濃度為0.25mg/ml的溶液，搖勻，作為供試品溶液；精密量取20pl供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。進(jìn)一步，檢測開始時(shí)的流動相組成為A:B為78:22，檢測30min時(shí)的流動相組成為A:B為35:65。本發(fā)明的另一目的在于提供艾塞那肽制劑用于制備防治糖尿病的藥物中的應(yīng)用，以增強(qiáng)患者對內(nèi)源性或外源性胰島素的敏感性。所述糖尿病選自I型糖尿病、II型糖尿病、肥胖癥、其它得益于減慢胃排空、降低血漿葡萄糖水平和減少攝取食物等病癥。除非另有說明，本發(fā)明的百分比為重量體積百分比(w/v)。本發(fā)明所述的exendin-4應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)固相肽合成技術(shù)(如自動或半自動肽合成法)制得在一種堿(如二異丙基乙胺)和偶聯(lián)劑(如二環(huán)己基碳二亞胺和1-羥基苯并三唑)存在下，在惰性溶劑(如二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯二酮(N-methylpyrrolidinone)或二氯甲烷)中，室溫下，使a-N-氨基甲?；Ｗo(hù)的氨基酸和連接在樹脂上的延長肽鏈的氨基酸偶聯(lián)。采用試劑(如三氟乙酸或哌啶)從產(chǎn)生的肽-樹脂去除a-N-氨基甲酰基保護(hù)基，用加入到所述肽鏈的下一個需要的N-保護(hù)的氨基酸重復(fù)偶聯(lián)反應(yīng)。所述的N-保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域常用的N-保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧基羰基(tBoc)和芴基甲氧基羰基(Fmoc)。具體實(shí)施例方式以下將結(jié)合實(shí)施例具體說明本發(fā)明，本發(fā)明的實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明的技術(shù)方案，并非限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)。實(shí)施例1艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽氨丁三醇甘露醇間甲酚甲硫氨酸250mg5.0g10.0g2.2g10.0g0.lgEDTA—Na注射用水加至1000ml。對比實(shí)施例1艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽醋酸鈉甘露醇250mg6.0g10.0g適量間甲酚2.2g注射用水加至1000ml。實(shí)施例2艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽250mg氨丁三醇5g甘露醇lO.Og間甲酚2.28g甲硫氨酸10g醋酸適量注射用水適量實(shí)施例3艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽氨丁三醇甘露醇間甲酚Vc注射用水250mg5glO.Og2.2g12g適量實(shí)施例4艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽氨丁三醇甘露醇間甲酚甲硫氨酸注射用水250mg5.0g10.Og2.2g20.Og實(shí)施例5艾塞那肽制劑的制備艾塞那肽250mg氨丁三醇5.Og甘露醇10.0g間甲酚2.2g甲硫氨酸10.OgEDTA-Na0.05g注射用水適量實(shí)施例6制劑穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)將實(shí)施例1與對比實(shí)施例1制得的艾塞那肽制劑置于卡式玻璃瓶或管式玻璃瓶中，用丁基膠塞封口，分別于25'C和2rC條件下放置，進(jìn)行穩(wěn)定性的考察，采用高效液相色譜法測定樣品中艾塞那肽含量在考察過程中的變化。采用高效液相色譜法測定制劑中艾塞那肽的含量，以十八烷基硅垸鍵合硅膠為色譜柱填充劑(Cw150X4.6mm300A)，以水(含0.05%的三氟乙酸)為流動相A;以乙腈(含0.05%的三氟乙酸)流動相B，流動相的組成參見表l;梯度洗脫；流速為1.0ml/min，檢測波長為220nm，理論板數(shù)以艾塞那肽計(jì)應(yīng)不低于2000。表l流動相的組成<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>取制劑適量，精密稱定，用0.05%三氟乙酸水溶液溶解并稀釋成濃度為0.25mg/ml(以艾塞那肽計(jì))的溶液，搖勻，作為供試品溶液；精密量取20nl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果參見表2。表2艾塞那肽制劑的穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>說明表2中的D表示"day";M表示"month"。分析表2得知，本發(fā)明艾塞那肽制劑的長期穩(wěn)定性明顯提高。權(quán)利要求1.一種穩(wěn)定的艾塞那肽制劑，所述制劑包括艾塞那肽、防腐劑、抗氧劑、絡(luò)合劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、緩沖劑和pH調(diào)節(jié)劑。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，所述制劑中艾塞那肽的含量為0.005-0.4%(w/v)，優(yōu)選為0.010-0.10%(w/v)，更優(yōu)選為0.015-0.05%(w/v)，最優(yōu)選為0.025%(w/v)。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制劑，所述的防腐劑為本領(lǐng)域常用的防腐劑，優(yōu)選為間甲酚、芐醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸苯酯、苯酚、甲酚、三氯叔丁醇、對氯間甲酚的任一種或其組合，更優(yōu)選為間甲酚或?qū)β乳g甲酚的任一種或其組合，所述防腐劑的用量為0.1%(w/v)-2%(w/v)，優(yōu)選0.2%(w/v)-0.5%(w/v)。4、根據(jù)權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)所述的制劑，所述的抗氧劑為本領(lǐng)域常用的抗氧劑，優(yōu)選為甲硫氨酸、Vc、半胱氨酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、二丁基苯酸、VE、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚、谷維素、黃酮類、枸櫞酸的任一種或其組合，更優(yōu)選為甲硫氨酸、Vc、半胱氨酸的任一種或其組合，所述抗氧劑的用量為0.2%(w/v)-5%(w/v)，優(yōu)選為0.5%(w/v)-2%(w/v)。5、根據(jù)權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)所述的制劑，所述的絡(luò)合劑為本領(lǐng)域常用的絡(luò)合齊U，優(yōu)選為乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸鈣鈉或l，2-二氨基環(huán)己烷四乙酸的任一種或其組合，所述絡(luò)合劑的用量為0.01%(w/v)-0.1%(w/v)，優(yōu)選為0.05%(w/v)-0.075%(w/v)。6、根據(jù)權(quán)利要求l-5任一項(xiàng)所述的制劑，所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑選自碳水化合物、多元醇或鹽，優(yōu)選為半乳糖、阿拉伯糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、肌醇、甘油、木糖醇、聚丙二醇/乙二醇共聚物、PEG200、PEG400、PEG1450、PEG3350、PEG4000、PEG6000、PEG8000、氯化鈉、葡萄糖的任一種或其組合，更優(yōu)選為山梨醇、木糖醇、或甘露醇的任一種或其組合。7、根據(jù)權(quán)利要求l-6任一項(xiàng)所述的制劑，所述的緩沖劑為本領(lǐng)域常用的緩沖劑，優(yōu)選為醋酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑或谷氨酸鹽緩沖劑的任一種或其組合。8、根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的制劑，所述的pH調(diào)節(jié)劑為本領(lǐng)域常用的pH調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選為氨丁三醇、鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀、氫氧化鈉、枸櫞酸鈉、三乙醇胺的任一種或其組合，更優(yōu)選為氨丁三醇或三乙醇胺的任一種或其組合。9、根據(jù)權(quán)利要求l-8任一項(xiàng)所述的制劑，還包括溶媒，所述溶媒為本領(lǐng)域常用的溶媒，優(yōu)選為注射用水。10、根據(jù)權(quán)利要求l-9任一項(xiàng)所述的制劑，所述制劑的pH為3.0-7.0，優(yōu)選為4.0-6.0，更優(yōu)選為4.0-5.0。11、根據(jù)權(quán)利要求l-10任一項(xiàng)所述的制劑，所述制劑選自液體制劑、凍干制劑或其改進(jìn)制劑，優(yōu)選液體制劑為胃腸外液體制劑，更優(yōu)選為皮下注射劑、靜脈內(nèi)注射劑或靜脈內(nèi)輸注劑。12、根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)所述的制劑，所述制劑選自經(jīng)鼻給藥制劑、經(jīng)肺給藥制劑、口服給藥制劑、氣管內(nèi)給藥制劑、舌下給藥制劑或經(jīng)頰給藥制劑。13、根據(jù)權(quán)利要求l-12任一項(xiàng)所述的制劑，所述的凍干制劑選自凍干單位制劑或凍干多用制劑。14、根據(jù)權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)所述的制劑，所述的制劑包括0.025%(w/v)的艾塞那肽、0.5%(w/v)氨丁三醇、1.0%(w/v)的甘露醇、0.22%(w/v)的間甲酚、1.0%(w/v)的甲硫氨酸和0.01%(w/v)的EDTA-Na，余量為注射用水。15、權(quán)利要求l-14任一項(xiàng)所述的艾塞那肽制劑用于制備防治糖尿病、肥胖癥、得益于減慢胃排空、降低血漿葡萄糖水平或減少攝取食物的病癥的藥物中的應(yīng)用。16、根據(jù)權(quán)利要求15所述的應(yīng)用，所述糖尿病選自I型糖尿病或II型糖尿病。17、一種測定艾塞那肽制劑含量的方法，其特征在于，采用高效液相色譜法測定制劑中艾塞那肽的含量，以十八烷基硅垸鍵合硅膠為色譜柱填充劑，由流動相進(jìn)行梯度洗脫，流速為1.0ml/min，檢測波長為220nm，以艾塞那肽計(jì)，理論板數(shù)不低于2000，所述流動相由流動相A和流動相B組成，所述流動相A為含0.05%三氟乙酸的水，所述流動相B為含0.05%三氟乙酸的乙腈。18、根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，所述的測定方法還包括，取制劑適量，精密稱定，用0.05y。三氟乙酸水溶液溶解并稀釋成濃度為0.25mg/ml的溶液，搖勻，作為供試品溶液；精密量取20|al供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。19、根據(jù)權(quán)利要求17或18所述的方法，檢測開始時(shí)的流動相組成為A:B為78:22，檢測30min時(shí)的流動相組成為A:B為35:65。全文摘要本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的艾塞那肽制劑及其制備方法和其應(yīng)用，以及制劑中艾塞那肽含量的測定方法。本發(fā)明的制劑長期穩(wěn)定性明顯提高，可用于防治糖尿病、得益于降低血漿血糖或延遲和/或減慢胃排空或抑制攝取食物的病癥。文檔編號A61K9/00GK101366692SQ20071014187公開日2009年2月18日申請日期2007年8月15日優(yōu)先權(quán)日2007年8月15日發(fā)明者吳玉霞,李語如,鐘慧娟申請人:江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司